四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，所述四葉參可以選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發(fā)酵物。本發(fā)明通過動(dòng)物水平實(shí)驗(yàn)證明了四葉參蜂蜜組合物具有催乳的功效，經(jīng)發(fā)酵得到的四葉參發(fā)酵物，具有生物利用度高，吸收完全等優(yōu)點(diǎn)，可以促進(jìn)四葉參催乳功效的最大發(fā)揮。四葉參蜂蜜組合物和發(fā)酵物均可以顯著增加大鼠的泌乳量，提高血清催乳素的水平，促進(jìn)催乳素的分泌，同時(shí)還通過毒性實(shí)驗(yàn)證明四葉參對動(dòng)物體的生長無不良反應(yīng)，所以將四葉參用于制備催乳制劑具有良好的市場應(yīng)用前景。
【專利說明】四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明具體涉及四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]產(chǎn)后缺乳是指分娩后乳腺泌乳量小，不能滿足喂養(yǎng)嬰兒的需要。母乳喂養(yǎng)有利于嬰兒的健康，但近年來，由于高齡產(chǎn)婦增多，加之剖宮產(chǎn)率的上升，以及妊娠期營養(yǎng)不足、精神過度緊張等諸多因素，產(chǎn)后缺乳的現(xiàn)象呈上升趨勢，尤其在城市婦女中該癥狀較為常見。2012年衛(wèi)生部發(fā)布信息顯示，我國母乳喂養(yǎng)率僅為30%。所以，如何有效地治療產(chǎn)后缺乳，是迫切需要解決的問題。 [0003]乳汁的合成及泌乳是一個(gè)復(fù)雜的生理過程，包括多種內(nèi)分泌的參與和影響，其中垂體分泌的催乳素(PRL)在泌乳啟動(dòng)和維持中起著重要作用。在妊娠期因雌激素和孕激素的作用，血中催乳素濃度是正常時(shí)的10~20倍以上，促使乳腺進(jìn)一步發(fā)育，但由于雌激素、孕激素與催乳素競爭同乳腺受體的結(jié)合，此時(shí)雖然催乳素濃度較高，但孕婦并不泌乳。胎盤娩出后，雌激素、孕激素水平迅速下降，解除了對丘腦下部及垂體的抑制作用，催乳素抑制因子(PIF)分泌減少，PRL與乳腺受體結(jié)合，開始泌乳。產(chǎn)后缺乳的成因主要是情緒緊張或疲勞過度影響垂體前葉催乳素的分泌，導(dǎo)致乳汁減少或斷奶。另外，營養(yǎng)不足、出血過多、藥物影響等因素也可導(dǎo)致乳汁分泌減少。
[0004]針對產(chǎn)后缺乳的治療，西醫(yī)目前尚缺乏有效的治療措施，臨床報(bào)道不多。據(jù)調(diào)研，泰必利、維生素E、甲氧氯普胺(滅吐靈)、奮乃靜等藥物有催乳的作用。但這些西藥副反應(yīng)明顯，泰必利的不良反應(yīng)為思睡、輕度頭昏、乏力，偶見惡心、胸悶、興奮、皮疹等，大劑量(400mg/d)維生素E長期(>10d)使用，可能產(chǎn)生胃腸不適、倦怠無力、生殖功能障礙、高血壓、骨骼肌無力、靜脈炎、以及免疫功能下降等不良反應(yīng)。一項(xiàng)隨機(jī)雙盲安慰劑對照試驗(yàn)結(jié)果顯示:滅吐靈IOmg tidX IOd與安慰劑對照組相比并不增加乳汁量，因此其催乳作用尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。多潘立酮可導(dǎo)致心律失常甚至心源性猝死，且乳汁進(jìn)入嬰兒體內(nèi)會造成不可預(yù)料的不良影響，目前美國食品藥品管理局已禁止使用多潘立酮用于催乳。以上藥物由于療效不確切，可能存在不良反應(yīng)，一直未被廣大患者接受，均未能廣泛應(yīng)用于臨床。
[0005]而中醫(yī)藥治療產(chǎn)后缺乳有著悠久的歷史，臨床實(shí)踐中也取得了較好的療效，也得到了現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。據(jù)報(bào)道，通草、王不留行和葛根等中藥具有提高缺乳模型大鼠血紅蛋白量、紅細(xì)胞數(shù)，提高血中PRL水平和降低多巴胺DA水平，增加乳腺細(xì)胞的數(shù)量并且其組織形態(tài)學(xué)未發(fā)現(xiàn)變化，增加大鼠泌乳量和仔鼠體重等作用。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為乳汁由沖任氣血生化，下則為經(jīng)，上則為乳。若氣血虧虛，津液不足，則致乳汁減少或不足；或七情所傷，肝氣郁結(jié)可致乳脈不行而缺乳。宋.陳自明《婦人大全良方.產(chǎn)后乳少或止方論》謂..“婦母乳汁，乃氣血所化，若元?dú)馓撊酰瑒t乳汁短少，初產(chǎn)乳房欣脹，此乳未通，……若累產(chǎn)無乳，此內(nèi)亡津液”，明確提出了缺乳的病機(jī)。金.張子和《儒門事親.卷五》云:“婦人本生無乳者不治，或因啼哭悲怒郁結(jié)，氣溢閉塞，以致乳脈不行”。