專利名稱：：落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的工藝的改進。
背景技術：
：二氫化槲皮素(taxifolin)屬生物類黃酮(bioflavonoids)擬維生素P。也稱紫杉葉素、花旗松素、黃杉素。[dihydroquercetin;2-(3，4-dihydroxyphenyl)畫2，3國dihydro-3，5，7-trihydroxy-4H隱denzopyran國4-one]，分子式C15H1207，分子質量304.3。二氫化槲皮素是諾貝爾獎金獲得者，生物學家圣杰爾季發(fā)現(xiàn)的，落葉松萃取物二氫化槲皮素，細顆粒結晶或無定型狀粉末，呈白色、淡黃色，無異味，無特別口味，是天然的抗氧化劑，具有多種生物活性。隨著新品種的不斷開發(fā)，二氫化槲皮素已應用于醫(yī)藥、食品、化妝品、工業(yè)、農(nóng)業(yè)植物生長調節(jié)等領域。二氫化槲皮素應用非常廣泛，但由于生產(chǎn)原料、提取工藝的不同，在歐美市場二氫化槲皮素產(chǎn)品價格非常昂貴，每克200-1000歐元。這樣的市場價格，在經(jīng)濟上限制了其廣泛的實用性。如選用落葉松為萃取原料，采用本工藝提取，將大幅度降低其生產(chǎn)成本，每克0.5歐元左右。
發(fā)明內容本發(fā)明選用落葉松為萃取原料，利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的騷動效應、空化效應和熱效應來加速二氫化槲皮素擴散溶解。上述的目的通過以下的技術方案實現(xiàn)一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是原料預處理，取落葉松木屑和乙醇溶液加入到提取機中充分攪拌混合，兩者的加入量為落葉松木屑50公斤、50%乙醇溶液500800升，進行提取，過濾，經(jīng)第二次提取，合并濾液，萃取，收集有機溶液，用真空蒸發(fā)器減壓蒸餾有機相至干，按重量份數(shù)10:l用熱水溶解殘留物，用活性炭脫色，在3-5'C溫度下結晶，析出二氫化槲皮素產(chǎn)品，再經(jīng)真空干燥、粉碎為成品。一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的原料預處理是選落葉松根莖部分，原料鋸段，去皮，加工成木屑。一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的提取是將原料加入到提取機中，開啟反應釜，利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的騷動效應、空化效應和熱效應來加速物質的擴散溶解，35分鐘后，關閉超聲器。一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的萃取是在溫度為30'C50'C的條件下，將濾液用甲基叔丁基醚與濾液按l:10進行萃取兩次，萃取時間為l小時。這個技術方案有以下有益效果1.本方法制備的二氫化槲皮素是天然的抗氧化劑，能消除人體的自由基，抗衰老、抗輻射、抗病毒，抑制細胞產(chǎn)生病變，阻礙細胞老化及各種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程。自由基是引發(fā)衰老、心血管、腫瘤等退變性疾病的根源。理化等致癌因子使體內產(chǎn)生自由基，集于脂質細胞膜的周圍，引發(fā)脂質過氧化。使細胞的DNA受到破壞而致癌。二氫化槲皮素可抑制癌細胞生長所必需的酶系統(tǒng)蛋白激酶C，阻滯了病變細胞增值，同時抑制癌細胞DNA合成的活化因子。對耐藥細胞也有功效，改善冠狀動脈血流量，增強心肌的收縮力、應激性，治療缺血性心臟病，心絞痛，心律不齊，心肌梗塞等。2.本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素有消炎功效，防治炎癥的機制在于抑制了前列腺素(PG)生物合成過程中的脂氧化酶(LOX)。對風濕、膿毒性內膜炎、急性肺炎、慢性支氣管炎、支氣管哮喘有治療功效。3.本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素能預防病毒及毒素對肝臟的損害，對急慢性肝炎、肝硬化、脂肪肝以及因半乳糖胺和CC14等引起的中毒性肝損傷均有治療功效。對CC14所致肝臟丙二醛(MDA，肝脂質過氧化物)含量的增高有明顯的抑制作用?？