專利名稱：：作為非核苷類hiv逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的間二芳烴-多取代苯胺類化合物、其制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有抗HIV活性的間二芳烴-多取代苯胺類化合物、其制備方法、含有它們的藥物組合物及其用于制備抗HIV的藥物的用途。
背景技術(shù)：
：艾滋病毒(HIV)是一種RM病毒。該病毒的表面是層雙脂膜。膜中包裹著2個(gè)單鏈RNA和一些重要的酶(如逆轉(zhuǎn)錄酶、蛋白水解酶、整合酶)及結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)(p24，p17，p7等)。病毒的膜表面有兩個(gè)非常重要的糖蛋白gpl20和gp41。gpl20在膜的外部，gp41橫跨雙脂膜并與gpl20形成一個(gè)復(fù)合體。它們的主要功能是識(shí)別和進(jìn)攻人體免疫系統(tǒng)中具有CD4表面受體的細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞)、巨噬細(xì)胞等。HIV在體外不能繁殖，必須借助于人體細(xì)胞才能復(fù)制再生。HIV的復(fù)制過(guò)程大致可分為以下階段病毒與宿主細(xì)胞的結(jié)合及融合，病毒基因的逆轉(zhuǎn)錄，整合，轉(zhuǎn)錄，和轉(zhuǎn)譯，病毒的組裝及釋放。艾滋病毒以這樣一個(gè)循環(huán)過(guò)程不斷地復(fù)制，感染人體免疫細(xì)胞，破壞人體的免疫系統(tǒng)，最終導(dǎo)致人體免疫功能的完全喪失，使病人處于各類感染而毫無(wú)抵御能力的危險(xiǎn)之中。理論上講，藥物只要阻斷病毒復(fù)制過(guò)程中的任一環(huán)節(jié)都會(huì)達(dá)到抑制病毒和治療疾病的目的。到目前為止，批準(zhǔn)上市的用于臨床抗HIV感染和治療艾滋病的化學(xué)藥物及其組合已有30種?，F(xiàn)有的藥物按其作用機(jī)制分為五類核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)、非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)、蛋白水解酶抑制劑(PIs)，融合抑制劑(Enfuvirtide)和進(jìn)入抑制劑(Maraviroc)。現(xiàn)有藥物單獨(dú)或聯(lián)合使用可有效地抑制病毒在體內(nèi)的復(fù)制，但共同面對(duì)的主要問(wèn)題是抗藥性。HIV病毒在與藥物作用一段時(shí)間后會(huì)產(chǎn)生某種變異。變異的病毒可不再受藥物的抑制，仍象用藥前一樣繼續(xù)在體內(nèi)復(fù)制大量病毒。因此，尋找和開發(fā)具有新結(jié)構(gòu)類型，新作用機(jī)制、新作用靶點(diǎn)或?qū)呖顾幮缘牟《居袕?qiáng)抑制作用的新一代抗艾滋病藥物一直是近年來(lái)藥物研究領(lǐng)域中的一個(gè)熱點(diǎn)。目前，只有3個(gè)上市的非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑[奈韋拉平(Nevirapine)，地拉韋咬(Delavirdine)，依非韋倫(Efavirenz)]。該類藥物具有結(jié)構(gòu)多樣性、高效低毒、靶點(diǎn)和作用機(jī)制清楚和非竟?fàn)幮砸种苿┑葍?yōu)越之處，在抗HIV組合療法(HAART)中的占有重要位置。但是主要存在的問(wèn)題是易產(chǎn)生耐藥性。為克服現(xiàn)有藥物的弊端，需要尋找能有效抑制野生型和多種耐藥性HIV病毒林復(fù)制的新一代非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人在抗HIV新藥的研究中已發(fā)現(xiàn)了一類新型結(jié)構(gòu)的化合物具有相當(dāng)強(qiáng)的抗HIV活性，極有可能發(fā)展成為新的抗HIV藥物。因此，本發(fā)明的第一個(gè)方面涉及式(I)所示間二芳烴-多取代苯胺類骨架結(jié)構(gòu)的化合物或其可藥用鹽R"R2和R3各自獨(dú)立地為-H、鹵素、-N02、-NH2、-NHR、-N(R)2、-CN、-0H、d—6烷基、Cw烷氧基、-CF3、-COOH、-S03H、-C0NH2、-CONHR，或-COOR，，或者，R!和112或112和R3可以一起形成-OCH20-;R4為一CN、-CH=CH2、-CsCH、d-6烷基、Cw烷氧基、-CF3、卣素、其中，-NH2、-0H、-COOH、-S03H、-CsCR，或-CH-CHR，；Rs和R6各自獨(dú)立地為卣素、d—6烷基、d—6烷氧基、-CF3、-NH2、-OH、-COOH、-S03H或-COOR，;R7為-CN、-HC-CH-CN、卣素、C"烷基、d—6烷氧基、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C^CH、-feCR，、-CH=CHR，、-CH=CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d—6烴基；X:-NH-、-0-、-S-、-CH廣、-CO-、-CHOH-、-CHOR-、-NR-、-NCOR-;并且R為Cw烴基。本發(fā)明第二個(gè)方面涉及式I化合物或其可藥用鹽的制備方法。本發(fā)明第三個(gè)方面涉及含有至少一種式I化合物或其可藥用鹽以及一種或多種藥用載體或賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明第四個(gè)方面涉及上述式I化合物或其可藥用鹽用于制備治療與HIV感染的有關(guān)的疾病或病癥的藥物的用途。本發(fā)明中所釆用的術(shù)語(yǔ)"烴基"包括烷基、烯基和炔基。本發(fā)明中所采用的術(shù)語(yǔ)"五元芳雜基，，是指環(huán)系中含有1-3個(gè)選自0，S或N的雜原子的五元芳香環(huán)系，其包括但不限于呋喃，吡咯、蓬吟、吡喳等。本發(fā)明中所提到的"在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代的五元雜芳基可示意如下，包括但不限于此R'R，為H、d—6烴基；R"為H、—CN、d"烴基；X、Y、Z各自獨(dú)立地表示選自N、0、S的雜原子或?yàn)樘荚?。根?jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，本發(fā)明涉及如下所示的式(I)化合物其中，Rl5R2和R3各自獨(dú)立地為-H、鹵素、-N02、-NH2、-NHR、-N(R)2、-CN、-0H、d—6烷基、d—6烷氧基、-CF3、-COOH、-S03H、-CONH2、-CONHR，或-COOR，，或者，Ri和112或R2和R3可以一起形成-OCH20-；R4為-CN、-CH=CH2、-CsCH、C^烷基、d-6烷氧基、-CF3、卣素、-NH2、-OH、-COOH、-S03H、-C^CR，或-CH-CHR，;Rs和R6各自獨(dú)立地為卣素、Cw烷基、d—6烷氧基、-CF3、-NH2、-OH、-COOH、-S03H或-COOR，；R7為-CN、-HC-CH-CN、卣素、C^烷基、C^烷氧基、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-C=CR，、-CH-CHR，、-CH=CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a,卩不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d-6烴基；X:-NH-、-0-、-S-、-CH廣、-C0-、-CHOH-、-CHOR-、-NR-、-NCOR-；并且R為Ch烴基。