專利名稱：用于給予苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和/或苯基乙酸鹽的治療方法
技術領域：
本發(fā)明涉及本發(fā)明一般涉及腫瘤疾病的治療方法領域。更具體地說，本發(fā)明涉及以高輸注速率和高劑量水平靜脈給予苯乙酰谷氨酰胺與苯乙酰異谷氨酰胺、或苯乙酰谷氨酰胺與苯基乙酸鹽、或其鹽或其衍生物的高度濃縮溶液的方法。
2．相關領域的描述在近三十年中對生長因子和生長抑制劑的研究表明可能存在與免疫系統(tǒng)互補的人體防護系統(tǒng)。可以將這種癌基因和腫瘤抑制基因表達的分化誘導物和調節(jié)物的防護系統(tǒng)稱作“生化防護系統(tǒng)”或“BDS”。然而，免疫系統(tǒng)的主要目的是保護身體而抵抗外部的侵害；BDS的主要目的是保護身體而抵抗缺損細胞。人體腫瘤疾病(癌癥、惡性腫瘤和良性腫瘤)是可由BDS抵抗的疾病的實例?？商峁〣DS成分的一類化合物是天然出現(xiàn)的氨基酸類似物和羧酸類。
盡管不受理論束縛，但是天然出現(xiàn)的氨基酸類似物的抗癌保護機理可能是通過減少超甲基化基因的甲基化來誘導分化、接合谷氨酰胺以便抑制癌細胞生長、下調癌基因諸如網(wǎng)狀激活系統(tǒng)(ras)或上調諸如GSTP1和GSTM1這樣的解毒基因和諸如p53這樣的腫瘤抑制基因、成視網(wǎng)膜細胞瘤基因和神經(jīng)纖維瘤1型基因。不管具體的作用機理如何，公知天然出現(xiàn)的氨基酸類似物可誘導異常細胞進行終末分化并通過程序性細胞死亡而死亡。不同于與化療和放射療法相關的壞死，染色細胞逐步被消除并被正常細胞所取代，從而導致愈合和功能重建。
對下文一般稱作“抗癌肽類”的天然出現(xiàn)的作為潛在抗癌劑的氨基酸類似物的研究開始于1967年，其中在癌癥患者的血清肽內含物中觀察到了明顯缺陷。在八十年代中，由Burzynski在美國專利4,470,970中教導了從人尿中分離抗癌肽類級分和這些級分在腫瘤人癌癥中的應用，將該專利文獻說明書的全部內容引入本文作為參考。在這些組合物中，作為治療癌癥發(fā)揮作用是(a)3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮和(b)按4∶1質量比混合的苯乙酸鈉和苯乙酰谷氨酰胺的混合物。將組合物(b)在下文中稱作“抗癌肽類AS2-1”或簡稱為“AS2-1”。發(fā)現(xiàn)3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮可在治療過程中的溶解時用氫氧化鈉水解并中和成4∶1比例的苯乙酰谷氨酰胺和苯乙酰異谷氨酰胺。
制備上述組合物的制劑且它們具有成功的前期臨床活性。3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮可產生對培養(yǎng)的人乳腺癌細胞系MDA-MB-231的抑制細胞效應。在給予3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮時還觀察到了細胞系KMCH-1、KYN-1和KIM-1；大鼠Nb2淋巴瘤和人結腸腺癌的生長曲線的劑量依賴性抑制作用。
進行體內實驗，其中對植入了S180細胞或R-27人乳腺癌細胞的小鼠給予3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮或A10。在S180實驗中，在給予3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮后，治療小鼠的肝臟和腫瘤中的cAMP水平相對于對照小鼠明顯升高。在R-27實驗中，在注射A10后，觀察到了3H-TdR的吸收抑制作用和生長曲線抑制作用。
AS2-1或苯乙酸在乳腺癌細胞系HBL-100和Ki-1中產生劑量依賴性生長抑制作用且還可促進人前髓細胞白血病HL-60、慢性淋巴細胞白血病、成神經(jīng)細胞瘤、鼠成纖維細胞瘤V7T、激素抗拒性前列腺腺癌PC3、星形細胞瘤、成神經(jīng)管細胞瘤、惡性黑色素瘤和卵巢癌的細胞系中的終末分化或表型反轉。AS2-1或苯乙酸可在培養(yǎng)的癌前期間充質C3H10T1/2細胞中導致脂肪細胞轉化并促進K562紅白血病細胞中的血紅蛋白產生。此外，且與目前標準化療劑諸如5-氮雜-2-deoxycitidine的區(qū)別在于苯乙酸不會在癌前期C3H10T1/2細胞中導致腫瘤發(fā)展。
前期臨床毒理學研究確定A10在小鼠體內的LD50為10.33g/kg/天。死亡動物的尸體解剖顯示內臟擴散性充血、肺水腫和牙槽中的出血改變。在尸體解剖中，存活的試驗動物與對照動物相同。慢性毒性研究顯示180天后沒有副作用。
AS2-1在小鼠體內的LD50為2.83g/kg/天。死亡動物的尸體解剖顯示內臟擴散性充血、肺水腫和牙槽中的出血改變以及胸腺塔迪厄點和充血。使用達1.11g/kg/天的慢性毒性研究顯示365天后沒有副作用。
通過埃姆斯法觀察到A10和AS2-1是非誘變的且在大鼠胚胎中觀察到A10是非致畸的。
有關毒理學研究的引人注目的觀點在于通常沒有在小鼠體內發(fā)現(xiàn)作為AS2-1的成分而且還是3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮的分解產物的苯乙酰谷氨酰胺而通常在人體內發(fā)現(xiàn)它。這提示人可能比小鼠表現(xiàn)出對A10和AS2-1更大的耐受性，且由此可能在人體內使用較高劑量的這兩種組合物。正如下面所證明的，這一提示是確切的。
在Ⅰ期臨床試驗的毒性研究中，靜脈給予劑量達2.21g/kg/天的A10涉及到最小的副作用包括發(fā)熱反應、肌肉和關節(jié)疼痛、咽喉肌肉收縮、短期腹痛和惡心、頭暈和頭痛的單一發(fā)病率(《藥物實驗與臨床研究》(Drugs Exptl.Clin.Res.)1986第12期增刊1,47-55)。
口服給予劑量達238mg/kg/天的AS2-1涉及到患者體內的白細胞計數(shù)暫時輕度減少。注射劑量達160mg/kg/天的AS2-1涉及到最小的副作用包括輕度惡心和嘔吐、皮膚過敏反應、血壓中度升高、發(fā)熱反應、白細胞計數(shù)輕度減少(每位患者)和3位患者體內的電解質輕度失衡。
臨床試驗確定3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮即A10和AS2-1可有效地治療癌癥。Burzynski等(《藥物實驗與臨床研究》(Drugs Exptl.Clin.Res.)第12期增刊1,25-35(1986))報導了以不超過0.16g/kg/天的劑量將抗癌肽類AS2-1(100mg/mL活性組分)的靜脈溶液注入患者體內的治療方案。在21個腫瘤疾病的病例中，觀察到有6位患者完全緩解，2位患者部分緩解，7位患者保持穩(wěn)定，而6位患者疾病發(fā)展。
進行Ⅱ期臨床試驗，其中給患有星形細胞瘤的患者以0.5-1.3g/kg/天的劑量水平輸注A10(100mg/mL)或以0.2-0.5g/kg/天的劑量水平輸注AS2-1(100mg/mL)，持續(xù)67-706天(參見《化療最新進展》(Recent Advances in Chemotherapy)Adam,D.編輯，Munich:Futuramed,1992)。在20位患者中，4位經(jīng)歷了完全反應，2位經(jīng)歷了部分反應，10位經(jīng)歷了穩(wěn)定的病情，而4位經(jīng)歷病情發(fā)展。
在Samid的美國專利5,605,930(將該文獻的全部內容引入本文作為參考)中，將苯乙酸鈉單獨用于腫瘤人體癌癥且給藥劑量不超過0.3g/kg/天。然而，觀察到了低的濃度、流速和靜脈溶液劑量的許多缺陷。
