專利名稱：：一種澤瀉三萜類化合物提取純化工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥，特別涉及中藥有效成分提取純化工藝，具體涉及澤瀉三萜類化合物提取純化。
背景技術(shù)：
：澤瀉為澤瀉科植物澤瀉(Alismaorientalis(Sam.)Juz印.)的干燥塊莖，性寒，味甘、淡，入腎、膀胱經(jīng)，味甘、淡，可滲濕，性寒能瀉腎及膀胱之熱，為常用的利水、滲熱、瀉熱藥物，臨床上常用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高血脂癥等的治療。對(duì)澤瀉的化學(xué)成分研究表明澤瀉中含有揮發(fā)油、生物堿、天門冬素、脂肪酸(棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸)、樹脂、蛋白質(zhì)、淀粉和系列三萜類[澤瀉醇A、B、C，24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B、24-乙酰澤瀉醇C等]以及系列倍半萜類(orientalolA、B、C、D等)等成分，其中澤瀉醇A、B、C和24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B、24_乙酰澤瀉醇C具有利尿、降血脂、抗脂肪肝及保肝作用，為澤瀉的主要活性成分。前期的藥理試驗(yàn)中，已經(jīng)篩選出澤瀉防治泌尿系統(tǒng)結(jié)石的有效部位，并經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定，初步確定其為三萜類化合物。本文旨在以澤瀉中總?cè)频暮恳约?3-乙酰澤瀉醇B的含量為指標(biāo)，考察以大孔吸附樹脂富集澤瀉中三萜類化學(xué)成分的工藝。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的任務(wù)是提供一種澤瀉三萜類化合物提取純化工藝。本發(fā)明通過對(duì)5種大孔吸附樹脂的吸附和解吸特性的比較，篩選出吸附澤瀉中三萜化合物的最佳樹脂，即HPD-100型大孔吸附樹脂，其他文獻(xiàn)未見相關(guān)報(bào)道。該樹脂屬于非極性樹脂，由苯乙烯和二乙烯苯縮合而成，故又稱芳香族吸附樹脂，因具有比較大的孔，適用于大分子物質(zhì)的吸附，且洗脫性良好，被吸附物可以容易地被洗脫下來，因此適用范圍廣泛，在醫(yī)藥食品領(lǐng)域評(píng)價(jià)很好。且經(jīng)本實(shí)驗(yàn)證明該樹脂對(duì)于澤瀉有效部位的純化作用優(yōu)于其它樹脂。在應(yīng)用大孔吸附樹脂分離純化中藥有效部位的傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)中，上樣前的供試品多用蒸餾水溶解，本實(shí)驗(yàn)采用50%乙醇溶解是因?yàn)闈蔀a中所含三萜類化合物極性較小，不能用蒸餾水溶解上樣，若用濃度高的乙醇溶解，雖然三萜類化合物在濃度高的醇溶液中溶解度較好，但樹脂的吸附量又會(huì)降低，所以選擇50%乙醇溶解。洗脫溶液濃度選擇80%乙醇是因?yàn)?0%乙醇溶液基本能把總?cè)坪?3-乙酰澤瀉醇B洗脫完全，而綜合考慮澤瀉三萜類化合物含量和23-乙酰澤瀉醇B的含量兩個(gè)指標(biāo)使該方法更加科學(xué)合理。