一種消除皺紋或抗衰老的組合物的制作方法
【專利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于消除或預(yù)防面部皺紋的組合物，特別涉及成體干細(xì)胞提取物，海藻不飽和脂肪酸，透明質(zhì)酸，水解明膠和褐藻多酚，以及很有提取物與其他的常用護(hù)膚功能物質(zhì)的組合物。
【【背景技術(shù)】】
[0002]目前普遍認(rèn)為，導(dǎo)致皮膚衰老的原因主要有內(nèi)源性因素和外源性因素兩方面。人們一直對(duì)衰老機(jī)理的理解各不相同，曾提出多種多樣的衰老學(xué)說(shuō)。目前研究較多的是衰老的自由基學(xué)說(shuō)及免疫調(diào)節(jié)障礙學(xué)說(shuō)。體內(nèi)代謝產(chǎn)生的自由基作用于細(xì)胞膜的多不飽和脂肪酸，形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，造成細(xì)胞的損傷和破壞，引起機(jī)體衰老與疾病。天然抗衰老化妝品原料具有延緩皮膚衰老、保護(hù)皮膚、延長(zhǎng)壽命、逆轉(zhuǎn)衰老的作用。目前作為化妝品中抗衰老活性成分的天然生物提取成分主要來(lái)自于植物、動(dòng)物和一些海洋微生物，其中對(duì)陸生植物提取物的研究開(kāi)發(fā)最為深入，但是對(duì)藻類尤其是海洋藻類的提取物研究較少。
[0003]發(fā)明人通過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)，選擇出成體干細(xì)胞提取物、海藻不飽和脂肪酸、透明質(zhì)酸、水解明膠和褐藻多酚聯(lián)合應(yīng)用的其他具有皮膚養(yǎng)護(hù)作用的物質(zhì)，并利用適當(dāng)?shù)慕M合使其能夠充分發(fā)揮協(xié)同作用，具有消除或預(yù)防面部皺紋的作用。
【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0004]本發(fā)明是基于更安全和有效的預(yù)防或消除面部皺紋，克服現(xiàn)有產(chǎn)品中的毒性缺陷，提供了一種不僅能夠抑制、消除表情肌過(guò)度收縮所產(chǎn)生的皺紋，而且能夠強(qiáng)力保持面部皮膚水分的組合物。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)特征是采用從成體干細(xì)胞提取的活性蛋白因子和生物活性物質(zhì)，所述活性蛋白因子包括白細(xì)胞介素、干擾素、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子和趨化性細(xì)胞因子。所述生物活性物質(zhì)可以是任何活性因子，例如神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)調(diào)質(zhì)、兒茶酚胺、生長(zhǎng)因子、輔助因子、營(yíng)養(yǎng)因子和激素，活性物質(zhì)也可以是類似物、激動(dòng)劑、衍生物或具有活性的活性因子片段，活性物質(zhì)還可以是生物活性物質(zhì)的抑制劑。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)特征還在于添加了海藻不飽和脂肪酸，由于海藻中含有豐富的極性月旨，主要有糖脂、磷脂和硫脂。糖脂有一半乳糖酰二甘油酯、二半乳糖酰二甘油酯，能清除多于膽固醇。磷脂有磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸以及磷脂酰肌醇等，磷脂是構(gòu)成細(xì)胞的主要成份，能夠降解過(guò)氧化物，是高度不飽和脂肪酸的穩(wěn)定劑。海藻中的硫脂還具有抗艾滋病毒的功能。這些物質(zhì)的添加對(duì)衰老和細(xì)胞修復(fù)有重要作用。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)特征還在于添加了褐藻多酚，褐藻多酚有脫臭作用和抗氧化活性，其基本結(jié)構(gòu)單元是間苯三酚，其多聚物能夠裂解DNA，抑制多種酶的活性，如淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶，能聚集人血紅細(xì)胞，而且褐藻多酚中的Eckols類化合物是抗血纖維蛋白溶酶原的抑制物。同時(shí)鹵代酚還具有類生長(zhǎng)素活性和抗氧化活性。
[0008]本發(fā)明中添加的透明質(zhì)酸和水解明膠主要作用是固定皮膚和組織內(nèi)的水份、養(yǎng)護(hù)結(jié)締組織，是目前抗衰老和美容化妝品中常用的添加物。
[0009]從成體干細(xì)胞中提取抗衰老有效成份:
[0010]I) I %明膠鋪T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶半個(gè)小時(shí)。
[0011]2)吸干并靜置5分鐘。
[0012]3)在37°C水浴箱快速溶解一管人成體干細(xì)胞，加入1ml無(wú)血清培養(yǎng)液清洗一次。1000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，去除上清液，用Iml培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，按上述步驟再清洗兩次。
[0013]4)加入14ml無(wú)血清干細(xì)胞培養(yǎng)液到培養(yǎng)瓶中，轉(zhuǎn)移干細(xì)胞到培養(yǎng)瓶中，二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)3天。
[0014]5)吸出培養(yǎng)液，用PBS清洗2-3次。
[0015]6)加2_3ml細(xì)胞溶解液溶解細(xì)胞，然后收集到離心管中。
[0016]7)在4°C搖晃I小時(shí)，離心14000轉(zhuǎn)/分，30分鐘。
[0017]8)取上清液4°C PBS透析8小時(shí)。
[0018]9)冷凍干燥，保存在_80°C冰箱。
[0019]從海藻中提取不飽和脂肪酸的提取:
[0020]I)采取研磨的方法破碎，可以加入鋼砂加強(qiáng)研磨的效果，顯微鏡下觀察，大部分細(xì)胞被破碎。
[0021]2)加入無(wú)水乙醚和石油醚的混合溶劑(不同體積配比)粗提取粗脂，適當(dāng)振蕩混勻。并且加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的KOH沉淀藻細(xì)胞，然后在4000轉(zhuǎn)/分條件下離心15分鐘取上層清液。在60°C水浴迅速蒸去多余的溶劑至溶液恒重。
[0022]3)蒸去多余溶劑后的溶液中加入等體積飽和KOH-甲醇溶液(0.4mol / L，加熱使KOH完全溶解)皂化6h或過(guò)夜。
[0023]4)然后用HCl稀溶液(商品濃鹽酸與去離子水以體積比9: I稀釋)調(diào)節(jié)pH值至I?2，再加入少量H2O使溶液分層，離心分離取上層油層。
[0024]5)尿素包合富集海藻多不飽和脂肪酸配制不同質(zhì)量濃度的尿素一甲醇溶液，加入到混合脂肪酸中，置冰箱冷凍層(_20°C )形成包合物至不再有結(jié)晶物析出(2h)。水洗后離心得多不飽和脂肪酸粗品。
[0025]從褐藻中提取褐藻多酚:
[0026]I)選擇生長(zhǎng)旺盛的褐藻。
[0027]2)清洗后迅速降溫至-10°C，以防止藻體細(xì)胞中有大冰晶形成。
[0028]3)用組織破碎器破碎藻體，轉(zhuǎn)速大于等于10000轉(zhuǎn)/分。
[0029]4) 80%乙醇抽提，200目篩過(guò)濾，紗布，棉花過(guò)濾，布氏漏斗抽濾。
[0030]5)在減壓的條件下，于45?60°C蒸去有機(jī)溶劑。
[0031]6)將不溶于水的色素等雜質(zhì)形成沉淀除去。
[0032]7)利用冷凍升華干燥或噴霧干燥，得到深褐色褐藻多酚粗品粉末。
[0033]組合物的制備
[0034]I)以去離子純凈水作為溶劑，其中首先加入透明質(zhì)酸，濃度為0.5?4g/L。
[0035]2)加入水解明膠，30?200g / L，將混合物置于60°C溫水浴鍋，輕搖45分鐘，溶液完全澄清透明后取出。
[0036]3)趁熱加入適量海藻不飽和脂肪酸和褐藻多酚，攪拌均勻。
[0037]4)冷卻至37°C，加入適量的成體干細(xì)胞提取物，冷卻至室溫。冷卻后形成凝膠。
[0038]5)最后加入殺菌劑，充分?jǐn)嚢杈鶆?，置于低光低溫保存?br>[0039]使用方法:
[0040]用清水清洗面部，用食指挑少許本組合物輕柔均勻涂抹在眼角及眼下，之后輕柔地由內(nèi)向外按摩8?10次即可。
【【具體實(shí)施方式】】
[0041]通過(guò)以下實(shí)施例將組分物質(zhì)具體配比進(jìn)一步舉例以描述本發(fā)明。各實(shí)施例中包含但不限于可能在此基礎(chǔ)上添加的其它各類有益于保水、抗衰老的添加組分。
[0042]實(shí)施例1:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.1?0.5g、透明質(zhì)酸0.1?0.5g、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0043]實(shí)施例2:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.4?1.0g、海藻不飽和脂肪酸0.1?