蓽p輕肝損傷對谷光甘肽(GSH)的消耗。能夠保護肝細胞機構的完整性，防止肝細胞中的轉氨酶等可溶性酶因從細胞中漏出而活性升高。護肝機制在于它的強抗氧化和抗自由基的作用。4.本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素能增強機體的非特異免疫功能和體液免疫功能。增加T細胞百分率、胸腺指數(shù)、脾特異玫瑰花形成細胞(SRFC)，能拮抗環(huán)麟酰胺引起的(SRFC)減少，在低濃度時促進淋巴細胞轉化，高濃度時抑制淋巴細胞轉化，從而提高肌體的免疫功能。它能將過敏原從人身體里清除并提高身體對過敏原的抵抗力。5.糖尿病因胰島分泌胰島素失調引起血糖升高，高血糖又引起多元醇代謝同路異?？哼M導致糖尿病并發(fā)癥，醛糖還原酶在多醇代謝途徑中是一關鍵酶，它使多種醛還原，引起糖尿病并發(fā)癥。本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素能促進胰島e細胞的恢復，降低血糖和血清膽固醇，改善糖耐量，對抗腎腺素的生血糖作用，抑制醛糖還原酶，因此可以治療糖尿病及其并發(fā)癥。它還能提高男性、女性生殖能力，促進性腺機能，補腎壯陽。6.食品在儲存過程中，由于水解、氧化等情況，不僅僅降低了食品的質量，還能使食品具有毒性作用。為解決這個問題，食品工業(yè)經(jīng)過多，嘗試了不同種類的抗氧化劑，化學合成，天然的。，很明顯，隨著科學的不斷發(fā)展進步，選擇天然的抗氧化劑，已成為人們首選的對象。本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素在生物類黃酮中，有著明顯的生物活性和強抗氧化性，有效的阻礙自由基脂質的氧化。使含油脂成分的食品保存期延長3-4倍。達到長期保鮮食品的目的，是綠色的防腐劑和保鮮劑。對白酒、啤酒、白蘭地、果酒加入二氫化槲皮素，酒呈軟綿性，增加爽口的感覺，可以改善酒的品質，尤其清除醉酒后引起的頭痛、胃腸不適等不舒服的感覺，起著防止酒精中毒的效果，對肝臟有保護治療作用。7.本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素用于化妝品，對皮膚有治療作用，使皮膚骨膠脘、彈性硬蛋白綜合正?；迯?、再生皮膚細胞。消除痤瘡和膿包斑疹，保護皮膚彈性，消除皺紋，減慢人體衰老老化的速度。8.本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素是工業(yè)中的抗氧化劑、穩(wěn)定劑、抗震劑。是燃料、油、漆類存儲時間的延長及穩(wěn)定劑。是發(fā)動機原料和噴氣(火箭)原料、碳氫化合物原料的穩(wěn)定劑、抗震劑。9.利用本發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素制成的，純天然高效植物防病、增產(chǎn)植物藥劑，因其無毒性、無致敏性。植物體和土壤內無殘留，自然生物過程3-5天。用于蔬菜、水果、糧食等作物。由于提高了植物生長活性，產(chǎn)量可增加10%-30%,降低了細菌、真菌的發(fā)病率2-5倍，改善了種子和果實的質量，增強植物的耐寒與耐旱性，減少了農(nóng)作物的成熟期。10.發(fā)明方法制備的二氫化槲皮素能維護細胞、膜片等人體組織器官，強固血管壁及毛細血管，降壓、抗菌，調節(jié)血管滲透壓的作用。改善微循環(huán)，抑制因營養(yǎng)不良對眼睛及皮硬化癥所引起的病變。調節(jié)血脂，防止低密度脂蛋白(LDL)氧化的作用，對主動脈內皮細胞腺苷脫氨酶有抑制作用，可防治動脈粥樣硬化。11.本發(fā)明提供的從落葉松中萃取二氫化槲皮素的工藝，生產(chǎn)過程是在低溫3(TC5(TC，其過程節(jié)省能源，生產(chǎn)過程沒有破壞其天然結構，保障了其生物活性不被破壞，縮短生產(chǎn)周期，簡化了分離工藝，提高了分離效率，產(chǎn)率高。減少成本，適合工業(yè)化生產(chǎn)。12.本發(fā)明采用天然的、資源豐富的中國北方大小興安陵地區(qū)的落葉松為原料。其原料成本低廉，生產(chǎn)周期小。產(chǎn)品出率高，生物活性高。副產(chǎn)品木屑可加工成木炭、活性炭和密度板。松脂可加工成松香、松節(jié)油、和樹膠等。充分的利用了原料，沒有造成浪費。13.生物類黃酮因其結構和來源的不同，溶解特性差異也很大，有水溶性，又有脂溶性的?？