專利名稱：：人參皂甙Compound-K在制藥中的新應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種人參皂甙Compound-K在制藥中的新應(yīng)用，特別涉及一種人參皂甙Compound-K在制備預(yù)防或治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：中國(guó)專利(公開(kāi)號(hào)CN1570133A)公開(kāi)了人參皂武Compound-K的結(jié)構(gòu)及其制備方法，以及其在抗腫瘤方面的一些應(yīng)用，其具有如下結(jié)構(gòu)但其在預(yù)防或治療關(guān)節(jié)炎的應(yīng)用卻未見(jiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于研究人參皂甙Compound-K在其他領(lǐng)域應(yīng)用的可能性，從而提供其在制藥中的新用途。本發(fā)明提供了人參皂甙Compound-K在制備預(yù)防或治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。具體實(shí)施方式實(shí)施例l初測(cè)毒人參皂甙Compound-K，靜脈注射360mg/kg劑量，小鼠活動(dòng)正常，未見(jiàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察待測(cè)樣品對(duì)角叉菜膠致小鼠急性炎癥的影響。2、材料和試劑1)藥物人參皂甙Compound-K，劑量為10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛，10mg/kg。角叉菜膠，用雙蒸水配制成1%濃度。2)動(dòng)物昆明種小鼠60只體重19-21g性別雄性每組動(dòng)物數(shù)10只實(shí)驗(yàn)室溫度2426°C，相對(duì)濕度6070%3、實(shí)驗(yàn)方法動(dòng)物先分成大劑量組10mg/kg，iv;中劑量組5mg/kg，iv;小劑量組2.5mg/kg，iv;消炎痛組10mg/kg，po;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg，iv。按上述方法給藥三天，致炎前先用排水法測(cè)各組小鼠右后足跖的體積一次，末次給藥一小時(shí)后在小鼠右后足跖中部皮下注射1%角叉菜膠O.lml致炎，以后每隔一小時(shí)測(cè)足跖體積1次，小鼠致炎前及致炎后不同時(shí)間右后足跖體積的差值即為腫脹值，計(jì)算腫脹率及抑制率，組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。腫脹率％=En;EoX100%toEn=致炎后不同時(shí)間的腫脹值Eo=致炎前的腫脹值e—t抑制率％=-x100%cc=對(duì)照組的腫脹率T=治療組的腫脹率4、結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表1。人參皂甙Compound-K可明顯地抑制角叉菜膠致小鼠足跖急性炎癥，其中高劑量組作用最強(qiáng)，4h時(shí)作用最好，對(duì)小鼠急性炎癥的抑制率可達(dá)65.66%，消炎痛組與小劑量組作用相當(dāng)。表l人參皂甙Compmind-K對(duì)角叉菜膠致小鼠急性炎癥的影響(％,n=10，x±s)致炎后不同時(shí)間的腫脹值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01與致炎對(duì)照組比較()內(nèi)為腫脹率(％)<>力為漸劍率廣％)實(shí)施例3人參皂甙Compound-K對(duì)角叉菜膠誘發(fā)大鼠足跖腫脹的影響1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察待測(cè)樣品對(duì)角叉菜膠致大鼠急性炎癥的影響。2、材料和試劑1)藥物人參皂甙Compound-K，劑量為10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛，lmg/kg。角叉菜膠，用雙蒸水配制成1%濃度。2)動(dòng)物大鼠，SD系體重130150g性別雄性每組動(dòng)物數(shù)8只實(shí)驗(yàn)室溫度2426°C，相對(duì)濕度6070%3、實(shí)驗(yàn)方法動(dòng)物先分成大劑量組10mg/kg,iv;中劑量組5mg/kg,iv;小劑量組2.5mg/kg，iv;消炎痛組lmg/kg,po;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg,iv。動(dòng)物先分組，按上述方法給藥三天，致炎前先用排水法測(cè)各組大鼠右后足跖的體積一次，末次給藥一小時(shí)后在大鼠右后足跖中部皮下注射1%角叉菜膠O.lml致炎，以后每隔一小時(shí)測(cè)足跖體積1次，計(jì)算腫脹率及抑制率方法同上，組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。4、結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表2，人參皂甙Compoimd-K可明顯地抑制角叉菜膠致大鼠足跖急性炎癥，其中高劑量組作用最強(qiáng)，對(duì)大鼠急性炎癥的抑制率最高可達(dá)78.23%，消炎痛組作用介于高劑量和低劑量之間。