用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于功能高分子材料領(lǐng)域，特別是一種用分子印跡聚合物從萃取液中吸附 林可霉素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 林可霉素又稱潔霉素，是由美國人Mason等從鏈霉菌林可變種培養(yǎng)液中獲得的一 類高效廣譜的林可胺類堿性抗生素，對(duì)革蘭氏陽性菌（如葡萄球菌、溶血性鏈球菌等）有 較強(qiáng)的抗菌作用，同時(shí)對(duì)支原體也有抑制作用。此外，林可霉素還具有生物醫(yī)藥這一特性， 以及抗菌譜廣、抗菌力強(qiáng)、毒性低、給藥方便（如可口服、靜脈滴注或肌肉注射）等優(yōu)點(diǎn)， 在醫(yī)學(xué)上應(yīng)用較為廣泛，可以用來治療革蘭氏陽性球菌所引起的骨髓炎、敗血癥、軟組織感 染、五官感染及呼吸道感染等。目前工業(yè)中提取林可霉素的方法主要為溶劑萃取法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法。
[0004] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，采用技術(shù)方案如下：
[0005] 用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法，包括以下步驟：
[0006] 1)以苯乙烯為聚合單體，在分散劑的作用下，熱聚合得到聚苯乙烯微球并作為種 球；
[0007] 2)以此種球?yàn)槿苊浐诵模谌苊泟┑淖饔孟略龃笃潴w積并通過溶劑的作用形成多 孔結(jié)構(gòu)；
[0008] 3)在多孔結(jié)構(gòu)的表面使林可霉素與功能單體進(jìn)行結(jié)合，并引發(fā)再次的聚合，在交 聯(lián)劑的作用下形成多孔網(wǎng)狀分子印跡聚合物微球；
[0009] 4)將待吸附的林可霉素萃取液加入以分子印跡聚合物微球填裝的吸附柱內(nèi)進(jìn)行 動(dòng)態(tài)吸附。
[0010] 按上述方案，所述動(dòng)態(tài)吸附過程溫度20~30°C，進(jìn)料流速0. 2~0. 7ml/min，高徑 比3: (1~5)，進(jìn)料濃度604~1926mg/L。
[0011] 按上述方案，所述待吸附的林可霉素萃取液按以下方法制備而來：
[0012] 調(diào)節(jié)pH到10~11的堿化林可霉素發(fā)酵液，以及萃取液氯仿，充分振搖、靜置分層 后取下層液體。
[0013] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0014] 選用具有專一性吸附能力的分子印跡聚合物來吸附林可霉素，可有效地簡(jiǎn)化吸附 分離的操作流程，減少消耗；分子印跡聚合物穩(wěn)定性好，可以多次再生循環(huán)使用，較為經(jīng)濟(jì)。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，但是本發(fā)明不限于以下實(shí)施例。
[0016] 林可霉素分子印跡聚合物的制備過程如下：
[0017] 1)將苯乙烯單體與無水乙醇混合，并加入聚乙烯吡咯烷酮與偶氮二異丁腈，其中 控制苯乙烯與乙醇的體積比為I: (1~1. 4)，偶氮二異丁腈與聚乙烯吡咯烷酮的質(zhì)量比為 1: (5~7. 5);在隔絕空氣的條件下60~70°C攪拌反應(yīng)20~24h，分離、干燥得到成品聚苯 乙烯微球；
[0018] 2)取步驟1)聚苯乙烯微球與十二烷基硫酸鈉均勻分散到超純水中，攪拌溶脹，其 中聚苯乙烯微球與十二烷基硫酸鈉的質(zhì)量比為（4~5) :1;再加入偶氮二異丁腈、鄰苯二甲 酸二丁酯與甲苯攪拌溶脹20~24h，其中偶氮二異丁腈、鄰苯二甲酸二丁酯、甲苯的質(zhì)量比 為 1: (5. 2 ~6. 3) : (8. 7 ~9. 6);
[0019] 3)取模板分子林可霉素、甲基丙烯酸、二甲基丙烯酸乙二醇酯、十二烷基硫酸鈉、 聚乙烯醇、辛醇與氯仿低溫混合均勻后加入上述裝置內(nèi)，繼續(xù)進(jìn)行攪拌20~24h，其中控制 模板分子，功能單體，交聯(lián)劑三者物質(zhì)的量之比為1: (4~6) : (20~25)，分散劑與乳化劑的 質(zhì)量比為1: (4~5)，致孔劑體積比為（5~7) : (9~10)。
[0020] 4)熱引發(fā)聚合制備林可霉素分子印跡聚合物
[0021] 取分散劑聚乙烯醇溶于超純水中，其中控制聚乙烯醇水溶液濃度為8~10g/l。此 體系加入上述反應(yīng)裝置中，再升溫至60~70°C并反應(yīng)20~24h，得到分子印跡聚合物； [0022] 5)模板分子的去除
