專利名稱：：瓜蔞或其提取物與紅花或其提取物的藥物組合物的制作方法瓜蔞或其提取物與紅花或其提取物的藥物組合物
技術(shù)領(lǐng)域：
I本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種用于心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，含有該藥物組合物的制劑。l
背景技術(shù)：
l心腦血管疾病向來(lái)被稱為威脅人類健康和長(zhǎng)壽的第一號(hào)殺手。中國(guó)老年人中，心腦血管病發(fā)病率高達(dá)30%，心腦血管疾病居死因首位，大大高于其它疾病的比率。隨著人民生活水平提高，生活節(jié)奏加快，飲食習(xí)慣向高熱、高脂化發(fā)展，該病發(fā)病率逐年上升，而且呈現(xiàn)出年輕化趨勢(shì)。然而目前我國(guó)心腦血管藥的開(kāi)發(fā)速度不及心腦血管病的高發(fā)病率，因此迫切需要開(kāi)發(fā)有效治療心腦血管疾病的藥物。瓜蔞為葫蘆植物栝樓7Hc/Kw朋/;jesfc'n7ow"Maxim或雙邊栝樓7Hc/kw朋AmraW/ior""Harms的干燥果實(shí)，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。主要含有油脂、有機(jī)酸類、甾醇、三萜及其苷類、蛋白質(zhì)、氨基酸類及微量元素、水溶性多糖等多種化學(xué)成分?，F(xiàn)代研究表明，全瓜蔞能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流量，增加心肌收縮力，擴(kuò)張微血管，抗血小板聚集，提高耐缺氧能力，能夠降低血脂，降低血清膽固醇等作用，對(duì)心絞痛、冠心病有很好的療效。紅花為菊科植物紅花Cfl"/w/m^""c/o"肌L的干燥花，現(xiàn)代研究證明紅花的主要有效成分是存在于其水溶性成分中的紅花黃色素。紅花黃色素是含有多種查耳酮類的水溶性混合物，藥理實(shí)驗(yàn)證明其具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、改善心肌供血，降低血壓、擴(kuò)張血管、改善器官供血，抗凝血，抑制血栓形成，耐缺氧、抗炎等多種藥理作用。紅花黃色素中羥基紅花黃色素A含量較高，具有藥理效應(yīng)代表性。與紅花黃色素相關(guān)的專利有CN1085674、CN1368503，涉及紅花黃色素的制備方法、制劑及用途等，另外，紅花黃色素和注射用紅花黃色素均有上市，批準(zhǔn)文號(hào)國(guó)藥準(zhǔn)字Z20050145、Z20050146，制劑規(guī)格每瓶裝50mg(含羥基紅花黃色素A35mg)，生產(chǎn)廠家浙江永寧制藥廠。目前，利用瓜蔞或瓜蔞提取物和紅花或紅花黃色素的相互作用、配伍組方，制備治療心腦血管疾病的藥物，還未見(jiàn)報(bào)道。[
發(fā)明內(nèi)容l本發(fā)明的目的是提供一種用于心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，含有該藥物組合物的制劑。按照重量組份計(jì)算，制成本發(fā)明藥物組合物所含藥效組分的原料藥為瓜蔞100~2000份、紅花1001500份，經(jīng)本發(fā)明人的大量篩選實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明藥物組合物在上述重量份范圍內(nèi)均有協(xié)同增效的作用；優(yōu)選為瓜蔞5001500份、紅花3001000份；最優(yōu)為瓜蔞1000份、紅花500份。本發(fā)明的藥物組合物中的瓜蔞和紅花可以用適宜的溶劑分別或混合經(jīng)過(guò)提取加工得到其提取物，提取物再和藥用輔料混合加工制成各種任何一種制劑。所述的溶劑是指藥學(xué)上常用的溶劑，優(yōu)選水或醇，提取方法可以用藥學(xué)上常規(guī)的方法進(jìn)行提取，如浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)提取法等。所得總提取物的主要有效成分為甾體類化合物和紅花黃色素。本發(fā)明提供了瓜蔞的優(yōu)選提取工藝，具體如下取瓜蔞藥材，烘干，粉碎成粗粉，加入水回流提取二次，每次加入10倍量水，回流提取2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.101.15(6(TC)的濃縮液，加入乙醇至含醇量達(dá)80%,放置過(guò)夜，取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓至稠膏狀，真空干燥，即得。通過(guò)本工藝制備的瓜蔞提取物得率為68%，其中甾體類化合物總含量不低于20%。為了使本發(fā)明藥物組合物達(dá)到更好的療效，還可將上述瓜蔞提取物進(jìn)一步精制將上述工藝得到瓜蔞粗提物用適量水溶解后，用等量石油醚振搖提取二次，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取三次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘?jiān)由倭克谷芙?，上大孔?shù)脂柱，分別用水、15%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過(guò)本工藝制備的瓜蔞提取物得率為24%，其中甾體類化合物總含量不低于30%。本發(fā)明藥物組合物中的瓜蔞可以通過(guò)上述工藝提取制備，但不僅限于上述工藝。本發(fā)明還提供了紅花的優(yōu)選提取工藝，具體如下-工藝一取紅花，于7(TC溫度用pH為3的酸水溫浸提取二至四次，每次均為50倍量的酸水，每次1.5小時(shí)。合并提取液，濾過(guò)，收集濾液，放冷，調(diào)pH值至中性，減壓濃縮至相對(duì)密度1.051.10，加乙醇至醇濃度為70%，冷藏(IO'C以下)放置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液加于已處理好的大孔吸附樹(shù)脂HPD100柱色譜藥材與樹(shù)脂比例為1:10(W/V)，先用去離子水以l2.5ml/cm2/min的流速洗脫兩個(gè)柱床體積，然后用60%的乙醇以l2.5ml/cm"min的流速洗脫五個(gè)柱床體積，收集60%醇洗脫部分，減壓濃縮至密度為1.10左右，然后在7(TC左右減壓真空干燥或減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后冷凍干燥，即得。通過(guò)本工藝提取的紅花提取物的得率為13%，其中紅花黃色素的含量不低于70%。工藝二將紅花加水冷浸24小時(shí)或煎煮11.5小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.101.25，加入乙醇至含醇量為80%，攪拌均勻，fC靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.151.20，加入510倍的水，4'C靜置1224小時(shí)，離心除沉淀，離心液減壓濃縮至提取液含生藥為lg/ml，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱層析，先用去離子水洗脫至Molish反應(yīng)和茚三酮反應(yīng)呈陰性，繼續(xù)用46個(gè)柱體積的去離子水洗脫并收集洗脫液，濃縮至提取液含生藥lg/ml，上聚酰胺柱，先用去離子水洗脫至無(wú)色，再用70~90%乙醇洗脫48個(gè)柱體積，收集洗脫液，減壓回收乙醇，冷凍干燥或噴霧干燥，得到桔黃色無(wú)定形粉末，即得。通過(guò)本工藝提取的紅花提取物的得率為1.53%，其中紅花黃色素的含量不低于70%。工藝三取紅花，加水3(TC溫浸二次，每次加水5倍量，溫浸24小時(shí)，其間不時(shí)攪拌，合并兩次水提液，濾過(guò)，濾液5090。C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.101.25，得紅花水提濃縮液，將此水提濃縮液，上柱床體積為15倍濃縮液體積的聚酰胺柱，以蒸餾水洗脫Molish反應(yīng)和茚三酮反應(yīng)呈陰性，再以95%乙醇洗脫至洗脫液無(wú)色，收集洗脫液，回收乙醇，509(TC減壓濃縮干燥，即得。通過(guò)本工藝提取的紅花提取物的得率為13%，其中紅花黃色素的含量不低于50%。工藝四取紅花，加水15倍量，室溫浸泡二次(帶攪拌)，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾液60'C減壓濃縮至相對(duì)密度1.101.20，加乙醇使含醇量至80%，靜置冷藏過(guò)夜，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加于已處理好的聚酰胺柱上(100200目，聚酰胺用量為上樣量的IO倍左右)，用35%的乙醇洗脫，收集第二個(gè)黃色帶，濃縮干燥，即得。通過(guò)本工藝提取的紅花提取物的得率為23%，其中紅花黃色素的含量不低于55%。本發(fā)明藥物組合物中的紅花可以通過(guò)上述工藝提取制備，但不僅限于上述工藝。本發(fā)明藥物組合物，還可以由瓜蔞提取物與紅花黃色素制成，根據(jù)提取物相對(duì)于原藥材的得率計(jì)算(瓜蔞提取物的得率為28%，紅花提取物的得率為1~3%)，其重量份數(shù)為瓜蔞提取物2160份、紅花黃色素145份；優(yōu)選為瓜蔞提取物10120份、紅花黃色素330份；進(jìn)一步優(yōu)選為瓜蔞提取物2080份，紅花黃色素515份。本發(fā)明藥物組合物中各藥物組分得用量是經(jīng)過(guò)發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出的，各組分的用量在上述重量范圍內(nèi)都有較好療效。以上組成，若以克為單位，可以制成10010000次用量的制劑，如作為注射劑，可制成10010000支，每次用量110支。如作為片劑，可制成100~10000片，每次服用110片。以上組成是按重量比作為配比的，在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)比例增大或減小，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為原料，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間的重量配比不變。以上比例是經(jīng)過(guò)科學(xué)篩選得到的，對(duì)于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過(guò)100%。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)本發(fā)明藥物組合物在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物組合物可以擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈流量；可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液流變學(xué)和微循環(huán)，減少血栓形成；改善心臟供血功能，降低腦血管阻力，增加腦血管流量，改善腦微循環(huán)。主要用于冠心病、心絞痛、缺血性腦血管疾病，以及中風(fēng)及中風(fēng)后遺癥等。本發(fā)明藥物組合物可與藥學(xué)上可接受的輔料制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，優(yōu)選注射劑或口服制劑；可以腸胃外或口服給藥等方式施用于需要這種治療的患者。用于腸胃外給藥時(shí)，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無(wú)菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無(wú)菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內(nèi)用的無(wú)菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內(nèi)注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無(wú)菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無(wú)菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無(wú)菌粉末或無(wú)菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無(wú)菌粉末用溶媒結(jié)晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無(wú)菌濃溶液。用于口服時(shí)，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的固體制劑，依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當(dāng)方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑?？诜鞈覄┫抵鸽y溶性固體藥物，分散在液體介質(zhì)中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖漿劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。制成注射劑時(shí)，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，可選用水性溶劑或非水性溶劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射劑時(shí)，可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑，如滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖；常用的pH值調(diào)節(jié)劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。制成口服制劑時(shí)，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預(yù)膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)點(diǎn)在于(1)首次采用瓜蔞或其提取物和紅花或其提取物合理配伍，用于制備治療心腦血管疾病的藥物，滿足臨床需要；(2)對(duì)本發(fā)明藥物組合物中藥物組份的用量進(jìn)行了大量的篩選實(shí)驗(yàn)研究，得出具有顯著療效的重量配比范圍；(3)藥理藥效實(shí)驗(yàn)研究表明，本發(fā)明藥物組合物可以顯著延長(zhǎng)雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎小鼠存活時(shí)間，顯著減少實(shí)驗(yàn)性大鼠心肌梗塞范圍，顯著降低ADP所致大鼠體外血小板聚集率，顯著減少大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)血栓形成，對(duì)兔腦缺血再灌注損傷有顯著保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，瓜蔞或其提取物與紅花或其提取物合并用藥呈協(xié)同作用，藥效明顯增強(qiáng)，量效關(guān)系鮮明，所達(dá)效果，是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所意想不到的；(4)本發(fā)明藥物組合物的有效成分明確、含量高，通過(guò)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，制劑穩(wěn)定性好，便于控制產(chǎn)品質(zhì)量，可以保證臨床用藥安全。以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明的藥物組合物的有益效果，這些實(shí)驗(yàn)例包括本發(fā)明藥物組合物的藥理藥效實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明的藥物組合物具有下列有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明的藥物組合物僅具有下列有益效果。以下實(shí)驗(yàn)例中所用的瓜蔞提取物均參照實(shí)施例1中的瓜蔞提取物制備方法制備，紅花黃色素均參照實(shí)施例2中的紅花黃色素制備方法制備。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明藥物組合物對(duì)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈小鼠存活時(shí)間的影響受試動(dòng)物Wistar大鼠，體重208230g，雌雄各半，160只，隨機(jī)分為16組。供試品瓜蔞顆粒，自制；紅花顆粒，自制；組合物顆粒(瓜蔞+紅花)不同配比，13組，自制。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為16組，每組10只，分別為生理鹽水對(duì)照組、瓜蔞組、紅花組、組合物不同配比組。各給藥組藥物在給藥前均用蒸餾水稀釋成適宜的濃度。各組大鼠均灌胃給藥一周，每天一次，對(duì)照組灌胃給藥同體積生理鹽水，末次給藥后20min用烏拉坦1.3g/kg腹腔注射麻醉，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎后記錄存活時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表l。表l本發(fā)明藥物組合物對(duì)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈小鼠存活率的影響(殳士S)組別配比劑量(g生藥/kg)動(dòng)物數(shù)(只)存活時(shí)間(min)生理鹽水對(duì)照組瓜蔞組紅花組組合物不同配比組(瓜蔞+紅花)—/103.87±1.31一0.5106.59±2.14*_1106.26±1.63*100+15000.5108.58±1.20*#A100+10000.5109.25±2.16*#厶200+12000.5109.68±2.43*#A500+畫(huà)0.51010.07±2.11"#A600+卯00.51011.54士1.74"化800+8000.51013.09±1.45"#AA1000+5000.51014.27±1.56"#厶厶1200+4000.51015.65±1.25"##AA1200+3000.51014.3011.49，厶1500+3000.51013.64±1.87"*AA1800+2000.51012.01±2.05"#厶1500+1000.51010.97±1.36"#A2000+1000.5109.75±2.03*#A注與生理鹽水組相比，><0.05，'V:0.01;與瓜蔞組相比，#p<0.05，色素組相比，Ap<0.05，AAp<0.01。實(shí)驗(yàn)結(jié)果由上表實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，8糾.1)與生理鹽水對(duì)照組相比，瓜蔞和紅花均能顯著延長(zhǎng)大鼠存活時(shí)間(p<0.05);瓜蔞1002000份、紅花1001500份范圍內(nèi)各配比組合物均能顯著延長(zhǎng)大鼠存活時(shí)間(p<0.05、p<0.01)，瓜蔞5001500份、紅花3001000份范圍內(nèi)各配比的效果更加明顯，以瓜蔞1000份、紅花500份的效果最好。2)與瓜蔞組相比，各配比組合物組大鼠存活時(shí)間延長(zhǎng)，有顯著性差異(p〈0.05、pO.01)。3)與紅花組相比，各配比組合物組大鼠存活時(shí)間延長(zhǎng)，有顯著性差異(pO.05、pO.01)。結(jié)論由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，各給藥組灌胃給藥均可顯著延長(zhǎng)雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎小鼠的存活時(shí)間，與單用瓜蔞和紅花相比，各組合物組大鼠的存活時(shí)間更長(zhǎng)。提示，瓜蔞和紅花合并用藥，具有協(xié)同增效作用，對(duì)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈所致小鼠急性缺血性缺氧腦循環(huán)障礙有顯著保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明藥物組合物對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響受試動(dòng)物Wistar大鼠，體重208230g,170只，隨機(jī)分為17組。供試品瓜蔞提取物注射液，自制；紅花黃色素注射液，自制；組合物注射液組(瓜蔞提取物+紅花黃色素的不同配比)，自制。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為17組生理鹽水對(duì)照組，瓜蔞提取物注射液組，紅花黃色素注射液組，組合物注射液14個(gè)不同配比組。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，尾靜脈注射給藥。大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞模型動(dòng)物戊巴比妥腹腔注射麻醉(45mg/kg)仰位固定。氣管插管，在胸骨左側(cè)作2cm的縱切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4肋軟骨，打開(kāi)胸腔后，連接人工呼吸機(jī)(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開(kāi)心包膜，暴露心臟，冠狀動(dòng)脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動(dòng)物喉部分泌物，使動(dòng)物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈15min后，靜脈給藥。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈4小時(shí)后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(N-BT)染色，計(jì)算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))。實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表2數(shù)據(jù)可知，1)與生理鹽水組比較，瓜蔞提取物注射液組和紅花黃色素注射液組均能顯著降低大鼠心肌梗死面積(p<0.05)，組合物注射液不同配比組均能極顯著降低大鼠心肌梗死面積(pO.Ol)。2)與瓜蔞提取物注射液組比較，組合物注射液不同配比組均能顯著降低大鼠心肌梗死面積(p<0.05、p<0.01)。3)與紅花黃色素注射液組比較，組合物注射液不同配比組均能顯著降低大鼠心肌梗死面積(p<0.05、p<0.01)。表2本發(fā)明藥物組合物對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響(5±s)組別給藥劑量(mg/kg)梗死區(qū)/心室(％)梗死區(qū)/心臟(％)生理鹽水對(duì)照組/36.87±7.0229.91±5.21瓜蔞提取物注射液組2028.36土6.28'24.35±5.10*紅花黃色素注射液組2027.21±6.98*23.57土5.69'組合物注射液2mg+45mg1019.53±6.52"#A18.93±4.82"#A組合物注射液6mg+30mg1018.50±6.24**#A17.35±4.74，組合物注射液10mg+30mg1017.96±5.21"#A16.32±4.15**#A組合物注射液10mg+10mg1017.42±5.45"#A15.98±4.01"#A組合物注射液20mg+15mg1015.38±4.01"##AA13.69±3.44，AA組合物注射液30mg+20mg1013.12±4.27，AA11.17±3.29"##AA組合物注射液40mg+10mg1011.02±4.17**##AA8.76±3.40"##AA組合物注射液45mg+9mg1010.87土4.35，厶厶9.74±3.08"##AA組合物注射液60mg+10mg1013.01±4.27"##AA10.18±3.46，A組合物注射液80mg+5mg1015.76±4.87，AA11.70±4.21，AA組合物注射液100mg+4mg1017.69±6.03"#A15.84±5.03"#A組合物注射液120mg+3mg1018.00±5.51"#A16.98±4.22"#A組合物注射液140mg+2mg1018.59±5.37，17.01±5.12"#A組合物注射液160mg+lmg1019.64±5.21"#A17.83±5.49"#A注與生理鹽水組相比，*p<0.05，p〈0.01;與瓜蔞注射液組相比，#p<0.05，糾p〈0.01;與紅花黃色素注射液組相比，Ap<0.05，AAp<0.01。結(jié)論各給藥組都具有顯著的抗心肌缺血作用，其中紅花黃色素與瓜蔞提取物配伍的組合物注射液的療效優(yōu)于單用紅花黃色素或瓜蔞提取物，提示兩藥配伍有協(xié)同增效作用。瓜蔞提取物2080份、紅花黃色素515份范圍內(nèi)效果更為顯著。實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明藥物組合物的抗血小板聚集作用受試動(dòng)物Wistar大鼠，體重201225g，60只，隨機(jī)分為6組。供試品紅花黃色素膠囊，自制；瓜蔞提取物膠囊，自制；組合物膠囊(瓜蔞提取物+紅花黃色素)，處方及制備方法見(jiàn)實(shí)施例8處方2。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為生理鹽水對(duì)照組、瓜蔞提取物膠囊組、紅花黃色素膠囊組、組合物膠囊高、中、低劑量組。各組動(dòng)物灌胃給藥，每日一次,連續(xù)給藥7天，末次給藥后1小時(shí)，動(dòng)物麻醉后自腹主動(dòng)脈取血，抗凝劑采用3.28%枸櫞酸鈉，與血液以l:9比例混合。將抗凝全血在20'C條件下1500r.min"離心5min獲得富血小板血漿(PPR)。留取定量PPR后，將剩余PPR再次以3000r.min"離心10min，獲得自身對(duì)照貧富血小板血漿(PPP)。以PPP調(diào)節(jié)PPR濃度，使各PPR濃度相同。將PPR在37。C的恒溫孔中預(yù)熱后，加入ADP(終濃度為3nmo1.I/1)引起血小板聚集，記錄最大聚集率。表3本發(fā)明藥物組合物抗血小板聚集作用(X±S)注與生理鹽水對(duì)照組相比Zp0.05，pO.01;與瓜蔞提取物膠囊組相比，<0.05，##p<0.01;與紅花黃色素膠囊組相比，Ap<0.05,AAp<0.01。實(shí)驗(yàn)結(jié)果由上表實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，1)與生理鹽水對(duì)照組比較，瓜蔞提取物膠囊組、紅花黃色素膠囊組血小板最大聚集率均顯著降低(p<0.05)，組合物膠囊各劑量組的血小板最大聚集率均極顯著降低(pO.Ol)。2)與瓜蔞提取物膠囊組比較，組合物膠囊低劑量組的血小板最大聚集率顯著降低(p<0.05)，組合物膠囊高、中劑量組的血小板最大聚集率均極顯著降低(p<0.01)。3)與紅花黃色素膠囊組比較，組合物膠囊中、低劑量組的血小板最大聚集率均顯著降低(p<0.05)，組合物膠囊高劑量組的血小板最大聚集率極顯著降低(p<0.01)。結(jié)論與生理鹽水對(duì)照組比較，各給藥組均能顯著降低大鼠的血小板最大聚集率，表明均有抗血栓作用，其中組合物膠囊療效優(yōu)于單用瓜蔞提取物膠囊和單用紅花黃色素膠囊，提示兩藥配伍有協(xié)同增效作用。組合物膠囊各劑量組實(shí)驗(yàn)數(shù)值顯示，隨著劑量的增加，抑制血小板聚集的作用更好，提示本發(fā)明藥物組合物膠囊抗血小板聚集作用呈量效遞增關(guān)系。實(shí)驗(yàn)例4本發(fā)明藥物組合物對(duì)兔腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用受試動(dòng)物家兔，78只，體重2.02.5kg，隨機(jī)分為13組，每組6只。供試品瓜蔞注射液，自制；紅花注射液，自制；組合物注射液(瓜蔞紅花=1000:500)，自制。實(shí)驗(yàn)方法將兔隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R組)、組合物注射液治療組、瓜蔞注射液治療組、紅花注射液治療組和假手術(shù)對(duì)照組(SOC組)。(1)缺血再灌注組(1/R組)18只，用25。/。的氨基甲酸乙脂溶液lg/kg體重耳緣靜脈麻醉，頸部正中切口分離氣管插入氣管劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)(只)最大聚集率生理鹽水對(duì)照組瓜蔞提取物膠囊組紅花黃色素膠囊組組合物膠囊低劑量組組合物膠囊中劑量組組合物膠囊高劑量組套管，暴露兩側(cè)頸總動(dòng)脈，以動(dòng)脈夾兩側(cè)夾閉20min，造成腦缺血，松夾分別再灌注m、6h和12h，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各6只。分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注生理鹽水5ml/kg體重。(2)組合物注射液治療組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注組合物注射液10mg/kg。(3)瓜蔞注射液治療組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注瓜簍注射液20mg/kg。(4)紅花注射液治療組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注紅花注射液20mg/kg。(5)假手術(shù)對(duì)照組(SOC組)6只，動(dòng)物僅行麻醉和動(dòng)脈分離術(shù)而不夾閉，lh后處死。上述各組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后即斷頭，在冰浴中剝出大腦，冰盤(pán)上解剖出雙側(cè)海馬區(qū)組織，用錫紙包裹放在4t:冰箱中儲(chǔ)存，備用。應(yīng)用pH酸度計(jì)檢測(cè)海馬組織PLA2的活性；采用干濕重法、TTC染色法測(cè)定皮層腦組織含水量、梗死面積；光鏡下觀察腦組織病理變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)對(duì)海馬組織PLA2活性的影響1/R組再灌注lh、6h和12h后，海馬組織PLA2活性較SOC顯著增高(p<0.05),且隨灌注時(shí)間延長(zhǎng)，PLA2活性呈遞減趨勢(shì)，但各時(shí)間點(diǎn)間比較差異不顯著(p>0.05);組合物注射液治療組(lh、6h、12h)PLA2活性明顯降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較具有極顯著性差異(pO.Ol)，且隨再灌時(shí)間延長(zhǎng)，PLA2活性逐漸向正常水平恢復(fù)；瓜蔞注射液治療組和紅花注射液治療組(lh、6h、12h)PLA2活性降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較具有明顯差異(p<0.05)。(2)對(duì)皮層組織含水量(％)和梗死面積(％)的影響1/R組各時(shí)間點(diǎn)腦含水量均增高，示造模成功；組合物注射液治療組各時(shí)間點(diǎn)腦水含量與I/R組相比明顯減輕(p<0.05)，腦梗死面積與1/R組相比極顯著縮小(pO.01);瓜萎注射液治療組和紅花注射液治療組各時(shí)間點(diǎn)腦水含量與I/R組相比均減輕(p<0.05)，腦梗死面積與I/R組相比均顯著縮小(p<0.05)o(3)腦組織病理改變SOC組無(wú)梗死灶，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)形態(tài)正常，無(wú)間質(zhì)水腫；1/R組有梗死灶，梗死灶周神經(jīng)元腫脹，細(xì)胞輪廓不清，間質(zhì)水腫明顯；組合物注射液治療組、瓜蔞注射液治療組、紅花注射液治療組梗死灶面積均縮小，梗死灶周神經(jīng)元腫脹不明顯，間質(zhì)水腫明顯減輕；組合物注射液治療組作用更顯著。結(jié)論上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，組合物注射液、瓜蔞注射液、紅花注射液均可通過(guò)降低PLA2活性，改善腦循環(huán)，減輕腦缺血再灌注損傷，而發(fā)揮腦保護(hù)作用。組合物注射液在各項(xiàng)指標(biāo)中均優(yōu)于瓜蔞注射液和紅花注射液?jiǎn)为?dú)用藥的效果，提示二者具有協(xié)同增效作用。實(shí)驗(yàn)例5本發(fā)明藥物組合物對(duì)大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)血栓形成的影響受試動(dòng)物Wistar大鼠，雌雄兼用，體重207227g，60只，隨機(jī)分為6組。供試品紅花黃色素片，自制；瓜蔞提取物片，自制；組合物片(瓜蔞提取物+紅花黃色素)，自制。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為生理鹽水對(duì)照組、紅花黃色素片組、瓜蔞提取物片組、組合物片高、中、低劑量組。灌胃給藥?？瞻讓?duì)照組給予等容積生理鹽水，給藥20分鐘后開(kāi)始試驗(yàn)。動(dòng)物用2.5%戊巴比妥鈉(25mg/kg)腹腔注射麻醉，將大鼠仰臥位固定，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，采用電流損傷頸動(dòng)脈內(nèi)膜法，用BT87-3實(shí)驗(yàn)性體內(nèi)血栓形成儀測(cè)定不同組別動(dòng)物頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間。將電極置放在頸動(dòng)脈上對(duì)其進(jìn)行電刺激(2mA，7min)，以感應(yīng)電極連續(xù)測(cè)量動(dòng)脈遠(yuǎn)端表面溫度，觀察動(dòng)脈溫度突降時(shí)間。記錄電剌激開(kāi)始至主動(dòng)脈溫度突降的時(shí)間，該時(shí)間定為頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間(超過(guò)3000秒者以3000秒計(jì))。實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表4實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知1)與生理鹽水對(duì)照組比較，瓜蔞提取物片組、紅花黃色素片組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間均顯著降低(p<0.05)，組合物片各劑量組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間均極顯著降低(pO.Ol)。2)與瓜蔞提取物片組比較，組合物片高劑量組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間極顯著降低(p<0.01)，組合物片中、低劑量組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間均顯著降低(p<0.05)。3)與紅花黃色素片組比較，組合物片高劑量組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間極顯著降低(p<0.01)，組合物片中、低劑量組大鼠頸動(dòng)脈血栓形成時(shí)間均顯著降低(p<0.05)。表4本發(fā)明藥物組合物對(duì)大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)血栓形成的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與生理鹽水對(duì)照組相比，'p<0.05，、<0.01;與瓜蔞注射液組相比，#p<0.05，##p<0.01;與紅花黃色素片組相比，<0.05，^p〈0.Ql。結(jié)論瓜蔞提取物片、紅花黃色素片和組合物片組均可使大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)血栓形成的時(shí)間延長(zhǎng)，且組合物的療效優(yōu)于單用瓜蔞提取物和單用紅花黃色素的療效，提示兩者有協(xié)同作用，且量效關(guān)系明顯。實(shí)驗(yàn)例6:本發(fā)明藥物組合物注射液穩(wěn)定性試驗(yàn)供試品組合物注射液，本實(shí)驗(yàn)采用實(shí)施例3處方1制得的組合物注射液。考察項(xiàng)目性狀、pH值、澄明度、有關(guān)物質(zhì)、標(biāo)示含量；并在加速實(shí)驗(yàn)6個(gè)月和長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)期末增加無(wú)菌和熱原檢査。1、影響因素實(shí)驗(yàn)強(qiáng)光照射實(shí)驗(yàn)取供試品，置照度為4500Lx的光照箱內(nèi)放置10天。高溫實(shí)驗(yàn)取供試品，分別置于4(TC、6(TC條件下放置10天。低溫實(shí)驗(yàn)取供試品，在4。C冰箱中放置10天。上述實(shí)驗(yàn)，分別于第5、10天取樣測(cè)定。比較性狀后測(cè)試各項(xiàng)指標(biāo)，并將結(jié)果與0天比較。結(jié)果光照4500Lx條件下放置10天，除有關(guān)物質(zhì)略有升高外，其它各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。高溫60'C條件下放置10天，外觀變?yōu)榈S色澄明液體，標(biāo)示含量下降，有關(guān)物質(zhì)略有升高。高溫40'C、低溫4'C條件下放置10天，各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯變化。2、加速實(shí)驗(yàn)方法置溫度40。C土2'C、相對(duì)濕度75%±5%的條件下放置6個(gè)月。在實(shí)驗(yàn)期間分別于第1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月末取樣，比較外觀后，測(cè)試各項(xiàng)指標(biāo)，將結(jié)果與O個(gè)月比較；并在6個(gè)月末增加無(wú)菌和熱原檢査。結(jié)果溫度40'C土2'C、相對(duì)濕度75%±5%的條件下放置6個(gè)月，除有關(guān)物質(zhì)略有增加，標(biāo)示含量略有下降外，其它各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，加速實(shí)驗(yàn)6個(gè)月末，熱原、無(wú)菌檢査均符合規(guī)定。3、長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)方法置溫度25T:土2t:、相對(duì)濕度60%±10%的條件下放置18個(gè)月。分別于第3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月、18個(gè)月，比較外觀后，測(cè)試各項(xiàng)指標(biāo)，將結(jié)果與O個(gè)月比較；并在18個(gè)月末增加無(wú)菌和熱原檢查。結(jié)果溫度25'C土2。C、相對(duì)濕度60%±10%的條件下放置18個(gè)月，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)18個(gè)月末，熱原、無(wú)菌檢査均符合規(guī)定。結(jié)論由上述考察結(jié)果得出結(jié)論，各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，本發(fā)明藥物組合物注射液比較穩(wěn)定。具體實(shí)施方式l以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的制備中所用的瓜蔞提取物、紅花黃色素的制備方法見(jiàn)分別實(shí)施例l、實(shí)施例2，輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實(shí)施例l瓜蔞提取物的制備和含量測(cè)定瓜蔞提取物的制備一取瓜蔞藥材，烘干，粉碎成粗粉，加入水回流提取二次，每次加入10倍量水，回流提取2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.10U5(6(TC)的濃縮液，加入乙醇至含醇量達(dá)80%，放置過(guò)夜，取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓至稠膏狀，真空干燥，即得瓜蔞提取物l。瓜蔞提取物的制備二取瓜蔞藥材，烘干，粉碎成粗粉，加入水回流提取二次，每次加入10倍量水，回流提取2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.101.15(60°C)的濃縮液，加入乙醇至含醇量達(dá)80%，放置過(guò)夜，取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓至稠膏狀，真空干燥后用適量水溶解后，用等量石油醚振搖提取二次，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取三次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘?jiān)由倭克谷芙?，上大孔?shù)脂柱，分別用水、15%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得瓜蔞提取物2。瓜蔞提取物含量測(cè)定甾體類化合物的含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線制備取人參皂甙Rgl對(duì)照品約2mg，經(jīng)6(TC真空千燥2小時(shí)，精密稱定，置10ml量瓶中，用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精確移取分別精密量取上述溶液5、10、30、50、70、90、U0pL于25ml量瓶中，加水稀釋定容至刻度，搖勻，制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。均精密移取0,2ml，置于10ml具塞試管中，水浴揮干甲醇，力B0.7ml8yo香草醛冰乙酸溶液，再加人5ml高氯酸，搖勻，于6(TC水浴15min，取出立刻用自來(lái)水沖至室溫，以加樣品平行樣作空白，于560nm測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定法取瓜蔞提取物適量，加甲醇適量超聲使溶解配制成25ml的溶液，準(zhǔn)確移取樣品溶液0.21111，置于10ml具塞試管中，水浴揮干甲醇，加0.5mL8。/。香草醛冰乙酸溶液，再加人5ml高氯酸，搖勻，于60'C水浴15min，取出立刻用自來(lái)水沖至室溫，于560nm測(cè)定吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中甾體類化合物的含量，計(jì)算，即得。通過(guò)以上兩工藝分別提取三批瓜蔞提取物，按照上述含量測(cè)定方法測(cè)得結(jié)果見(jiàn)表5。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>實(shí)施例2紅花黃色素的制備以及鑒別和含量測(cè)定紅花黃色素的制備一取紅花，于70'C溫度用pH為3的酸水溫浸提取三次，每次均為50倍量的酸水，每次1.5小時(shí)。合并提取液，濾過(guò)，收集濾液，放冷，調(diào)pH值至中性，減壓濃縮至相對(duì)密度1.051.10，加乙醇至醇濃度為70%，冷藏(l(TC以下)放置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液加于己處理好的大孔吸附樹(shù)脂HPD100柱色譜(藥材與樹(shù)脂比例為l:10(W/V)),先用去離子水以12.5ml/cm2/min的流速洗脫兩個(gè)柱床體積，然后用60°/。的乙醇以l2.5ml/cm2/min的流速洗脫五個(gè)柱床體積，收集60%醇洗脫部分，減壓濃縮至密度為1.10左右，然后在70'C左右減壓真空干燥或減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后冷凍干燥，即得紅花黃色素l。紅花黃色素的制備二取紅花250kg加水煎煮1.5小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.101.20，將濃縮液中加入乙醇至含醇量80%，并不斷攪拌，在4'C沉淀24小時(shí)，過(guò)濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.18加入8倍的水，在4'C沉淀24小時(shí)，離心除去沉淀，離心液減壓濃縮至提取液含生藥lg/ml，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱層析，先用去離子水洗脫至Molish反應(yīng)和茚三酮反應(yīng)呈陰性，繼續(xù)用6個(gè)柱體積的去離子水洗脫并收集洗脫液，濃縮至提取液含生藥lg/ml，上聚酰胺柱，先用去離子水洗脫至無(wú)色，再用7090%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，收集洗脫液，減壓回收乙醇，冷凍干燥或噴霧干燥，得到桔黃色無(wú)定形粉末，即紅花黃色素2。紅花黃色素的鑒別以紅花黃色素為對(duì)照品，鑒別紅花黃色素。分別精密稱定羥基紅花黃色素A和紅花黃色素l.Omg至lml的量瓶中，用水溶解并定容至刻度。分別吸取上述兩種溶液，點(diǎn)于薄層硅膠GF254板，以丙酮甲醇水(10:2.5-1.5)為展開(kāi)劑，在紫外燈下254nm處觀察可看到相應(yīng)熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定紅花黃色素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱定羥基紅花黃色素A10mg，置于100ml量瓶中，加水溶解定容至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液lml、2ml、3ml、4ml、5ml，分別置于25ml量瓶中，加水稀釋定容至刻度，搖勻。采用紫外分光光度法，在403nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。供試品溶液的制備取紅花提取物適量，加水適量超聲使溶解配制成25ml的溶液，濾過(guò)，取濾液采用紫外分光光度法，在403nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中紅花黃色素的含量，計(jì)算，即得。通過(guò)以上兩工藝分別提取三批紅花提取物，按照上述含量測(cè)定方法測(cè)得結(jié)果見(jiàn)表6。表6紅花提取物的得率和紅花黃色素的含量<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>處方h制法提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗；取配液量80%的注射用水，加入瓜蔞提取物和紅花黃色素，加熱攪拌溶解完全；補(bǔ)加注射用水至全量；加入配液量0.1%的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘；經(jīng)砂濾棒過(guò)濾脫炭。測(cè)定并調(diào)節(jié)溶液的pH值；經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾；檢査溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)；將溶液熔封于玻璃安瓿中；10(TC流通蒸汽滅菌30分鐘；趁熱將樣品放入0.01%的亞甲藍(lán)溶液中檢漏；燈檢，成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例4本發(fā)明藥物組合物粉針劑的制備處方l:瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)處方2:處方3:處方4:紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)甘露醇，g無(wú)菌注射用水加至5000ml共制備1000支瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)甘露醇，g無(wú)菌注射用水加至5000ml共制備1000支瓜蔞提取物2525g(相當(dāng)于原藥材15kg)紅花黃色素258g(相當(dāng)于原藥材3kg)甘露醇，g無(wú)菌注射用水加至5000ml共制備1000支瓜蔞提取物2700g(相當(dāng)于原藥材20kg)紅花黃色素112.2g(相當(dāng)于原藥材lkg)甘露醇，g無(wú)菌注射用水加至5000ml共制備1000支制法先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進(jìn)行無(wú)菌處理；按照處方量稱取原輔料;取配液量80%的無(wú)菌注射用水，將瓜蔞提取物和紅花黃色素加入加熱攪拌溶解完全。