使用1,3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物治療肝臟疾患的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了使用1,3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物治療肝臟疾患。具體提供了1,3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物以及包含它們的藥物組合物，其用于治療肝臟疾患，特別是需要降低生物化學標志物例如轉氨酶的血漿水平的肝臟疾患。通式(I)的1,3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物具有護肝性質，并可用于涉及肝臟細胞的病理破壞、炎癥、退化和/或增殖的肝臟疾患、例如肝纖維變性或脂肪性肝病的治療方法中。
【專利說明】使用1, 3-二苯基丙-2-烯-1 -酮衍生物治療肝臟疾患
[0001] 本申請為國際申請PCT/EP2010/068346于2012年5月28日進入中國國家階段、 申請?zhí)枮?01080053762. 8、發(fā)明名稱為"使用1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物治療肝臟 疾患"的分案申請。

【技術領域】
[0002] 本發(fā)明涉及具有護肝效應的化合物在藥物組合物的制備和肝臟疾患的治療方法 中的應用。

【背景技術】
[0003] 根據(jù)《華盛頓醫(yī)學治療手冊》（Washington Manual of Medical Therapeutics) (第31版，2004, Lippincott Williams&Wilkins)，肝臟疾患可以被分類成不同的疾病組， 特別是病毒性疾病、藥物和酒精相關性肝病、免疫介導的肝病、代謝性肝病、雜病例如非酒 精性脂肪性肝病，以及肝功能不全（例如暴發(fā)性肝衰竭或肝細胞癌）和肝臟移植的并發(fā)癥。
[0004] 具體來說，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD)是常見的肝臟疾患，其在飲酒很少乃至 不飲酒的個體中具有酒精誘導的脂肪性肝病的組織學特點（Yeh M等，2007 Warchesini G 等，2003)。NAFLD是由脂類在細胞內的異常滯留（通常被定義為脂肪變性）所造成的，由于 肝臟主要負責脂類代謝，因此這一事件在該器官內更為頻繁。NAFLD具有多種組織學形式， 包括肝臟脂肪變性和以肝細胞破壞引起的肝臟炎癥、脂肪變性、壞死和纖維變性為特征的 非酒精性脂肪性肝炎（NASH)。與NAFLD相關的病癥多種多樣，并包括2型糖尿病、肥胖癥、 血脂異常、代謝綜合征、用肝毒性藥物、毒素、感染性因子治療，或其他外部原因。
[0005] 盡管NAFLD典型地遵從良性、非進展性臨床過程，但NASH是潛在的嚴重病癥；多 達25%的患者可能發(fā)展成晚期纖維變性、肝硬化并經歷門靜脈高壓癥、肝衰竭和肝細胞癌 的并發(fā)癥，這使得有必要進行早期和正確的評估（Yeh M等，2007)。
[0006] 肝成像系統(tǒng)也可用于評價肝臟結構和脂肪變性的存在。然而，肝組織活檢仍然是 用于評估肝臟纖維變性的黃金標準，但是由于它的有創(chuàng)性，不能在每個單一研究中執(zhí)行這 種分析方法。經常使用肝臟生物化學和代謝的無創(chuàng)性評價來確定肝臟疾病，例如在NAFLD 和 NASH 中（Gressner A 等，2009;Vuppalanchi R 和 Chalasani N，2009)。通過使用血楽，除 了血清葡萄糖和胰島素抗性參數(shù)之外，通常還測到高水平的酶例如丙氨酸轉氨酶（ALAT)、 天冬氨酸轉氨酶（ASAT)、堿性磷酸酶（AP)和/或Y-谷氨?；D肽酶（GGT)以及其他肝臟 來源的蛋白（包括觸珠蛋白、總膽紅素、α-2-微球蛋白、抵抗素、切開的或完整的細胞角蛋 白-18)的存在。由于在NASH患者中ALAT的活性水平常常增加（Angulo P等，2002)，該標 準被認為是用于評估肝臟損傷的代用標志物。事實上，沒有可靠的無創(chuàng)方法可以正確診斷 NAFLD或NASH，甚至組織學特點也不總是足以將NAFLD或NASH與其他病癥例如酒精性肝病 正確區(qū)分開（Yeh M 等，2007;Vuppalanchi R 和 Chalasani N，2009)。