0.5g、透明質(zhì)酸0.1?0.5g、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0044]實(shí)施例3:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.4?
1.0g、透明質(zhì)酸0.1?0.5g、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0045]實(shí)施例4:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.1?0.5g、透明質(zhì)酸0.1?0.5g、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0046]實(shí)施例5:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.4?1.0g、海藻不飽和脂肪酸0.1?0.5g、透明質(zhì)酸0.1?0.5g、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0047]實(shí)施例6:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.4?1.0g、海藻不飽和脂肪酸0.1?0.5g、透明質(zhì)酸0.5?lg、水解明膠5?10g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0048]實(shí)施例7:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.5?lg、透明質(zhì)酸0.5?lg、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0049]實(shí)施例8:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.5?lg、透明質(zhì)酸0.5?lg、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0050]實(shí)施例9:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸0.5?lg、透明質(zhì)酸0.5?lg、水解明膠5?10g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
[0051]實(shí)施例10:組分配比為:成體干細(xì)胞提取物0.1?0.5g、海藻不飽和脂肪酸I?2g、透明質(zhì)酸0.5?lg、水解明膠3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去離子純水中，分裝，低溫保存。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用于消除和預(yù)防面部皺紋的組合物，所述組合物包括有效劑量的:第一組分，人成體干細(xì)胞提取物；第二組分，海藻不飽和脂肪酸；第三組分，透明質(zhì)酸；第四組分，水解明膠；第五組分，褐藻多酚。2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述成體干細(xì)胞提取物和生長(zhǎng)因子。3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述海藻不飽和脂肪酸。4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述透明質(zhì)酸。5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述水解明膠。6.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述褐藻多酚。7.如權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求所述組合物在制備用于消除或預(yù)防面部皺紋尤其是眼部皺紋中的用途。8.如權(quán)利要求1中所述的干細(xì)胞提取物在制備用于消除或預(yù)防面部皺紋尤其是眼部皺紋中的用途。9.如權(quán)利要求1，其中還可包含VC，VE等可用于面部養(yǎng)護(hù)的營(yíng)養(yǎng)素。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種涉及用于消除或預(yù)防面部皺紋的組合物，特別涉及成體干細(xì)胞提取物、海藻不飽和脂肪酸、透明質(zhì)酸、水解明膠和褐藻多酚，以及很有提取物與其他的常用護(hù)膚功能物質(zhì)的組合物。該組合物基于更安全和有效的預(yù)防或消除面部皺紋，克服現(xiàn)有產(chǎn)品中的毒性缺陷，提供了一種不僅能夠抑制、消除表情肌過(guò)度收縮所產(chǎn)生的皺紋，而且能夠強(qiáng)力保持面部皮膚水分。
【IPC分類】A61K8/97, A61Q19/08, A61Q19/00, A61K8/98
【公開(kāi)號(hào)】CN104906011
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410097307
【發(fā)明人】吳世凱
【申請(qǐng)人】吳世凱
【公開(kāi)日】2015年9月16日
【申請(qǐng)日】2014年3月14日