[0023] 將所制得的印跡聚合物離心分離，洗滌干燥后，將其以甲醇與醋酸的混合溶劑清 洗20~24h，再用純甲醇與超純水反復(fù)離心洗滌、干燥，獲得最終的成品分子印跡聚合物。
[0024] 林可霉素的吸附過程如下：
[0025] 調(diào)節(jié)pH到10~11的堿化林可霉素發(fā)酵液，以及萃取液氯仿，充分振搖、靜置分層 后取下層液體。
[0026] 將待吸附的林可霉素萃取液加入以分子印跡聚合物微球填裝的吸附柱內(nèi)進(jìn)行動(dòng) 態(tài)吸附。
[0027] 其中，動(dòng)態(tài)吸附過程溫度20~30°C，進(jìn)料流速0. 2~0. 7ml/min，高徑比3: (1~ 5)，進(jìn)料濃度604~1926mg/L。
[0028] 實(shí)施例1
[0029] 在分液漏斗中，加入pH= 10. 5的堿化林可霉素發(fā)酵液50ml，以及50ml氯仿，充分 振搖混合lOmin，靜置分層后取下層液體，上層液體再以同樣體積的氯仿反復(fù)萃取2次，得 到一定量待吸附的林可霉素氯仿萃取液備用。
[0030] 取規(guī)格為?2.0X30cm玻璃吸附柱1支，均勻裝填分子印跡聚合物使高徑比為 3:5,吸附柱以膠管與蠕動(dòng)栗相連。取林可霉素濃度為1190mg/L的氯仿萃取液200ml，于 25~30°C溫度條件下將其用蠕動(dòng)栗在恒定的流速下通入吸附柱，每隔15min收集出口處流 出液lml，烘干并以甲醇定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其中林可霉素的濃度，直至檢測(cè)濃度 與初始濃度相近且不再變化時(shí)為止。計(jì)算吸附過程的各項(xiàng)物理參數(shù)，其數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。
[0031] 實(shí)施例2
[0032] 在分液漏斗中，加入pH= 10. 8的堿化林可霉素發(fā)酵液50ml，以及40ml氯仿，充分 振搖混合9min，靜置分層后取下層液體，上層液體再以同樣體積的氯仿反復(fù)萃取3次，得到 一定量待吸附的林可霉素氯仿萃取液備用。
[0033] 取規(guī)格為?2.0X30cm玻璃吸附柱1支，均勻裝填分子印跡聚合物使高徑比為 3:4,吸附柱以膠管與蠕動(dòng)栗相連。取林可霉素濃度為1926mg/L的氯仿萃取液150ml，于 20~28°C溫度條件下將其用蠕動(dòng)栗在恒定的流速下通入吸附柱，每隔15min收集出口處流 出液lml，烘干并以甲醇定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其中林可霉素的濃度，直至檢測(cè)濃度 與初始濃度相近且不再變化時(shí)為止。計(jì)算吸附過程的各項(xiàng)物理參數(shù)，其詳細(xì)的數(shù)據(jù)結(jié)果見 表1。
[0034] 實(shí)施例3
[0035] 在分液漏斗中，加入pH= 10. 2的堿化林可霉素發(fā)酵液45ml，以及50ml氯仿，充分 振搖混合5min，靜置分層后取下層液體，上層液體再以同體積的氯仿反復(fù)萃取3次，得到一 定量待吸附的林可霉素氯仿萃取液備用。
[0036] 取規(guī)格為?2.0X30cm玻璃吸附柱1支，均勻裝填分子印跡聚合物使高徑比為 3:5，吸附柱以膠管與蠕動(dòng)栗相連。取林可霉素濃度為604mg/L的氯仿萃取液220ml，于22~ 30°C溫度條件下將其用蠕動(dòng)栗以0. 7ml/min的流速通入吸附柱，每隔15min收集出口處流 出液lml，烘干并以甲醇定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其中林可霉素的濃度，直至檢測(cè)濃度 與初始濃度相近且不再變化時(shí)為止。計(jì)算吸附過程的各項(xiàng)物理參數(shù)，其詳細(xì)的數(shù)據(jù)結(jié)果見 表1。
[0037] 實(shí)施例4
[0038] 在分液漏斗中，加入pH= 10的堿化林可霉素發(fā)酵液40ml，以及50ml氯仿，充分振 搖混合8min，靜置分層后取下層液體，上層液體再以同體積的氯仿反復(fù)萃取2次，得到一定 量待吸附的林可霉素氯仿萃取液備用。
