專利名稱：：具有抗惡性瘧原蟲活性的三個卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及通過植物化學(xué)提取分離手段從豆科云實屬藥用植物喙莢云實(CaesalpiniaminaxHance)種子中分離得到三種卡山烷型二萜內(nèi)酯單體化合物，其中有兩個化合物為新化合物。該三個化合物的制備方法和兩個新化合物的結(jié)構(gòu)以及三個化合物在制備治療和/或預(yù)防瘧疾藥物中的應(yīng)用方面申請專利保護(hù)。
背景技術(shù)：
：豆科(Leguminosoe)云實屬(CaesalpiniaLinn)植物全世界約有100余種，主要分布在亞熱帶和熱帶地區(qū)，我國約產(chǎn)17種，尤以云實(Caesa-lpiniajaponicaSieb.),喙莢云實(CaesalpiniaminaxHance.)產(chǎn)藏量較大，主要產(chǎn)地在南部和西南部的海南、廣東、廣西、云南和貴州五省，入藥種類達(dá)14種(見表1-1)。其中3種，即蘇木(CaesalpiniasappanLirm.)、云實、喙莢云實為中國藥典及地方標(biāo)準(zhǔn)收載，其他種類為民間用藥。該屬植物中主要化學(xué)成分為黃酮類和卡山烷型二萜(cassane)及其內(nèi)酯，1985年至今，從該屬植物中發(fā)現(xiàn)的新二萜類化合物有100多個，主要具有抗瘧、抗病毒、抗菌、抗腫瘤、抗排斥反應(yīng)、抗氧化、抗結(jié)核等多種生物活性。華南云實(C.cristaL.)的CH2Cl2提取物有顯著的抗瘧活性。LinnTZ等人從其種皮中分得的CaesalpininC、D、E、F，norcaesalpininA、B、C、D、E,2-acetoxy-3_deacetoxycaesaldekarine,caesalminB、G,caesakdekarinΕ,14(17)dehydrocaesalpinF,2-acetoxycaesaldekarine,7-acetoxy-bonducellpinC者β能顯著抑制P.falciparumFCR3/A2生長，其中norcaesalpininE抑制效果最好，14(17)dehydrocaesalpinF^IC50IST^L^E^iiRi(IC50283291nmol/ml)。Dong-MeiLi等(Diterpene-lactonefromtheseedsofCaesalpiniaminaxHance.Chemistry&Biodiversity,2006,3:1260-1265.)報道了化合物neocaesalpinL(III)的結(jié)構(gòu)，但沒有進(jìn)行抗瘧的生物活性的研究。本發(fā)明所涉及的化合物5α，14β-二羥基-Ia，6α，7β-三乙?；?13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯(I)和12α-甲氧基，5α，14β-二羥基_1α，6α，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯(II)為兩個新化合物，其抗瘧生物活性為首次發(fā)現(xiàn)，化合物neocaesalpinL(III)的抗瘧生物活性也為首次發(fā)現(xiàn)，迄今為止，以上研究成果尚未發(fā)現(xiàn)有專利或文獻(xiàn)報道。本發(fā)明之目的在于充分利用我國豐富的含有卡山烷型二萜內(nèi)酯的植物資源，深入進(jìn)行研究開發(fā)，尋找具有獨特化學(xué)結(jié)構(gòu)，抗瘧活性強(qiáng)，且毒副作用小的該類化合物，以期為臨床提供新型抗瘧藥物。
發(fā)明內(nèi)容本實驗室利用現(xiàn)代分離技術(shù)和結(jié)構(gòu)測定手段對豆科藥用植物喙莢云實種子進(jìn)行化學(xué)成分研究過程中，從中分離得到三種卡山烷型二萜內(nèi)酯單體化合物(化合物I、π、III)，分別是5α，14β-二羥基-Ια，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯(I)禾口12α-甲氧基，5α，14β_二輕基-Ia，6a，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯(II)及化合物neocaesalpinL(III)，其中，化合物I、II為新化合物。通過對這三個化合物進(jìn)行體外抗瘧藥效學(xué)研究試驗，發(fā)現(xiàn)其對惡性瘧原蟲(Plasmodiumfaciparum,P.f.)FCCl分離株具有明顯抑制作用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式1本發(fā)明的目的之一提供兩種新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物(化合物I、II)。