專利名稱：一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物的制作方法
一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于治療老年癡呆等衰老性疾病的藥物組合物及其制備方法，尤其是治療 阿爾茨海默氏病(Alzheimer’ s diseaseAD)的中藥提取組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著社會的發(fā)展，人類壽命普遍延長，高齡老人明顯增多，人口老齡化問題日益嚴(yán) 重，已經(jīng)成為當(dāng)今世界普遍關(guān)注的焦點。而現(xiàn)在廣泛使用的抗衰老的西藥，例如治療阿爾茨 海默氏病的改善膽堿能神經(jīng)傳遞類、促代謝類、激素類、影響自由基代謝類、鈣離子拮抗劑 類等普遍具有各種各樣的副作用。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是根據(jù)祖國醫(yī)學(xué)的理論指導(dǎo)，結(jié)合數(shù)千年傳統(tǒng)醫(yī)藥的 經(jīng)驗積累，以及對鉤藤、茯苓、陳皮、麥冬、人參、防風(fēng)、甘草在藥學(xué)、藥理學(xué)等方面的研究，從 中藥復(fù)方入手，科學(xué)組方，并探討其作用機理，將其制成現(xiàn)代中藥制劑。為解決以上問題，本發(fā)明采取如下的技術(shù)方案。稱取鉤藤lOOOg，加6倍量70%乙醇回流提取2次，每次1.證，合并提液，濃縮得 浸膏1。陳皮lOOOg、防風(fēng)667g混合，8倍量水煮證，先提揮發(fā)油，母液收集，藥渣6倍水量 再提一次，1. 水提液合并濃縮，得稀濃縮液1。茯苓1000g、麥冬1000g、甘草334g混合， 8倍量水提取2次，每次1.證，合并水提液，濃縮得稀濃縮液2。稀濃縮液1和2合并，繼續(xù) 濃縮至8000ml左右，70%乙醇醇沉過夜，取醇液濃縮得浸膏2。人參667g加8倍量水提取 3次，每次1.證，合并提液，濃縮得浸膏3。浸膏1、2、3合并，加揮發(fā)油混勻，共得1800ml浸 膏，留樣5ml，其余分裝，壓蓋，滅菌。本浸膏含生藥3. 15g/ml。將浸膏干燥、混合成型，輔以藥學(xué)上可接受的劑型輔料得到片劑、膠囊劑、滴丸劑、 溶液劑、緩控釋劑和注射劑等常見藥物劑型。本發(fā)明中鉤藤、防風(fēng)清熱平肝，熄風(fēng)止痙；茯苓、陳皮、甘草化痰安神，降逆止嘔； 人參、麥冬清熱養(yǎng)陰，益氣生津。全方共奏平肝熄風(fēng)，清熱化痰，益氣養(yǎng)陰，降逆止嘔之功。
具體實施方式實施例1含鉤藤抗衰老組合物的急毒實驗研究每種抗衰老藥物或方劑不僅要求確實有效，而且要求無明顯的毒副作用。所以一 般情況下須對這些藥物或方劑進行急毒、亞急毒甚至慢性毒性試驗。通常用測定其半數(shù)致 死量(LD50)進行急毒試驗，因傳統(tǒng)中藥一般毒性很低，不易求得LD50，可觀察最大耐受量。 本實驗用此法對小鼠進行了急性毒性實驗，以對安全毒性進行初探。1、材料1.1實驗動物
清潔級健康KM小鼠，18_22g，雌雄各半，由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提 供，許可證號SCXK (滬)2007-0005。1.2藥物制備含鉤藤抗衰老組合物由本院中藥制劑室按傳統(tǒng)方法水提、濃縮、消毒等制成浸 膏，本浸膏含生藥3. 15g/ml，臨用前置冰箱中4°C保存。1.3實驗環(huán)境清潔級，合格證號SYXK(蘇)2007-0(^6。2、方法2.1預(yù)試驗取禁食16h以上的KM小鼠20只，早$各半，用含量為3. 15g生藥/ml的含鉤藤抗 衰老組合物按0. 5ml/10g體重的給藥量(最大給藥量)灌胃給藥，此濃度為12號灌胃器能 抽吸的最大濃度。給藥劑量為157. 5g/kg，觀察一周，結(jié)果無動物死亡，若有死亡，則需降低 劑量再試。因無法按常規(guī)測定LD50，故進行最大給藥量測定。2. 2正式試驗選取健康KM小鼠30只，早$各半，平均體重早為18. 5 士 0. 5g ； $為19. 6 士 1. Igo 小鼠禁食(不禁水)約1 后，用含生藥3. 15g/ml的含鉤藤抗衰老組合物(預(yù)先溫?zé)嶂?20°C左右)按0.5ml/10g體重的最大給藥量灌胃給藥，劑量為157. 5g/kg。給藥后小鼠正 常飼養(yǎng)于清潔級飼養(yǎng)室(室溫21 士0. 50C ；相對濕度45 60% )，觀察動物的活動、皮毛、 飲食、糞便有無異常改變，并觀察有無中毒癥狀及死亡(若有死亡，則進行解剖及病理學(xué)檢 驗)，連續(xù)觀察一周。