故產(chǎn)后缺乳多因“氣血生化之源不足，機(jī)體虛弱或因肝郁氣滯，乳汁運(yùn)行受阻所致”，氣血虧虛，肝郁氣滯，經(jīng)絡(luò)閉塞為缺乳的主要病機(jī)?？梢?，在中醫(yī)藥治療產(chǎn)后缺乳方面，形成了ー套比較完整的理論體系，對產(chǎn)后缺乳的病因、病機(jī)、治療都有獨(dú)特的見解。中醫(yī)藥治療產(chǎn)后缺乳具有廣闊的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明提供了四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，本發(fā)明通過尋找天然無毒、安全可靠的催乳藥物來源，解決了人工合成催乳藥副作用大的問題。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
[0008]本發(fā)明提供了四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用。
[0009]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發(fā)酵物。
[0010]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參為嶗山四葉參。
[0011]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參蜂蜜組合物的制備方法為:將四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合并，離心分離得上清液，減壓濃縮干燥成干浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物，將四葉參提取物與槐花蜂蜜質(zhì)量比8:1混合,得四葉參蜂蜜組合物。
[0012]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參發(fā)酵物的制備方法為:將四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合并，離心分離得上清液，離心后上清液經(jīng)減壓濃縮至適量體積，滅菌；加入占四葉參質(zhì)量比為10%的嗜熱鏈球菌ST4菌粉，42°C發(fā)酵10h，發(fā)酵液減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
[0013]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參可以提高泌乳量。
[0014]對上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn):所述四葉參能提高血清催乳素水平。
[0015]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是:本發(fā)明通過動(dòng)物水平實(shí)驗(yàn)證明了四葉參蜂蜜組合物具有催乳的功效，經(jīng)發(fā)酵得到的四葉參發(fā)酵物，具有生物利用度高，吸收完全等優(yōu)點(diǎn)，可以促進(jìn)四葉參催乳功效的最大發(fā)揮。四葉參蜂蜜組合物和發(fā)酵物均可以顯著增加大鼠的泌乳量，提高血清催乳素的水平，促進(jìn)催乳素的分泌，同時(shí)還通過毒性實(shí)驗(yàn)證明四葉參對動(dòng)物體的生長無不良反應(yīng)，所以將四葉參用于制備催乳制劑具有良好的市場應(yīng)用前景。
[0016]結(jié)合附圖閱讀本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】后，本發(fā)明的其他特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將變得更加清
Ah, O
【專利附圖】

【附圖說明】
[0017]圖1為本發(fā)明中正常組乳腺組織光鏡切片。
[0018]圖2為本發(fā)明中模型組乳腺組織光鏡切片。
[0019]圖3為本發(fā)明中四葉參蜂蜜組合物組乳腺組織光鏡切片。
[0020]圖4為本發(fā)明中四葉參發(fā)酵組乳腺組織光鏡切片。
[0021]圖5為本發(fā)明中陽性組乳腺組織光鏡切片。
[0022]圖6為本發(fā)明中正常組垂體組織光鏡切片。
[0023]圖7為本發(fā)明中模型組垂體組織光鏡切片。[0024]圖8為本發(fā)明中四葉參蜂蜜組合物組垂體組織光鏡切片。
[0025]圖9為本發(fā)明中四葉參發(fā)酵組垂體組織光鏡切片。
[0026]圖10為本發(fā)明中陽性組垂體組織光鏡切片。
