一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法，具體涉及一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]作為一種常用的磺胺類抗菌劑，磺胺二甲嘧啶被廣泛用于預(yù)防和治療奶牛的細(xì)菌感染性疾病。因其在動(dòng)物體內(nèi)的作用時(shí)間和代謝時(shí)間較長(zhǎng)，易殘留在動(dòng)物的組織中，進(jìn)而進(jìn)入動(dòng)物分泌物中(如乳汁)。長(zhǎng)期飲用磺胺類藥物殘留過(guò)高的乳制品，將對(duì)人體、特別是嬰幼兒的健康造成嚴(yán)重后果。目前，牛奶中磺胺類藥物殘留的檢測(cè)方法有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、氣-質(zhì)聯(lián)用法(GC/MS)、液-質(zhì)聯(lián)用法(LC/MS)等。現(xiàn)有的方法雖具有靈敏度高、檢出限低等優(yōu)點(diǎn)，但因儀器昂貴、耗時(shí)長(zhǎng)、檢測(cè)成本高等而難以滿足食品安全問(wèn)題頻發(fā)的現(xiàn)狀。因此，開(kāi)發(fā)一種低成本、滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的新方法極為必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法，通過(guò)分子印跡技術(shù)制備對(duì)磺胺二甲基嘧啶具有特異性識(shí)別作用的水凝膠，待測(cè)樣品經(jīng)水凝膠吸附富集后，利用便攜式拉曼光譜儀進(jìn)行光譜采集，通過(guò)與磺胺二甲基嘧啶的標(biāo)準(zhǔn)拉曼光譜相對(duì)比，判斷樣品中是否含有此藥物。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:
[0005]一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法，包括如下步驟:
[0006]S1、制備磺胺二甲嘧啶分子印跡水凝膠:分別取0.017g磺胺二甲嘧啶(模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能單體)、3.0g丙烯酰胺(功能單體)、0.09gN’ N-亞甲基雙丙烯酰胺(交聯(lián)劑)、0.09g過(guò)硫酸銨(引發(fā)劑)和4.0ml去離子水(溶劑)于燒杯中充分混合，經(jīng)氮?dú)獬鹾?，將其填充到由兩片載玻片形成的夾板空間中，置于60°C的烘箱中聚合反應(yīng)3h，得薄膜狀的磺胺二甲嘧啶印跡水凝膠；
[0007]S2、去除模板分子:將由步驟SI所得的印跡水凝膠浸泡在10%的醋酸溶液中，并超聲振蕩5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；
[0008]S3、將不同濃度的磺胺二甲嘧啶儲(chǔ)備液分別加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的濃度分別為0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.lmg/L、0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ；
[0009]S4、將步驟S2所得的印跡水凝膠浸泡于步驟S3中所得的含不同濃度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，約5min后(達(dá)到吸附平衡)，將其取出并用去離子水漂去多余的牛奶；
[0010]S5、用便攜式拉曼光譜儀對(duì)步驟S4所得的溶液進(jìn)行檢測(cè)，將所得光譜與磺胺二甲嘧啶的標(biāo)準(zhǔn)拉曼光譜進(jìn)行比對(duì)，判斷樣品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
[0011]本發(fā)明具有以下有益效果:
[0012]本發(fā)明能夠快速、低成本檢測(cè)牛奶中過(guò)量的磺胺二甲嘧啶。通過(guò)分子印跡技術(shù)制備的水凝膠，可在5min之內(nèi)完成對(duì)被測(cè)樣品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再經(jīng)便攜式拉曼光譜儀采集光譜信息，整個(gè)過(guò)程快速便捷，且水凝膠可多次循環(huán)重復(fù)使用，在降低檢測(cè)成本的同時(shí)還具有環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)，并可滿足現(xiàn)場(chǎng)、高通量檢測(cè)的需求。
【具體實(shí)施方式】
[0013]為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0014]本發(fā)明實(shí)施例提供了一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法，包括如下步驟:
[0015]S1、制備磺胺二甲嘧啶分子印跡水凝膠:分別取0.017g磺胺二甲嘧啶(模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能單體)、3.0g丙烯酰胺(功能單體)、0.09gN’ N-亞甲基雙丙烯酰胺(交聯(lián)劑)、0.09g過(guò)硫酸銨(引發(fā)劑)和4.0ml去離子水(溶劑)于燒杯中充分混合，經(jīng)氮?dú)獬鹾?，將其填充到由兩片載玻片形成的夾板空間中，置于60°C的烘箱中聚合反應(yīng)3h，得薄膜狀的磺胺二甲嘧啶印跡水凝膠；
[0016]S2、去除模板分子:將由步驟SI所得的印跡水凝膠浸泡在10%的醋酸溶液中，并超聲振蕩5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；
