本發(fā)明涉及一種改善骨密度的組合物及其制備方法，屬于保健組合物
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：骨質(zhì)疏松癥流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)，骨強(qiáng)度及骨折的發(fā)生與骨礦含量(bonemineralcontent，bmc)有關(guān)。影響bmc的最重要因素是鈣，鈣攝入不足將導(dǎo)致骨鈣動(dòng)員增加，骨密度峰值下降或骨質(zhì)丟失加速。影響骨質(zhì)丟失的因素有高齡、絕經(jīng)、鈣攝入減少、體力活動(dòng)少、嗜煙酒及藥物等。與高齡有關(guān)的主要因素是成骨細(xì)胞功能和腸鈣吸收能力下降。骨質(zhì)疏松病理機(jī)制的一個(gè)重要方面是成骨細(xì)胞的增殖與分化受到抑制，不能形成足量的骨膠原蛋白和非膠原性蛋白，從而使骨小梁變得稀松、斷裂，骨質(zhì)量和骨量均下降。成骨細(xì)胞不僅決定骨的形成，同時(shí)也調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞對(duì)骨的吸收，是骨代謝的主要功能細(xì)胞，其增殖在很大程度上決定最終形成的骨量。因此，為機(jī)體補(bǔ)充適量鈣質(zhì)和提高成骨細(xì)胞的功能是增加骨密度，預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的基本途徑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種改善骨密度的組合物，該組合物以多種有利于改善骨密度的成分協(xié)同作用，提高骨密度的改善效率。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的可以通過采取如下技術(shù)方案達(dá)到：一種改善骨密度的組合物，包括按重量份計(jì)的以下成分：作為優(yōu)選，所述改善骨密度的組合物包括按重量份計(jì)的以下成分：作為優(yōu)選，所述改善骨密度的組合物包括按重量份計(jì)的以下成分：本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種上述改善骨密度的組合物的制備方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的可以通過采取如下技術(shù)方案達(dá)到：一種如上所述的改善骨密度的組合物的制備方法，包括：將原料混合的步驟；及，將混合后的原料制備成溶液、粉劑、顆?；蚱５牟襟E。作為優(yōu)選，所述制備方法包括以下步驟：1)過篩：將原料分別過相同目的篩；2)混料制粒：以等量遞增的方式先將維生素d3與羧甲基纖維素鈉混合，然后加入d-氨基葡萄糖鹽酸鹽、硫酸軟骨素、碳酸鈣和微晶纖維素，混合均勻后制粒，過篩，得顆粒；3)壓片：將顆粒與硬脂酸鎂混合，然后壓片，得到改善骨密度的組合物。作為優(yōu)選，步驟1)中，將原料分別過60目篩。作為優(yōu)選，步驟2)中，將制粒后的顆粒過18目篩。作為優(yōu)選，步驟3)中，壓片后調(diào)節(jié)每片的片重為0.85g。本發(fā)明的配方設(shè)計(jì)原理如下：相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明立足于骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機(jī)理，在現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究成果的基礎(chǔ)上，研究得到一種改善骨密度的組合物，該組合物通過更加優(yōu)良的成分配比，促進(jìn)成分間的協(xié)同作用，提高骨密度的改善效率。具體實(shí)施方式下面，結(jié)合具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述：一種改善骨密度的組合物，包括按重量份計(jì)的以下成分：以上的改善骨密度的組合物通過以下步驟制備得到：1)過篩：將原料分別過60目篩；2)混料制粒：以等量遞增的方式先將維生素d3與羧甲基纖維素鈉混合，然后加入d-氨基葡萄糖鹽酸鹽、硫酸軟骨素、碳酸鈣和微晶纖維素，混合均勻后制粒，過18目篩，得顆粒；3)壓片：將顆粒與硬脂酸鎂混合，然后壓片，壓片后調(diào)節(jié)每片的片重為0.85g，得到改善骨密度的組合物。本發(fā)明中，d-氨基葡萄糖鹽酸鹽是由天然的甲殼質(zhì)提取并經(jīng)鹽酸水解得到的一種海洋生物制劑，對(duì)人體有重要的生理作用。