專利名稱：化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及如上文中所定義的式(1)化合物及其鹽。用于藥物組合物的鹽為藥學(xué)上可接受的鹽，但是其它的鹽也可用于制備式(1)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽。例如，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽包括如上文中所定義的式(1)化合物的酸加成鹽，所述式(1)化合物是充分酸性的，從而形成這種鹽。該酸加成鹽包括例如與提供藥學(xué)上可接受的陰離子的無機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽，例如與鹵化氫(特別是鹽酸或氫溴酸其中優(yōu)選鹽酸)的鹽或者與硫酸或磷酸的鹽，或者與三氟乙酸、檸檬酸或馬來酸的鹽。適宜的鹽包括鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，烷基磺酸鹽，芳基磺酸鹽，乙酸鹽，苯甲酸鹽，檸檬酸鹽，馬來酸鹽，富馬酸鹽，琥珀酸鹽，乳酸鹽和酒石酸鹽。另外，如果式(1)化合物是充分酸性的，則可與提供藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子的無機(jī)堿或有機(jī)堿形成藥學(xué)上可接受的鹽。例如，與無機(jī)堿或有機(jī)堿形成的鹽包括堿金屬鹽如鈉或鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣或鎂鹽，銨鹽或者例如與甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥乙基)胺的鹽。
本發(fā)明的化合物可以以前藥的形式給藥，所述前藥在人體或動(dòng)物體內(nèi)分解得到本發(fā)明的化合物。前藥可用于改變或提高母化合物的物理和/或藥物動(dòng)力學(xué)特性，并且可以在母化合物包含能夠衍生成前藥的合適基團(tuán)或取代基時(shí)形成。前藥的實(shí)例包括本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的體內(nèi)可水解的酯。
包含羧基或羥基的式(1)化合物的體內(nèi)可水解的酯為例如藥學(xué)上可接受的酯，其在人體或動(dòng)物體內(nèi)分解產(chǎn)生母體酸或醇。
對(duì)羧基而言，適宜的藥學(xué)上可接受的酯包括C1-6烷氧基甲基酯如甲氧基甲基酯，C1-6烷酰氧基甲基酯如新戊酰氧基甲基酯，酞基酯，C3-8環(huán)烷氧基羰氧基C1-6烷基酯如1-環(huán)己基羰氧基乙基酯，1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯如5-甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯，及C1-6烷氧基羰氧基乙基酯如1-甲氧基羰氧基乙基酯，并且可以在本發(fā)明的化合物中的任何羧基上成酯。
對(duì)羥基而言，適宜的藥學(xué)上可接受的酯包括無機(jī)酯如磷酸酯(包括氨基磷酸環(huán)酯)以及因?yàn)轷サ捏w內(nèi)水解而得到母體羥基的α-酰氧基烷基醚和相關(guān)的化合物。α-酰氧基烷基醚的實(shí)例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基甲氧基。對(duì)羥基而言，形成體內(nèi)可水解的酯的選擇包括C1-10烷酰基，例如乙?；?；苯甲酰基；苯乙?；?；取代的苯甲酰基和苯乙?；籆1-10烷氧基羰基(得到烷基碳酸酯)，例如乙氧基羰基；二-(C1-4)烷基氨基甲?；蚇-(二-(C1-4)烷基氨基乙基)-N-(C1-4)烷基氨基甲?；?得到氨基甲酸酯)；二-(C1-4)烷基氨基乙酰基和羧基乙?；１揭阴；捅郊柞；沫h(huán)取代基的實(shí)例包括氨基甲基，(C1-4)烷基氨基甲基和二-((C1-4)烷基)氨基甲基，以及由環(huán)氮原子通過亞甲基連接基團(tuán)連接至苯甲?；h(huán)的3-或4-位而形成的嗎啉代或哌嗪子基。其它感興趣的體內(nèi)可水解的酯包括，例如，RAC(O)OC1-6烷基-CO-，其中RA為例如芐氧基-(C1-4)烷基，或者苯基)。這種酯的苯基上的適宜取代基包括，例如，4-(C1-4烷基)哌嗪子基-C1-4烷基，哌嗪子基-C1-4烷基和嗎啉代-(C1-C4)烷基。
在本說明書中，通用術(shù)語“烷基”包括直鏈和支鏈烷基。然而，提及的單獨(dú)烷基如“丙基”僅特指直鏈型，提及的單獨(dú)支鏈烷基如叔丁基僅特指支鏈型。例如，“C1-4烷基”包括甲基，乙基，丙基，異丙基和叔丁基，及“C1-6烷基”的實(shí)例包括“C1-4烷基”的實(shí)例以及另外的戊基，2，3-二甲基丙基，3-甲基丁基和己基。類似的規(guī)定適用于其它通用術(shù)語，例如，“C2-4烯基”包括乙烯基，烯丙基和1-丙烯基，及“C2-6烯基”的實(shí)例包括“C2-4烯基”的實(shí)例以及另外的1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-甲基-丁-2-烯基，3-甲基-丁-1-烯基，1-戊烯基，3-戊烯基和4-己烯基。“C2-4炔基”的實(shí)例包括乙炔基，1-丙炔基和2-丙炔基，及“C2-6炔基”的實(shí)例包括“C2-4炔基”的實(shí)例以及另外的3-丁炔基，2-戊炔基和1-甲基戊-2-炔基。
術(shù)語“羥基C1-4烷基”包括羥基甲基，羥基乙基，羥基丙基，羥基異丙基和羥基丁基。術(shù)語“羥基C1-3烷基”包括羥基甲基、羥基乙基、羥基丙基和羥基異丙基。術(shù)語“羥基乙基”包括1-羥基乙基和2-羥基乙基。術(shù)語“羥基丙基”包括1-羥基丙基，2-羥基丙基和3-羥基丙基，類似的規(guī)定適用于其它術(shù)語如羥基丁基。術(shù)語“二羥基C1-4烷基”包括二羥基乙基，二羥基丙基，二羥基異丙基和二羥基丁基。術(shù)語“二羥基丙基”包括1，2-二羥基丙基和1，3-二羥基丙基。類似的規(guī)定適用于其它術(shù)語如二羥基異丙基和二羥基丁基。
術(shù)語“鹵代”是指氟代、氯代、溴代和碘代。例如，術(shù)語“二鹵代C1-4烷基”包括二氟甲基和二氯甲基。例如，術(shù)語“三鹵代C1-4烷基”包括三氟甲基。
“C1-3烷氧基”、“C1-4烷氧基”和“-OC1-4烷基”的實(shí)例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基和異丙氧基。“C1-6烷氧基”的實(shí)例包括“C1-4烷氧基”的實(shí)例以及另外的丁氧基，叔丁氧基，戊氧基和1，2-(甲基)2丙氧基。“羥基C2-3烷氧基”的實(shí)例包括1-羥基乙氧基，1-羥基丙氧基和2-羥基丙氧基；C1-3烷氧基C2-3烷氧基的實(shí)例包括甲氧基乙氧基，乙氧基乙氧基和甲氧基丙氧基；“C1-3烷?；焙汀癈1-4烷?；钡膶?shí)例包括甲?；?，乙?；捅；?。“C1-6烷?；钡膶?shí)例包括“C1-4烷酰基”的實(shí)例以及另外的丁?；?，戊?；?，己?；?，2-(甲基)2丙酰基?！癈1-4烷酰氧基”的實(shí)例包括甲酰氧基，乙酰氧基和丙酰氧基?！癈1-6烷酰氧基”的實(shí)例包括“C1-4烷酰氧基”的實(shí)例以及另外的丁酰氧基，戊酰氧基，己酰氧基和1，2-(甲基)2丙酰氧基。“N-(C1-4烷基)氨基甲?；钡膶?shí)例為甲基氨基甲酰基和乙基氨基甲?；??！癗，N-(C1-4烷基)2氨基甲?；钡膶?shí)例為N，N-(甲基)2氨基甲?；琋，N-(乙基)2氨基甲?；蚇-甲基-N-乙基氨基甲酰基?！癗-(C1-4烷基)氨磺?；钡膶?shí)例為N-(甲基)氨磺酰基和N-(乙基)氨磺?；！癗，N-(C1-4烷基)2氨磺酰基”的實(shí)例為N，N-(甲基)2氨磺?；?，N，N-(乙基)2氨磺?；蚇-(甲基)-N-(乙基)氨磺酰基。-NHSO2C1-4烷基的實(shí)例為甲基磺?；被?，乙基磺酰基氨基，丙基磺酰基氨基，異丙基磺?；被褪宥』酋；被?。
“C1-4烷基S(O)b(其中b為0、1或2)”，“C1-4烷基S(O)c(其中c為0～2)”，“C1-3烷基S(O)c(其中c為0～2)”和“C1-4烷基S(O)d(其中d為0～2)”的實(shí)例獨(dú)立地包括甲硫基，乙硫基，丙硫基，甲亞磺酰基，乙亞磺?；?，丙亞磺酰基，甲磺酰基，乙磺?；?，丙磺?；彤惐酋；?。“C1-4烷基S(O)bC1-4烷基-(其中b為0、1或2)”的實(shí)例包括甲基磺?；谆?，甲基亞磺酰基甲基，甲硫基甲基，乙基磺?；谆一鶃喕酋；谆鸵伊蚧谆?。“C1-4烷基磺?；钡膶?shí)例包括甲磺?；?，乙磺?；酋；彤惐酋；??！?OSO2C1-4烷基”的實(shí)例包括甲基磺酰氧基，乙基磺酰氧基，丙基磺酰氧基，異丙基磺酰氧基和叔丁基磺酰氧基。
“C3-6環(huán)烷基”的實(shí)例包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基?！癈3-6環(huán)烷基C1-3烷基”的實(shí)例包括環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基甲基，環(huán)戊基甲基和環(huán)己基甲基?！癈3-6環(huán)烷氧基”的實(shí)例包括環(huán)丙氧基，環(huán)丁氧基，環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基?！癈3-6環(huán)烷基C1-3烷氧基”的實(shí)例包括環(huán)丙基甲氧基，環(huán)丁基甲氧基，環(huán)戊基甲氧基和環(huán)己基甲氧基。
在本說明書中使用復(fù)合術(shù)語描述包括一個(gè)以上官能團(tuán)的基團(tuán)如-C1-4烷基SO2C1-4烷基。這類術(shù)語應(yīng)當(dāng)依據(jù)本領(lǐng)域的技術(shù)人員明白的各組成部分的含義來解釋。
為了避免疑義，應(yīng)當(dāng)理解，在本說明書中，如果某基團(tuán)被限定為‘前文中定義的’或者‘如前文中所定的’，則該基團(tuán)包括第一次出現(xiàn)和最寬的定義，以及有關(guān)該基團(tuán)的全部具體定義。
應(yīng)當(dāng)理解，如果取代基在烷基鏈上包含兩個(gè)取代基，其中二者均通過雜原子連接(例如兩個(gè)烷氧基取代基)，則這兩個(gè)取代基不為烷基鏈的同一碳原子上的取代基。
應(yīng)當(dāng)理解，所有基團(tuán)上的任選取代基可連接在任何適宜的可利用的原子上，除非另有規(guī)定，包括雜原子，只要它們沒有因此被季銨化。因此，羥基取代的C1-6烷基包括羥基甲基，1-羥基乙基，2-羥基乙基和3-羥基丙基。
為了避免疑義，如果Z1＝-Y-COOH，其中Y為被一個(gè)雜原子間隔(而且也任選被取代)的C1-6亞烷基，則該C1-6亞烷基可以是支鏈的，而且任何任選的取代基可以位于支鏈上，使得這種Z1的定義包括如下所示的結(jié)構(gòu)(其中Y為乙氧基取代的亞丙基)。

如果任選的取代基選自“0、1或2”個(gè)基團(tuán)，應(yīng)當(dāng)理解，該定義包括選自指定基團(tuán)之一的所有取代基或者選自規(guī)定基團(tuán)中兩或多個(gè)的取代基。
被選自氮、氧和硫的雜原子間隔的C1-6亞烷基的實(shí)例包括二價(jià)的-CH2XCH2-，-CH2XCH2CH2-，-CH2CH2XCH2-，-CH(Ra)XCH2-，-CH(Ra)XCH2CH2-，-CH(Ra)CH2XCH2-，-CH2CH(Ra)XCH2-，-CH2CH2XCH(Ra)-，-CH2XCH(Ra)CH2-，-CH2XCH2CH(Ra)-[其中X選自-O-，-S-，-SO-，-SO2-和-N(Rc)(本申請(qǐng)中Rc選自甲基、乙基、甲?；?、乙酰基和甲磺?；?及Ra選自甲基和乙基]。右側(cè)的連接符與Z1中的COOH基團(tuán)相連。
被雜原子間隔的C1-6亞烷基的其它實(shí)例包括-CH2XCH2-，-CH2XCH2CH2-，-CH2CH2XCH2，-CH(Rf)XCH2-，-CH(Rf)XCH2CH2-，-CH(Rf)CH2XCH2-，-CH2CH(Rf)XCH2-，-CH2CH2XCH(Rf)-，-CH2XCH(Rf)CH2-，-CH2XCH(Rf)-，-CH2XCRf2-，-CH2XCH2CH2CH2-，-CH(CH2XCH2CH3)-，-CH(CH2XCH3)-，-CH(CH2CH2XCH3)-，-CH(CH2CH2XCH2CH3)-，-CH(CH2CH2CH2XCH3)-，-CH(CH2XCH2CH3)CH2-，-CH(CH2XCH3)CH2-，-CH(CH2CH2XCH3)CH2-，-CH(CH2CH2XCH2CH3)CH2-，及-CH(CH2CH2CH2XCH3)CH2-[其中X定義如上并具體地選自-O-、-S-和-SO2-，及Rf選自甲基和乙基]。右側(cè)的連接符與Z1中的COOH基團(tuán)相連。
C1-6亞烷基的實(shí)例包括二價(jià)的亞甲基，亞乙基，亞丙基，亞丁基，-CH(Me)-，-CH(Et)-，-C(Me)2-，-CH2CH(Me)-，-CH2CH(Et)-和-CH2C(Me)2-。右側(cè)的連接符與Z1中的COOH基團(tuán)相連。
C3-6亞環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙-1-亞基，環(huán)丁-1-亞基和環(huán)戊-1-亞基。
Y，R1，R4，R5，R6，R7，n和m的具體值如下。如果對(duì)前文和下文中所確立的定義、權(quán)利要求、方面和實(shí)施方案合適，則可以使用這些值。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中提供式(1)化合物，在可選擇的實(shí)施方案中提供式(1)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，在進(jìn)一步可選擇的實(shí)施方案中提供式(1)化合物的體內(nèi)可水解的酯，及在更進(jìn)一步可選擇的實(shí)施方案中提供式(1)化合物的體內(nèi)可水解的酯的藥學(xué)上可接受的鹽。
在進(jìn)一步的可選的實(shí)施方案中，提供式(1)化合物的前藥，在更進(jìn)一步的可選的實(shí)施方案中，提供式(1)化合物的前藥的藥學(xué)上可接受的鹽。
Z的具體值 i)在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供上述式(1)化合物，其中Z為CH。
ii)在本發(fā)明的另一方面，Z為氮。
R4和R5的具體值 i)在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供上述式(1)化合物，其中R4和R5一起為-S-C(R6)＝C(R7)-。
ii)在本發(fā)明的另一方面，R4和R5一起為-C(R7)＝C(R6)-S-。
R6和R7的具體值 i)在本發(fā)明的又一方面，R6和R7獨(dú)立地選自氫，鹵素或C1-6烷基。
ii)具體地，R6和R7獨(dú)立選自氫，氯，溴或甲基。
iii)具體地，R6和R7獨(dú)立選自氫或氯。
iv)更具體地，R6和R7之一為氯。
v)在一個(gè)實(shí)施方案中，R6和R7之一為氯，另一個(gè)為氫。
vi)在另一實(shí)施方案中，R6和R7二者均為氯。
n的具體值 i)在本發(fā)明的一個(gè)方面，n為0或1。
ii)在一個(gè)方面，優(yōu)選n為1。
iii)在另一方面，優(yōu)選n為0。
n為2時(shí)R1的具體值 i)當(dāng)n為2，且兩個(gè)R1基因與其相連的碳原子一起可形成4至7元飽和環(huán)，且該環(huán)任選包含1或2個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、S或N的雜原子時(shí)，優(yōu)選該環(huán)為5或6元環(huán)。
ii)在一個(gè)實(shí)施方案中，該5或6元環(huán)包含兩個(gè)O原子(即環(huán)狀縮醛)。
iii)一方面，當(dāng)兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成這樣的環(huán)狀縮醛時(shí)，其是未取代的。
iv)最具體地，兩個(gè)R1基團(tuán)一起為-O-CH2-O-。
R1的具體值 i)在本發(fā)明的另一方面，R1選自鹵素，硝基，氰基，羥基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基和C1-4烷氧基。
ii)在又一方面，R1選自鹵素，硝基，氰基，羥基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，C1-4烷基S(O)b(其中b為0、1或2)，-OS(O)2C1-4烷基，C1-4烷基和C1-4烷氧基。
iii)在又一方面，R1選自鹵素，硝基，氰基，羥基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，-S(O)bMe(其中b為0、1或2)，-OS(O)2Me，甲基和甲氧基。
iv)在又一方面，R1為C1-4烷基。
v)具體地，R1選自鹵素和C1-4烷氧基。
vi)在另一實(shí)施方案中，優(yōu)選R1選自氟，氯，甲基，乙基，甲氧基和-O-CH2-O-。
一方面，Y選自選項(xiàng)a)。
另一方面，Y選自選項(xiàng)b)，特別是b)i)。
關(guān)于選項(xiàng)a)的Y的具體值 i)一方面，Y為C3-6亞環(huán)烷基。
ii)另一方面，Y為亞環(huán)丙基，亞甲基環(huán)丙-1-基，亞甲基環(huán)丁-1-基或亞甲基環(huán)戊-1-基。
iii)另一方面，Y為C1-6亞烷基。
iv)另一方面，Y選自亞甲基，亞乙基，亞丙基，亞丁基，-CH(Me)-，-CH(Et)-，-C(Me)2-，-CH2CH(Me)-，-CH2CH(Et)-和-CH2C(Me)2-。
v)又一方面，Y選自亞甲基和亞乙基。
關(guān)于選項(xiàng)b)的Y的具體值 vi)Y的具體值包括-CH2XCH2-，-CH2XCH2CH2-，-CH2CH2XCH2，-CH(Ra)XCH2-，-CH(Ra)XCH2CH2-，-CH(Ra)CH2XCH2-，-CH2CH(Ra)XCH2-，-CH2CH2XCH(Ra)-，-CH2XCH(Ra)CH2-，-CH2XCH2CH(Rb)-[其中X選自-O-，-S-，-SO-，-SO2-和-N(Rc)(本申請(qǐng)中Rc選自甲基，乙基，甲?；?，乙?；?，甲磺?；?，以及Ra選自甲基和乙基，Rb選自甲基，乙基，甲氧基和乙氧基]，-CH2C(Me)2OCH2-，-CH2CH2OC(Me)2-，-CH2OC(Me)2CH2-，-CH2OCH2C(Me)2-，-CH(Rd)-(其中Rd選自環(huán)丙基，環(huán)丙基甲基，甲氧基，乙氧基，甲氧基乙基，環(huán)丙基甲氧基，甲氧基乙氧基和氰基)，-CH2CH(Re)-(其中Re選自環(huán)丙基，環(huán)丙基甲基，甲氧基，乙氧基，環(huán)丙基甲氧基，甲氧基乙氧基，氰基，甲硫基，甲基亞磺?；?，甲基磺?；?，氨基磺?；?，N-甲基氨基磺酰基，N，N-二甲基氨基磺酰基，甲磺酰氨基，N-甲基-甲磺酰氨基，乙?；?，乙酰氨基，N-甲基乙酰氨基，氨基甲?；琋-甲基氨基甲?；蚇，N-二甲基氨基甲酰基)，亞甲基環(huán)丙-1-基氧基甲基(-CH2C(CH2CH2)OCH2-)，亞乙基氧基環(huán)丙-1-基，亞甲基氧基環(huán)丙-1-基甲基和亞甲基氧基甲基環(huán)丙-1-基。
vii)Y的更進(jìn)一步的具體值包括-CH2XCH2-，-CH2XCH2CH2-，-CH2CH2XCH2，-CH(Rf)XCH2-，-CH(Rf)XCH2CH2-，-CH(Rf)CH2XCH2-，-CH2CH(Rf)XCH2-，-CH2CH2XCH(Rf)-，-CH2XCH(Rf)CH2-，-CH2XCH(Rf)-，-CH2XCRf2-，-CH2XCH2CH2CH2-[其中X選自-O-，-S-和-SO2-，Rf選自甲基和乙基]，-CH2-，-CH2CH2-，-CH2CH2CH2-，-CH2CH(Me)-，-CH(Rg)-和-CH(Rg)CH2-[其中Rg選自甲氧基甲基，乙氧基乙基，甲氧基乙基，乙氧基甲基，甲氧基丙基，環(huán)丙基甲基，異丙基甲基，乙基和丙基]。