[0007] 用于有效治療肝臟纖維變性疾病、特別是NAFLD和NASH的手段仍然不足。對 于患有NASH的患者來說還沒有確立治療方法，有幾種治療性選擇在臨床試驗中測試 (Vuppalanchi R 和 Chalasani N，2009;Dowman J.K 等，2009)。這些研究涉及使用許多不 同家族的化合物（貝特類、噻唑烷二酮類、雙胍類、他汀類、大麻素類）和治療靶點（核受 體、血管緊張素受體、大麻素受體、HMG-CoA還原酶）。最近，涉及噻唑烷二酮類（羅格列酮 和吡格列酮）的研究顯示，這些藥物可以改善肝臟狀況，但是使用這些藥物治療并非沒有 不想要的效應，例如充血性心衰和骨質疏松的更高風險以及對患者具有心理影響的體重增 力口（Dcwman J.K 等，2009;Shiri-Sverdlov R 等，2006;Neuschwander-Tetri 等，2003)。涉 及大麻素類給藥的臨床試驗引起了對神經精神紊亂的顧慮（Vuppanchi R和Chalasani N， 2009)。其他正在進行中的療法正在設法評估作為抗氧化劑的NASH藥物，但是這些治療仍 然無一顯示出令人信服的結果（Nelson A等，2009)。
[0008] 對用于管理肝臟疾患、特別是涉及肝纖維變性和/或脂肪變性的肝臟疾患的新的 治療性選擇的需求，仍然是明確和急迫的。


【發(fā)明內容】

[0009] 臨床研究出人意料地顯不，使用1，3_二苯基丙_2_烯-1-酮衍生物治療患者，提 供了血漿中的肝臟特異性生物化學標志物的統(tǒng)計學相關性降低，證實了由通式（I)所定義 的化合物家族的護肝性質。
[0010] 本發(fā)明提供了通式（I)的新的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物（所述衍生物 在別處也被稱為"化合物"）或包含它們的藥物組合物，其用于肝臟疾患、特別是導致生物化 學標志物例如轉氨酶的血漿水平增加的肝臟疾患的治療方法中。通式（I)的1，3_二苯基 丙-2-烯-1-酮衍生物和包含它們的藥物組合物具有護肝性質，并可用于涉及肝臟細胞的 病理性破壞、炎癥、退化和/或增殖的肝臟疾患例如肝纖維變性、脂肪性肝病和非酒精性脂 肪性肝炎的治療方法中。
[0011] 本發(fā)明的其他目的，包括目標化合物的具體通式，提供在詳細描述中。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012] 在圖和f本中#用的縮寫:
[0013] - ALAT=丙氨酸轉氨酶
[0014] - CCL5 =趨化因子（C-C基序）配體5
[0015] - Collal = I 型膠原蛋白，a 1
[0016] - Cpdl = W02007/147879 的化合物 1
[0017] - Cpd29 = TO2004/005233 的化合物 29
[0018] - Ctrl =對照或介質
[0019] - Feno =非諾貝特
[0020] - HDL=高密度脂蛋白
[0021] - LDL=低密度脂蛋白
[0022] - NAFLD =非酒精性脂肪性肝病
[0023] - NASH=非酒精性脂肪性肝炎
[0024] - PPAR=過氧化物酶體增殖物激活受體
[0025] - Rosi =羅格列酮
[0026] - RT-PCR=反轉錄聚合酶鏈反應
[0027] - TGFP =轉化生長因子β
[0028] - TNFa =腫瘤壞死因子α
[0029] 圖1 :通式（I)的示例件化合物的結構
[0030] 根據(jù)通式（II)(圖A)、通式（IV)(圖B)和通式（V)(圖C)的更具體的定義，對通 式（I)的示例性化合物進行分組。
[0031] 圖2 :在ob/ob小鼠中對通式（I)化合物的抗炎件質的體內評價