首先，Burzynski等(《藥物實驗與臨床研究》(Drugs Exptl.Clin.Res.)第12期增刊1,11-16(1986))報導了使用5.0mg/mL的苯乙酸或抗癌肽類AS2-1可使HBL-100和KiNo.1腫瘤細胞系的集落完全減少。類似地，使用濃度為2.0mg/mL的3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮和濃度為3.0mg/mL的AS2-1觀察到了人乳腺癌細胞系MDA-MB-231的白細胞郁積。然而，3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮極難溶于水，而當對大鼠口服給藥時，峰值血漿濃度約為0.2mg/mL，大約低于在組織培養(yǎng)物實驗中觀察到的抑制細胞濃度的10倍。在典型的抗癌肽類AS2-1的給藥方案中，苯乙酸的峰值血漿濃度約為0.43mg/mL，大約低于在組織培養(yǎng)物實驗中觀察到的抑制細胞濃度的7倍。此外，3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮、其水解產物和AS2-1均可在體內快速清除。
此外，在腫瘤組織吸收抗癌肽類的過程中，在抗癌肽類的濃度等于血漿濃度的腫瘤組織外部與抗癌肽類的濃度處于最低且可以為0的腫瘤組織內部的點或多點之間形成濃度梯度。相對低的抗癌劑的血漿濃度由此導致腫瘤組織內的某些部分避免明顯吸收抗癌劑并保留其癌癥狀態(tài)。
第二，以2.5mL/小時-84mL/小時的低輸注速率給予含有3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮水解產物的溶液通常導致血漿中的廢物濃度升高。如此升高的典型廢物是尿酸。這種升高通過需要降低劑量或中斷治療來給予另外的藥物(例如別嘌醇)以降低廢物(例如尿酸)濃度而干擾了治療。
因此，需要擁有具有抗癌活性的氨基酸類似物的藥物組合物的靜脈制劑，其中該靜脈制劑可產生高血漿濃度的活性組分或多種活性組分以便以有效量的活性組分或有效量的多種活性組分完全透入腫瘤。還要求這類靜脈制劑不會導致血漿中的廢物濃度升高。
發(fā)明概括本發(fā)明涉及一種治療腫瘤疾病(包括癌癥)的方法，該方法包括對患者給予一種藥物組合物的步驟，該藥物組合物含有通式Ⅰ的苯乙酰谷氨酰胺化合物和通式Ⅲ的苯乙酰異谷氨酰胺化合物。通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的苯乙酰異谷氨酰胺化合物的重量比為4∶1。
通式Ⅰ由下列結構表示 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)或低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、成鹽陽離子諸如鈉、鉀或銨、二乙胺、環(huán)己胺、天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、低級烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H和C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；且R2是選自下列通式Ⅱ組成的組的芳基通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或選自通式Ⅱ的組，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。此外，通式Ⅰ的化合物可以作為外消旋混合物或作為獨立的旋光異構體或其任意的混合物使用。
通式Ⅲ由下列結構表示 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)或低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、成鹽陽離子諸如鈉、鉀或銨、二乙胺、環(huán)己胺、天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、低級烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H或C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；而R2是芳基(C6-12)或選自通式Ⅱ組成的組的取代芳基，其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或通式Ⅱ的取代芳基，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。同樣，通式Ⅲ的化合物可以作為外消旋混合物或作為獨立的旋光異構體或其任意的混合物使用。
在所述的組合物中，通式Ⅰ的苯乙酰谷氨酰胺化合物與通式Ⅲ的苯乙酰異谷氨酰胺化合物的水溶液的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL；且以2.5mL/小時-400mL/小時、優(yōu)選100mL/小時-400mL/小時的輸注速率給予該組合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療腫瘤疾病(包括癌癥)的方法，該方法包括給予一種藥物組合物的步驟，所述的藥物組合物包括下列通式Ⅳ的苯乙酸化合物通式Ⅳ 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、成鹽陽離子諸如鈉、鉀或銨、二乙胺、環(huán)己胺、天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、低級烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H或C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；而R2是選自通式Ⅱ組成的組的芳基，其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或選自通式Ⅱ的組的取代芳基，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。
在另一個實施方案中，通式Ⅳ化合物與通式Ⅰ的化合物一般在水溶液中的重量比為4∶1。在所述的組合物中，通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度為約70mg/mL-約150mg/mL；且以2.5mL/小時-400mL/小時、優(yōu)選100mL/小時-400mL/小時的輸注速率給予該組合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種包括通式Ⅳ化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1的藥物組合物，其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL；且以2.5mL/小時-400mL/小時、優(yōu)選100mL/小時-400mL/小時的輸注速率給予該組合物。
這些流速遠高于目前報導的任何公知的抗癌劑的流速。高流速有利于治療癌癥，這是因為它們可使活性劑抗癌肽類A10的血藥濃度達到大約2倍于常規(guī)的低輸注速率產生的血藥濃度。高流速使得血藥濃度可與證實在組織培養(yǎng)物中具有抗癌活性的那些活性劑的血藥濃度相比擬且還產生優(yōu)良的透入腫瘤組織的能力。高流速由此在癌癥治療過程中比低輸注速率更為有效。
解釋性實施方案的描述將下文所用的術語“抗癌肽類A10”定義為按4∶1比例混合的苯乙酰谷氨酰胺與苯乙酰異谷氨酰胺的鈉鹽的混合物。