viii)Y的更進(jìn)一步的具體值包括-CH2OCH2-，-CH2OCH(Me)-，-CH2-，-CH2CH2-，-CH2SCH2CH2-，-CH2SO2CH2CH2-，-CH(CH2CH(CH2CH2))-，-CH(CH2CH2OCH3)-，-CH(CH2CH2OCH2CH3)-，-CH(CH2CH2OCH3)CH2-和-CH(CH2CH2CH2OCH3)-。
化合物的具體類別包括式(1’)和(1”)的類別
其中R1和Z1如上文中所定義的。
本發(fā)明的化合物的更具體的類別為式(1’)和(1”)的類別，其中Z1中的R1和Y利用上述定義的組合如下文的表A或B中所定義的。例如，表中標(biāo)題為R1的欄目中的‘i’是指上文中為R1給出的定義(i)，‘I’是指在說明書開始為式(I)的化合物中的變量給出的第一定義。應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于Y的定義，“b)i)”是指在說明書開始于式(1)化合物的選項(xiàng)b)下變量的第一定義。
表A 表B 本發(fā)明的更具體的化合物為表C中所定義的化合物 表C 在本發(fā)明的一個(gè)方面，式(1)化合物為式(1A)的化合物(其中Z優(yōu)選為CH)
應(yīng)當(dāng)理解，上述關(guān)于式(1)、(1’)和(1”)的化合物的具體值、方面和實(shí)施方案，同樣適用于式(1A)的化合物。
本發(fā)明的更具體的化合物包括下列中的一種或多種(或其藥學(xué)上可接受的鹽) [((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸； [((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸； (2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸； (2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸； 3-((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸； 3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸； 3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲磺酰基}-丙酸； ((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸； (3R)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸； (3S)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸；及 (3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸。
本發(fā)明的更具體的化合物包括下列中的一種或多種，或者其藥學(xué)上可接受的鹽 [((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸； (2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸； 3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸； 3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲磺?；鶀-丙酸； ((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸； (3R)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸； (3S)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸；及 (3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸。
本發(fā)明的更具體的化合物包括下列中的一種或多種，或者其藥學(xué)上可接受的鹽 (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸； (2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸； (3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸；及 (3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸。
本發(fā)明的另一方面，提供式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯的制備方法，該方法(其中Z，Z1，R1，R4，R5，及n如式(1)中所定義的，除非另外說明)包括 a)使式(2)的酸或其活化的衍生物與式(3)的胺反應(yīng)，
以及其后，在需要時(shí) i)將式(1)化合物轉(zhuǎn)化成其它式(1)化合物； ii)除去任何保護(hù)基； iii)形成藥學(xué)上可接受的鹽。
上述反應(yīng)的具體反應(yīng)條件如下。
方法a)式(2)的酸和式(3)的胺可以在適宜的偶聯(lián)劑存在下偶聯(lián)在一起。可以采用本領(lǐng)域中公知的標(biāo)準(zhǔn)的肽偶聯(lián)劑作為該適宜的偶聯(lián)劑，例如，羰基二咪唑，1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)和二環(huán)己基-碳二亞胺(DCCI)，任選在諸如1-羥基苯并三唑、二甲氨基吡啶或4-吡咯烷子基吡啶等催化劑存在下，任選在堿例如三乙胺、二-異丙基乙基胺、吡啶或2，6-二烷基-吡啶如2，6-二甲基吡啶或2，6-二叔丁基吡啶存在下。適宜的溶劑包括二甲基乙酰胺，二氯甲烷，苯，四氫呋喃和二甲基甲酰胺。偶聯(lián)反應(yīng)可方便地在范圍為-40～40℃的溫度下進(jìn)行。
適宜的活化酸衍生物包括酰鹵如酰氯，及活性酯如五氟苯基酯。該類型化合物與胺的反應(yīng)是本領(lǐng)域中眾所周知的，例如，它們可以在堿(如上述那些堿)存在下，于適當(dāng)?shù)娜軇?如上述那些溶劑)中進(jìn)行反應(yīng)。該反應(yīng)可方便地在范圍為-40～40℃的溫度下進(jìn)行。
其中Z為CH的式(2)的化合物可根據(jù)下面的方案1制備 方案1
式(2a)的化合物可從商業(yè)上得到，或者它們?yōu)橐阎幕衔?，或者它們可根?jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。
其中X為氮的式(2)的化合物可由式(4)的化合物制備
首先利用鹵化劑如POCl3或POBr3在惰性有機(jī)溶劑如二氯甲烷中于環(huán)境溫度至回流溫度范圍內(nèi)，將氧代基團(tuán)轉(zhuǎn)化成氯或溴(例如參見Nucleic AcidChem.1991，4，24-6)；然后利用氫化物鹽如氰化鉀，在惰性有機(jī)溶劑如甲苯、苯或二甲苯中，任選在催化劑如18-冠醚-6存在下，置換氯或溴基團(tuán)(例如參見J.Heterocycl.Chem 2000，37(1)，119-126)；最后利用酸水溶液如鹽酸水溶液將氰基水解成羧基(例如參見Chem.Pharm.Bull.1986，34(9)，3635-43)。
作為選擇，其中X為氮的式(2)的化合物可通過式(4)的化合物與(Cl3CCO)2O和Cl3CCO2H在氯化鎂存在下反應(yīng)而形成，其中采用Cl3CCO2H作為溶劑，進(jìn)而形成式(5)的化合物
然后利用例如氫氧化鈉水溶液，在環(huán)境溫度至回流溫度范圍水解式(5)的化合物(例如參見J Heterocycl.Chem.1980，17(2)，381-2)。
式(4)的化合物可由式(6)和(7)的化合物，利用已知的Curtius重排條件制備(Tetrahedron 1999，55，6167)
式(8)和(9)的化合物
分別轉(zhuǎn)換成式(6)和(7)的化合物。這種轉(zhuǎn)換可同時(shí)發(fā)生，也可以用酸或堿誘導(dǎo)。
式(8)和(9)的化合物可通過將羧基引入到式(10)或(11)的化合物中而制備
其中P’為氨基保護(hù)基如丁氧基羰基。
將羧基引入到式(10)或(11)的化合物中，引入辦法是使烷基鋰試劑如正丁基鋰在惰性有機(jī)溶劑如THF中于低溫如-10℃至-78℃范圍的溫度下反應(yīng)，然后通過下列步驟適當(dāng)?shù)匦纬墒?8)或(9)的化合物 a)使所得化合物與二氧化碳反應(yīng)；或者 b)與DMF在范圍為-10℃至環(huán)境溫度的溫度下反應(yīng)，形成相應(yīng)的醛，并用標(biāo)準(zhǔn)試劑將該醛氧化成羧基，進(jìn)而得到式(8)或(9)的化合物。
式(10)和(11)的化合物可采用公知的Curtius反應(yīng)條件由式(12)和(13)的化合物制備
式(12)和(13)的化合物可利用標(biāo)準(zhǔn)的氧化劑如錳酸鉀或高碘酸鈉，通過氧化相應(yīng)的醛來制備。
式(12)或(13)的化合物的醛前體可利用本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)制備。例如，很多式(12)或(13)的化合物可通過將合適的R6和R7引入到式(14)或(15)的化合物中而制備
例如，當(dāng)R6和R7二者均為氯時(shí)，式(14)或(15)的化合物可用氯化試劑如氯氣在氯化鋁或三氯化鐵(III)存在下于惰性有機(jī)溶劑如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷中進(jìn)行氯化，接著用堿的水溶液如氫氧化鈉水溶液處理。單氯化的化合物可按相同的方式形成。
式(2b)的化合物還可按方案2中所示制備 方案2
將式(10)的化合物轉(zhuǎn)化為式(16)的化合物，可通過定向的鄰位鋰化反應(yīng)進(jìn)行(J.Org.Chem，2001，volume 66，3662-3670)，例如采用正丁基鋰和(CHO)N(烷基)2。式(10)的化合物中的保護(hù)基P’必須是適合該反應(yīng)的定向取代基，并且可以為例如-CO2t-Bu。式(16)的化合物與LCH2CO2R(L為離去基團(tuán))的反應(yīng)，以及根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法的保護(hù)基P’被可供選擇的P”(例如-CO烷基)的置換，得到式(17)的化合物。其可以利用堿如碳酸鉀或甲醇鈉環(huán)化。
式(3)的化合物或者是已知的化合物，或者可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備，或者可根據(jù)下面方案3至8制備，或者根據(jù)具體實(shí)例中使用的方法制備 方案3
(其中R17＝C1-6烷基，R18為與Y有關(guān)的變量-例如，當(dāng)Y為-CH(CH3)-時(shí)R18為CH3，或者當(dāng)Y為-CH(OCH3)-時(shí)，R18為OCH3)。
化合物A(其中R1為氫)是可從商業(yè)上得到的[(1R，2R)-(-)-反式-1-氨基-2-茚滿醇，Cas.Reg.No.163061-73-2；或者[(1S，2S)-(-)-反式-1-氨基-2-茚滿醇Cas.Reg.No.13286-59-4]。類型B的化合物可通過文獻(xiàn)中已知的方法制備，例如上面方案3中所示的方法。應(yīng)當(dāng)理解，方案3中所示的方法同樣適用于與所示那些對(duì)應(yīng)的化合物A、B和C的對(duì)映異構(gòu)體。然后使化合物(C)與適當(dāng)?shù)乃?2)偶聯(lián)，并通過本領(lǐng)域中已知的方法(例如，三氟乙酸或氫氧化鉀)除去酸保護(hù)基R17。
類似地，可以使用根據(jù)下面方案4的方法 方案4
(其中R9為C1-6烷基，R8為與Y有關(guān)的變量-例如，當(dāng)Y為-CH2C(O)NHCH2-時(shí)，R8為-CH2CO2R9)。然后將(C)偶聯(lián)在適當(dāng)?shù)乃?2)上，接著通過本領(lǐng)域公知的方法(如三氟乙酸或氫氧化鉀)除去酸保護(hù)基R8。
式(3a)的化合物可從商業(yè)上得到，它們或者是已知的化合物或者可通過本領(lǐng)域公知的方法制備。例如，由式(19)的伯胺(其中R為H或適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基)開始，R1可通過酰化(例如與乙酰氧基乙酸和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(EDAC)反應(yīng))、烷基化、還原烷基化、磺化或有關(guān)的方法引入，接著在適當(dāng)?shù)那闆r下進(jìn)行O-去保護(hù)。作為選擇，R1可借助于還原、氧化、水解(如將乙酰氧基轉(zhuǎn)化為羥基)、親核取代、胺化、相關(guān)方法或這些方法的組合，通過改變前面引入的基團(tuán)中的官能團(tuán)而得到，接著在適當(dāng)?shù)那闆r下進(jìn)行O-去保護(hù)。應(yīng)當(dāng)理解，這種改變可包括將一種式(1)化合物轉(zhuǎn)化成另一種式(1)化合物的改變。
方案5
作為選擇，式(3)的胺可如此得到，即將制備式(3a)的化合物的方法應(yīng)用于式(20)的化合物(其中W為NH2或帶有一個(gè)或兩個(gè)合適保護(hù)基的氮原子)。

(其中R1為氫或CO2R10；R10為C1-6烷基或適當(dāng)保護(hù)的酸；及R11為與Y有關(guān)的變量-例如，當(dāng)Y為-CH2CH(OCH3)-時(shí)，R11為-OCH3)。然后將(C)偶聯(lián)到合適的酸(2)上，接著通過本領(lǐng)域公知的方法(如三氟乙酸或氫氧化鉀)除去酸保護(hù)基R10。
方案7
(其中R12獨(dú)立地為C1-6烷基或羧基-保護(hù)基，R13為與Y有關(guān)的變量-例如，當(dāng)Y為-CH2CH(CH2OCH3)-時(shí)，R13為-CH2OCH3；LG為離去基團(tuán))。然后將(C)偶聯(lián)至適宜的酸(2)，接著通過本領(lǐng)域公知的方法(如三氟乙酸或氫氧化鉀)除去酸保護(hù)基R12。
方案8
(其中R16為C1-6烷基，R14和R15為與Y有關(guān)的變量-例如，當(dāng)Y為-CH2OCH(CH3)CH2-時(shí)，R14為-CH3和R15為H；LG為離去基團(tuán))。然后將(C)偶聯(lián)至適宜的酸(2)，接著通過本領(lǐng)域公知的方法(如三氟乙酸或氫氧化鉀)除去酸保護(hù)基R16。
應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的化合物中的某些不同的環(huán)取代基，例如R1和R4，可通過標(biāo)準(zhǔn)的芳族取代反應(yīng)引入，也可以在上述方法之前或就在上述方法之后通過常規(guī)的官能團(tuán)改變而生成，這同樣包括在本發(fā)明的方法方面中。這類反應(yīng)可將一種式(1)化合物轉(zhuǎn)化成另一種式(1)化合物。這種反應(yīng)和改變包括，例如，借助于芳族取代反應(yīng)的取代基引入，取代基的還原，取代基的烷基化和取代基的氧化。這些方法的試劑和反應(yīng)條件在化學(xué)領(lǐng)域是眾所周知的。芳族取代反應(yīng)的具體實(shí)例包括采用濃硝酸的硝基引入；采用例如酰鹵和路易斯酸(Lewis acid)(如三氯化鋁)在傅克(Friedel Crafts)條件下的?；?；采用烷基鹵和路易斯酸(如三氯化鋁)在傅克條件下的烷基引入；以及鹵素基團(tuán)的引入。改變的具體實(shí)例包括硝基到氨基的還原，例如，采用鎳催化劑的催化氫化，或者在鹽酸存在和加熱條件下采用鐵的處理；烷硫基到烷基亞磺?；蛲榛酋；难趸?。
還應(yīng)當(dāng)理解，在本文中提及的某些反應(yīng)中，保護(hù)化合物中的任何敏感基團(tuán)可能是必要的/可取的。保護(hù)是必要或可取的場(chǎng)合以及合適的保護(hù)方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的?？筛鶕?jù)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)踐(參見T.W.Green，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，1991)采用常規(guī)的保護(hù)基。因此，如果反應(yīng)物包含諸如氨基、羧基或羥基等基團(tuán)，則在本文中提及的某些反應(yīng)中保護(hù)該基團(tuán)也許是可取的。
例如，氨基和烷基氨基的適宜的保護(hù)基包括?；?，例如乙酰基等烷?；煌檠趸驶?，例如甲氧基羰基，乙氧基羰基或叔丁氧基羰基；芳基甲氧基羰基，例如芐氧基羰基；或者芳?；?，例如苯甲酰基。上述保護(hù)基的去保護(hù)條件當(dāng)然隨保護(hù)基的選擇而變化。因此，例如，烷?；蛲檠趸驶蚍减；弱；赏ㄟ^用適宜的堿進(jìn)行水解而除去，所述堿的實(shí)例包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰或氫氧化鈉。作為選擇，諸如叔丁氧基羰基等?；部梢酝ㄟ^例如用適宜的酸如鹽酸、硫酸、磷酸或三氟乙酸處理而除去，而諸如芐氧基羰基等芳基甲氧基羰基則可通過例如采用鈀/碳等催化劑的氫化或者通過用路易斯酸如三(三氟乙酸)合硼處理而除去。適合伯氨基的可供選擇的保護(hù)基為例如酞酰基，其可通過用烷基胺如二甲氨基丙基胺或者用肼處理而除去。
例如，適合羥基的保護(hù)基為?；?，例如諸如乙?；韧轷；?；芳?；?，例如苯甲酰基；或者芳基甲基，例如苯甲基。上述保護(hù)基的去保護(hù)條件當(dāng)然隨保護(hù)基的選擇而變化。因而，例如，烷?；蚍减；弱；赏ㄟ^用適宜的堿進(jìn)行水解而除去，所述堿的實(shí)例包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰或氫氧化鈉。作為選擇，芳基甲基如苯甲基可通過例如采用鈀/碳催化劑的氫化而除去。
例如，適合于羧基的保護(hù)基為酯化基團(tuán)，例如甲基或乙基，其可通過例如用堿(如氫氧化鈉)進(jìn)行水解而除去；或者為叔丁基，其可通過用酸(如三氟乙酸等有機(jī)酸)進(jìn)行處理而除去；或者為芐基，其可通過用催化劑(如鈀/碳)進(jìn)行氫化而除去。
保護(hù)基可以利用化學(xué)領(lǐng)域公知的常規(guī)技術(shù)，在合成的任何方便階段除去。
式(1)化合物的制備中的某些中間體是新的，并且構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。
如前文中所述，本發(fā)明中定義的化合物具有糖原磷酸化酶抑制活性。該性質(zhì)可利用下述方法評(píng)定。
試驗(yàn) 化合物的活性是通過測(cè)量化合物對(duì)糖原降解的抑制作用測(cè)定的，由糖原產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸酯通過多酶偶聯(lián)試驗(yàn)監(jiān)測(cè)的，如EP 0846464A2中所述，Pesce等人的一般方法(Pesce，M A，Bodourian，S H，Harris，R C，and Nicholson，J F(1977)Clinical Chemistry 23，1171-1717)。反應(yīng)為384孔微量培養(yǎng)板形式，體積為50μl。在Tecan Ultra多功能微量培養(yǎng)板讀數(shù)器中，以340nm激發(fā)波長(zhǎng)和465nm發(fā)射波長(zhǎng)，測(cè)量因輔助因子NAD轉(zhuǎn)化為NADH而引起的熒光變化。反應(yīng)在含0.5mM二硫蘇糖醇的50mM HEPES，3.5mM KH2PO4，2.5mMMgCl2，2.5mM乙二醇-二(b-氨基乙基醚)N，N，N′，N′-四乙酸，100mM KCl，8mMD-(+)-葡萄糖pH7.2的試驗(yàn)緩沖液中進(jìn)行。將人重組肝糖原磷酸化酶a(hrlGPa)20nM于試驗(yàn)緩沖液中預(yù)培養(yǎng)30分鐘，所述緩沖液含有6.25mM NAD，1.25mg III型糖原(1.25mg·ml-1試劑緩沖液)。在試劑緩沖液中準(zhǔn)備偶聯(lián)酶，磷酸葡萄糖變位酶和葡萄糖-6-磷酸酯脫氫酶(Sigma)，最終濃度為0.25單位/孔。將20μl的hrl GPa溶液加至10μl的化合物溶液中，并通過加入20μl的偶聯(lián)酶溶液使反應(yīng)啟動(dòng)。將要試驗(yàn)的化合物制備于10μl 5％DMSO/試驗(yàn)緩沖液中，試驗(yàn)中DMSO的最終濃度為1％。在10μl 5％DMSO/試驗(yàn)緩沖液存在下，測(cè)量GPa的非抑制活性，并在5mg·ml-1的N-乙基馬來酰亞胺存在下，測(cè)量最大抑制。在30℃下6小時(shí)之后，以340nm激發(fā)和465nm發(fā)射波長(zhǎng)，測(cè)量相對(duì)熒光單位(RFU)。