表2人參皂甙Compoimd-K對(duì)角叉菜膠致大鼠急性炎癥的影響(％，n=10，x±s)致炎后不同時(shí)間的腫脹值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*P<0.05,**P<0.01與致炎對(duì)照組比較()內(nèi)為腫脹率(％)實(shí)施例4人參皂甙Compound-K對(duì)佐劑誘導(dǎo)的大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的影響(一)人參皂甙Compound-K對(duì)佐劑誘導(dǎo)的大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的預(yù)防作用。1、材料和試劑1)藥物人參皂甙Compound-K，劑量為10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛lmg/kg。雷公藤1.5mg/kg。弗氏完全佐劑購(gòu)于Sigma公司，每只大鼠右后足跖中部皮下注射O.lml致炎2)動(dòng)物大鼠，SD系體重130150g性別雄性每組動(dòng)物數(shù)8只實(shí)驗(yàn)室溫度2426°C，相對(duì)濕度6070%2、實(shí)驗(yàn)方法動(dòng)物先分成大劑量組10mg/kg，iv;中劑量組5mg/kg，iv;小劑量組2.5mg/kg，iv;消炎痛組lmg/kg,po;雷公藤組1.5mg/kg，po;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg，iv。動(dòng)物致炎前先用排水法測(cè)右后足跖的體積一次，然后在大鼠右后足跖中部皮下注射弗氏完全佐劑O.lml致炎，致炎后次日按上述分組，并開(kāi)始給藥15天，每隔一定時(shí)間測(cè)足跖體積，計(jì)算腫脹率及抑制率同上，組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。3、結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表3，人參皂甙Compound-K可預(yù)防大鼠佐劑性的關(guān)節(jié)炎，其中高劑量組作用略高于雷公藤組，與消炎痛組相當(dāng)。表3人參皂甙Compoiiiid-K對(duì)角叉菜膠致大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的預(yù)防作用(％,n=10，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(二)人參皂甙Compound-K對(duì)佐劑誘導(dǎo)的大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的治療作用。1、材料和試劑1)藥物人參皂甙Compound-K，劑量為10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛lmg/kg。雷公藤1.5mg/kg。弗氏完全佐劑購(gòu)于Sigma公司，每只大鼠右后足跖中部皮下注射O.lml致炎2)動(dòng)物-大鼠，SD系體重130150g性別雄性每組動(dòng)物數(shù)8只實(shí)驗(yàn)室溫度2426°C，相對(duì)濕度6070%2、實(shí)驗(yàn)方法-動(dòng)物先分成大劑量組10mg/kg，iv;中劑量組5mg/kg，iv;小劑量組2.5mg/kg，iv;消炎痛組lmg/kg，po;雷公藤組1.5mg/kg，po;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg，iv。動(dòng)物致炎前先用排水法測(cè)右后足跖的體積一次，然后在大鼠右后足跖中部皮下注射弗氏完全佐劑O.lml致炎，致炎后20日起按上述分組，并開(kāi)始給藥8天，每隔一定時(shí)間測(cè)足跖體積，計(jì)算腫脹率及抑制率同上，組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。3、結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表4，人參皂甙Compound-K可治療大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎，其中高劑量組作用最強(qiáng)，26day時(shí)作用最好，抑制率最高可達(dá)36.15%,明顯高于消炎痛組和雷公藤組。表4人參皂甙Compoimd-K對(duì)角叉菜膠致大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的治療作用(％,n=10，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)施例5人參皂甙Compound-K對(duì)II型膠元(CII)誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎的影響1、材料和試劑1)藥物藥物人參皂甙Compound-K，劑量為10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。Enbrel:9mg/kg，皮下注射，每4天一次。雷公藤1.5mg/kg。致炎劑II型膠元溶解在O.lmol/L醋酸中，使終濃度為2mg/ml膠元溶液，4"C過(guò)夜，次日將II型膠元溶液滴加至冷的不完全弗氏佐劑中，充分乳化(11型膠元液:弗氏不完全佐劑=1:1)，使II型膠元終濃度為lmg/ml。II型膠元乳劑4"C冰箱保存?zhèn)溆?。免疫方法每只大鼠?點(diǎn)背部皮內(nèi)注射免疫，每點(diǎn)0.1ml，共5ml(含有II型膠元量為0.5mg)，7天后以同樣的方法追加免疫一次。