一周后復(fù)稱體重，處死動物進行解剖，觀察心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸 腺、腦、甲狀腺、胃、腸、膀胱、性腺(子宮、卵巢或睪丸和附睪)等主要臟器有無異常變化。3、結(jié)果在給藥后5min后，動物活動明顯減少，約15min后大多數(shù)小鼠伏下少動，少數(shù)靜臥 不動，呈昏睡狀(雌性有2只，雄性3只)，但輕敲籠具有抬頭或躲避等反應(yīng)。4小時內(nèi)動物 極少進食，大便呈黃褐色。6小時后多數(shù)動物的活動、飲食、大便等逐漸恢復(fù)正常，仍有2只 動物(雌性1只，雄性1只)伏下少動。未見其它異?；虿涣挤磻?yīng)，也無動物死亡。一周后 復(fù)稱體重，早為四.3士1.68，$*32.9±1.0g。處死解剖動物后，其主要臟器均未見明顯的 異常病變。小鼠灌胃給藥的最大給藥量為157. 5g/kg體重，未見明顯的毒性反應(yīng)。結(jié)論含鉤藤抗衰老組合物的小鼠灌胃最大給藥量約為157. 5g生藥/kg體重，除給藥后 因給藥量過大動物有短時間的不適外，未見明顯的毒性反應(yīng)。人的劑量為0. 85g生藥/kg 體重，給小鼠的劑量是人的185. 3倍。由此可見，在按人的常規(guī)劑量服用時是安全的。實施例2含鉤藤抗衰老組合物的益智作用實驗研究1、材料1. 1藥品與試劑含鉤藤抗衰老組合物由本院中藥制劑室按傳統(tǒng)方法水提、濃縮、消毒等制成浸 膏。臨用將含鉤藤抗衰老組合物加蒸餾水配至100ml，變成0. 85g生藥/ml浸膏溶液，實驗 中所用劑量均以生藥量計。
茴拉西坦膠囊(三樂喜)無錫凱西藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號20081023,0. Ig/ 粒。用前將三樂喜研成粉末，用蒸餾水按10粒/IOOml蒸餾水配成0. 01g/ml溶液。氫溴酸東莨菪堿上海禾豐制藥有限公司產(chǎn)品，批號080201,0. 3mg/mL·亞硝酸鈉南京化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號20080506乙二醇上海久億化學(xué)試劑有限公司，批號20080403。使用前用蒸餾水配成40% 的乙醇。1. 2實驗動物清潔級KM小鼠，18_22g，雌雄各半，由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，許 可證號SCXK (滬)2007-0005。1. 3 儀器MG-2迷宮，張家港市生物醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)。1. 4動物實驗環(huán)境清潔級，合格證號SYXK(蘇)2007-0(^6。2、方法2. 1記憶獲得障礙實驗2. 1. 1 預(yù)選將小鼠放入Y迷路箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境5-8分鐘，然后驅(qū)趕至I臂(起步區(qū))停留aiiin 后給予電擊(35V)，小鼠受電擊后逃至II臂安全區(qū)(有光亮)為正確反應(yīng)，否則為錯誤反 應(yīng)。待小鼠逃入安全區(qū)后，使停留30秒，將小鼠取出放回I臂，停留1分鐘后再予第二次電 擊，依次重復(fù)訓(xùn)練。選取達(dá)到連續(xù)2次直接逃至安全區(qū)前的電擊訓(xùn)練次數(shù)< 3次，且自由活 動較敏捷的小鼠，供試驗用。2. 1.2分組給藥將小鼠分為實驗高、中、低劑量、陽性對照、模型對照、正常對照共6組，每組20只， 雌雄各半。實驗組高劑量每天灌胃以17g生藥/kg體重(20倍人的等效量)，中劑量8. 5g/ kg體重，低劑量4. 25g/kg體重，陽性對照組每天給茴拉西坦溶液(三樂喜)0. 2g生藥/kg 體重(20倍人的等效量)，模型對照組與正常組每天給0. 2ml/10g體重的蒸餾水，每天灌胃 一次，連續(xù)給藥3周。2. 1.3學(xué)習(xí)訓(xùn)練最后一天給藥后50min用氫溴酸東莨菪堿造模，爾后進行學(xué)習(xí)訓(xùn)練，除正常組外， 各組小鼠每只腹腔注射氫溴酸東莨菪堿(5mg/kg體重)。訓(xùn)練時，將小鼠放入I臂起步區(qū)停留:3min后給予電擊(35V)，按I — II — III — I 或I — III — II — I連續(xù)試驗a項小鼠到達(dá)安全區(qū)停留0. 5min，然后取出放回原臂，Imin 后給予下次電擊，達(dá)到連續(xù)2次直接逃至安全區(qū)后，以逃入的安全區(qū)作為起步區(qū)進行電擊 訓(xùn)練。當(dāng)小鼠在三臂均達(dá)到連續(xù)2次直接逃至安全區(qū)后，進行b項試驗小鼠在I臂起步區(qū) 停留Imin后給予電擊，逃至安全區(qū)停留0. 5min，再以此區(qū)作為起步區(qū)予以電擊，連續(xù)循環(huán) 電擊訓(xùn)練(每兩次電擊之間休息lmin)，以小鼠連續(xù)10次(或9/10)正確反應(yīng)(直接逃入 安全區(qū))作為空間辨別記憶指標(biāo)，每回連續(xù)學(xué)習(xí)的電擊總次數(shù)一般不超過30次。最后將a 項和b項相加作為訓(xùn)練成績，統(tǒng)計學(xué)習(xí)成績。2. 1.4記憶測試
