一個(gè)/ 一種（a)"、"一個(gè)/ 一種（an)"、"所述（the)"和"至少一種/ 一個(gè)"W及在描述本發(fā)明的上下文中的類似的表述（尤其在所附的權(quán)利要求中）應(yīng)被解釋 為既包括單數(shù)又包括復(fù)數(shù)，除非本文另外指明或者與上下文明顯矛盾。使用的術(shù)語(yǔ)"至少一 種/ 一個(gè)"，在其后有一個(gè)或多個(gè)項(xiàng)目的列表（例如"A和B中的至少一種")，應(yīng)被解釋為意 指選自列出的項(xiàng)中的一項(xiàng)（A或B)，或列出的項(xiàng)中的兩項(xiàng)或更多項(xiàng)的任何組合（A和B)，除 非本文另外指明或者與上下文明顯矛盾。術(shù)語(yǔ)"包含"、"具有"、"包括"W及"含有"應(yīng)被解 釋為開(kāi)放式的術(shù)語(yǔ)（即意為"包括，但不限于，"），除非另外指明。本文敘述的值的范圍僅 意圖將其作為分別提及落入該范圍內(nèi)的每個(gè)單獨(dú)值的速記法，除非本文另外指明，并且將 每一單獨(dú)的值并入本說(shuō)明書，如同本文對(duì)其單獨(dú)敘述。可任何合適的順序?qū)嵤┍疚拿?述的所有方法，除非本文另外指明或者與上下文明顯矛盾。使用的本文提供的任何W及全 部實(shí)例或示例性語(yǔ)言（例如"諸如"）僅意圖更好地闡明本發(fā)明，并不對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行 限制，除非另有聲明。不應(yīng)將本說(shuō)明書中的語(yǔ)言解釋為表明任何未要求保護(hù)的元素對(duì)于本 發(fā)明的實(shí)施是必要的。
[0062] 本文描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，包括發(fā)明人已知的實(shí)施本發(fā)明最佳方式。通 過(guò)閱讀前面的描述，運(yùn)些優(yōu)選實(shí)施方案的變化對(duì)那些本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。 發(fā)明人期望技術(shù)人員適當(dāng)?shù)貞?yīng)用此類變型，并且發(fā)明人意欲W不同于本文具體描述的方式 實(shí)施本發(fā)明。因此，如適用法律所允許的，本發(fā)明包括所附權(quán)利要求中敘述的主題的所有修 飾和等同主題。此外，本發(fā)明包括上述元素W其所有可能的變體形式的任何組合，除非本文 另外指明或者與上下文明顯矛盾。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的方法，所述方法包括： (a) 從外周血樣本中獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs)的混合群； (b) 從混合群中特異地選擇還表達(dá)H)-l和/或HM-3的⑶8+T細(xì)胞；和 (c) 將（b)中選擇的細(xì)胞與未被選擇的細(xì)胞分離，以獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞 群。2. 獲得包含富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的藥物組合物的方法，所述方法包括： (a) 從外周血樣本中獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs)的混合群； (b) 從混合群中特異地選擇還表達(dá)H)-l和/或HM-3的⑶8+T細(xì)胞； (c) 將（b)中選擇的細(xì)胞與未被選擇的細(xì)胞分離，以獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞 群；和 (d) 將富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群與藥學(xué)上可接受的載體組合，以獲得包含富集 腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的藥物組合物。3. 如權(quán)利要求1或2中任一項(xiàng)所述的方法，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇 表達(dá)HM-3的CD8+T細(xì)胞。4. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇表 達(dá)PD-I的⑶8+T細(xì)胞。5. 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇為（i) HM-37PD-1+、（ii)HM-3/PD-l +或（iii)HM-3+/PD-l 的 CD8+T 細(xì)胞。6. 如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中獲得所述富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞 群而沒(méi)有進(jìn)行自體腫瘤識(shí)別的篩選。7. 如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中在（b)之前，未對(duì)所述T細(xì)胞混合群進(jìn)行 非特異性刺激。8. 如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括將（c)中獲得的富集細(xì)胞群中的T 細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行擴(kuò)增。9. 如權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括在存在TWS119、白介素（IL-21)、 IL-12、IL-15、IL-7、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF) 以及AKT抑制劑（AKTi)中的任何一種或多種的 情況下，培養(yǎng)（c)中獲得的富集細(xì)胞群。10. 如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括用腫瘤抗原和/或用自體腫瘤T細(xì) 胞刺激（c)中獲得的富集細(xì)胞群。11. 如權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括用核苷酸序列轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染（c)中 獲得的富集群中的細(xì)胞，所述核苷酸序列編碼IL-12、IL-7、IL-15、IL-2、IL-21、mirl55以 及抗I 3D-IsiRNA中的任何一種或多種。12. 