一種膽烷酸的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及以3α?羥基?7?氧代?5β?膽烷酸為起始原料，以N，N?二甲基甲酰胺作溶劑，用碳酸鉀做堿，與芐氯發(fā)生反應(yīng)，得到3α?芐氧基?7?氧代?5β?膽烷酸芐酯；以四氫呋喃作溶劑，以堿二異丙基氨基鋰作用下與溴乙烷發(fā)生反應(yīng)，得到3α?芐氧基?6α?乙基?7?氧代?5β?膽烷酸芐酯，先與氫溴酸反應(yīng)，再加入氫氧化鈉水溶液，使體系pH≥9，保溫反應(yīng)，得到3α?羥基?6α?乙基?7?氧代?5β?膽烷酸，以氫氧化鈉水溶液作溶劑，以NaBH4做還原劑，發(fā)生反應(yīng)，得到最終化合物3α，7α?二羥基?6α?乙基?5β?膽烷酸。此制備方法簡(jiǎn)便易行、收率高，質(zhì)量好，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】
一種膽烷酸的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
[0001 ]本發(fā)明涉及藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一種膽烷酸的合成方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 非酒精性脂肪性肝病是指除酒精和其他明確的損肝因素所致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過(guò) 度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，與胰島素抵抗和遺傳易感性密切相關(guān)的獲得性代謝 應(yīng)激性肝損傷.包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎及其相關(guān)肝硬化。在世界范圍內(nèi)， 有15~32%的人口患有非酒精性脂肪肝病，已成為一種流行疾病。
[0003] 奧貝膽酸，又稱6-乙基鵝去氧膽酸，是人初級(jí)膽汁酸中鵝去氧膽酸的一種新型衍 生物。體外研究發(fā)現(xiàn)，奧貝膽酸使人類胰島細(xì)胞胰島素分泌增加，同時(shí)增加脂肪細(xì)胞中脂肪 的儲(chǔ)存，并促進(jìn)脂聯(lián)素和瘦素的分泌。在動(dòng)物模型中，還發(fā)現(xiàn)奧貝膽酸可使明確的纖維化/ 硬化病變發(fā)生逆轉(zhuǎn)。
[0004] 化合物專利W0 2013/192097報(bào)道了一種3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸的合 成方法，其合成路線如下：
[000
[0006] 該路線步驟較長(zhǎng)，收率較低。
[0007] 化合物專利W0 02/072598專利報(bào)道了一種3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸的 合成方法，其合成路線如下：
[0008]
Λ
[0009] R=乙基，丙基，烯丙基 [0010]該路線收率極低。
[0011]技術(shù)方案
[0012 ]針對(duì)上述文獻(xiàn)不足之處，本發(fā)明對(duì)其合成路線進(jìn)行了重新設(shè)計(jì)，
[0013] 本發(fā)明以3α-羥基-7-氧代-5β-膽烷酸(2)為起始原料，以N，N-二甲基甲酰胺作溶 劑，在碳酸鉀堿性體系中，與芐氯發(fā)生反應(yīng)，得到3α_芐氧基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯（3); (3)以四氫呋喃作溶劑，以堿LDA作用下與溴乙烷發(fā)生反應(yīng)，得到3α-芐氧基-6α-乙基-7-氧 代-5β_膽烷酸芐酯(4)，（4)先于氫溴酸反應(yīng)，再加入氫氧化鈉水溶液，使體系pH多9,保溫反 應(yīng)，得到3α-羥基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸(5)，（5)以氫氧化鈉水溶液作溶劑，以NaBH4 做還原劑，發(fā)生反應(yīng)，得到最終化合物3α，7α_二羥基-6α_乙基-5β_膽烷酸（1)。
[0014] 此制備方法簡(jiǎn)便易行、收率高，質(zhì)量好，便于工業(yè)化生產(chǎn)，合成路線如下：
[0015]
[0016] 實(shí)驗(yàn)例1、堿種類的加入方式對(duì)3α-芐氧基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(4)的 影響