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，X為-O-。才艮據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有如下的式Ia.'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其中，R,和R3各自獨(dú)立地為-N02、-NH2、卣素、-OH、-CN或-N(R)2;R7為-CN、-HC-CH-CN、卣素、-CH3、-OCH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-CsCH、-C=CR，、-CH=CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a,p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或烴基；X為-0-、-NH-或-NCOR-;并且R為d"烴基。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有上述式Ia,其中^為-冊(cè)2、-NH2、鹵素、一OH、—CN或-N(R)2;Rz和R3為-H;R7為-CN、-HC-CH-CN、面素、-CH3、-OCH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-feCR，、-CH-CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或烴基；X為-O-、-NH-或-NCOR-;并且R為d-4烴基。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有上述<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>式Ia，其中RH-NH2、—鹵素、-0H、-CN或-N(R)2;Ri和R3為H;R,為-CN、-HC=CH-CN、卣素、-CH3、-OCH"-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-CsCH、-CsCR，、-CH=CHR，、-CH=CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或烴基；X為-O-、-NH-，-NCOR-;并且R為d-4烴基。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有上述式Ia，其中RH-NH2、-鹵素、-0H、-CN或-N(R)2;K和R:為H;R7為-CN、一HC-CH-CN、卣素、-CH3、—0CH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-CsCR，、-CH=CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，P不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或Ch烴基；X為-0-、-NH-,-NCOR-;并且R為d-4烴基。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有上述式la,其中RH-NH2、-卣素、-0H、-CN或-N(R)2;Ri和112為H;R為-CN、一HC-CH-CN、卣素、—CH3、-0CH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-CsCR，、-CH=CHR，、-CH=CHC0R，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或C卜6烴基；X為-0-或-NH-;并且R為Ch烴基。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明式I化合物具有上述式Ia，其中Ri和R2或R2和R3一起為-0CH20-，余下的R3或R!為-H、0H、-NH2、-卯2或卣素；R7為-CN、-HC-CH-CN、卣素、-CH3、-OCH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH-CH2、-C=CH、-C=CR，、-CH=CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a,p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d-6烴基；X為-O-、-S-、-CH2-、-NH-、-NCOR-;并且R為Ch烴基。本發(fā)明更優(yōu)選下列化合物^(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲基-4，-溴苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；^"(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；l-薩(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基-5-^(2，，4，，6，-三甲基苯基)-1，5-苯二胺；l-f(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基-5-[iV-乙酰氧-^(2，，4，，6，-三甲基苯基)]-l，5-苯二胺；4-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-2-[f(4，-氰基苯基)]-5-硝基苯二胺；N-(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二曱苯氧基)-2-硝基苯胺；N-(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2-硝基苯胺；5-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-NL(4，-氰基苯基)-l，2，4-苯三胺；舲(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；N1-(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二曱苯氧基)-1，2，4-苯三胺；5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)(4，-氰基苯基)]-4-硝基-1，2-苯二胺；5-(4，-溴-2，，6，-二曱苯氧基)-f(4'-氰基苯基)-2-硝基苯胺；4-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-y-(4，-氰基苯基)]-1，2-苯二胺;薩(4，-氰基苯基)-5-(2'，4，，6，-三甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2，4-二硝基-K4，-曱基苯基)苯胺；5-(4，-溴-2，，6，-二曱苯氧基)-2，4-二硝基-薩(4，-甲基氧苯基)苯胺；^"(4，-氰基苯基)-5-(2，，6-二曱苯氧基)-3-硝基苯胺；f(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰基-2，，6-二甲苯氧基)-2，4-二硝'基苯胺；^(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰-'2，，6-二甲苯氧基)-4-硝基-l，2-二苯胺；和薩(4，-氰基苯基)-5-{2，，6，-二甲-4，-[2"-(5"-甲酰呋喃)]苯氧基}-2，4-二硝基苯胺。