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一種甜菜夜蛾幼蟲對殺蟲劑抗藥性的監(jiān)測方法

文檔序號:5944857閱讀:341來源:國知局
專利名稱:一種甜菜夜蛾幼蟲對殺蟲劑抗藥性的監(jiān)測方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種甜菜夜蛾幼蟲對殺蟲劑抗藥性的監(jiān)測方法,屬于農(nóng)藥學(xué)和昆蟲學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hilbner))俗稱白菜褐夜蛾,隸屬于鱗翅目夜蛾科, 是一種世界性分布的重要農(nóng)業(yè)害蟲。因其食性雜、寄主范圍廣,又特別喜食蔬菜、大豆、花生、玉米和棉花等作物,對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成很大成脅。造成甜菜夜蛾暴發(fā)成災(zāi)主要是由以下幾方面的原因造成的一是高溫干旱的特殊氣候條件有利于甜菜夜蛾的發(fā)生,二是近幾年來種植結(jié)構(gòu)的改變,特別是90年代以來蔬菜種植面積的不斷增加為甜菜夜蛾提供了充足的食料,三是抗藥性的產(chǎn)生導(dǎo)致了甜菜夜蛾防治難度的增加。其中抗藥性問題又是造成甜菜夜蛾暴發(fā)成災(zāi)的一個(gè)重要原因。長期以來化學(xué)藥劑的不合理使用,導(dǎo)致甜菜夜蛾對多種殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。為了延緩甜菜夜蛾抗藥性的發(fā)展,及時(shí)制定抗性治理措施,抗藥性監(jiān)測成為準(zhǔn)確獲知甜菜夜蛾在某地抗性水平的有效手段。Brewer等采用誘蟲和生物測定的方法,監(jiān)測到美國加州甜菜夜蛾對氰戊菊酯的相對抗性倍數(shù)為11倍,甜菜夜蛾對擬除蟲菊酯類藥劑迅速產(chǎn)生抗藥性;Ernst等(1992)報(bào)道,1990年采用浸葉法測定危地馬拉棉花甜菜夜蛾田間種群對氯氰菊酯產(chǎn)生了 6000倍的抗藥性;Moulton等采用浸葉法測定了美國亞利桑那州和泰國甜菜夜蛾對多殺菌素和甲氧蟲酰胼的抗性;1993年,鄭允采用噴霧塔噴霧法、浸葉法測定了臺灣北、中、南部地區(qū)甜菜夜蛾4齡幼蟲對有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類殺蟲劑的抗藥性;1995年吳士昌采用幼蟲浸漬法測定了上海地區(qū)甜菜夜蛾3齡幼蟲對有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類殺蟲劑的抗性;2002年,劉永杰采用點(diǎn)滴法、浸葉法測定了南京、上海等六個(gè)地區(qū)甜菜夜蛾3齡幼蟲對有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、昆蟲生長調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑的抗性水平;2008年,賈變桃采用浸葉法測定了江蘇、河南甜菜夜蛾初孵幼蟲對阿維菌素類、噁二嗪類、吡咯類、昆蟲生長調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑的抗藥性。上述監(jiān)測工作確實(shí)為甜菜夜蛾的田間防治及抗性治理提供了極大的幫助,但存在各監(jiān)測單位監(jiān)測方法步驟繁瑣,方法不規(guī)范的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明就是以已有研究方法為基礎(chǔ),針對現(xiàn)有監(jiān)測方法中存在的不足而提出的, 目的在于提供一種簡便、快速、準(zhǔn)確的抗性監(jiān)測方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供了一種甜菜夜蛾幼蟲對殺蟲劑抗藥性的監(jiān)測方法,該方法包括以下步驟(1)通過田間采集獲得至少一個(gè)地理區(qū)域的甜菜夜蛾幼蟲種群; (2)將田間采集的甜菜夜蛾幼蟲種群室內(nèi)擴(kuò)繁一代;(3)將擴(kuò)繁一代后的3齡甜菜夜蛾幼蟲挑入二十四孔養(yǎng)蟲板中,饑餓2小時(shí)后進(jìn)行抗藥性測定;(4)通過將至少一種殺蟲劑原藥稀釋成死亡率在10%-90%的五個(gè)濃度,浸漬圓葉片制成帶毒葉片飼喂步驟(3)中挑選的甜菜夜蛾3齡幼蟲;(5) —定時(shí)間后檢查結(jié)果,獲得某一地區(qū)甜菜夜蛾幼蟲對某種殺蟲劑的抗藥性水平。