專利名稱：潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種潘多汀(panduratin)衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪(Kaempferia pandurata)萃取物的新用途。更具體地，本發(fā)明涉及一種用于改善皺紋和/或防止老化的組合物，所述組合物包含潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。

背景技術(shù)：
老化大體上分為自然老化或內(nèi)因性老化和外因性老化。自然老化是由遺傳因素引起的，難以控制，而外因性老化是由環(huán)境因素引起的，相對容易控制。因此，一直在進行預(yù)防外因性老化的研究。尤其是對預(yù)防由長期暴露于紫外線下引起的外因性光致老化造成的皺紋的研究引起人們的注意[Gilchre st B.A.，J.Am.Acad.Dermatol.，198921610-613]。光致老化或外因性皮膚老化臨床上的特征為皮膚粗糙無彈性、色素沉著不規(guī)則以及皺紋較深。
影響老化的外因包括風、溫度、濕度、香煙煙霧、污染、紫外線等。特別地，紫外線引起的老化被稱為光致老化。特別地，光致老化與化妝重要區(qū)域--面部和頭部的皺化密切相關(guān)。因此，人們正積極地進行對人皮膚或動物模型的光致老化和皺化的基礎(chǔ)研究以開發(fā)抗老化或抗皺化妝品。關(guān)于光致老化和皺化，報道了基本生理代謝如皮膚的主要成分膠原蛋白的合成和分解的變化[Lavker R.M.，Blackwell Science Inc.，1995123-135]。
將對光致老化機理作簡單描述。當皮膚暴露于大量紫外線下時，在皮膚中生成很多活化氧物質(zhì)(reactive oxygen species)，破壞了酶和非酶抗氧化防御系統(tǒng)。結(jié)果，皮膚組織的主要蛋白質(zhì)--膠原蛋白的含量顯著降低。膠原酶(基質(zhì)金屬蛋白酶-1；MMP-1)在膠原蛋白的減少中起到重要作用。這種酶與細胞外基質(zhì)和基底膜的分解有關(guān)。根據(jù)研究，暴露于紫外線會導致皮膚中的MMP-1活性升高，從而顯著破壞膠原蛋白并形成皺紋[Sim G.S.，Kim J.H.，et al.，Kor.J.Biotechnol.Bioeng.，200520(1)40-45]。
迄今已開發(fā)的用于改善皺紋和防止老化的一些活性成分具有不能用作化妝品原料、極不穩(wěn)定和不易輸送給皮膚的問題。因此，需要特別的穩(wěn)定系統(tǒng)和輸送系統(tǒng)，且其對皮膚皺紋改善作用的影響不明顯。為此，人們最近對含類視色素的皮膚保護劑的興趣有所提高。目前，類視色素用作解決光致老化現(xiàn)象如日光引起的皺紋、皮膚增厚、皮膚下垂和皮膚彈性降低的手段。但類視色素的問題在于它是一種極不穩(wěn)定的化合物，其對紫外線、水分、熱和氧敏感，因此其中易發(fā)生化學變化。在解決此問題的嘗試中，已進行了集中于開發(fā)來源于天然原料的有效成分的研究。
蓬莪，也稱為手指根(Boesenbergia pandurata)，是一種姜(Zingiberaceae)科植物。其根莖廣泛用于治療感冒、腸炎、皮膚病和尿道疼痛。蓬莪含有松屬素查爾酮(pinocembrin chalcone)、小豆蔻素(cardamonin)、松屬素(pinocembrin)、喬松酮(pinostribin)、4-羥基潘多汀A、潘多汀A等。這些成分據(jù)報道具有抗癌效果[Trakoontivakorn，G.，et al.，J.Agri.Food Chem.，49，3046-3050，2001]，而基于類黃酮的二氫查耳酮化合物據(jù)報道具有殺蟲效果[Pandji，C，et al.，Phytochemistry，34，415-419，1993]。韓國專利No.492034公開了包含潘多汀衍生物如異潘多汀A的用于預(yù)防和治療齲齒和牙周炎用的一種抗微生物劑和一種口服組合物。但從來沒有報道潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的皺紋改善效果或抗老化效果。


發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題 本發(fā)明的發(fā)明人已研究了具有皺紋改善或抗老化活性的天然物質(zhì)。他們發(fā)現(xiàn)潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物具有所述活性，并完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明在一個方面提供一種皺紋改善和/或抗老化用化妝品組合物，其包含選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物 [化學式1] [化學式2] [化學式3]
本發(fā)明在另一個方面提供一種皺紋改善和/或抗老化用食品組合物，其包含選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。
本發(fā)明在另一個方面提供一種防止和處理皺紋和/或防止老化用醫(yī)藥組合物，其包含選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。
本發(fā)明在另一個方面提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備化妝品組合物的用途。
本發(fā)明在另一個方面提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備食品組合物的用途。
本發(fā)明在另一個方面提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備醫(yī)藥組合物的用途。
本發(fā)明在另一個方面提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止、改善或處理皺紋的方法。
本發(fā)明在另一個方面提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止老化的方法。
本發(fā)明在另一個方面提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物促進膠原蛋白合成的方法。
本發(fā)明在另一個方面提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物抑制膠原蛋白分解的方法。
技術(shù)方案 為實現(xiàn)上述目標，本發(fā)明提供了一種皺紋改善和/或抗老化用化妝品組合物，其包含選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物 [化學式1] [化學式2] [化學式3]
本發(fā)明提供一種皺紋改善和/或抗老化用食品組合物，其包含選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。