=CI,Br,IZ=CI,已r,IX=NH2,OHX二NH,O,NR',S其中R「R7和X的定義同上式I所述。使式II取代的間二g苯在強(qiáng)堿的作用下與對(duì)位取代苯胺類化合物反應(yīng)生成N-芳基取代苯胺，即式IV中間體；然后使式IV中間體與多取代酚或苯胺類化合物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，或在鈀類催化劑作用下加熱或在微波條件下偶聯(lián)生成具有式I的間二芳烴多取代苯胺類目標(biāo)化合物o此外，式I中的部分目標(biāo)化合物在微波反應(yīng)條件下，也可以二步偶合反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，即"一鍋反應(yīng)"。例如，本發(fā)明式Ia化合物可按照以下合成路線制備:x=o其中l(wèi)、R2、R3和R7的定義同上式I所述，可根據(jù)需要選擇具有適當(dāng)R"R2、R3取代基的式II為原料。中間體IV的芳胺偶聯(lián)合成具體來(lái)說(shuō)，在叔丁醇鉀、氫化鈉、三乙胺、吡啶、N，N-二曱胺基吡啶，或碳酸鉀/卣代亞銅(I)存在下，使間二卣代硝基苯(II)和對(duì)位取代苯胺或取代酚(式IIIa)在DMF，乙腈、THF或DMS0溶劑中，室溫-130。C以下，反應(yīng)5分鐘-24小時(shí)，生成N-(對(duì)位取代芳基)苯胺或苯醚中間體(IVa)。反應(yīng)物II/III的投料摩爾比為1:1.1-1:2。該偶合反應(yīng)也可在微波條件下，以DMF或DMSO為溶劑，溫度可在150-180。C范圍內(nèi)、反應(yīng)10-30分鐘，得到中間體IV-a。堿和反應(yīng)物投料比例同上所述。目標(biāo)化合物I的合成例如，當(dāng)通式中的X為-O-時(shí)，其合成方法如下方法1:N-芳基-間氯苯胺(式IV-a)與多取代苯酚(式V)以DMSO，DMF等為溶劑，在催化劑Cu或亞銅試劑(例如Cul,CuBr)、K2C03存在下，氮?dú)獗Ｗo(hù)加熱至130匸反應(yīng)約4小時(shí)。方法2:在干燥乙醚中，使式V的三取代苯酴與NaH反應(yīng)成為鈉鹽，其鈉鹽與IV-a的N-芳基-間氯苯胺在DMF中回流0.5-8小時(shí)；方法3:使中間體IV-a在DMF中與酚鈉鹽或鉀鹽在微波條件下反應(yīng)5-IO分鐘；方法4:以DMSO為溶劑，使中間體IV-a與取代苯酚(式V)及碳酸鉀一起在微波下反應(yīng)5-10分鐘。又如，當(dāng)目標(biāo)化合物通式中的X為-NH-時(shí)，其合成方法如下R5,R6=H,Br,CN,CH3,OCH3,CF:其中各取代基的定義同上式I所述，可根據(jù)需要選擇具有適當(dāng)R,、R2、Rs取代基的式IV為原料。方法5:使式(IV)中間體氯苯與式(VI)取代苯胺在非質(zhì)子極性溶劑(如DMSO或DMF等)，以銅試劑Cu，Cul或CuBr等為催化劑，K2C03存在、氮?dú)獗Ｗo(hù)下，在溫度140-160X:反應(yīng)時(shí)間約6小時(shí)。方法6:以鈀試劑為催化試劑，甲苯為溶劑，在碳酸銫存在、氮?dú)獗Ｗo(hù)下，使式(iv)中間體氯苯與式(vi)取代苯胺在ioor;左右反應(yīng)1-20小時(shí)；方法7:若式(VI)芳胺為液體，則無(wú)需用其它溶劑，可直接將VI與中間體IV混合，在芳胺沸點(diǎn)溫度、微波下反應(yīng)約15-20分鐘左右；方法8:DMSO或NMP等為溶劑，式(VI)芳胺與式(IV)中間體氯苯以4:l摩爾比，叔丁醇鉀存在下、溫度200-250X:、微波反應(yīng)15-20分鐘。類似地，還可以制備得到式I中X為其它定義的通式I化合物。本發(fā)明式I的間二芳烴-多取代苯胺類化合物在抑制HIV復(fù)制的細(xì)胞試驗(yàn)(MT-2和H9淋巴細(xì)胞)中顯示出強(qiáng)的抗HIV活性和高選擇性。因此，對(duì)本發(fā)明化合物進(jìn)行深入研究將有望開發(fā)出新的抗HIV藥物。本發(fā)明化合物既可以其本身也可以其可藥用鹽或溶劑化物的形式使用。式I化合物的可藥用鹽包括與藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸、或者無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿形成的常規(guī)鹽。合適的酸加成鹽的例子包括與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、羥基乙酸、甲酸、乳酸、馬來(lái)酸、酒石酸、檸檬酸、樸酸、丙二酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羥基萘甲酸、氫碘酸、蘋果酸、鞣酸等形成的鹽。合適的堿加成鹽的例子包括與鈉、鋰、鉀、鎂、鋁、鉀、鋅、N,N，-二節(jié)基乙二胺、氯代普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺和普魯卡因等形成的鹽。本文中涉及到本發(fā)明化合物時(shí)，包括式I化合物及其可藥用鹽或溶劑化物。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明式I化合物可與常規(guī)藥用載體或賦形劑組成藥物組合物。該藥物組合物可通過(guò)口服或非腸道途徑給藥。本發(fā)明的藥物組合物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備成各種劑型，包括但不限于片劑、膠嚢、溶液、懸浮液、顆粒劑或注射劑等，經(jīng)口服或非腸道途徑給藥。另外需要指出，本發(fā)明化合物使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營(yíng)養(yǎng)狀況、化合物的活性強(qiáng)度、服用時(shí)間、代謝速率、病癥的嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。優(yōu)選的使用劑量介于0.01~100mg/kg體重/天。具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但其不意味著本發(fā)明僅限于此。