將本文所用的術語“抗癌肽類AS2-1”和“AS2-1”定義為按4∶1比例混合的苯乙酸與苯乙酰谷氨酰胺的鈉鹽的混合物。
本文所用的術語“患者”包括人和獸患者。
根據(jù)提交本申請時公知的優(yōu)選實施方案來描述本發(fā)明，這些優(yōu)選的實施方案代表目前所關注的用于制備和使用本發(fā)明方法中的本發(fā)明藥物組合物的最佳實施方式。
A．藥物組合物的制備在一個實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包括下列通式Ⅰ的化合物通式Ⅰ 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)或低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、成鹽陽離子諸如鈉、鉀或銨、二乙胺、環(huán)己胺、天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H或C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；而R2是選自下列通式Ⅱ組成的組的芳基(C6-12)通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或選自通式Ⅱ的組的取代芳基，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。
通式Ⅰ的化合物與下列通式Ⅲ的化合物的質量比為4∶1通式Ⅲ 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、諸如鈉、鉀、銨這樣的成鹽陽離子、二乙胺、環(huán)己胺或天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H或C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；而R2是選自通式Ⅱ組成的組的芳基，其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或選自通式Ⅱ的組的取代芳基，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。
在所述的組合物中，通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的水溶液的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL。一般來說，使用每種化合物的外消旋混合物；然而，也可以使用獨立的旋光異構體。
在第二個實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包括下列通式Ⅳ的化合物的水溶液通式Ⅳ 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)或低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自芳基(C6-12)和取代芳基組成的組；M是氫、諸如鈉、鉀或銨這樣的成鹽陽離子、二乙胺、環(huán)己胺、或天然出現(xiàn)的MW低于500kD的氨基酸、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5。優(yōu)選的情況是，M是氫或鈉；n是0；R選自H或C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；而R2是選自通式Ⅱ組成的組的芳基，其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4。更優(yōu)選的情況是，R2是苯基或選自通式Ⅱ的組的取代芳基，其中X選自Cl、F或OH。最優(yōu)選的情況是，R2是苯基或苯基氯。
通式Ⅳ化合物與通式Ⅰ的化合物的質量比為4∶1，且在所述的組合物中，通式Ⅰ的化合物與通式Ⅳ的化合物的混合濃度為約70mg/mL-約150mg/mL。
在另一個實施方案中，通式Ⅳ化合物與通式Ⅲ的化合物的質量比為4∶1，且在所述的組合物中，通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度為約70mg/mL-約150mg/mL。
在通式Ⅰ中，優(yōu)選的化合物是苯乙酰谷氨酰胺和苯乙酰谷氨酰胺鈉及其L型旋光異構體；在通式Ⅲ中，優(yōu)選的化合物是苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酰異谷氨酰胺鈉；且在通式Ⅳ中，優(yōu)選的化合物是苯乙酸和苯乙酸鈉。
苯乙酰谷氨酰胺可以分離自人的體液例如尿或可以通過本領域公知的技術來合成它，例如用N.N’-二琥珀酰亞胺基碳酸鹽的乙腈溶液處理苯乙酸、隨后在有NaHCO3的1∶1乙腈/水混合物溶液存在的情況下使處理過的苯乙酸與L-谷氨酰胺反應。還可以通過使苯乙酰氯與L-谷氨酰胺在有NaHCO3水溶液存在的情況下反應來合成苯乙酰谷氨酰胺?？梢允褂玫牧硪环N合成方法是用氫氧化鈉處理3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮。
苯乙酰異谷氨酰胺可以通過下列步驟合成使苯乙酰氯與L-谷氨酰胺反應而生成苯乙酰谷氨酰胺；隨后在160℃下的真空中加熱而生成3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮；然后將其用氫氧化鈉處理。此外，可以通過用N.N’-二琥珀酰亞胺基碳酸鹽的乙腈溶液處理苯乙酸、隨后在有NaHCO3的1∶1乙腈/水混合物溶液存在的情況下使處理過的苯乙酸與L-異谷氨酰胺反應來制備苯乙酰異谷氨酰胺。不過，第二種合成方法需要L-異谷氨酰胺，它較為昂貴，所以以前的合成途徑優(yōu)選依靠經(jīng)濟的研磨法進行。
苯乙酸可以分離自人的體液例如尿或可以通過本領域公知的技術來合成它，諸如用稀硫酸或稀鹽酸回流芐基氰。
可以通過本領域公知的技術來合成通式Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的其它化合物。例如，酸加成的鹽可以由所述化合物的游離堿形式通過下列步驟生成使所述化合物的游離堿形式與一種相當?shù)暮线m的無毒性的藥物上可接受的酸反應；隨后蒸發(fā)用于該反應的溶劑且如果需要將所述的鹽重結晶。可以從所述的酸加成的鹽中回收游離堿，該步驟通過使所述的鹽與含有合適的堿諸如碳酸鈉、氫氧化鈉等的鹽的水溶液反應來進行。
“藥物上可接受的鹽”指的是具有母體化合物的生物活性并在所選擇的給藥濃度下不具有毒性活性的鹽。此外，通過對本領域技術人員來說公知的方法可以完成鹽是否是藥物上可接受的確定。苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的藥物上可接受的鹽包括但不限于無機鈉、鉀和銨鹽以及有機的二乙胺、環(huán)己胺和氨基酸的鹽。優(yōu)選所述的鹽是鈉鹽。
用于形成本發(fā)明化合物的酸加成的鹽的合適的酸包括但不限于乙酸、苯甲酸、苯磺酸、酒石酸、氫溴酸、鹽酸、檸檬酸、富馬酸、葡糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、乳酸、蘋果酸、馬來酸、甲磺酸、雙羥萘酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸和酒石酸。適合于形成無毒性的藥物上可接受的鹽的類型的酸對于藥物制劑領域的技術人員來說是眾所周知的。(參見，例如，Stephen N.Berge等《藥物科學雜志》(J.Pharm.Sciences)66:1-19(1977))。