本發(fā)明提供一種防止和處理皺紋和/或防止老化用醫(yī)藥組合物，其包含選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。
本發(fā)明提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備化妝品組合物的用途。
本發(fā)明提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備食品組合物的用途。
本發(fā)明提供選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備醫(yī)藥組合物的用途。
本發(fā)明提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止、改善或處理皺紋的方法。
本發(fā)明提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止老化的方法。
本發(fā)明提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物促進膠原蛋白合成的方法。
本發(fā)明提供一種用選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物抑制膠原蛋白分解的方法。
下文將詳細描述本發(fā)明。
本發(fā)明中公開的“蓬莪萃取物”是指一種從蓬莪--也稱作手指根--得到的包含上述潘多汀衍生物的萃取物。對制備蓬莪萃取物的方法沒有特殊限制，只要所述萃取物中包含潘多汀衍生物即可。優(yōu)選地，其可以通過用至少一種選自水、C1-C6有機溶劑和亞臨界或超臨界流體的溶劑萃取蓬莪(Kaempferia pandurata(Roxb.))的整株植物或部分(莖、根莖或葉)制備。如果需要，還可加入相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域中常用的過濾或濃縮過程。
所述C1-C6有機溶劑可選自C1-C6醇、丙酮、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、環(huán)己烷和石油醚，但不限于此。
本文使用的“超臨界流體”是指溫度和壓力高于其熱力學臨界點的任何物質(zhì)?！皝喤R界流體”包括亞臨界液體和氣體。特別地，亞臨界液體是指溫度低于超臨界溫度和飽和溫度的流體。而亞臨界氣體是指溫度高于飽和溫度且壓力低于超臨界壓力的流體。超臨界流體和亞臨界流體被用于各個領(lǐng)域，包括制藥工業(yè)、食品工業(yè)、化妝品/香料工業(yè)、化學工業(yè)和能源工業(yè)。對可用于本發(fā)明的超臨界流體和亞臨界流體沒有特殊限制。例如，可使用二氧化碳、氮氣、一氧化二氮、甲烷、乙烯、丙烷、丙烯、石油醚、乙醚、環(huán)己烷等。特別地，優(yōu)選二氧化碳，因為其易得、相對便宜、不易爆、且操作足夠安全。二氧化碳的臨界溫度為31.1℃，臨界壓力為73.8個大氣壓。
作為本發(fā)明的一個實施方案，干燥蓬莪被粉碎，用乙醇、己烷或氯仿溶劑萃取，過濾并濃縮以制備蓬莪的乙醇、己烷或氯仿萃取物。另外，將蓬莪加入使用二氧化碳(CO2)作為超臨界流體的超臨界流體萃取器以制備蓬莪的超臨界萃取物(見實施例1)。
本文使用的“潘多汀衍生物”是指一種選自由以下化學式1至3表示的化合物的化合物。具體地，由化學式1、2和3表示的化合物分別為潘多汀A、異潘多汀A和4-羥基潘多汀A。
[化學式1] [化學式2][化學式3]
所述潘多汀衍生物是市售可得的或可根據(jù)已知合成方法制備。其可通過分離和純化蓬莪萃取物或通過擠壓蓬莪得到油制備。為分離和純化源自蓬莪萃取物的潘多汀衍生物，使用硅膠、活性氧化鋁或各種其他合成樹脂的柱色譜或高效液相色譜(HPLC)可被單獨或結(jié)合使用，但不限于此。
作為本發(fā)明的一個實施方案，干燥蓬莪被粉碎并與乙醇混合。溶劑萃取后，除去溶劑并濃縮得到的萃取物。將濃縮的粗萃取物與乙酸乙酯混合。萃取出乙酸乙酯可溶性成分后，接著除去乙酸乙酯，乙酸乙酯可溶性成分被濃縮并根據(jù)極性被分離。具體地，首先使用己烷和乙酸乙酯的混合物溶劑進行展開以除去雜質(zhì)。然后，使用己烷、氯仿和乙酸乙酯的混合物溶劑進行分離。最后，得到潘多汀A、異潘多汀A或4-羥基潘多汀A(見圖1和實施例2至4)。
所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物具有極好的抗老化活性，且在改善、防止或處理皺紋方面表現(xiàn)出色。
具體地，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物具有極好的細胞增殖活性。當使用成纖維細胞進行MTT試驗分析時，添加所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物會顯著引起細胞增殖(見試驗例1)。
另外，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物具有通過抑制MMP-1的表達而抑制膠原蛋白分解的活性，和通過引發(fā)原膠原蛋白合成而促進膠原蛋白合成的活性。當用所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物處理時，MMP-1的表達被抑制，而原膠原蛋白合成得到提高(見試驗例2)。
本發(fā)明人已揭示了所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物抑制膠原蛋白分解和促進膠原蛋白合成的機理。
具體地，膠原蛋白分解通過以下機理進行。當細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、Jun氨基末端激酶(JNK)和p38激酶--它們屬于絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)--通過磷酸化被活化時，激活蛋白-1(AP-1)的活化被引發(fā)[Xu Y，F(xiàn)isher GJ.，J Dermatol.Sci.Suppl.2005；1S1S8]，導致與DNA結(jié)合。藉此，MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)被排出，膠原蛋白被分解。這里，已知c-Jun和c-Fos在AP-1與DNA的結(jié)合中起作用[Waskiewicz AJ，Cooper JA.，Curr.Opin.Cell Biol.，1995；7798805]。
當加入潘多汀A時，ERK、JNK和p38激酶的活性，以及AP-1與DNA的結(jié)合受到抑制。另外，c-Jun和c-Fos的活性受到抑制。結(jié)果，MMP的分泌受到抑制。因此，證明潘多汀A具有抑制膠原蛋白分解和促進原膠原蛋白合成的活性(見試驗例3)。
