Sb216763在制備甲基苯丙胺成癮藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及SB216763的一種新用途，具體涉及一種制備甲基 苯丙胺成癮藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 甲基苯丙胺(METH)，俗稱冰毒，是一種白色苯丙胺類合成類毒品。高劑量或長(zhǎng)期反 復(fù)使用者會(huì)共患精神疾病，包括抑郁、躁狂、精神分裂等，嚴(yán)重者造成中毒性精神病，表現(xiàn)為 被害妄想和幻覺(jué)，過(guò)度使用甚至出現(xiàn)自殺和殺人傾向。在冰毒的戒斷期間，冰毒依賴者會(huì)出 現(xiàn)失眠、抑郁、躁狂、以及焦慮的精神情緒變化，而這些戒斷反應(yīng)也成為影響冰毒依賴者復(fù) 吸的主要生理因素(王瑋等.2012)。
[0003] 糖原合成激酶(GSK)有GSK-3a和GSK-30兩個(gè)亞型(Woodgett，1990)，其中GSK-30普 遍存于腦區(qū)，例如杏仁體、伏隔核和海馬(Woodgett 1990;Leroy and Brion 1999)，而這些 又是是多巴胺關(guān)鍵投射區(qū)（Robbins et al. 2008) Α5Κ-3β在腦區(qū)的豐富表達(dá)暗示了它在中 樞神經(jīng)系統(tǒng)有著重要的地位，并且GSK-30已經(jīng)被證明牽涉到多種腦區(qū)疾病，包括阿爾茲海 默癥、（Pei et al.，1999，DaRocha-Souto et al.，2012，Ly et al.，2013)，精神分裂 (Kozlovsky etal.，2000，Emamian et al.，2004，F(xiàn)reyberg et al. ,2010)，進(jìn)行性神經(jīng)精 神疾病(Willi et al. ,2013)，嚴(yán)重抑郁（Saus et al.，2010，Diniz et al. ,2011)，以及燥 狂型抑郁(Nishiguchi et al.，2006，Benedetti et al.，2013)。多個(gè)證據(jù)支持GSK-30將會(huì) 是治療中樞疾病的重要革巴點(diǎn)（Mathew et al.，2008，Li and Jope，2010,Maes et al·， 2012)。
[0004] 有研究顯示GSK-30通過(guò)單胺類氧化物，例如多巴胺、谷氨酸和五羥色胺，對(duì)行為進(jìn) 行調(diào)節(jié)（Li and Gao,2011，Beaulieu，2012，Zhu wang et al.2012)。由于多巴胺在腦區(qū)中 是極為重要的神經(jīng)遞質(zhì)，使GSK-30在成癮領(lǐng)域受到重視。最近有研究顯示，慢性甲基苯丙胺 (Μ E T Η)處理的大鼠，其腹側(cè)被蓋區(qū)（V T A)中磷酸化糖原合成激酶3 β (p - G S K - 3 β)降低 (Junwang et al .2012)，而當(dāng)抑制GSK-30的活性時(shí)，即p-GSK-30/GSK-30水平升高可以顯著 改善METH誘導(dǎo)的大鼠行為敏化和自發(fā)活動(dòng)。
[0005] SB216763是GSK-30受體阻斷劑，其結(jié)構(gòu)式如下
[0006] 因?yàn)镾B216763與磷酸化糖原合成激酶的聯(lián)系，SB216763也逐漸走入藥物成癮研究 者的視野，但有關(guān)SB216763作為甲基苯丙胺成癮的戒毒藥還未有相關(guān)的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)現(xiàn)狀而提供一種SB216763在制備甲 基苯丙胺成癮藥物中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明所述的成癮指與成癮有關(guān)的行為，主要包括強(qiáng)迫性覓藥和用藥，在動(dòng)物模 型中通常表現(xiàn)為甲基苯丙胺自身給藥模型。
[0009] 本發(fā)明所述的SB216763的有效計(jì)量范圍是lmg/kg~10mg/kg。
[0010] 作為優(yōu)選，最佳SB216763劑量是5mg/kg。
[0011] 所述成癮藥物是以有效量的SB216763為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔 助性成分制備而成的藥劑。