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案本發(fā)明提供的澤瀉三萜類化合物提取純化工藝的步驟是(1)稱取澤瀉粗粉加入50%的甲醇，回流提取過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，即得澤瀉粗浸膏；(2)將制得的澤瀉粗浸膏加入水分散，用水飽和的乙酸乙酯萃取，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥，得到澤瀉精制浸膏；(3)將制得的澤瀉精制浸膏用50%乙醇溶解，制得到濃度為0.2g生藥/ml的上柱液，分別以1.0ml/min的流速上樣于67ml體積的HPD-100樹脂柱，后以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類、多糖和苷類，再用30%乙醇洗脫，然后用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，回收乙醇，得總固物，即為澤瀉三萜類化合物。本發(fā)明通過對(duì)5種大孔吸附樹脂的吸附和解吸特性的比較，篩選出吸附澤瀉中三萜化合物的最佳樹脂，即HPD-100型大孔吸附樹脂，其他文獻(xiàn)未見相關(guān)報(bào)道。該樹脂屬于非極性樹脂，由苯乙烯和二乙烯苯縮合而成，故又稱芳香族吸附樹脂，因具有比較大的孔，適用于大分子物質(zhì)的吸附，且洗脫性良好，被吸附物可以容易地被洗脫下來，因此適用范圍廣泛，在醫(yī)藥食品領(lǐng)域評(píng)價(jià)很好。且經(jīng)本發(fā)明實(shí)驗(yàn)證明該樹脂對(duì)于澤瀉有效部位的純化作用優(yōu)于其它樹脂。在應(yīng)用大孔吸附樹脂分離純化中藥有效部位的傳統(tǒng)工藝中，上樣前的供試品多用蒸餾水溶解，本實(shí)驗(yàn)采用50%乙醇溶解是因?yàn)闈蔀a中所含三萜類化合物極性較小，不能用蒸餾水溶解上樣，若用濃度高的乙醇溶解，雖然三萜類化合物在濃度高的醇溶液中溶解度較好，但樹脂的吸附量又會(huì)降低，而本發(fā)明選擇50%乙醇溶解，使樹脂的吸附量不降低。本發(fā)明披露了80%乙醇溶液基本能把澤瀉三萜類化合物和23-乙酰澤瀉醇B洗脫完全的結(jié)果，本發(fā)明工藝中的洗脫溶液濃度選擇80%乙醇，因而本發(fā)明工藝基本能把澤瀉三萜類化合物和23-乙酰澤瀉醇B洗脫完全。本發(fā)明工藝綜合考慮澤瀉三萜類化合物含量和23-乙酰澤瀉醇B的含量兩個(gè)指標(biāo)使本發(fā)明工藝更加合理，更加科學(xué)。實(shí)驗(yàn)資料1儀器和試藥1.1儀器紫外-可見光分光光度計(jì)(UV-cary);精密電子分析天平(精確到十萬分之一AG285，METTLERTOLEDO)1.2試藥澤瀉購于武漢市漢口國藥有限公司，產(chǎn)于福建毫州，批號(hào)為071001。經(jīng)華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥教研室尹春萍教授鑒定為澤瀉科植物澤瀉(Alismaorientalis(Sam.)Juz印.)的干燥塊莖。乙醇、乙酸乙酯、高氯酸、冰醋酸、香草醛等試劑為分析純，乙腈為色譜純。對(duì)照品23-乙酰澤瀉醇B:由南京中醫(yī)藥大學(xué)提供，23-乙酰澤瀉醇B的制備方法參見[彭國平，潘林梅，文紅梅等.澤瀉的對(duì)照品研究[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).2001;17(3):154-156.]。經(jīng)HPLC峰面積歸一法確認(rèn)其純度大于98X，可供含量測定用。2方法和結(jié)果2.1樹脂的預(yù)處理樹脂先用乙醇充分浸泡，然后用乙醇洗至加適量水無白色混濁，再用純凈水洗至洗脫液無醇味，去醇后再進(jìn)行酸堿處理先用5%HC1(V/V)溶液浸泡3h，然后用去離子水洗至中性，接著用5%Na0H溶液浸泡3h，最后用去離子水洗至中性，最后用水浸泡備用。2.2三萜類成分的含量測定供試品溶液的制備稱取澤瀉粗粉80g，加入8倍量(V/V)50X的甲醇，回流提取三次，每次為1.5h。