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基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法與流程

文檔序號(hào):40656544發(fā)布日期:2025-01-10 19:08閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述方法是先利用基因操作將外源基因?qū)爰倚Q基因組內(nèi)并培育成新轉(zhuǎn)基因家蠶品種,然后再在蠶體外針對(duì)家蠶分泌出的蠶絲物質(zhì)進(jìn)行理化處理,進(jìn)而改善蠶絲性能。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述方法具體是先利用轉(zhuǎn)基因或者基因編輯的基因操作技術(shù)將外源基因?qū)爰倚Q基因組或同源整合到家蠶基因組特定位點(diǎn),再培育獲得穩(wěn)定遺傳的新型家蠶品種,合成分泌復(fù)合絲蛋白,然后利用離子交聯(lián)方法或者底物酶促反應(yīng)方法對(duì)復(fù)合絲蛋白進(jìn)行理化處理以改變復(fù)合絲蛋白的性質(zhì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述外源基因是指家蠶表皮蛋白基因,具體為rr-1、rr-2、rr-3、cpg、cph或glycine-rich中的一種基因:

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述基因操作是將家蠶表皮蛋白基因?qū)爰倚Q基因組中,或同源整合到家蠶的絲素重鏈基因、絲素輕鏈基因、絲素p25基因、絲膠1基因中。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述理化處理是將復(fù)合絲蛋白在體外進(jìn)一步處理,具體是復(fù)合絲蛋白在體外或在繅制過(guò)程中添加鋅金屬離子,使復(fù)合絲蛋白分子發(fā)生交聯(lián),進(jìn)而改善復(fù)合絲性能。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述理化處理是將復(fù)合絲蛋白在體外進(jìn)一步處理,具體是復(fù)合絲蛋白在體外或在繅制過(guò)程中添加底物進(jìn)行酶促反應(yīng),所述底物為n-乙酰多巴胺(nada)或n-β丙酰多巴胺(nbad),所述酶為漆酶2。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:方法是先通過(guò)基因工程方法生物合成目的家蠶表皮蛋白基因序列作為外源基因,然后采用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建外源基因載體,通過(guò)顯微注射將外源基因載體導(dǎo)入家蠶卵內(nèi)并整合到家蠶基因組內(nèi),或同源整合到家蠶的特定基因中,對(duì)家蠶進(jìn)行多代培育,通過(guò)熒光顯微鏡篩選獲得g1代陽(yáng)性個(gè)體,g1代陽(yáng)性個(gè)體分別與野生型交配或陽(yáng)性個(gè)體自交得到g2代,g3代后均篩選陽(yáng)性個(gè)體并采用陽(yáng)性個(gè)體自交留種,到g8代育成穩(wěn)定遺傳的品種;

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述的外源基因載體是采用以piggybac為骨架的轉(zhuǎn)基因載體或者應(yīng)用于talen或crispr基因編輯的同源重組載體;

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法,其特征在于:所述的復(fù)合絲蛋白的組成包含了家蠶表皮蛋白基因rr-1、rr-2、rr-3、cpg、cph或glycine-rich中的1個(gè)基因構(gòu)成的蛋白分子成分和蠶絲蛋白成分。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種基因操作結(jié)合理化處理的體內(nèi)外聯(lián)合作用改善蠶絲性能的方法。本方法采用不同的家蠶表皮蛋白基因構(gòu)建外源基因載體,利用轉(zhuǎn)基因或者基因編輯的分子生物學(xué)技術(shù)將表皮蛋白基因整合到家蠶基因組內(nèi),最終獲得能夠穩(wěn)定遺傳的新型家蠶品種,再利用鋅金屬離子交聯(lián)方法或底物酶促反應(yīng)方法改變復(fù)合絲性質(zhì),生產(chǎn)性能優(yōu)異的復(fù)合絲;外源基因是指家蠶表皮蛋白基因,可以采用RR?1、RR?2、RR?3、CPG、CPH或Glycine?rich中的一種基因。本發(fā)明處理獲得的復(fù)合絲再經(jīng)理化處理復(fù)合絲力學(xué)性能顯著增強(qiáng),這種發(fā)明能極大的改良蠶絲品質(zhì),已創(chuàng)造很好的經(jīng)濟(jì)效益。

技術(shù)研發(fā)人員:鐘伯雄,戴小燕
受保護(hù)的技術(shù)使用者:浙江超絲生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/9
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