該試驗(yàn)以10μM或100μM的抑制劑試驗(yàn)濃度進(jìn)行。利用一系列試驗(yàn)濃度的抑制劑，評(píng)價(jià)在這兩個(gè)濃度之一或二者之下呈現(xiàn)出顯著抑制的化合物，從而測(cè)定IC50，即預(yù)計(jì)抑制酶反應(yīng)50％的濃度。
活性計(jì)算如下 ％抑制＝(1-(化合物RFU-完全抑制的RFU)/(非抑制級(jí)的RFU-完全抑制的RFU))×100。
在上述試驗(yàn)中進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，本發(fā)明的化合物的典型IC50值為100μM至1nM。例如，測(cè)定實(shí)施例1的IC50為0.191μM，測(cè)定實(shí)施例8的IC50為0.014μM。
在大鼠原代肝細(xì)胞中進(jìn)一步試驗(yàn)化合物的抑制活性。大鼠肝細(xì)胞是通過膠原酶灌注技術(shù)，即Seglen的一般方法(P.O.Seglen，Methods Cell Biology(1976)13 29-83)分離的。將細(xì)胞在Nunclon六孔培養(yǎng)板上于DMEM(Dulbeco′sModified Eagle′s Medium)中培養(yǎng)4～6小時(shí)，所述DMEM具有高含量的葡萄糖，包含10％胎牛血清，NEAA(非基本氨基酸)，谷氨酰胺，青霉素/鏈霉素((100單位/100μg)/ml)。然后將肝細(xì)胞在不含胎牛血清但含10nM胰島素和10nM地塞米松的DMEM溶液中培養(yǎng)。在培養(yǎng)之后18～20小時(shí)，通過洗滌細(xì)胞以及加入含2.5mM CaCl2和1％明膠的Krebs-Henseleit碳酸氫鹽緩沖液開始實(shí)驗(yàn)。加入試驗(yàn)化合物，并在5分鐘之后用25nM糖原測(cè)試細(xì)胞。在37℃，95％O2/5％CO2中培養(yǎng)培養(yǎng)60分鐘之后，除去Krebs-Henseleit溶液，并測(cè)量Krebs-Henseleit溶液的葡萄糖濃度。
根據(jù)本發(fā)明的其它方面，提供藥物組合物，其包含前文所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯，以及結(jié)合有藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明的組合物可為下述合適的形式口服使用(例如片劑、錠劑、硬膠囊劑或軟膠囊劑、水性或油性混懸劑、乳劑、可分散的粉劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑)、局部使用(例如乳膏、軟膏、凝膠、或水性或油性溶液劑或混懸劑)、吸入給藥(例如微細(xì)分散的粉末或液態(tài)氣溶膠)、吹入給藥(例如微細(xì)分散的粉末)或腸胃外給藥(例如用于靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或肌間給藥的無菌水性或油性溶液，或用于直腸給藥的栓劑)。
本發(fā)明的組合物可通過常規(guī)操作使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)藥物賦形劑來獲得。因此，目的用于口服使用的組合物可包含例如一種或多種著色劑、增甜劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。一方面，本發(fā)明的組合物呈適于口服劑量的形式。
片劑配制用的合適藥用的賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，造粒劑和崩解劑如玉米淀粉或海藻酸(algenic acid)；粘合劑如淀粉；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，以及抗氧化劑如抗壞血酸。片劑可以是包衣或未包衣的，以改變它們的崩解和隨后活性成分在腸胃道內(nèi)的吸收，或提高它們的穩(wěn)定性和/或外觀，在任意種情況下，使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)包衣劑和操作。
口服使用的組合物可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或者為軟明膠膠囊的形式，其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性混懸劑通常包含細(xì)粉形式的活性成分以及一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤(rùn)濕劑，如卵磷脂或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)，或氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物如十七氧乙烯基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨酸糖醇單油酸酯，或氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物如十七氧乙烯基十六醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨酸糖醇單油酸酯，或者氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物，如十七氧乙烯基十六醇，或者氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯失水山梨酸糖醇單油酸酯。水性混懸劑也可包括含一種或多種防腐劑(如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、調(diào)味劑、和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
可通過使活性成分懸浮在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中來配制油性混懸劑。油性混懸劑也可包含增稠劑如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇?？杉尤胩鹞秳┤缫陨狭谐龅哪切┨鹞秳┖驼{(diào)味劑，以提供適口的口服制品。這些組合物可通過加入抗氧化劑如抗壞血酸來保存。
通過加入水而適于制備水性混懸劑的可分散的粉末和顆粒通常包含活性成分以及分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑例如有上述的那些。也可存在另外的賦形劑如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物也可為水包油乳液的形式。油相可為植物油如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟，或任何這些油的混合物。合適的乳化劑可為例如天然存在的樹膠如阿拉伯樹膠、黃蓍樹膠，天然存在的磷脂如大豆、卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇的酯或偏酯(如失水山梨糖醇單油酸酯)，和所述偏酯與氧化乙烯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯失水山梨糖醇單油酸酯。該乳液也可包含增甜劑、調(diào)味劑和防腐劑。
糖漿和酏劑可與增甜劑一起配制，增甜劑如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖，也可包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
藥物組合物也可為無菌可注射的水性或油性混懸劑的形式，該混懸劑可根據(jù)已知操作來配制，使用一種或多種上述合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑。無菌可注射的制品也可為在無毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或混懸劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
用于吸入給藥的組合物可為常規(guī)的加壓氣溶膠形式，其設(shè)置成將活性成分分配成包含微細(xì)分散固體的氣溶膠或液滴。可使用常規(guī)的氣溶膠推進(jìn)劑如揮發(fā)性氟化烴或烴，并且氣溶膠裝置通常設(shè)置成分配計(jì)量量的活性成分。
對(duì)于制劑的更多信息，讀者可參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990的第五卷中第25.2章。
活性成分與一種或多種賦形劑結(jié)合以制備單個(gè)劑型的量當(dāng)然隨治療的主體和具體給藥途徑而改變。例如，目的用于人的口服給藥的制劑通常包含例如0.5 mg-2 g的活性試劑，以及混合有合適、方便量的賦形劑，賦形劑的量可為整個(gè)組合物的約5～約98重量％。劑量單位形式通常包含約1mg～約500mg的活性成分。對(duì)于給藥途徑和劑量制度的更多信息，讀者可參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman of EditorialBoard)，Pergamon Press 1990的第5卷中第25.3章。
式(1)化合物通常以范圍為每平方米動(dòng)物體面積5～5000mg，即約0.1～100mg/kg的單位劑量給藥至溫血?jiǎng)游?，這通常提供治療有效的劑量。單位劑型如片劑或膠囊通常包含例如1～250mg的活性成分。優(yōu)選采用范圍為1～50mg/kg的日劑量。然而，日劑量必然隨著治療的宿主、具體的給藥途徑和要治療的疾病的嚴(yán)重性而變化。因此，最佳的劑量可由治療具體患者的執(zhí)業(yè)醫(yī)生確定。
本文所述的糖原磷酸化酶活性的抑制可作基礎(chǔ)療法應(yīng)用，并且除了本發(fā)明的主題之外還可以包括一種或多種其它物質(zhì)和/或治療。這種聯(lián)合治療可通過同時(shí)、相繼或分別給藥各治療組分而實(shí)現(xiàn)。同時(shí)治療可以呈單一片劑或不同片劑的形式。
例如，為了預(yù)防、遲滯或治療2型糖尿病，本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可與一種或多種下列藥劑聯(lián)合給藥 1)胰島素和胰島素類似物； 2)包含磺酰脲的胰島素促分泌劑(如格列本脲，格列吡嗪)，膳食葡萄糖調(diào)節(jié)劑(如瑞格列奈，那格列奈)和葡萄糖激酶活化劑； 3)提高內(nèi)分泌作用的藥劑(如二肽基肽酶IV抑制劑，GLP-1激動(dòng)劑)； 4)胰島素致敏劑，包括PPARγ激動(dòng)劑(如吡格列酮和羅格列酮)，及具有結(jié)合的PPARα和γ活性的藥劑； 5)調(diào)整肝葡萄糖平衡的藥劑(如二甲雙胍，果糖-1，6二磷酸酶抑制劑，糖原合成酶激酶抑制劑，葡萄糖激酶活化劑)； 6)降低葡萄糖腸吸收的藥劑(如阿卡波糖)； 7)阻止葡萄糖被腎再吸收的藥劑(SGLT抑制劑)； 8)用于治療拖延的高血糖癥并發(fā)癥的藥劑(如醛糖還原酶抑制劑)； 9)抗肥胖癥藥劑(如西布曲明和奧利司他)； 10)抗血脂障礙藥劑如HMG-CoA還原酶抑制劑(他汀類藥物，如普伐他丁)；PPARα激動(dòng)劑(氯貝特類藥物，如吉非貝齊)；膽汁酸多價(jià)螯合劑(消膽胺)；膽固醇吸收抑制劑(植物stanols，合成抑制劑)；膽汁酸吸收抑制劑(IBATi)；及煙酸和類似物(尼克酸和緩釋劑型)； 11)抗高血壓劑如β阻滯劑(例如阿替洛爾，心得安)；ACE抑制劑(如賴諾普利)；鈣拮抗劑(如硝苯地平)；增壓素受體拮抗劑(如坎地沙坦)，α拮抗劑和利尿劑(如呋塞米，芐噻嗪)； 12)止血調(diào)節(jié)劑如抗血栓藥，纖維蛋白溶解的活化劑，及抗血小板藥劑；凝血酶拮抗劑；凝血因子Xa抑制劑；凝血因子VIIa抑制劑)；抗血小板藥劑(如阿斯匹林，氯吡格雷)；抗凝血?jiǎng)?肝素及低分子量類似物，水蛭素)和華法林； 13)拮抗高血糖素的作用的藥劑；以及 14)抗炎劑，例如非甾體抗炎藥(如阿斯匹林)和甾體抗炎藥(如可的松)。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，提供上文中所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯的用途，即通過療法而治療溫血?jiǎng)游锶缛说姆椒ㄖ械挠猛尽?br> 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供上文中所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯作為藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供上文中所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯作為治療溫血?jiǎng)游锶缛说南铝屑膊〉乃幬锏挠猛?型糖尿病，胰島素耐受性，綜合征X，高胰島素血癥，血胰高血糖素過多癥，心肌缺血或肥胖癥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供上文中所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯在制備用于治療溫血?jiǎng)游锶缛说南铝屑膊〉乃幬镏械挠猛?型糖尿病，胰島素耐受性，綜合征X，高胰島素血癥，血胰高血糖素過多癥，心肌缺血或肥胖癥。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供上文中所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯在制備用于治療溫血?jiǎng)游锶缛说?型糖尿病的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明該方面的進(jìn)一步特征，提供在需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶缛酥挟a(chǎn)生糖原磷酸化酶抑制作用的方法，該方法包括將有效量的式(1)化合物給藥于所述的動(dòng)物。
根據(jù)本發(fā)明該方面的進(jìn)一步特征，提供治療需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶缛说?型糖尿病，胰島素耐受性，綜合征X，高胰島素血癥，血胰高血糖素過多癥，心肌缺血或肥胖癥的方法，該方法包括將有效量的式(1)化合物給藥于所述的動(dòng)物。
根據(jù)本發(fā)明該方面的進(jìn)一步特征，提供治療需要這種治療的溫血?jiǎng)游锶缛说?型糖尿病的方法，該方法包括將有效量的式(1)化合物給藥于所述的動(dòng)物。
如上所述，治療或預(yù)防性治療特定細(xì)胞增殖疾病所需劑量的大小必然隨治療的宿主、給藥途徑和要治療的疾病的嚴(yán)重性而變化。擬定的單位劑量范圍為例如1～100mg/kg，優(yōu)選為1～50mg/kg。
除用于治療藥物外，式(1)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽也可用作藥理學(xué)工具，用于在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如貓、狗、家兔、猴、大鼠和小鼠中評(píng)價(jià)細(xì)胞周期活性的抑制劑作用的體外和體內(nèi)測(cè)試系統(tǒng)的開發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化，作為尋找新治療劑的組成部分。
在上述其它藥物組合物、過程、方法、用途和藥物制造特征中，本文中所述的本發(fā)明的化合物的選擇性和優(yōu)選實(shí)施方案同樣適用。
實(shí)施例 現(xiàn)將通過下面的實(shí)施例說明本發(fā)明，除非另外說明，其中 (i)溫度以攝氏度(℃)給出；操作在室溫或環(huán)境溫度，即在18～25℃的溫度范圍和惰性氣氛如氬氣下進(jìn)行； (ii)有機(jī)溶液通過無水硫酸鎂干燥；溶劑的蒸發(fā)采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在減壓(600-4000Pascals；4.5-30mmHg)和最高60℃的浴溫下進(jìn)行； (iii)色譜是指快速硅膠色譜；薄層色譜(TLC)在硅膠板上進(jìn)行；在提及Bond Elut柱時(shí)，其是指包含10g或20g或50g的顆粒尺寸為40微米的氧化硅的柱，該氧化硅裝在60ml的一次性注射器中并由多孔盤支撐，得自美國(guó)加利福尼亞的Varian，Harbor City，名稱為“Mega Bond Elut SI”；“MegaBond Elut”是一種商標(biāo)；當(dāng)提及Biotage筒時(shí)，其是指含有KP-SILTM氧化硅(60μ，顆粒尺寸32-63mM)的組件筒，由美國(guó)(1500 Avon Street Extended，Charlottesville，VA 22902)Dyax公司的Biotage分公司提供； (iv)一般地，反應(yīng)過程由TLC跟蹤，并且僅為了說明給出反應(yīng)時(shí)間； (v)僅為了說明給出收率，而不必是那些通過認(rèn)真的工藝過程而得到的收率；如果需要更多的材料，則重復(fù)制備過程； (vi)如果給出，則NMR數(shù)據(jù)為主要診斷質(zhì)子的δ值形式，以相對(duì)于內(nèi)標(biāo)物四甲基硅烷(TMS)的百萬分之一的份數(shù)(ppm)給出，在300MHz下利用全氘二甲亞砜(DMSO-δ6)作為溶劑(除非另外指出)進(jìn)行測(cè)定，其它溶劑(文中所指出的)包括氘化氯仿CDCl3； (vii)化學(xué)符號(hào)具有其通常的意義；使用SI單位和符號(hào)； (viii)減壓作為絕對(duì)壓力以帕斯卡(Pa)給出；高壓作為表壓以巴給出； (ix)溶劑比例按體積∶體積(v/v)給出； (x)質(zhì)譜(MS)數(shù)據(jù)產(chǎn)生于LCMS系統(tǒng)，其中HPLC組成部分一般包括Waters Alliance HT(2790 & 2795)設(shè)備并且運(yùn)行在Phemonenex Gemini C185μm，50×2mm色譜柱(或類似色譜柱)，該色譜柱以酸性洗脫液(例如，采用梯度為0～95％的水/乙腈，其含有5％的1％甲酸于50∶50 水∶乙腈(v/v)混合物中的溶液；或者采用以甲醇代替乙腈的等價(jià)溶劑體系)，或者堿性洗脫液(例如，采用梯度為0～95％的水/乙腈，其含有5％的0.1％880氨于乙腈混合物中的溶液)；以及MS組成部分一般包括Waters ZQ光譜儀。產(chǎn)生電噴霧色譜圖(ESI)正負(fù)基峰強(qiáng)度，及220-300nm的UV全吸收色譜圖，并給出m/z的值；一般地，僅報(bào)告代表母體質(zhì)量的離子，除非另外說明，括號(hào)中的數(shù)值為(MH+)； (xi)可以使用下列縮寫 RT保留時(shí)間； EtOAc 乙酸乙酯； MeOH 甲醇； EtOH 乙醇； DCM 二氯甲烷； HOBT 1-羥基苯并三唑； DIPEA 二異丙基乙胺； EDCI(EDAC)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽； Et2O 乙醚； THf 四氫呋喃； DMF N，N-二甲基甲酰胺； HATU O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基