過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，加入100ml水分散，分別用100ml水飽和的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥。將浸膏用50X乙醇400ml溶解，制備成上柱前的澤瀉供試品溶液，濃度相當(dāng)于0.2g生藥/ml。對(duì)照品溶液的制備再精密稱取2.58mg干燥至恒重的23-乙酰澤瀉醇B對(duì)照品，加色譜純乙腈溶解并定容至5ml，作為對(duì)照品溶液，濃度為0.516mg/ml。含量測定方法采用紫外-可見光分光光度計(jì)法進(jìn)行測定。取3支具塞試管，一支試管作為空白管，另兩支分別精密加入對(duì)照品溶液和供試品溶液，水浴揮去溶劑，冷卻，分別加入5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸，混勻，密塞。置60°C恒溫水浴中加熱20min，取出，冰水浴冷卻，分別加乙酸乙酯5ml，搖勻，室溫放置10min后，在554nm處測定吸光度。加入試劑的量如表1:表1加入試劑的量<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2.3靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)2.3.1大孔吸附樹脂的篩選精確稱取約1.0g抽濾至干的預(yù)處理過的下列樹脂，置于250mL具塞磨口錐形瓶中，加lOOmL上述澤瀉供試品溶液，置于恒溫?fù)u床上震蕩吸附24h，充分吸附后過濾，測定剩余總?cè)埔掖既芤褐锌側(cè)频臐舛龋?jì)算各樹脂對(duì)總?cè)频奈饺萘?mg/g干樹脂)。過濾后的樹脂精密加入80%乙醇100ml進(jìn)行解吸附，解吸完過濾，紫外_可見光分光光度計(jì)法測定各濾液濃度，并計(jì)算解吸率。結(jié)果如表2:表25種大孔吸附樹脂對(duì)于澤瀉總?cè)频撵o態(tài)吸附效果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>結(jié)論選擇HPD-100型，滿足Q最大，而且解吸率達(dá)到85%以上。2.4上樣流速對(duì)HPD-100型樹脂吸附的影響以相同濃度(0.2g/ml)及體積(150ml)的澤瀉供試品溶液，控制流速分別為0.5ml/min、1.0ml/min、1.5ml/min進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附，柱床體積(BV)為10ml。結(jié)果見圖1。從圖1可得，流速為2ml/min時(shí)，第1BV過柱液就發(fā)生泄漏，上樣11BV附近吸附速度明顯減緩；而流速為0.5ml/min，1.Oml/min時(shí)，第2BV過柱液開始檢測到總?cè)疲瑑烧呔谏蠘?2BV時(shí)吸附緩慢，為使上樣液在樹脂間充分?jǐn)U散，吸附，流速不宜過快，故選擇以1.0ml/min的流速上樣。2.5動(dòng)態(tài)吸附曲線的考察取HPD-100型樹脂，濕法裝柱，柱床體積為10ml，取上述澤瀉供試品溶液以lml/min的速度上柱吸附，10ml樹脂共計(jì)吸附15BV的澤瀉供試溶液，每處理1BV收集過柱液，每次1BV，紫外法分別測定以上過柱液中總?cè)频暮浚瑒?dòng)態(tài)吸附曲線結(jié)果見圖2。由圖2可見，HPD-100型樹脂吸附此濃度的供試品溶液，過柱泄漏點(diǎn)在第6BV，從第7BV開始泄漏已達(dá)30%以上。即10ml的HPD-100型樹脂達(dá)到過柱泄漏點(diǎn)對(duì)于總?cè)频奈搅繛?08.48mg。2.6HPD-100型樹脂洗脫液的選擇按照上述實(shí)驗(yàn)確定的最大上樣量，另取20g澤瀉，按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制備，所得澤瀉供試品溶液上樣于已處理的樹脂柱，以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類。