[0027]圖11為本發(fā)明中驗(yàn)證四葉參具有催乳作用的實(shí)驗(yàn)流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0028]下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。 [0029]實(shí)施例1
[0030]本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證四葉參具有催乳作用的實(shí)驗(yàn)流程圖如圖11所示。
[0031]一、四葉參催乳作用的藥效學(xué)研究
[0032]1、試驗(yàn)材料
[0033](I)四葉參，青島流清河森寶生物科技開發(fā)有限公司提供，青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院周三副教授鑒定。
[0034](2)槐花蜂蜜:500克/瓶，蒙陰深山蜜坊蜂業(yè)有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號:符合蜂蜜國標(biāo)GB18796要求。
[0035](3)嗜熱鏈球菌ST4菌粉:200克/袋，內(nèi)蒙古普澤生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)，活菌數(shù) I X 101ICFU/ 克，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn) Q/PZSW 0014S-2010。
[0036](4)乳泉顆粒:15克/袋，四川志遠(yuǎn)廣和有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號:060101，批準(zhǔn)文號:國家準(zhǔn)字Z51020010。
[0037](5)甲磺酸溴隱亭片:2.5mg/片，匈牙利吉瑞大藥廠生產(chǎn)，進(jìn)口藥品注冊證號:H20110116，進(jìn)口藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)JX20100204，生產(chǎn)批號:T29400A。臨用前用生理鹽水配制成0.05mg/ml的藥液。
[0038](6)大鼠(Rat)催乳素(PRL) ELISA試劑盒，試劑盒貨號:CK_E30594R。
[0039](7)生理鹽水:500ml，4.5g，山東齊都藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國家準(zhǔn)字號:H37020766，產(chǎn)品批號:8B13010402。
[0040](8) SD大鼠，雌雄兼有(雌:雄=3:1)，72只，雌鼠體重250g左右，雄鼠體重350-400g,由青島市藥檢所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，清潔級動(dòng)物，合格證號:0014107。
[0041]2、試驗(yàn)方法
[0042](I)分組方法:選用成年健康清潔級SD大鼠72只，雌雄比例3:1合籠飼養(yǎng)，雌鼠未經(jīng)孕產(chǎn)，18d后，取出雄鼠，同時(shí)將雌鼠每籠一只飼養(yǎng)。取產(chǎn)仔時(shí)間前后相差不超過24h的40只母鼠作為實(shí)驗(yàn)對象，使每只母鼠帶仔鼠8只，多余的棄掉。
[0043]將篩選出的40只母鼠按體重隨機(jī)分為5組:正常組、模型組、四葉參蜂蜜組合物組、四葉參發(fā)酵組及陽性對照藥物乳泉顆粒組。
[0044](2)造模方法:各組于產(chǎn)后第2d起溴隱亭灌胃造模(正常組除外)，連續(xù)7d。
[0045](3)給藥方法:于產(chǎn)后第2天起，正常組以每天每只10ml/kg的蒸餾水灌胃，每天I次；四葉參蜂蜜組合物組于產(chǎn)后第2d起給予四葉參蜂蜜組合物15g.kg—1 (相當(dāng)于含生藥量)ig ;四葉參發(fā)酵組于產(chǎn)后第2d起給予四葉參發(fā)酵物15g.k^1 (相當(dāng)于含生藥量)ig ;陽性對照組乳泉顆粒灌胃，連續(xù)7d。各組動(dòng)物均予正常飲食。
[0046](4)四葉參蜂蜜組合物制備方法:取四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，6倍蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾,將兩次濾液合并，3000rpm離心15分鐘，分離上清液，減壓濃縮干燥成干浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物。將四葉參提取物與槐花蜂蜜質(zhì)量比8:1混合，得四葉參蜂蜜組合物。