六氟磷酸鹽； EDAC 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽； TFA 三氟乙酸； DMTMM 4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉氯化物； DMA N，N-二甲基乙酰胺； NaHCO3碳酸氫鈉； NaHMDS六甲基二硅氮烷化鈉(Sodium hexamethyldisilazide)； mCPBA 間氯過苯甲酸； DABCO 二氮雜-[2.2.2]二環(huán)-辛烷； HPLC 高壓液相色譜； AcOH 乙酸； Boc 叔丁氧基羰基； MeCN 乙腈； IPA 異丙醇； DEA 二乙胺 TEA 三乙胺。
實(shí)施例1[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸
向[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸叔丁酯(中間體5；150mg，0.325mmol)于DCM(5mL)中的溶液中，加入三氟乙酸(1mL)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。減壓蒸發(fā)并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(100mg，76％)，其為泡沫狀物。
1H NMRδ2.85(dd，1H)，3.24(m，1H)，3.42(m，1H)，3.67(m，1H)，3.8(m，1H)，4.05(s，1H)，4.5(m，1H)，7.02(d，1H)，7.18(m，4H)，7.4(m，1H)，8.4(d，1H)，11.81(s，1H)，12.52(s，1H)；MS m/z 403/405。
按實(shí)施例1的方法，適宜的叔丁基酯(中間體6)作為原料制備下列實(shí)施例。
實(shí)施例2[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸

實(shí)施例3(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸
向(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸叔丁酯(中間體17；410mg，0.98mmol)于DCM(10mL)中的溶液中，加入三氟乙酸(1mL)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)。減壓蒸發(fā)并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(310mg，86％)，其為泡沫狀物。
1H NMR δ1.4(dd，3H)，2.9(m，1H)，3.42(m，2H)，3.61(d，0.5H)，3.77(dd，0.5H)，3.95(m，0.5H)，4.04(m，1.5H)，4.85(m，1H)，6.42(m，1H)，6.65(dd，1H)，6.81(d，1H)，7.22(m，5H)，10.38(s，0.5H)，10.44(s，0.5H)；MS m/z417/419(M-H)。
按實(shí)施例3的方法，采用適宜的叔丁基酯(中間體18)制備下面的實(shí)施例。
實(shí)施例4(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸

實(shí)施例53-((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸
向3-((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸乙酯(中間體22；150mg，0.36mmol)于1，4-二烷∶水(2mL，2∶1)中的溶液中，加入氫氧化鈉溶液(540μL，2M水溶液，1.08mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)。將該混合物部分地蒸發(fā)(至約0.5體積)，并將殘余物酸化至pH2(2M HCl)，將所得沉淀物過濾，用乙醚洗滌并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(120mg，86％)，其為粉末狀物。
1H NMRδ1.82(m，1H)，2.04(m，1H)，2.37(m，2H)，2.88(dd，1H)，3.22(m，2H)，4.4(m，1H)，7.04(s，1H)，7.15(s，1H)，7.23(m，4H)，8.43(d，1H)，11.86(s，1H)，12.04(s，1H)；MS m/z 389/391。
實(shí)施例63-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸
將3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸甲基酯(中間體30，355mg，0.74mmol)溶于甲醇(5mL)，用2M氫氧化鈉溶液(1.84mL，3.68mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物蒸發(fā)以除去甲醇，用2M HCl酸化，并用EtOAc(50mL)稀釋。待用水(2×10mL)洗滌并干燥(MgSO4)之后，真空蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題產(chǎn)物，其為白色固體(336mg，97％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ2.7(t，2H)，2.9(m，2H)，3.05(m，1H)，3.3(m，3H)，3.5(m，1H)，4.6(m，1H)，7.15(s，1H)，7.25(m，3H)，7.4(m，1H)，8.5(d，1H)，12.4(s，1H)，12.5(s，1H)。
MS m/z 469。
實(shí)施例73-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲磺酰基}-丙酸
將3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸(實(shí)施例6；336mg，0.72mmol)溶于DCM(20mL)，冷卻至5℃并用mCPBA(398mg，2.25mmol)處理。在5℃攪拌1小時(shí)之后，加入DMA(1mL)，得到澄清溶液，并減壓蒸發(fā)除去DCM。通過反相制備型HPLC(MeCN，水，TFA)，從所得DMA溶液中分離標(biāo)題化合物。將合并的產(chǎn)物級(jí)分濃縮，得到固體沉淀物，將其過濾回收，用水洗滌并真空干燥，得到標(biāo)題化合物，其為淺紅色固體。(177mg，49％)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ2.7(t，2H)，2.95(dd，1H)，3.3(m，1H)，3.5(t，2H)，3.6(m，2H)，3.7(m，1H)，4.65(m，1H)，7.1(s，1H)，7.3(m，3H)，7.5(m，1H)，8.6(d，1H)，12.4(s，1H)，12.6(s，1H)；MSm/z 501。
實(shí)施例8((1R，2R)-2-{[2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸
將((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸甲酯(中間體31；581mg，1.4mmol)溶于MeOH(5mL)。加入碳酸鉀(500mg)，并將該懸浮液在60℃攪拌19小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，然后加入EtOAc(25mL)和水(25mL)。將有機(jī)相分離，用水(2×25mL)、鹽水(25mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。然后將產(chǎn)物真空干燥，得到標(biāo)題化合物(570mg，100％)，其為固體。
1H-NMR δ2.62(m，2H)，2.87(m，1H)，3.24(m，1H)，3.56(m，1H)，4.43(m，1H)，7.16(m，5H)，8.47(d，1H)，12.14(s，1H)，12.34(s，1H)；MS m/z 409。
實(shí)施例9和10(3R)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸和(3S)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸
a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 異構(gòu)體1 異構(gòu)體2 酸的非對(duì)映體混合物僅在a碳處的構(gòu)型不同于羧酸(中間體37；222mg，0.48mmol)，在下列條件下對(duì)酸的非對(duì)映體混合物進(jìn)行色譜分析，分離非對(duì)映異構(gòu)體 色譜柱 Merck 50mm 10μm Kr60 silica No.SAT001 洗脫液 (異己烷/HOAc 99.9/0.1)(CH2Cl2/MeOH/HOAc 100/2/0.1)50/50 將合適的級(jí)分合并，真空蒸發(fā)，得到第一洗脫化合物(95mg，43％)和第二洗脫化合物(104mg，47％)固體，其中之一為(3R)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸，其中另一個(gè)為(3S)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸 第一洗脫(實(shí)施例9)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ-0.15(1H，m)，0.06(1H，m)，0.39(2H，t)，0.75(1H，m)，1.07(1H，m)，2.28-2.35(1H，m)，2.87-2.93(1H，m)，3.27(1H，d)，3.44-3.51(1H，m)，4.00(1H，d)，4.96-5.04(1H，m)，6.22(1H，d)，6.49(1H，s)，7.24(4H，m)，11.59(1H，s)；MS m/z 463.3。
第二洗脫(實(shí)施例10)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ-0.01(1H，m)，0.15(1H，m)，0.37-0.45(2H，m)，0.70(1H，m)，1.57-1.62(1H，m)，1.87-1.93(1H，m)，2.64-2.71(1H，m)，2.80(1H，m)，3.43(1H，d)，3.48(1H，q)，4.94-5.00(1H，m)，6.25(1H，d)，6.54(1H，m)，7.20-7.28(3H，m)，11.51(1H，s)；MS m/z461.2。
實(shí)施例11和12(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸
a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知異構(gòu)體1異構(gòu)體2 將((1S，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)(2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯(中間體42，4.27g，7.92mmol)溶于THF(10mL)，然后加入氫氧化鋰(655mg，15.62mmol)和水(5mL)。將反應(yīng)混合物在微波中于150℃加熱50分鐘，然后加入EtOAc(100mL)和水(30mL)，并用2M HCl(10mL)酸化至pH1。
將有機(jī)層分離，用鹽水(50mL)洗滌，接著汽提(stripping)，得到棕色泡沫狀物。重復(fù)該反應(yīng)，并將該材料(5.4g，11.59mmol)在下列條件下進(jìn)行色譜分析，分離非對(duì)映異構(gòu)體 色譜柱 10μm Merck 50mm Kromasil Si 60-10 No.SAT0011 洗脫液 EtOAC/EtOH/TEA/HOAc 95/5/0.2/0.1 將合適的級(jí)分合并并蒸發(fā)，之后將各非對(duì)映異構(gòu)體溶于EtOAc(50mL)并用TFA(2mL)酸化，然后用水(2×25mL)洗滌。接著將產(chǎn)物真空干燥，得到第一洗脫化合物(1.756mg，33％)和第二洗脫化合物(2.012g，37％)固體，其中之一為(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸，其中另一個(gè)為(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸 第一洗脫(實(shí)施例11)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.48-1.56(1H，m)，2.01(3H，s)，2.14-2.20(1H，m)，2.80-2.87(1H，m)，3.20-3.27(1H，m)，3.37-3.43(2H，m)，3.50-3.56(1H，m)，3.93-3.96(1H，m)，4.81(1H，t)，6.44(1H，d)，6.50(1H，d)，7.14-7.21(5H，m)，11.16(1H，s)；MS m/z 467。
第二洗脫(實(shí)施例12)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.90-1.97(2H，m)，2.02(1H，s)，2.02-2.10(1H，m)，2.74-2.79(2H，m)，3.37-3.43(1H，m)，3.35-3.48(3H，m)，4.84-4.91(1H，m)，6.46(1H，d)，6.54(1H，d)，7.08-7.16(4H，m)，7.19(1H，s)，10.95(1H，s)；MS m/z 467。
實(shí)施例13和14(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸和(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸
a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 異構(gòu)體1 異構(gòu)體2 將((1S，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)(2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯(中間體45；2.16g，3.91mmol)溶于THF(15mL)，然后加入氫氧化鋰(655mg，15.62mmol)和水(5mL)。將反應(yīng)混合物在微波中于150℃加熱100分鐘，然后加入EtOAc(100mL)和水(30mL)并用2M HCl(10mL)酸化至pH1。
將有機(jī)層分離，用鹽水(50mL)洗滌，接著汽提，得到棕色泡沫狀物。該材料在下列條件下進(jìn)行色譜分析，分離非對(duì)映異構(gòu)體 色譜柱 16μm Chirose Bond C2NCB(250mm×4.6mm)CT9014 洗脫液 異己烷/IPA/AcOH/DEA 35/65/0.2/0.1 將合適的級(jí)分合并并蒸發(fā)，之后將各非對(duì)映異構(gòu)體溶于EtOAc(50mL)并用TFA(1.2mL)酸化，接著用水(2×25mL)洗滌。然后將產(chǎn)物真空干燥，得到第一洗脫化合物(975mg，56％)和第二洗脫化合物(620mg，36％)固體，其中之一為(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸，其中另一個(gè)為(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸。
第一洗脫(實(shí)施例13)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.06(3H，t)，1.63-1.67(1H，m)，1.91(1H，d)，2.81-2.87(2H，m)，3.32-3.42(5H，m)，3.59(1H，t)，4.79-4.83(1H，m)，7.15(1H，d)，7.20-7.26(3H，m)，7.18-7.28(1H，m)，8.51(1H，d)，12.36(1H，s)；MS m/z 481.2。
第二洗脫(實(shí)施例14)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.05-1.10(3H，m)，1.64-1.72(1H，m)，1.92-1.99(1H，m)，2.72-2.77(1H，m)，2.81-2.87(1H，m)，3.20-3.40(5H，m)，3.60(1H，t)，4.61-4.68(1H，m)，7.09-7.11(1H，m)，7.17-7.26(4H，m)，8.42(1H，d)，12.31(1H，s)；MS m/z 481.2。
實(shí)施例15和16(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸和(2S)-2-((91R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸
a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 異構(gòu)體1異構(gòu)體2 按與實(shí)施例13和14類似的方法，采用中間體46作為原料制備上述化合物。
第一洗脫(實(shí)施例15)1H NMR(400MHz，DMSO-d6))δ1.42-1.79(4H，m)，2.59-2.64(1H，m)，2.81-2.86(1H，m)，3.17(3H，s)，3.25(3H，m)，3.56(1H t)，4.62-4.66(1H，m)，7.11-7.11(1H，m)，7.18-7.25(4H，m)，8.40(1Hd)，12.18(1H，s)，12.32(1H，s)；MS m/z 481.1。
第二洗脫(實(shí)施例16)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.40-1.72(4H，m)，2.69-2.73(1H，m)，2.83-2.88(1H，m)，3.16(3H，s)，3.26-3.29(3H，m)，3.56(1H t)，4.77-4.84(1H，m)，7.11(1H，m)，7.25-7.29(4H，m)，8.49(1H d)，12.18(1H，s)，12.36(1H，s)；MS m/z 481.1。
實(shí)施例17和18(3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸和(3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸
a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知a＝絕對(duì)結(jié)構(gòu)未知 異構(gòu)體1異構(gòu)體2 將3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸甲酯(中間體52；324mg，1.65mmol)溶于MeOH(10mL)并用2M氫氧化鈉(1.65mL，3.28mmol)處理。待于環(huán)境溫度攪拌24小時(shí)之后，將該混合物減壓蒸發(fā)以除去甲醇，用水(20mL)稀釋，用2M HCl酸化至pH4，并用EtOAc(2×20mL)萃取。合并的萃取液用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得到膠狀物。將其溶于DCM并施用于12g硅膠柱，并以EtOAc-15AcOH/己烷0-100％洗脫，得到膠狀的非對(duì)映異構(gòu)體混合物(245mg)。將該非對(duì)映異構(gòu)體在下列條件下通過色譜進(jìn)行分離 色譜柱Merck 50mm 20μm Chiralpak AD 洗脫液MeCN/EtOH/HOAc 90/10/0.1 合并合適的級(jí)分并蒸發(fā)，得到第一洗脫化合物(93mg，12％)和第二洗脫化合物(69mg，8.7％)固體，其中之一為(3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸，其中另一個(gè)為(3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸 第一洗脫(實(shí)施例17)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.59-1.71(2H，m)，2.01-2.06(1H，m)，2.16-2.23(1H，m)，2.50(1H，m)，2.85-2.91(1H，m)，3.18-3.20(4H，m)，3.23-3.46(3H，m)，4.56-4.64(1H，m)，7.13(1H，d)，7.20-7.26(4H，m)，8.54(1H，d)，12.36-12.69(1H，m)；MS m/z 481。
