in;進(jìn)樣量：10ml;柱溫為室溫。接收含化合物II的洗脫液，濃縮干燥即得純 品。通過i-NMR譜、質(zhì)譜等進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證，解析所得數(shù)據(jù)見表2。
[0098]實(shí)施例5替格瑞洛氧化雜質(zhì)I、II在替格瑞洛有關(guān)物質(zhì)檢查時(shí)作為雜質(zhì)對照品的 應(yīng)用
[0099] 色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以磷酸鹽緩沖液(1)_乙腈（90:10) 為流動(dòng)相A，以磷酸鹽緩沖液(2)_乙腈（30:70)為流動(dòng)相B，按表3進(jìn)行梯度洗脫；流速為 1. 0ml/min，柱溫為55°C，檢測波長為242nm。
[0100] 實(shí)驗(yàn)步驟：精密稱定替格瑞洛待測品10.oimg，至100mL容量瓶中，加35 %乙腈 溶解并稀釋至刻度，作為供試品溶液；精密量取氧化雜質(zhì)I對照品10. 17mg和氧化雜質(zhì)II 對照品10. 24mg，至100mL容量瓶中，用35%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶 液。精密稱取替格瑞洛對照品50. 12mg、氧化雜質(zhì)I50. 32mg、氧化雜質(zhì)II50. 23mg，加35% 乙腈溶解并稀釋制成每lml中分別含替格瑞洛501. 2μg、氧化雜質(zhì)I503. 2μg、氧化雜質(zhì)II502. 3μg的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。精密量取系統(tǒng)適用性溶液10μ1，注入液相 色譜儀，記錄色譜圖，理論板數(shù)以替格瑞洛計(jì)應(yīng)不低于10000,替格瑞洛峰的拖尾因子應(yīng)不 大于1.5,替格瑞洛與各雜質(zhì)間的分離度應(yīng)符合要求。精密量取對照品溶液及供試品溶液各 10μ1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
[0101] 氧化雜質(zhì)化合物作為有關(guān)物質(zhì)檢查時(shí)的對照品測定替格瑞洛的有關(guān)物質(zhì)含量檢 查結(jié)果如下：
[0102]
[0103] 如上表所示結(jié)果可知，在替格瑞洛的成品中均有相關(guān)氧化雜質(zhì)的存在。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種替格瑞洛氧化物I和氧化物II的制備方法，其特征在于，反應(yīng)路線如下：具體反應(yīng)步驟如下： (a)將 2- [ [ (3AR，4S，6R，6A巧-6- [7-氯-5-(丙硫基）-3H-1，2, 3-Ξ氮挫并[4, 5-D]喀 晚-3-基]四氨-2, 2-二甲基-4H-環(huán)戊締并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]乙醇溶于非質(zhì) 子性有機(jī)溶劑中與氧化劑發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)畢，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)； 化）向步驟（a)的化合物V、VI的有機(jī)溶劑中加入（lR，2S)-2-(3,4-二氣苯基）環(huán)丙胺 (時(shí)-扁桃酸鹽，滴加堿性物質(zhì)的水溶液攬拌反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，生成的化合物III、 IV溶于機(jī)相中； (C)有機(jī)相中滴加濃鹽酸的有機(jī)溶劑，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，分別濃縮干燥水相和有機(jī) 相，得淡黃色固體和白色固體1;將白色固體1后處理得化合物I純品；將淡黃色固體后處 理得化合物II純品； 其中，步驟（a)所述非質(zhì)子性有機(jī)溶劑選自二氯甲燒、氯仿、苯、甲苯、二甲苯中的一 種，所述氧化劑選自間氯過氧苯甲酸、重銘酸鐘、高儘酸鐘、氯酸鐘、過氧化氨中的一種； 步驟化）所述堿性物質(zhì)選自碳酸鐘、碳酸鋼、氨氧化鋼、氨氧化鐘中的一種； 步驟（C)所述有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇丙酬、四氨巧喃、二甲酸、乙酸 中的一種。