一種含六甲基苯環(huán)和硝基苯結(jié)構(gòu)的黃原酸酯類化合物、其制備方法及用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及2型糖尿病治療的藥物領(lǐng)域。更具體地講，本發(fā)明涉及對(duì)2型糖尿病 具有治療作用的一種含六甲基苯環(huán)和硝基苯結(jié)構(gòu)的黃原酸酯類AMPK激活劑、其制備方法， 以及在制藥上的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是由多病因引起的疾病過(guò)程，影響到全球6 %的人口。預(yù)計(jì)到2025年，患病 人數(shù)會(huì)再增加一倍達(dá)到3億。糖尿病的最重要的臨床病理特征是血漿葡萄糖（血糖）濃度 增高。血糖濃度增高是導(dǎo)致糖尿病的各種臨床癥狀的主要原因。未控制的高血糖導(dǎo)致諸多 糖尿病并發(fā)癥，如增加微血管和大血管疾病風(fēng)險(xiǎn)，包括腎病，神經(jīng)病，視網(wǎng)膜病，高血壓，腦 缺血和冠心病等。因此，降低血糖是治療和預(yù)防糖尿病及其并發(fā)癥的關(guān)鍵。
[0003] AMP (腺苷一磷酸）活化的蛋白激酶（AMPK)作為一種重要的蛋白激酶參與多種代 謝過(guò)程。AMPK在調(diào)節(jié)肌體能量代謝的平衡方面起總開關(guān)作用。在肌肉和肝臟中，AMPK的活 化增強(qiáng)了葡萄糖的攝取、脂肪酸氧化作用和胰島素敏感性，并且減少了葡萄糖、膽固醇和甘 油三酯的產(chǎn)生。因此，AMPK及其信號(hào)通路是2型糖尿病有效藥物作用靶點(diǎn)。事實(shí)上，目前 在臨床上廣泛應(yīng)用的雙胍類降糖藥，如二甲雙胍、苯乙雙胍和丁福明治就是AMPK激活劑。 其中二甲雙胍是目前臨床上應(yīng)用最廣泛的一線抗糖尿病藥物，不僅是首選的糖尿病治療藥 物而且對(duì)正常血糖無(wú)影響。這表明AMPK是II型糖尿病藥物治療的關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。但是， 目前該在臨床上廣泛使用的雙胍類AMPK激活劑的一個(gè)嚴(yán)重的副作用是會(huì)導(dǎo)致乳酸性酸中 毒。乳酸性酸中毒是一種嚴(yán)重的代謝類疾病，一旦發(fā)生將危及生命。正是由于可導(dǎo)致乳酸 性酸中毒，苯乙雙胍等雙胍類AMPK激活劑在歐美等國(guó)已被終止臨床應(yīng)用。雖然二甲雙胍導(dǎo) 致乳酸性酸中毒的幾率較苯乙雙胍低，但在口服降糖藥中，其導(dǎo)致嚴(yán)重毒副反應(yīng)及導(dǎo)致死 亡的臨床報(bào)告數(shù)最多，因此，研發(fā)新型、非雙胍類AMPK激活劑作為糖尿病的治療藥物具有 及其重要的臨床意義。
[0004] 本發(fā)明公開了一種含六甲基苯環(huán)和硝基苯結(jié)構(gòu)的黃原酸酯類AMPK激活劑，該化 合物可用于制備治療2型糖尿病的藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種具有式I的良好活性的AMPK激動(dòng)劑。
[0006] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備具有式I的化合物的方法。
[0007] 本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供含有式I的化合物作為有效成分在治療2型糖尿病方 面的應(yīng)用。
[0008] 現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
進(jìn)行具體描述。
[0009] 本發(fā)明具有式I的化合物具有下述結(jié)構(gòu)式：
[0010]
[0013] 化合物II在路易斯酸催化下與化合物III發(fā)生反應(yīng)，得到化合物IV ;化合物IV經(jīng) BX3處理脫去甲氧基上的甲基，得到VI ;化合物VI被先在堿存在下與CS 2反應(yīng)，得到對(duì)應(yīng)的 黃原酸鹽，后者再與后加入的化合物VII發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物I ;其中，X = Br或者 Clo
[0014] 本發(fā)明所述式I化合物具有AMPK激活作用，可作為有效成分用于制備2型糖尿病 治療藥物。本發(fā)明所述式I化合物的活性是通過(guò)受體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證的。
[0015] 本發(fā)明的式I化合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量約在 Img-1000 mg/人范圍內(nèi)，分為一次或數(shù)次給藥。實(shí)際服用本發(fā)明式I化合物的劑量可由醫(yī)生 根據(jù)有關(guān)的情況來(lái)決定。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。需要說(shuō)明的是，下述實(shí)施例僅是用于 說(shuō)明，而并非用于限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)所做出的各種變化均應(yīng) 在本申請(qǐng)權(quán)利要求所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0017] 實(shí)施例1化合物I的合成