本發(fā)明的化合物還可以借助于該化合物中存在的一個或多個不對稱中心而以不同的立體異構體形式存在。本發(fā)明關注所述化合物的所有立體異構體形式及其混合物包括外消旋混合物。如果需要，可以通過本領域公知的方法、例如手性層析柱上的立體異構體分離法來獲得各個立體異構體。
此外，本發(fā)明的化合物可以以非溶劑化形式以及含有諸如水、乙醇等這樣的藥物上可接受的溶劑的溶劑化形式以存在。一般來說，認為溶劑化形式與用于本發(fā)明目的的非溶劑化形式等價。
可以將苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的前體用于本發(fā)明。本文將苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的前體定義為可以在人體內代謝成苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的化合物。苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的藥物上可接受的前體是在所選擇的給藥濃度下不具有毒性活性的前體，無論它們自身還是前體與最終化合物之間的任意可代謝的中間產物。通過應用本領域技術人員公知的方法可以測定苯乙酰谷氨酰胺、苯乙酰異谷氨酰胺和苯乙酸的前體是否是藥物上可接受的。苯乙酰谷氨酰胺和苯乙酰異谷氨酰胺的優(yōu)選的前體是3-苯乙酰氨基-2,6-哌啶二酮。用于本發(fā)明的苯乙酸的優(yōu)選前體是苯基丁酸鹽，其結構如下苯基丁酸鹽 對于通式Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的化合物來說，在合成后需要純化?？梢詫⑷我夤募夹g用于從其它化合物和雜質中純化所需的化合物，例如包括HPLC和從水中結晶?？梢酝ㄟ^任意公知的方法對所述的化合物進行定量。
為了制備抗癌肽類A10的藥物組合物，按4∶1的比例制備苯乙酰谷氨酰胺鈉與苯乙酰異谷氨酰胺鈉的水溶液，使得苯乙酰谷氨酰胺在溶液中的濃度為160mg/mL-280mg/mL，且優(yōu)選230mg/mL-250mg/mL；而苯乙酰異谷氨酰胺在溶液中的濃度為40mg/mL-70mg/mL，且優(yōu)選55mg/mL-65mg/mL。使用本領域技術人員公知的任意技術均可以制備該溶液。注意應制成無菌溶液并將pH調節(jié)至血漿pH7.4的值或與之接近，例如pH7.0。如果需要，在制備所述溶液前可以將活性組分制成通式Ⅰ和Ⅲ中的任意化合物。
為了制備本發(fā)明的抗癌肽類AS2-1的藥物組合物，按4∶1的質量比制備苯乙酸鈉與苯乙酰谷氨酰胺鈉的水溶液，使得苯乙酸鹽的濃度為56mg/mL-120mg/mL，且優(yōu)選62mg/mL-66mg/mL；而苯乙酰谷氨酰胺的濃度為14mg/mL-30mg/mL，且優(yōu)選15mg/mL-17mg/mL。使用本領域技術人員公知的任意技術均可以制備該溶液。注意應制成無菌溶液并將pH調節(jié)至生理pH7.4的值或與之接近，例如pH7.0。如果需要這類應用，在制備所述溶液前可以將活性組分制成通式Ⅳ和Ⅰ中的任意化合物。
對于抗癌肽類A10和抗癌肽類AS2-1來說，所用的活性組分的濃度遠高于任意公知的預先報導的抗癌劑的水溶液組合物所用的那些濃度。
本發(fā)明的所有組合物均可以任意地包括其它試劑諸如作為本領域中公知的適用于為靜脈給藥制備的藥物組合物的緩沖化合物、葡萄糖、其它糖類、防腐劑等。
B．藥物組合物的給藥本發(fā)明的藥物組合物的可以通過靜脈給藥。靜脈給藥方法在本領域中是眾所周知的。
在本發(fā)明中，對于對成年人和未成年人給藥來說，抗癌肽類A10的靜脈輸注流速可以在2.5mL/小時-400mL/小時。優(yōu)選靜脈流速為100mL/小時-400mL/小時。對于成年人來說，一般流速為250mL/小時；而對于未成年人來說是100-250mL/小時，兒童年齡越大，流速一般越快。
這些流速遠高于任意公知的預先報導的抗癌劑的流速。高流速有利于治療癌癥，這是因為它們可使活性劑抗癌肽類A10的血藥濃度達到大約2倍于常規(guī)的低輸注速率產生的血藥濃度。高流速使得血藥濃度可與證實在組織培養(yǎng)物中具有抗癌活性的那些活性劑的血藥濃度相比擬且還產生優(yōu)良的透入腫瘤組織的能力。高流速由此在癌癥治療過程中比低輸注速率更為有效。
高流速的抗癌肽類A10的輸注和高濃度的抗癌肽類A10可產生利尿作用。利尿作用在防止因較大輸注體積而負載過量液體方面對患者有利。利尿作用還在提供用于消除可另外在體內累積的廢物的機制方面對患者有利。
可以以本發(fā)明的高流速每天給予本發(fā)明的抗癌肽類A10組合物一次或一次以上，例如每天4-12次，持續(xù)15分鐘-24小時的期限。典型的給藥方式是6-8次輸注/天，每次輸注約90分鐘-120分鐘的期限。
在患者對抗癌肽類A10有過敏反應(通常表現(xiàn)為皮疹)的情況中，可以跟隨脫敏方案。每日給予的總劑量為96次注射(靜脈給藥，每次15分鐘)，流速為1mL/分鐘-4mL/分鐘(240mL/小時)。
抗癌肽類A10的每日劑量水平可以在0.6g.kg/天-25g/kg/天。優(yōu)選的情況是，抗癌肽類A10的每日劑量水平為5.0g.kg/天-12.0g/kg/天。一般來說，抗癌肽類A10的每日劑量水平約為8.0g/kg/天。
本發(fā)明還涉及抗癌肽類AS2-1的靜脈輸注方法。對于對成年人給藥來說，抗癌肽類AS2-1的靜脈輸注流速可以在2.5mL/小時-400mL/小時；而對于未成年人給藥來說，它的靜脈輸注流速可以在25mL/小時-400mL/小時。對于成年人和未成年人來說，優(yōu)選的靜脈流速為100mL/小時-400mL/小時。對于成年人來說，一般的流速為250mL/小時；而對于未成年人來說，流速一般為100-250mL/小時，兒童年齡越大，流速一般越快。
這些流速遠高于任意公知的預先報導的抗癌劑的流速。高流速有利于治療癌癥，這是因為它們可使活性劑抗癌肽類AS2-1的血藥濃度達到大約2倍于常規(guī)的低輸注速率產生的血藥濃度。如上所述，高流速使得血藥濃度可與證實在組織培養(yǎng)物中具有抗癌活性的那些的血藥濃度相比擬且還產生優(yōu)良的透入腫瘤組織的能力。
高流速的抗癌肽類AS2-1輸注和高濃度的抗癌肽類A10可產生利尿作用。如上所述，利尿作用在防止因較大輸注體積而負載過量液體方面和在提供用于消除可另外在體內累積的廢物的機制方面對患者有利。
可以以本發(fā)明的高流速每天給予本發(fā)明的抗癌肽類AS2-1組合物一次或一次以上，例如每天4-12次，持續(xù)5分鐘-24小時的期限。典型的給藥方式是6-8次輸注/天，每次輸注約10分鐘-120分鐘的期限。
在患者對抗癌肽類AS2-1有過敏反應(通常表現(xiàn)為皮疹)的情況中，可以跟隨脫敏方案。每日給予的總劑量為96次注射(即每次15分鐘)，流速為1mL/分鐘-4mL/分鐘(240mL/小時)。
抗癌肽類AS2-1的每日劑量水平可以在0.1g/kg/天-2.6g/kg/天?？拱╇念怉S2-1的每日劑量水平優(yōu)選為0.2g/kg/天-0.9g/kg/天。一般來說，抗癌肽類AS10的每日劑量水平約為0.4g/kg/天。