訓(xùn)練后24h測試，測試方法同訓(xùn)練，測試后處死。統(tǒng)計學(xué)習(xí)成績，作為測試成績。2. 2記憶鞏固障礙實驗2. 2. 1 預(yù)選同記憶獲得障礙實驗。2. 2. 2分組給藥同記憶獲得障礙實驗。2. 2. 3學(xué)習(xí)訓(xùn)練最后一次給藥后一小時進行學(xué)習(xí)訓(xùn)練，訓(xùn)練方法同前。2. 2. 4記憶測試訓(xùn)練后除正常組外，其余各組立即用亞硝酸鈉按100mg/kg體重進行腹腔注射， 24h后進行測試，測試方法同前，測試后處死。統(tǒng)計學(xué)習(xí)成績。2. 3記憶再現(xiàn)障礙實驗2. 3. 1 預(yù)選同記憶獲得障礙實驗。2. 3. 2分組給藥同記憶獲得障礙實驗。2. 3. 3學(xué)習(xí)訓(xùn)練最后一次給藥后一小時進行學(xué)習(xí)訓(xùn)練，訓(xùn)練方法同記憶獲得障礙實驗。2. 3. 4記憶測試訓(xùn)練后24h進行測試，測試前30分鐘用40%的乙醇灌胃0. lml/10g,正常對照組 灌以等體積的生理鹽水。測試方法同記憶獲得障礙實驗，測試后處死。統(tǒng)計學(xué)習(xí)成績。2. 4 統(tǒng)計全部數(shù)據(jù)用^ ± 31)表示，進行組間t檢驗統(tǒng)計。3、結(jié)果3. 1對記憶獲得障礙的影響實驗組的訓(xùn)練成績與測試成績皆顯著好于模型組(P < 0. 01)，而和正常組相比則 比較接近，無明顯差異；模型組無論訓(xùn)練成績還是測試成績都正常組顯著地差(P < 0.01)。 因此模型的制作是成功的，含鉤藤抗衰老組合物對小鼠記憶獲得障礙模型有明顯的益智作 用，見表2-1。表2-1含鉤藤抗衰老組合物對小鼠記憶獲得障礙的影響(；土SD，η = 20)
權(quán)利要求
1.一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物，其特征為該組合物按重量比包括鉤藤1000 份、茯苓1000份、陳皮1000份、麥冬1000份，人參667份、防風(fēng)667份、甘草334份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物，其特征為該組合物按 重量比包括鉤藤1200份、茯苓1200份、陳皮1250份、麥冬1500份，人參750份、防風(fēng)750 份、甘草450份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物，其特征為該組合物按 重量比包括鉤藤700份、茯苓600份、陳皮750份、麥冬800份，人參400份、防風(fēng)450份、甘 草350份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種含鉤藤具有抗衰老作用的組合物，其特征為將該組合物 與藥學(xué)上所有可接受的劑型輔料混和后，進一步加工后制成片劑、膠囊劑、滴丸劑、溶液齊U、 緩控釋劑或注射劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥材藥物活性成分提取與臨床應(yīng)用的領(lǐng)域，尤其是使用特定提取劑從中藥材鉤藤、茯苓、陳皮、麥冬、人參、防風(fēng)、甘草中提取具有抗衰老提高智力的組合物。采用乙醇、蒸餾水作為提取劑，提取液經(jīng)濃縮后得含藥物活性成分的組合物浸膏。動物試驗表明該提取組合物對小鼠記憶獲得障礙模型有明顯的益智作用、促進小鼠記憶功能的改善及延緩衰老。在該組合物中通過加入不同的劑型輔料，即可制成片劑、膠囊劑、滴丸劑、溶液劑、緩控釋劑和注射劑等常見藥物劑型。同時，該種組合物還具有服用安全的突出優(yōu)點。
文檔編號A61P39/06GK102078507SQ20101060328
公開日2011年6月1日 申請日期2010年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月24日
發(fā)明者曹鵬, 楊德功, 賈曉斌, 鐘榮玲, 黃厚才 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院