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替格瑞洛氧化物的制備方法，其特征在于，具體步驟如 下： (a)將 2- [ [ (3AR，4S，6R，6A巧-6- [7-氯-5-(丙硫基）-3H-1，2, 3-Ξ氮挫并[4, 5-D]喀 晚-3-基]四氨-2, 2-二甲基-4H-環(huán)戊締并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]乙醇溶于甲苯 中，滴加間氯過氧苯甲酸的甲苯溶液使其氧化； 化）向反應(yīng)液中加入加，25)-2-(3,4-二氣苯基）環(huán)丙胺佩-扁桃酸鹽，滴加1(2(：〇3水 溶液攬拌反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，取甲苯相用于下一步反應(yīng)； (C)甲苯相中滴加濃鹽酸的甲醇溶液，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，分別濃縮干燥水相和有機(jī) 相，得淡黃色固體和白色固體1 ; (d) 將白色固體1用甲醇加熱溶解后，降溫析出白色固體2,抽濾即得化合物I純品； (e) 將淡黃色固體用水在室溫下打漿，抽濾得白色固體3 ; 訊將白色固體3在真空干燥箱中烘干，后使用制備液相分離得化合物II純品。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替格瑞洛氧化物的制備方法，其特征在于，具體步驟如 下： (a)將 2-[[(3AR，4S，抓，SA巧-e-[7-氯-S-(丙硫基）-抓-1，2, 3_Ξ氮挫并[4,S-D] 喀晚-3-基]四氨-2, 2-二甲基-4H-環(huán)戊締并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]乙醇溶于甲 苯中，冰水浴冷卻至5°C~-5°C，滴加2~5倍摩爾當(dāng)量的間氯過氧苯甲酸甲苯溶液，保溫 0°C~-5°C攬拌1-5小時(shí)； 化）向反應(yīng)液中加入0.5~2倍摩爾當(dāng)量的（1R，2巧-2-(3,4-二氣苯基）環(huán)丙胺 (時(shí)-扁桃酸鹽，滴加0.6~Imol/L的K2CO3水溶液攬拌反應(yīng)5~8小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后靜置 分層，取甲苯相用于下一步反應(yīng)； (C)甲苯相中滴加0. 2~0. 5mol/L濃鹽酸的甲醇溶液，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，分別濃縮 蒸干水相和有機(jī)相，得淡黃色固體和白色固體1 ; (d) 將白色固體1在真空干燥箱中烘干，然后用60~80倍量的甲醇加熱回流溶解，室 溫環(huán)境下降溫至40~50°C，抽濾得化合物I純品； (e) 將淡黃色固體用5~8倍重量的水室溫打漿1~3小時(shí)，抽濾得白色固體3 ; 訊將白色固體3在真空干燥箱中烘干，后使用制備液相分離。審恪液相分離條件 十八烷基鍵合硅膠為填充劑（250巧0mm，10μm) 乙臘-水（體積比為：3~5:7~5)為 流動(dòng)相；檢測波長為242皿；流速：50~80ml/min;進(jìn)樣量：10ml;柱溫為室溫。接收含化合 物II的洗脫液，濃縮干燥即得純品。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替格瑞洛氧化物的制備方法，其特征在于，具體反應(yīng)步 驟如下： (a)將 2- [ [ (3AR，4S，6R，6A巧-6- [7-氯-5-(丙硫基）-3H-1，2, 3-Ξ氮挫并[4, 5-D]喀 晚-3-基]四氨-2, 2-二甲基-4H-環(huán)戊締并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]乙醇溶于甲苯 中，冰水浴冷卻至-2°C，滴加2~4倍摩爾當(dāng)量的間氯過氧苯甲酸甲苯溶液，保溫0°C攬拌 2小時(shí)； 化）向反應(yīng)液中加入0.5~1倍摩爾當(dāng)量的（1R，2巧-2-(3,4-二氣苯基）環(huán)丙胺 (時(shí)-扁桃酸鹽，滴加0.8mol/L的K2CO3水溶液攬拌反應(yīng)6小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，取甲 苯相用于下一步反應(yīng)； (C)甲苯相中滴加0. 