[0017] 將體系降溫至-78°C，攪拌下加入四氫呋喃（500.0 mL)，向體系中加入一定量的堿 性試劑(正丁基鋰、二異丙基氨基鋰、鈉氫、或乙醇鈉），保溫?cái)嚢瑭?5h，向體系中滴加3α_芐 氧基-7-氧代-5β-膽烷酸芐酯(3)的四氫呋喃溶液（100.0g3a-芐氧基-7-氧代-5β-膽烷酸芐 酯（3)溶于300 . OmL四氫呋喃中），保溫?cái)嚢?.5h，向體系中滴加溴乙烷的四氫呋喃溶液 (190.0g溴乙燒溶于200.0 mL四氫呋喃中），保溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束后，向體系中加入氯化銨 溶液（200mL)，攪拌0.5h，向體系中加入1000 . OmL乙酸乙酯，攪拌0.5h，分液，有機(jī)相水洗 (500mL X 2)，飽和NaCl溶液(500mL)洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用乙 酸乙酯和正己烷精制，得到化合物3α-芐氧基-6α_乙基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(4)
[0018] 第二步反應(yīng)的堿種類的選擇分別為正丁基鋰、二異丙基氨基鋰、鈉氫、乙醇鈉，進(jìn) 行比較，結(jié)果如表1所示。
[0019] 表1第二步反應(yīng)的堿種類的選擇
[0020]
[0021]由表1可以看出，正丁基鋰作堿時(shí)，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率最高，但產(chǎn)物純度較差，產(chǎn)物需要柱 層析純化，收率也是較低;二異丙基氨基鋰作堿時(shí)，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率較高，產(chǎn)物收率較高;鈉氫作 堿時(shí)，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率較低，產(chǎn)物需要柱層析純化，收率也是較低；乙醇鈉作堿時(shí)，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率最 低，收率也是最低。
[0022]實(shí)驗(yàn)例2、催化劑的加入方式對(duì)3α-芐氧基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(4)的 影響
[0023]將體系降溫至-78°C，攪拌下加入四氫呋喃（500.0 mL)，向體系中加入一定量的二 異丙基氨基鋰，保溫?cái)嚢瑭? 5h，向體系中滴加3α_芐氧基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(3)的四氫 呋喃溶液（100.0g3a-芐氧基-7-氧代-5β-膽烷酸芐酯(3)溶于300.0 mL四氫呋喃中），保溫?cái)?拌0.5h，向體系中滴加溴乙烷的四氫呋喃溶液（190.0g溴乙烷溶于200.0 mL四氫呋喃中），保 溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束后，向體系中加入氯化銨溶液（200mL)，攪拌0.5h，向體系中加入 1000.0 mL乙酸乙酯，攪拌0.5h，分液，有機(jī)相水洗(500mL X 2)，飽和NaCl溶液(500mL)洗滌一 次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯和正己烷精制，得到化合物3α_芐氧 基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(4)
[0024]第二步催化劑使用量的考察
[0025] 表2二異丙基氨基鋰作堿的反應(yīng)條件比較
[0026]
[0027]由表2可以看出，分別采用l.Oeq二異丙基氨基鋰、1.5eq二異丙基氨基鋰、2.0eq二 異丙基氨基鋰、2.5eq二異丙基氨基鋰作堿時(shí)，轉(zhuǎn)化率依次遞增，但是以2.Oeq二異丙基氨基 鋰作堿時(shí)收率最高。
[0028] 本發(fā)明制備得到3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸純度高、雜質(zhì)少，穩(wěn)定性強(qiáng)，是 制劑的優(yōu)良原料，將本發(fā)明的結(jié)晶的劑型制成藥品，將結(jié)晶與適當(dāng)?shù)妮o料添加劑混合，制成 制劑。