研究表明，氨基葡萄糖鹽酸鹽參與肝腎解毒，可發(fā)揮抗炎、護(hù)肝作用；刺激嬰兒腸道中雙歧桿菌的增生等；在醫(yī)藥上作為抗菌消炎藥物，用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥和胃潰瘍疾病。有研究表明，用不同劑量的氨基葡萄糖對(duì)絕經(jīng)骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型進(jìn)行的試驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組堿性磷酸酶(alp)、抗酒石酸酸性磷酸酶(trap)、甘油三酯(tg)、膽固醇(cho)、低密度脂蛋白(ldl)、肌酐(cr)都明顯升高，氨基葡萄糖中劑量(0.25g/kg)能明顯降低上述6個(gè)指標(biāo)的水平(p<0.05)，這表明氨基葡萄糖對(duì)去勢(shì)大鼠過高的骨轉(zhuǎn)換有明顯的抑制作用，并能提高骨再建能力，對(duì)去卵巢致骨質(zhì)疏松有明顯的對(duì)抗作用。本發(fā)明中，硫酸軟骨素是存在于人和動(dòng)物結(jié)締組織中的酸性粘多糖，主要分布于軟骨、骨、肌腱、肌膜和血管中。他是結(jié)締組織中天然存在的成分，能夠結(jié)合水分子用于潤滑和支撐關(guān)節(jié)，使關(guān)節(jié)活動(dòng)自如，減輕關(guān)節(jié)疼痛?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，硫酸軟骨素還有一個(gè)重要的作用就是促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，增加骨密度，從而對(duì)防治骨質(zhì)疏松癥有一定的作用。其中，鈣是人體骨組織的主要成分，人體中的鈣99％存在于骨骼和牙齒中。機(jī)體內(nèi)的鈣通常是在血液及骨骼間保持動(dòng)態(tài)平衡的，即骨鈣不斷從破骨細(xì)胞中釋出進(jìn)入血液，而血液中的鈣又不斷沉積于成骨細(xì)胞中，以保持人體生理活動(dòng)的正常進(jìn)行。這種動(dòng)態(tài)平衡主要有甲狀旁腺素、降鈣素和1,25-(oh)2-d3中激素組成鈣含量，因此本發(fā)明添加碳酸鈣，以維持使用者體內(nèi)鈣的平衡。實(shí)施例1-3：實(shí)施例1-3公開了一種改善骨密度的組合物，其成分如表格1所示：表格1實(shí)施例1-3的成分成分實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3d-氨基葡萄糖鹽酸鹽230g260g252g硫酸軟骨素210g190g195g碳酸鈣185g195g190g維生素d30.4g0.5g0.35g微晶纖維素185g170g185g羧甲基纖維素鈉25g27g24g硬脂酸鎂4g3.5g2.8g并以具體實(shí)施方式中所述的制備步驟制備成片。對(duì)實(shí)施例1-3得到的改善骨密度的組合物進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目和標(biāo)準(zhǔn)如表格2所示：表格2實(shí)施例1-3檢測(cè)結(jié)果以實(shí)施例3得到的片劑，進(jìn)行增加骨密度功能試驗(yàn)：一、材料：來源：由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供的清潔級(jí)動(dòng)物；品系：清潔級(jí)wistar大鼠，雄性50只，批準(zhǔn)證號(hào)：scxk-(吉)2007-0003；體重：60.3-75g；飼養(yǎng)條件：本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施合格證：吉?jiǎng)釉O(shè)字10-1005，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：syxk-(吉)2010-0011；溫度20-22℃、濕度55-65％；飼料由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，合格證號(hào)：scxk-(吉)2010-0001；劑量選擇：以成人(體重60kg計(jì))攝入實(shí)施例3的片劑為每日3次，每次兩片，0.85g/片，即5.1g/60kgbw。樣品含鈣量9.4％。本實(shí)驗(yàn)設(shè)低、中、高三個(gè)劑量，即0.43、0.85、2.55g/kgbw，相當(dāng)于成人推薦劑量的5倍、10倍、30倍，另設(shè)低鈣對(duì)照組(基礎(chǔ)飼料組，含鈣量為1.5g/kg)與高劑量鈣對(duì)照組(含鈣量為40％的碳酸鈣)。