3mol/L濃鹽酸的甲醇溶液，反應(yīng)結(jié)束后靜置分層，分別濃縮蒸干 水相和有機(jī)相，得淡黃色固體和白色固體1; (d) 將白色固體1在真空干燥箱中烘干，然后用70倍量的甲醇加熱回流溶解，室溫環(huán)境 下降溫至45~50°C，抽濾得化合物I純品； (e) 將淡黃色固體用7倍重量的水室溫打漿2小時(shí)，抽濾得白色固體3 ; 訊將白色固體3在真空干燥箱中烘干，后使用制備液相分離。審恪液相分離條件 十八烷基鍵合硅膠為填充劑（250巧0mm，10μπι) 乙臘-水（體積比為4 :6)為流動(dòng)相；檢 測波長為242皿；流速：60ml/min;進(jìn)樣量：10ml;柱溫為室溫。接收含化合物II的洗脫液， 濃縮干燥即得純品。5. 替格瑞洛氧化物的HPLC檢測方法，其特征在于，具體的色譜條件如下： 填充劑十八烷基鍵合硅膠； 流動(dòng)相A:憐酸鹽緩沖液-乙臘（80~90:10~20)，其中，憐酸鹽緩沖液制備方法一一 取1.OmoVI憐酸二氨鋼溶液（用憐酸調(diào)抑值至3. 0) 10ml，加水至900ml，搖勻； 流動(dòng)相B:憐酸鹽緩沖液-乙臘（20~30:60~70)，其中，憐酸鹽緩沖液制備方法一一 取1.OmoVI憐酸二氨鋼溶液（用憐酸調(diào)抑值至3. 0) 10ml，加水至300ml，搖勻； 檢測波長：237~245nm;流速：1.Oml/min;進(jìn)樣量：10~20μ1 ;柱溫：40~55°C。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的替格瑞洛氧化物的HPLC檢測方法，其特征在于，具體的色譜 條件如下： 填充劑：十八烷基鍵合硅膠為填充劑； 流動(dòng)相A:憐酸鹽緩沖液-乙臘巧0:10)，其中，憐酸鹽緩沖液制備方法一一取l.Omol/1憐酸二氨鋼溶液（用憐酸調(diào)抑值至3.0) 10ml，加水至900ml，搖勻； 流動(dòng)相B:憐酸鹽緩沖液-乙臘（30:70)，其中，憐酸鹽緩沖液制備方法一一取1.Omol/1憐酸二氨鋼溶液（用憐酸調(diào)抑值至3.0) 10ml，加水至300ml，搖勻； 梯度程序：檢測波長為242皿；流速：1.Oml/min;進(jìn)樣量：20μ1 ;柱溫：55°C。7. 替格瑞洛氧化物I和氧化物II在替格瑞洛有關(guān)物質(zhì)檢查時(shí)作為雜質(zhì)對照品的用途。
【專利摘要】本發(fā)明提供替格瑞洛的氧化物(1S,2S,3R,5S)-3-[7-{[(1R,2S)-2-(3.4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-(丙基亞硫酰基)-3H-[1，2，3]三唑并-[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥基乙氧基)環(huán)戊烷-1,2-二醇和(1S,2S,3R,5S)-3-[7-{[(1R,2S)-2-(3.4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-(丙基硫?；?-3H-[1，2，3]三唑并-[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥基乙氧基)環(huán)戊烷-1,2-二醇的制備方法、檢測方法和該氧化物在替格瑞洛質(zhì)量控制研究中的應(yīng)用。
【IPC分類】G01N30/02, C07D487/04
【公開號】CN105237540
【申請?zhí)枴緾N201510605513
【發(fā)明人】李志華, 吳艦, 錢修文, 柴雨柱, 朱謐, 徐丹, 朱春霞, 田舟山
【申請人】南京正大天晴制藥有限公司
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年9月21日