在本發(fā)明的方法中,所述步驟(1)進(jìn)一步包括在同一個(gè)地理區(qū)域內(nèi)“W”型五點(diǎn)取樣,采集方圓3公頃內(nèi)的甜菜夜蛾幼蟲,每點(diǎn)采集數(shù)量至少在100頭以上,總數(shù)量應(yīng)在500 頭以上。所述步驟⑶進(jìn)一步包括試驗(yàn)使用的二十四孔養(yǎng)蟲板(孔深20mm,孔徑15mm)用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%的癸甲溴銨水溶液浸泡過夜后清水沖洗、晾干后使用;挑選健康、活潑,生長均勻一致3齡甜菜夜蛾幼蟲于24孔板中,每孔一頭試蟲。所述步驟(4)進(jìn)一步包括試驗(yàn)使用的圓葉片采用不結(jié)球甘藍(lán)葉,甘藍(lán)葉用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 曲拉通水溶液將表皮蠟質(zhì)層洗去、晾干,用直徑為IOmm的打孔器打成圓葉片;藥液配制是將殺蟲劑原藥用丙酮溶解,然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 1 %吐溫-80水溶液直接配制成所需濃度;每個(gè)濃度重復(fù)3次。所述步驟(5)進(jìn)一步包括對于常規(guī)殺蟲劑和部分新型殺蟲劑處理后48小時(shí)檢查結(jié)果,至少包括有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、阿維菌素類、噁二嗪類、吡咯類、大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑; 昆蟲生長調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑為處理后72小時(shí)檢查結(jié)果,至少包括蛻皮激素類似物、保幼激素類似物。本發(fā)明的有益效果1)本發(fā)明使用曲拉通水溶液將甘藍(lán)葉片表皮蠟質(zhì)層洗去、晾干,提高了藥液對葉片的潤濕展布效果,使藥液在甘藍(lán)葉片上分布更均勻,提高了抗性監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確性。2)本發(fā)明使用的二十四孔養(yǎng)蟲板經(jīng)濟(jì)易得,占用空間小,不同試蟲間干擾小,檢查結(jié)果快速、方便。
具體實(shí)施例方式下面對本研究的具體實(shí)施方式
進(jìn)一步詳細(xì)說明。實(shí)施例1 本實(shí)驗(yàn)的目的在于研究甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽在山東滕州、濱州兩地的抗藥性水平。田間分別在山東滕州、濱州步行“W”型五點(diǎn)取樣,采集方圓3公頃內(nèi)的甜菜夜蛾3 齡以上幼蟲,每點(diǎn)采集數(shù)量約以上約100頭,總計(jì)約500頭,室內(nèi)飼養(yǎng)一代,挑取大小均勻一致的3齡試蟲于24孔板中饑餓2小時(shí)抗藥性水平測定。準(zhǔn)確稱取90%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥1. llllg,用丙酮溶解定容至IOOmL容量瓶中,配成IOOOOmg. L—1的甲維鹽母液, 用0. 吐溫-80水溶液將母液稀釋成2. 00、0· 50、0· 13、0· 03,0. Olmg. L-1用于甜菜夜蛾滕州種群的抗性監(jiān)測,用0. 吐溫-80水溶液將母液稀釋成4. 00,2. 00、1. 00,0. 50,0. 25mg. Γ1用于甜菜夜蛾濱州種群的抗性監(jiān)測,用0. 吐溫-80水溶液將母液稀釋成0. 20,0. 10、 0. 05,0. 03,0. Olmg. Γ1用于甜菜夜蛾敏感種群的抗性監(jiān)測,分別將洗凈晾干的甘藍(lán)圓葉片按濃度從低到高的順序在配制好的藥液中浸漬10s,取出晾干,將帶藥葉片加入二十四孔板中,每濃度重復(fù)3次,48h后檢查結(jié)果。以對照死亡率小于10%為有效試驗(yàn),計(jì)算死亡率和校正死亡率,用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計(jì)算LC5tl值,毒力回歸曲線。