樣品配制：根據(jù)本實(shí)驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)要求，分別取25.5g、8.5g、4.25g受試物溶于蒸餾水至100ml混勻定容，采用經(jīng)口灌胃方式給予受試物；低鈣對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料同時(shí)每日給予蒸餾水灌胃；高劑量鈣對(duì)照組為含鈣量為40％的碳酸鈣6g溶于蒸餾水至100ml制成混懸液經(jīng)口灌胃反式給予；各組每次灌胃量均為1ml/100gbw?；A(chǔ)飼料：用以下配方的基礎(chǔ)飼料配制高劑量鈣對(duì)照組以及各劑量組?；A(chǔ)飼料配方(ca2+計(jì)，調(diào)整為150mg/100g飼料)表格3基礎(chǔ)飼料配方成分質(zhì)量百分比(％)酪蛋白10黃豆粉15小麥面粉54花生油4纖維素2混合鹽2.6混合維生素1氯化膽堿0.2d1-蛋氨酸0.2淀粉11黃豆粉需要高壓處理后用，每kg混合鹽中組分含量：kh2po4501.4g；nacl74g；mgco350.2g；乳酸亞鐵5.4g；乳酸鋅4.16g；mnco33.5g；cuso4·5h2o0.605g；na2seo36.6mg；ki7.76mg；cr3cl·6h2o0.292g；加蔗糖到1kg?；旌暇S生素：每kg混合維生素中各組分含量：維生素a：400000iu；維生素d3:100000iu；維生素e：500iu；維生素k：5mg；維生素b1:600mg；維生素b2:600mg；維生素b6:700mg；維生素b12:1mg；尼克酸：3g；葉酸：200mg；泛酸鈣：1.6g；生物素：20mg；加蔗糖至1kg。給樣途徑：采用經(jīng)口灌胃方式給予受試物，每周稱重調(diào)整灌胃量。二、實(shí)驗(yàn)方法：出生四周的斷乳大鼠經(jīng)適應(yīng)期三天后，禁食12小時(shí)稱體重，按體重隨機(jī)分組，每組10只，分籠飼養(yǎng)。飲用去離子水以避免從飲水中獲得鈣。各組按計(jì)量設(shè)計(jì)給予樣品三個(gè)月，每周記錄各組動(dòng)物體重。鈣代謝實(shí)驗(yàn)：第三周做鈣吸收實(shí)驗(yàn)，然后繼續(xù)喂養(yǎng)。鈣吸收實(shí)驗(yàn)：出生四周的斷乳大鼠飼養(yǎng)四周。每周測(cè)量體重、體長一次。實(shí)驗(yàn)三周后進(jìn)行三天鈣代謝實(shí)驗(yàn)。記錄三天進(jìn)食量，收集72小時(shí)糞便，測(cè)定飼料及糞便中鈣含量。飼料樣品經(jīng)均勻混合并過20目篩；鼠糞樣品在105℃烘箱中烘干，置干燥器中冷卻后磨細(xì)。注意防止在樣品制備過程中的污染。準(zhǔn)確稱取烘干磨細(xì)的一定量的樣品，置于150ml三角瓶中，上蓋小漏斗，加入混合酸(硝酸：高氯酸＝4:1)15ml，在電熱板上加熱消化直至冒白煙并透明無色。酸液不夠時(shí)可以再加入少量混合酸。消化液透明無色后加數(shù)毫升去離子水，煮沸以趕除剩余的酸，重復(fù)兩次，最后消化液的體積不超過1ml。消化樣品時(shí)應(yīng)同時(shí)作空白試驗(yàn)，加入與樣品消化時(shí)相同體積的混合酸，在相同條件下消化。按照原子吸收分光光度計(jì)儀器說明書的步驟進(jìn)行。測(cè)定液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白均用0.5％氧化鑭溶液稀釋，定容。按下列公式計(jì)算：鈣的表觀吸收率％＝(攝入鈣-糞鈣)/攝入鈣×100％股骨骨密度測(cè)定：解剖大鼠，剖離左側(cè)股骨，應(yīng)用吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院法國產(chǎn)雙能x線骨密度儀，型號(hào)為lexxosdexa型骨密度儀測(cè)量大鼠股骨中點(diǎn)及股骨遠(yuǎn)心端骨密度。將股骨烤干至恒重，稱量骨干重。骨鈣含量測(cè)定：采用原子吸收法測(cè)量，原子吸收儀為aa6401f型。取大鼠一側(cè)股骨在105℃烘箱中烘干至恒重。準(zhǔn)確稱取一定量樣品，置于150ml三角瓶中，上蓋小漏斗，加入混合酸(硝酸：高氯酸＝4:1)15ml，在電熱板上加熱消化直至冒白煙并透明無色。酸液不夠時(shí)可以再加入少量混合酸。消化液透明無色后加數(shù)毫升去離子水，煮沸以趕除剩余的酸，重復(fù)兩次，最后消化液的體積不超過1ml。