[0032] 在II型糖尿病的鼠類模型ob/ob小鼠中測試通式（I)的化合物。用兩種不同劑量 (10和30mg/kg/天）的W02004/005233的化合物29和用原型PPAR a -和PPAR γ -特異性 參比化合物（分別為l〇〇mg/kg/天的非諾貝特和10mg/kg/天的羅格列酮）對小鼠進行每日 口服處理。在處理26天后，將動物處死并收獲血漿樣品和肝臟。評價已知牽涉肝臟炎癥過 程的基因的肝表達，并測量ALAT的血漿水平（圖A-C)。統(tǒng)計學分析使用不配對T-檢驗來 進行，以三種P值來定義統(tǒng)計學相關性（*表示P〈〇. 05 ;**表示p〈0. 01 ;***表示p〈0. 001)。
[0033] 圖3 :在hAp〇E2KI小鼠中對通式（I)化合物的抗炎和抗纖維奪件件質的體內評價
[0034] 在高脂肪飲食的小鼠模型中對通式（I)的化合物進行了體內測試。在12周期間， 對血脂異常的"人源化"Ap 〇E2敲入小鼠（hAp〇E2KI)喂食西式飲食并進行處理。在飲食中 摻入目標化合物，包括〇· 3mg/kg/天的W02004/005233的化合物29和100mg/kg/天的非諾 貝特（用作參比化合物）。在方案結束時，將動物處死，收獲肝臟，并通過定量RT-PCR評價 已知牽涉肝臟炎癥和纖維變性過程的基因的肝臟表達（圖A-D)。如對圖1所指示執(zhí)行統(tǒng)計 學分析。
[0035] 圖4 :在hAp〇E2KI和hAp〇E2KI/PPARa KO小鼠中對誦式⑴化合物的抗炎和抗脂 肪奪件件質的體內評價
[0036] 在高脂肪飲食的小鼠模型中對通式（I)的化合物進行了體內測試。在6周期間， 對血脂異常的PPARa缺陷的"人源化"hAp 〇E2KI小鼠喂食西式飲食并進行處理。通過管飼 法口服給藥目標化合物，包括30mg/kg/天的W02004/005233的化合物29和30mg/kg/天的 W02007/147879的化合物1。在方案結束時，將動物處死，收獲肝臟，并通過定量RT-PCR評 價牽涉肝臟炎癥和纖維變性過程的相關基因的肝臟表達。平行地評價了肝臟甘油三酯含量 (圖A-D)。如對圖1所指示執(zhí)行統(tǒng)計學分析。
[0037] 發(fā)明詳述
[0038] 本發(fā)明提供了通式（I)的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物和包含它們的藥物 組合物用于治療肝臟疾患的新的治療性應用和給藥方法。根據(jù)實施例，可以確定在兩個苯 基上被取代的特定1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物可用于治療肝臟疾患，因為這些化合 物在人類對象和動物模型中，以令人吃驚的方式減少了肝臟炎癥的特異性標志物以及肝細 胞破壞、退化和/或增殖的特異性標志物，因此它們能夠提供護肝效果。
[0039] 按照本發(fā)明使用和給藥并且包含在本發(fā)明的組合物中的化合物，具有下列通式 (I)：
[0040]

【權利要求】
1. 一種通式（I)的化合物： 其中：
Xl表示鹵素、Rl或Gl-Rl基團； A表示CH=CH或CH2-CH2基團； X2表示G2-R2基團； Gl和G2相同或不同，表不氧或硫原子； Rl表不氧原子、未取代的燒基、芳基或被一個或多個齒素原子、燒氧基或燒硫基、環(huán)燒 基、環(huán)燒硫基或雜環(huán)基取代的燒基； R2表不至少被-C00R3基團取代的燒基，其中R3表不氫原子、或者被一個或多個齒素 原子、環(huán)烷基或雜環(huán)基取代的或未被取代的烷基； R4和R5相同或不同，表示被一個或多個鹵素原子、環(huán)烷基、雜環(huán)基取代的或未被取代 的烷基； 其用于治療肝臟疾患的方法中。
2. 權利要求1的化合物，其中所述化合物為通式（I)，其中 Xl表示鹵素、Rl或Gl-Rl基團； A表示CH=CH基團； X2表示G2-R2基團； Gl和G2相同或不同，表不氧或硫原子； Rl表示具有1至7個碳原子的烷基或環(huán)烷基，特別是被一個或多個鹵素原子取代的或 未被取代的烷基或環(huán)烷基； R2表示被-C00R3基團取代的烷基，其中R3表示氫原子或具有1至4個碳原子的烷 基； R4和R5表示具有1至4個碳原子的烷基。