[0012] 本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明：在SB216763對(duì)甲基苯丙胺類成癮小鼠成癮階段的實(shí)驗(yàn)，通過(guò) 觀察SB216763能對(duì)大鼠甲基苯丙胺獎(jiǎng)賞動(dòng)機(jī)起到抑制作用，以及對(duì)苯丙胺類成癮小鼠的學(xué) 習(xí)與記憶有明顯的促進(jìn)作用，反映 SB216763在甲基苯丙胺成癮階段具有治療效果，說(shuō)明 SB216763可用于戒斷甲基苯丙胺的成癮，以開(kāi)發(fā)作為新的戒毒藥物。
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1:大鼠甲基苯丙胺靜脈自身給藥結(jié)果圖；
[0014]圖2:大鼠甲基苯丙胺組與生理鹽水組靜脈自身給藥結(jié)果圖（其中，active poke為 有效鼻觸數(shù)，infusion為注射針數(shù)，inactive poke為無(wú)效鼻觸數(shù)）；
[0015]圖3:大鼠甲基苯丙胺自身給藥下五個(gè)腦區(qū)GSK-30表達(dá)的結(jié)果圖；
[0016]圖4:SB216763腹腔給藥對(duì)戒斷大鼠線索誘導(dǎo)重建的行為結(jié)果圖；
[0017]圖5:SB216763腹腔給藥對(duì)戒斷大鼠藥物誘導(dǎo)重建的行為結(jié)果圖；
[0018]圖6:SB216763腹腔給藥對(duì)戒斷大鼠線索誘導(dǎo)重建的GSK-30表達(dá)的結(jié)果圖；
[0019]圖7:SB216763腹腔給藥對(duì)戒斷大鼠藥物誘導(dǎo)重建的GSK-30表達(dá)的結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 以下通過(guò)結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明
[0021] 本發(fā)明實(shí)施例中使用的甲基苯丙胺為標(biāo)準(zhǔn)品，來(lái)自寧波市微循環(huán)與莨菪類藥研究 所，采用靜脈注射給藥方式;SB216763來(lái)自于美國(guó)Selleck公司，溶于二甲基亞砜(DMS0)，并 采用腹腔給藥。
[0022] 實(shí)施例1甲基苯丙胺靜脈自身給藥模型的建立
[0023] 靜脈自身給藥（Intravenous Drug Self-Administration)是研究藥物成癮最經(jīng) 典的動(dòng)物模型之一，靜脈自身給藥模型是反映用藥者主動(dòng)覓藥和用藥行為的經(jīng)典動(dòng)物模 型，可以利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物考察給藥動(dòng)機(jī)和主動(dòng)強(qiáng)迫性用藥行為。
[0024] 經(jīng)典的大鼠甲基苯丙胺甲基苯丙胺自身給藥模型可以很好的模擬臨床上吸毒患 者的甲基苯丙胺吸食行為，大鼠經(jīng)過(guò)訓(xùn)練可以產(chǎn)生對(duì)甲基苯丙胺的自我給藥，同時(shí)訓(xùn)練過(guò) 程中不斷上升的對(duì)甲基苯丙胺的行為反應(yīng)率和給藥量可以反映吸毒患者從一開(kāi)始接觸甲 基苯丙胺到大量吸食甲基苯丙胺成癮的這樣一個(gè)過(guò)程。
[0025] 我們采用如下方法來(lái)建立大鼠的自身給藥模型：
[0026] 首先，SD大鼠進(jìn)行頸靜脈插管手術(shù)，在右頸靜脈插入一段PE管，并經(jīng)背部穿出體 外，手術(shù)后抗菌和恢復(fù)一周以上。隨后，大鼠分別在自身給藥操作籠內(nèi)進(jìn)行訓(xùn)練，每次訓(xùn)練 前連通大鼠背部的PE管與操作籠內(nèi)的甲基苯丙胺注射系統(tǒng);操作籠內(nèi)設(shè)左右兩個(gè)鼻觸器， 其中一個(gè)為有效鼻觸器，大鼠觸鼻一下有效鼻觸器將獲得一針甲基苯丙胺注射，同時(shí)操作 籠內(nèi)的籠燈亮起(作為一種伴藥的線索），計(jì)算機(jī)記錄;另外一個(gè)為無(wú)效鼻觸器，大鼠觸鼻一 下無(wú)效鼻觸器沒(méi)有任何甲基苯丙胺注射和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄。兩次甲基苯丙胺注射之間 有20秒的不應(yīng)期，期間觸鼻有效鼻觸器將不會(huì)有甲基苯丙胺注射和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄，每 天的甲基苯丙胺注射針數(shù)限制為50針(防止過(guò)量注射死亡）。32個(gè)操作籠采用大型服務(wù)器的 計(jì)算機(jī)同時(shí)控制，自身給藥訓(xùn)練軟件為自主編寫(xiě)的AniLabV652，訓(xùn)練程序?yàn)楣潭ū嚷实?FR1，即大鼠觸鼻一次有效鼻觸器獲得一針甲基苯丙胺注射。大鼠經(jīng)過(guò)3天，每天4小時(shí)的訓(xùn) 練后，有效觸鼻反應(yīng)率和注射量均明顯上升，在最后幾天趨于穩(wěn)定，從而形成了穩(wěn)定的甲基 苯丙胺成癮狀態(tài)。