對(duì)照組注射0.1mol/L醋酸及不完全弗氏佐劑乳化液，注射前及免疫后20天起用排水法測(cè)定右后足踝部關(guān)節(jié)的腫脹度。2)動(dòng)物大鼠，SD系體重140160g性別雄性每組動(dòng)物數(shù)8只實(shí)驗(yàn)室溫度2426°C，相對(duì)濕度6070%2.人參皂甙Compound-K對(duì)II型膠元(CII)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的預(yù)防作用2.1實(shí)驗(yàn)方法將預(yù)先已溶解在0.1mol/L醋酸并放置過(guò)夜的II型膠元，調(diào)整濃度為2mg/ml后以1:1的比例慢慢滴加至弗氏不完全佐劑中，充分乳化后在每個(gè)大鼠背部5點(diǎn)皮內(nèi)注射，每點(diǎn)0.1ml(每鼠共0.5ml，含膠元0.5mg)進(jìn)行首次免疫，于第7天同法進(jìn)行第二次免疫，此即為致炎動(dòng)物。相似的方法處理正常對(duì)照組動(dòng)物，但免疫組分中不含膠元。動(dòng)物分成大劑量組人參皂甙Compound-K10mg/kg,iv;中劑量組人參皂式Compound-K5mg/kg，iv;小劑量組人參皂武Compound陽(yáng)K2.5mg/kg,iv;雷公藤組1.5mg/kg，po;Enbrel組9mg/kg，sc;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg，iv。給藥組動(dòng)物首次免疫時(shí)開(kāi)始給藥，于第一次免疫后8天停止給藥。用排水法測(cè)量免疫前和首次免疫后20、22、24、27、29天的足踝關(guān)節(jié)腫脹值，計(jì)算腫脹率及抑制率同上，組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，取足踝關(guān)節(jié)作病理檢查。2.2結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表5。人參皂甙Compoimd-K可明顯地預(yù)防II型膠元誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，其中高劑量組作用最強(qiáng)，其作用明顯高于雷公藤組，與enbrd組相當(dāng)。表5人參皂甙Compound-K對(duì)II型膠元(CH)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的預(yù)防作用(％，n=8，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01與致炎對(duì)照組比較()內(nèi)為腫脹率(％)<〉/^為湖劍率卩％」3.人參皂甙Compound-K對(duì)II型膠元(CII)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的治療作用3.1實(shí)驗(yàn)方法將II型膠原(CII)與弗氏不完全佐劑研磨成乳劑，分別在每個(gè)大鼠背部皮內(nèi)注射免疫，至19天大鼠足關(guān)節(jié)大部分開(kāi)始腫脹，挑選足關(guān)節(jié)出現(xiàn)腫脹的致敏大鼠40只，隨即分為5組，每組8只，分別為至炎對(duì)照組；人參皂甙Compound-K10mg/kg,iv;中齊U量組人參皂武Compound-K5mg/kg，iv;小劑量組人參皂甙Compound-K2.5mg/kg，iv;Enbrel組9mg/kg，sc;雷公藤組1.5mg/kg;空白對(duì)照組生理鹽水10mg/kg，iv。連續(xù)給藥8天。用排水法測(cè)量致炎前及癥狀開(kāi)始后(20天后)不同時(shí)間的足腫脹值，計(jì)算腫脹率及抑制率，以組間差異以t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。3.2結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表6，人參皂甙Compound-K可治療II型膠元誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，其中高劑量組作用最強(qiáng)，31day時(shí)作用最好，抑制率最高達(dá)27.67%，高于雷公藤組，與enbrd組相當(dāng)。表6人參皂甙Compound-K對(duì)II型膠元(CII)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的治療作用(％，n=8，x±s)致炎后不同天數(shù)的腫脹值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>權(quán)利要求1、一種人參皂甙Compound-K在制備預(yù)防或治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供結(jié)構(gòu)式如右的人參皂甙Compound-K在制備預(yù)防或治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K31/7028GK101147743SQ20061011619公開(kāi)日2008年3月26日申請(qǐng)日期2006年9月19日優(yōu)先權(quán)日2006年9月19日發(fā)明者劉全海,李晶晶申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院