3. 權利要求1的化合物，其中所述化合物為通式（I)，其中： Xl表示Rl或Gl-Rl基團； A表示CH2-CH2基團； X2表示G2-R2基團； Gl表示氧或硫原子，并且G2表示氧原子； Rl表不具有1至7個碳原子的燒基或環(huán)燒基； R2表示至少被-C00R3基團取代的烷基，其中R3表示氫原子或具有1至4個碳原子的 燒基； R4和R5表示具有1至4個碳原子的烷基。
4. 權利要求1的化合物，其中所述化合物為通式（I)，其中 Xl表示鹵素原子或Rl或Gl-Rl基團； A表示CH2-CH2基團； X2表示G2-R2基團； Gl表示氧或硫原子，并且G2表示氧原子； Rl表示被一個或多個鹵素原子取代的烷基或環(huán)烷基； R2表示被一個或多個鹵素原子取代或未被一個或多個鹵素原子取代，并至少 被-C00R3基團取代的烷基，其中R3表示氫原子或具有1至4個碳原子的烷基； R4和R5表示具有1至4個碳原子的烷基。
5. 前述權利要求任一項的化合物，其中G2是氧原子并且R2是被-C00R3基團取代的 烷基，其中R3表示氫原子或具有1至4個碳原子的未取代的直鏈或支鏈烷基。
6. 前述權利要求任一項的化合物，其中Xl是烷硫基，其包含具有1至7個碳原子、被一 個或多個鹵素原子取代的或未被取代的直鏈或支鏈烷基。
7. 前述權利要求任一項的化合物，其中所述化合物選自1-[4_甲硫基苯 基]-3-[3, 5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮、1-[4_甲硫基苯 基]-3-[3, 5-二甲基-4-異丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮、1- [4-甲硫基 苯基]-3_[3, 5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮、1-[4_三 氟甲基苯基]_3_[3, 5-二甲基_4_叔丁氧基撰基二甲基甲氧基苯基]丙_2_烯-1-酮、 1-[4_三氟甲基苯基]-3-[3, 5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮、 1-[4_三氟甲氧基苯基]-3-[3, 5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮、1-[4_三氟甲氧基苯基]-3-[3, 5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮、2- [2, 6-二甲基-4- [3- [4-(甲硫基）苯基]-3-氧-丙基]苯氧基]-2-甲 基丙酸以及2-[2,6_二甲基-4-[3-[4-(甲硫基）苯基]-3-氧-丙基]苯氧基]-2-甲 基-丙酸異丙酯。
8. 前述權利要求任一項的化合物，其中所述化合物與二甲雙胍、胰島素、噻唑烷二酮 類、格列酮類或他汀類組合給藥。
9. 一種藥物組合物，其包含權利要求1至8任一項中所限定的通式（I)的化合物，用于 肝臟疾患的治療方法中。
10. 權利要求9的藥物組合物，其中所述組合物被配制成可注射懸液、凝膠、油、丸劑、 栓劑、粉劑、囊形片、膠囊、氣溶膠的形式或被配制在確保延長和/或緩慢釋放的蓋侖制劑 或裝置的機構中。
11. 權利要求1至8任一項的化合物或權利要求9或10的藥物組合物，其用于肝臟疾 患的治療方法中，所述肝臟疾患選自肝纖維變性、脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝炎。
【文檔編號】A61K31/192GK104434891SQ201410458131
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2010年11月26日 優(yōu)先權日:2009年11月26日
【發(fā)明者】拉斐爾·達泰爾, 萊米·翰夫, 德安·哈姆, 因格里德·杜佛爾 申請人:基恩菲特公司