本公開涉及用于對獲自受試者的生物樣品進(jìn)行至少一種側(cè)向流測定以確定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的量或存在、或者uch-l1的量或存在和gfap的量或存在。

背景技術(shù)：

1、僅在美國，每年發(fā)生超過500萬的輕度創(chuàng)傷性腦損傷(tbi)。目前，沒有可用于幫助患者評估的簡單、客觀、準(zhǔn)確的測量。事實(shí)上，tbi的評價和診斷中的大多數(shù)是基于主觀數(shù)據(jù)。遺憾的是，客觀測量諸如頭部ct和格拉斯哥昏迷量表(gcs)評分在評價輕度tbi方面并不十分全面或靈敏。此外，頭部ct絕大部分時間都無法顯示輕度tbi，價格昂貴，并且使患者暴露于不必要的輻射之下。另外，陰性頭部ct也并不意味著患者已免于腦震蕩；相反，它僅意指某些干預(yù)措施(諸如手術(shù))是不能保證的。臨床醫(yī)生和患者需要客觀、可靠的信息來準(zhǔn)確評價這種病狀，以促進(jìn)適當(dāng)?shù)姆诸惡突謴?fù)。迄今為止，僅有有限的數(shù)據(jù)可以用于針對使用uch-l1和gfap來在急癥護(hù)理環(huán)境中幫助患者評估和管理。迄今為止，僅有有限的數(shù)據(jù)可以用于針對使用uch-l1和gfap來在急癥護(hù)理環(huán)境中幫助患者評估和管理。

2、輕度tbi或腦震蕩更難客觀地檢測，并且這對全球急救中心來說是一項日常挑戰(zhàn)。腦震蕩通常不會導(dǎo)致大體病理，諸如出血，并且在對腦的常規(guī)計算機(jī)斷層攝影掃描中不會出現(xiàn)異常，但是會出現(xiàn)在幾天到幾周內(nèi)以自發(fā)方式消退的快速發(fā)作的神經(jīng)元功能障礙。大約15％的輕度tbi患者罹患持續(xù)的認(rèn)知功能障礙。對于在現(xiàn)場、在急診室和診所中、在運(yùn)動區(qū)中和在軍事活動(例如，戰(zhàn)斗)中檢測和評估輕度tbi受害者而言存在尚未滿足的需求。

3、目前用于評估腦損傷的嚴(yán)重程度的算法包括格拉斯哥昏迷量表評分和其他措施。這些措施有時可能足以關(guān)聯(lián)急性嚴(yán)重程度，但對可能導(dǎo)致永久性缺陷的細(xì)微病理不夠敏感。gcs和其他措施也無法區(qū)分損傷類型，并且可能不夠充分。因此，進(jìn)入臨床試驗(yàn)被分組到單一gcs水平的患者可能具有嚴(yán)重程度和類型非常不同的損傷。因?yàn)榻Y(jié)局也因此發(fā)生變化，所以不恰當(dāng)?shù)姆诸悤茐呐R床試驗(yàn)的完整性。損傷分類改進(jìn)將能夠在臨床試驗(yàn)中更精確地描述tbi患者的疾病嚴(yán)重程度和類型。

4、另外，目前的腦損傷試驗(yàn)依賴于結(jié)局測量諸如擴(kuò)展的格拉斯哥結(jié)局量表，其捕捉了全局現(xiàn)象，但未能評估結(jié)局的細(xì)微差異。需要靈敏的結(jié)局測量來確定患者從腦損傷恢復(fù)的情況，以測試治療劑和預(yù)防藥。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、在一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種方法，其包括：

2、對獲自受試者的生物樣品進(jìn)行至少一種側(cè)向流測定以確定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的量或存在、或者uch-l1的量或存在和gfap的量或存在；以及