另外，當施用于皮膚或口服施用于小鼠時--其中通過暴露于紫外線引發(fā)皺化，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物表現(xiàn)出明顯的皺紋改善效果(見試驗例4)。
因此，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物在防止老化方面表現(xiàn)出色，特別是在防止、改善或處理皺紋方面表現(xiàn)出色，從而被用作化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物的有效成分。
本發(fā)明的化妝品組合物包含所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物作為有效成分，并且可以與皮膚可接受的賦形劑一起制成基礎(chǔ)化妝品(化妝水、潤膚霜、精華、清潔用品如清潔泡沫和清潔水、面膜、身體護理油)、著色化妝品(粉底、唇膏、睫毛膏、妝底)、護發(fā)組合物(香波、潤絲、護發(fā)素、發(fā)膠)和肥皂的形式。
所述賦形劑可包含但不限于柔膚劑、皮膚滲透增強劑、著色劑、芳香劑、乳化劑、增稠劑或溶劑。另外，可以加入香料、色素、殺菌劑、抗氧化劑、防腐劑、保濕劑等，并且可加入改善物理性質(zhì)用的稠化劑、無機鹽或合成聚合物。例如，在制作包含本發(fā)明組合物的清潔用品和肥皂的情況下，它們可通過向常規(guī)清潔用品或肥皂基質(zhì)中添加所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物來容易地制備。在制作潤膚霜的情況下，可通過向常規(guī)水包油潤膚霜基底中添加所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物制備。另外，也可添加香料、螯合劑、色素、抗氧化劑、防腐劑等，以及添加改善物理性質(zhì)用的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)或合成聚合物。
本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可以優(yōu)選在0.001-10重量％，更優(yōu)選0.01-5重量％的范圍內(nèi)被包含在化妝品組合物中，以制劑的總重量為基準計。如果所述組分以小于0.001重量％的量添加，其將在防止老化或改善皺紋方面提供較低的效果，而如果所述組分以大于10重量％的量添加，其將在安全或配制方面有困難。
同時，本發(fā)明的食品組合物可包含所有形式，包括功能性食品、營養(yǎng)補劑、保健食品和食品添加劑。
所述食品組合物可以通過本領(lǐng)域中已知的方法制成各種形式。
例如，作為保健食品，本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可被制成用于飲用的茶、果汁和飲品，或被制成攝取用的顆粒、膠囊或粉末。另外，公知具有防止老化或防止、改善或處理皺紋的活性的常規(guī)活性成分可以與本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物混合以制備一種組合物。另外，為制備功能性食品，本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可被添加至飲料(包括酒精飲料)、水果及其加工食品(例如罐頭水果、樽裝水果、果醬、桔子醬等)、魚類、肉類及其加工食品(例如火腿、香腸、腌牛肉等)、面包和面條(例如日本面條、蕎麥面、中國面條、意大利面條、空心面等)、果汁、飲品、曲奇、太妃糖、奶制品(例如黃油、奶酪等)、植物油、人造黃油、植物蛋白、袋裝殺菌食品(retortfood)、冷凍食品、各種調(diào)味料(例如豆瓣醬、醬油、調(diào)味汁等)。另外，所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可以以食品添加劑用粉末或萃取物的形式制備。
本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可以優(yōu)選在以食品總重量為基準計為0.01至50％的范圍內(nèi)，被適當?shù)匕谑称方M合物中。更優(yōu)選地，本發(fā)明的食品組合物可以特別是將公知具有防止老化或防止、改善或處理皺紋活性的常規(guī)活性成分與本發(fā)明的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物混合而制備。
同時，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以單獨包含所述潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物或還同時包含一種或多種另外的載體、賦形劑或稀釋劑。
可以包含可藥用的載體，例如胃腸外制劑或口服制劑用的載體?？诜苿┯玫妮d體可包括乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸。另外，胃腸外制劑用載體可包括水、油、鹽水、葡萄糖水溶液和乙二醇、以及穩(wěn)定劑和防腐劑。穩(wěn)定劑的實例可以為抗氧化劑如亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉和抗壞血酸。防腐劑的實例可以為氯化苯二甲烴銨、對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯、和氯丁醇?？伤幱玫妮d體的目錄公開于Remington’s Pharmaceutical Sciences，第19版，Mack PublishingCompany，Easton，PA，1995中。
本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以以多種途徑施用于哺乳動物，包括人類。例如，其可以通過口服或胃腸外制劑被施用。胃腸外制劑可以為但不限于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、動脈內(nèi)、骨髓內(nèi)、硬膜下、心內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)、胃腸道、胃腸外、舌下或直腸制劑。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以以上述口服制劑或胃腸外制劑的形式制備。在口服施用用制劑的情況下，本發(fā)明的組合物可以通過本領(lǐng)域公知的方法被配制成粉劑、粒劑、片劑、丸劑和糖衣片劑、膠囊劑、液劑、凝膠劑、糖漿劑、漿劑和乳劑。例如，口服施用用制劑可以通過將有效成分與固體賦形劑混合、粉碎、并添加合適的補劑、然后制成顆粒狀混合物的形式，從而以片劑或糖衣片劑的形式獲得。