[0027] a、方法:對(duì)大鼠進(jìn)行頸靜脈插管手術(shù)，之后恢復(fù)3天?；謴?fù)后，開(kāi)始自身給藥，分為 兩組，即甲基苯丙胺組和生理鹽水組，每組6只老鼠。前三天是給藥訓(xùn)練期，這個(gè)階段讓老鼠 學(xué)會(huì)。學(xué)會(huì)后連續(xù)十四天給藥。
[0028] a)甲基苯丙胺組:配制溶度為0 · 12mg/ml的甲基苯丙胺，按照0 · 05mg/kg/infusion 劑量給藥。
[0029] b)生理鹽水組:該組為對(duì)照組，直接用生理鹽水替代甲基苯丙胺進(jìn)行給藥。
[0030]從圖1可以看出，給藥次數(shù)甲基苯丙胺組顯著高于生理鹽水組，并維持在一定水平 上，說(shuō)明甲基苯丙胺組已經(jīng)成癮，并且自身給藥模型已經(jīng)建立好。
[0031] 從圖2可以看出，有效鼻觸(Active poke)顯著高于無(wú)效鼻觸（Inactive poke)，說(shuō) 明自身給藥模型建立成功，而有效鼻觸(Active poke)的數(shù)目和給藥次數(shù)(infusion)有一 定差異，其原因在于有效鼻觸有20s的有效不應(yīng)期，這樣有效鼻觸數(shù)與給藥次數(shù)有一定的差 異，可以忽略。
[0032] 實(shí)施例2甲基苯丙胺慢性給藥對(duì)大鼠??(^?11、嫩〇、!^、￥了六腦區(qū)631(-3邱勺影響
[0033] a、前額皮層(PFC):指初級(jí)運(yùn)動(dòng)皮層和次級(jí)運(yùn)動(dòng)皮層以外的全部額葉皮層，發(fā)揮認(rèn) 知功能的主要高級(jí)腦區(qū)。其可調(diào)節(jié)工作記憶、注意、決策、執(zhí)行、沖動(dòng)性、激勵(lì)、抑制控制等功 能。前人研究表明藥物成癮的沖動(dòng)性選擇可能與vmPFC和dmPFC兩者功能障礙有關(guān)，Peters， Koya等人研究證明藥物成癮表現(xiàn)出沖動(dòng)性選擇或反應(yīng)、強(qiáng)迫性行為(脫離目的和獎(jiǎng)賞的持 續(xù)反應(yīng))可能與vmPFC功能障礙有關(guān)。
[0034] b、紋狀體(CPU):基底神經(jīng)節(jié)的主要組成部分，包括豆?fàn)詈撕臀矤詈?。隨意運(yùn)動(dòng)的 穩(wěn)定、肌張力的維持等，紋狀體對(duì)運(yùn)動(dòng)的產(chǎn)生、發(fā)動(dòng)和行為習(xí)慣化的形成具有重要作用。作 為進(jìn)入基底神經(jīng)節(jié)的主要通路，紋狀體接受幾乎所有腦區(qū)的傳入并接受來(lái)自丘腦和邊緣結(jié) 構(gòu)的傳入纖維。紋狀體與成癮學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)的多個(gè)腦區(qū)具有廣泛的聯(lián)系，參與了多種與 藥物成癮有關(guān)的學(xué)習(xí)和記憶過(guò)程。
[0035] c、伏隔核(NAc):接受前額皮層、海馬、杏仁核的谷氨酸能神經(jīng)傳入，研究表明NAc 參與了與成癮有關(guān)的"刺激獎(jiǎng)賞"學(xué)習(xí)，NAc的神經(jīng)纖維主要終止于其外殼區(qū)，并與投射到 VTA的GABA能神經(jīng)元形成突觸聯(lián)系，直接參與與藥物獎(jiǎng)賞的動(dòng)機(jī)和情緒活動(dòng)。
[0036] d、海馬(Hip):是參與記憶和情緒信息處理的關(guān)鍵腦區(qū)，海馬與情感、情緒密切相 關(guān)，富含各種神經(jīng)遞質(zhì)及受體，是參與應(yīng)激反應(yīng)的最重要腦區(qū)之一，也是易造成應(yīng)激損傷的 主要靶器官。有研究表明，藥物成癮的相關(guān)大腦回路與已知的記憶存儲(chǔ)相關(guān)回路有很多相 似之處，通過(guò)電刺激成癮模型大鼠海馬的谷氨酸豐富區(qū)，會(huì)引起動(dòng)物對(duì)成癮藥物的強(qiáng)烈渴 望，而刺激其它腦區(qū)則無(wú)效，進(jìn)一步說(shuō)明了海馬記憶中心及其神經(jīng)回路在成癮過(guò)程中的關(guān) 鍵作用。
[0037] e、中腦腹側(cè)背蓋區(qū)（VTA):作為投射