米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示，制備得到的納米膠囊顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀，超小金納米顆粒位于膠囊內(nèi)部。
[0119]實(shí)驗(yàn)例6:包載脂溶性超小磷鎢酸納米粒的納米膠囊的制備與表征
[0120]取6.53mg DEPG和0.48mg高純膽固醇溶于2mL乙醇中，振蕩20min使其混勻，得磷脂溶液。取20mg PLGA溶于6.5mL 二甲基甲酰胺和3.5mL三氟乙醇的混合物中，振蕩過夜使其混勻，得PLGA溶液；向PLGA溶液中加入0.017mgDPPG與16.7mg磷鎢酸水溶液。
[0121]在實(shí)施例6的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有三次水的注射器，在第二通道200與第三通道300的合并后的入口處接裝磷鎢酸，DPPG與PLGA溶液的注射器，在第四通道400和第五通道500的入口處接裝三次水的注射器，在第六通道600的入口處接裝磷脂溶液的注射器，在第八通道130的出口處接裝收集管。
[0122]使用注射泵控制三次水的流速15mL/h，磷脂溶液和第一級(jí)溶液的流速0.2mL/h，DPPG、PLGA與磷鎢酸溶液流速為lmL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130的出口收集納米膠囊懸浮液。
[0123]取10 UL上述納米膠囊懸浮液，滴于碳膜銅網(wǎng)上，靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體。干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察，如圖13 (圖13為實(shí)驗(yàn)例6制備得到的納米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示，制備得到的納米膠囊顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀，細(xì)小的磷鎢酸納米顆粒位于膠囊的殼層中。
[0124]應(yīng)用例1:熒光納米顆粒用于細(xì)胞的成像
[0125]利用實(shí)驗(yàn)例I制備的焚光納米顆粒進(jìn)彳丁細(xì)胞的焚光標(biāo)記。將實(shí)驗(yàn)例I制備的焚光納米顆粒與MCF-7細(xì)胞共孵育lh，用激光共聚焦拍攝其熒光情況。如圖14所示，細(xì)胞內(nèi)被綠色熒光標(biāo)記(圖14為應(yīng)用例I的細(xì)胞熒光圖片)。
[0126]應(yīng)用例2:包載表達(dá)綠色熒光蛋白的質(zhì)粒的納米膠囊用于熒光細(xì)胞的構(gòu)建
[0127]取實(shí)驗(yàn)例4制備所得帶有質(zhì)粒的納米膠囊與細(xì)胞共同孵育，72h后，觀察細(xì)胞熒光。如圖15所示，細(xì)胞內(nèi)綠色熒光有表達(dá)(圖15為應(yīng)用例2的細(xì)胞熒光圖片)。
[0128]申請(qǐng)人聲明，本發(fā)明通過上述實(shí)施例來說明本發(fā)明的詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程，但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)，對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種微流控芯片，包括: 第一通道(100):所述第一通道(100)上順流依次分布有第一節(jié)點(diǎn)(101)，第二節(jié)點(diǎn)(102)，和第三節(jié)點(diǎn)(103)，所述第一通道(100)自第三節(jié)點(diǎn)(103)之后分成第一子通道(110)和第二子通道(120);第一子通道(110)和第二子通道(120)相交于第四節(jié)點(diǎn)(104)合流成第八通道(130)； 第二通道(200)和第三通道(300):所述第二通道(200)和第三通道(300)分布于第一通道(100)兩側(cè)，并與第一通道(100)通過第一節(jié)點(diǎn)(101)連通； 第四通道(400)和第五通道(500):所述第四通道(400)和第五通道(500)分布于第一通道(100)兩側(cè)，并與第一通道(100)通過第二節(jié)點(diǎn)(102)連通； 第六通道￠00):所述第六通道(600)在第四節(jié)點(diǎn)(104)與第一子通道(110)、第二子通道(120)和第八通道(130)連通。
2.如權(quán)利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述第八通道(130)的排布為螺旋型結(jié)構(gòu)、直線型結(jié)構(gòu)、矩形波結(jié)構(gòu)、圓形串珠結(jié)構(gòu)、菱形串珠結(jié)構(gòu)中的任意I種。
3.如權(quán)利要求1或2所述的微流控芯片，其特征在于，所述第一通道(100)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第二通道(200)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第三通道(300)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第四通道(400)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第五通道(500)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第六通道(600)具有一個(gè)獨(dú)立入口 ； 優(yōu)選地，所述第八通道(130)具有唯一的獨(dú)立出口。