再依次用濃度為10%，30%，50%，70%，80%，95%的乙醇溶液各150ml以2ml/min流速洗脫，分別用試管收集各乙醇洗脫液，收集溶液體積分別為(50ml，50ml，25ml，25ml)，各取1ml揮干溶劑后作為樣品，測定澤瀉總?cè)频暮浚咽Ｏ碌母鳚舛认疵撘悍謩e合并，減壓蒸餾并定容至10ml，進(jìn)行HPLC-ELSD測定其23-乙酰澤瀉醇B的含量，結(jié)果見圖3和圖4。結(jié)果表明80%乙醇洗脫液對(duì)澤瀉三萜類化合物的洗脫效果最好，而且80%乙醇可將澤瀉中大約90%的三鵬類化合物洗脫下來，因此確定HPD-100型樹脂分離純化澤瀉總?cè)频淖罴严疵撊軇?0%乙醇。操作步驟為上樣后，先以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類。再用濃度為30%的乙醇溶液洗脫水溶性雜質(zhì)，然后用80%乙醇溶液以2ml/min流速洗脫，收集80%乙醇洗脫液。2.7洗脫溶劑用量的考察按照上述實(shí)驗(yàn)確定的最大上樣量，將20g澤瀉所得供試品溶液上樣于已處理的樹脂柱，以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類。再以400ml30X乙醇洗脫樹脂柱，收集洗脫液，每100ml為一份，分別揮干溶劑，干燥稱重。然后以500ml80X乙醇洗脫樹脂柱，收集洗脫液，每100ml為一份，適當(dāng)濃縮后，取適量分別用紫外和HPLC方法測定其中澤瀉總?cè)坪?3-乙酰澤瀉醇B的含量，結(jié)果見表3，表4。表330%乙醇用量的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結(jié)果表明，采用HPD-100型樹脂，用300ml的30%乙醇溶液可以將20g澤瀉所得供試品溶液中的雜質(zhì)基本洗脫干凈，再用300ml的80%乙醇溶液可將澤瀉供試品溶液中總?cè)瞥煞职?3-乙酰澤瀉醇B基本洗脫完全。累積洗脫率達(dá)90%以上。3.澤瀉三萜類化合物提取純化工藝的驗(yàn)證試驗(yàn)稱取澤瀉粗粉80g，加入8倍量50%的甲醇，回流提取三次，每次為1.5h。過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，加入100ml水分散，分別用100ml水飽和的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥。將浸膏用400ml50X乙醇溶解。得到濃度為0.2g生藥/ml的上柱液，分別以1.Oml/min的流速上樣于67ml體積的HPD-100樹脂柱，后以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類，再用1200ml的30%乙醇洗脫，然后用1200ml80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，紫外法和HPLC-ELSD法分別測定總?cè)坪?3-乙酰澤瀉醇B含量，余下溶液回收乙醇，得總固物，平行操作3份，計(jì)算總固物中三萜類化合物和23-乙酰澤瀉醇B的含量，結(jié)果見表5。表5澤瀉三萜類化合物提取純化工藝的驗(yàn)證<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>4.澤瀉總?cè)铺崛〖兓に嚨母攀霾襟E1:澤瀉粗浸膏的制備稱取澤瀉粗粉80g，加入8倍量50%的甲醇，回流提取三次，每次為1.5h。過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，即得澤瀉粗浸膏。