本發(fā)明所涉及的化合物5α，14β-二羥基-Ia，6α，7β-三乙?；?13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯(化合物I)禾Π12α-甲氧基，5a，14β-二羥基_1a，6a，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯(化合物II)為兩個新化合物，在體外抗瘧藥效學(xué)研究試驗中，化合物I、II對惡性瘧原蟲(Plasmodiumfaciparum,P.f.)FCCl分離株具有明顯抑制作用，有較強(qiáng)的抗瘧活性，其抗瘧生物活性為首次發(fā)現(xiàn)。同時，經(jīng)抗瘧藥效學(xué)研究試驗證明，化合物neocaesalpinL(III)具有很強(qiáng)的抗瘧生物活性，也為首次發(fā)現(xiàn)。迄今為止，以上研究成果尚未發(fā)現(xiàn)有專利或文獻(xiàn)報道。本發(fā)明還提供制備這三種化合物的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案依此包含如下步驟以豆科云實屬植物喙莢云實(CaesalpiniaminaxHance.)種子(5.0kg)為原料(見附圖1)，用95%乙醇回流提取2次，2h/次，減壓回收溶劑，濃縮后得浸膏744g，藥渣再用75%乙醇回流提取2次，2h/次，提取液經(jīng)減壓濃縮后得浸膏208g，將全部浸膏合并后得到苦石蓮乙醇總提物(952g)?？嗍徱掖伎偨嘤眉状既芙夂?，稱取100200目硅膠按11的比例與之拌樣，混勻烘干備用。稱取100200目硅膠536g裝入索氏提取器底部，然后再裝入拌樣后的苦石蓮乙醇總提取物(1750g)。依次用4.5L石油醚、2.5L氯仿、3.5L乙酸乙酯、3.5L丙酮、3L甲醇回流提取(提取流程見附圖1所示)。將各提取液分別減壓濃縮后得到苦石蓮乙醇總浸膏的石油醚回流提取層(143g)、氯仿回流提取層(106g)、乙酸乙酯回流提取層(497g)、丙酮回流提取層(15.5g)和甲醇回流提取層(68g)。乙酸乙酯部位浸膏497g按附圖2所示流程進(jìn)行硅膠柱色譜，用氯仿_甲醇不同比例的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫。其中氯仿甲醇(955)洗脫部分50-57流份繼續(xù)用硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，其中氯仿甲醇(1001)洗脫所得流份49-56用甲醇重結(jié)晶得到化合物I(9mg)，梯度8020洗脫所得流份57-76繼續(xù)用硅膠柱色譜分離，石油醚乙酸乙酯(41)洗脫后的流份92，93，經(jīng)己烷丙酮重結(jié)晶得到化合物II(3mg)。氯仿-甲醇(9010)洗脫部分，58-72流份進(jìn)行S^hadexLH-20凝膠柱色譜，甲醇洗脫，其中流份5-17再進(jìn)行硅膠柱色譜分離，用氯仿甲醇(301)洗脫的流份42-47再進(jìn)行SephadexLH-20凝膠柱色譜，甲醇洗脫，收集流份7和8利用硅膠柱色譜進(jìn)行純化，石油醚丙酮氯仿(113)的系統(tǒng)洗脫后得到化合物III(15mg)?；衔颕白色針狀結(jié)晶(甲醇)，mpl79180°C，10%濃硫酸乙醇溶液噴灑顯黃色單點。HRESI-MS在m/z529.2048處給出分子離子峰[M+Na]+，顯示其分子量為506.2048，推測分子式為C26H34Oltl，不飽和度為10。IR光譜顯示該化合物分子中存在羥基(3446，3471CHT1)，甲基(1375CHT1)，雙鍵(1674CHT1)，酯羰基(1747cm-1)U1H-WR(SOOMHziCDCl3)譜中可觀察到4個甲基信號δ1.50(3Η,s)，1.09(3H，s)，1·12(3H，s)，1.21(3H，s)，3個乙酰基的甲基信號δ2.07(3Η，s)，2.00(3Η，s)，2.11(3H，s)，以及2個烯氫的信號δ5.55(1Η，m)，6.05(1H，s)；13C-WR(125MHz，CDCL3)譜表明化合物V有26個碳原子，從13C-NMR譜上可以觀察到4個羰基碳的信號δ170.2，168.8，170.3，169.0(包括1個內(nèi)酯環(huán)上羰基碳信號)和4個烯碳信號δ162.9，150.0，110.7，107.9，提示該化合物分子中含有內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)和兩個雙鍵。以上數(shù)據(jù)表明化合物I具有卡山烷型二萜的骨架特征。