筛鶕?jù)其極性和水溶性的大小選擇合適的溶劑進行提取，本發(fā)明選用落葉松為萃取原料，利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的騷動效應、空化效應和熱效應來加速二氫化槲皮素擴散溶解，空化產(chǎn)生的極大壓力使得植物細胞壁及整個植物體在瞬間被破碎，并引起湍動效應、微擾效應、界面效應和聚能效應，其中湍動效應和機械效應使傳質邊界層減薄，增大傳質速率，熱效應加快了類黃酮分子擾動。從而能整體上提高提取過程的傳質速率和效果，起到了輔助提取類黃酮的效果。本發(fā)明采用該技術，具有提取時間短、提取率髙、成本低、節(jié)省能耗量、污染小的特點，容易實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。采用有機溶液量少，保障產(chǎn)品質量，單體純度高90%-98%。14.甲基叔丁基醚作為二次萃取劑，乙醇溶于水，而甲基叔丁基醚在水中的溶解度低，水幾乎不不溶于甲基叔丁基醚，有利于二氫化槲皮素單體的提取，去除其他成分的化合物。利用活性炭脫色和吸附雜質，能夠制得高純度的二氫化槲皮素產(chǎn)品。附圖l為本發(fā)明工藝的流程圖。本發(fā)明的具體實施例方式實施例l:落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備工藝是選落葉松根莖部分，原料鋸段，去皮，加工成木屑，稱取50克的落葉松木屑，置于恒溫超聲提取機中。用量筒量取500800ml的50%乙醇溶液加入到提取機中與落葉松木屑充分攪拌混合。開啟超聲反應釜，利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的騷動效應、空化效應來加速物質的擴散溶解，35分鐘后，關閉超聲器，混合物呈現(xiàn)黃棕色略帶油狀混濁液，過濾，經(jīng)兩次提取，合并濾液。用甲基叔丁基醚對濾液在溫度為3(TC5(TC的條件下，按l:IO進行萃取兩次，收集有機溶液。用真空蒸發(fā)器減壓蒸餾有機相至干。分離出的有機溶液、水溶液保存?zhèn)溆?。?0:1用熱水溶解殘留物，用活性炭脫色。在3-5'C溫度下結晶，析出二氫化槲皮素產(chǎn)品。再經(jīng)真空干燥、粉碎為成品。在提取二氫化槲皮素的過程中，受到很多因素的影響。其中，落葉松木屑質量與乙醇溶液之比、超聲波時間、濾液萃取劑量比、萃取時間、萃取次數(shù)和PH值是主要的影響因素。經(jīng)過多次實驗和得到的產(chǎn)品的質量，進而確定了落葉松中提取二氫化槲皮素的最佳工藝路線。反應釜恒溫30-50'C下進行。改變固液比例，其他條件不變進行對比實驗結果:<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從表圖可以看出，固液比越大，二氫化槲皮素的提取率越高。只是固液比的不斷增大，到一定值后，即1/12提取率將不會明顯增加，因此選1/12的固液比為最佳。2.改變超聲時間，其他條件不變進行對比實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從表圖可以看出，超聲時間的延長，二氫化槲皮素的提取率越高。只是超聲時間的不斷延長，到一定值后即45分鐘，提取率將不會明顯增加，因此選擇35-45分鐘為最佳。3.改變萃取劑用量比例，其他條件不變進行對比實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從表圖可以看出，萃取劑量越大，二氫化槲皮素的提取率越高。只是萃取劑量的不斷增大，到一定值后，提取率將不會增加。因此選擇i/io的萃取劑用量為最佳。4.改變萃取時間，其他條件不變進行對比實驗結果萃取時間固液比超聲時間萃取劑用量萃取次數(shù)PH值萃取率％<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表圖可以看出，萃取時間越長。二氫化槲皮素的提取率越高。只是萃取時間延長到一定值后，提取率將不會增加。因此選擇1小時萃取時間為最佳。5.改變萃取次數(shù)，其他條件不變進行對比實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表圖可以看出，萃取次數(shù)越多，二氫化槲皮素的提取率越高。只是萃取次數(shù)不斷增多，到一定值后，提取率將不會增加。因此選擇萃取次數(shù)2次為最佳。