關(guān)于合適的賦形劑的實例，其可包括糖，包括乳糖、右旋葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤蘚糖醇和麥芽糖醇；淀粉，包括玉米淀粉、小麥淀粉、米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素，包括纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和羥丙基甲基纖維素；以及填充劑，包括明膠和聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，其還可包括交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、褐藻酸或褐藻酸鈉作崩解劑(solutionizer)。另外，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物還可包含抗凝血劑、潤滑劑、潤濕劑、調(diào)味劑、乳化劑和抗菌劑。在胃腸外施用用醫(yī)藥制劑的情況下，其可以通過本領(lǐng)域公知的方法以注射制劑、乳膏劑、乳液劑、油膏劑、油劑、保濕劑、凝膠劑、噴霧劑和鼻用吸入劑的形式制備。以上提及的制劑詳細描述于公知的處方冊--Remington’s Pharmaceutical Sciences，第15版，1975，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania 18042，第87章Blaug，Seymour中。
全部有效量的本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以以單次劑量施用于患者，或可以通過分次治療程序以多次劑量施用。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可根據(jù)疾病嚴重程度包含不同量的有效成分。在胃腸外施用的情況下，所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的有效量優(yōu)選為約0.01至50mg/kg體重/天，更優(yōu)選0.1至30mg/kg體重/天，而在口服施用的情況下，所述量優(yōu)選為約0.01至100mg/kg體重/天，更優(yōu)選0.1至50mg/kg體重/天，其可為單次劑量或多次劑量。但潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的劑量可以通過考慮各種因素而適當確定，所述因素例如為需要治療的對象的年齡、體重、健康狀況、性別、疾病嚴重程度、飲食和排泄，以及施用時間和施用途徑。當考慮到這些因素時，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以確定用于防止老化或防止、改善或處理皺紋的某一用途的所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的適當劑量。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以不限制制劑、施用途徑和施用方法，只要它們表現(xiàn)出本發(fā)明的效果即可。
另外，由于所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物具有極好的抗老化活性，且在改善、防止或處理皺紋方面尤其出色，因此其可用于制備用于抗老化或改善、防止或處理皺紋用的化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物。
使用所述潘多汀衍生物或蓬莪萃取物制備化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物的方法與上述方法相同。且所述組合物中的所述潘多汀衍生物或蓬莪萃取物的含量與上述含量相同。
另外，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可用于防止、改善或處理皺紋，或防止老化的方法中。
為防止、改善或處理皺紋，或為防止老化，所述潘多汀衍生物或蓬莪萃取物可以以有效量施用于需要其的對象。
本文使用的“需要的對象”是指需要防止、改善或處理皺紋，或防止老化的哺乳動物，優(yōu)選人?！坝行Я俊笔侵竿ㄟ^在所述對象體內(nèi)抑制膠原蛋白分解和促進膠原蛋白合成，從而表現(xiàn)出防止、改善或處理皺紋和防止老化的效果的量。以有效量進行施用的施用方法和施用劑量與以上詳細描述的相同。
另外，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物可用于促進膠原蛋白合成和抑制膠原蛋白分解的方法中。
所述潘多汀衍生物或蓬莪萃取物促進膠原蛋白合成和抑制膠原蛋白分解的活性及其機理與以上所述的相同。
有益效果 從上文可以看出，所述選自由化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物引發(fā)細胞增殖、抑制膠原蛋白分解、并促進膠原蛋白合成，因此，其在防止老化，特別是防止、改善或處理皺紋方面表現(xiàn)出出色的活性，可用作化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物的有效成分。



圖1說明了一種從蓬莪中分離具有皺紋改善活性的物質(zhì)的方法。
圖2示出蓬莪乙醇萃取物的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進活性(AMMP-1表達抑制活性，BMMP-1mRNA表達抑制活性，C原膠原蛋白生物合成促進活性，D原膠原蛋白mRNA表達促進活性)。
圖3示出潘多汀A的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進活性(AMMP-1表達抑制活性，BMMP-1mRNA表達抑制活性，C原膠原蛋白生物合成促進活性，D原膠原蛋白mRNA表達促進活性)。
圖4示出異潘多汀A的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進活性(AMMP-1表達抑制活性，BMMP-1mRNA表達抑制活性，C原膠原蛋白生物合成促進活性，D原膠原蛋白mRNA表達促進活性)。
圖5示出4-羥基潘多汀的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進活性(AMMP-1表達抑制活性，BMMP-1mRNA表達抑制活性，C原膠原蛋白生物合成促進活性，D原膠原蛋白mRNA表達促進活性)。
圖6示出所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物對MAPK的活化的影響。
圖7示出所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物對AP-1的DNA結(jié)合活性的影響。
圖8示出所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物對c-Jun和c-Fos的活性的影響。
圖9示出施用所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物以后的小鼠皮膚復(fù)制物。