4.如權(quán)利要求1或2所述的微流控芯片，其特征在于，所述第二通道(200)和第三通道(300)具有同一個(gè)入口。
5.如權(quán)利要求1或2所述的微流控芯片，其特征在于，所述第四通道(400)和第五通道(500)具有同一個(gè)入口。
6.一種使用權(quán)利要求1?5所述微流控芯片制備納米膠囊的方法，其特征在于，按流體流向，向第一通道(100)內(nèi)通入水溶性待包載物，向第二通道200)和第三通道(300)內(nèi)通入高分子聚合物的有機(jī)溶液，向第四通道(400)和第五通道(500)內(nèi)通入水性溶劑；向第六通道￠00)內(nèi)通入兩親性分子。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述高分子聚合物有機(jī)溶液中溶解有脂溶性待包載物。
8.如權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述方法添加有熒光分子；當(dāng)所述熒光分子為水溶性時(shí)，從第一通道(100)加入；當(dāng)所述熒光分子為油溶性時(shí)，從第二通道(200)或第三通道(300)加入； 或者，將所述高分子聚合物進(jìn)行熒光分子改性，從第二通道(200)或第三通道(300)加入； 或者，將兩親性分子進(jìn)行熒光分子改性，從第六通道(600)或第三通道(300)加入。
9.如權(quán)利要求6?8之一所述的方法，其特征在于，所述水溶性待包載物包括水溶性無機(jī)鹽、水溶性有機(jī)小分子、水溶性高分子聚合物、核酸、水溶性蛋白質(zhì)、水溶性納米顆粒中的任意I種或至少2種的組合； 優(yōu)選地，所述高分子聚合物選自聚乳酸、聚羥基乙酸、聚乳酸-羥基乙酸共聚物、聚己內(nèi)酯中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選聚丙烯腈和/或聚羥基烷酸酯； 優(yōu)選地，所述脂溶性待包載物包括脂溶性小分子、脂溶性高分子聚合物、兩親性脂溶性化合物、脂溶性蛋白質(zhì)、脂溶性納米顆粒中的任意I種或至少2種的組合； 優(yōu)選地，所述有機(jī)溶液為能與水以任意比例混溶的有機(jī)溶劑，優(yōu)選甲醇、乙醇、丙酮、三氟乙醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、羥基丙酸、乙二醇或甘油中的任意I種或至少2種的組合； 優(yōu)選地，所述水性溶劑選自去離子水、一次蒸餾水、二次蒸餾水或三次蒸餾水中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選三次蒸餾水； 優(yōu)選地，所述兩親性分子為磷脂分子和/或表面活性劑；優(yōu)選自氫化大豆磷脂、蛋黃卵磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚?；?2-油?；字Ｄ憠A、二油?；字Ｄ憠A、二硬脂?；字Ｄ憠A、二芥酰磷脂酰甘油、1，2-棕櫚酰磷脂酰甘油、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、二芥?；字Ｒ掖及?、二棕櫚?；字＝z氨酸、二油?；字＝z氨酸、二肉豆蔻酰磷脂酸、二硬脂酰磷脂酸、硬脂酰溶血卵磷脂、DOTAP、十Λ胺、吐溫、聚乙二醇、生物素、熒光素中的任意I種或至少2種的組合； 優(yōu)選地，所述熒光分子選自羅丹明、Di1、DiD、D1、DAP1、Cy3、Cy5、剛果紅、尼羅紅、苯并噻唑、鈣黃綠素中的任意I種或至少2種的組合。
10.一種由權(quán)利要求6?9之一所述的方法制備得到的納米膠囊，其特征在于，所述納米膠囊為顆粒完好的中空納米膠囊。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種微流控芯片，包括：第一通道：所述第一通道上順流依次分布有第一節(jié)點(diǎn)，第二節(jié)點(diǎn)，和第三節(jié)點(diǎn)，所述第一通道自第三節(jié)點(diǎn)之后分成第一子通道和第二子通道；第一子通道和第二子通道相交于第四節(jié)點(diǎn)合流成第八通道；第二通道和第三通道：所述第二通道和第三通道分布于第一通道兩側(cè)，并與第一通道通過第一節(jié)點(diǎn)連通；第四通道和第五通道：所述第四通道和第五通道分布于第一通道兩側(cè)，并與第一通道通過第二節(jié)點(diǎn)連通；第六通道：所述第六通道在第四節(jié)點(diǎn)與第一子通道、第二子通道和第八通道連通。本發(fā)明提供的微流控芯片具有多級(jí)結(jié)構(gòu)，能夠制備具有多級(jí)核殼結(jié)構(gòu)的空心納米顆粒，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同藥物進(jìn)行包載的可能。
【IPC分類】A61K9-51, B82Y5-00, B01L3-00
【公開號(hào)】CN104549585
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410854624
【發(fā)明人】蔣興宇, 馮強(qiáng), 張璐, 孫佳姝
【申請(qǐng)人】國家納米科學(xué)中心
【公開日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2014年12月31日