3、顯示所述樣品中uch-l1、gfap、或者uch-l1和gfap的量或存在。在上述方法的一些實(shí)施方案中，至少一種側(cè)向流測定為側(cè)向流裝置的一部分。在上述方法的另外的實(shí)施方案中，側(cè)向流裝置包括(a)至少一個測試條；或(b)至少兩個測試條。

4、在上述方法的一些實(shí)施方案中，(a)針對uch-l1的側(cè)向流測定包括結(jié)合uch-l1上的表位的第一特異性結(jié)合配偶體和包含可檢測標(biāo)記的第二特異性結(jié)合配偶體；并且(b)針對gfap的側(cè)向流測定包括結(jié)合gfap上的表位的第三特異性結(jié)合配偶體和包含可檢測標(biāo)記的第四特異性結(jié)合配偶體。在另外的實(shí)施方案中，第一特異性結(jié)合配偶體、第二特異性結(jié)合配偶體、第三特異性結(jié)合配偶體、第四特異性結(jié)合配偶體或其任何組合為抗體或其抗體片段。

5、在其他實(shí)施方案中，所述方法用于幫助診斷和評價已經(jīng)遭受或可能已經(jīng)遭受頭部損傷的受試者。例如，在其他實(shí)施方案中，受試者被診斷為患有創(chuàng)傷性腦損傷。當(dāng)受試者被診斷為患有創(chuàng)傷性腦損傷時，受試者可以被進(jìn)一步診斷為患有輕度、中度、重度或中度至重度創(chuàng)傷性腦損傷。

6、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，所述方法可以用于確定受試者是否應(yīng)接受頭部計算機(jī)斷層(ct)掃描、磁共振成像(mri)掃描、或者頭部ct掃描和mri掃描兩者。

7、在另外的實(shí)施方案中，受試者為人類受試者(例如，成人受試者和/或兒科受試者)。

8、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，生物樣品為選自由以下組成的組的樣品：全血樣品、尿液樣品、腦脊液樣品、組織樣品、體液樣品、唾液樣品、口咽樣本和鼻咽樣本。例如，在一些實(shí)施方案中，樣品為全血樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為血漿樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為血清樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為唾液樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為尿液樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為口咽樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為全血樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在其他實(shí)施方案中，樣品為血漿樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為血清樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為唾液樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為尿液樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在其他實(shí)施方案中，樣品為口咽樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。

9、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，至少一種針對gfap的側(cè)向流測定、至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定、或者至少一種針對gfap的側(cè)向流測定和至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定各自在或能夠在小于約30分鐘、小于約25分鐘、小于約20分鐘、小于約18分鐘或小于約15分鐘內(nèi)進(jìn)行。在上述方法的另外的實(shí)施方案中，至少一種針對gfap的側(cè)向流測定、至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定、或者至少一種針對gfap的側(cè)向流測定和至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定各自在或能夠在范圍為約4至約20分鐘、約10至約15分鐘或約15至約18分鐘的時間內(nèi)進(jìn)行。

10、在另一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種用于進(jìn)行上述方法的試劑盒。試劑盒可以包括：(a)用于檢測樣品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)的存在的第一側(cè)向流裝置；(b)用于檢測樣品中膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的存在的第二側(cè)向流裝置；以及(c)用于檢測樣品中uch-l1和gfap的存在的說明。

11、在另一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種用于進(jìn)行上述方法的試劑盒。試劑盒可以包括：(a)用于檢測樣品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的存在的側(cè)向流裝置；以及(b)用于檢測樣品中uch-l1和gfap的存在的說明。

12、在另一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種方法，其包括：

13、對獲自受試者的生物樣品進(jìn)行至少一種側(cè)向流測定，以確定泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)、或者uch-l1和gfap兩者的量或存在；以及