試驗(yàn)結(jié)果見表1、2.表1.甜菜夜蛾幼蟲對甲維鹽抗藥性監(jiān)測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種甜菜夜蛾幼蟲對殺蟲劑抗藥性的監(jiān)測方法,其特征在于該方法包括以下步驟(1)通過田間采集獲得至少一個(gè)地理區(qū)域的甜菜夜蛾幼蟲種群;(2)將田間采集的甜菜夜蛾幼蟲種群室內(nèi)擴(kuò)繁一代;(3)將擴(kuò)繁一代后的3齡甜菜夜蛾幼蟲挑入二十四孔養(yǎng)蟲板中,饑餓2小時(shí)后進(jìn)行抗藥性測定;(4)通過將至少一種殺蟲劑原藥稀釋成死亡率在10%-90%的五個(gè)濃度,浸漬圓葉片制成帶毒葉片飼喂甜菜夜蛾3齡幼蟲;(5)一定時(shí)間后檢查結(jié)果,獲得某一地區(qū)甜菜夜蛾幼蟲對某種殺蟲劑的抗藥性水平。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(1)進(jìn)一步包括在同一個(gè)地理區(qū)域內(nèi) “W”型五點(diǎn)取樣,采集方圓3公頃內(nèi)的甜菜夜蛾幼蟲,每點(diǎn)采集數(shù)量至少在100頭以上,數(shù)量應(yīng)在500頭以上。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(3)進(jìn)一步包括挑選3齡甜菜夜蛾幼蟲健康、活潑,生長均勻一致;試驗(yàn)使用的二十四孔板(孔深20mm,孔徑15mm)用質(zhì)量分?jǐn)?shù) 0. 5%癸甲溴銨水溶液浸泡過夜后清水沖洗、晾干后使用。
4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(4)進(jìn)一步包括試驗(yàn)使用的圓葉片采用不結(jié)球甘藍(lán)葉,甘藍(lán)葉用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1 %曲拉通水溶液將表皮蠟質(zhì)層洗去、晾干,用直徑為 IOmm的打孔器打成圓葉片;藥液配制是將殺蟲劑原藥用丙酮溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 吐溫-80水溶液直接配制成所需濃度。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(5)進(jìn)一步包括對于常規(guī)殺蟲劑和部分新型殺蟲劑處理后48小時(shí)檢查結(jié)果,至少包括有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、 噁二嗪類、吡咯類、大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑,昆蟲生長調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑為處理后72小時(shí)檢查結(jié)果,至少包括蛻皮激素類似物、保幼激素類似物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種殺蟲劑抗藥性監(jiān)測方法,該方法包括(1)通過田間采集獲得至少一個(gè)地理區(qū)域的甜菜夜蛾幼蟲種群;(2)將田間采集的甜菜夜蛾幼蟲種群轉(zhuǎn)入室內(nèi)擴(kuò)繁一代;(3)將擴(kuò)繁后一代3齡甜菜夜蛾幼蟲饑餓2小時(shí)后進(jìn)行抗藥性測定;(4)通過將至少一種殺蟲劑原藥稀釋成死亡率在10%-90%的五個(gè)濃度,浸漬甘藍(lán)圓葉片制成帶毒葉片飼喂甜菜夜蛾3齡幼蟲;(5)一定時(shí)間后檢查結(jié)果,獲得某一地區(qū)甜菜夜蛾幼蟲對某種殺蟲劑的抗藥性水平。本方法通過對田間甜菜夜蛾種群對殺蟲劑抗性的監(jiān)測,明確田間甜菜夜蛾對殺蟲劑的抗性情況,從而可以為甜菜夜蛾的抗性治理及綜合防治提供有效的指導(dǎo)。
文檔編號G01N33/50GK102175845SQ20111004479
公開日2011年9月7日 申請日期2011年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月22日
發(fā)明者周超, 慕衛(wèi) 申請人:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
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