第二洗脫(實(shí)施例18)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.42-1.48(2H，m)，2.29-2.42(2H，m)，2.83-2.89(1H，m)，3.12(3H，s)，3.20-3.40(4H，m)，3.42-3.44(1H，m)，4.63(1H，t)，7.13(1H，s)，7.19-7.25(4H，m)，8.61(1H，d)；MS m/z 481。
中間體12-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-羧酸
將NaOH(15mL，2N水溶液)加至2-氯-5-甲氧基羰基-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯(中間體3，777mg，3.6mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中，并將該混合物加熱回流5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，加入水(250mL)，并將水相用Et2O(2×50mL)洗滌，用HCl(2N)酸化至pH 2，并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(705mg，97％)，其為淺紅色固體。
1H NMR(CDCl3)δ12.6-12.7(1H，b)，12.0-12.1(1H，b)，7.15(1H，s)，6.9(1H，s)；MS m/z 183，185。
通過中間體1的方法，采用2，3-二氯-5-甲氧基羰基-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯(中間體4)作為酯制備下列中間體 中間體25-羧基-2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯
1H NMR(CDCl3)δ7.0(1H，s)；MS m/z 234。
中間體32-氯-5-甲氧基羰基-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯
將鈉(659mg，28.7mmol)加至無水MeOH(20mL)中并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌30分鐘，之后冷卻至-20℃。以MeOH(10mL)溶液的形式加入2-氯噻吩-3-甲醛(Gronowitz et al.，Tetrahedron Vol.321976 p.1403；1.17g，7.2mmol)和疊氮基乙酸甲酯(3.3g，28.7mmol)，并將反應(yīng)混合物在-20℃至10℃攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入飽和氯化銨溶液(300mL)中并用DCM(3×100mL)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×100mL)、鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑。粗產(chǎn)物溶于二甲苯(50mL)并滴加至回流的二甲苯(150mL)中，并在加完之后進(jìn)一步回流攪拌30分鐘。減壓除去溶劑，得到黃色固體，將其重結(jié)晶(25∶75，EtOAC∶異己烷)，得到標(biāo)題化合物(1.06g，69％)，其為固體。
1H NMR(CDCl3)δ9.4-9.2(1H，br)，7.0(1H，s)，6.9(1H，s)，3.9(3H，s)；MS m/z 214，216。
按中間體3的方法，采用4，5-二氯噻吩-2-甲醛(參考DE 2814798)作為醛制備下列中間體 中間體42，3-二氯-5-甲氧基羰基-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯
1H NMR(CDCl3)δ9.2(1H，br)，7.0(1H，s)，3.9(3H，s)；MS m/z 248.2。
中間體5[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸叔丁酯
將HOBT(280mg，2.07mmol)，{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}乙酸叔丁酯(中間體7；575mg，2.07mmol)和EDAC(496mg，2.6mmol)加至2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-羧酸(中間體1；417mg，2.07mmol)于DMA(5mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)。加入水(25mL)并過濾沉淀物，用水(2×20mL)洗滌并干燥。通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，1∶1)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(150mg，16％)，其為泡沫狀物。
1H NMR δ1.5(s，9H)，2.95(dd，1H)，3.5(m，1H)，3.64(dd，1H)，3.8(m，1H)，3.95(m，1H)，4.06(d，2H)，4.57(m，1H)，6.73(m，2H)，6.87(s，1H)，7.27(m，4H)，9.95(s，1H)；MS m/z 459/461(M-H)。
按中間體5的方法，采用{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}乙酸叔丁酯(中間體7)作為胺和適當(dāng)?shù)聂人?2，3-二氯-6H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2)制備下列中間體。
中間體6[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸叔丁酯

中間體7{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}乙酸叔丁酯
向({(1R，2R)-2-[({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)乙酸叔丁酯(中間體8；3.5g，8.03mmol)于THF(30mL)中的溶液中，加入四正丁基氟化銨(8.8mL，1M的THF溶液，8.8mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌1小時(shí)。加入氯化銨溶液(25mL，飽和水溶液)，并將該混合物用EtOAc(2×25mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題化合物(2.2g，100％)，其為油狀物。MS m/z 278。
中間體8({(1R，2R)-2-[({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)乙酸叔丁酯
向({(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)乙酸叔丁酯(中間體9；2.8g，7.42mmol)和2，6-二甲基吡啶(1.73mL，14.83mmol)于無水DCM(20mL)中的溶液中，加入叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(2.6mL，11.1mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌30分鐘。加入氯化銨溶液(20mL，飽和水溶液)，并將該混合物用EtOAc(2×35mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題化合物(3.2g，100％)，其為油狀物。MS m/z 458(M+Na)。
中間體9({(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)乙酸叔丁酯
向[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中間體10；2.63g，10.0mmol)于DCM(35mL)中的溶液中，加入溴乙酸叔丁酯(2.0mL，12.5mmol)，四正丁基硫酸氫銨(850mg，2.5mmol)和NaOH(9.6mL，50％w/v水溶液，120.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌3小時(shí)。加入水(50mL)，并將該混合物用DCM(2×50mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(25mL)、鹽水(25mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。殘余物通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，3∶1)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(350mg，93％)，其為油狀物。MS m/z 400(M+Na)。
中間體10[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]氨基甲酸叔丁酯
將四丁基氟化銨(10.0mL，2.0M的THF溶液，20.0mmol)加至[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中間體11；4.1g，10.9mmol)于THF(50mL)中的溶液中，并在環(huán)境溫度攪拌4小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(100mL)，用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。將粗殘余物研磨(4∶1，異己烷∶乙酸乙酯)，過濾并干燥，得到標(biāo)題化合物(1.5g，54％)，其為白色固體。1H NMR 1.44(s，9H)，2.78(dd，1H)，3.15(m，2H)，3.61(m，1H)，3.75(m，1H)，4.07(m，1H)，4.7(m，1H)，7.19(m，4H)，7.37(m，1H)。
中間體11[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]氨基甲酸叔丁酯
將(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]胺(中間體12；3.1g，11.2mmol)和三乙胺(3.1mL，22.4mmol)溶于DCM(40mL)。加入二碳酸二叔丁酯(2.9g，13.4mmol)/DCM(10mL)，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌24小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(75mL)，用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。粗殘余物通過硅膠色譜(16∶1，異己烷∶乙酸乙酯)純化，得到標(biāo)題化合物(4.2g，100％)，其為無色的油狀物。
1H NMR 0.3(d，6H)，0.85(s，9H)，1.42(s，9H)，2.75(dd，1H)，3.15(m，2H)，3.79(m，1H)，3.95(m，1H)，4.05(m，1H)，7.15(m，4H)，7.3(m，1H)。
中間體12[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]胺
將(1S，2S)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯(中間體13；7.2g，20.2mmol)溶于DMA(50mL)，加入疊氮化鈉(3.94g，60.6mmol)，并將該混合物在60℃攪拌7小時(shí)。將該混合物倒入乙酸乙酯(250mL)中，用水(6×75mL)、鹽水(100mL)洗滌并干燥(MgSO4)。加入鈀/碳(500mg，10％w/w)，并將該混合物在氫氣氛下攪拌6小時(shí)。通過硅藻土(Celite)進(jìn)行過濾，接著減壓蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(5.2g，93％)，其為淡棕色油狀物。
1H NMR 0.07(d，6H)，0.9(s，9H)，2.58(dd，1H)，2.89(m，1H)，3.1(dd，1H)，3.3(寬峰s，2H)，3.41(m，1H)，3.85(m，2H)，7.2(m，4H)。
中間體13(1S，2S)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯
在5℃，將(1S，2S)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)茚滿-2-醇(中間體14；6.3g，22.65mmol)和三乙胺(4.7mL，34.0mmol)溶于DCM(90mL)。加入甲磺酰氯(2.86g，24.9mmol)于DCM(10mL)中的溶液，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(150mL)，用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。粗殘余物通過硅膠色譜(6∶1，異己烷∶乙酸乙酯)純化，得到標(biāo)題化合物(7.2g，89％)，其為無色的油狀物。
1H NMR 0.03(d，6H)，0.85(s，9H)，3.19(s，3H)，3.21(m，2H)，3.45(m，1H)，3.95(m，2H)，5.45(m，1H)，7.22(m，4H)。
中間體14(1S，2S)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)茚滿-2-醇
在10℃，將(1S，2S)-1-(羥基甲基)茚滿-2-醇(中間體15；9.0g，54.8mmol)和咪唑(4.5g，65.8mmol)溶于DCM(75mL)。加入叔丁基二甲基氯硅烷(9.1g，60.3mmol)于DCM(25mL)中的溶液，使該混合物升溫至環(huán)境溫度并攪拌2小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(150mL)，用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去揮發(fā)物。粗殘余物通過硅膠色譜(16∶1，異己烷∶乙酸乙酯)純化，得到標(biāo)題化合物(9.5g，62％)，其為無色的油狀物。1H NMR 0.03(d，6H)，0.9(s，9H)，2.78(dd，1H)，3.0(dd，1H)，3.1(m，1H)，3.9(m，2H)，4.54(m，1H)，4.68(d，1H)，7.2(m，4H)。
中間體15(1S，2S)-1-(羥基甲基)茚滿-2-醇
在0℃和氮?dú)夥障?，?1R，2S)-2-羥基茚滿-1-羧酸甲酯(中間體16；10.56g，55.0mmol)溶于無水THF(100mL)。加入LiBH4(55.0mL，2.0M的THF溶液，110.0mmol)，并反應(yīng)混合物在0～5℃攪拌0.5小時(shí)，使之升溫至環(huán)境溫度并進(jìn)一步攪拌2小時(shí)。將該混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，用乙酸乙酯(200mL)萃取，有機(jī)相用水(2×50mL)、鹽水(50mL)洗滌并干燥(MgSO4)。減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題化合物(9.1g，93％)，其為無色的油狀物。
1HNMR 2.7(m，1H)，2.95(m，1H)，3.05(m，1H)，3.55(m，1H)，3.8(m，1H)，4.55(m，3H)，7.2(m，4H)。
中間體16(1R，2S)-2-羥基茚滿-1-羧酸甲酯
(參考Didier，E et al Tetrahedron 47(27)，4941-4958，1991) 將去離子水(20L)升溫至34℃，加入發(fā)面酵母(3Kg)，并將該混合物攪拌0.5小時(shí)。加入2-氧代茚滿-1-羧酸甲酯(40g，0.21mmol)，將該懸浮液攪拌3天并通過硅藻土過濾。將含水濾液用乙酸乙酯(4×2.5L)萃取，將有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，過濾并減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物。粗殘余物通過快速硅膠色譜(4∶1異己烷∶乙酸乙酯)純化，蒸發(fā)溶劑，所得固體用異己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(10.8g，27％)，其為無色的針狀物。
Mp＝72.5-73.5℃(lit＝73.2℃)；[∝]D＝+48.7°(C＝1.0，CHCl3)(lit＝+48.3°) 1H NMR 2.85(dd，1H)，3.04(dd，1H)，3.61(s，3H)，4.1(d，1H)，4.76(m，1H)，5.2(d，1H)，7.2(m，4H)。
中間體17(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸叔丁酯
將HOBT(185mg，1.37mmol)，(2R/S)-{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}丙酸叔丁酯(中間體19；400mg，1.37mmol)和EDAC(328mg，1.71mmol)加至2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-羧酸(中間體1；276mg，1.37mmol)于DMA(5mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)。加入水(25mL)并過濾沉淀物，用水(2×20mL)洗滌并干燥。通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，2∶1)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(410mg，63％)，其為泡沫狀物。
1H NMRδ1.37(dd，3H)，1.45(d，9H)，2.98(m，1H)，3.48(m，1H)，3.65(m，1.5H)，3.85(m，2H)，4.12(m，0.5H)，6.64(d，0.5H)，6.7(dd，1H)，6.85(s，1H)，6.9(d，0.5H)，7.25(m，4H)，10.72(s，1H)；MS m/z 473/475(M-H)。
按中間體17的方法，采用(2R/S)-{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}丙酸叔丁酯(中間體19)作為胺以及適宜的羧酸(2，3-二氯-6H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2)制備下列中間體 中間體18(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸叔丁酯