14、使在樣品中確定的uch-l1、gfap、uch-l1和gfap的量或存在可視化，

15、其中測定不需要讀取uch-l1、gfap或者uch-l1和gfap的量或存在的裝置(例如，讀取器或讀取裝置)。

16、在上述方法的一些實(shí)施方案中，(a)針對uch-l1的側(cè)向流測定包括結(jié)合uch-l1上的表位的第一特異性結(jié)合配偶體和包含可檢測標(biāo)記的第二特異性結(jié)合配偶體；并且(b)針對gfap的側(cè)向流測定包括結(jié)合gfap上的表位的第三特異性結(jié)合配偶體和包含可檢測標(biāo)記的第四特異性結(jié)合配偶體。在另外的實(shí)施方案中，第一特異性結(jié)合配偶體、第二特異性結(jié)合配偶體、第三特異性結(jié)合配偶體、第四特異性結(jié)合配偶體或其任何組合為抗體或其抗體片段。

17、在其他實(shí)施方案中，所述方法用于幫助診斷和評價已經(jīng)遭受或可能已經(jīng)遭受頭部損傷的受試者。例如，在其他實(shí)施方案中，受試者被診斷為患有創(chuàng)傷性腦損傷。當(dāng)受試者被診斷為患有創(chuàng)傷性腦損傷時，受試者可以被進(jìn)一步診斷為患有輕度、中度、重度或中度至重度創(chuàng)傷性腦損傷。

18、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，所述方法可以用于確定受試者是否應(yīng)接受頭部計算機(jī)斷層(ct)掃描、磁共振成像(mri)掃描、或者頭部ct掃描和mri掃描兩者。

19、在另外的實(shí)施方案中，受試者為人類受試者(例如，成人受試者和/或兒科受試者)。

20、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，生物樣品為選自由以下組成的組的樣品：全血樣品、尿液樣品、腦脊液樣品、組織樣品、體液樣品、唾液樣品、口咽樣本和鼻咽樣本。例如，在一些實(shí)施方案中，樣品為全血樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為血漿樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為血清樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為唾液樣品。在另外的實(shí)施方案中，樣品為尿液樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為口咽樣品。在其他實(shí)施方案中，樣品為全血樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在其他實(shí)施方案中，樣品為血漿樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為血清樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為唾液樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在另外的實(shí)施方案中，樣品為尿液樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。在其他實(shí)施方案中，樣品為口咽樣品，并且受試者為人類受試者(例如，成人和/或兒科受試者)。

21、在上述方法的另外的實(shí)施方案中，至少一種針對gfap的側(cè)向流測定、至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定、或者至少一種針對gfap的側(cè)向流測定和至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定各自在或能夠在小于約30分鐘、小于約25分鐘、小于約20分鐘、小于約18分鐘或小于約15分鐘內(nèi)進(jìn)行。在上述方法的另外的實(shí)施方案中，至少一種針對gfap的側(cè)向流測定、至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定、或者至少一種針對gfap的側(cè)向流測定和至少一種針對uch-l1的側(cè)向流測定各自在或能夠在范圍為約4至約20分鐘、約10至約15分鐘或約15至約18分鐘的時間內(nèi)進(jìn)行。

22、在另一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種用于進(jìn)行上述方法的試劑盒。試劑盒可以包括：(a)用于檢測樣品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)的存在的第一側(cè)向流裝置；(b)用于檢測樣品中膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的存在的第二側(cè)向流裝置；以及(c)用于檢測樣品中uch-l1和gfap的存在的說明。

23、在另一個實(shí)施方案中，本公開涉及一種用于進(jìn)行上述方法的試劑盒。試劑盒可以包括：(a)用于檢測樣品中泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)的存在的側(cè)向流裝置；以及(b)用于檢測樣品中uch-l1和gfap的存在的說明。試劑盒中所含的側(cè)向流裝置可以含有一個用于檢測樣品中uch-l1和gfap的存在或量的測試條。替代地，側(cè)向流裝置可以含有用于確定樣品中uch-l1的存在或量的第一測試條和用于確定樣品中g(shù)fap的存在或量的第二測試條。