圖10示出對小鼠皮膚施用所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物以后的Rt、Rm、Rz和Ra測量結(jié)果(Rt從皮膚表面最高部分至最低部分的距離，Rm5次測量的最大Rt值，Rz5次測量的平均Rt值，Ra算術(shù)平均表面粗糙度)。
圖11示出口服施用所述蓬莪萃取物或潘多汀衍生物以后的小鼠皮膚復(fù)制物。

具體實施例方式 后文將通過實施例和試驗例詳細描述本發(fā)明的構(gòu)成和效果。但以下實施例和試驗例僅是為說明本發(fā)明的目的給出，本發(fā)明的范圍不受其限制。
實施例1包含潘多汀的蓬莪萃取物的制備 1-1.蓬莪的乙醇萃取物的制備 使用攪拌器將干燥蓬莪根莖粉碎。將100g粉碎的蓬莪試樣加入1L乙醇中，并在室溫下萃取48小時。萃取試樣通過沃特曼(Whatman)2號濾紙過濾。溶劑成分通過使用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮而從濾出的萃取物溶液中除去。得到蓬莪的乙醇萃取物。
1-2.蓬莪的己烷萃取物的制備 使用攪拌器將干燥蓬莪根莖粉碎。將100g粉碎的蓬莪試樣加入1L己烷中，并在室溫下萃取48小時。萃取試樣通過沃特曼2號濾紙過濾。溶劑成分通過使用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮而從濾出的萃取物溶液中除去。得到蓬莪的己烷萃取物。
1-3.蓬莪的氯仿萃取物的制備 使用攪拌器將干燥蓬莪根莖粉碎。將100g粉碎的蓬莪試樣加入1L氯仿中，并在室溫下萃取48小時。萃取試樣通過沃特曼2號濾紙過濾。溶劑成分通過使用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮而從濾出的萃取物溶液中除去。得到蓬莪的氯仿萃取物。
1-4.蓬莪的超臨界萃取物的制備 使用超臨界流體萃取器并使用二氧化碳(CO2)作超臨界流體從蓬莪根莖中獲得超臨界萃取物。在50℃和200巴下萃取后，從萃取物溶液中除去溶劑成分。得到超臨界萃取物。
實施例2潘多汀A的分離 將在實施例1-1中獲得的蓬莪的濃縮乙醇萃取物與乙酸乙酯混合。萃取出乙酸乙酯可溶性成分，并在減壓下除去乙酸乙酯以濃縮所述乙酸乙酯可溶性成分。使用其中填充6x15cm硅膠的柱，并使用一種由正己烷、氯仿和乙酸乙酯(15∶5∶1.5，體積/體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)，將一共6個級分濃縮并干燥。在所述6個級分中，使用一種由正己烷、乙酸乙酯和甲醇(18∶2∶1，體積/體積/體積)構(gòu)成的展開溶劑對第3個級分(級分3)進行薄層色譜分析(TLC，硅膠60F254，Merck)。將一共3個級分濃縮并干燥。在所述3個級分中，對第2個級分(級分3-2)進行循環(huán)HPLC(柱W-252，20.0mm ID x 500mm L)。將一共2個級分濃縮并干燥。最后在所述2個級分中，將第2個級分(級分3-2-2)濃縮并干燥。分離出作為具有皺紋改善活性的純凈物的以下化學式1的潘多汀A。
[化學式1]
實施例3異潘多汀A的分離 將在實施例1-1中獲得的蓬莪的濃縮乙醇萃取物與乙酸乙酯混合。萃取出乙酸乙酯可溶性成分，并在減壓下除去乙酸乙酯以濃縮所述乙酸乙酯可溶性成分。使用其中填充6x15cm硅膠的柱，并使用一種由正己烷、氯仿和乙酸乙酯(15∶5∶1.5，體積/體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)，將一共6個級分濃縮并干燥。在所述6個級分中，使用一種反相-18(Rp-18，LiChropep，25-40m)填料和一種由甲醇和水(9∶1，體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)洗脫第4個級分(級分4)。一共得到2個級分。在所述2個級分中，將第2個級分(級分4-2)濃縮、干燥、并使用一種由氯仿和甲醇(10∶0.2，體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)洗脫。將一共2個級分濃縮并干燥。在所述2個級分中，使用一種由正己烷和乙酸乙酯(10∶3，體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)洗脫第2個級分(級分4-2-2)。將一共2個級分濃縮并干燥。最后在所述2個級分中，將第2個級分(級分4-2-2-2)濃縮并干燥。分離出作為具有皺紋改善活性的純凈物的以下化學式2的異潘多汀A。
[化學式2]
實施例44-羥基潘多汀A的分離 將在實施例1-1中獲得的蓬莪的濃縮乙醇萃取物與乙酸乙酯混合。萃取出乙酸乙酯可溶性成分，并在減壓下除去乙酸乙酯以濃縮所述乙酸乙酯可溶性成分。使用其中填充6x15cm硅膠的柱，并使用一種由正己烷、氯仿和乙酸乙酯(15∶5∶1.5，體積/體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)，將一共6個級分濃縮并干燥。在所述6個級分中，使用一種由二氯甲烷和甲醇(19∶1，體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)洗脫第6個級分(級分6)。一共得到3個級分。在所述3個級分中，使用一種由氯仿和甲醇(20∶1，體積/體積)構(gòu)成的溶劑系統(tǒng)洗脫第2個級分(級分6-2)。一共得到2個級分。最后在所述2個級分中，將第2個級分(級分6-2-2)進行循環(huán)HPLC(柱W-252，20.0mm IDx500mm L)。分離出作為具有皺紋改善活性的純凈物的以下化學式3的4-羥基潘多汀A。
[化學式3]
試驗例1蓬莪萃取物和潘多汀衍生物的細胞增殖效果 1-1.蓬莪萃取物的細胞增殖作用 對成纖維細胞進行MTT試驗分析[溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑還原方法]以評價實施例1-1中制備的蓬莪乙醇萃取物的細胞增殖作用。選擇一種已知具有皮膚皺紋改善效果的綠茶萃取物作為對照物質(zhì)。結(jié)果在下表1中給出。
表1 蓬莪萃取物的細胞增殖效果 從表1可以看出，本發(fā)明的蓬莪萃取物表現(xiàn)出比對照物質(zhì)更好的細胞增殖效果。
1-2.潘多汀衍生物的細胞增殖作用 對成纖維細胞進行MTT試驗分析[溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑還原方法]以評價實施例2至4中制備的潘多汀衍生物的細胞增殖作用。選擇一種已知具有皮膚皺紋改善效果的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯(epigallocatechin-3-O-gallate，EGCG)作為對照物質(zhì)。結(jié)果在下表2中給出。
表2 潘多汀衍生物的細胞增殖效果 從表2可以看出，本發(fā)明的潘多汀衍生物表現(xiàn)出比對照物質(zhì)更好的細胞增殖效果。