步驟2:澤瀉浸膏精制澤瀉粗浸膏加入100ml水分散，分別用100ml水飽和的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥，得到澤瀉精制浸膏。步驟3:澤瀉總?cè)撇课坏闹苽鋵蔀a精制浸膏用400ml50%乙醇溶解。得到濃度為0.2g生藥/ml的上柱液，分別以1.Oml/min的流速上樣于67ml體積的HPD-100樹脂柱，后以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類，再用1200ml的30%乙醇洗脫，然后用1200ml80X乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，紫外法和HPLC-ELSD法分別測定總?cè)坪?3-乙酰澤瀉醇B含量，余下溶液回收乙醇，得總固物，即為澤瀉總?cè)撇课弧?.以下將采用大孔吸附樹脂分離中藥有效部位的傳統(tǒng)方法和本實(shí)驗(yàn)所用方法作比較<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)5種大孔吸附樹脂的吸附和解吸特性的比較，篩選出吸附澤瀉中三萜化合物的最佳樹脂，即HPD-100型大孔吸附樹脂，其他文獻(xiàn)未見相關(guān)報(bào)道。該樹脂屬于非極性樹脂，由苯乙烯和二乙烯苯縮合而成，故又稱芳香族吸附樹脂，因具有比較大的孔，適用于大分子物質(zhì)的吸附，且洗脫性良好，被吸附物可以容易地被洗脫下來，因此適用范圍廣泛，在醫(yī)藥食品領(lǐng)域評(píng)價(jià)很好。且經(jīng)本實(shí)驗(yàn)證明該樹脂對(duì)于澤瀉有效部位的純化作用優(yōu)于其它樹脂。在應(yīng)用大孔吸附樹脂分離純化中藥有效部位的傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)中，上樣前的供試品多用蒸餾水溶解，本實(shí)驗(yàn)采用50%乙醇溶解是因?yàn)闈蔀a中所含三萜類化合物極性較小，不能用蒸餾水溶解上樣，若用濃度高的乙醇溶解，雖然三萜類化合物在濃度高的醇溶液中溶解度較好，但樹脂的吸附量又會(huì)降低，所以選擇50%乙醇溶解。洗脫溶液濃度選擇80%乙醇是因?yàn)?0%乙醇溶液基本能把總?cè)坪?3-乙酰澤瀉醇B洗脫完全，而綜合考慮總?cè)坪亢?3-乙酰澤瀉醇B的含量兩個(gè)指標(biāo)使該方法更加合理，更加科學(xué)。HPD-100型大孔吸附樹脂適合分離純化澤瀉中極性較小的三萜類成分。圖1為吸附流速與吸附量關(guān)系圖，從圖l可得，流速為2ml/min時(shí)，第1BV過柱液就發(fā)生泄漏，上樣11BV附近吸附速度明顯減緩；而流速為0.5ml/min，1.0ml/min時(shí)，第2BVB過柱液開始檢測到總?cè)疲瑑烧呔谏蠘?2BV時(shí)吸附緩慢，為使上樣液在樹脂間充分?jǐn)U散，吸附，流速不宜過快，故選擇以1.Oml/min的流速上樣。圖2為HPD-100型樹脂對(duì)澤瀉總?cè)i的動(dòng)態(tài)吸附曲線，由圖2可見，HPD-100型樹脂吸附此濃度的供試品溶液，過柱泄漏點(diǎn)在第6BV，從第7BV開始泄漏已達(dá)30%以上。即10ml的HPD-100型樹脂達(dá)到過柱泄漏點(diǎn)對(duì)于總?cè)频奈搅繛?08.48mg。圖3為不同濃度乙醇中總?cè)葡疵撉€，圖中14為10%乙醇洗脫液；58為30%乙醇洗脫液；912為50%乙醇洗脫液；1316為70%乙醇洗脫液；1720為80%乙醇洗脫液；2124為95%乙醇洗脫液。圖4為不同濃度乙醇洗脫液中23-乙酰澤瀉醇B洗脫曲線，圖中1為10%乙醇洗脫液；2為30%乙醇洗脫液；3為50%乙醇洗脫液；4為70%乙醇洗脫液；5為80%乙醇洗脫液；6為95%乙醇洗脫液。