在HMBC譜中，δ6.05(1Η，s)與δ150.0(C-12)，162.9(C-13)，169.0(C-16)遠(yuǎn)程相關(guān)，δ5.55(1Η,m)與δ48.0(C-8)，38.3(C-9)，45.1(C-10)，150.0(C-12)，162.9(C-13)遠(yuǎn)程相關(guān)，由此確定雙鍵位置在C-11，C-12位和C-13，C-15位。所有的1H-WR和13C-NMR信號通過HMBC，HMQC都得以歸屬(見表1)，故化合物鑒定為5α，14β-二羥基-Ia，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯。該化合物為新化合物。化合物II白色針狀結(jié)晶(甲醇)，mp263267°C，10%濃硫酸乙醇溶液噴灑顯黃色單點。HRESI-MS在m/z561.2360處給出分子離子峰[M+Na]+，顯示其分子量為538.2360，推測分子式為C27H38O11,不飽和度為9。IR光譜顯示該化合物分子中存在羥基(3461CHT1)，甲基(1375CHT1)，雙鍵(1652CHT1)，酯羰基(1743cm-1)U1H-WR(SOi)MHz,CD3OD)譜中可觀察到4個甲基信號δ1.11(3Η,s)，l.12(3H,s)，1.15(3H,s)，1.50(3H，s)，3個乙?；募谆盘枽?.12(3Η，s)，1.93(3Η，s)，2.02(3H，s)，以及1個烯氫信號δ6.00(1Η，s)；13C-NMR(125MHz,OT3OD)譜表明化合物II有27個碳原子，從13C-NMR上可以觀察到4個羰基碳的信號δ172.3，172.5，172.9，172.4(包括1個內(nèi)酯環(huán)上羰基碳的信號)和2個烯碳信號δ176.2,117.8。以上數(shù)據(jù)表明化合物II具有卡山烷型二萜的骨架特征。將該化合物的ID-NMR數(shù)據(jù)與neocaesalpinL比較(見表1)，發(fā)現(xiàn)二者非常相似，僅C-12上取代基的不同?；衔颕I的1H-NMR譜在δ3.16處給出一個甲氧基的信號；從13C-NMR譜來看，二者的差異在于該化合物C-12的化學(xué)位移值δ109.0較neocesalpinL的C-12化學(xué)位移值δ107.0明顯增大，而C-15的化學(xué)位移值δ114.7則較neocaesalpinL的C-15化學(xué)位移值δ117.8減小，且在δ51.8處給出一個甲氧基的碳信號。在HMBC譜中，δ6.00(1Η，s)與δ109.0(C-12)，δ176.2(C-13)遠(yuǎn)程相關(guān)，顯示雙鍵位置在C-13，C-15位；δ3.16(3Η，s)與δ109.0(C-12)，δ1.37(1Η,t)與δ109.0(C-12)禾口δ51.8(-OCH3)遠(yuǎn)程相關(guān)，則說明-OCH3連在C-12位上，具體相關(guān)(見圖3-4)。所有的1H-NMR和13C-NMR信號通過HMBC，HMQC都得以歸屬(見表1)，故化合物II鑒定為12α-甲氧基，5α，14β-二羥基-Ια，6α，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯?；衔颕II白色針狀結(jié)晶(甲醇)，mpl98200°C，10%濃硫酸乙醇溶液噴灑顯黃色單點。ESI-MS譜顯示其分子離子峰m/z524，推測其分子式為C26H36O11。從1H-NMR(500MHz，CD3OD)譜中可觀察到4個甲基信號δ1.11(3Η,s,H-18)，1.12(3H,s,H-19)，1.16(3H,s,H-20)，1.52(3H,s,H—17)，3個乙?；募谆盘枽?.02(3Η,s,I-OCOCH3)，1.93(3H,s,6-0C0CH3),2.13(3H,s，7_0C0CH3)，以及1個內(nèi)酯環(huán)上雙鍵氫的信號δ5.80(1H，s，Η-15)；13C-WR(125MHz，CD3OD)譜顯示3個乙酰基信號δ21.7(I-OCOCH3)，172.3(I-OCOCH3)，22.1(6-0C0CH3)，172.6(6_0C0CH3)，22.0(7_0C0CH3)，172.9(7_0C0CH3)。內(nèi)酯環(huán)上1個羰基碳的信號S172.4和2個雙鍵碳信號δ178.9，114.7。以上數(shù)據(jù)顯示該化合物具有卡山烷型二萜的骨架特征。將該化合物1H和13C-NMR數(shù)據(jù)(見表1.)與neocaesalpinL(Dong-Mei,etal.CassaneDiterpene-IactonefromtheseedsofCaesalpiniaminaxHance.Chemistry&Biodiversity，2006，3:1260-1265.)