[0018]
[0019] Α·化合物IV-I的合成
[0020] 化合物 II (I. 48g, lOmmol)和化合物 III-l (2. Olg, lOmmol)溶于 20mL 干燥的 CH2Cl2*，室溫下攪拌，加入無(wú)水AlCl 3(1. 33g, IOmmol)，而后反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò) 夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取， 合并萃取相，依次用1 %稀鹽酸和鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物IV-1，白色固體。ESI-MS，m/z = 314([M+H]+)。
[0021] Β·化合物V-I的合成
[0022] 化合物IV-I (I. 88g，6mmol)溶于15mL干燥的CH2ClA，氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷卻到-50°C， 攪拌，用注射器慢慢滴加 1.0 M的BCl3 (10mL，lOmmol)的CH2Cl2溶液，滴加完畢后，反應(yīng)混合 物逐漸升溫到室溫，并在室溫下攪拌1小時(shí)，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL 冰水中，攪拌，用CH2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除 去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物V-1，白色 固體。ESI-MS，m/z = 300([M+H]+)。
[0023] C. VI-I 的合成
[0024] 化合物V-l(l. 20g，4mmol)溶于IOmL THF中，室溫下攪拌，力卩入 Na0H(0. 40g，lOmmol)，室溫下攪拌30分鐘，而后加入（R)-環(huán)氧丙烷（0. 29g，5mmol)，所得 反應(yīng)混合物而后升溫回流12小時(shí)，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入IOOmL冰水中， 攪拌，用CH 2Cl2(60mLX3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥 劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物VI-1，白色固體。 ESI-MS，m/z = 358([M+H]+) 〇
[0025] D.化合物I的合成
[0026] 化合物￥1-1(0.718,2臟〇1)溶于101^干燥的1'冊(cè)中，室溫下攪拌，加入60% NaH(0. 40g, lOmmol)，繼續(xù)攪拌30分鐘，而后加入干燥的CS2(0. 23g, 3mmol),繼續(xù)攪拌30分 鐘，最后加入化合物VII-I (0. 40g, 3mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn) 反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入IOOmL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相， 用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物 使用柱層析純化，得到化合物I，白色固體。ESI-MS，m/z = 530([M+H]+)。
[0027] 實(shí)施例2參比化合物D-I的合成
[0028] 為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明化合物的良好效果，本申請(qǐng)記載了同為申請(qǐng)人發(fā)明的、尚未 公開的化合物D-I，其結(jié)構(gòu)如下：
[0032] A.化合物IV-2的合成
[0033] 化合物 II (I. 48g, IOmmol)和化合物 III-2 (I. 57g, IOmmol)溶于 20mL 干燥的 CH2Cl2*，室溫下攪拌，加入無(wú)水AlCl 3(1. 33g, IOmmol)，而后反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò) 夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取， 合并萃取相，依次用1 %稀鹽酸和鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物IV-2,白色固體。ESI-MS，m/z = 269([M+H]+)。
[0034] B.化合物V-2的合成