結(jié)果表明80%乙醇洗脫液對(duì)澤瀉三萜類化合物的洗脫效果最好，而且80%乙醇可將澤瀉中大約90%的三鵬類化合物洗脫下來，因此確定HPD-100型樹脂分離純化澤瀉總?cè)频淖罴严疵撊軇?0%乙醇。操作步驟為上樣后，先以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類。再用濃度為30%的乙醇溶液洗脫水溶性雜質(zhì)，然后用80%乙醇溶液以2ml/min流速洗脫，收集80%乙醇洗脫液。具體實(shí)施方式實(shí)施例1澤瀉總?cè)铺崛〖兓に?1)制備澤瀉粗浸膏稱取澤瀉粗粉80g，加入8倍量50X的甲醇，回流提取三次，每次為1.5小時(shí)，過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，即得澤瀉粗浸膏；(2)精制澤瀉浸膏將制得的澤瀉粗浸膏加入100ml水分散，用100ml水飽和的乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥，得到澤瀉精制浸膏；(3)澤瀉總?cè)撇课坏闹苽鋵⒅频玫臐蔀a精制浸膏用50%乙醇400ml溶解，得到濃度為0.2g生藥/ml的上柱液，分別以1.Oml/min的流速上樣于67ml體積的HPD-IOO樹脂柱，后以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類，多糖和苷類，再用1200ml的30%乙醇洗脫，然后用80%乙醇1200ml洗脫，收集80%乙醇洗脫液，回收乙醇，得總固物，即為澤瀉三萜類化合物。實(shí)施例2應(yīng)用大孔吸附樹脂對(duì)中藥澤瀉中三萜類化合物成分進(jìn)行富集方法80g澤瀉所得浸膏用400ml50%乙醇溶解后，上樣于HPD-lOO型大孔吸附樹脂，充分吸附后，再用蒸餾水洗脫至molish反應(yīng)呈陰性，然后用1200ml30X乙醇，1200ml80%乙醇依次洗脫，收集80%乙醇洗脫液，蒸干溶劑，干燥，即為所得。結(jié)果以23-乙酰澤瀉醇B為對(duì)照品計(jì)算，富集產(chǎn)物中總?cè)祁惡靠蛇_(dá)50%以上，23-乙酰澤瀉醇B含量可達(dá)1.29%以上。權(quán)利要求一種澤瀉三萜類化合物提取純化工藝，其步驟是(1)稱取澤瀉粗粉加入50％的甲醇，回流提取過濾，合并濾液，回收溶劑至浸膏狀，即得澤瀉粗浸膏；(2)將制得的澤瀉粗浸膏加入水分散，用水飽和的乙酸乙酯萃取，合并萃取液，回收溶劑得浸膏，干燥，得到澤瀉精制浸膏；(3)將制得的澤瀉精制浸膏用50％乙醇溶解，制得到濃度為0.2g生藥/ml的上柱液，分別以1.0ml/min的流速上樣于67ml體積的HPD-100樹脂柱，后以蒸餾水洗至molish反應(yīng)呈陰性，除去糖類、多糖和苷類，再用30％乙醇洗脫，然后用80％乙醇洗脫，收集80％乙醇洗脫液，回收乙醇，得總固物，即為澤瀉三萜類化合物。全文摘要本發(fā)明提供了一種澤瀉三萜類化合物的提取純化工藝，本發(fā)明通過對(duì)5種大孔吸附樹脂的吸附和解吸特性的比較，篩選出吸附澤瀉中三萜化合物的最佳樹脂，即HPD-100型大孔吸附樹脂。本發(fā)明分離純化工藝上樣前采用50％乙醇溶解，使樹脂的吸附量不降低，本發(fā)明披露了80％乙醇溶液基本能把澤瀉三萜類化合物和23-乙酰澤瀉醇B洗脫完全的結(jié)果，本發(fā)明工藝中的洗脫溶液濃度選擇80％乙醇，因而本發(fā)明工藝基本能把澤瀉三萜類化合物和23-乙酰澤瀉醇B洗脫完全。本發(fā)明工藝綜合考慮了澤瀉三萜類化合物含量和23-乙酰澤瀉醇B的含量兩個(gè)指標(biāo)，使提取純化工藝更加合理，更加科學(xué)。文檔編號(hào)C07J75/00GK101724009SQ20081019731公開日2010年6月9日申請日期2008年10月23日優(yōu)先權(quán)日2008年10月23日發(fā)明者尹春萍申請人:華中科技大學(xué)