再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補(bǔ)加無(wú)菌注射用水至全量；加入配液量0.1%的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘；經(jīng)砂濾棒過(guò)濾脫炭。測(cè)定并調(diào)節(jié)溶液的pH值；經(jīng)0.2211111的微孔濾膜精濾；檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)；分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機(jī)中冷凍干燥。預(yù)凍-45"C5小時(shí)，低溫真空干燥-45'C0'C20小時(shí)，然后升溫至25。C真空干燥3小時(shí)；凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例5本發(fā)明藥《氯化鈉注射液的制備處方l:處方2:瓜蔞提取物2紅花黃色素1氯化鈉注射用水共制備瓜萎提取物2紅花黃色素2氯化鈉注射用水70g(相當(dāng)于原藥材2kg)146.4g(相當(dāng)于原藥材12kg)900g加至100000ml1000瓶280g(相當(dāng)于原藥材8kg)154.4g(相當(dāng)于原藥材8kg)900g加至100000ml共制備1000瓶制法提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗；取配液量20%的注射用水將瓜蔞提取物和紅花黃色素加入加熱攪拌溶解完全。將氯化鈉用配液量40%的注射用水溶解完全；合并兩溶液，補(bǔ)加注射用水至全量；加入配液量0.1%的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘；經(jīng)砂濾棒過(guò)濾脫炭。測(cè)定并調(diào)節(jié)溶液的pH值；經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾；檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)；灌裝于100ml的輸液瓶中；115'C熱壓滅菌30分鐘;燈檢，成品全檢，包裝入庫(kù)。共制備1000瓶處方3:提取物2315g(相當(dāng)于原藥材9kg)黃色素173.2g(相當(dāng)于原藥材6kg)鈉卿g用水加至100000ml蔞花化射瓜紅氯注實(shí)施例6本發(fā)明藥物組合物葡萄糖注射液的制備處方l:瓜蔞提取物2420g(相當(dāng)于原藥材12kg)紅花黃色素148.8g(相當(dāng)于原藥材4kg)葡萄糖5000g注射用水加至100000ml處方2:處方3:處方4:共制備1000瓶瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)葡萄糖5000g注射用水加至100000ml共制備1000瓶瓜蔞提取物2315g(相當(dāng)于原藥材9kg)紅花黃色素173.2g(相當(dāng)于原藥材6kg)葡萄糖5000g注射用水加至100000ml共制備廳瓶瓜蔞提取物2280g(相當(dāng)于原藥材8kg)紅花黃色素2154.4g(相當(dāng)于原藥材8kg)葡萄糖5000g注射用水加至100000ml共制備畫(huà)瓶制法提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗，取配液量20%的注射用水將瓜蔞提取物和紅花黃色素加入加熱攪拌溶解完全。將葡萄糖用配液量40%的注射用水溶解完全；合并兩溶液，補(bǔ)加注射用水至全量；加入配液量0.1%的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘；經(jīng)砂濾棒過(guò)濾脫炭。測(cè)定并調(diào)節(jié)溶液的pH值；經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾；檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)；灌裝于100ml的輸液瓶中；115'C熱壓滅菌30分鐘;燈檢，成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例7本發(fā)明藥物組合物片劑的制備處方1:處方2:處方3:處方4:瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備1000片瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備畫(huà)片瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備1000片瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備難片21處方5:處方6:處方7:處方8:制法:瓜蔞提取物2210g(相當(dāng)于原藥材6kg)紅花黃色素1109.8g(相當(dāng)于原藥材9kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備1000片瓜蔞提取物1847g(相當(dāng)于原藥材llkg)紅花黃色素154.9g(相當(dāng)于原藥材4.5kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備1000片瓜蔞提取物11309g(相當(dāng)于原藥材17kg)紅花黃色素238.6g(相當(dāng)于原藥材2kg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備1000片瓜蔞提取物2105g(相當(dāng)于原藥材3kg)紅花黃色素2212.3g(相當(dāng)于原藥材llkg)淀粉150g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂2g羧甲淀粉鈉4g共制備畫(huà)片將瓜蔞提取物和紅花黃色素粉碎過(guò)100目篩備用；按照處方量稱取各種輔料；將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用；將瓜蔞提取物、紅花黃色素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2%HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過(guò)20目篩制顆粒；顆粒在6(TC的條件下烘干；干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過(guò)18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的片重壓片；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例8本發(fā)明藥物組合物膠蔞劑的制備處方2:處方3:處方4:瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉30g微晶纖維素2g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備1000粒瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉30g微晶纖維素2g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備畫(huà)粒瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉30g微晶纖維素2、2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備畫(huà)粒瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)淀粉30g微晶纖維素2g2。/。HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備1000粒處方處方6:處方7:瓜蔞提取物2210g(相當(dāng)于原藥材6kg)紅花黃色素1109.8g(相當(dāng)于原藥材9kg)淀粉30g微晶纖維素2g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備1000粒瓜蔞提取物1847g(相當(dāng)于原藥材llkg)紅花黃色素154.9g(相當(dāng)于原藥材4.5kg)淀粉30g微晶纖維素2g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備1000粒瓜蔞提取物2245g(相當(dāng)于原藥材7kg)紅花黃色素2154.4g(相當(dāng)于原藥材8kg)淀粉30g微晶纖維素2g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂lg共制備1000粒制法將瓜蔞提取物和紅花黃色素粉碎過(guò)100目篩備用；按照處方量稱取輔料；將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用；將瓜蔞提取物、紅花黃色素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2。/。HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過(guò)20目篩制顆粒；顆粒在60'C的條件下烘干；干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過(guò)18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的裝量裝入膠囊；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例9本發(fā)明藥1!顆粒劑的制備處方h瓜蔞提取物2紅花黃色素1糖粉20/oHPMC50。/。乙醇溶液350g(相當(dāng)于原藥材10kg)61g(相當(dāng)于原藥材5kg)900g1000包處方2:處方3:處方4處方5:處方6:瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)糖粉900g2%HPMC50%乙醇溶液適量共制備1000包瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)糖粉900g2%HPMC50%乙醇溶液適量共制備1000包瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)糖粉900g2%HPMC50%乙醇溶液適量共制備1000包瓜蔞提取物11155g(相當(dāng)于原藥材15kg)紅花黃色素257.9g(相當(dāng)于原藥材3kg)糖粉900g20/oHPMC50。/。乙醇溶液適量共制備畫(huà)包瓜蔞提取物11463g(相當(dāng)于原藥材19kg)紅花黃色素118.3g(相當(dāng)于原藥材1.5kg)糖粉900g2%HPMC50%乙醇溶液適量共制備1000包制法將蔗糖粉碎過(guò)100目篩備用；將瓜蔞提取物和紅花黃色素粉碎過(guò)100目篩備用；按照處方量稱取輔料；將瓜蔞提取物、紅花黃色素與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2MHPMC50。/。乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過(guò)20目篩制顆粒；顆粒在60'C的條件下烘干；干顆粒過(guò)18目篩整粒；取樣，半成品化驗(yàn)顆粒中主藥的含量，確定裝量；包裝，成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例IO本發(fā)明藥物組合物口服液的制備處方l-瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)苯甲酸鈉15g甜菊武10g水加至10000ml共制備1000支瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素161g(相當(dāng)于原藥材5kg)苯甲酸鈉15g甜菊甙10g水加至10000ml共制備1000支瓜蔞提取物1770g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)苯甲酸鈉15g甜菊甙10g水加至10000ml共制備1000支瓜蔞提取物2350g(相當(dāng)于原藥材10kg)紅花黃色素296.5g(相當(dāng)于原藥材5kg)苯甲酸鈉15g甜菊甙10g水加至10000ml共制備1000支制法-將瓜蔞提取物和紅花黃色素用配液量60%的水溶解完全；將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量20%的水溶解完全；合并上述兩個(gè)溶液，補(bǔ)加水至全量；過(guò)0.8um的微孔濾膜過(guò)濾；半成品化驗(yàn)；灌裝。成品全檢，包裝入庫(kù)。權(quán)利要求1.一種用于心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為瓜蔞100～2000份、紅花100～1500份。2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，該藥物組合物原料藥的組成為瓜蔞5001500份、紅花3001000份。3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，該藥物組合物原料藥的組成為瓜蔞1000份、紅花500份。4.如權(quán)利要求13所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，瓜蔞和紅花可以用適宜的溶劑和方法通過(guò)單提或混提制備得到提取物，總提取物再與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑，所得總提取物的主要有效成分為甾體類化合物和紅花黃色素。5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成還可以是瓜蔞提取物2160份、紅花黃色素145份。6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，該藥物組合物原料藥的組成為瓜蔞提取物10120份、紅花黃色素330份。7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，該藥物組合物原料藥的組成為瓜蔞提取物2080份，紅花黃色素515份。8.如權(quán)利要求57所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的瓜蔞提取物中留體類化合物的含量不低于30%，紅花提取物中紅花黃色素的含量不低于50%。9.如權(quán)利要求13、57所述的任一藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以制成注射劑或口服制劑。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
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，公開(kāi)了一種用于心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，含有該藥物組合物的制劑。制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為瓜蔞100～2000份、紅花100～1500份，或者為瓜蔞提取物2～160份、紅花黃色素1～45份。該藥物組合物可以制成各種藥學(xué)上可接受的任一劑型，優(yōu)選注射劑或口服制劑。本發(fā)明藥物組合物具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈流量，抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液流變學(xué)和微循環(huán)，減少血栓形成，改善心臟供血功能，降低腦血管阻力，增加腦血管流量，改善腦微循環(huán)等作用。文檔編號(hào)A61K36/185GK101161253SQ200610069278公開(kāi)日2008年4月16日申請(qǐng)日期2006年10月12日優(yōu)先權(quán)日2006年10月12日發(fā)明者黃振華申請(qǐng)人:黃振華