試驗例2蓬莪萃取物或潘多汀衍生物的MMP-1抑制和原膠原蛋白合成促進效果 2-1.蓬莪萃取物 實施例1中制備的蓬莪乙醇萃取物的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進效果通過蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)和逆轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測定。結(jié)果在圖2中給出。
具體地，從培養(yǎng)的成纖維細胞中提取出蛋白質(zhì)并使用一種蛋白質(zhì)試驗分析試劑(Bio-Rad Laboratories Inc.，Hercules，CA，USA)對其定量。對于蛋白質(zhì)印跡法，所述蛋白質(zhì)被加熱3分鐘，冷卻后通過在10％SDS-PAGE中電泳而被轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜(Amersham International，Little Chalfont，England)。用5％的脫脂乳的TBST溶液(10mM Tris，pH 7.5，100mM NaCl，0.1％Tween 20)使所述膜飽和。使用一抗(1∶1000稀釋)印跡2小時后，用TBST沖洗，再用二抗(1∶2000稀釋)印跡2小時。用TBST沖洗3次后，使用ECL檢測系統(tǒng)(AmershamInternational，Little Chalfont，EnRland)分析印跡抗體。
對于RT-PCR，使用TRIZOL(Invitrogen，USA)從成纖維細胞中分離出RNA。分離的RNA使用MMP-1和原膠原蛋白的引物和Taq聚合酶進行定量。具體地，RT-PCR使用MMP-1引物進行25個循環(huán)，每個循環(huán)由94℃30秒、50℃1分鐘和72℃1分鐘構(gòu)成。RT-PCR使用原膠原蛋白進行28個循環(huán)，每個循環(huán)由94℃30秒、60℃1分鐘和72℃1分鐘構(gòu)成。然后，在使用1％瓊脂糖凝膠進行電泳后，MMP-1和原膠原蛋白的mRNA表達通過溴化乙錠(EtBr)亮度進行分析。
從圖2可以看出，用所述蓬莪乙醇萃取物處理導致MMP-1蛋白質(zhì)和mRNA的表達以濃度相關(guān)方式降低，而原膠原蛋白和mRNA的表達以濃度相關(guān)方式升高(見圖2)。
對實施例1中制備的蓬莪的己烷萃取物、氯仿萃取物和超臨界萃取物進行同樣的實驗。與對照組相比，用所述蓬莪己烷萃取物處理導致MMP-1表達降低37％，原膠原蛋白合成升高250％(圖中沒有顯示)。與對照組相比，用所述蓬莪氯仿萃取物處理導致MMP-1表達降低40％，原膠原蛋白合成升高290％(圖中沒有顯示)。最后，與對照組相比，用所述蓬莪超臨界萃取物處理導致MMP-1表達降低29％，原膠原蛋白合成升高220％(圖中沒有顯示)。
因此，由于所述蓬莪萃取物抑制膠原酶表達并促進原膠原蛋白合成，因此證實其可有效地用于抗老化或皺紋改善。
2-2.潘多汀衍生物 實施例2至4中制備的潘多汀衍生物的MMP-1抑制活性和原膠原蛋白合成促進效果通過蛋白印跡法和RT-PCR、以與試驗例2-1相同的方式測定。結(jié)果在圖3-5中給出。
從圖3-5可以看出，用潘多汀A(見圖3)、異潘多汀A(見圖4)或4-羥基潘多汀A(見圖5)處理導致MMP-1蛋白質(zhì)和mRNA的表達以濃度相關(guān)方式降低，而原膠原蛋白和mRNA的表達以濃度相關(guān)方式升高。特別地，它們表現(xiàn)出比對照物質(zhì)EGCG更好的活性。
因此，由于所述潘多汀衍生物抑制膠原酶表達并促進原膠原蛋白合成，因此證實其可有效地用于抗老化或皺紋改善。
試驗例3蓬莪萃取物或潘多汀衍生物的膠原蛋白分解抑制機理 3-1.對絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化的影響 在DMEM(Gibco，Grand Island，NY，USA)中培養(yǎng)人類皮膚成纖維細胞(CCD-986sk，ATCC，Manassas，VA，USA)。所述成纖維細胞在一個10cm培養(yǎng)皿(SPL，Seoul，Korea)上培養(yǎng)至80％的濃度，并在無血清培養(yǎng)基中進一步培養(yǎng)24小時。然后，所述細胞在包含實施例2的潘多汀A的無血清DMEM中培養(yǎng)24小時。用5mL磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)代替所述培養(yǎng)基后，將所述細胞暴露于紫外線下(20mJ/cm2)。沒有暴露于紫外線下的細胞用作陰性對照組，用EGCG處理的細胞用作陽性對照組。
將所述成纖維細胞在RIPA緩沖液(Sigma-Aldrich Co.，St.Louis，MO，USA)中裂解，并使用一種蛋白質(zhì)試驗分析試劑(Bio-RadLaboratories Inc.，Hercules，CA，USA)對蛋白質(zhì)定量。對于蛋白印跡法，所述蛋白質(zhì)被加熱3分鐘，冷卻后通過在10％SDS-PAGE中電泳被轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜(Amersham International，Little Chalfont，England)。用5％的脫脂乳的TBST溶液(10mM Tris，pH 7.5，100mMNaCl，0.1％Tween 20)使所述膜飽和。使用一抗(1∶1000稀釋)印跡2小時后，用TBST沖洗，再用二抗(1∶2000稀釋)印跡2小時。用TBST沖洗3次后，使用ECL檢測系統(tǒng)(Amersham International，LittleChalfont，England)分析印跡抗體。檢出水平使用軟件RFLPscan 2.1版計量。
通過該步驟，測得細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、Jun氨基末端(JNK)和p38激酶--它們屬于絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)--的活性變化。結(jié)果在圖6中給出。
從圖6可以看出，當暴露于紫外線下時，ERK、JNK和p38激酶通過磷酸化被活化。但是，當加入潘多汀A時，ERK、JNK和p38激酶的活化以濃度相關(guān)的方式被抑制?？紤]到通過磷酸化對ERK、JNK和p38激酶的活化會引發(fā)激活蛋白-1(AP-1)的活化[Xu Y，F(xiàn)isher GJ.，J.Dermatol.Sci.Suppl.2005；1S1S8]，從而促進基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)分泌和膠原蛋白分解[Huang C，Schmid PC，Ma WY，Schmid HH，DongZ.，J.Biol.Chem.1997；272418794]，因此潘多汀A可通過抑制膠原蛋白分解而有效地用于抗老化或皺紋改善。