中間體19(2R/S)-{[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]甲氧基}丙酸叔丁酯
向(2R/S)-({(1R，2R)-2-[({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)丙酸叔丁酯(中間體20；3.1g，7.0mmol)于THF(50mL)中的溶液中，加入四丁基氟化銨(9.0mL，1M的THF溶液，9.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌4小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(25mL)，并將該混合物用EtOAc(2×25mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題化合物(1.6g，80％)，其為油狀物。
1H NMRδ(CDCl3)1.48(d，9H)，3.0(ddd，1H)，3.32(m，1H)，3.55(m，3H)，3.7(m，1H)，3.9(m，1H)，4.04(m，1H)，7.17(m，4H)；MS m/z 292。
中間體20(2R/S)-({(1R，2R)-2-[({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)丙酸叔丁酯
向(2R/S)-({(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)丙酸叔丁酯(中間體21；2.75g，7.02mmol)和2，6-二甲基吡啶(1.6mL，14.0mmol)于無水DCM(25mL)中的溶液中，加入叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(2.4mL，10.54mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌30分鐘。加入飽和氯化銨水溶液(20mL)，并將該混合物用EtOAc(2×35mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到標(biāo)題化合物(3.2g，100％)，其為油狀物。MS m/z 472(M+Na)。
中間體21(2R/S)-({(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}甲氧基)丙酸叔丁酯
向[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中間體102.63g，10.0mmol)于DCM(30mL)中的溶液中，加入(2R/S)-溴丙酸叔丁基酯(2.6g，12.5mmol)，四丁基硫酸氫銨(850mg，2.5mmol)和氫氧化鈉(9.6mL，50％w/v水溶液，120.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌3小時(shí)。加入水(50mL)，并將該混合物用DCM(2×50mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(25mL)、鹽水(25mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓除去揮發(fā)物。殘余物通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，3∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(2.5g，64％)，其為油狀物。
1H NMRδ(CDCl3)1.42(m，21H)，2.78(ddd，1H)，3.23(m，1H)，3.35(m，1H)，3.57(m，1H)，4.85(m，2H)，4.14(m，1H)，4.9(m，1H)，7.17(m，3H)，7.37(m，1H)；MS m/z 414(M+Na)。
中間體223-((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸乙酯
向[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲基]丙二酸二乙酯(中間體23；500mg，1.02mmol)于DMSO(8mL)和水(300μL)中的溶液中，加入氯化納(230mg，4.09mmol)，并將反應(yīng)混合物在160℃加熱20小時(shí)。減壓蒸發(fā)揮發(fā)物，殘余物通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(150mg，35％)，其為泡沫狀物。
1H NMRδ(CDCl3)1.23(t，3H)，2.02(m，1H)，2.18(m，1H)，2.57(m，2H)，2.85(dd，1H)，3.21(m，1H)，3.6(dd，1H)，4.15(q，2H)，4.55(m，1H)，6.65(d，1H)，6.72(s，1H)，6.87(s，1H)，7.23(m，4H，10.24(s，1H)；MS m/z 417/419。
中間體23[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲基]丙二酸二乙酯
向丙二酸二乙酯(1.12g，7.0mmol)于無水THF(15mL)中的-78℃溶液中，加入二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉(7mL，1M的THF溶液，7.0mmol)。使反應(yīng)混合物升溫至10℃，加入((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲基甲磺酸酯(中間體24；850mg，2.0mmol)于無水THF(15mL)中的溶液，并將該反應(yīng)混合物在65℃攪拌20小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(30mL)，并將該混合物用EtOAc(2×30mL)萃取。有機(jī)萃取液用水(25mL)、鹽水(25mL)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并減壓除去揮發(fā)物。殘余物通過快速色譜(SiO2，異己烷∶EtOAc，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(500mg，51％)，其為泡沫狀物。
1H NMRδ(CDCl3)1.22(t，3H)，1.26(t，3H)，2.21(m，1H)，2.48(m，1H)，2.82(dd，1H)，3.19(m，1H)，3.65(dd，1H)，3.76(dd，1H)，4.2(m，4H)，4.5(m，1H)，6.78(s，1H)，6.82(d，1H)，6.88(s，1H)，7.24(m，4H)，10.4(s，1H)；MS m/z511/513(M+Na)。
中間體24((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲基甲磺酸酯
將2-氯-N-[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酰胺(中間體26347mg，1.0mmol)和三乙胺(350μl，2.5mmol)溶于THF(10mL)。加入甲磺酰氯(126mg，1.1mmol)于THF(5mL)中的溶液，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌24小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(25mL)，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(370g，87％)，其為淡棕色泡沫狀物。
1H NMR 2.95(dd，1H)，3.18(s，3H)，3.3(dd，1H)，3.58(m，1H)，4.45(m，1H)，4.58(m，2H)，7.02(s，1H)，7.15(s，1H)，7.23(m，3H)，7.35(m，1H)，8.48(d，1H)，11.86(s，1H)；MS m/z 425.1/427.1。
中間體25((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲基甲磺酸酯
將2，3-二氯-N-[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酰胺(實(shí)施例27；1.2g，3.15mmol)和三乙胺(658μl，4.73mmol)溶于THF(20mL)。加入甲磺酰氯(397mg，3.47mmol)于THF(5mL)中的溶液，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌3小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(50mL)，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.45g，100％)，其為淡棕色泡沫狀物。
1H NMR(CDCl3)δ2.95(dd，1H)，3.5(dd，1H)，3.62(m，1H)，4.45(dd，1H)，4.65(dd，1H)，4.8(m，1H)，6.4(d，1H)，6.75(s，1H)，7.25(m，4H)，9.8(s，1H)；MS m/z 481，483(M+Na)。
中間體262-氯-N-[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酰胺
將N-[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酰胺(中間體28；320mg，0.7mmol)溶于THF(10mL)，加入四丁基氟化銨(5mL，1M的THF溶液，5.0mmol)，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌4小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(15mL)，用水(2×5mL)、鹽水(5mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑。粗殘余物經(jīng)過結(jié)晶(乙酸乙酯∶異己烷，1∶1)，得到標(biāo)題化合物(160mg，66％)，其為無色固體。
1H NMR 2.93(dd，1H)，3.32(m，1H)，3.73(m，2H)，4.55(m，1H)，4.8(t，1H)，7.1(s，1H)，7.22(m，4H)，7.4(m，1H)，8.45(d，1H)，11.9(s，1H)；MS m/z345，347。
中間體272，3-二氯-N-[(1R，2R)-1-(羥基甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酰胺
將N-[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酰胺(中間體29；286mg，0.56mmol)溶于THF(5mL)，加入四丁基氟化銨(2mL，1M的THF溶液，2.0mmol)，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(15mL)，用水(2×5mL)、鹽水(5mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑。粗殘余物經(jīng)過結(jié)晶(乙酸乙酯)，得到標(biāo)題化合物(120mg，57％)，其為無色固體。
1H NMRδ2.9(dd，1H)，3.3(m，1H)，3.68(m，2H)，4.55(m，1H)，4.75(t，1H)，7.2(m，4H)，7.39(m，1H)，8.5(d，1H)，12.35(s，1H)；MS m/z 381，383，385。
中間體28N-[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酰胺
將[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]胺(中間體12；277mg，1.0mmol)，2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-羧酸(中間體1；201mg，1.0mmol)和DIPEA(174μl，1.0mmol)溶于DCM(10mL)。加入HOBT(135mg，1mmol)和EDCI(240mg，1.25mmol)，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(25mL)，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑。粗殘余物通過快速硅膠色譜(6∶1異己烷∶乙酸乙酯)純化，得到標(biāo)題化合物(320mg，70％)，其為黃色泡沫狀物。
1H NMR 0.03(d，6H)，0.85(s，9H)，2.9(dd，1H)，3.35(m，1H)，3.9(m，2H)，4.58(m，1H)，7.05(s，1H)，7.2(m，4H)，7.38(m，1H)，8.4(d，1H)，11.87(s，1H)。
中間體29N-[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]-2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酰胺
將[(1R，2R)-1-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2，3-二氫-1H-茚-2-基]胺(中間體12；277.0mg，1.0mmol)，2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2；236mg，1.0mmol)和DIPEA(174μl，1.0mmol)溶于DCM(10mL)。加入HOBT(135mg，1mmol)和EDCI(240mg，1.25mmol)，并將該混合物在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶于乙酸乙酯(25mL)，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓除去溶劑。粗殘余物通過快速硅膠色譜(6∶1，異己烷∶乙酸乙酯)純化，得到標(biāo)題化合物(286mg，56％)，其為橙色泡沫狀物。
1H NMRδ0.03(d，6H)，0.85(s，9H)，2.9(dd，1H)，3.35(m，1H)，4.93(m，1H)，7.17(s，1H)，7.23(m，4H)，7.38(m，1H)，8.5(d，1H)，12.37(s，1H)。
中間體303-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸甲基酯
將3-巰基丙酸甲酯(664μL，6mmol)溶于THF(15mL)，并用冰/水冷卻至5℃。滴加NaHMDS(6mL，1M的THF溶液)溶液，同時(shí)保持溫度低于10℃。在5℃攪拌30分鐘之后，加入甲磺酸(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲基酯(中間體25；916mg，2mmol)于THF(5mL)中的溶液，使該混合物升溫至環(huán)境溫度并攪拌過夜。加入飽和氯化銨(50mL)，并將該混合物用DCM(2×50mL)萃取。將合并的DCM萃取液干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到棕色油狀物，其經(jīng)過硅膠色譜(40g，EtOAc/己烷梯度0-30％)純化，得到標(biāo)題化合物，該標(biāo)題化合物為澄清的無色油狀物，并在靜置時(shí)結(jié)晶(770mg，80％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ2.6(t，2H)，2.75(t，2H)，2.9(m，2H)，3.0(m，1H)，3.3(m，1H)，3.45(m，1H)，3.6(s，3H)，4.6(m，1H)，7.15(s，1H)，7.2(m，3H)，7.4(m，1H)，8.5(d，1H)，12.4(s，1H)；MS m/z 483。
中間體31((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸甲酯
將2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2，463mg，2.0mmol)，[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]乙酸甲酯鹽酸鹽(中間體32，500mg，2.1mmol)，三乙胺(0.63mL，4.5mmol)和HOBT(307mg，2.3mmol)溶于DMF(20mL)。加入EDAC(436mg，2.3mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌19小時(shí)。減壓除去揮發(fā)物，并將粗產(chǎn)物溶于EtOAc(15mL)。有機(jī)相用水(3×15mL)、鹽水(15mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并真空除去溶劑。通過快速柱色譜進(jìn)行純化(SiO2，1∶5 EtOAc∶己烷至3∶2 EtOAc∶己烷梯度)，得到標(biāo)題化合物(783mg，94％)，其為固體。
1H NMRδ2.72(d，2H)，2.89(m，1H)，3.24(m，1H)，3.56(m，4H)，4.43(m，1H)，7.16(m，5H)，8.47(d，1H)，12.31(s，1H)；MSm/z 423。
中間體32[(1R，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]乙酸甲酯鹽酸鹽
將{(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}乙酸甲酯(中間體33；4.09g，13mmol)溶于DCM(20mL)，并用HCl(20mL，4M的二烷溶液)處理，且在環(huán)境溫度攪拌1小時(shí)。然后減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物。將所得白色固體用乙醚(70mL)攪拌，通過過濾回收，得到標(biāo)題化合物(2.96g，91％)。
1H NMRδ2.73(m，1H)，2.99(m，2H)，3.31(m，1H)，3.60(m，4H)，3.76(m，1H)，7.18(m，4H)，8.51(s，3H)；MS m/z 206。
中間體33{(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}乙酸甲酯
將氯化納(405mg，6.93mmol)加至{(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}丙二酸二甲酯(中間體34；630mg，1.73mmol)于包含4滴水的DMSO(8mL)中的溶液中，并將該反應(yīng)混合物在160℃加熱46小時(shí)。在Genevac EZ-2離心蒸發(fā)儀上除去溶劑，并將殘余物吸收于水(25mL)和EtOAc(25mL)中。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)。通過柱色譜(SiO2，EtOAc∶己烷，1∶2)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(360mg，68％)，其為固體。
1H NMR(DMSO)δ1.45(s，9H)，2.78(m，2H)，3.38(m，2H)，3.75(s，3H)，4.13(m，1H)，4.87(br。s，1H)，7.17(m，4H)；MS m/z 386[M+Na+MeCN]+。
中間體34{(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}丙二酸二甲酯
