一種黃曲霉毒素分子印跡材料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于高分子材料技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種富集痕量黃曲霉毒素(B^Bh Gi、G2)的分子印跡材料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃曲霉毒素(AFT)是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，目前已分離鑒定出12種，主要分 子型式含出、82、61、62屬爲(wèi)等。黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(1!10)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為1 類致癌物，是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì)。黃曲霉毒素存在于土壤、動(dòng)植物、各種堅(jiān)果，特別是 花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常 發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素。
[0003] 隨著人們對(duì)食品安全關(guān)注度的快速上升，毒素的快速檢測(cè)已成為國內(nèi)外研究的發(fā) 展趨勢(shì)。但是薄膜層析法、液相色譜法、金標(biāo)試紙法和免疫親和柱法具有檢測(cè)周期長，程序 復(fù)雜所需試劑繁多，檢測(cè)費(fèi)用過高等缺點(diǎn)，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足現(xiàn)代檢測(cè)要求。隨著分子印跡技 術(shù)的發(fā)展和真菌毒素檢測(cè)要求的不斷提高，分子印跡技術(shù)在真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用越來越 廣泛。將分子印跡聚合物填充于固相萃取小柱中，可用于樣品的分離、純化和濃縮，與抗體 相比，分子印跡聚合物制備步驟簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、使用壽命長。但目前由于沒有合適的對(duì)黃 曲霉毒素具有很強(qiáng)識(shí)別功能的分子印記材料，所以還沒有廣泛使用分子印跡方法檢測(cè)黃曲 霉毒素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 有鑒于此，本發(fā)明創(chuàng)造旨在提出一種對(duì)黃曲霉毒素(1?1、132、61、62)具有尚選擇性的 分子印跡材料。
[0005] 本發(fā)明利用功能單體負(fù)載型離子液體為載體，表面溶膠-凝膠方法合成出一種用 于選擇性富集痕量黃曲霉毒素(B^Bs 的吸附材料。該材料可用作固相萃取材料，可 克服環(huán)境樣品體系復(fù)雜的預(yù)處理過程，為樣品的富集和分離提供很大的方便，與免疫親和 柱相比，成本也低。在食品領(lǐng)域的痕量分析中起重要作用，具有可適用性。
[0006]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明創(chuàng)造的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：
[0007]采用功能單體負(fù)載型離子液體作為載體，合成了一種黃曲霉毒素 子印跡材料。
[0008]本發(fā)明的分子印跡材料對(duì)黃曲霉毒素(Βι、B2、Gi、G2)有很強(qiáng)的識(shí)別功能。
[0009] 本發(fā)明還公開了這種分子印跡材料的制備方法：
[0010] -種黃曲霉毒素分子印跡材料的制備方法，包括如下步驟：
[0011] (1)將黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)類似物DMC作為模板分子加入到DMF溶液中，攪拌使其充 分溶解，加入功能單體負(fù)載型離子液體，攪拌30min，再加入四乙氧基硅烷和催化劑，40°C水 浴孵化24h;
[0012] (2)將步驟(1)所得產(chǎn)物先用DMF淋洗，再用甲醇淋洗除去未反應(yīng)物，50°C真空干燥 老化8h;將老化后的反應(yīng)產(chǎn)物放于索氏萃取器中，洗去模板分子;50°C真空干燥，得到對(duì)黃 曲霉毒素具有高選擇性的分子印跡材料。
[0013]進(jìn)一步，步驟（1)中DMC與負(fù)載型離子液體的質(zhì)量比為0.5-1:1;四乙氧基硅烷與催 化劑的體積比為5-6:1。
[0014]進(jìn)一步，步驟(1)所述催化劑是氨水。
[0015]進(jìn)一步，步驟(2)中洗去模板分子是使用體積比為8-10:1甲醇和冰乙酸混合溶液 索氏提取48h后，再用甲醇索氏提取12h，直至萃取液中無 DMC檢出為止。得到本發(fā)明的分子 印跡聚合物(MIP)。
[0016]以功能單體負(fù)載型離子液體為支持體，合成對(duì)黃曲霉毒素具有高選擇性的分子印 跡材料;所使用的功能單體負(fù)載型離子液體是核心為咪唑環(huán)的一類物質(zhì)，的結(jié)構(gòu)式為：
[0018]按照上述方法，但不加模板分子DMC，制備本發(fā)明對(duì)應(yīng)的非印跡聚合物(NIP)。
[0019 ]本發(fā)明黃曲霉毒素分子印跡材料，用于食品中黃曲霉毒素的快速檢測(cè)。
[0020] 相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明創(chuàng)造所述的黃曲霉毒素分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用 在黃曲霉毒素檢測(cè)中具有以下優(yōu)勢(shì)：
[0021] 本發(fā)明利用表面溶膠-凝膠方法合成的分子印跡材料，具有傳質(zhì)速度快，比表面積 大，顆粒粒徑均一的優(yōu)點(diǎn)。該材料可以快速吸附黃曲霉毒素，對(duì)目標(biāo)物具有強(qiáng)的選擇性;該 材料用化學(xué)方法制備，具有較好的穩(wěn)定性，較長的使用壽命。本發(fā)明成本低廉，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn) 單，反應(yīng)條件容易控制，制得的黃曲霉毒素分子印跡聚合物作為固相萃取的填料與液相色 譜聯(lián)用，適用于食品中痕量黃曲霉毒素的分離與富集。與商品化的免疫親和柱相比，該材料 具有制備方便，選擇性高，成本低的優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說明】
[0022]構(gòu)成本發(fā)明創(chuàng)造的一部分的附圖用來提供對(duì)本發(fā)明創(chuàng)造的進(jìn)一步理解，本發(fā)明創(chuàng) 造的示意性實(shí)施例及其說明用于解釋本發(fā)明創(chuàng)造，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明創(chuàng)造的不當(dāng)限定。
【附圖說明】
[0023]
[0024]圖1分子印跡聚合物和非印跡聚合物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)；
[0025]圖2赭曲霉毒素六(01六)為黃曲霉毒素(131、132、61、62)的競(jìng)爭(zhēng)物，研究該分子印跡材 料的選擇性能。
【具體實(shí)施方式】
[0026]為了使本發(fā)明上述特征和優(yōu)點(diǎn)更加清楚和容易理解，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的 實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0027]下述實(shí)施例中所述負(fù)載型離子液體為自己合成，其他(DMC、黃曲霉毒素 G2)、四乙氧基硅烷、氨水、DMF、甲醇、冰乙酸)均為市售，使用前未經(jīng)任何處理。
[0028] 實(shí)施例1
[0029 ] -種黃曲霉毒素(Βι、B2、Gi、G2)分子印跡材料的制備：
[0030] (1)將0.6mmol DMC加入到1.7ml DMF中，攪拌15min至完全溶解，加入100mg負(fù)載型 離子液體，繼續(xù)攪拌30min，隨后加入9mmol四乙氧基硅烷，攪拌反應(yīng)30min，再加入0.4ml氨 水(3. Omol/L)，攪拌反應(yīng)20min，40°C水浴孵化24h;
[0031] (2)抽濾，先用DMF淋洗，再用甲醇進(jìn)