上述治療方式用于治療患有所有種類的腫瘤疾病包括癌癥的患者，既包括硬組織和軟組織類型又包括惡性和良性腫瘤。特別地，對使用本發(fā)明公開的治療方式治療極為敏感的腫瘤疾病包括腎上腺癌；膀胱癌；乳腺癌；高級神經(jīng)膠質瘤；多形性成膠質細胞瘤；星形細胞瘤包括多形性成膠質細胞瘤和低級星形細胞瘤；腦干神經(jīng)膠質瘤；早期神經(jīng)外胚層腫瘤包括成神經(jīng)管細胞瘤和成松果體細胞瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)的桿狀腫瘤；少突神經(jīng)膠質瘤；混合型星形細胞瘤；神經(jīng)纖維瘤；神經(jīng)鞘瘤；視通路星形細胞瘤；室管膜瘤；生殖細胞腫瘤；腦膜瘤；結腸和直腸癌；食管癌；早期和轉移型肝癌；頭和頸部癌癥；肺腺癌；肺的大細胞未分化癌；肺的支氣管-肺泡癌；肺的鱗狀細胞癌；肺的非小型細胞癌；非霍金奇淋巴瘤；慢性白血病；間皮瘤；惡性黑色素瘤；惡性皮膚纖維瘤；多發(fā)性骨髓瘤；成神經(jīng)細胞瘤；神經(jīng)內分泌腫瘤；卵巢癌；胰腺癌；中樞神經(jīng)系統(tǒng)外部的早期桿狀腫瘤；前列腺的腺癌；腎癌；肉瘤；小腸癌；胃癌；子宮癌；外陰癌和未知的早期癌癥。
下列實施例用來證明本發(fā)明的優(yōu)選實施方案。本領域技術人員應認識到實施例中公開的技術代表本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)的在實施本發(fā)明過程中起良好作用的技術，且由此可以認為這些技術提供了用于實施本發(fā)明的優(yōu)選方式。然而，本領域技術人員顯然可以根據(jù)本說明書的公開內容對所公開的特定實施方案進行許多改變并仍然可以獲得相似或類似的結果而不會脫離本發(fā)明的實質和范圍。
實施例1通過每日靜脈給予平均劑量為7.9g/kg/天的抗癌肽類A10和平均劑量為0.39g/kg/天的抗癌肽類AS2-1來治療診斷為早期惡性腦瘤的43位患者。在這43位患者中，對36位進行評估；且16位通過完成療法而產生了完全或部分反應，沒有嚴重的副作用。
在這43位患者中，除一位患者外，所有患者均經(jīng)過組織學診斷而證明患早期腦瘤。剩余的患者在腦干內患有早期腦瘤，其中不能以足夠的安全性對腦干進行活檢。14位患者被診斷為多形性成膠質細胞瘤且6位患者被診斷為無定性星狀細胞瘤。
患者的年齡范圍在2-71歲。選擇Karnofsky PerformanceStatus為40-100、預期壽命超過2個月且年齡超過1歲的患者。將患有肝衰竭、無法充分控制的高血壓或懷孕或哺乳期的患者排除在外。所有患者均預先進行了陰性結果的外科手術或化療和/或放射療法。
如上所述制備抗癌肽類A10的制劑，其中苯乙酰谷氨酰胺的濃度為230mg/mL-250mg/mL且苯乙酰異谷氨酰胺的濃度為55mg/mL-65mg/mL；并將pH調節(jié)至7.0。如上所述制備抗癌肽類AS2-1的制劑，其中苯乙酸鈉的濃度為62mg/mL-66mg/mL且苯乙酰谷氨酰胺的濃度為15mg/mL-17mg/mL；并將pH調節(jié)至7.0。
患者通過單腔鎖骨下導管(Broviac,Groshong或等價物)接受靜脈注射的抗癌肽類?；颊咄ㄟ^使用便攜式Abbott Provider 6000雙通道可編程泵周期性多次注射而接受逐步增加的劑量，每天6次。對于成年人來說，輸注速率為250mL/小時，而對于18歲以下的人來說，輸注速率為50-100mL/小時，這取決于耐受性。給予輸注液91天-3509天范圍的期限，平均治療期限為661天?？拱╇念怉10的平均劑量為7.91g/kg/天而AS2-1的平均劑量為0.39g/kg/天?？拱╇念怉10的最高總劑量為551.865kg而AS2-1的足夠總劑量為59.348kg。
在開始治療前，接受評估的患者從手術(如果進行)中完全恢復或已經(jīng)間斷化療至少4周(如果化療由亞硝基脲類組成，那么已經(jīng)間斷了6周)和/或已經(jīng)中斷了放射療法至少6周。
在成象研究(MRI等)時將完全反應鑒定為所有反差增強的腫瘤完全消失4周或4周以上。將部分反應鑒定為反差增強的腫瘤的最大垂直直徑的產物總量減少了50％以上至少4周而沒有新的損害出現(xiàn)。
將疾病穩(wěn)定的情況鑒定為反差增強的腫瘤的最大垂直直徑的產物總量改變了50％以下(增加或減少)最少12周。將疾病發(fā)展的情況鑒定為反差增強的腫瘤的最大垂直直徑的產物總量增加了50％以上或有新的損害出現(xiàn)。
在36位經(jīng)過評估的患者中，有7位(19.5％)獲得了完全反應。有9位患者(25％)獲得了部分反應。在12位患者(33.3％)中觀察到了疾病穩(wěn)定的情況。8位患者(22.2％)的疾病在逐步發(fā)展。
在本試驗中注意到了大量不良的用藥經(jīng)歷包括血鈉過多、血氯過少、血氯過多、血鉀過少、皮疹、嗜睡、虛弱、惡心和嘔吐、頭痛、語言不清、意識模糊、幻覺、發(fā)熱和液體潴留。大多數(shù)不良用藥經(jīng)歷是輕微的且不會明顯妨礙治療過程。例如，有23個病例的血鈉過多不超過150mEq/L，12個病例不超過160mEq/L，且2個病例不超過170mEq/L。在6個病例中鑒定了血氯過少且在2個病例中鑒定了血氯過多。有7個病例的血鉀過少不低于2.8mEq/L?？雌饋砜拱╇念怉10的劑量限制因素是靜脈液體的體積，而對于AS2-1來說，劑量限制因素是增加的催眠和虛弱。
在16位分類為經(jīng)歷了完全或部分反應的患者中，13位依然存活，此時有8位患者被分類為疾病穩(wěn)定、疾病發(fā)展和未評估。存活患者中的大多數(shù)自病理診斷以來目前仍然活了4年以上；且2位患者(1位患有少突神經(jīng)膠質瘤且1位患有低級星形細胞瘤)自病理診斷以來已經(jīng)存活了約12年。
因此，使用以本發(fā)明的高流速和高每日劑量靜脈給予抗癌肽類A10和抗癌肽類AS2-1的高度濃縮的水溶液的癌癥療法在幾乎50％的經(jīng)評估的具有最低不良用藥經(jīng)歷的患者中產生了部分或完全反應。
實施例2在患有高級神經(jīng)膠質瘤的12位患者中進行抗癌肽類A10和AS2-1的Ⅱ期臨床研究。7位患者被診斷為多發(fā)性成膠質細胞瘤；4位患者被診斷為無定型星形細胞瘤，且1位患者被診斷為具有多發(fā)性轉移瘤的腦干神經(jīng)膠質瘤。
患者接受連續(xù)輸注的抗癌肽類A10和AS2-141天-713天?？拱╇念怉10的劑量水平為0.9g/kg/天-1.7g/kg/天，而AS2-1的劑量水平為0.2g/kg/天-0.8g/kg/天。
在本試驗中，在5位患者中注意到了輕度性質和偶然發(fā)生的不良用藥經(jīng)歷。2位患者表現(xiàn)出輕度的暫時性的白細胞計數(shù)下降且1位患者表現(xiàn)出暫時性的紅細胞計數(shù)和血紅蛋白下降。2位患者患有血鉀過少和血糖過少，1位患者患有增加的液體潴留，且1位患者在治療過程中具有一次胃痙攣和惡心。
在2位患者中觀察到了完全反應，而在2位患者中注意到了部分反應。4位患者經(jīng)歷了穩(wěn)定的病情，而4位患者經(jīng)歷了病情的發(fā)展。
實施例3對患有腦瘤的11位患者進行抗癌肽類A10和AS2-1的Ⅱ期臨床研究?？拱╇念怉10的劑量水平為3.9g/kg/天-12.9g/kg/天，而AS2-1的劑量水平為0.20g/kg/天-0.40g/kg/天。評估8位患者。通過完成治療，在5位患者中觀察到了部分反應。
患者患有腦瘤。使用如實施例1中所述的鎖骨下導管和雙通道輸注泵每天給予250mL/小時6次的抗癌肽類A10和AS2-1注射液。治療期限為44天-480天，平均治療期限為195天。抗癌肽類A10的劑量水平為3.9g/kg/天-12.9g/kg/天，平均劑量為7.2g/kg/天。AS2-1的劑量水平為0.20g/kg/天-0.40g/kg/天，平均劑量為0.29g/kg/天?？拱╇念怉10的最高總劑量為381.738kg，而AS2-1的最高總劑量為9.702kg。
在本研究中的8位經(jīng)過評估的患者中，在5位患者中觀察到了部分反應，在2位患者中觀察到了病情穩(wěn)定，而1位患者病情逐步發(fā)展。