制備實(shí)施例1:5-氯-N-(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基苯胺(IV-1)2，4-二氯-1,5-二硝基苯(II-l，1.2g，5mmol)和對(duì)氰基苯胺(III-1，0.59g，5mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF，10mL)。在冷卻于水水浴中分批加入叔丁醇鉀(1.4g，12.5mmol),然后室溫反應(yīng)45分鐘。將反應(yīng)液倒入冰水中，用稀HCl調(diào)pH值至6左右，攪拌30分鐘，析出固體。將固體濾出，水洗至中性，干燥，硅膠柱分離(乙酸乙酯石油醚洗脫)得化合物VI-1(1.44g，90。/。)，淡黃色固體。^NMR(CDCl3)5ppm，7.41(1H，s，ArH-6)，7.57(2H，d，J=8.7Hz，ArH-3，，5，)，7.91(2H，d，J=8.7Hz，ArH-2，，6，)，8.90(1H，s，ArH-3)，10.07(1H，s,NH)。制備實(shí)施例2:5-氯-2，4-二硝基-N-(4，-甲氧基苯基)-苯胺(IV-2)將2，4-二氯-1，5-二硝基苯(II-l，0.5g，2.11mmol)和對(duì)甲氧基苯胺(111-2，0.26g,2.11mmol)溶于5mLDMSO中，加入K2C03(0.58g，4.22mmol)和催化量的金屬Cu，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌、115r反應(yīng)2小時(shí)。倒入水水中攪拌、析出固體。固體被濾出、水洗數(shù)次，干燥，硅膠柱分離(石油醚/乙酸乙酯)，紅褐色固體(IV-2，0.68g，67%)。^NMR(CDC13)5ppm3.88(3H，s，0CH3),7.02(1H，s，ArH-6)，7.03(2H，d，J=8.96Hz，ArH-3，，5，)，7.21(2H，d，J=8.96Hz，ArH-2，，6，)，9.07(1H，s，ArH-3)，9.73(1H，s，NH)。制備實(shí)施例3:5-氯-2，4-二硝基-N-(4，-甲基苯基)-苯胺(IV-3)制備方法同IV-2，產(chǎn)率70%。力NMR6ppm2.08(3H，s，CH3),6.86(2H，d，J=8.12Hz，ArH-3，，5，)，7.03(1H，s，ArH-6)，7.10(2H,d，J-8.12Hz，ArH-2，，6，)，9.16(1H,s，ArH-3),9.71(1H，s，NH)。制備實(shí)施例4:5-氯-N-(4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺(IV-4)制備方法同IV-1，產(chǎn)率63%。力NMR(CDC13)5ppm7.17(lH，d，J=8.9Hz，ArH-5)，7.40(2H，d，J=8.7Hz，ArH-2，，6，)，7.45(1H,s，ArH-3)，7.79(2H，d，J=8.7Hz，ArH-3，，5，)，8.14(1H，d，J=8.9Hz，ArH-6)，9.49(1H，s，NH)。制備實(shí)施例5:5-氯-N-(4，-氰基苯基)-3-硝基苯胺(IV-5)制備方法同IV-1，產(chǎn)率50%。力NMR(CDC13)Sppm6.25(1H，s，ArH-6)，6.78(2H，d，J=8.68Hz，ArH-3，，5，)，7.55(2H，d，J=8.68Hz,ArH-2，，6，)，7.83(1H，s，ArH-2)，8.02(1H，s，ArH-4)。實(shí)施例1:f(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二曱基-4，-溴苯氧基)-2，4-二硝基苯胺(1-1)化合物IV-1(318mg，lmmol)和4-溴-2，6-二甲苯酚(242mg，1.2mmol)溶于DMSO(2mL)中，加入碳酸鉀(276mg，2mmol)，192匸下微波反應(yīng)15分鐘。將反應(yīng)物倒入冰水中，稀鹽酸調(diào)pH至中性，攪拌半小時(shí)，濾出固體，水洗，干燥，硅膠柱分離得淡黃色化合物1-1(410mg，85%)。質(zhì)鐠(EI-MS):m/z(%)483[M+，100];卞NMR(DMSO-夂)5ppm2.05(6H，s，2CH3)，5.93(1H，s，ArH-6)，7.28(2H，d，J=8.7Hz，ArH-3，，5，)，7.42(2H，s，ArH-3"，5")，7.73(2H，d，J=8,7Hz，ArH-2，，6，)，8.96(1H，s，ArH-3)，10.07(1H，s，NH)。實(shí)施例2:^(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二曱苯氧基)-2，4-二硝基苯胺(I-2)制備方法同使中間體IV-1(318.5mg,1mmol)和2，6-二曱基苯酚(146.4mg，1.2mmol)反應(yīng)得產(chǎn)物I-b(327mg，)，產(chǎn)率81%。^NMR(DMS0)52.06(6H，s，2CH3),6.01(1H，s，ArH-6)，7.09(2H，d，/=8.7Hz，ArH-3，，5，)，7.11(1H，t，/=6.7Hz，ArH-4")，7.28(2H，d，/=8.7Hz，ArH-2，，6，)，7.69(2H，d,/=6.7Hz，ArH-3"，5")，8.96(1H，s，ArH-3)，10.07(1H，s，NH)。實(shí)施例3:1-^(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基-5-^(2，，4，，6，-三曱基苯基)-1，5-苯二胺(1-3)將中間體IV-1(318mg，lmmol)，溶于2，4，6-三甲基苯胺(1.5mL),微波反應(yīng)202C，25分鐘。將反應(yīng)物倒入稀鹽酸水液中，攪拌半小時(shí)，濾出沉淀，水洗，干燥，柱分離，得到淺黃色固體化合物I-3(266mg，64%)。質(zhì)鐠(EI-MS):m/z(%):417[M+，100];力NMR(DMS0-《)6ppm2.04(6H,s，2CH3)，2.24(3H，s，4"-CH3)，5.56(1H，s，ArH-6),6.95(2H，s，ArH-3"，5")，7.21(2H，d，J=8.7Hz,ArH-3，，5，)，7,66(2H，d，J=8.7Hz，ArH-2，，6，)，9.02(1H，s，ArH-3)，9.63(2H，2NH)。實(shí)施例4:l-薩(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基-5-[#-乙酰氧-^(2，，4，，6，-三甲基苯基)]-l，5-苯二胺(I-4)將IV-1(64mg，0.2mmol)，53mg(0.3mmol)、2，4，6-三曱基乙酰苯胺(34mg，0.3mmol)叔丁醇鉀，投入3mLDMS0中，200。C下，微波反應(yīng)20分鐘。反應(yīng)液倒入水中，調(diào)節(jié)pH至偏酸性，抽濾出固體，水溶液用乙酸乙酯提取3次，合并有機(jī)相，硫酸鎂干燥。減壓除去乙酸乙酯，粗品用硅膠板分離(氯仿)得到淡黃色產(chǎn)物18mg.產(chǎn)率20%.力纖(DMSO)51.91(3H，s，COCH3)，2.09(6H,s，ArH-2"，6")，2.27(3H，s，ArH-4'，)，6.53(1H，s，ArH-6)，6.99(2H，s，ArH-3"，5'，)，7.55(2H，d，J=8.4Hz，ArH-2，，6，)，7.91(2H，d，J=8.4Hz，ArH-3'，5')，8.71(1H，s，ArH-3)，10.12(1H，s，NH).