[0029]本發(fā)明的優(yōu)選制劑是:片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑、含片劑、吸入劑等口服 制劑;栓劑、軟膏劑、眼膏劑、透皮劑、滴眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、巴布劑、洗劑等外用制劑或注 射劑。
[0030]優(yōu)選的輔料是:賦形劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、矯味矯嗅劑、乳化劑、表 面活性劑、助溶劑、混懸化劑、等滲劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、穩(wěn)定劑、吸收促進(jìn)劑等。 [0031 ]優(yōu)選的賦形劑是:乳糖、白糖、葡萄糖、玉米淀粉、甘露醇、山梨糖醇、淀粉、α淀粉、 糊精、結(jié)晶纖維素、輕質(zhì)硅酸酐、硅酸鋁、硅酸鈣、硅酸鋁酸鎂、磷酸氫鈣等。
[0032]優(yōu)選的粘合劑是:聚乙烯醇、甲基纖維素、乙基纖維素、阿拉伯膠、黃耆膠、明膠、蟲(chóng) 膠、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等。 [0033]優(yōu)選的潤(rùn)滑劑是：硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、富馬酸十八酯鈉、滑石、聚乙二醇、膠態(tài)二 氧化硅等。
[0034]優(yōu)選的崩解劑是:結(jié)晶纖維素、瓊脂、明膠、碳酸鈣、碳酸氫鈉、檸檬酸鈣、糊精、果 膠、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀 粉、羧甲基淀粉鈉等。
[0035]優(yōu)選的著色劑是：三氧化二鐵、黃色三氧化二鐵、胭脂紅、焦糖、β_胡蘿卜素、氧化 鈦、滑石、磷酸核黃素鈉等。
[0036]優(yōu)選的矯味劑是:可可粉、薄荷醇、薄荷油、冰片、桂皮粉等。
[0037]優(yōu)選的乳化劑或表面活性劑是:十八烷基三乙醇胺、十二烷基硫酸鈉、十二烷基氨 基丙酸、卵磷脂、甘油單硬脂酸酯、蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯等。
[0038]優(yōu)選的助溶劑是:聚乙二醇、丙二醇、安息香酸芐酯、乙醇、膽固醇、三乙醇胺、碳酸 鈉、檸檬酸鈉、吐溫80、煙酰胺等。
[0039]優(yōu)選的混懸劑是:聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥乙 基纖維素、羥丙基纖維素等親水性高分子。
[0040]優(yōu)選的等滲劑是:葡萄糖、氯化鈉、甘露醇、山梨糖醇等。
[0041 ]優(yōu)選的緩沖劑是:磷酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽等緩沖液。
[0042]優(yōu)選的防腐劑是：對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、氯丁醇、芐醇、苯乙醇、 脫氫乙酸、山梨酸等。
[0043]優(yōu)選的抗氧化劑是:亞硫酸鹽、抗壞血酸、α-生育酚等。
【具體實(shí)施方式】
[0044]實(shí)施例1:3α-芐氧基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(3)的合成
[0045] 在室溫下，攪拌下依次向Ν，Ν-二甲基甲酰胺(800.0 mL)中加入3α-羥基-7-氧代-5 β-膽烷酸（2)(100.0g)和無(wú)水碳酸鉀（150.0g)，然后滴加芐氯的ΝΝ-二甲基甲酰胺溶液 (100.0 g芐氯溶于200.0 mLN，N-二甲基甲酰胺中），室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束后，把反應(yīng)體系轉(zhuǎn) 移至2000 . OmL水和1000 . OmL乙酸乙酯中，攪拌0.5h，分液，有機(jī)相水洗（500mL X 2)，飽和 NaCl溶液(500mL)洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯和正己烷 精制，得到化合物3α-芐氧基-7-氧代-5β-膽烷酸芐酯(3) 132.4g(收率為91 % )。
[0046] LC-MS 571·5(Μ+1)。
[0047] 4-^^(50011^,0)(:13):7.23-7.24(101111),5.43(218),4.72(2^8),2.82(111, m)，2.01~2.31(5H，m)，0.97~1.82(30H，m)。
[0048] 實(shí)施例2:3α-芐氧基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(4)的合成
