一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種蒜氨酸的提取方法，具體涉及一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法。
【背景技術】
[0002]大蒜一直以來都廣泛用于治療和預防一些疾病，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其中的含硫化合物具有很好的醫(yī)療效果，尤其在預防癌癥方面，其中的一種風味前體物質(zhì)蒜氨酸(S-烯丙基-L半胱氨酸亞砜)具有預防作用。研究表明蒜氨酸具有抗過氧化物、抗糖尿病、抗氧化抑菌、抗腫瘤以及抗癌等作用；當生大蒜被壓碎或者切碎的情況下，蒜氨酸會發(fā)生酶促反應生成大蒜素，大蒜素也具有抗菌、抗腫瘤、抑制免疫調(diào)節(jié)等作用，但是大蒜素易分解不易保存，而蒜氨酸醫(yī)藥保健特性和大蒜素相差不大，并且蒜氨酸較穩(wěn)定易保存，所以最好的方法是直接獲取蒜氨酸。
[0003]目前從大蒜中提取蒜氨酸方法主要是米用水或者水醇混合物進行直接提取，但是提取時間長，而且提取率低。
[0004]反膠束是將表面活性劑溶解在非極性有機溶劑中，并使其濃度超過臨界濃度，碳氫鏈向外，親水基向內(nèi)組成，形成的球狀極性核內(nèi)具有一定數(shù)量的水，稱為“水池”，其能夠溶解可溶性極性物質(zhì)。
[0005]反膠束提取在回收、分離和純化目標生物分子方面具有巨大潛力，反膠束中“水池”可以選擇性的溶解生物分子并保護其生物活性不被破壞，這是反膠束最大優(yōu)勢。此外，反膠束體系具有熱力學穩(wěn)定性、光學透明性、以及成本低、節(jié)能、穩(wěn)定狀態(tài)下可以連續(xù)操作等特性，因此很有利于大規(guī)模生產(chǎn)及質(zhì)量控制。目前關于使用反膠束方法提取大蒜素的技術未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為彌補現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供一種提取時間短，提取純度高的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法。
[0007]本發(fā)明是通過如下技術方案實現(xiàn)的:
一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特殊之處在于:包括以下步驟:
(1)取干燥蒜片，微波滅酶后粉碎過篩；
(2)取濃度為0.03-0.08mol/L的十六烷基三甲基溴化銨置于100mL錐形瓶中，向其中加入正庚烷、正辛醇和含有KCL的磷酸緩沖溶液，超聲震蕩至十六烷基三甲基溴化銨完全溶解，溶液呈透明后得到反膠束溶液，其中，KCL的濃度為0.2-0.5mol/L，磷酸緩沖溶液pH值為 6.0-8.0 ；
(3)向反膠束溶液中加入0.2-0.8g/30mL的蒜粉，在25_50°C下超聲提取5_40min后，離心分離，所得上清液為反膠束的前萃液；
(4)向前萃液中加入含有KI的磷酸緩沖溶液進行反萃取，KI溶液濃度為0.5-1.0mol/L，磷酸鹽緩沖溶液pH為4.0-6.0，反萃取后離心分離得有機相和水相；
(5)將水相用乙醇沉淀，濃縮，真空干燥，得到蒜氨酸。
[0008]本發(fā)明的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，步驟(1)中過篩優(yōu)選80目篩。
[0009]本發(fā)明的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，步驟(2)中正庚烷和正辛醇的體積比為9:1，十六烷基三甲基溴化銨的濃度優(yōu)選為0.07mol/L，KCL的濃度優(yōu)選為0.3mol/L，磷酸緩沖溶液pH值優(yōu)選為7.0。
[0010]本發(fā)明的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，步驟(3)中離心轉速為3000r/min，離心時間為20min，蒜粉含量優(yōu)選為0.5g/30mL，萃取溫度優(yōu)選為40°C，萃取時間優(yōu)選為30min。