鑒定了幾種可能的不良用藥經(jīng)歷，它們由血鈉過多、血氯過少、肌酸升高、過敏反應、嗜睡、虛弱、發(fā)熱和關節(jié)痛組成。不良用藥經(jīng)歷是輕微的且不會對治療的連續(xù)性具有顯著影響；特別地，有2個病例的血鈉過多不超過150mEq/L，且4個病例不超過160mEq/L。在1個病例中鑒定的血氯過少為82mEq/L，而有3個病例的血鉀過少不低于2.5mEq/L。
因此，使用以本發(fā)明的高流速和高每日劑量靜脈給予抗癌肽類A10和抗癌肽類AS2-1的高度濃縮的水溶液的癌癥療法在幾乎62.5％的經(jīng)評估的具有最低不良用藥經(jīng)歷的患者中產生了部分或完全反應。
實施例4對患有腦干神經(jīng)膠質瘤的15位患者進行抗癌肽類A10和AS2-1的Ⅱ期臨床研究?？拱╇念怉10的劑量水平為5.27g/kg/天-16.06g/kg/天，而AS2-1的劑量水平為0.20g/kg/天-0.57g/kg/天。在2位患者中觀察到了完全反應且2位患者獲得了部分反應。
15位患者患有用于研究的腦干神經(jīng)膠質瘤。評估他們中的14位?；颊呓邮苋鐚嵤├?中所述的抗癌肽類A10和AS2-1注射、每天6次?？拱╇念怉10的劑量水平為5.27g/kg/天-16.06g/kg/天，平均劑量為9.47g/kg/天。而AS2-1的劑量水平在0.20g/kg/天-0.57g/kg/天的范圍，平均劑量為0.37g/kg/天。抗癌肽類A10的最高總劑量為311.985kg，而AS2-1的最高總劑量為9.912kg。
在14位經(jīng)過評估的患者中，根據(jù)實施例1中得到的定義，在2位患者中觀察到了完全反應且2位患者獲得了部分反應。在5位患者中觀察到了病情穩(wěn)定，而5位患者病情逐步發(fā)展。
鑒定了幾種涉及用抗癌肽類A10和AS2-1治療的可能的不良用藥經(jīng)歷，它們由血鈉過多、血鉀過少、過敏性皮疹、轉氨酶升高、嗜睡、虛弱、呼吸困難、惡心和嘔吐、腹瀉、發(fā)熱和關節(jié)痛組成。有8個病例的血鈉過多不超過150mEq/L，有3個病例不超過165mEq/L，且1個病例為180mEq/L。在2個病例中鑒定的血鉀過少不低于2.5mEq/L。不良用藥經(jīng)歷是輕微的且不會對治療的連續(xù)性具有顯著影響。
因此，使用以本發(fā)明的高流速和高每日劑量靜脈給予抗癌肽類A10和抗癌肽類AS2-1的高度濃縮的水溶液的癌癥療法在幾乎30％的經(jīng)評估的具有最低不良用藥經(jīng)歷的患者中產生了部分或完全反應。
實施例5對患有混合型神經(jīng)膠質瘤的12位成年患者進行抗癌肽類A10和AS2-1的Ⅱ期臨床研究。評估9位患者?？拱╇念怉10的劑量水平為3.5g/kg/天-12.1g/kg/天，而AS2-1的劑量水平為0.24g/kg/天-0.40g/kg/天。在9位經(jīng)過評估的患者中，在3位患者中確定了完全反應且1位患者獲得了部分反應。
患者接受如實施例1中所述的抗癌肽類A10和AS2-1注射。治療期限為32天-615天，平均治療期限為191天?？拱╇念怉10的劑量水平為3.5g/kg/天-12.1g/kg/天，平均劑量為7.6g/kg/天。AS2-1的劑量水平為0.24g/kg/天-0.40g/kg/天，平均劑量為0.33g/kg/天?？拱╇念怉10的最高總劑量為192.907kg，而AS2-1的最高總劑量為11.189kg。
在12位患者中，9位經(jīng)過評估。在這9位中，根據(jù)實施例1中得到的定義，在3位患者中確定了完全反應且1位患者獲得了部分反應。在2位患者中觀察到了病情穩(wěn)定，而3位患者病情逐步發(fā)展。
遇到了幾種可能涉及可能用抗癌肽類A10和AS2-1治療的不良用藥經(jīng)歷。它們由血鈉過多、血氯過多、血鉀過少、腹瀉和惡心組成。有8個病例的血鈉過多不超過150mEq/L且有2個病例不超過160mEq/L。在每個病例中均觀察到了血氯過多為111mEq/L且血鉀過少為3.1mEq/L。不良用藥經(jīng)歷是輕微的且不會對抗癌肽類給藥的連續(xù)性具有顯著影響。
在臨床試驗中的毒性觀察結果小結根據(jù)采集自1,003位在由FDA批準的67Ⅱ期臨床研究方案中登記的患有各種類型的惡性腫瘤患者的數(shù)據(jù)來分析不良用藥經(jīng)歷的發(fā)生率。在上述實施例中具體描述了某些而非全部Ⅱ期研究方案。因為在許多情況中，參與這些臨床研究中的患者患晚期癌癥，存活期短，所以如果副作用是因疾病晚期還是抗癌肽類治療方式所導致的，那么通常難以鑒定。在任何情況中，僅有1.7％的患者經(jīng)歷了嚴重(3或4級)毒性。
在抗癌肽類A10和AS2-1的Ⅱ期臨床試驗中且除特別的例外以外，0.3％的患者經(jīng)歷了4級毒性，特別是單個病例的血鈉過多、血小板減少和血膽紅素過多。1.4％的患者經(jīng)歷了3級毒性，特別是血鈉過多、血鈣過少、血鉀過少、血鎂過少、SGOT升高或SGPT升高。
在18.6％的患者中觀察到了2級毒性且涉及無感染性發(fā)熱(3.3％)、血鉀過少(3.0％)、血鈉過多(2.0％)、血氯過少(1.9％)和諸如意識模糊和催眠(1.5％)這樣的神經(jīng)皮質癥狀。0.5％-0.9％的患者經(jīng)歷了過敏反應、血鎂過少、神經(jīng)聽覺癥狀、嘔吐、諸如頭暈和語言含糊這樣的神經(jīng)小腦癥狀、惡心或血氯過多。低于0.5％的患者經(jīng)歷了血紅蛋白減少、血鈣過少、SGPT升高、液體潴留、神經(jīng)運動衰弱或神經(jīng)視覺癥狀；還在單個病例中觀察到了寒戰(zhàn)、腹瀉、粒細胞減少、白細胞減少、淋巴細胞減少、頭痛、多神經(jīng)病和SGOT升高。
大多數(shù)患者經(jīng)歷了實驗室異常和次要癥狀形式的1級毒性，包括血鈉過多(54.3％)、血鉀過少(18.0％)、過敏反應(14.2％)、神經(jīng)皮質癥狀(9.1％)、神經(jīng)運動衰弱(7.8％)、嘔吐(7.6％)、血氯過少(7.1％)、惡心但不嘔吐(6.8％)和無感染性發(fā)熱(6.0％)。在7.5％的患者中觀察到了局部毒性，通常最常見關節(jié)痛；還觀察到了肌痛、關節(jié)炎和結節(jié)紅斑。
另外，在1.0％-5.0％的患者中觀察到了1級毒性血氯過多、頭痛、神經(jīng)小腦癥狀、腹瀉、液體潴留、血鎂過少、神經(jīng)聽覺癥狀、血鈉過少和肺呼吸困難。罕有(低于1.0％)的不良用藥經(jīng)歷包括血鈣過少、寒戰(zhàn)、便秘、神經(jīng)視覺癥狀、SGOT和SGPT升高、高血壓、表皮形成增加、血小板減少；且單個病例出現(xiàn)堿性磷酸酶、膽紅素、肌酸升高或粒細胞減少、血紅蛋白減少和血鈣過多。
幾乎所有患者均經(jīng)歷了尿量增加(98.3％)和輕度饑渴，這些癥狀大多數(shù)可能是由靜脈給予的液體體積較大而造成的。血鈉過多的高發(fā)生率大多數(shù)可能由抗癌肽類作為鈉鹽吸收、脫水和惡性腫瘤、特別是腦部和肝部腫瘤所導致。
抗癌肽類A10的最大給藥劑量為25g/kg/天，而AS2-1的最大給藥劑量為2.59g/kg/天。
可以根據(jù)本說明書的公開內容來制備和完成本文所公開和要求保護的全部組合物和方法而沒有不合適的實驗方法。盡管已經(jīng)根據(jù)優(yōu)選的實施方案描述了本發(fā)明的組合物和方法，但是對于本領域技術人員來說，顯而易見的是可以對這些組合物和方法以及本文所述方法的步驟和步驟的順序進行改變而不會脫離本發(fā)明的原則、實質和范圍。更具體地說，顯然可以用化學和生理上相關的某些活性劑來替代本文所述的活性劑同樣可以達到相同或類似的結果。所有這類相似的替換和修改對于本領域技術人員來說均是顯而易見的，認為它們均屬于由所附權利要求所定義的本發(fā)明的實質、范圍和原則之內。
參考文獻將下列參考文獻特別引入本文作為參考，就這些參考文獻而言，它們對本文所述的那些技術方案提供了典型的程序上的或其它具體的補充。