[0047] 四葉參發(fā)酵物制備方法:取四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，6倍蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾,將兩次濾液合并,3000rpm離心15分鐘，離心后上清液經(jīng)減壓濃縮至適量體積。120°C，20min滅菌。加入嗜熱鏈球菌ST4菌粉10%(每100克四葉參干品加入IOg菌粉)，42°C發(fā)酵10h。發(fā)酵液減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
[0048]甲磺酸溴隱亭片臨用前用生理鹽水配制成0.05mg/ml的藥液,齊Li量為0.5mg/kg,按每天每只10ml/kg灌胃造模(正常組除外)，連續(xù)7d。
[0049](5)計(jì)算泌乳量及仔鼠體重:每日晨9時(shí)用精密電子天平稱每窩仔鼠體重，然后將仔鼠與母鼠分離，以每窩仔鼠總重量(g)/每窩仔鼠個(gè)數(shù)為平均體重，觀察平均每只仔鼠每日體重的變化；仔鼠與母鼠分離4h后，再次稱量全窩仔鼠體重作為喂乳前體重值，隨即將仔鼠送回母鼠身邊哺乳喂養(yǎng)；3h后第三次稱量全窩仔鼠體重作為喂乳后體重值。并每日稱量母鼠的體重，連續(xù)觀察7d。
[0050]計(jì)算每日母鼠3h平均泌乳量[(喂乳后體重值-喂乳前體重值)/仔鼠個(gè)數(shù)]，仔鼠體重增長率[(當(dāng)日離乳體重值-第I日離乳體重值)/第I日離乳體重值]。所得數(shù)據(jù)進(jìn)打t檢驗(yàn)。
[0051](6)催乳素(PRL)的測定:于給藥后第8d，將5組大鼠腹主動(dòng)脈取血2ml。室溫靜置2h、3500r/min離心15min,分離血清。用酶免法測定催乳素。
[0052](7)觀察乳腺及垂體的病理組織學(xué)變化--第8d，將5組母鼠處死，腦垂體稱重，剝離乳腺，取乳腺及垂體，用10%甲醛分別固定，IOd后石蠟包埋切片，HE染色，于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行乳腺及垂體的組織形態(tài)學(xué)檢查。
[0053]根據(jù)以上數(shù)據(jù)，通過計(jì)算母鼠泌乳量、母鼠體重變化、檢測血清催乳素(PRL)水平，觀察乳腺及垂體的病理組織學(xué)變化等指標(biāo)，研究四葉參的催乳作用。
[0054]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0055]采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，各組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(x土 s)表示，組間差異性比較，采用t檢驗(yàn)。
[0056]( I)四葉參對大鼠泌乳量的影響
[0057]表1.四葉參對產(chǎn)后缺乳模型大鼠的泌乳量的影響
【權(quán)利要求】
1.四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參選用四葉參蜂蜜組合物和/或四葉參發(fā)酵物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參為嶗山四葉參。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參蜂蜜組合物的制備方法為:將四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合并，離心分離得上清液，減壓濃縮干燥成干浸膏，粉碎，過篩，得四葉參提取物，將四葉參提取物與槐花蜂蜜按質(zhì)量比8:1混合，得四葉參蜂蜜組合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參發(fā)酵物的制備方法為:將四葉參切成薄片，干燥，粉碎，過篩，蒸餾水浸泡，煎煮，過濾；藥渣再加蒸餾水浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液合并，離心分離得上清液，離心后上清液經(jīng)減壓濃縮至適量體積，滅菌；加入占四葉參質(zhì)量比為10%的嗜熱鏈球菌ST4菌粉，42°C發(fā)酵10h，發(fā)酵液減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，低溫保存。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參可以提高泌乳量。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四葉參在制備用于催乳的制劑中的應(yīng)用，其特征在于:所述四葉參能提高血清催乳素水平。
【文檔編號】A61K35/64GK103585248SQ201310624182
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月28日
【發(fā)明者】彭曉娉, 錢學(xué)艷, 周三, 高華, 劉明 申請人:青島大學(xué)