[0049] 將體系降溫至-78°C，攪拌下加入四氫呋喃（500.OmL)，向體系中加入二異丙基氨 基鋰(2M，175mL)，保溫?cái)嚢?.5h，向體系中滴加3α-芐氧基-7-氧代-5β-膽烷酸芐酯(3)的四 氫呋喃溶液（100.0g3a-芐氧基-7-氧代-5β_膽烷酸芐酯(3)溶于300.OmL四氫呋喃中），保溫 攪拌0.5h，向體系中滴加溴乙烷的四氫呋喃溶液（190.0g溴乙烷溶于200.0 mL四氫呋喃中）， 保溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束后，向體系中加入氯化銨溶液（200mL)，攪拌0.5h，向體系中加入 1000.0 mL乙酸乙酯，攪拌0.5h，分液，有機(jī)相水洗(500mL X 2)，飽和NaCl溶液(500mL)洗滌一 次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯和正己烷精制，得到化合物3α_芐氧 基-6α-乙基-7-氧代-5β-膽烷酸芐酯(4)81.9g(收率為78% )。
[0050] LC-MS 599.7(M+1)。
[0051] 4-^^(50011^,0)(:13):7.22-7.25(101111),5.40(218),4.74(2^8),2.84(111, m)，2.00~2.26(4H，m)，0.82~1.80(35H，m)。
[0052] 實(shí)施例3:3α-羥基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸(5)的合成
[0053] 在室溫下，攪拌下依次向氫溴酸（800.OmL)中加入3α-芐氧基-6α-乙基-7-氧代-5 β-膽烷酸芐酯(4)(80.0g)，體系升溫至50°C，保溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束后，向體系中加入氫氧 化鈉水溶液，使體系pH彡9,體系升溫至回流，保溫反應(yīng)10h，反應(yīng)結(jié)束，用稀鹽酸調(diào)pH，使體 系pH彡3，向體系中加入1000.0 mL乙酸乙酯，攪拌0.5h，分液，有機(jī)相水洗(500mL X 2)，飽和 NaCl溶液(500mL)洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余物用乙酸乙酯和正己烷 精制，得到化合物3α-羥基-6α-乙基-7-氧代-5β_膽烷酸(5)46.8g(收率為84% )。
[0054] LC-MS 419·4(Μ+1)。
[0055] 4-^^(5001^,01^0):3.07(111,111),2.00-2.27(411,111),0.81-1.75(351111)0
[0056] 實(shí)施例4: 3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸（1)的合成
[0057] 在室溫下，攪拌下依次向50 %氫氧化鈉水溶液（300 . OmL)中加入3α-羥基-6α-乙 基-7-氧代-5β-膽烷酸(5)(40.(^)和似8財(cái)（11.(^)，體系升溫至回流，保溫?cái)嚢?11。反應(yīng)結(jié) 束后，用稀鹽酸調(diào)pH，使體系pH彡4，向體系中加入500.0 mL乙酸乙酯，攪拌0.5h，分液，有機(jī) 相水洗(500mL X 2)，飽和NaCl溶液(500mL)洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，剩余 物用乙酸乙酯精制，得到化合物3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β_膽烷酸（1)36.4g(收率為 91%)〇
[0058] LC-MS 421·5(Μ+1)。
[0059] 4-^^(5001^^,01^0):3.54(111,111),3.38-3.34(111,111),2.21-2.51(211,111),1.67 ~1.47(12H，m)，1.45~1.00(12H，m)，0.97~0.72(13H，m)。
[0060] 實(shí)施例5:樣品純度的HPLC的條件是：
[0061 ]高效液相色譜儀配備蒸發(fā)光檢測(cè)器 [0062] 色譜柱:普通C18柱
[0063] DC：80°C
[0064] SC：70°C
[0065] N2 壓力：35Bar
[0066] 柱溫：35 Γ
[0067] 進(jìn)樣量:20μ1
[0068] 流動(dòng)相：以0.05mol/L三氟乙酸水溶液為流動(dòng)相Α，乙腈為流動(dòng)相Β，按下表進(jìn)行洗 脫。流速為每分鐘1. 〇ml
[0069]
