本發(fā)明涉及核酸檢測，特別涉及一種核酸檢測試劑盒及測試方法。

背景技術：

1、核酸檢測是對生物遺傳物質(zhì)進行檢測的一種技術，被廣泛地應用于病原微生物檢測以及傳染性疾病診斷等領域。為了快速便捷地檢測核酸，本發(fā)明利用微流控技術開發(fā)出了一種核酸檢測試劑盒對待測樣本進行檢測，其中試劑盒內(nèi)存儲的各液體試劑的流動控制通過微流控技術實現(xiàn)。具體地，微流控技術能夠控制芯片內(nèi)的流體釋放、流動、分配等，并在外部儀器的配合下，最終實現(xiàn)核酸檢測。

2、相關技術中，實現(xiàn)流體驅(qū)動的驅(qū)動源來源于外部設備，例如泵，外部的泵會對試劑盒造成交叉感染的風險。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種核酸檢測試劑盒及測試方法，能夠安全地完成核酸檢測。

2、第一方面，本發(fā)明提供一種核酸檢測試劑盒，包括多個儲液腔、微閥組件、樣本組件、混合池、凍干試劑腔、反應單元和柱塞泵；

3、多個所述儲液腔分別裝盛有裂解液、結合液、清洗液和洗脫液，微閥組件包括與第一微閥、第二微閥、第三微閥、第四微閥、第五微閥、第六微閥、第七微閥、第八微閥和第九微閥，所述第一微閥與裝盛洗脫液的儲液腔連接，所述第二微閥和裝盛清洗液的儲液腔連接，所述第三微閥和裝盛結合液的儲液腔連接，所述第四微閥和裝盛裂解液的儲液腔連接，所述第一微閥、第二微閥、第三微閥、第四微閥依次連通，所述第一微閥、第二微閥、第三微閥、第四微閥與其各自連接的所述儲液腔通過閥門開閉實現(xiàn)連通、斷開，所述第五微閥用于控制樣本組件和混合池之間的通斷，所述第六微閥與所述第一微閥通過所述第六微閥的閥門實現(xiàn)二者間的通斷，所述第六微閥和所述凍干試劑腔連通，所述凍干試劑腔和所述反應單元連通，所述反應單元和透氣組件連通，所述第七微閥和所述柱塞泵、所述樣本組件和所述第八微閥連接，所述第七微閥開閉以控制其與所述樣本組件之間的連通，所述第八微閥與所述混合池和所述第七微閥連接，所述第八微閥用于控制其與第七微閥之間的通斷，所述第九微閥開啟時用于配合所述透氣組件使氣路暢通，關閉時用于密封所述反應單元。

4、在一種可能的設計中，所述微閥組件的每個微閥均由閥座、連通結構和密封膜組成，通過控制所述密封膜封堵所述連通結構來實現(xiàn)閥的開關。

5、在一種可能的設計中，還包括相變材料，所述相變材料用于通過加熱融化、流動和再固化密封的過程分別封堵所述凍干試劑腔與反應單元的通道和透氣組件的出氣端，實現(xiàn)反應單元的密封。

6、在一種可能的設計中，還包括主體和穿刺裝置；

7、所述主體包括相鄰的密封腔和限位倉，所述密封腔包括開口方向互相垂直的第一開口和第二開口，所述第二開口和所述限位倉連通，所述第一開口和所述第二開口密封設置有密封膜，所述穿刺裝置包括第一穿刺件和第二穿刺件，所述第一穿刺件朝向所述第一開口，所述第二穿刺件穿入所述限位倉中，所述限位倉相對所述第二開口的內(nèi)壁上設置有限位斜面；

8、需要釋放所述密封腔中的流體時，驅(qū)動所述穿刺裝置朝向所述主體移動，以使所述第一穿刺件刺穿所述第一開口處的密封膜，使所述限位倉中的所述第二穿刺件在所述限位斜面的限制下向所述第二開口彎曲以刺破所述第二開口處的密封膜，使流體流入所述限位倉下部的所述儲液腔。

9、在一種可能的設計中，所述第二穿刺件包括依次連接的導向部和穿刺部，所述限位倉內(nèi)設置有導向槽，所述導向部穿過所述導向槽，所述導向槽用于限制所述第二穿刺件沿預設方向移動。

10、在一種可能的設計中，所述導向部靠近所述穿刺部的部位設置有呈板狀的受力板，所述受力板用于與所述限位斜面配合以控制所述穿刺部的發(fā)生變形的方向，以穿刺所述第二開口上的密封膜。