[0011]本發(fā)明的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，步驟(4)中加入含有KI的的磷酸緩沖溶液的體積與前萃液的體積相等，反萃取溫度為40°C，反萃取時間為30min，ΚΙ濃度優(yōu)選為
0.8mol/L,磷酸鹽緩沖溶液pH值優(yōu)選為5.0。
[0012]本發(fā)明的反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，步驟(5)中水相沉淀選用體積分數(shù)為80%的乙醇。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:
(1)采用反膠束技術只需前萃和反萃兩步就可以達到萃取純化的目的，步驟簡單，操作方便；
(2)萃取純化蒜氨酸回收率高；
(3)具有提取時間短，實驗容易放大等優(yōu)點，可應用于工業(yè)提取蒜氨酸。
【附圖說明】
[0014]附圖1是本發(fā)明的工藝步驟示意圖。
【具體實施方式】
[0015]實施例1
(1)蒜粉的制備
取干燥蒜片，微波滅酶后在高速粉碎機上粉碎，粉碎后過80目篩；
(2)反膠束溶液的配制
稱取1.09g十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，置于100mL錐形瓶中，同時加入54mL正庚烷和6mL正辛醇，超聲震蕩使其溶解，隨后加入適量含0.5mol/L的KCL的磷酸鹽緩沖溶液，調(diào)節(jié)緩沖溶液使其pH為7.0，繼續(xù)超聲振蕩至CTAB完全溶解，溶液透明，得到反膠束溶液；
(3)反膠束溶液前萃蒜氨酸
取反膠束溶液60mL于錐形瓶中，加入0.4g蒜粉，在溫度為40°C下超聲提取30min后，以3000r/min離心20min，所得上清液即為蒜氨酸的前萃液，蒜氨酸提取率為1.49% ；
(4)KI溶液反萃取蒜氨酸
取前萃液60mL，向其中加入相同體積的含0.8 mol/L ΚΙ的磷酸鹽緩沖溶液進行反萃取，調(diào)節(jié)緩沖溶液pH為5.0，在溫度為40°C下反萃取30min，反萃取后離心分離得有機相和水相，水相中蒜氨酸反萃率為80.8% ；
(5)取出富含蒜氨酸的水相，用80%的乙醇沉淀，濃縮，真空干燥，得到蒜氨酸。
[0016]實施例2 (1)蒜粉的制備
取干燥蒜片，微波滅酶后在高速粉碎機上粉碎，粉碎后過80目篩，所得即為試驗所需蒜粉;
(2)反膠束溶液的配制
稱取1.09g十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，置于100mL錐形瓶中，同時加入54mL正庚烷和6mL正辛醇，超聲震蕩使其溶解，隨后加入適量含0.3mol/L的KCL磷酸鹽緩沖溶液，調(diào)節(jié)緩沖溶液使其pH為6.0，繼續(xù)超聲振蕩至CTAB完全溶解，溶液透明；
(3)反膠束溶液前萃蒜氨酸
取上述反膠束溶液60mL于錐形瓶中，加入1.0g蒜粉，在溫度為，25 °C下超聲提取40min后，以3000r/min離心20min，所得上清液即為蒜氨酸的前萃液，蒜氨酸提取率為
1.62% ；
(4)KI溶液反萃取蒜氨酸
取前萃液60mL，向其中加入相同體積的含0.8mol/L ΚΙ磷酸鹽緩沖溶液進行反萃取，調(diào)節(jié)緩沖溶液pH為4.0，在溫度為40°C下反萃取30min，反萃取后離心分離得有機相和水相，水相中蒜氨酸反萃率為80.8% ；
(5)取出富含蒜氨酸的水相，用80%的乙醇沉淀，濃縮，真空干燥，得到蒜氨酸。
[0017]實施例3
(1)蒜粉的制備
取干燥蒜片，微波滅酶后在高速粉碎機上粉碎，粉碎后過80目篩，所得即為試驗所需蒜粉;
(2)反膠束溶液的配制
稱取1.09g十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，置于100mL錐形瓶中，同時加入54mL正庚烷和6mL正辛醇，超聲震蕩使其溶解，隨后加入適量含0.5mol/L的KCL磷酸鹽緩沖溶液，調(diào)節(jié)緩沖溶液使其pH為6.0，繼續(xù)超聲振蕩至CTAB完全溶解，溶液透明；
(3)反膠束溶液前萃蒜氨酸