3-2.對AP-1的DNA結(jié)合活性的影響 進行電泳遷移率變動分析(EMSA)以確定AP-1的DNA結(jié)合活性。具體地，向試驗例3-1中培養(yǎng)的成纖維細胞中加入潘多汀A并將其暴露于紫外線下，用PBS沖洗并收集該細胞。在將其再懸浮于100μL裂解緩沖液(10mM HEPES，10mM KCl，0.1mM EDTA，1mM DTT，0.5mM PMSF，pH 7.9)15分鐘后，加入30μL 5％的NP-40并混合15秒。通過離心除去細胞溶質(zhì)成分并使用萃取緩沖液(20mM HEPES，0.4MNaCl，1mM EDTA，1mM DTT，1mM PMSF，pH 7.9)裂解細胞核沉淀(nuclear pellets)。凝膠遷移分析根據(jù)生產(chǎn)商指示(Gel Shift KitSystem；Panomics，F(xiàn)remont，CA，USA)使用經(jīng)定量的核蛋白質(zhì)進行。然后，用ECL檢測系統(tǒng)(Amersham International，Little Chalfont，England)分析檢測到的蛋白質(zhì)，檢出水平使用軟件RFLPscan 2.1版計量。
通過此方法測定AP-1的DNA結(jié)合活性。結(jié)果在圖7中給出。
從圖7可以看出，加入潘多汀A會導致以濃度相關(guān)的方式抑制AP-1對DNA的結(jié)合。因此，考慮到AP-1的活化可促進MMP分泌和膠原蛋白分解，潘多汀A可通過抑制膠原蛋白分解有效地用于抗老化或皺紋改善。
3-3.對c-Jun和c-Fos的活性的影響 以與試驗例3-1中相同的方式進行蛋白印跡以研究潘多汀A對c-Jun和c-Fos的活性的影響。結(jié)果在圖8中給出。
從圖8中可以看出，加入潘多汀A會導致以濃度相關(guān)的方式抑制c-Jun和c-Fos的活性?？紤]到c-Jun和c-Fos對AP-1的轉(zhuǎn)錄活性的影響[Waskiewicz AJ，Cooper JA.，Curr.Opin.Cell Biol.，1995；7798805]，可以看出潘多汀A可抑制AP-1活性，如試驗例3-2。
試驗例4蓬莪萃取物或潘多汀衍生物的皺紋改善效果 4-1.在皮膚上施用 使四十八只6周齡的無毛雌性小鼠(HosHR-1)適應(yīng)一周，并將其隨機分為6組，每組8只。將所述無毛小鼠(HosHR-1)暴露于紫外線下8周。一周進行3次紫外線輻射，從1MED(1MED＝50mJ/cm2)至4MED，直到試驗結(jié)束。所述6個試驗組為沒有紫外線處理的組、紫外線處理的組、紫外線和蓬莪乙醇萃取物(0.1％，0.5％)處理的組、以及紫外線和潘多汀A(1mM，5mM)處理的組。將每個試樣溶于乙醇和聚乙二醇(7∶3，體積/體積)的混合物溶劑中，并在8周內(nèi)每天將50μL施用于所述小鼠的背上。對沒有紫外線處理的組和紫外線處理的組，施用50μL乙醇和聚乙二醇(7∶3，體積/體積)的混合物。
為研究防皺效果，使用硅氧烷聚合物(SILFLO Impression Material，F(xiàn)lexico，England)制作皮膚復(fù)制物。使用計算機圖像分析軟件SkinVisiometer SV 600(Courage+Khazaha Electronic，Kln，Germany)對所述皮膚復(fù)制物的圖像文件進行皺紋評價。測定Rt、Rm、Rz和Ra值(Rt從皮膚表面最高部分至最低部分的距離，Rm5次測量的最大Rt值，Rz5次測量的平均Rt值，Ra算術(shù)平均表面粗糙度)。結(jié)果在圖9和10中給出。
從圖9可以看出，與紫外線處理的組相比，所述蓬莪乙醇萃取物處理的組(0.1％和0.5％)和所述潘多汀A處理的組(1mM和5mM)表現(xiàn)出顯著降低的皺化。另外，從圖10可以看出，無論所述蓬莪乙醇萃取物處理的組還是所述潘多汀A處理的組均表現(xiàn)出顯著降低的Rt、Rm、Rz和Ra值(p＜0.05)。
因此，可以看出在皮膚上施用所述蓬莪萃取物或所述潘多汀衍生物可提供出色的皺紋改善效果。
4-2.口服施用 對試驗例4-1中暴露于紫外線下的無毛小鼠，在8周內(nèi)每天口服施用溶于含5％Tween 80的0.5％羧甲基纖維素溶液中的蓬莪乙醇萃取物(200mg/kg)或潘多汀A(50mg/kg)。對于對照組(沒有紫外線處理的組和紫外線處理的組)，施用0.5％羧甲基纖維素溶液。
為研究防皺效果，使用硅氧烷聚合物(SILFLO Impression Material，F(xiàn)lexico，England)制作皮膚復(fù)制物。結(jié)果在圖11中給出。
從圖11可以看出，口服施用所述蓬莪萃取物或所述潘多汀衍生物表現(xiàn)出顯著降低的皺化。
因此，可以看出口服施用所述蓬莪萃取物或所述潘多汀衍生物可提供出色的皺紋改善效果。
制劑例1化妝品 1-1和1-2.營養(yǎng)化妝水(乳液) 營養(yǎng)化妝水根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表3中的組成制備。
表3 營養(yǎng)化妝水(乳液) 1-3和1-4.柔膚水(爽膚水) 柔膚水根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表4中的組成制備。
表4 柔膚水(爽膚水) 1-5和1-6.營養(yǎng)霜 營養(yǎng)霜根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表5中的組成制備。
表5 營養(yǎng)霜 1-7和1-8.按摩膏 按摩膏根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表6中的組成制備。
表6 按摩膏 1-9和1-10.面膜 面膜根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表7中的組成制備。
表7 面膜 1-11和1-12.凝露 凝露根據(jù)一種相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，使用實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物，以下表8中的組成制備。
表8 凝露 制劑例2食品 2-1.保健食品 1,000mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以與70μg維生素A乙酸酯、1.0mg維生素E、0.13mg維生素B1、0.15mg維生素B2、0.5mg維生素B6、0.2μg維生素B12、10mg維生素C、10μg生物素、1.7mg煙酰胺、50μg葉酸、0.5mg泛酸鈣、1.75mg硫酸亞鐵、0.82mg氧化鋅、25.3mg碳酸鎂、15mg磷酸二氫鉀、55mg磷酸氫鈣、90mg檸檬酸鉀、100mg碳酸鈣和24.8mg氯化鎂混合?；旌媳壤刹煌馗淖儭Ｋ龌旌衔锟筛鶕?jù)相關(guān)領(lǐng)域中的常用方法制成顆粒，并且可根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域中的常用方法用于制備一種保健食品組合物。