將NaHMDS(6mL，1M的THF溶液，6.00mmol)加至攪拌著的(1S，2S)-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯(中間體35，1.79g，5.46mmol)于THF(24mL)中的溶液中，同時(shí)保持內(nèi)部溫度＜20℃。30分鐘之后，加入丙二酸二甲酯(0.69mL，6.00mmol)，接著加入NaHMDS(6mL，1M的THF溶液，6.00mmol)，并將該反應(yīng)混合物在50℃加熱18.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻(至環(huán)境溫度)并用飽和氯化銨水溶液(50mL)和Et2O(50ml)淬滅，水層再次用Et2O(50mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，過濾，并真空除去揮發(fā)物。通過快速柱色譜(SiO2，洗脫液梯度1∶3至1∶1EtOAc∶己烷)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(630mg，32％)，其為白色固體。
1H NMRδ1.45(s，9H)，2.78(dd，1H)，3.37(dd，1H)，3.72(m，8H)，4.40(m，1H)，4.78(br。s，1H)，7.20(m，4H)；MS m/z 386[M+Na]。
中間體35(1S，2S)-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯
將甲磺酰氯(2.24mL，30.03mmol)加至冷卻(至0℃)的[(1S，2S)-2-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]氨基甲酸叔丁酯(中間體36，6.80g，27.3mmol)和三乙胺(4.01mL，30.03mmol)于DCM(100mL)中的溶液中，并在0℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)通過加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(100mL)淬滅，將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾，并真空除去揮發(fā)物。粗產(chǎn)物用熱Et2O(40mL)研磨，冷卻并過濾，得到標(biāo)題化合物(8.11g，91％)，其為白色固體。
1H NMRδ1.45(s，9H)，3.18(m，4H)，3.47(dd，1H)，4.78(s，1H)5.19(m，2H)，7.28(m，4H)；MS m/z 350[M+Na]+。
中間體36[(1S，2S)-2-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]氨基甲酸叔丁酯
先后將THF(100mL)和1M氫氧化鈉(水溶液)加至(1S，2S)(+)-反式-1-氨基-2-茚滿醇(CAS Reg.No.163061-74-3，5.00g，33.55mmol)中。然后加入二碳酸二叔丁酯(7.30g，33.55mmol)并攪拌16小時(shí)。真空除去THF，余下的水層用檸檬酸(5％w/v水溶液)酸化至pH2，并用EtOAc(150mL)稀釋。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾，并真空除去揮發(fā)物。將粗產(chǎn)物固體用熱的Et2O∶己烷(1∶1，40mL)研磨，將該懸浮液冷卻并過濾，得到標(biāo)題化合物(6.80g，81％)，其為白色固體。
1H NMRδ1.54(s，9H)，2.92(dd，1H)，3.28(dd，1H)，4.23(s，1H)，4.42(m，1H)，4.93(t，1H)，5.03(s，1H)，7.22(m，4H)；MS m/z 313[M+Na+MeCN]+。
中間體373-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸
將3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸甲基酯(中間體38；283mg，0.59mmol)溶于MeOH/THF(30mL)，之后加入2M NaOH(2.97mL，5.93mmol)。將反應(yīng)混合物在微波中于140℃加熱5分鐘，然后加入EtOAc(30mL)和水(10mL)，并用2M HCl(5mL)酸化至pH1。分離有機(jī)層，然后用鹽水(50mL)洗滌，接著汽提，得到標(biāo)題化合物(257mg，93％)，其為奶油泡沫狀物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.01-0.05(2H，m)，0.33-0.38(2H，m)，0.70(1H，m)，1.10-1.30(1H，m)，1.73-1.81(1H，m)，2.62-2.83(2H，m)，3.25(1H，m)，3.53-3.57(1H，m)，4.52-4.82(1H，m)，7.11-7.25(5H，m)，8.44(1H，m)，12.24(2H，m)；MS m/z 462.9。
中間體383-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸甲基酯
將2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2；189mg，0.80mmol)，2-((1R，2R)-2-氨基-茚滿-1-基)-3-環(huán)丙基-丙酸甲基酯鹽酸鹽(中間體39；250mg，0.84mmol)，三乙胺(1.53mL，11.0mmol)和HOBT(125mg，0.93mmol)溶于DMF(15mL)。加入EDAC(178mg，0.93mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌19小時(shí)。加入水(15mL)，然后將該混合物用EtOAc(2×30mL)洗滌。將有機(jī)相合并，用水(2×30mL)、2M HCl(30mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)洗滌，然后真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(336mg，88％)，其為固體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.01-0.04(2H，m)，0.34-0.35(2H，m)，0.66-0.71(1H，m)，1.25-1.40(1H，m)，1.69-1.77(1H，m)，2.70-2.90(2H，m)，3.25(1H，m)，3.51-3.59(1H，m)，4.55-4.79(1H，m)，7.07-7.26(5H，m)，8.40(1H，d)，8.49(1H，m)12.00(1H，s)；MS m/z 477.1。
中間體392-((1R，2R)-2-氨基-茚滿-1-基)-3-環(huán)丙基-丙酸甲基酯鹽酸鹽
按類似于合成中間體32所用的方式，采用中間體40作為原料制備上述化合物 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.00(2H，m)，0.35(2H，m)，0.60(1H，m)，1.34-1.40(1H，m)，1.56-1.64(1H，m)，2.68-2.93(2H，m)，3.35(1H，m)，3.51-3.53(4H，m)，3.89-3.92(1H，m)，7.15-7.30(4H，m)，8.34(3H，s)；MS m/z 260.4。
中間體402-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-3-環(huán)丙基-丙酸甲基酯
按類似于合成中間體33所用的方式，采用中間體41作為原料制備上述化合物 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.00(2H，m)，0.33-0.38(2H，m)，0.70(1H，m)，1.40(9H，d)，1.71-1.74(1H，m)，2.65-2.71(2H，m)，3.09(1H，m)，3.33(1H，m)，3.59(3H，d)，4.13(1H，m)，7.00-7.19(5H，m)；MS m/z 3.82.3[M+Na]。
中間體412-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-3-環(huán)丙基-丙酸甲基酯；以及乙酸甲基酯的混合物
將NaHMDS(10.5mL，1M的THF溶液，10.5mmol)加至攪拌著的{(1R，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}丙二酸二甲酯(中間體34；3.82g，10.5mmol)于DMD(50mL)中的溶液中，并將該溶液攪拌30分鐘。加入環(huán)丙基甲基溴(1.1mL，11.6mmol)，接著加入碘化鉀(1.9g，11.6mmol)，然后在100℃加熱2小時(shí)。加入水(50mL)，然后將該混合物用EtOAc(2×100mL)洗滌。將有機(jī)相合并，先后用水(3×100mL)和2M鹽水(100mL)洗滌，接著干燥(MgSO4)，過濾并真空蒸發(fā)。通過快速柱色譜(SiO2，洗脫液梯度0％至25％EtOAc∶己烷)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(2.53g，58％)，其為無色膠狀物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.00(2H，m)，0.36-0.41(2H，m)，0.79(1H，s)，1.39(9H，s)，1.88-1.94(2H，m)，2.63(1H，m)，3.06-3.12(1H，m)，3.50(3H，s)，3.61(3H，s)，3.93(1H，d)，4.30(1H，t)，7.12-7.14(1H，m)，7.14-7.19(4H，m)；MS m/z 440.3[M+Na]。
中間體42((1S，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)(2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯
將2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2，4.25g，18.0mmol)，[(1S，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基](2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯鹽酸鹽(中間體43，4.25g，18.0mmol)，三乙胺(3.765mL，27.0mmol)和HOBT(2.435g，18mmol)溶于DMA(50mL)。加入EDAC(3.80g，19.8mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌19小時(shí)。加入水(50mL)，然后將該混合物用EtOAc(2×100mL)洗滌。將有機(jī)相合并，并用水(2×100mL)、2M HCl(100mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌，接著真空除去溶劑。通過快速柱色譜(SiO2，0∶1 EtOAc∶己烷至1∶1 EtOAc∶己烷梯度)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(5.071g，52％)，其為固體。MS m/z 423。
中間體43[(1S，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基](2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯鹽酸鹽
將{(1S，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}(2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯(中間體44，1.64g，3.89mmol)用HCl(40mL，4M的二烷溶液)處理，并在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)。然后減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物，產(chǎn)物進(jìn)一步真空干燥，得到標(biāo)題化合物，其為油狀物(1.435g，100％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.08-2.14(2H，m)，2.89-2.94(1H，m)，3.15-3.19(2H，m)，3.40(2H，t)，3.58-3.58(6H，m)，3.57-3.62(1H，m)，3.66-3.69(3H，m)，3.91(1H，s)，4.11(1H，d)，7.18(1H，d)，7.22-7.31(3H，m)，8.30(3H，s)；MS m/z 322。
中間體44{(1S，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}(2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯
將NaHMDS(10.08mL，1M的THF溶液，10.08mmol)加至攪拌著的(1S，2S)-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯(中間體35，3g，9.16mmol)于THF(30mL)中的溶液中，同時(shí)保持內(nèi)部溫度＜5℃。30分鐘之后，加入(2-甲氧基乙基)丙二酸二甲酯(參考CA 869089-20-3；1.745g，9.16mmol)，接著加入NaHMDS(5mL，1M的THF溶液，5.00mmol)，并使反應(yīng)混合物升溫至室溫，且攪拌18.5小時(shí)。將反應(yīng)用飽和氯化銨水溶液(50mL)和Et2O(50ml)淬滅，水層再次用Et2O(50mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，過濾，并真空除去揮發(fā)物。通過快速柱色譜(SiO2，洗脫液梯度0％至30％EtOAc∶己烷)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(1.64g，43％)，其為橙色油狀物。MS m/z 444[M+Na]。
中間體45((1S，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)(2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯
將2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(中間體2；1.18g，5.0mmol)，[(1S，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基](2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯鹽酸鹽(中間體47；1.86g，5.0mmol)，三乙胺(1.53mL，11.0mmol)和HOBT(742mg，5.5mmol)溶于DMF(50mL)。加入EDAC(1.10g，5.5mmol)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌19小時(shí)。加入水(50mL)，然后將該混合物用EtOAc(2×100mL)洗滌。合并有機(jī)相，并用水(2×100mL)、2M HCl(100mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌，然后真空除去溶劑。通過快速柱色譜(SiO2，DCM至1∶4EtOAc∶DCM梯度)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(2.22g，80％)，其為固體。
1H NMRδ1.00(3H，t)，2.14-2.26(2H，m)，2.69(1H，d)，2.75(1H，d)，3.22(1H，s)，3.35-3.38(4H，m)，3.51(3H，s)，3.57(3H，s)，4.07(1H，d)，4.73-4.78(1H，m)，7.11-7.11(1H，m)，7.15-7.25(4H，m)，8.53(1H，d)，12.29(1H，s)；MS m/z 553.1。
中間體46((1S，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)(3-甲氧基丙基)丙二酸二甲酯
按類似于中間體45的方法，采用中間體48作為原料制備上述化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.45-1.49(2H，m)，2.00(2H，s)，2.71-2.76(1H，m)，3.14(3H，s)，3.23(2H，t)，3.53(3H，s)，3.60(3H，s)，4.08(1H，d)，4.79-4.82(1H，m)，7.12-7.12(1H，m)，7.18-7.24(4H，m)，8.54(1H，d)，12.31(1H，s)；MS m/z 553.2。
中間體47[(1S，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基](2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯鹽酸鹽
將{(1S，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}(2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯(中間體49；2.30g，5.28mmol)溶于DCM/MeOH(40mL)中并用HCl(20mL，4M的二烷溶液)處理，然后在環(huán)境溫度攪拌1小時(shí)。然后減壓蒸發(fā)除去揮發(fā)物。將該膠狀物與氯仿(60mL)然后與乙醚(60mL)共沸，得到標(biāo)題化合物，其為白色固體(1.87g，95％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.08(3H，t)，2.12(2H，t)，3.36(2H，t)，2.91(1H，d)，3.30(3H，m)，3.44(2H，t)，3.58(3H，s)，3.69(3H，s)，3.92(1H，s)，4.12(1H，d)，7.19(1H，d)，7.23-7.26(1H，m)，7.30-7.31(2H，m)，8.30-8.33(3H，m)；MS m/z 336.4。
中間體48[(1S，2R)-2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基](3-甲氧基丙基)丙二酸二甲酯鹽酸鹽
按類似于中間體47的方法，采用中間體50作為原料制備上述化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.28-1.41(1H，m)，1.55-1.63(1H，m)，1.80-2.05(2H，m)，2.92(1H，d)，3.28-3.36(5H，m)，3.56(3H，s)，3.69(3H，s)，3.84(1H，s)，4.08(1H，s)，7.20-7.32(4H，m)，8.29(3H，s)；MS m/z 336.4。
中間體49{(1S，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}(2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯
將NaHMDS(12.2mL，1M的THF溶液，12.2mmol)加至攪拌著的(1S，2S)-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-2-基甲磺酸酯(中間體35；4.00g，12.2mmol)于THF(70mL)中的溶液中，同時(shí)保持內(nèi)部溫度＜0-5℃。除去冷卻浴，并將該溶液攪拌30分鐘(此時(shí)溫度為12℃)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，接著加入(2-乙氧基乙基)丙二酸二甲酯(C.A.163669-25-8)(2.70g，13.5mmol)，隨后加入NaHMDS(6.12mL，1M的THF溶液，6.12mmol)，同時(shí)保持內(nèi)部溫度＜0-3℃。保溫5分鐘，之后除去冷卻浴并攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)用1M檸檬酸(100mL)和EtOAc(200ml)淬滅。分離的有機(jī)萃取液先后用水(100mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌，然后干燥(MgSO4)，過濾并真空蒸發(fā)。通過快速柱色譜(SiO2，洗脫液梯度0％至30％EtOAc∶己烷)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(2.32g，44％)，其為黃色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.06(3H，t)，1.39-1.39(9H，s)，2.12-2.19(2H，m)，2.60-2.65(1H，m)，3.09-3.15(1H，m)，3.34-3.39(4H，m)，3.53(3H，s)，3.61(3H，s)，3.90(1H，d)，4.23(1H，s)，7.12-7.14(5H，m)；MS m/z 458.4[M+Na]。
中間體50{(1S，2R)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2，3-二氫-1H-茚-1-基}(3-甲氧基丙基)丙二酸二甲酯
按類似于中間體49的方法，采用中間體51和中間體35作為原料制備上述化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.42-1.49(2H，m)，1.94-1.98(2H，m)，2.05(1H，m)，3.08-3.14(1H，m)，3.28-3.3 1(5H，m)，3.52(3H，s)，3.61(3H，s)，3.80(1H，d)，4.27(1H，s)，7.12-7.17(4H，m)；MS m/z 458.4[M+Na]。
中間體51(3-甲氧基丙基)丙二酸二甲酯
向攪拌著的冷卻于冰浴中的NaH(60％的礦物油分散液，2.44g，61mmol)于DMF(100mL)中的懸浮液中，小心加入丙二酸二甲酯(6.34mL，56mmol)。將所得產(chǎn)物在冰浴中攪拌30分鐘，然后用1-溴-3-甲氧基丙烷(8.50g，56mmol)處理。然后將反應(yīng)混合物在60℃加熱3小時(shí)，然后在環(huán)境溫度攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水(100mL)中并用乙醚(2×150mL)萃取。合并醚層，然后用水(3×150mL)和鹽水(150mL)洗滌，接著干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)，得到油狀物。將該油狀物靜置1小時(shí)并分為兩層。分離底層，得到標(biāo)題化合物(8.15g，72％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.46-1.52(2H，m)，1.78-1.84(2H，m)，3.12(3H，s)，3.30(2H，q)，3.53(1H，t)，3.66(6H，t)；MS未觀察到質(zhì)量離子(mass ion)。
中間體523-{(R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸甲酯
將[(1R，2R)-1-(1-氰基甲基-3-甲氧基-丙基)-茚滿-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(中間體53；2.47g，7.18mmol)溶于二烷(50mL)，加入濃HCl(50mL)，并將該混合物在100℃加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，蒸發(fā)至干，并真空干燥。將所得固體溶于甲醇(75mL)并加入4M HCl/二烷(25mL)。待在環(huán)境溫度攪拌2小時(shí)之后，將該混合物蒸干。將殘余物兩次溶于甲醇(50mL)并再次蒸發(fā)，最后在高真空干燥，得到3-(2-氨基-茚滿-1-基)-5-甲氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽，其為白色固體(2.19g)。
將粗產(chǎn)物懸浮于DCM(50mL)中并加入2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸(1.65g，7mmol)，HOBT(945mg，7mmol)和DIPEA(6.085mL，35mmol)。將該混合物用EDCI(1.675g，8.75mmol)處理，在環(huán)境溫度攪拌72小時(shí)，然后用2M HCl(50mL)、水(3×25mL)和鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到棕色油狀物(3.8g)。對(duì)該粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠色譜分析(EtOAc/DCM0-50％)，分離出標(biāo)題化合物，其為膠狀物(324mg，9.3％)。MSm/z495。
中間體53[(1R，2R)-1-(1-氰基甲基-3-甲氧基-丙基)-茚滿-2-基]-氨基甲酸叔丁酯
將甲磺酸2-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-4-甲氧基-丁基酯(中間體54；3.46g，8.38mmol)溶于DMSO(30mL)。加入氰化鈉(822mg，16.76mmol)，并將該混合物在120℃加熱1小時(shí)。待冷卻至環(huán)境溫度之后，加入水(100mL)并將該混合物用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的萃取液用水(2×50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到油狀物。該粗產(chǎn)物通過硅膠色譜(EtOAc/己烷0-50％)進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物，其為膠狀物(2.47g)；MS m/z245 M-Boc。
中間體54甲磺酸2-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-4-甲氧基-丁基酯
將[(1R，2R)-1-(1-羥基甲基-3-甲氧基-丙基)-茚滿-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(中間體55；3g，8.96mmol)溶于DCM(50mL)并用冰水冷卻。加入三乙胺，然后滴加甲磺酰氯(0.73mL，9.4mmol)于DCM(5mL)中的溶液。加完之后，使反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度并攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(100mL)稀釋，用1M檸檬酸溶液(50mL)和水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為膠狀物(3.4g，92％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.41(9H，s)，1.66(2H，d)，2.69-2.75(1H，m)，3.10(3H，s)，3.15(3H，s)，3.28-3.31(2H，m)，3.39-3.45(2H，m)，3.45-3.5(3H，m)，4.01-4.24(1H，m)，7.16-7.23(5H，m)。
中間體55(1R，2R)-1-(1-羥基甲基-3-甲氧基-丙基)-茚滿-2-基]-氨基甲酸叔丁酯
將2-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-4-甲氧基-丁酸甲酯(中間體56；4g，11.02mmol)溶于THF(20mL)并在氮?dú)夥障聰嚢?。將該溶液用冰水浴冷卻并用2M硼氫化鋰于THF中的溶液(10mL，20mmol)處理。除去冷卻浴，并使反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度。4小時(shí)之后，再次加入10mL的硼氫化鋰溶液，并在環(huán)境溫度繼續(xù)攪拌18小時(shí)。將該混合物倒入水(100mL)中，用檸檬酸酸化，并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并的萃取液用水(200mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到油狀物，其通過硅膠色譜(EtOAc/己烷0-50％)進(jìn)一步純化，得到油狀的標(biāo)題化合物(3g，81％)。
MS m/z 236(M-Boc)。
中間體562-((1R，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-4-甲氧基-丁酸甲基酯
將2-((1S，2R)-2-叔丁氧基羰基氨基-茚滿-1-基)-2-(2-甲氧基-乙基)-丙二酸二甲酯(8g，19mmol)溶于DMSO(100mL)并加入水(4.56mL)和氯化納(4.45g，76mmol)。將該混合物在160℃加入6小時(shí)，然后用水(500mL)稀釋并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的萃取液用水(2×100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到膠狀物，其通過硅膠色譜進(jìn)一步純化，以EtOAc/己烷梯度液(0-50％)洗脫，得到膠狀標(biāo)題化合物(4.41g，64％)。MS m/z 364。
權(quán)利要求
1.式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
式中
Z為CH或氮；
R4和R5一起為-S-C(R6)＝C(R7)-或者-C(R7)＝C(R6)-S-；
R6和R7獨(dú)立地選自氫，鹵素，硝基，氰基，羥基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，三氟甲氧基，羧基，氨基甲?；?，C1-4烷基，C2-4烯基，C2-4炔基，C1-4烷氧基和C1-4烷?；?br> n為0，1或2；
R1獨(dú)立地選自鹵素，硝基，氰基，羥基，羧基，氨基甲?；?，N-C1-4烷基氨基甲酰基，N，N-(C1-4烷基)2氨基甲?；?，氨磺?；琋-C1-4烷基氨磺?；?，N，N-(C1-4烷基)2氨磺?；珻1-4烷基S(O)b(其中b為0、1或2)，-OS(O)2C1-4烷基，C1-4烷基，C2-4烯基，C2-4炔基，C1-4烷氧基，C1-4烷?；?，C1-4烷酰氧基，羥基C1-4烷基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，三氟甲氧基和-NHSO2C1-4烷基；
或者，當(dāng)n為2時(shí)，兩個(gè)R1可與其相連的碳原子一起形成4至7元飽和環(huán)，該環(huán)任選包含1或2個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、S或N的雜原子，并任選被一或兩個(gè)甲基所取代；
Z1為下列a)或b)
a)式-Y-COOH，其中Y為C1-6亞烷基或C3-6亞環(huán)烷基；或者
b)式-Y-COOH，其中Y為C1-6亞烷基，該C1-6亞烷基
i)被選自-N(R7)-，-O-，-S-，-SO-和-SO2-中的一個(gè)雜原子間隔(條件是該雜原子不與所述羧基相鄰，且其中R7為氫，C1-4烷基，C1-4烷?；駽1-4烷基磺?；?；和/或
ii)在碳上被1或2個(gè)選自下列的取代基所取代氰基，氧代，羥基，C1-3烷氧基，C1-3烷?；?，C1-3烷氧基C2-3烷氧基，羥基C1-3烷基，羥基C2-3烷氧基，C3-6環(huán)烷基，C3-6環(huán)烷基C1-3烷基，C3-6環(huán)烷氧基，C3-6環(huán)烷基C1-3烷氧基，C1-3烷基S(O)c(其中c為0、1或2)，-CON(R2)R3，-N(R2)COR3，-SO2N(R2)R3和-N(R2)SO2R3，其中R2和R3獨(dú)立地選自氫和C1-3烷基；
或者當(dāng)所述亞烷基被一個(gè)雜原子間隔時(shí)，其還可在碳上任選被2個(gè)取代基所取代，所述取代基與其相連的碳原子一起形成C3-6環(huán)烷基環(huán)；
條件是該化合物不為(+/-)-反式-(-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸。
2.權(quán)利要求1的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其為式(1”)的化合物
3.權(quán)利要求1或2的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n＝0。
4.權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Y選自選項(xiàng)a)。
5.權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Y選自選項(xiàng)b)。
6.權(quán)利要求5的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Y選自-CH2XCH2-，-CH2XCH2CH2-，-CH2CH2XCH2，-CH(Rf)XCH2-，-CH(Rf)XCH2CH2-，-CH(Rf)CH2XCH2-，-CH2CH(Rf)XCH2-，-CH2CH2XCH(Rf)-，-CH2XCH(Rf)CH2-，-CH2XCH(Rf)-，-CH2XCRf2-，-CH2XCH2CH2CH2-[其中X選自-O-、-S-和-SOx-，Rf選自甲基和乙基]，-CH2-，-CH2CH2-，-CH2CH2CH2-，-CH2CH(Me)-，-CH(Rg)-和-CH(Rg)CH2-[其中Rg選自甲氧基甲基，乙氧基乙基，甲氧基乙基，乙氧基甲基，甲氧基丙基，環(huán)丙基甲基，異丙基甲基，乙基和丙基]。
7.權(quán)利要求5或6的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Y選自-CH2OCH2-，-CH2OCH(Me)-，-CH2-，-CH2CH2-，-CH2SCH2CH2-，-CH2SO2CH2CH2-，-CH(CH2CH(CH2CH2))-，-CH(CH2CH2OCH3)-，-CH(CH2CH2OCH2CH3)-，-CH(CH2CH2OCH3)CH2-和-CH(CH2CH2CH2OCH3)-。
8.權(quán)利要求4的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Y為C1-6亞烷基。
9.權(quán)利要求1的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其為下面中的任意一個(gè)或多個(gè)
[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸；
[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]乙酸；
(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸；
(2R/S)-[((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)甲氧基]丙酸；
3-((1R，2R)-2-{[(2-氯-6H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸；
3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲硫基}-丙酸；
3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基甲磺?；鶀-丙酸；
((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)乙酸；
(3R)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸；
(3S)-3-環(huán)丙基-2-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-丙酸；
(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸；
(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-甲氧基丁酸；
(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸；
(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-4-乙氧基丁酸；
(2R)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸；
(2S)-2-((1R，2R)-2-{[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-基)羰基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-5-甲氧基戊酸；
(3R)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸；及
(3S)-3-{(1R，2R)-2-[(2，3-二氯-4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羰基)-氨基]-茚滿-1-基}-5-甲氧基-戊酸。
10.一種藥物組合物，其包含前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及結(jié)合有藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于通過療法而治療溫血?jiǎng)游锶缛说姆椒ㄖ小?br> 12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，用作藥物。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，用作治療溫血?jiǎng)游锶缛说南铝屑膊〉乃幬?型糖尿病，胰島素耐受性，綜合征X，高胰島素血癥，血胰高血糖素過多癥，心肌缺血或肥胖癥。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備用于治療溫血?jiǎng)游锶缛说南铝屑膊〉乃幬镏械挠猛?型糖尿病，胰島素耐受性，綜合征X，高胰島素血癥，血胰高血糖素過多癥，心肌缺血或肥胖癥。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備用于治療溫血?jiǎng)游锶缛说?型糖尿病的藥物中的用途。
16.權(quán)利要求1的式(1)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，該方法包括(其中Z，Z1，R1，R4，R5，及n如式(1)中所定義，除非另外說明)
a)使式(2)的酸或其活化的衍生物與式(3)的胺反應(yīng)
以及其后，在需要時(shí)
i)將式(1)化合物轉(zhuǎn)化成其它式(1)化合物；
ii)除去任何保護(hù)基；
iii)形成藥學(xué)上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明披露式(1)化合物或藥學(xué)上可接受的鹽，其具有糖原磷酸化酶抑制活性，因而在與糖原磷酸化酶活性提高有關(guān)的病癥如2型糖尿病的治療中具有價(jià)值。還描述了該化合物及包含它的藥物組合物的制備方法。
文檔編號(hào)C07D495/04GK101151267SQ200680010515
公開日2008年3月26日 申請(qǐng)日期2006年2月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月5日
發(fā)明者艾倫·M·伯奇, 克雷格·約翰斯通, 阿萊恩·T·普洛賴特, 伊恩·辛普森, 保羅·R·O·惠特莫爾 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司