消化樣品時(shí)應(yīng)同時(shí)作空白試驗(yàn)，加入與樣品消化時(shí)相同體積的混合酸，在相同條件下消化。按照原子吸收分光光度計(jì)儀器說明書的步驟進(jìn)行。測(cè)定液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白均用0.5％氧化鑭溶液稀釋，定容。計(jì)算公式：c：測(cè)定試樣液中元素濃度(μg/ml)；v：定容體積，v＝25ml；f：稀釋倍數(shù)，f＝250；m：取樣量(g)。統(tǒng)計(jì)方法：數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理采用spss11.5統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析進(jìn)行均值比較，方差齊時(shí)，各組間兩兩比較用lsd法，方差不齊時(shí)，各組間兩兩比較采用tamhane法。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)大鼠體重的影響，如表格4所示：表格4大鼠體重檢測(cè)p1值：各實(shí)驗(yàn)組與基礎(chǔ)飼料組比較。p2值：各實(shí)驗(yàn)組與高劑量鈣對(duì)照組比較。與基礎(chǔ)飼料組或高劑量鈣對(duì)照組比較p＜0.05。由表格4可見，各實(shí)驗(yàn)組與高劑量鈣對(duì)照組、基礎(chǔ)飼料組比較大鼠始重?zé)o顯著性差異(p＞0.05)。經(jīng)口給予大鼠實(shí)施例3的片劑3個(gè)月后，2.55g/kgbw劑量組終重與增重高于基礎(chǔ)飼料組，且差異有顯著性(p＜0.05)；其他劑量組分別與基礎(chǔ)飼料組、高劑量鈣對(duì)照組比較無顯著性差異(p＞0.05)。對(duì)大鼠身長的影響：表格5大鼠身長檢測(cè)p1值：各實(shí)驗(yàn)組與基礎(chǔ)飼料組比較。p2值：各實(shí)驗(yàn)組與高劑量鈣對(duì)照組比較。從表格5可見，各實(shí)驗(yàn)組分別與基礎(chǔ)飼料組、高劑量鈣對(duì)照組比較無顯著性差異(p＞0.05)。對(duì)大鼠鈣代謝的影響：表格6大鼠鈣代謝檢測(cè)p值：各實(shí)驗(yàn)組與高劑量鈣對(duì)照組表觀吸收率比較。從表格6可見，經(jīng)口給予大鼠實(shí)施例3的片劑3個(gè)月后，2.55g/kgbw劑量組的表觀吸收率與高劑量鈣對(duì)照組比較無顯著差異(p＞0.05)；中、低劑量組的表觀吸收率明顯高于高劑量鈣對(duì)照組，且差異有顯著性(p＜0.05)。說明實(shí)施例3的表觀吸收率不低于高劑量鈣對(duì)照組，可作為補(bǔ)鈣劑。對(duì)大鼠股骨的重量、骨鈣及股骨骨密度的影響：表格7大鼠股骨骨重、骨鈣和骨密度檢測(cè)p1值：各實(shí)驗(yàn)組與基礎(chǔ)飼料組比較。p2值：各實(shí)驗(yàn)組與高劑量鈣對(duì)照組比較。從表格7可見，經(jīng)口給予大鼠實(shí)施例3的片劑3個(gè)月后，2.55g/kgbw劑量組的股骨干重、股骨遠(yuǎn)心端骨密度、股骨中點(diǎn)骨密度、骨鈣含量明顯高于基礎(chǔ)飼料組，且差異有顯著性(p＜0.05)；高劑量鈣對(duì)照組與2.55g/kgbw劑量組比較無顯著性差異(p>0.05)。說明實(shí)施例3股骨遠(yuǎn)心端骨密度與中點(diǎn)骨密度顯著高于基礎(chǔ)飼料組且不低于高劑量鈣對(duì)照組。小結(jié)：經(jīng)口給予大鼠實(shí)施例3的片劑0.43、0.85、2.55g/kgbw，(相當(dāng)于成人推薦劑量的5倍、10倍、30倍)90天，2.55g/kgbw劑量組終重與增重高于基礎(chǔ)飼料組差異有顯著性(p＜0.05)，2.55g/kgbw劑量組鈣的表觀吸收率不低于高劑量鈣對(duì)照組；2.55g/kgbw劑量組股骨干重、股骨遠(yuǎn)心端骨密度、股骨中點(diǎn)骨密度顯著高于基礎(chǔ)飼料組差異有顯著性(p＜0.05)且不低于高劑量鈣對(duì)照組?？膳卸ū緦?shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)該樣品具有增加骨密度功能。對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，可根據(jù)以上描述的技術(shù)方案以及構(gòu)思，做出其它各種相應(yīng)的改變以及變形，而所有的這些改變以及變形都應(yīng)該屬于本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁12