專利名稱：紅細(xì)胞生成素受體激動劑的穩(wěn)定的混懸液制劑的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明通常涉及制劑的用于連續(xù)遞送的藥物制劑。紅細(xì)胞生成素(EPO)為多效的()糖蛋白激素，其主要由腎產(chǎn)生。EPO刺激骨髓產(chǎn)生紅細(xì)胞，并在骨髓外發(fā)揮組織保護(hù)效應(yīng)，例如神經(jīng)保護(hù)作用。EPO通過結(jié)合細(xì)胞表面受體而發(fā)揮生物效應(yīng)。EPO受體激動劑(ERAs)為一類可活化EPO受體的重組體分子。在ERA類中的重組體分子可能或不可能包含天然人EPO(hEPO)的同源性序列。在ERA類中包含天然hEPO同源性序列的產(chǎn)品的實施例顯示在下面的表1中。
表1 ERA產(chǎn)品已經(jīng)表明可用于治療慢性腎衰竭引起的貧血、與癌癥化療和外科手術(shù)有關(guān)的貧血，和AZT治療ADDS繼發(fā)的貧血。目前市售的ERA產(chǎn)品為通過皮下或肌肉注射給藥患者，每周給藥三次(EPREX、ERYPO和PROCRIT)或每周一次(ARANESP)。目前市售的某些ERA產(chǎn)品為液體，需要在2至8℃貯存，在室溫和高溫下不穩(wěn)定。ERAs對聚集體敏感，其可導(dǎo)致藥物的效能降低，并可引起不想要的副作用。與目前給藥ERAs有關(guān)的不良副作用包括，但不限于血栓形成事件、感染、高血壓、肌痛和頭痛。如果ERAs可以使用例如可植入遞送裝置，如滲透性的、機(jī)械性的或電動機(jī)械的泵植入管以低劑量連續(xù)遞送，則與給藥ERAs有關(guān)的治療的效果可能會提高?？芍踩脒f送裝置的使用通常確保了患者的順應(yīng)性，因為可植入裝置不易受患者干預(yù)，其可設(shè)計在幾周內(nèi)、幾月內(nèi)或甚至幾年內(nèi)提供治療量的藥物而不需要患者加藥。當(dāng)與在相對短時期需要多次給藥的注射相比，采用一次植入裝置，而不是每隔幾天的注射，存在如下優(yōu)點(diǎn)減少部位發(fā)炎、對患者和醫(yī)師的職業(yè)危害較少、降低廢物處理的危險、通過減少用于重復(fù)注射的設(shè)備費(fèi)用而提高了成本效果和提高了功效。為了在長期內(nèi)以控制速率從可植入遞送裝置遞送ERAs，ERAs必須被包含于在高溫例如37℃或更高溫度下，在所述裝置的使用年限內(nèi)，保持它們穩(wěn)定性的制劑中，并且制劑必須是可流動的形式。
發(fā)明概述在一個方面，本發(fā)明涉及一種混懸液制劑，其包含顯示出粘性流體特性的非水單相載體，和其包含分散在載體中的紅細(xì)胞生成素受體激動劑的微粒制劑。在另一個方面，本發(fā)明涉及刺激患者中紅細(xì)胞生成的方法，其包含給藥所述患者如上所述有效量的混懸液制劑。在另一個方面，本發(fā)明涉及一種可植入遞送裝置，其包含含有足量的如上所述混懸液制劑的儲庫，所述足量未能在使用環(huán)境下，以治療有效速度提供連續(xù)遞送紅細(xì)胞生成素受體激動劑的量。根據(jù)下述說明書，本發(fā)明的其它特點(diǎn)和益處將變得顯而易見。
附圖簡述

圖1為包含根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的ERA制劑的滲透泵圖。圖2A顯示了包含根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的ERA制劑的滲透泵的釋放速率，其中滲透泵用于泵入釋放速率介質(zhì)。圖2B顯示了包含根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的ERA制劑的滲透泵的釋放速率，其中滲透泵是用于泵入空氣。圖3顯示根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的釋放的制劑的生物活性。
發(fā)明詳述本發(fā)明現(xiàn)在將參考幾個優(yōu)選的實施方案進(jìn)行詳細(xì)闡述。在下述說明書中，列出許多特定的詳述是為了使對本發(fā)明有徹底的理解。然而，對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，在沒有某些或所有這些特定的詳述下，也可以實施本發(fā)明。在其它的情況下，沒有詳細(xì)描述熟知的特征和/或制備方法是為了避免使本發(fā)明不明確的多余內(nèi)容。參照附圖和下述談?wù)?，可更透徹地理解本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的實施方案提供了紅細(xì)胞生成素受體激動劑(ERAs)的穩(wěn)定的制劑，其為使用可植入遞送裝置在緩釋期內(nèi)以控制速率遞送的。本發(fā)明在某種程度上是基于發(fā)現(xiàn)了將ERA微粒制劑混懸于非水單相載體而獲得了ERA的混懸液制劑，該制劑在高溫，例如37℃或更高溫度下長期穩(wěn)定，例如3個月至12個月。在懸浮于載體之前，ERA微粒制劑通常具有低水分含量，優(yōu)選小于5％。ERA微粒制劑可以使用本領(lǐng)域用于制備蛋白質(zhì)微粒的已知方法來制備，例如噴霧干燥和冷凍干燥。所述ERA微粒制劑可以全部是純ERA或可以是純ERA與一種或多種助劑或賦形劑制劑的。術(shù)語″ERA″或″紅細(xì)胞生成素受體激動劑″指一類可以活化EPO受體的分子。這些分子可包含或不包含與天然hEPO同源性的序列。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的ERA可選自具有重組體hEPO生物活性的多肽和蛋白質(zhì)、EPO類似物、EPO同工型、EPO模擬物、EPO片段、雜種EPO蛋白質(zhì)、融合蛋白質(zhì)低聚體和上述多聚體、上述的同系物、上述的糖基化模式變異體(glycosylation pattern variants)、上述的突變蛋白和包含上述列舉物小修飾體的EPO分子。根據(jù)本發(fā)明的ERAs將不會受到合成或制備方法的限制，包括由重組體(無論產(chǎn)生自cDNA還是基因組DNA)法、化學(xué)合成法、轉(zhuǎn)基因法和基因活化法合成或制備的那些。特別優(yōu)選的ERAs為能刺激哺乳動物紅細(xì)胞生成的那些。能刺激哺乳動物紅細(xì)胞生成的ERAs的實例包括，但不限于，epoetin α(商品名EPREX、ERYPO、PROCRIT)、epoetinβ(商品名NEORECORMON)和darbepoetinα(商品名NESPTM、ARANESP)。darbepoetinα的一種形式描述于PCT公布WO95/05465(Amgen，Inc.)中，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考。在WO95/05465公布中，darbepoetinα包括hEPO的類似物，其含有包括至少一個另外的位點(diǎn)或至少一個用于糖基化位點(diǎn)重排的氨基酸序列。糖基化位點(diǎn)位于N-連接的或O-連接的碳水化合物鏈。表明能刺激哺乳動物紅細(xì)胞生成的其它ERAs包括hEPO類似物，例如在PCT公布WO 99/66054(Genzyme Transgenics Corp)中描述的人血清白蛋白融合蛋白質(zhì)，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考，和EPO突變體，例如在PCT公布WO 99/38890(Beth IsraelDeaconess Medical Center)中描述的，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考。在WO 99/38890公布中，EPO突變體包括分離的核酸編碼的EPO，其中在非編碼區(qū)域，核酸具有一個或多個突變，且EPO具有改變的生物活性。在一個實施方案中，突變位于非編碼區(qū)域的51位。表明能刺激哺乳動物紅細(xì)胞生成的其它ERAs包括EPOω，其可產(chǎn)生自描述于U.S.專利No.5,688,679(Powell)中的hEPO基因的Apa I限制性片斷，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考，和改變的糖基化hEPO，例如描述于PCT公布WO 99/11781(Hoechst MarionRoussel Deutschland GMBH)中，將其內(nèi)容引入本文作為參考。在WO99/11781公布中，改變的糖基化hEPO包括具有EPO的部分或所有主要結(jié)構(gòu)構(gòu)型的多肽，其為外原性DNA序列的真核表達(dá)產(chǎn)物。證實能刺激哺乳動物紅細(xì)胞生成的另一種ERA包括聚乙二醇(PEG)共軛的紅細(xì)胞生成素類似物，其公開于例如PCT公布WO98/05363(Ortho Pharmaceutical Corporation)中，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考，和WO 01/76640(Amgen，Inc.)，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考，和U.S.專利No.5,643,575(Martinez等.)，將其內(nèi)容引入本文作為參考。其它的實例包括用于表達(dá)內(nèi)源性人EPO的修飾的細(xì)胞系，如描述于PCT公布WO 99/05268(Boehringer Mannheim GMBH)中，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考，和WO 94/12650(transkaryoticTherapies，Inc)，將其教導(dǎo)性內(nèi)容引入本文作為參考。ERAs的組織和細(xì)胞保護(hù)形式也包括在內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明的ERAs也可包括長效形式的EPO。如本文使用的″長效EPO″包括具有循環(huán)半衰期增加的EPO，典型地通過修飾獲得，例如降低免疫原性和清除率，和包囊在聚合物微球體中的EPO的緩釋組合物和制劑。長效EPO的一個實例公開于PCT公布WO 02/49673(F.Hoffman-La Roche AG)中，將其內(nèi)容引入本文作為參考。WO02/49673公布描述了包含具有N-末端α-氨基的紅細(xì)胞生成素糖蛋白的共軛物，選自hEPO或其類似物，該類似物具有通過通過添加1-6糖基化位點(diǎn)或糖基化位點(diǎn)重排來修飾的hEPO序列，其中糖蛋白共價連接至PEG基。長效EPO的其它實例包括，但不限于公開于PCT公布WO02/32957(Chugal Seiyaku Kabushiki Kaisha，Japan)中的PEG-修飾的EPO，描述于PCT公開WO 94/28024(Enzon，Inc.)中的具有紅細(xì)胞生成活性和具有至少一個與非抗原性聚合物共價連接的氧化的碳水化物部分的糖蛋白共軛物，及使用琥珀酰亞胺基羧甲基化PEG(SCM-PEG)、琥珀酰亞胺基丙酸酯PEG(SPA-PEG)和SBA-PEG制備的其它PEG-EPO。在本發(fā)明的一個實施方案中，在懸浮于非水單相載體之前，在37℃或更高溫度下，ERA可穩(wěn)定地防止聚集。在一個實施方案中，含有穩(wěn)定劑和緩沖劑的ERA穩(wěn)定地防止聚集。在一個實施方案中，穩(wěn)定劑包括糖。糖在ERA微粒制劑中的含量可以為0.1至99.9％重量?？砂ㄔ谖⒘Ｖ苿┲械奶堑膶嵗?，但不限于，蔗糖、海藻糖、葡萄糖、乳糖、麥芽糖和果糖。在一個實施方案中，在微粒制劑中使用的緩沖劑的含量為0.1至99.8％重量。優(yōu)選地，緩沖劑具有的pH值為5.0至8.0，更優(yōu)選地為5.5至7.5。在一個實施方案中，緩沖劑在溶液中的濃度為5mM至50mM。緩沖劑的實例包括，但不限于檸檬酸鹽、組氨酸、磷酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、三羥甲基氨基甲烷、醋酸鹽、碳酸鹽和甘氨酸-甘氨酸(gly-gly)。在這些實例中，檸檬酸鹽and組氨酸緩沖劑是最優(yōu)選的。穩(wěn)定劑與ERA的比率可以改變。使用檸檬酸鹽緩沖劑時，穩(wěn)定劑和ERA的比率優(yōu)選為大于2.0。在本發(fā)明的其它實施方案中，在ERA微粒制劑中使用的穩(wěn)定劑可進(jìn)一步包括一種或多種選自下述的組分氨基酸、多元醇和聚合物。微粒制劑可包括0至99.9％重量的氨基酸，0至99.9％重量的多元醇，和0至99.9％重量的聚合物。可加入到微粒制劑中的氨基酸的實例包括，但不限于組氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-亮氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、L-蘇氨酸、2-苯胺和精氨酸。可加入到微粒制劑中的多元醇的實例包括，但不限于脫水山梨醇和甘露醇?？杉尤氲轿⒘Ｖ苿┲械木酆衔锏膶嵗?，但不限于聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、葡聚糖和丙二醇。微粒制劑可包括其它的賦形劑，選自例如表面活性劑、填充劑和鹽。微粒制劑可包括0至10wt％，優(yōu)選0至5wt％的表面活性劑，0至99.9wt％，優(yōu)選0至70wt％的填充劑和0至99.9wt％，優(yōu)選0至70wt％的鹽。包括在微粒制劑中的表面活性劑可以是離子型的或非離子型的。表面活性劑的實例包括，但不限于聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單月桂酸酯(商品名TWEEN20)、聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯(商品名TWEEN80)、聚氧乙烯-聚氧丙二醇(商品名PLURONICF68)和十二烷基硫酸鈉(SDS)。填充劑的實例包括，但不限于，甘露醇和甘氨酸。鹽的實例包括，但不限于氯化鈉、氯化鈣和氯化鎂。下述表2列舉了穩(wěn)定地防止聚集的凍干Epoetinα(EPO)組合物，以及當(dāng)將該組合物儲存在37℃下三個月時，它們的總可溶性聚集體，其通過尺寸排阻色譜法(SEC)測定。
表2 適用于本發(fā)明的非水單相載體可以是任意混合溶劑、聚合物(液體和非液體)、非聚合物(液體和非液體)和表面活性劑。選擇載體的組分以使載體能與水相混溶，盡管載體的每種組分易于與水混溶并不是必要的。選擇并混合物載體的組分以使得到的載體為均勻系統(tǒng)，即在物理上和化學(xué)上都是均勻的。所述載體為可生物降解的，其中其在對生物環(huán)境的應(yīng)答期內(nèi)崩解或分解。載體在生物環(huán)境中的崩解可通過一種或多種物理或化學(xué)方法來進(jìn)行，例如酶促作用、氧化作用、還原作用、水解作用(例如蛋白水解作用)、移位(displacement)或增溶作用的溶解、乳化作用或膠束形成。選擇本發(fā)明載體的組分，以使載體具有的粘性為大約1,000至10,000,000泊(poise)，優(yōu)選10,000至250,000泊。為了在高溫，例如37℃或更高下保持一段時間的穩(wěn)定性，選擇載體的組分以使載體不會與ERA反應(yīng)。當(dāng)載體的組分包括聚合物和溶劑時，載體優(yōu)選地包含幾乎不會從溶劑中相分離的聚合物，當(dāng)在給藥期間載體與水混合時，例如可減少遞送裝置部分或完全堵塞事件。選擇載體的組分，以使載體對選擇的ERA幾乎沒有可溶性，從而保持選擇的ERA為無水微粒，從而獲得了選擇的ERA的穩(wěn)定性。在一個實施方案中，載體包括至少一種聚合物。所述聚合物優(yōu)選為生物相容的，且可以是可生物降解的或非生物降解的。在形成載體中有用的聚合物的實例包括，但不限于吡咯烷酮例如聚乙烯吡咯烷酮(具有的分子量為2,000至1,000,000)、聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯乙交酯)、聚乳酸乙醇酸(PLGA)、聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(在37℃顯示出高粘度)，例如PLURONIC105，和不飽和醇的酯或醚例如醋酸乙烯酯。載體也可包括能與聚合物混合獲得載體的任意可藥用溶劑，所述載體為非水的、單相的、生物相容的，且能與水混溶。在形成載體中有用的溶劑的實例包括，但不限于苯甲酸芐酯(BB)、苯甲醇(BA)、月桂基乳酸酯(LL)、月桂醇(LA)、聚乙二醇、四氫呋喃聚乙二醇醚(glycofural)(GF)、維生素E。載體可包括多于一種不同的聚合物或不同等級的單一聚合物。載體可同時包括多于一種與聚合物混合的溶劑。特別地，需要兩種或多種溶劑來提供都能在水混中溶，且能促進(jìn)制備穩(wěn)定的ERA制劑的載體。包括在載體中的聚合物和溶劑的含量可改變，以提供具有預(yù)期性能特性的載體。通常，載體包括大約40至80wt％的聚合物和大約20至60wt％的溶劑。除了聚合物和溶劑，載體也可包括其它的賦形劑，例如一種或多種表面活性劑或防腐劑?？稍谳d體中使用的表面活性劑包括，但不限于聚山梨酯例如以商品名TWEEN出售的，乙烯氧化物-丙烯氧化物共聚物例如以商品名PLURONIC出售的，脫水山梨醇的脂肪酸酯例如以商品名SPAN出售的，甘油基辛酸酯，PEG-8辛酸癸酸甘油酯，聚甘油基-6油酸酯，二辛基鈉，磺基丁二酸酯和維生素E TPGS。表面活性劑可包括在載體中，以便當(dāng)將制劑遞送到使用環(huán)境中時能促進(jìn)ERA從載體釋放，或當(dāng)將ERA懸浮在載體中時能保持ERA的穩(wěn)定性。當(dāng)包括表面活性劑時，其典型地占載體的量為小于20wt％，優(yōu)選地小于10wt％，更優(yōu)選地小于5wt％?？稍谳d體中使用的防腐劑包括，例如抗氧劑和抗微生物劑?？捎米骺寡鮿┑目赡艿膶嵗ǎ幌抻谏?維生素E)、抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁羥茴醚、丁基化的羥基甲苯和沒食子酸丙酯。當(dāng)將一種或多種防腐劑加入載體中時，其用量可根據(jù)應(yīng)用、使用的防腐劑和想要的結(jié)果而改變。通常，防腐劑的量為僅足夠獲得想要的防腐效果的量。然而，所述載體不限于包括聚合物和溶劑的那些。作為進(jìn)一步的實例，載體可以包括非聚合物。非聚合物質(zhì)的實例包括疏水性糖類物質(zhì)、有機(jī)凝膠或起單相載體作用的類脂物質(zhì)。示范性糖類物質(zhì)包括，但不限于在室溫或生理學(xué)溫度下以流體存在的蔗糖酯，例如蔗糖乙酸異丁酸酯(SAIB)。SAIB為一種液體非聚合物。某些非聚合物質(zhì)如SAEB可被用作″neat″，即不加入其他溶劑。包括非聚合材料的載體可同時包括一種或多種溶劑。包括非聚合材料的載體可同時包括一種或多種表面活性劑，其中的某些實例已在上述給出。包括非聚合材料的載體可同時包括防腐劑，其中的某些實例已在上述給出。非水單相載體可以載有各種量的ERA微粒制劑以提供混懸液制劑，其能在選擇的時期內(nèi)以想要的比率給藥ERA。混懸液制劑可包括0.1至40wt％，優(yōu)選0.1至20wt％的ERA?；鞈乙褐苿┦蛊淠芤韵胍牧魉購目芍踩脒f送裝置中分散?？芍苿┗鞈乙褐苿┮栽趲讉€月至一年內(nèi)遞送1ng/天至600μg/天的ERA。當(dāng)ERA從設(shè)計提供低流率的滲透泵植入物中遞送時，優(yōu)選地將混懸液制劑制成用于遞送0.5至5μg/天的形式，流量為大約1.5μl/天，特別優(yōu)選1.0μl/天。應(yīng)當(dāng)注意，所述混懸液制劑不限于可植入遞送裝置例如泵植入物，但也可能被用作貯存注射液(depot injection)。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，本發(fā)明也包括再由ERA混懸液制劑的可植入遞送裝置。可植入遞送裝置可包含具有下述特性的任意輸送系統(tǒng)裝置在植入患者后，其能在緩釋期內(nèi)，以控釋速率遞送可流動制劑。根據(jù)本發(fā)明的可植入遞送裝置可包括，例如滲透泵植入物，例如以商品名DUROS出售的，調(diào)節(jié)劑類型的泵植入物，例如售自如Codman of Raynham，Massachusetts，Medtronic of MinneapolisMinnesota和Tricumed Medinzintechnik GmbH of Germany，或其它非滲透泵植入物。研究旨在評價EPO(epoetinα)在非水單相載體中的微粒制劑的穩(wěn)定性。微粒制劑的穩(wěn)定性使用尺寸排阻色譜法(SEC)來評價。根據(jù)EPO負(fù)載量和總可溶性聚集體來評價穩(wěn)定性。EPO負(fù)載量為總的可溶性EPO在包括單體、二聚物、及其它較高分子量產(chǎn)品的微粒制劑中的百分比。EPO負(fù)載量提供有關(guān)在存貯或遞送期間是否形成大量不溶性EPO的某些信息?？偪扇苄跃奂w為比單體大且可溶于水的EPO有關(guān)化合物的百分?jǐn)?shù)。下述實施例是用于闡述的目的，而不意味著以與本文描述的不同方式限制本發(fā)明。
實施例1如下制備EPO微粒制劑獲得呈冷凍溶液的EPO的本體溶液，具有的濃度為約3.1mg/ml。用10mM組氨酸緩沖溶液滲析EPO溶液。按想要的比率的EPO與蔗糖與表面活性劑，將蔗糖(穩(wěn)定劑)和TWEEN20(表面活性劑)加入到滲析的EPO溶液。將緩沖溶液噴霧干燥成含有EPO∶蔗糖∶Tween20∶10mM組氨酸的比率等于1∶4.53∶0.03∶0.50，pH為6.9，且EPO負(fù)載量為16.5％。
實施例2評價在高溫下貯存的EPO微粒制劑的穩(wěn)定性。將如在實施例1中制備的EPO三個微粒制劑樣品貯存在40℃下3個月。在初始時、1個月、2個月和3個月使用SEC分析樣品。在初始時間點(diǎn)，EPO微粒制劑具有的平均粒度為約4.5μm，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為54.9±5.6℃，含水量為1.16±0.01％。下述表3顯示穩(wěn)定性結(jié)果。當(dāng)將其貯存在40℃下3個月時，結(jié)果顯示出EPO微粒穩(wěn)定地防止聚集。
表3
實施例3如下制備混懸液制劑如在實施例1中的描述，將EPO微粒制劑懸浮于Ceraphyl31/PVP載體中，靶微粒負(fù)荷為大約10％(w/w)。
實施例4在40℃下，將如在實施例3中制備的三個混懸液樣品貯存在玻璃容器中3個月。在初始時、1個月、2個月和3個月使用SEC分析樣品。下述表4顯示了穩(wěn)定性結(jié)果。在3個月觀察到混懸液的總可溶性聚集體為大約1.57％，與之比較，在3個月，EPO粉末的為0.1％。結(jié)果表明，當(dāng)在40℃下貯存3個月時，懸浮在Ceraphyl31/PVP載體中的EPO為穩(wěn)定的。
表4 研究旨在評價使用可植入遞送裝置例如滲透泵植入物時，懸浮于非水單相載體中的EPO微粒制劑的釋放速率。圖1顯示了在研究中使用的滲透泵植入物100的示意圖。滲透泵植入物100包括圓柱狀體102，由鈦制成，具有開口端104、106。擴(kuò)散緩和器(diffusionmoderator)108封固在圓柱狀體102的端口106。擴(kuò)散緩和器108具有導(dǎo)管110，其允許液體從圓柱狀體102的內(nèi)部輸送到外部。由擴(kuò)散緩和器108提供的導(dǎo)出管110為直形的。然而，也可預(yù)期除了直形外的其它結(jié)構(gòu)的擴(kuò)散緩和器，其也包括在本發(fā)明內(nèi)。在該研究中，使用直形遞送導(dǎo)管的擴(kuò)散緩和器，該導(dǎo)管的直徑為0.25mm至0.5mm，長度為1.5mm。將半透膜114插入到圓柱狀體102的端口104，形成圓柱狀體102的外部和內(nèi)部之間的流體可滲透屏障。將柱塞116和滲透劑122置于圓柱狀體102中。藥物儲庫120定義為圓柱狀體102的內(nèi)部。下述實施例是用于闡述的目的，而不意味著以與發(fā)本文描述的不同方式限制本發(fā)明。
實施例5將在實施例3中制備的大約150μl(大約150mg)的混懸液裝入滲透泵植入物100的藥物儲庫120中，如在124(圖1)所示。靶劑量為3000IU/天(24μg/天)。
實施例6如在實施例5中所述制備幾個滲透泵。將每個滲透泵的薄膜端置入裝有3mL磷酸鹽緩沖液(PBS)的堵塞式(stoppered)Vacutainer中，將滲透泵的擴(kuò)散緩和器端置入干燥的Vacutainer中。將系統(tǒng)置入封端的試管中，擴(kuò)散緩和器朝下，并部分浸入37℃水浴中。7天后，從水浴中取出系統(tǒng)的部分，將系統(tǒng)的擴(kuò)散緩和器端的干燥的Vacutainers用裝有2.5mL釋放速率介質(zhì)(20mM檸檬酸鹽和50mg/mL蔗糖，pH為6.9)的vacutainers替換，將系統(tǒng)放回水浴。因此，給系統(tǒng)的部分泵入釋放速率介質(zhì)(泵入釋放速率介質(zhì))，同時其它部分泵入空容器(泵入空氣)。在特定的時間點(diǎn)，為了給系統(tǒng)泵入釋放速率介質(zhì)，將擴(kuò)散緩和器端的vacutainers用新的裝有2.5ml入上述的釋放速率介質(zhì)的vacutainers替換。使用高效液相色譜(HPLC)分析從除去擴(kuò)散緩和器端的vacutainers中收集的樣品。在特定的時間點(diǎn)，為了給系統(tǒng)泵入空氣，將系統(tǒng)從水浴中移出，將擴(kuò)散緩和器端的vacutainers替換為新的干的vacutainers，再將系統(tǒng)放回水浴。稱重從除去擴(kuò)散緩和器端的vacutainers中收集的樣品，然后使用HPLC分析。為了積累足夠的物質(zhì)用于分析，收集在3至4天內(nèi)釋放的制劑。將在37℃下于3個月內(nèi)每天的釋放速率繪制在圖2A和2B中。圖2A顯示給泵入釋放速率介質(zhì)的系統(tǒng)的釋放速率。圖2B顯示了泵入空氣的系統(tǒng)的釋放速率。結(jié)果表明，在37℃下，于3個月內(nèi)，系統(tǒng)以常數(shù)遞送EPO，大約為靶向速率(23.5μg)(零級速率遞送)。在2.5個月的時間點(diǎn)，使用細(xì)胞增殖法評價釋放的樣品的生物活性。結(jié)果顯示在圖3中。結(jié)果顯示出在37℃下，于2.5個月內(nèi)，與本體溶液相比，釋放的EPO的生物活性沒有明顯降低。在37℃，于2.5個月內(nèi)，釋放的EPO包含大于99％的單體。雖然本發(fā)明參照有限的實施方案進(jìn)行了描述，從本發(fā)明公開的內(nèi)容受益的本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以設(shè)計其它的實施方案，而不會背離如本文公開的本發(fā)明的范圍。下面概述了本發(fā)明的示范性實施方案。