比較，數(shù)據(jù)一致。故化合物III鑒定為neocaesalpinL.表1.化合物I，II和IIIL匪R(500MHz)和13C-WR(125MHz)數(shù)據(jù)(inCD3OD)~~IIIIII_^(multility^)_δ_Sh(multility,J)_δ_δΗ(multility’·/)_8C15.10(lH，d,J=3.0Hz)74.04.83(lH，d,J=3.0Hz)73.74.84(lH,d’J=6.5Hz)76.822.03(lH,m,Hp),22.61.99(1H,m,Hp),24.01.98(lH，d,_T=2.5Hz，Hp)23.91.77(111，1101)1.65(lH，m,Ha)1.68(lH,m,Ha)31.82(1H,m,Hp),32.31.88(1H,m,Hp),33.81.86(lH’d，J=14.5，3.0Hz，Hp)33.8LlS(IHiIiiiHct)1.05(1H,m,Ha)1.06(1H,CijJ=M-OHz5Ha)438.640.039.9579.380.480.565.55(lH,m)74.45.45(1H,d,J=8.0Hz)76.25.45(lH,d,J=3.0Hz)77.375.70(lH，s)71.95.69(lH，s)77.25.69(lH,s)73.482.27(1H,m)48.01.95(lH，m)52.81.89(lH,m)52.193.30(lH,d，J=10.5Hz)38.32.77(lH，td，J=10.5Hz)35.22.79(lH，td，J=12.5，2.5Hz)35.61045.146.349.0115.55(1H,m)107.92.03(lH，d，J=2.5Hz，Hp)，39.01.96(lH,d,J=2.5Hz,H)39.11.37(lH,t,J=12.8Hz,Ha)1.30(lH，t，J=12.5Hz,Ha)12150.0109.0107.013162.9176.2178.91472.676.776.1156.05(lH,s)110.76.00(lH,s)117.85.80(3H,s)114.716169.0172.3172.4171.50(3H，s)21.21.50(3H,s)20.21.52(lH,s)21.2181.09(3H，s)29.9l.ll(3H，s)31.4l.ll(3H，s)31.4191.12(3H，s)23.71.12(3H，s)25.31.12(3H,s)25.3201.21(3H，s)18.91.15(3H，s)17.71.16(lH’s)17.812-OMe3.16(3H,s)51.8I-OAc2.07(3H,s)170.2，2.12(3H,s)171.2,2.02(3H，s)172.4,21.221.621.76-OAc2.00(3H,s)170.3，1.93(3H，s)172.5，1.93(3H,s)172.6,21.522.122.17-OAc2.11(3H，s)168.8,2.02(3H，s)172.9，2.13(3H,s)172.9，_2Z5_220_22.0本發(fā)明進(jìn)一步涉及式1所述的三個卡山烷型二萜內(nèi)酯單體化合物在制備治療和/或預(yù)防瘧疾藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)過實驗證明本發(fā)明化合物具有治療和/或預(yù)防瘧疾的作用，本發(fā)明進(jìn)行了體外抗瘧藥效學(xué)研究試驗，試驗采用惡性瘧原蟲(Plasmodiumfaciparum,P.f.)FCC1分離株，試驗如下建立惡性瘧原蟲(Plasmodiumfaciparum，P.f.)FCCl分離株體外培養(yǎng)體系。完全的瘧原蟲培養(yǎng)基為含25mMHEPES、23.8mMNaHC03、50mg·L—1慶大霉素及10%兔血清的RPMI1640?！?”型紅細(xì)胞用完全培養(yǎng)基稀釋至紅細(xì)胞比容為5%。培養(yǎng)條件為37°C、5%CO2,5%02及90%隊。生長穩(wěn)定后，用5%甘露醇進(jìn)行同步化處理，一個周期后(約48小時)再次用甘露醇處理，同步化后繼續(xù)培養(yǎng)28-30小時，至生長為成熟裂殖體期。調(diào)整最終的紅細(xì)胞比容為5%，原蟲血癥為0.5-1%。將原蟲培養(yǎng)物調(diào)整至0.5-1%原蟲血癥，紅細(xì)胞比容為5%，按照50μ1每孔分裝入96孔板。所有樣品用DMSO溶解稀釋后，按不同濃度分別加入小孔，在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-30小時后，取每孔中的培養(yǎng)物涂厚血片，吉姆薩染色后顯微鏡觀察原蟲血癥的變化。