11、在一種可能的設計中，所述穿刺裝置還包括卡扣，所述限位倉內(nèi)設置有卡位，所述卡扣和所述卡位配合以限制所述穿刺裝置的位置；

12、所述卡位包括第一卡位和第二卡位，當所述卡扣位于所述第一卡位上時，所述穿刺裝置未刺破所述第一開口上的密封膜和所述第二開口上的密封膜，當所述卡扣位于所述第二卡位上時，所述穿刺裝置刺破所述第一開口上的密封膜和所述第二開口上的密封膜。

13、在一種可能的設計中，所述穿刺裝置還包括受力驅(qū)動件，所述受力驅(qū)動件包括安裝板和傾斜設置于所述安裝板上的驅(qū)動面，所述安裝板遠離所述驅(qū)動面的一側分別安裝有所述第一穿刺件、所述第二穿刺件，所述驅(qū)動面一側設置有柱塞泵和驅(qū)動件，所述驅(qū)動件設置在所述柱塞泵的往復桿上，所述往復桿平行于所述安裝板，通過所述往復桿沿其軸向移動，所述往復桿上的所述驅(qū)動件、所述驅(qū)動面、所述導向部和所述導向槽配合以驅(qū)動所述穿刺裝置沿所述預設方向運動；其中，所述柱塞泵與微流控芯片連接以為其提供流體控制的動力。

14、第二方面，本發(fā)明提供了一種核酸檢測試方法，基于上述中任一所述的核酸檢測試劑盒，所述方法包括：

15、關閉第一微閥、第二微閥、第三微閥、第四微閥、第五微閥和第七微閥，其余開啟，利用所述柱塞泵排出各個通道中的氣體；

16、開啟所述第四微閥、所述第五微閥、第七微閥和第九微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將與第四微閥連通的儲液腔中的裂解液和所述樣本組件中的樣品泵入所述混合池，所述混合池中包括加熱裝置和旋轉(zhuǎn)子，通過所述加熱裝置和所述旋轉(zhuǎn)子使所述混合池中的樣品和裂解液混合并裂解，得到靶核酸；

17、開啟所述第三微閥、所述第五微閥、第七微閥和第九微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將與第三微閥連通的儲液腔中的結合液泵入所述混合池，在結合液的作用下，所述靶核酸吸附在所述混合池的磁珠上，開啟所述第四微閥、所述第五微閥和第七微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將所述混合池內(nèi)的廢液泵入與所述第四微閥連通的所述儲液腔中；

18、開啟所述第二微閥、所述第五微閥、第七微閥和第九微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將與第二微閥連通的儲液腔中的清洗液泵入所述混合池，以清洗所述混合池內(nèi)靶核酸以外的殘留試劑，開啟所述第三微閥、所述第五微閥和所述第七微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將所述混合池內(nèi)的廢液泵入與所述第三微閥連通的所述儲液腔中；

19、開啟所述第一微閥、所述第五微閥、第七微閥和第九微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將與第一微閥連通的儲液腔中的洗脫液泵入所述混合池，以清洗所述混合池內(nèi)磁珠上的靶核酸，開啟所述第六微閥、所述第五微閥、第七微閥和第九微閥，其余關閉，利用所述柱塞泵將所述混合池內(nèi)的帶有靶核酸的洗脫液泵入所述反應單元以完成核酸檢測，在所述反應單元進行擴增反應時，關閉所述第九微閥。

20、在一種可能的設計中，反應完成后，加熱相變材料至融化，使其流動至凍干試劑腔和所述反應單元連通的通道，以及流動至所述透氣組件與外界連通的通道，冷卻后物理密封所述反應單元。

21、在一種可能的設計中，所述反應單元側面或底面透明，以允許所述反應單元內(nèi)部接收外界的光學信號。

22、在一種可能的設計中，所述反應單元設置有導熱面，所述導熱面用于與加熱控制單元接觸。

23、在一種可能的設計中，所述導熱面由厚度＜0.1mm的，導熱率＞1w/mk的薄膜構成。

24、本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比至少具有如下有益效果：

25、在本發(fā)明中，通過微閥組件的多個微閥的開閉配合，實現(xiàn)不同液體，例如裂解液、結合液、清洗液和洗脫液的依次釋放至混合池，進而實現(xiàn)樣品的靶核酸提取，最終，通過微閥組件的多個微閥的配合，將攜帶靶核酸的液體由混合池經(jīng)過凍干試劑腔運送至反應單元完成反應。