分離或純化的富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群，其通過(guò)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所 述的方法獲得。13. 分離或純化的細(xì)胞群，其包含下述中的任何一種或多種： (a) CD87TIM-37PD-1+T 細(xì)胞， (b) CD8+/T頂-3 /TO-I+T 細(xì)胞，和 (c) CD8+/T頂-3+/PD-l T 細(xì)胞， 其中所述細(xì)胞群富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞。14. 如權(quán)利要求13所述的分離或純化的細(xì)胞群，其包含： (a) CD87TIM-37PD-1+T 細(xì)胞， (b) CD8+/T頂-3 /I3D-I+T 細(xì)胞，或 (c) CD8+/T頂-3+/PD-l T 細(xì)胞。15. 富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群，其用于向哺乳動(dòng)物施用所述富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì) 胞的細(xì)胞群，所述細(xì)胞群通過(guò)包括以下的方法獲得： (a) 從外周血樣本中獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs)的混合群； (b) 從混合群中特異地選擇還表達(dá)H)-l和/或HM-3的⑶8+T細(xì)胞；和 (c) 將（b)中選擇的細(xì)胞與未被選擇的細(xì)胞分離，以獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞 群。16. 如權(quán)利要求15所述的細(xì)胞群，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇表達(dá) HM-3 的 CD8+T 細(xì)胞。17. 如權(quán)利要求15所述的細(xì)胞群，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇表達(dá)ro-i 的CD8+T細(xì)胞。18. 如權(quán)利要求15所述的細(xì)胞群，其中（b)包括從所述混合群中特異地選擇為（i) HM-37PD-1+、（ii)HM-3/PD-l +或（iii)HM-3+/PD-l 的 CD8+T 細(xì)胞。19. 如權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，其中獲得所述富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的 細(xì)胞群而沒(méi)有進(jìn)行自體腫瘤識(shí)別的篩選。20. 如權(quán)利要求15-19中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，其中在（b)之前，未對(duì)所述T細(xì)胞混合 群進(jìn)行非特異性刺激。21. 如權(quán)利要求15-20中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，還包括將（c)中獲得的富集細(xì)胞群中的 T細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行擴(kuò)增。22. 如權(quán)利要求15-21中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，還包括在存在TWSl 19、白介素（IL-21)、 IL-12、IL-15、IL-7、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF) 以及AKT抑制劑（AKTi)中的任何一種或多種的 情況下，培養(yǎng)（c)中獲得的富集細(xì)胞群。23. 如權(quán)利要求15-22中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，還包括用腫瘤抗原和/或用自體腫瘤T 細(xì)胞刺激（c)中獲得的富集細(xì)胞群。24. 如權(quán)利要求15-23中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，還包括用核苷酸序列轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染（c)中 獲得的富集群中的細(xì)胞，所述核苷酸序列編碼IL-12、IL-7、IL-15、IL-2、IL-21、mirl55以 及抗I 3D-IsiRNA中的任何一種或多種。25. 通過(guò)權(quán)利要求1和3-11中任一項(xiàng)要求保護(hù)的方法獲得的富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞 的細(xì)胞群，通過(guò)權(quán)利要求2-11中任一項(xiàng)要求保護(hù)的方法獲得的藥物組合物，或者權(quán)利要求 15-24中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞群，其用于治療或預(yù)防癌癥。
【專利摘要】本申請(qǐng)公開(kāi)了獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的方法，所述方法包括：(a)從外周血樣本中獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)的混合群；(b)從混合群中特異地選擇還表達(dá)PD-1和/或TIM-3的CD8+T細(xì)胞；和(c)將(b)中選擇的細(xì)胞與未被選擇的細(xì)胞分離，以獲得富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群。還公開(kāi)了向哺乳動(dòng)物施用富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的相關(guān)方法、獲得包含富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的細(xì)胞群的藥物組合物的方法、以及分離或純化的細(xì)胞群。
【IPC分類】C12N5/0783, G01N33/569, A61K35/17, G01N33/50
【公開(kāi)號(hào)】CN105163745
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380075806
【發(fā)明人】阿萊娜·格羅斯, 史蒂文·A·羅森伯格
【申請(qǐng)人】美國(guó)衛(wèi)生和人力服務(wù)部
【公開(kāi)日】2015年12月16日
【申請(qǐng)日】2013年4月30日
【公告號(hào)】CA2902448A1, EP2961416A1, WO2014133568A1