取上述反膠束溶液60mL于錐形瓶中，加入1.0g蒜粉，在溫度為50°C下超聲提取5min后，以3000r/min離心20min，所得上清液即為蒜氨酸的前萃液，蒜氨酸提取率為1.40%。
[0018](4) KI溶液反萃取蒜氨酸
取前萃液60mL，向其中加入相同體積的含0.8mol/L ΚΙ磷酸鹽緩沖溶液進行反萃取，調(diào)節(jié)緩沖溶液pH為6.0，在溫度為40°C下反萃取30min，反萃取后離心分離得有機相和水相，水相中蒜氨酸反萃率為80.8% ；
(5)取出富含蒜氨酸的水相，用80%的乙醇沉淀，濃縮，真空干燥，得到蒜氨酸。
【主權項】
1.一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)取干燥蒜片，微波滅酶后粉碎過篩； (2)取濃度為0.03-0.08mol/L的十六烷基三甲基溴化銨，向其中加入正庚烷、正辛醇和含有KCL的磷酸緩沖溶液，超聲震蕩至十六烷基三甲基溴化銨完全溶解，溶液呈透明后得到反膠束溶液，其中，KCL的濃度為0.2-0.5mol/L,磷酸緩沖溶液pH值為6.0-8.0 ; (3)向反膠束溶液中加入0.2-0.8g/30mL的蒜粉，在25_50°C下超聲提取5_40min后，離心分離，所得上清液為反膠束的前萃液； (4)向前萃液中加入含有KI的磷酸緩沖溶液進行反萃取，KI溶液濃度為0.5-1.0mol/L，磷酸鹽緩沖溶液pH為4.0-6.0，反萃取后離心分離得有機相和水相； (5)將水相用乙醇沉淀，濃縮，真空干燥，得到蒜氨酸。2.根據(jù)權利要求1所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(1)中選取過80目篩。3.根據(jù)權利要求1所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(2)中正庚烷和正辛醇的體積比為9:1。4.根據(jù)權利要求1或3所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(2)中十六烷基三甲基溴化銨的濃度為0.07mol/L, KCL的濃度為0.3mol/L，磷酸緩沖溶液pH值為7.0。5.根據(jù)權利要求1所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(3)中離心轉速為3000r/min，離心時間為20min。6.根據(jù)權利要求1或5所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(3)中蒜粉含量為0.5g/30mL，萃取溫度為40°C，萃取時間為30min。7.根據(jù)權利要求1所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(4)中加入含有KI的磷酸緩沖溶液的體積與前萃液的體積相等。8.根據(jù)權利要求1或7所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(4)中反萃取溫度為40°C，反萃取時間為30min。9.根據(jù)權利要求1或7所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(4)中KI濃度為0.8mol/L,磷酸鹽緩沖溶液pH值為5.0。10.根據(jù)權利要求1所述的一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，其特征在于:步驟(5)中水相沉淀選用體積分數(shù)為80%的乙醇。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種反膠束體系萃取蒜氨酸的方法，包括粉碎大蒜，制備反膠束溶液，前萃蒜氨酸，反萃取蒜氨酸，最后濃縮干燥制得蒜氨酸。本發(fā)明工藝簡單，蒜氨酸提取率高，與傳統(tǒng)方法相比節(jié)約水資源，降低能耗。
【IPC分類】C07C315/06, C07C317/48
【公開號】CN105399650
【申請?zhí)枴緾N201510942009
【發(fā)明人】崔波, 于瑞, 檀琮萍, 于濱, 盧艷敏
【申請人】齊魯工業(yè)大學
【公開日】2016年3月16日
【申請日】2015年12月16日