MicrosoftExcel2003整理數(shù)據(jù)，STATA7.0進(jìn)行統(tǒng)計處理和分析，并用GraphpadPrism進(jìn)行非線性回歸的曲線擬合后得到各樣品的IC50及其95%可信區(qū)間。表2.化合物I，II和III對惡性瘧原蟲的半數(shù)抑制濃度和95%可信區(qū)間<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實驗結(jié)果表明樣品I和II具有較好的抗瘧活性，樣品III有很強(qiáng)的抗瘧活性。圖1喙莢云實種子乙醇總浸膏不同極性部位的提取流程2卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物I，II和III的制備流程；圖3化合物I的HRESI-MS譜；圖4化合物I的1H-NMR譜；圖5化合物I的13C-WR譜；圖6化合物I的HMBC譜；圖7化合物I的HMQC譜；圖8化合物II的HRESI-MS譜；圖9化合物II的1H-NMR譜；圖10化合物II的13C-WR譜；圖11化合物II的HMBC譜；圖12化合物II的HMQC差譜；圖13化合物III的HRESI-MS譜；圖14化合物III的1H-NMR譜；圖15化合物III的13C-WR譜；圖16化合物III的HMBC譜；圖17化合物III的HMQC譜。具體實施例方式下面所實施例有助于本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例化合物的制備以豆科云實屬植物喙莢云實(CaesalpiniaminaxHance.)種子(5.Okg)為原料(見附圖1)，用95%乙醇回流提取2次，2h/次，減壓回收溶劑，濃縮后得浸膏744g，藥渣再用75%乙醇回流提取2次，2h/次，提取液經(jīng)減壓濃縮后得浸膏208g，將全部浸膏合并后得到苦石蓮乙醇總提物(952g)?？嗍徱掖伎偨嘤眉状既芙夂螅Q取100200目硅膠按11的比例與之拌樣，混勻烘干備用。稱取100200目硅膠536g裝入索氏提取器底部，然后再裝入拌樣后的苦石蓮乙醇總提取物(1750g)。依次用4.5L石油醚、2.5L氯仿、3.5L乙酸乙酯、3.5L丙酮、3L甲醇回流提取(提取流程見附圖1所示)。將各提取液分別減壓濃縮后得到苦石蓮乙醇總浸膏的石油醚回流提取層(143g)、氯仿回流提取層(106g)、乙酸乙酯回流提取層(497g)、丙酮回流提取層(15.5g)和甲醇回流提取層(68g)。乙酸乙酯部位浸膏497g按附圖2所示流程進(jìn)行硅膠柱色譜，用氯仿-甲醇不同比例的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫。其中氯仿甲醇(955)洗脫部分50-57流份繼續(xù)用硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，其中氯仿甲醇(1001)洗脫所得流份49-56用甲醇重結(jié)晶得到化合物I(9mg)，梯度8020洗脫所得流份57-76繼續(xù)用硅膠柱色譜分離，石油醚乙酸乙酯(41)洗脫后的流份92，93，經(jīng)己烷丙酮重結(jié)晶得到化合物II(3mg)。氯仿-甲醇(9010)洗脫部分，58-72流份進(jìn)行S^hadexLH-20凝膠柱色譜，甲醇洗脫，其中流份5-17再進(jìn)行硅膠柱色譜分離，用氯仿甲醇(301)洗脫的流份42-47再進(jìn)行SephadexLH-20凝膠柱色譜，甲醇洗脫，收集流份7和8利用硅膠柱色譜進(jìn)行純化，石油醚丙酮氯仿(113)的系統(tǒng)洗脫后得到化合物III(15mg)。權(quán)利要求具有抗惡性瘧原蟲活性的兩個新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物，其特征在于其是由豆科藥用植物喙莢云實種子中提取分離得到的，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為按照權(quán)利要求1所述的兩個新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物，其特征在于化合物Ⅰ為5α，14β-二羥基-1α，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯，其分子式為C26H34O10，分子量為506.2152(計算值)，系白色無定型粉末狀；化合物Ⅰ為新化合物?；衔铫驗?2α-甲氧基，5α，14β-二羥基-1α，6α，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯，其分子式為C27H38O11，分子量為538.2414(計算值)，系白色無定型粉末狀；化合物Ⅱ為新化合物。F2009100093734C0000011.tif2.