本發(fā)明涉及一種屬于阿克曼氏菌(akkermansia)屬的新穎微生物，更詳細(xì)而言，涉及該微生物、以及以其作為有效成分的用于活化nod2(nucleotide-bindingoligomerization?domain2，核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2)的組合物及用于激活免疫的組合物等。

背景技術(shù)：

1、在人體腸道內(nèi)，多種多樣的腸內(nèi)微生物聚集并構(gòu)筑了復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)。該生態(tài)系統(tǒng)也被稱為腸內(nèi)微生物菌群，會對作為宿主的人類的各種生理作用產(chǎn)生影響。因此，在人類健康并長壽的方面，棲息在腸道內(nèi)的微生物的種類及它們的多樣性較為重要。

2、關(guān)于作為腸內(nèi)微生物的1種的屬于阿克曼氏菌屬的微生物，已知其在腸道內(nèi)的豐度對于各種癥狀有效，譬如肥胖、2型糖尿病等代謝障礙、潰瘍性結(jié)腸炎、闌尾炎等炎癥性疾病。此外，近年來有腦-腸-微生物軸(brain-gut-microbiota?axis)這一概念，還報(bào)告有阿克曼氏菌的存在量與宿主的性格(社交能力高低)有關(guān)(非專利文獻(xiàn)1)。

3、另外，報(bào)告有在生活著許多百歲以上長壽者(百歲(centenarian)率較高)的奄美大島(日本)，對高齡者的腸內(nèi)菌群進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，相較于其他地區(qū)的同年代高齡者，阿克曼氏菌等的比率較高(非專利文獻(xiàn)2)。進(jìn)而，還報(bào)告有向早衰癥模型小鼠給予阿克曼氏菌后發(fā)現(xiàn)，壽命得到延長(非專利文獻(xiàn)3)，根據(jù)這些結(jié)果，提示了阿克曼氏菌在腸內(nèi)的豐度對宿主的壽命產(chǎn)生較好影響。

4、如上所述，阿克曼氏菌會對宿主的健康、性格等產(chǎn)生影響，甚至可能延長壽命，故而近年來備受關(guān)注，但屬于阿克曼氏菌屬的微生物僅明確有2種(嗜黏蛋白阿克曼氏菌(akkermansia?muchiniphila)、嗜聚糖阿克曼氏菌(akkermansia?glycaniphila))。

5、現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

6、非專利文獻(xiàn)

7、非專利文獻(xiàn)1：katerina?v-a?johnson、hum?microb?j.、“gut?microbiomecomposition?and?diversity?are?related?to?human?personality?traits”，2020年3月15日，doi：10.1016/j.humic.2019.100069.

8、非專利文獻(xiàn)2：森田英利，科學(xué)研究費(fèi)助成事業(yè)研究成果報(bào)告書，“奄美群島の百壽者がもつ特徴的な腸內(nèi)細(xì)菌叢を指標(biāo)としたヒト長壽腸內(nèi)科學(xué)への展開”，2021年6月23日

9、非專利文獻(xiàn)3：clea?barcena等人，nat?med.、“healthspan?and?lifespanextension?by?fecal?microbiota?transplantation?into?progeroid?mice1”，2019年8月25日，8卷，1234～1242頁，doi：10.1038/s41591-019-0504-5.

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、發(fā)明要解決的問題

2、本發(fā)明的目的在于，單離出屬于阿克曼氏菌屬的新穎微生物，并提供該微生物。其目的還在于，明確上述微生物對宿主的影響，并提供一種基于該影響的用于改善宿主的健康狀態(tài)的組合物。

3、用于解決問題的方案

4、本發(fā)明人等為了達(dá)成上述目的而反復(fù)進(jìn)行了銳意研究，結(jié)果，成功地自5名受試者中3人的糞便中，檢測到屬于阿克曼氏菌屬的微生物株(won2089、won2090、won2093)的菌落形成。另外，確定并比較這些微生物株的16srrna(ribonucleic?acid，核糖核酸)序列，結(jié)果表明，均攜帶有包含相同序列(序列號：3所記載的序列)的16s?rrna基因。