實(shí)施例5:4-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-2-[舲(4，-氰基苯基)]-5-硝基苯二胺(I-5)將化合物1-1(88mg，0.18mmol)于乙腈(2mL)中，加入少量Pd-C(5-10。/。)和三乙胺(0.06mL)，攪拌下將甲酸的乙腈溶液[36mg(95%)曱酸溶于lmL乙腈中]在冰浴下滴入(約5分鐘)上述混合液中后，迅速加熱至回流20小時(shí)。經(jīng)硅膠板分離(氯仿為展開劑)得到51mg產(chǎn)物I-5，產(chǎn)率62%。力醒R(DMSO-《)52.07(6H，s，2xCH3)，5.13(2H，s，NH2)，6.16(1H，s，ArH-6)，6.82(2H，d，/=8.4Hz，ArH-3，，5，)，7.40(2H，s,ArH-3"，5")，7.55(2H，d，/=8.4Hz，ArH-2，，6，)，7.95(1H，s，ArH-3)，8.45(1H，s，NH)。實(shí)施例6:N-(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-2-硝基苯胺(I-6)中間體IV-4(50mg，0.21mmol)和2，6-二甲基-4-氰基苯酚(37nig,0.25咖o1)溶在二甲基亞砜(2mL)中，加入碳酸鉀58mg(0.42mmol)，密封后于192C微波反應(yīng)15分鐘。反應(yīng)液倒入冰水中，析出沉淀，濾出固體，經(jīng)硅膠柱分離(石油醚/乙酸乙酯)得淡黃色固體1-6(32mg)，產(chǎn)率46%。NMR(CDCU5ppm2.16(6H,s，2xCH3),6.15(1H，q，/=9.2&2.4Hz，ArH-4)，6.87(1H，d，/=2.4Hz，ArH-6),7.31(2H,d，/=8.4Hz，ArH-3，，5，)，7.45(2H，s，ArH-3"，5")，7.66(2H，d，8.4Hz，ArH-2，，6，)，8.21(1H，d，9.2Hz，ArH-3)，9.75(1H，s，NH).實(shí)施例7:N-(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2-硝基苯胺(I-7)使中間體IV-4(50mg，0.18mmol)，2，6-二甲苯酚(31mg，0.25mmol)的碳酸鉀(58mg，0.42mmol)溶于DMAS0(2mL)中，密封后于192C^L波反應(yīng)15分鐘。反應(yīng)液倒入冰水中，析出沉淀，濾出固體，經(jīng)硅膠柱分離(石油醚/乙酸乙酯)得淡黃色固體1-7(20mg)，產(chǎn)率31%。NMR(CDCU<52,12(6H，s，2xCH3),6.35(1H，q,/=9.2&2.4Hz，ArH-4)，6.73(1H，d，/=2.4Hz，ArH-6)，7.10(3H，m，ArH-3"，4"，5")，7.24(2H，d，/=8.4Hz，ArH-2，，6，)，7.59(2H，d，/=8.4Hz，ArH-3，，5，)，8.21(1H，d，/=9.2Hz，ArH-3),9.76(1H，s，NH)。實(shí)施例8:5-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-Ni-(4，-氰基苯基)-1，2，4-苯三胺(I-8)將化合物I-1(48.3mg，0.1mmol)溶于2mL四氫呋喃，將含有7.13mg(0.003mmol)六水氯化鎳的曱醇(1mL)溶液在冰浴下加入四氫呋喃溶液中。水浴攪拌下，將18.9mg(0.5mmol)硼氫化鈉分批加入，15分鐘后將反應(yīng)液倒入水中，調(diào)pH值約6，再攪拌15分鐘，出濾固體。經(jīng)硅膠大板分離(氯仿/曱醇洗脫)得20mg褐色固體產(chǎn)物I-8，產(chǎn)率47°/0。力NMR(DMSO-&)5ppm2.08(6H，s，2xCH3)，4.28(2H，s，NH廣4)，4.91(2H，s，NH廣2)，5.70(1H，s,ArH-3)，6.22(1H，s，ArH-6)，6.43(2H，d，/=8,8Hz,ArH-2，，6，)，7,30(2H，s，ArH-3"，5")，7.38(2H，d，/=8.8Hz，ArH-3，，5，)，7.71(1H，s，腺實(shí)施例9:^(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺(I-9)制備方法同I-l。中間體IV-1和2，6-二甲基-4-氰基苯酚反應(yīng)得到淡黃色固體產(chǎn)物1-9，產(chǎn)率80%。質(zhì)譜(EI-MS):m/z(%)429(M+，100);力讓3ppm2.05(6H，s，2CH3)，5.93(1H，s，ArH-3)，7.32(2H，d，J=8.7Hz，ArH-2，，6，)，7.42(2H，s，ArH-3"，5")，7.73(2H，d，J-8.7Hz,ArH-3，，5，)，8.96(1H，s，ArH-6)，10.07(1H，s，NH)。實(shí)施例10:NL(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-1，2，4-苯三胺(1-10)制備方法同1-8。還原化合物1-9(93mg，0.217mmol)得到產(chǎn)物l-10，12mg，產(chǎn)率15.5%;NMR(DMSO-《)5ppm2.08(6H，s，2xCH3)，4.33(2H，s，NH廣4)，4.97(2H，s，NH廣2)，5.71(1H，s，ArH-3)，6.23(1H，s，ArH-6)，6.43(2H，d，/=8.4Hz，ArH-2，，6，)，7.38(2H，d，/=8.4Hz，ArH-3，，5，)，7.61(2H，s，ArH-3"，5"),7.71(1H，s，NH)。實(shí)施例11:5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-y-(4，-氰基苯基)]-4-硝基-1，2-苯二胺(1-11)制備方法同1-5?；衔颕-9(37mg，0,086mmol)經(jīng)還原得到產(chǎn)物I-11，13mg，產(chǎn)率38%。卞NMR(DMSO-《)5ppm2.07(6H，s，2xCH3)，5.17(2H，s，NH廣2)，6.15(1H，s，ArH-6)，6.81(2H，d，/=8.8Hz，ArH-2，，6，)，7.55(2H，d，/=8.8Hz，ArH-3，，5，)，7.71(2H，s，ArH-3",5")，8.06(1H，s，ArH-3)，8.45(1H，s，NH)。實(shí)施例12:5-(4，-溴-2，，6，-二曱苯氧基)-f(4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺(1-12)制備方法同I-l。j吏IV-4(100mg，0.36mmol)與2，4-二甲基-3-溴苯酚鉀偶合得到1-12產(chǎn)物147mg，產(chǎn)率93%。NMR(CDC13)5ppm2.03(6H，s，2xCH3)，6.19(1H,q，J=9.3&2.5Hz，ArH-6)，6.74(1H，d，J=2.5Hz，ArH-4)，7.21(2H，d，J-8.8Hz，ArH-2，，6，)，7.30(2H,s，ArH-3"，5")，7.57(2H，d，J=8.8Hz，ArH-3，，5，)，8.13(1H，d，J=9.3Hz，ArH-3)，9.69(1H，s，冊(cè))。