[0039] 取規(guī)格為?2. 5X30cm玻璃吸附柱1支，均勻裝填分子印跡聚合物使高徑比為 3:2,吸附柱以膠管與蠕動(dòng)栗相連。取林可霉素濃度為691mg/L的氯仿萃取液170ml，于20~ 25°C溫度條件下將其用蠕動(dòng)栗在恒定的流速下通入吸附柱，每隔15min收集出口處流出液 lml，烘干并以甲醇定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其中林可霉素的濃度，直至檢測(cè)濃度與初 始濃度相近且不再變化時(shí)為止。計(jì)算吸附過程的各項(xiàng)物理參數(shù)，其詳細(xì)的數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。
[0040] 實(shí)施例5
[0041 ] 在分液漏斗中，加入pH= 11的堿化林可霉素發(fā)酵液50ml，以及45ml氯仿，充分振 搖混合6min，靜置分層后取下層液體，上層液體再以同體積的氯仿反復(fù)萃取3次，得到一定 量待吸附的林可霉素氯仿萃取液備用。
[0042] 取規(guī)格為?3.0X30cm玻璃吸附柱1支，均勻裝填分子印跡聚合物使高徑比為 3:1，吸附柱以膠管與蠕動(dòng)栗相連。取林可霉素濃度為650mg/L的氯仿萃取液150ml，于23~ 29°C溫度條件下將其用蠕動(dòng)栗在恒定的流速下通入吸附柱，每隔15min收集出口處流出液 lml，烘干并以甲醇定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其中林可霉素的濃度，直至檢測(cè)濃度與初 始濃度相近且不再變化時(shí)為止。計(jì)算吸附過程的各項(xiàng)物理參數(shù)，其詳細(xì)的數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。
[0043] 表 1
[0044]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 以苯乙烯為聚合單體，在分散劑的作用下，熱聚合得到聚苯乙烯微球并作為種球； 2) 以此種球?yàn)槿苊浐诵模谌苊泟┑淖饔孟略龃笃潴w積并通過溶劑的作用形成多孔結(jié) 構(gòu)； 3) 在多孔結(jié)構(gòu)的表面使林可霉素與功能單體進(jìn)行結(jié)合，并引發(fā)再次的聚合，在交聯(lián)劑 的作用下形成多孔網(wǎng)狀分子印跡聚合物微球； 4) 將待吸附的林可霉素萃取液加入以分子印跡聚合物微球填裝的吸附柱內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài) 吸附。2. 如權(quán)利要求1所述的用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法，其特征在 于所述動(dòng)態(tài)吸附過程溫度20~30°C，進(jìn)料流速0. 2~0. 7ml/min，高徑比3: (1~5)，進(jìn)料 濃度 604 ~1926mg/L。3. 如權(quán)利要求1所述的用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法，其特征在 于所述待吸附的林可霉素萃取液按以下方法制備而來： 調(diào)節(jié)pH到10~11的堿化林可霉素發(fā)酵液，以及萃取液氯仿，充分振搖、靜置分層后取 下層液體。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用分子印跡聚合物從萃取液中吸附林可霉素的方法。以苯乙烯為聚合單體，在分散劑的作用下，熱聚合得到聚苯乙烯微球并作為種球；以此種球?yàn)槿苊浐诵?，在溶脹劑的作用下增大其體積并通過溶劑的作用形成多孔結(jié)構(gòu)；在多孔結(jié)構(gòu)的表面使林可霉素與功能單體進(jìn)行結(jié)合，并引發(fā)再次的聚合，在交聯(lián)劑的作用下形成多孔網(wǎng)狀分子印跡聚合物微球；將待吸附的林可霉素萃取液加入以分子印跡聚合物微球填裝的吸附柱內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附。選用具有專一性吸附能力的分子印跡聚合物來吸附林可霉素，可有效地簡(jiǎn)化吸附分離的操作流程，減少消耗；分子印跡聚合物穩(wěn)定性好，可以多次再生循環(huán)使用，較為經(jīng)濟(jì)。
【IPC分類】C07H1/06, C07H15/16
【公開號(hào)】CN105001280
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510387912
【發(fā)明人】張佑紅, 鐘季良, 李衛(wèi)朋, 諶頡
【申請(qǐng)人】武漢工程大學(xué)
【公開日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年7月3日