5、然后，將上述微生物的16s?rrna序列相對于美國國家生物技術(shù)信息中心(以下，稱為ncbi)的rrna/its的基準(zhǔn)株數(shù)據(jù)庫來進(jìn)行blast+分析，結(jié)果，與已知的嗜黏蛋白阿克曼氏菌(序列號：1所記載的序列；genbank登錄編號ay271254)的同源性為98.0％，與已知的嗜聚糖阿克曼氏菌的同源性為94.0％(序列號：2所記載的序列；genbank登錄編號kt254068)。進(jìn)而，對won2089進(jìn)行全基因組測序，基于該序列，通過dfast進(jìn)行ani(average?nucleotideidentity，平均核苷酸一致性)分析，與阿克曼氏菌屬的2個(gè)菌株進(jìn)行比較。其結(jié)果，與已知的嗜黏蛋白阿克曼氏菌相比，ani值約為82.5％，與已知的嗜聚糖阿克曼氏菌相比，ani值約為77.4％。95％ani為當(dāng)前菌種的臨界值，由于低于該值，因此表明單離出的微生物株可能為阿克曼氏菌的新種。

6、另外，在使用api20a的酸產(chǎn)生試驗(yàn)的結(jié)果中，觀察到微生物株(won2089、won2090、won2093)均與已知的2種阿克曼氏菌同樣地在d-葡萄糖、乳糖、d-甘露糖中增殖，不同于已知的2種阿克曼氏菌的是，觀察到上述微生物株均在d-甘露醇中也增殖。

7、進(jìn)而，對配體活性進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，對于已知的2種阿克曼氏菌，未觀察到nod2激動劑活性，但微生物株(won2089、won2090、won2093)均觀察到該活性。

8、需要說明的是，nod2為一種模式識別受體(pattern?recognition?receptor，prr)，通過該受體的活化，能夠檢測到已入侵的病原體或變得異常的自體細(xì)胞，并將它們清除(所謂天然免疫、后天免疫)。

9、另外，關(guān)于won2089，對iga(immunoglobulin?a，免疫球蛋白a)分泌促進(jìn)作用進(jìn)行評價(jià)，結(jié)果可知具有該作用，進(jìn)而還發(fā)現(xiàn)較已知的嗜黏蛋白阿克曼氏菌(標(biāo)準(zhǔn)株muc，strainatcc?baa-835)的iga分泌促進(jìn)作用高2倍以上，從而完成了本發(fā)明。

10、即，本發(fā)明提供以下的方式。

11、[1]一種微生物，其屬于阿克曼氏菌屬，

12、其具有包含相對于序列號：1所記載的核苷酸序列具有98.0％以下的同源性、相對于序列號：2所記載的核苷酸序列具有94.0％以下的同源性、或相對于序列號：3所記載的核苷酸序列具有超過98.0％的同源性的核苷酸序列的16s?rrna基因，并且

13、具有以下1)～4)的性質(zhì)：

14、1)具有nod2激動劑活性；

15、2)具有對于d-甘露醇的同化性；

16、3)革蘭氏染色呈陰性，為球狀至短桿狀的厭氧性細(xì)菌；

17、4)氧化酶試驗(yàn)呈陰性，過氧化氫酶試驗(yàn)呈陽性。

18、[2]一種微生物，其為由保藏編號nite?bp-03622、nite?bp-03623或nite?bp-03624特定的微生物。

19、[3]根據(jù)[1]所述的微生物，其進(jìn)而相較于嗜黏蛋白阿克曼氏菌的標(biāo)準(zhǔn)株atccbaa-835，具有2倍以上的iga分泌促進(jìn)作用。

20、[4]一種用于激活免疫的組合物，其以[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物作為有效成分。

21、[5]一種用于活化nod2的組合物，其以[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物作為有效成分。

22、[6]一種用于促進(jìn)iga的分泌的組合物，其以[2]或[3]所述的微生物作為有效成分。

23、另外，本發(fā)明涉及一種[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物在用于制造用于激活免疫的組合物、用于活化nod2的組合物或用于促進(jìn)iga的分泌的組合物中的用途。

24、另外，本發(fā)明涉及一種[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物的用于激活免疫、用于活化nod2、或用于促進(jìn)iga的分泌的用途。

25、另外，本發(fā)明涉及一種[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物，其用于激活免疫、用于活化nod2、或用于促進(jìn)iga的分泌。

26、另外，本發(fā)明涉及一種用于激活免疫、活化nod2、或促進(jìn)iga的分泌的方法，其中，將[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的微生物的有效量給予至對象。

27、發(fā)明的效果

28、根據(jù)本發(fā)明，可經(jīng)由nod2的活化等來激活免疫。