一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種豆芽中生長調(diào)節(jié)劑的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 我國豆芽以作坊式生產(chǎn)為主，為了追求高利潤，在豆芽生產(chǎn)過程中肆意添加植物 生長調(diào)節(jié)劑催發(fā)豆芽生長的現(xiàn)象時有發(fā)生。其中4-氯苯氧乙酸（4-CPA)、6-芐基腺嘌呤 (6-BA)，是問題豆芽培育過程中較常用的"AB粉"、"無根豆芽素"等的主要成分。4-CPA屬 內(nèi)吸性植物生長調(diào)節(jié)劑，能調(diào)節(jié)植物株內(nèi)激素的平衡，刺激子房膨大，補(bǔ)充植物體內(nèi)生長素 不足，促進(jìn)生長。6-BA與植物內(nèi)源激素結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似，在豆芽生長過程中可以促進(jìn)芽的形 成、抑制根的生長。人體攝入過多6-BA會刺激皮膚黏膜，出現(xiàn)惡心、嘔吐等現(xiàn)象。國家質(zhì)檢 總局159號公告已明確指出，6-BA和4-CPA不得作為添加劑生產(chǎn)和使用。在生產(chǎn)豆芽過程 中非法添加"AB粉"、"無根豆芽素"等植物生長調(diào)節(jié)劑的"毒豆芽"事件已逐漸受到人們的 關(guān)注，成為目前食品安全領(lǐng)域的一個重大問題。
[0003] 當(dāng)前豆芽中6-BA和4-CPA的檢測方法具有前處理方法繁瑣，靈敏度差，只能檢測 單一組分等缺點(diǎn)，如國家標(biāo)準(zhǔn)委員會發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)《GB/T23381-2009》只對對豆芽中的6-BA 進(jìn)行檢測，而且方法檢出限高，難以滿足高靈敏的檢測要求。國家各相關(guān)部門也在積極研發(fā) 多組分植物生長調(diào)節(jié)劑的檢測方法，例如，浙江省地方標(biāo)準(zhǔn)《DB33/T625. 3-2007》，然而，該 標(biāo)準(zhǔn)針對6-BA和4-CPA使用了不同的前處理技術(shù)和儀器分析方法，這勢必將增加檢測任 務(wù)，消耗更多的資源。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)不足，而提供一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤 和4-氯苯氧乙酸鈉的方法，該方法具有快速、高效、高靈敏度等特點(diǎn)，為市場豆芽質(zhì)量安全 監(jiān)控提供了新的保障。
[0005] 本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0006] 一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的方法，包括步驟如下：
[0007] (1)樣品前處理：將待測豆芽破碎處理，破碎后置于器皿中加氫氧化鈉水溶液和 甲醇，震蕩搖勻后，進(jìn)行光波萃取l〇s_3min，高速離心處理，取上清液經(jīng)膜過濾得待測液；
[0008] (2)將待測液進(jìn)入液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測
[0009] HPLC檢測條件：
[0010] 色譜柱：EclipsePlusC18 ;
[0011] 流動相：A相為0. 1% (v/v)的甲酸水，B相為乙腈；
[0012] 流速：0? 2mL/min;
[0013] 柱溫：30°C;
[0014] 進(jìn)樣量：10yL;
[0015]梯度洗脫程序：0?4min，B相從25 %升至65 %，4?5min，B相從65 %升至100 %， 5?7.21^11，8相保持100%不變，7.2?7.3111111，8相從100%降至25%，7.3?10111111，8相 保持25 %不變；
[0016] MS/MS條件：
[0017] 采用多反應(yīng)監(jiān)測模式；
[0018] 離子源：電噴霧離子源（+ESI);
[0019] 6 -芐基腺嘌呤采用正離子模式檢測，4 一氯苯氧乙酸鈉采用負(fù)離子模式檢測；
[0020] 干燥氣：N2，干燥氣溫度：300°C，干燥氣流速：10L/min;
[0021] 霧化壓力：30Psi;
[0022] 毛細(xì)管電壓：4000V;
[0023] 6 -芐基腺嘌呤和4 一氯苯氧乙酸鈉母離子及子離子參數(shù)見下表：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的方法，其特征是，包括步驟 如下： (1) 樣品前處理：將待測豆芽破碎處理，破碎后置于器皿中加氫氧化鈉水溶液和甲醇， 震蕩搖勻后，進(jìn)行光波萃取l〇s-3min，高速離心處理，取上清液經(jīng)膜過濾得待測液； (2) 將待測液進(jìn)入液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測 HPLC檢測條件： 色譜柱：Eclipse Plus C18 ; 流動相：A相為0. 1%的甲酸水，B相為乙腈； 流速：〇· 2mL/min ; 柱溫：30°C ; 進(jìn)樣量：10 yL; 梯度洗脫程序：〇?4min，B相從25 %升至65 %，4?5min，B相從65 %升至100 %，5? 7.2111丨11，8相保持100%不變，7.2?7.3111丨11，8相從100%降至25%，7.3?10111丨11，8相保 持25 %不變； MS/MS條件： 采用多反應(yīng)監(jiān)測模式； 離子源：電噴霧離子源； 6 -芐基腺嘌呤采用正離子模式檢測，4 一氯苯氧乙酸鈉采用負(fù)離子模式檢測； 干燥氣：N2，干燥氣溫度：300°C，干燥氣流速：10L/min ; 霧化壓力：30Psi ; 毛細(xì)管電壓：4000V ; 6 -芐基腺嘌呤和4 一氯苯氧乙酸鈉母離子及子離子參數(shù)見下表：
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2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的 方法，其特征是，步驟（1)所述的氫氧化鈉水溶液的濃度為10mM，加入量為每克破碎豆芽 0. 5ml ;甲醇加入量為每克破碎豆芽0. 5ml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的方 法，其特征是，所述的光波萃取為2min。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的 方法，其特征是，所述的高速離心處理為先8000rpm離心IOmin ;取上清液再12000rpm離心 IOmin0
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種同時檢測豆芽中6-芐基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸鈉的方法，將待測豆芽破碎處理，破碎后置于器皿中加氫氧化鈉水溶液和甲醇溶液，震蕩搖勻后，進(jìn)行光波萃取10s-3min，高速離心處理，取上清液經(jīng)膜過濾得待測液，將待測液進(jìn)入液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測。本發(fā)明方法具有快速、高效、高靈敏度等特點(diǎn)，為市場豆芽質(zhì)量安全監(jiān)控提供了新的保障。
【IPC分類】G01N30-88
【公開號】CN104535703
【申請?zhí)枴緾N201510004968
【發(fā)明人】趙汝松, 邢寒竹, 苑金鵬, 陳躍, 王珊珊, 王曉利
【申請人】山東省分析測試中心
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2015年1月6日