實(shí)施例13:4-(4，-溴-2，，6，-二曱苯氧基)-#-(4，-氰基苯基)〗-l，2-苯二胺(1-13)制備方法同1-8?；衔?-12(89mg，0.2mmol)經(jīng)還原得到21mg產(chǎn)物1-13，產(chǎn)率26%。NMR(DMS0-《)5ppm2.07(6H，s，2xCH3)，4.55(NHr活潑氬),6.34(1H，s，ArH-6)，6.47(1H，d，/=8.8Hz，ArH-4)，6.65(2H，d，/=8.8Hz，ArH-2，，6，)，6.73(1H，d，/-8.8Hz,ArH-3)，7.34(2H，s,ArH-3"，5")，7.49(2H，d，7-8.8Hz，ArH-3，，5，)，8.08(1H，s，NH)。實(shí)施例14:薩(4，-氰基苯基)-5-(2，，4，，6，-三甲苯氧基)-2,4-二硝基苯胺(1-14)制備方法同I-l。IV-1(637mg,2mmol)與2，4，6-三曱基苯胺(286mg，2.1mmol)在無(wú)水碳酸鉀(414mg，3mmol)存在下反應(yīng)得到1-14，580mg，產(chǎn)率70%，熔點(diǎn)132匸。NMR(DMS0-d6)5ppm2.00(6H，s，2xCH3-2，，，6")，2.22(3H，s，CH廣4")，5.92(1H，s，ArH-6)，6.95(2H，s，ArH-3"，5")，7.27(2H，d，/=8.7Hz，ArH-2，，6，)，7.72(2H，d，/=8.7Hz，ArH-3，，5，)，8.95(1H，s，ArH-3)，10.04(1H，s，NH)。實(shí)施例15:5-(2，，6'-二甲苯氧基)-2，4-二硝基-^(4'-曱基苯基)苯胺(1-15)未經(jīng)純化的中間體IV-3在氮?dú)獗Ｗo(hù)下直接加入2，6-二甲基苯酚(622mg，5.1mmol)，升溫至125匸反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)液倒入冰水中攪拌20分鐘，有固體析出，抽濾出固體，水洗，干燥，硅膠柱分離(洗脫劑為石油醚乙酸乙酯)得到淡黃色固體884mg，產(chǎn)率45%。^醒R(DMS0-5ppm2.06(6H，s，3CH3)，5.91(1H，s，ArH-3)，6.7(2H，d，/=8.12Hz，ArH-2，，6，)，7.11(1H，t，/=6.7Hz，ArH-4")，7.20(2H，d，/=8.12Hz，ArH-3，，5，)，7.69(2H，d，/=6.7Hz，ArH-3"，5"),8.96(1H，s,ArH-6),9.70(1H，s，NH)。實(shí)施例16:5-(4，-溴-2，，6，-二曱苯氧基)-2，4-二硝基-^(4，-甲基氧苯基)苯胺(1-16)制備方法同1-1。IV-2(647mg，2mmo1)和4-溴-2，6-二甲基苯酚(422mg，2.lmmol)反應(yīng)得I-16，517mg，淡黃固體，產(chǎn)率53。/。？HNMR(CDC13)5ppm2.07(6H，s，2CH3)，3.78(3H，s，0CH3)，5.91(1H,s，ArH-3)，6.75(2H，d，/=8.96Hz，ArH-2，，6，)，6.89(2H，d，/=8.96Hz，ArH-3，，5，)，7.34(2H，s，ArH-3"，5")，9.17(1H，s，ArH-6)，9.68(1H，s，NH)。實(shí)施例17:薩(4，-氰基苯基)-5-(2，，6-二曱苯氧基)-3-硝基苯胺U-17)置IV-5(43mg，0.15mmol)、2，6-二甲基苯酚(49mg，0.60mmol)和碳酸鉀(42mg，0.3mmol)于2mLDMSO中，微波、200X:反應(yīng)30分鐘。反應(yīng)液倒入水中，調(diào)節(jié)pH至偏酸性，過(guò)濾出固體，水洗.干燥后。用硅膠板分離(石油醚乙酸乙酯)得到淡黃色固體5mg.產(chǎn)率10%。H腿(CDCU5ppffl2.18(6H，s，2xCH3)，6.31(1H，s，ArH-6)，6.69(2H,d，J-4.2Hz，ArH-3",5")，6.88(1H，t，J-4.2Hz，ArH-4")，7.08(2H，d，J=8.8Hz，ArH-2'，6，)，7.11(2H，s，ArH-2，4)，7.54(2H，d，J=8.8Hz，ArH-3'，5')。實(shí)施例18:舲(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰基-2，，6-二曱苯氧基)-2，4-二硝基苯胺(1-18)1-1(48.3mg,0.1mmol)、丙烯腈(53mg，1mmol)、醋酸把(4.5mg，0.02mmol)和三苯基膦(26.2mg，0.1mmol)在三乙胺中，微波反應(yīng)30分鐘.將反應(yīng)液倒入水中，乙酸乙酯萃取.硫酸鎂干燥.減壓除去溶劑，粗產(chǎn)物用硅膠板分離(二氯甲烷)，得到6mg黃色固體產(chǎn)物1-18，產(chǎn)率13.2%。屮NMR(CDC13)5ppm2.18(6H，s，2xCH3)，5.86(1H，d，J-16.4Hz，靠近氰基的烯氫)，6.26(1H，s，ArH-6)，7.12(2H，d，J=8,8Hz，ArH-2'，6，)，7.21(2H，s，ArH-3"，5"),7.32(1H，d，J-16.4Hz,靠近苯環(huán)的烯氫)，7.55(2H，d，J=8.8Hz，ArH-3，，5')，9.19(1H，s，ArH-3)，9.97(1H，s，NH).實(shí)施例19:/-(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰-'2，，6-二曱苯氧基)-4-硝基-l，2-二苯胺(1-19)1-5(45mg,0.1mmol)、丙烯腈(53mg，1mmol)、醋酸4巴(4.5mg，0.02mmol)和三苯基膦(26mg，0.1mmol),在三乙胺(4mL)和DMF(2mL)中，氮?dú)獗Ｗo(hù)，回流25小時(shí)。反應(yīng)液倒入水中，調(diào)節(jié)pH至偏酸性，抽濾出固體。水洗干燥后用硅膠大板分離(石油醚乙酸乙酯)得到10mg固體產(chǎn)物1-19，產(chǎn)率23%。質(zhì)譜(EI-MS)m/z(%)426{[M+H]+，100};力腿(CDC13)5ppm2.18(6H，s，2xCH》，3.55(2H，s，NH2)，5.82(1H，d，J-16.8Hz，與氰基在同一碳的烯氫)，6.31(1H，s，ArH-6)，6.76(2H，d，J-8.68Hz，ArH-2'，6，)，7.20(2H,s，ArH-3"，5")，7.32(1H，d,J-16.8Hz，與氰基不在同一碳的烯氫)，7.47(2H，d，J=8.68Hz，ArH-3'，5')，7.63(1H，s，ArH-3)。實(shí)施例20:滬(4，-氰基苯基)-5-{2，，6，-二甲-4，-[2"-(5"-甲酰呋喃)]苯氧基}-2，4-二硝基苯胺(1-20)V-l(96.6mg,0.2m邁ol)、5-甲?；?2-硼酸呋喃(56mg，0.4mmo1)、醋酸4巴(4.5mg,0.02mmol)、三苯基膦(15.7mg，0.06mmol)和碳酸銫(197mg，0.6mmol)在3mLDMF中，微波、80匸反應(yīng)20分鐘。反應(yīng)液倒入水中，調(diào)節(jié)pH至酸性，過(guò)濾出固體，水洗千燥后，用硅膠大板分離(石油醚氯仿)得到50邁g淺綠色固體產(chǎn)物1-20，產(chǎn)率50%。