[0035] 化合物IV-2(1. 61g，6mmol)溶于15mL干燥的012(：12中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷卻到-50°C， 攪拌，用注射器慢慢滴加 1.0 M的BCl3 (10mL，lOmmol)的CH2Cl2溶液，滴加完畢后，反應(yīng)混合 物逐漸升溫到室溫，并在室溫下攪拌1小時(shí)，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL 冰水中，攪拌，用CH2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除 去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物V-2,白色 固體。ESI-MS，m/z = 255([M+H]+)。
[0036] a VI-2 的合成
[0037] 化合物V-2(1.02g，4mmol)溶于IOmL THF中，室溫下攪拌，力卩入 Na0H(0. 40g，lOmmol)，室溫下攪拌30分鐘，而后加入（R)-環(huán)氧丙烷（0. 29g，5mmol)，所得 反應(yīng)混合物而后升溫回流12小時(shí)，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入IOOmL冰水中， 攪拌，用CH 2Cl2(60mLX3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥 劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合物VI-2,白色固體。 ESI-MS，m/z = 313([M+H]+) 〇
[0038] D.化合物D-I的合成
[0039] 化合物VI-2(0. 62g，2mmol)溶于IOmL干燥的THF中，室溫下攪拌，加入60% NaH(0. 40g, IOmmol)，繼續(xù)攪拌30分鐘，而后加入干燥的CS2(0. 23g, 3mmol),繼續(xù)攪拌30分 鐘，最后加入化合物VII-I (0. 40g, 3mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，TLC跟蹤發(fā)現(xiàn) 反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入IOOmL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相， 用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物 使用柱層析純化，得到化合物D-1，白色固體。ESI-MS，m/z = 485([M+H]+)。
[0040] 實(shí)施例3化合物體外對(duì)AMPK的激活作用
[0041] 在大腸桿菌中表達(dá)人重組AMPK酶并在酶活性測(cè)定之前在體外用LKBl重新活化。 使用兩種基于熒光的技術(shù)檢測(cè)AMPK酶活性（α-篩選和Delfia)并在微孔板（分別包含 25mM Tris/HCl 緩沖液、ρΗ7· 5、含有 100 μΜ ATP/50mM 的！fepes 緩沖液，25mM Tris/HCl 緩 沖液、pH7. 4、含有125 μΜ ATP)上在合成的膚底物（AMARAASAAALARRR，即〃AMARAA〃膚）和 連續(xù)稀釋的激活劑存在下進(jìn)行。通過(guò)加入AMPK(50-100ng)引發(fā)反應(yīng)?；旌虾螅瑢遄釉谑?溫下孵育30分鐘。通過(guò)使用抗磷酸化絲氨酸的抗體以測(cè)定摻入AMARAA中的磷酸量來(lái)檢測(cè) 酶活性?；钚砸詫?duì)照（基礎(chǔ)活性表示為100)的百分率（％)表示。
[0042] 測(cè)試結(jié)果見下表。
[0043]
[0044] 從上表結(jié)果可以看出，本發(fā)明的化合物對(duì)AMPK具有很強(qiáng)的激活作用，可以作為制 備治療2型糖尿病的的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 具有通式I結(jié)構(gòu)的化合物，2. 合成權(quán)利要求1所述化合物的方法：化合物II在路易斯酸催化下與化合物III發(fā)生反應(yīng)，得到化合物IV;化合物IV經(jīng)BX3 處理脫去甲氧基上的甲基，得到VI;化合物VI被先在堿存在下與CS2反應(yīng)，得到對(duì)應(yīng)的黃原 酸鹽，后者再與后加入的化合物VII發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物I;其中，X=Br或者C1。3. 權(quán)利要求1所述化合物在制備治療2型糖尿病藥物方面的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及與2型糖尿病相關(guān)的藥物領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種含六甲基苯環(huán)和硝基苯結(jié)構(gòu)的黃原酸酯類AMPK激活劑、其制備方法、以及在制備2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
【IPC分類】A61P3/10, A61K31/381, C07D333/18
【公開號(hào)】CN104945369
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510351839
【發(fā)明人】鄧潤(rùn)卿
【申請(qǐng)人】佛山市賽維斯醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月30日
【申請(qǐng)日】2015年6月23日