[0017]S3、將不同濃度的磺胺二甲嘧啶儲(chǔ)備液分別加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的濃度分別為0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.lmg/L、
0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ；
[0018]S4、將步驟S2所得的印跡水凝膠浸泡于步驟S3中所得的含不同濃度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，約5min后(達(dá)到吸附平衡)，將其取出并用去離子水漂去多余的牛奶；
[0019]5、用便攜式拉曼光譜儀對(duì)步驟S4所得的溶液進(jìn)行檢測(cè)，將所得光譜與磺胺二甲嘧啶的標(biāo)準(zhǔn)拉曼光譜進(jìn)行比對(duì)，判斷樣品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
[0020]本發(fā)明的原理為:分子印跡技術(shù)，首先通過(guò)選擇合適的功能單體與模板分子在介質(zhì)中預(yù)組裝形成特異性識(shí)別位點(diǎn)，再通過(guò)交聯(lián)聚合反應(yīng)形成聚合物凝膠而將這種特異性識(shí)別位點(diǎn)固定下來(lái)，然后利用合適的溶劑將模板分子從凝膠中移除，這樣便在凝膠中留下了在三維空間上與模板分子相匹配的具有“記憶”功能的空穴，即實(shí)現(xiàn)對(duì)模板分子的特異性識(shí)另IJ，從而可以在一定的基質(zhì)中將模板分子富集。在本發(fā)明中，模板分子為磺胺二甲嘧啶，其分子結(jié)構(gòu)中有多種共價(jià)鍵，拉曼光譜信號(hào)強(qiáng)度大且譜峰尖銳。利用印跡聚合物凝膠將其在被測(cè)樣品中富集后，采集聚合物凝膠的拉曼光譜，通過(guò)與磺胺二甲基嘧啶的標(biāo)準(zhǔn)拉曼光譜進(jìn)行比對(duì)，判斷凝膠中是否含有磺胺二甲嘧啶，從而判斷被測(cè)樣品中是否含有此成分。
[0021]其中，本具體實(shí)施在0.05mg/L-10mg/L的濃度范圍內(nèi)均可檢測(cè)到磺胺二甲嘧啶。
[0022]綜上所述，本發(fā)明能夠快速、低成本檢測(cè)牛奶中過(guò)量的磺胺二甲嘧啶。通過(guò)分子印跡技術(shù)制備的水凝膠，可在5min之內(nèi)完成對(duì)被測(cè)樣品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再經(jīng)便攜式拉曼光譜儀采集光譜信息，整個(gè)過(guò)程快速便捷，且水凝膠可多次循環(huán)重復(fù)使用，在降低檢測(cè)成本的同時(shí)還具有環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)，并可滿足現(xiàn)場(chǎng)、高通量檢測(cè)的需求
[0023]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟: S1、分別取0.017g磺胺二甲嘧啶、1.4ml丙烯酸、3.0g丙烯酰胺、0.09gN，N-亞甲基雙丙烯酰胺、0.09g過(guò)硫酸銨和4.0ml去離子水于燒杯中充分混合，經(jīng)氮?dú)獬鹾?，將其填充到由兩片載玻片形成的夾板空間中，置于60°C的烘箱中聚合反應(yīng)3h，得薄膜狀的磺胺二甲嘧啶印跡水凝膠； S2、將由步驟SI所得的印跡水凝膠浸泡在10%的醋酸溶液中，并超聲振蕩5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶； S3、將不同濃度的磺胺二甲嘧啶儲(chǔ)備液分別加入1ml本身不含磺胺二甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的濃度分別為0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、lmg/L、5mg/L、lOmg/L ； S4、將步驟S2所得的印跡水凝膠浸泡于步驟S3中所得的含不同濃度磺胺二甲嘧啶的牛奶中，約5min后，將其取出并用去離子水漂去多余的牛奶； S5、用便攜式拉曼光譜儀對(duì)步驟S4所得的溶液進(jìn)行檢測(cè)，將所得光譜與磺胺二甲嘧啶的標(biāo)準(zhǔn)拉曼光譜進(jìn)行比對(duì)，判斷樣品中是否含有磺胺二甲嘧啶。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印跡-拉曼聯(lián)用檢測(cè)方法，本發(fā)明能夠快速、低成本檢測(cè)牛奶中過(guò)量的磺胺二甲嘧啶。通過(guò)分子印跡技術(shù)制備的水凝膠，可在5min之內(nèi)完成對(duì)被測(cè)樣品中磺胺二甲嘧啶的吸附富集作用，再經(jīng)便攜式拉曼光譜儀采集光譜信息，整個(gè)過(guò)程快速便捷，且水凝膠可多次循環(huán)重復(fù)使用，在降低檢測(cè)成本的同時(shí)還具有環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)，并可滿足現(xiàn)場(chǎng)、高通量檢測(cè)的需求。
【IPC分類】G01N21/65
【公開(kāi)號(hào)】CN105628668
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410589400
【發(fā)明人】陳達(dá), 譚棕
【申請(qǐng)人】河北伊諾光學(xué)科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年6月1日
【申請(qǐng)日】2014年10月28日