熔點(diǎn)198匸JH醒R(CDCh)5ppm2.18(6H，s，2xCH》6.28(1H，s，ArH-6)，6.85(1H，d，J=3.9Hz，呋喃環(huán)上近苯環(huán)的氫)，7.10(2H，d,J=8.8Hz，ArH-2'，6')，7.36(1H，d,J=3.9Hz,呋喃環(huán)上臨近甲?；臍?，7.50(2H，d，J=8.8Hz,ArH-3'，5，)，7.59(2H，s，ArH-3"，5")，9.20(1H，s，ArH-3)，9.67(1H，s，CH0)，9.94(1H,s,NH)。實(shí)施例21:抗HIV活性試驗(yàn)(H9細(xì)胞模型)參照文獻(xiàn)(/.2004，47,756-760)。淋巴細(xì)胞H9在培養(yǎng)液1640，5%C02，37°C的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。被測(cè)試化合物最初被溶解于DMSO中，隨后用培養(yǎng)液稀釋至常規(guī)篩選濃度100，20，4，0.8pg/mL。培養(yǎng)好的H9細(xì)胞被分為兩部分，其中一部分用HIV病毒(IIIB)(m.i.o.0.1~0.01infectiousUnits/cell)感染，為測(cè)活性所用。另一部分細(xì)胞不加病毒，只加培養(yǎng)液，為測(cè)毒性所用。兩部分的細(xì)胞在完全相同的條件下(37°C，5%(:02)培養(yǎng)4小時(shí)之后，用新鮮的培養(yǎng)液洗3次，將兩部分細(xì)胞分別加入到配制好的不同濃度的測(cè)試樣品中或是完全的培養(yǎng)液中(后者為陽(yáng)性感染對(duì)照或陰性藥物對(duì)照)，同時(shí)用AZT作陽(yáng)性藥對(duì)照。所有這些細(xì)胞在5%C02，37。C條件下培養(yǎng)4天。在第4天將受病毒感染的細(xì)胞先除去細(xì)胞膜，胞液用P24抗原ELISA方法測(cè)定樣品的活性，用ECs。來(lái)表示。ECs。為抑制病毒復(fù)制50%時(shí)的有效濃度。未加病毒部分的細(xì)胞通過(guò)數(shù)細(xì)胞的方法來(lái)確定測(cè)試樣品的毒性，用CCs。來(lái)表示。CCs。為殺死生長(zhǎng)細(xì)胞50。/。時(shí)的濃度。實(shí)施例22:抗HIV活性試驗(yàn)(MT-2細(xì)胞模型)參照、文獻(xiàn)(Jiang,S.，efa/.lof/邊/cro6.Jge/7tsC力e/z70f力er.2004，48，4349-4359).在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，將50jul不同濃度的化合物溶液與等體積的HIV-1,病毒林(100TCID5。)混合，于37匸溫育30分鐘，然后加入100ju1MT-2細(xì)胞(1x105/ml，含10%血清的RPIM1640培養(yǎng)液)，混合均勻，37X:溫育過(guò)夜。第2天吸去150jul上清液，補(bǔ)入等體積新鮮培養(yǎng)液，37X:繼續(xù)溫育3天，于第四天記錄細(xì)胞病變(CPE)效應(yīng)。然后吸取100nl的培養(yǎng)上清夜，用5%的TritonX-100裂解病毒顆粒，采用ELISA方法檢測(cè)其中p24抗原。簡(jiǎn)言之，用HIVIG(2|jg/ml)包被酶標(biāo)板，再用1%的無(wú)脂牛奶封閉，先后加入病毒裂解液，37C溫育60分鐘。在充分洗板之后，先后加入抗p24單抗-183-12H-5C，生物素標(biāo)記的羊抗鼠抗體及卵白素標(biāo)記的辣根過(guò)氧化物酶。然后用TMB顯色，在450nm處檢測(cè)光密度。用CalcuSyn軟件計(jì)算化合物的半數(shù)病毒抑制濃度(EC5。)。實(shí)施例23:化合物的細(xì)胞毒性試驗(yàn)參l、文獻(xiàn)(Jiang,S.，efa7.In〃'邁/cr06.C力e邊of力e二2004，48,4349-4359).在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，將50jul不同濃度的化合物溶液與等體積的PBS混合，于37C溫育30分鐘，然后加入100|u1MT-2(或H9)細(xì)胞(1x105/ml,含10%血清的RPIM1640培養(yǎng)液)，混合均勻，37"C溫育過(guò)夜。第2天吸去150ju1上清液，補(bǔ)入等體積新鮮培養(yǎng)液，371C繼續(xù)溫育3天后，于第四天加入50yl新鮮配制的含PMS的XTT溶液(lmg/ml)，4h后檢測(cè)450nm處的光密度。用CalcuSyn軟件計(jì)算化合物的半數(shù)細(xì)胞毒性濃度(CC5。)。部分生物評(píng)價(jià)結(jié)果列于表1。表1抗HIV活性試驗(yàn)數(shù)據(jù)(H9和MT-2細(xì)胞)<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>'SI:化合物的選擇性指數(shù)，為毒性CCs。值與活性EC5。值之比。已有的結(jié)果表明本發(fā)明式I化合物是一類具有新型骨架結(jié)構(gòu)的抗HIV活性化合物。由于該類化合物的分子柔性比較好，因此，本發(fā)明涉及的化合物極有可能對(duì)HIV耐藥性病毒林有強(qiáng)抑制活性，有可能發(fā)展成為一類具有新型結(jié)構(gòu)的抗HIV新藥。權(quán)利要求1.式(I)化合物或其可藥用鹽其中，R1，R2和R3各自獨(dú)立地為-H、鹵素、-NO2、-NH2、-NHR、-N(R)2、-CN、-OH、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-CF3、-COOH、-SO3H、-CONH2、-CONHR’或-COOR’，或者，R1和R2或R2和R3可以一起形成-OCH2O-；R4為-CN、-CH＝CH2、-C≡CH、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-CF3、鹵素、-NH2、-OH、-COOH、-SO3H、-C≡CR’或-CH＝CHR’；R5和R6各自獨(dú)立地為鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-CF3、-NH2、-OH、-COOH、-SO3H或-COOR’；R7為-CN、-HC＝CH-CN、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-NH2、-OH、-NO2、-CF3、-CH＝CH2、-C≡CH、-C≡CR’、-CH＝CHR’、-CH＝CHCOR’、CHO、含1-3個(gè)選自N、O、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、α，β不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R’為H或C1-6烴基；X-NH-、-O-、-S-、-CH2-、-CO-、-CHOH-、-CHOR-、-NR-、-NCOR-；并且R為C1-4烴基。2.權(quán)利要求1的化合物，其中X為-0-。