Burzynski，美國專利4,470,970；Burzynski等《藥物實驗與臨床研究》(Drugs Exptl.Clin.Res.)第12期增刊1,25-35(1986)；Burzynski等《藥物實驗與臨床研究》(Drugs Exptl.Clin.Res.)第12期增刊1,11-16(1986)；Samid，美國專利5,605,930。
權利要求
1．一種藥物組合物，它包括一種通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及一種通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ。
2．權利要求1的藥物組合物，其中在通式Ⅰ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH；且在通式Ⅲ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R選自H和C3H7組成的組；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是是Cl、F或OH。
3．權利要求1的藥物組合物，其中所述的通式Ⅰ的化合物是苯乙酰谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽；且通式Ⅲ的化合物是苯乙酰異谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽。
4．權利要求3的藥物組合物，進一步包括足以形成苯乙酰谷氨酰胺與苯乙酰異谷氨酰胺的水溶液的水，其中苯乙酰谷氨酰胺與苯乙酰異谷氨酰胺的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL。
5．權利要求4的藥物組合物，其中所述的混合濃度約為300mg/mL。
6．權利要求1的藥物組合物，其中所述的通式Ⅰ的化合物與所述的通式Ⅲ的化合物的重量比約為4∶1。
7．一種藥物組合物，它包括一種通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及一種通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的重量比約為4∶1；以及足以形成通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的水溶液的水，其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
8．權利要求7的藥物組合物，其中在通式Ⅳ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH；且在通式Ⅰ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是是Cl、F或OH。
9．權利要求7的藥物組合物，其中所述的通式Ⅳ的化合物是苯乙酸或其藥物上可接受的鹽；且所述的通式Ⅰ的化合物是苯乙酰谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽。
10．權利要求9的藥物組合物，其中所述的混合濃度約為80mg/mL。
11．一種藥物組合物，它包括一種通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及一種通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ。
12．權利要求11的藥物組合物，其中在通式Ⅳ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH；且在通式Ⅲ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH。
13．權利要求11的藥物組合物，其中所述的通式Ⅳ的化合物是苯乙酸或其藥物上可接受的鹽；且所述的通式Ⅲ的化合物是苯乙酰異谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽。
14．權利要求13的藥物組合物，其中所述的混合濃度約為80mg/mL。
15．權利要求11的藥物組合物，其中所述的通式Ⅳ的化合物與所述的通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1。
16．權利要求11的藥物組合物，進一步包括足以形成通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的水溶液的水，其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
17．一種藥物組合物，它包括一種通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；所述的通式Ⅰ的化合物是外消旋混合物、L或R旋光異構體或其混合物；以及一種藥物上可接受的稀釋劑。
18．權利要求17的藥物組合物，其中在通式Ⅰ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH。
19．權利要求17的藥物組合物，其中是的通式Ⅰ的化合物是苯乙酰谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽。
20．權利要求17的藥物組合物，進一步包括足以形成約200mg/mL-約350mg/mL濃度范圍的苯乙酰谷氨酰胺水溶液的水。
21．一種藥物組合物，它包括一種通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；所述的通式Ⅰ的化合物是外消旋混合物、L或R旋光異構體或其混合物；以及一種藥物上可接受的稀釋劑。
22．權利要求21的藥物組合物，其中在通式Ⅲ的化合物中，M是氫或鈉；n是0；R是H或C3H7；R1選自H、CH3、CH3-O-、C2H5和C3H7組成的組；R2選自通式Ⅱ，其中X是Cl、F或OH。
23．權利要求21的藥物組合物，其中所述的通式Ⅲ的化合物是苯乙酰異谷氨酰胺或其藥物上可接受的鹽。
24．權利要求21的藥物組合物，進一步包括足以形成約200mg/mL-約350mg/mL濃度范圍的苯乙酰異谷氨酰胺水溶液的水。
25．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括以約100mL/小時-約400mL/小時的輸注速率對患者給予一種藥物組合物的步驟，所述的藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL。
26．權利要求25的方法，其中所述的輸注速率約為250mL/小時-約300mL/小時且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.6g/kg/天-約25g/kg/天的劑量水平的給藥步驟。
27．權利要求26的方法，其中所述的劑量水平約為5.0g/kg/天-約12.0g/kg/天。
28．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括以約100mL/小時-約400mL/小時的輸注速率對患者給予一種藥物組合物的步驟，所述的藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
29．權利要求28的方法，其中所述的輸注速率約為250mL/小時-約300mL/小時且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.1g/kg/天-約2.6g/kg/天的劑量水平的給藥步驟。