權(quán)利要求1所述的兩個新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物經(jīng)抗瘧藥效學(xué)試驗證明，具有較好的抗瘧活性。同時，從豆科藥用植物喙莢云實種子中提取分離得到的化合物III為neocaesalpinL(5，12，14-三羥基-1，6，7_三乙酰基-13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯)也屬于卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物，其分子式為C26H36O11,分子量為524.2258(計算值)，系白色無定型粉末狀。首次對化合物III(neocaesalpinL)進(jìn)行抗瘧藥效學(xué)試驗，證明該化合物具有很強(qiáng)的抗瘧活性。3.權(quán)利要求1所述的兩個新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物(化合物I、II)及權(quán)利要求2所述的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物(化合物III)的制備方法，包括以下步驟干燥苦石蓮粉末，分別用95%和75%乙醇回流提取，減壓回收溶劑，合并浸膏后得到苦石蓮乙醇總提取物，硅膠與之拌樣后裝入索氏提取器，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇回流提取，將各提取液分別減壓濃縮后得到苦石蓮乙醇總浸膏的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇回流提取部位。乙酸乙酯部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜層析、SephadexLH-20凝膠柱色譜層析和重結(jié)晶純化得到化合物5α，14β-二羥基_1α，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯(I)，12α-甲氧基，5α，14β-二羥基_1α，6α，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯(II)和neocaesalpinL(III)。4.權(quán)利要求1所述的兩個新的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物(化合物I、II)及權(quán)利要求2所述的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物(化合物III)在制備治療和/或預(yù)防瘧疾藥物中的應(yīng)用，所述卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物分別是5α，14β-二羥基-Ια，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯、12α-甲氧基，5α，14β-二羥基-Ια，6α，7β-三乙酰基-13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯、neocaesalpinL(5a，12a，14β-三羥基-la,6a，7β-三乙酰基-13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯)。全文摘要本發(fā)明涉及一類具抗惡性瘧原蟲活性的卡山烷型二萜內(nèi)酯化合物，是以豆科藥用植物喙莢云實的種子為原料，用特定溶劑提取，經(jīng)各種色譜層析，得到三個卡山烷型二萜內(nèi)酯單體化合物，分別為5α，14β-二羥基-1α，6α，7β-三乙酰基-13(15)，11(12)-二烯-16，12-內(nèi)酯(Ⅰ)，12α-甲氧基，5α，14β-二羥基-1α，6α，7β-三乙?；?13(15)-烯-16，12-內(nèi)酯(Ⅱ)和neocaesalpinL(Ⅲ)，其中化合物Ⅰ和Ⅱ為新化合物。首次對這三個化合物體外抗瘧藥效學(xué)的研究試驗表明，其對惡性瘧原蟲具有明顯抑制作用，可用于制備治療和/或預(yù)防瘧疾藥物。文檔編號C07D307/77GK101812041SQ20091000937公開日2010年8月25日申請日期2009年2月20日優(yōu)先權(quán)日2009年2月20日發(fā)明者程燕,繆劍華,袁經(jīng)權(quán),許娜,許旭東,馬麗焱申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所;廣西壯族自治區(qū)藥用植物園