3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中式I化合物具有如下的式Ia:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>R,和R3各自獨(dú)立地為-N02、-NH2、卣素、-OH、-CN或-N(R)2;R2為-H;R為-CN、-HC=CH-CN、卣素、-CH3、-0CH3、-NH2、-0H、-N02、-CF"-CH=CH2、-feCH、-C5CR，、-CH-CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，P不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d-6烴基；X為-O-、-NH-或-NCOR-;并且R為Cw烴基。4.權(quán)利要求1或2的化合物，其中式I化合物具有如下的式la:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>Ri為-冊(cè)2、-NH2、面素、-OH、-CN或-N(R)2;R2和R3為-H;R7為-CN、-HC-CH-CN、囟素、-CH3、-OCH3、-NH2、-0H、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-CsCR'、-CH-CHR'、—CH=CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，(3不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d_6烴基；X為-0-、-NH-或-NCOR-;并且R為Ch烴基。5.權(quán)利要求1或2的化合物，其中式I化合物具有如下的式Ia:112為-冊(cè)2、-NH2、-鹵素、—0H、-CN或-N(R)2;Ri和R3為H;R為-CN、-HC=CH-CN、卣素、-CH3、-0CH3、-NH2、-OH、-N02、-CF3、-CH=CH2、-C=CH、-C=CR，、-CH=CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或Ch烴基；X為-0-、-NH-，-NC0R-;并且R為Ch烴基。6.權(quán)利要求1或2的化合物，其中式I化合物具有如下的式la:R3為-N。2、-NH2、-鹵素、-0H、-CN或-N(R)2;Ri和R2為H;R7為一CN、—HC-CH-CN、卣素、-CH3、-0CH3、—匪2、一0H、-N02、-CF3、-CH=CH2、-CsCH、-CsCR，、-CH-CHR，、-CH-CHCOR，、-CHO、含1-3個(gè)選自N、0、S的雜原子的五元雜芳基，并任選在其環(huán)結(jié)構(gòu)上帶有醛基、酮基、氰基、a，p不飽和氰、烯、炔、醛基或酮基取代；R，為H或d-6烴基；X為-0-、-NH-，-NCOR-;并且R為Ch烴基。7.權(quán)利要求l的化合物，其選自^(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲基-4，-溴苯氧基)-2,4-二硝基苯胺；^(4，-氰基苯基)-5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；l-薩(4，-氰基苯基)-2，4-二硝基-5-^(2，，4，，6，-三甲基苯基)-l，5-苯二胺；1-^(4，-氰基苯基)-2,4-二硝基-5-[7V-乙酰氧-^"(2，，4，，6，-三甲基苯基)]-l，5-苯二胺；4-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-2-[f(4'-氰基苯基)]-5-硝基苯二胺；N-(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)-2-硝基苯胺；N-(4，-氦基苯基)-5-(2，，6，-二甲苯氧基)-2-硝基苯胺；5-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-NL(4，-氰基苯基)-l，2，4-苯三胺；薩(4'-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二曱苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；N^(4，-氰基苯基)-5-(4，-氰基-2，，6，-二曱苯氧基)-1，2，4-苯三胺；5-(4，-氰基-2，，6，-二甲苯氧基)(4，-氰基苯基)]-4-硝基-l，2-苯二胺；5-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)-薩(4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺；4-(4，-溴-2，，6，-二甲苯氧基)(4，-氰基苯基)]-1，2-苯二胺；舲(4'-氰基苯基)-5-(2，，4，，6，-三甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；5-(2，，6'-二甲苯氧基)-2，4-二硝基-^(4，-甲基苯基)苯胺；5-(4，-溴-2，，6，-二甲苯ltJ0-2，4-二硝基-^(4，一甲基氧^i0絲；薩(4，-氰基苯基)-5-(2，，6-二甲苯氧基)-3-硝基苯胺；滬(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰基-2，，6-二甲苯氧基)-2，4-二硝基苯胺；^-(4，-氰基苯基)-5-(4，-丙烯氰-'2，，6-二甲苯氧基)-4-硝基-1，2-二苯胺；和^(4，-氰基苯基)-5-{2，，6，-二甲-4，-[2"-(5"-甲酰呋喃)]苯氧基}-2，4-二硝基苯胺。8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物的制備方法:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R廣R7和X的定義同權(quán)利要求1所述，所述方法包括使式II取代的間二卣苯在強(qiáng)堿的作用下與對(duì)位取代苯胺類化合物反應(yīng)生成式IV的N-芳基取代苯胺；然后使式IV中間體與多取代酚或苯胺類化合物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，或在鈀類催化劑作用下加熱或在微波條件下偶聯(lián)生成具有式I的間二芳烴多取代苯胺。9.藥物組合物，其包含權(quán)利要求l-7任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽以及一種或多種藥用載體或賦形劑。10.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽用于制備治療與HIV感染的疾病或病癥的藥物的用途。全文摘要本發(fā)明涉及具有抗HIV活性的間二芳烴-多取代苯胺類化合物或其可藥用鹽、其中X、R₁-R₇的定義見權(quán)利要求書，其制備方法、含有它們的藥物組合物及其用于制備抗HIV的藥物的用途。文檔編號(hào)C07C255/59GK101407476SQ200710163958公開日2009年4月15日申請(qǐng)日期2007年10月12日優(yōu)先權(quán)日2007年10月12日發(fā)明者姜世勃,李國(guó)雄,秦炳杰,藍(lán)謝,虹陸申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所