2-2.保健飲品 1,000mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與1,000mg檸檬酸、100g低聚糖、2g梅萃取物和1g?；撬峄旌??？杉尤肟傮w積為900mL的凈化水。85℃攪拌加熱約1小時后，將形成的溶液過濾并收集在一個2L的無菌容器中。密封及殺菌后，可使其保持低溫以制備一種保健飲品組合物。
2-3.口香糖 0.1重量％的實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與20重量％的口香糖膠基、76.9重量％的糖、1重量％的香料和2重量％的水混合以制備口香糖。
2-4.糖果 0.1重量％的實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與60重量％的糖、39.8重量％的淀粉糖漿和0.1重量％的香料混合以制備糖果。
2-5.餅干 1重量％的實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與25.59重量％的硬質(zhì)小麥粉、22.22重量％的中等硬粒小麥粉、4.80重量％的精制糖、0.73重量％的食鹽、0.78重量％的葡萄糖、11.78重量％的棕櫚酥油、1.54重量％的銨、0.17重量％的小蘇打、0.16重量％的亞硫酸氫鈉、1.45重量％的米粉、0.0001重量％的維生素B1、0.0001重量％的維生素B2、0.04重量％的牛奶香精、20.6998重量％的水、1.16重量％的全脂奶粉、0.29重量％的代乳粉、0.03重量％的磷酸二氫鈣、0.29重量％的散鹽(scattering salt)和7.27重量％的噴霧奶粉(spray-milk)混合以制備餅干。
制劑例3藥物 3-1.粉劑 50mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與2g結(jié)晶纖維素混合并放入密封袋以制備粉劑。
3-2.片劑 50mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與400mg結(jié)晶纖維素和5mg硬脂酸鎂混合并制成片劑。
3-3.膠囊劑 30mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域常用的方法與100mg乳清蛋白質(zhì)、400mg結(jié)晶纖維素和6mg硬脂酸鎂混合并裝入明膠膠囊以制備膠囊劑。
3-4.注射劑 根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法，可將活性成分溶于注射劑用蒸餾水中，并可將pH調(diào)節(jié)至約7.5。然后，可將100mg實施例2至4的潘多汀衍生物或?qū)嵤├?的蓬莪萃取物、注射劑用蒸餾水和pH調(diào)節(jié)劑混合，裝入2mL的安瓿并殺菌，以制備注射劑。
工業(yè)應(yīng)用性 所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物引發(fā)細胞增殖、抑制膠原蛋白分解、并促進膠原蛋白合成，因此，其在防止老化，特別是防止、改善或處理皺紋方面表現(xiàn)出出色的活性，可用作化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物的有效成分。
權(quán)利要求
1.一種皺紋改善和/或抗老化用化妝品組合物，其包含選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物
[化學式1] [化學式2] [化學式3]
2.一種皺紋改善和/或抗老化用食品組合物，其包含選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物
[化學式1][化學式2] [化學式3]
3.一種防止和處理皺紋和/或防止老化用醫(yī)藥組合物，其包含選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物
[化學式1] [化學式2] [化學式3]
4.權(quán)利要求1至3中任一項的組合物，其中所述蓬莪萃取物使用選自水、C1-C6有機溶劑和亞臨界或超臨界流體的溶劑萃取。
5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述C1-C6有機溶劑是選自C1-C6醇、丙酮、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、環(huán)己烷和石油醚的一種溶劑。
6.選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備化妝品組合物的用途
[化學式1][化學式2] [化學式3]
7.選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備食品組合物的用途
[化學式1] [化學式2] 化學式3]
8.選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物用于制備醫(yī)藥組合物的用途
[化學式1][化學式2] [化學式3]
9.一種用選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止、改善或處理皺紋的方法
[化學式1] [化學式2][化學式3]
10.一種用選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物防止老化的方法
[化學式1] [化學式2] [化學式3]
11.一種用選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物促進膠原蛋白合成的方法
[化學式1][化學式2] [化學式3]
12.一種用選自由以下化學式1至3表示的化合物的潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物抑制膠原蛋白分解的方法
[化學式1][化學式2] [化學式3]
全文摘要
本發(fā)明涉及一種潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物的新用途。更具體地，本發(fā)明涉及一種用于改善皺紋和/或防止老化的組合物，所述組合物包含潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物。所述潘多汀衍生物或包含所述潘多汀衍生物的蓬莪萃取物引發(fā)細胞增殖、抑制膠原蛋白分解、并促進膠原蛋白合成，因此，其在防止老化，特別是防止、改善或處理皺紋方面表現(xiàn)出出色的活性，可用作化妝品組合物、食品組合物或醫(yī)藥組合物的有效成分。
文檔編號A61K8/35GK101827576SQ200880112198
公開日2010年9月8日 申請日期2008年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月17日
發(fā)明者J-K·黃, J-S·申, S·H·權(quán), Y·Y·權(quán), H·I·吳, Y·S·韓, E·J·崔, D·U·金 申請人:新樹有限公司