權(quán)利要求
1.用于治療用途的混懸液制劑，包含顯示出粘性流體特性的非水單相載體；和，包含分散在載體中的紅細(xì)胞生成素受體激動劑的微粒制劑。
2.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其在40℃下穩(wěn)定至少3個月。
3.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其在40℃下穩(wěn)定達(dá)12個月。
4.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其中在分散于載體中之前，微粒的含水量小于5wt％。
5.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其中微粒制劑進(jìn)一步包含緩沖劑和選自下述的穩(wěn)定劑糖、氨基酸、多元醇、聚合物及其組合。
6.權(quán)利要求5的混懸液制劑，其中所述緩沖劑選自組氨酸和檸檬酸鹽緩沖劑。
7.權(quán)利要求5的混懸液制劑，其中糖為蔗糖。
8.權(quán)利要求5的混懸液制劑，其中緩沖劑為檸檬酸鹽緩沖劑，且穩(wěn)定劑與紅細(xì)胞生成素受體激動劑的比率為大于2.0。
9.權(quán)利要求5的混懸液制劑，其中微粒制劑進(jìn)一步包含表面活性劑、填充劑和鹽中的至少一種。
10.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其中載體包含選自溶劑、聚合物、非聚合物和表面活性劑中的一種或多種組分。
11.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其中在混懸液制劑中，紅細(xì)胞生成素受體激動劑的含量為大約0.1至40wt％。
12.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其中紅細(xì)胞生成素受體激動劑選自epoetinα、epoetinβ、和darbepoetinα。
13.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其使用可植入遞送裝置遞送。
14.權(quán)利要求1的混懸液制劑，其在使用環(huán)境中，能以靶劑量連續(xù)釋放紅細(xì)胞生成素受體激動劑達(dá)12個月。
15.刺激患者中紅細(xì)胞生成的方法，包括給藥患者有效量的混懸液制劑，該制劑包含顯示出粘性流體特性的非水單相載體；和包含分散在載體中的紅細(xì)胞生成素受體激動劑的微粒制劑。
16.權(quán)利要求15的方法，其中給藥患者經(jīng)由可植入遞送裝置遞送。
17.權(quán)利要求15的方法，其中給藥患者為長期連續(xù)給藥。
18.可植入遞送裝置，包含儲庫，其包含在使用環(huán)境中能提供以有效速率連續(xù)遞送紅細(xì)胞生成素受體激動劑的足量混懸液制劑，所述混懸液制劑包含顯示出粘性流體特性的非水單相載體，和包含分散在載體中的紅細(xì)胞生成素受體激動劑的微粒制劑。
19.權(quán)利要求18的可植入遞送裝置，其提供連續(xù)遞送紅細(xì)胞生成素受體激動劑達(dá)3個月。
20.權(quán)利要求18的可植入遞送裝置，其提供連續(xù)遞送紅細(xì)胞生成素受體激動劑達(dá)12個月。
全文摘要
用于治療用途的混懸液制劑，包含顯示出粘性流體特性的非水單相載體；和，包含分散在載體中的紅細(xì)胞生成素受體激動劑的微粒制劑。
文檔編號A61K38/18GK1993108SQ200580026338
公開日2007年7月4日 申請日期2005年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月5日
發(fā)明者劉葵, M·A·德斯賈丁, B·希爾, Z·李 申請人:阿爾扎公司