6.PH值萃液的酸堿性可以用飽和碳酸鈉溶液進行調節(jié)，選擇PH值為5-6之間。從落葉松中提取二氫化槲皮素的過程中主要參數(shù)固液比為1/12,萃取溫度為30-50'C,超聲時間為35分鐘，萃取劑之比為1/10，萃取時間為l小時，萃取次數(shù)為2次，PH值為5-6。實施例3:1.產(chǎn)品的理化指標外形粉末狀顏色白色-淡黃色氣味無異味口感無特別口感溶解度0.001毫克/公斤水水分《8純度》90%熔點230°C礦物質《032.熔點對比由熔點測定儀做對比。3.紅外光譜檢測由紅外光譜檢測儀檢驗產(chǎn)品二氫化槲皮素。4.對產(chǎn)品的液相色譜檢測將對照標準品二氫化槲皮素0.1克放入干燥箱中120'C烘干。然后溶解于10毫升的丙酮溶液當中。將700毫升2%的醋酸溶液加入300毫升的丙酮溶液中，攪勻。將2%的醋酸溶液19毫升填加入容量一升的計量燒杯內，加蒸餾水到一升，攪勻。將10毫克樣品二氫化槲皮素和10克的正硝基苯酚溶入到10毫升的丙酮溶液中，攪勻。將2毫升的溶液注入到有紫外線檢測儀的液態(tài)色譜儀中，進行色譜分析:擁一注64mmX2.0mm吸附劑分離C180波長分析290nm流動相位丙酮溶液在2%的醋酸中(3:7循環(huán))流動相位速度100亳克/分鐘色譜計時10分鐘色譜中頂峰面積可用電子積分儀分析確定。測量二氫化槲皮素的頂峰面積。二氫化槲皮素含量等于(B2XA1X10/B1XA2X10)X100%Al二氫化槲皮素在色譜實驗樣品中的頂峰面積。A2二氫化槲皮素在標準樣品溶液中的頂峰面積。Bl試驗樣品的質量，單位克B2標準品二氫化槲皮素的質量，單位克<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>二氫化槲皮素的含量不低于90%。權利要求1.一種落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是原料預處理，取落葉松木屑和乙醇溶液加入到提取機中充分攪拌混合，兩者的加入量為落葉松木屑50公斤、50％乙醇溶液500～800升，進行提取，過濾，經(jīng)第二次提取，合并濾液，萃取，收集有機溶液，用真空蒸發(fā)器減壓蒸餾有機相至干，按重量份數(shù)10∶1用熱水溶解殘留物，用活性炭脫色，在3-5℃溫度下結晶，析出二氫化槲皮素產(chǎn)品，再經(jīng)真空干燥、粉碎為成品。2.根據(jù)權利要求1所述的落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的原料預處理是選落葉松根莖部分，原料鋸段，去皮，加工成木屑。3.根據(jù)權利要求1或2所述的落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的提取是將原料加入到提取機中，開啟反應釜，利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的騷動效應、空化效應和熱效應來加速物質的擴散溶解，35分鐘后，關閉超聲器。4.根據(jù)權利要求1或2所述的落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法，其特征是所述的萃取是在溫度為3(TC5(TC的條件下，將濾液用甲基叔丁基醚與濾液按l:IO進行萃取兩次，萃取時間為l小時。全文摘要落葉松中萃取二氫化槲皮素的制備方法。本發(fā)明是生產(chǎn)方法的改進。由于生產(chǎn)原料、提取工藝的不同，在歐美市場二氫化槲皮素產(chǎn)品價格非常昂貴，每克200-1000歐元。這樣的市場價格，在經(jīng)濟上限制了其廣泛的實用性。原料預處理，取落葉松木屑和乙醇溶液加入到提取機中充分攪拌混合，兩者的加入量為落葉松木屑50公斤、50％乙醇溶液500～800升，進行提取，過濾，經(jīng)第二次提取，合并濾液，萃取，收集有機溶液，用真空蒸發(fā)器減壓蒸餾有機相至干，按重量份數(shù)10∶1用熱水溶解殘留物，用活性炭脫色，在3-5℃溫度下結晶，析出二氫化槲皮素產(chǎn)品，再經(jīng)真空干燥、粉碎為成品。本發(fā)明用于在落葉松中萃取二氫化槲皮素。文檔編號C07D311/30GK101333204SQ20071007243公開日2008年12月31日申請日期2007年6月29日優(yōu)先權日2007年6月29日發(fā)明者戰(zhàn)鳳軍,才健輝申請人:黑龍江花旗科技發(fā)展有限公司;才健輝;戰(zhàn)鳳軍