30．權利要求29的方法，其中所述的劑量水平約為0.2g/kg/天-約0.9g/kg/天。
31．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括以約100mL/小時-約400mL/小時的輸注速率對患者給予一種藥物組合物的步驟，所述的藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基、取代芳基(C6-12)或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
32．權利要求31的方法，其中所述的輸注速率約為250mL/小時-約300mL/小時且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.1g/kg/天-約2.6g/kg/天的劑量水平的給藥步驟。
33．權利要求32的方法，其中所述的劑量水平約為0.2g/kg/天-約0.9g/kg/天。
34．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括對患者給予下列第一種和第二種藥物組合物的步驟其中第一種藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL，輸注速率約為100mL/小時-400mL/小時；其中第二種藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；以及通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅳ的化合物與通式Ⅰ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL，輸注速率約為100mL/小時-400mL/小時。
35．權利要求34的方法，其中第一種藥物組合物的輸注速率約為250mL/小時-300mL/小時而第二種藥物組合物的輸注速率約為250mL/小時-300mL/小時；且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.6g/kg/天-約25g/kg/天的第一種藥物組合物的劑量水平和約0.1g/kg/天-約2.6g/kg/天的第二種藥物組合物的劑量水平的給藥步驟。
36．權利要求35的方法，其中第一種藥物組合物的劑量水平約為5.0g/kg/天-約12.0g/kg/天；而其中第二種藥物組合物的劑量水平約為0.2g/kg/天-約0.9g/kg/天。
37．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括對患者給予第一種藥物組合物和第二中藥物組合物的步驟其中第一種藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅰ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基(C6-12)、取代芳基或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；以及通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅰ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為200mg/mL-約350mg/mL，輸注速率約為100mL/小時-400mL/小時；其中第二種藥物組合物包括下列化合物的水溶液通式Ⅳ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；以及通式Ⅲ的化合物 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自通式Ⅱ；其中通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的重量比為4∶1且通式Ⅳ的化合物與通式Ⅲ的化合物的混合濃度約為70mg/mL-約150mg/mL，輸注速率約為100mL/小時-約400mL/小時。
38．權利要求37的方法，其中第一種藥物組合物的輸注速率約為250mL/小時-300mL/小時而第二種藥物組合物的輸注速率約為250mL/小時-300mL/小時；且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.6g/kg/天-約25g/kg/天的第一種藥物組合物的劑量水平和約0.1g/kg/天-約2.6g/kg/天的第二種藥物組合物的劑量水平的給藥步驟。
39．權利要求38的方法，其中第一種藥物組合物的劑量水平約為5.0g/kg/天-約12.0g/kg/天；而其中第二種藥物組合物的劑量水平約為0.2g/kg/天-約0.9g/kg/天。
40．一種治療腫瘤疾病的方法，該方法包括以約100mL/小時-約400mL/小時的輸注速率對患者給予一種藥物組合物的步驟，所述的藥物組合物包括下列通式Ⅳ的化合物的水溶液 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基、取代芳基(C6-12)或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；且其中通式Ⅳ的化合物的濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
41．權利要求40的方法，其中所述的輸注速率約為250mL/小時-約300mL/小時且該方法進一步包括進行通常足以達到約0.1g/kg/天-約2.6g/kg/天的劑量水平的給藥步驟。
42．權利要求41的方法，其中所述的劑量水平約為0.2g/kg/天-約0.9g/kg/天。
43．權利要求40的方法，其中所述的通式Ⅳ的化合物是苯乙酸或其藥物上可接受的鹽。
44．權利要求40的方法，其中所述的通式Ⅳ的化合物是一種前體化合物。
45．權利要求44的方法，其中所述的通式Ⅳ的前體化合物是苯基丁酸或其藥物上可接受的鹽。
46．一種藥物組合物，它包括下列通式Ⅳ的化合物的水溶液 其中R和R1獨立地選自H、低級烷氧基(C1-6)和低級烷基(C1-6)組成的組；R2選自下列通式Ⅱ 其中X是鹵素、低級烷基(C1-6)、低級烷氧基(C1-6)、環(huán)烷基、環(huán)烷氧基、芳基、取代芳基(C6-12)或羥基且n為0、1、2、3或4；M是氫、成鹽陽離子、烷基(C1-6)、環(huán)烷基或芳基(C6-12)；且n為0-5；且其中通式Ⅳ的化合物的濃度約為70mg/mL-約150mg/mL。
47．權利要求46的組合物，其中所述的通式Ⅳ的化合物是苯乙酸或其藥物上可接受的鹽。
48．權利要求46的組合物，其中所述的通式Ⅳ的化合物是一種前體化合物。
49．權利要求48的組合物，其中所述的通式Ⅳ的前體化合物是苯基丁酸或其藥物上可接受的鹽。
全文摘要
本文公開了一種治療腫瘤疾病(包括癌癥)的方法,該方法包括以100mL/小時－400mL/小時的輸注速率給予一種藥物組合物的步驟,該藥物組合物含有4∶1比例的苯乙酰谷氨酰胺與苯乙酰異谷氨酰胺的高度濃縮的水溶液。在進一步的實施方案中,本文還公開了一種治療腫瘤疾病(包括癌癥)的方法,該方法包括以100mL/小時－400mL/小時的輸注速率給予一種藥物組合物的步驟,該藥物組合物含有4∶1比例的苯基乙酸鹽與(苯乙酰谷氨酰胺或苯乙酰異谷氨酰胺)的高度濃縮的水溶液。本文還公開了用于上述方法的藥物組合物。
文檔編號A61K31/19GK1319010SQ99811314
公開日2001年10月24日 申請日期1999年7月2日 優(yōu)先權日1998年7月23日
發(fā)明者斯坦尼斯勞·R·伯辛斯基 申請人:斯坦尼斯勞·R·伯辛斯基