[0070] 本發(fā)明實(shí)施例4產(chǎn)品、標(biāo)準(zhǔn)品用流動(dòng)相溶解，取供試品溶液，取20μ1注入液相色譜 儀，記錄色譜圖，依匹哌唑峰保留時(shí)間為16.8分鐘，理論板數(shù)按依匹哌唑峰計(jì)算不低于 3000，含化合物3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸（1)應(yīng)為標(biāo)示量的99.7%~101.0%。
[0071] L0072J 買施例6
[0073] 3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸片由以下組份配制而成，按1000片用量： 3α,7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸（1) 10.0 g 聚維酮 30. 0 g 微晶纖維素 52. 0 g
[0074] 羧甲基淀粉鈉 5.0g 硬脂酸鎂 〇. 5g 二氧化硅 0. 5g 歐巴代（包衣） 3.0g
[0075] 其制備方法包括如下步驟：
[0076] 1)將3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸（1)和藥用輔料分別粉碎過(guò)篩，備用，
[0077] 2)取處方量重量份數(shù)的原料及藥用輔料物理混合均勻，
[0078] 3)濕法制粒，
[0079] 4)干燥，整粒，
[0080] 5)折算外加輔料，混合均勻，壓制成片劑
[0081] 6)將歐巴代采用一定的溶劑進(jìn)行溶解，作為包衣液進(jìn)行包衣。
[0082] 試驗(yàn)結(jié)果
[0083]藥物含量:合格 [0084]崩解時(shí)限:符合規(guī)定
[0085] 實(shí)施例7
[0086] 3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸片由以下組份配制而成，按1000片用量： 3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸（1) 10.0 g 聚維酮 30. 0 g 微晶纖維素 50.0 g
[0087] 羧甲基淀粉鈉 7.0g 硬脂酸鎂 0. 5g 二氧化硅 0· 5g 歐巴代（包衣） 3.0g
[0088] 其制備方法包括如下步驟：
[0089] 1)將3α，7α-二羥基-6α-乙基-5β-膽烷酸(1)和藥用輔料分別粉碎過(guò)篩，備用，
[0090] 2)取處方量重量份數(shù)的原料及藥用輔料物理混合均勻，
[0091] 3)濕法制粒，
[0092] 4)干燥，整粒，
[0093] 5)折算外加輔料，混合均勻，壓制成片劑
[0094] 6)將歐巴代采用一定的溶劑進(jìn)行溶解，作為包衣液進(jìn)行包衣。
[0095]試驗(yàn)結(jié)果 [0096]藥物含量:合格 [0097]崩解時(shí)限:符合規(guī)定
[0098]以上對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例， 不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。凡依本發(fā)明申請(qǐng)范圍所作的均等變化與改進(jìn)等， 均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種膽燒酸的合成方法，其特征在于： W3a-徑基-7-氧代-5β-膽燒酸（2)為起始原料，WN，N-二甲基甲酯胺作溶劑，在碳酸鐘 堿性體系中，與節(jié)氯發(fā)生反應(yīng)，得到3α-節(jié)氧基-7-氧代-5β-膽燒酸節(jié)醋(3);(3) W四氨巧喃 作溶劑，W堿二異丙基氨基裡作用下與漠乙燒發(fā)生反應(yīng)，得到3α-節(jié)氧基-6α-乙基-7-氧代- 5β-膽燒酸節(jié)醋(4)，（4)先于氨漠酸反應(yīng)，再加入氨氧化鋼水溶液，使體系抑>9,保溫反應(yīng)， 得到3α-徑基-6α-乙基-7-氧代-5β-膽燒酸(5)，（5) W氨氧化鋼水溶液作溶劑，W化ΒΗ4做還 原劑，發(fā)生反應(yīng)，得到最終化合物3α，7α-二徑基-6α-乙基-5β-膽燒酸（1);
【文檔編號(hào)】C07J9/00GK106083970SQ201610370148
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年5月31日
【發(fā)明人】程剛
【申請(qǐng)人】北京康立生醫(yī)藥技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司