本發(fā)明涉及一類新化合物、其制備方法與應(yīng)用，具體是n-(5-?；邕?2-基)酰胺、其制備方法及其在制備抗流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

ye等[europeanjournalofmedicinalchemistry,2012,54(12):764-770]描述了嗎啉修飾的扎那米韋類似物對(duì)流感na的抑制活性，其中a對(duì)h3n2的ic50值分別為566.8±76.9μm，對(duì)h5n1的ic50值分別為517.0±105μm。wen等[bioorganic&medicinalchemistry,2010,18(11):4074-84]描述了c-4位修飾的扎那米韋類似物對(duì)流感病毒神經(jīng)氨酸酶的抑制活性。其中化合物b對(duì)h1n1na的ic50值為33.3μm，ec50值為37.6μm。

尤啟冬等[cn102659615b.2014.05.07]描述了奧司他韋衍生物的制備方法以及其在抗流感病毒中的作用；其中，化合物c對(duì)流感病毒h1n1和h3n2神經(jīng)氨酸酶的抑制活性ic50分別為1.9μm和2.3μm；其乙酯d對(duì)流感病毒h1n1和h3n2神經(jīng)氨酸酶的抑制活性ic50分別為1.2μm和0.9μm。

sokoloova等[med.chem.,2017,2(11):960-963]描述了冰片類雜環(huán)化合物的制備，并在mdck細(xì)胞中測(cè)試了其對(duì)流感病毒的抑制活性；其中含有嗎啉片段的化合物e～g有較好的抗流感病毒活性，ic50分別是7.1μm、12.2μm和7.8μm。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一類n-(5-酰基噻唑-2-基)酰胺、其制備方法、藥物組合物和用途。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供了一類如結(jié)構(gòu)式ⅰ所示的n-(5-?；邕?2-基)酰胺及其在藥學(xué)上可接受的鹽：

式中r¹選自：h、c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；r²選自：c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基、c1～c2烷氧基、c3～c4直鏈烷氧基或c3～c4支鏈烷氧基；r³選自：h、c1～c2烷基、c3～c6直鏈烷基；r⁴選自：h、c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基；z選自：o，s或ch2；n選自：1、2、3、4、5或6。

進(jìn)一步的，優(yōu)選的化合物選自：n-(5-乙酰基-4-甲基噻唑-2-基)-2-(嗎啉-1-基)乙酰胺、n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-3-(嗎啉-1-基)丙酰胺或n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-2-(哌啶-1-基)乙酰胺。

本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面是提供了第一方面所述通式i所示的n-(5-?；邕?2-基)酰胺的制備方法，其特征在于它的制備反應(yīng)如下：

式中r¹選自：h、c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；r²選自：c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基、c1～c2烷氧基、c3～c4直鏈烷氧基或c3～c4支鏈烷氧基；r³選自：h、c1～c2烷基、c3～c6直鏈烷基；r⁴選自：h、c1～c2烷基、c3～c4直鏈烷基；z選自：o，s或ch2；n選自：1、2、3、4、5或6；x選自：氯、溴或碘。

本發(fā)明技術(shù)方案的第三方面是提供含有第一方面所述化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明的n-(5-酰基噻唑-2-基)酰胺及其藥學(xué)上可接受的鹽，以及任選的含有藥用載體。其中所述的藥用載體指藥學(xué)領(lǐng)域常用的藥用載體；該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^(guò)將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑組合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在其藥物組合物中的含量通常為0.1％～95％重量百分比。

本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。

給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。

本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。

為了將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤(rùn)劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤(rùn)滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。

還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。

為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?，再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的膠囊劑。

為將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、ph調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-β-環(huán)糊精等；ph調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。

此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。

為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。

本發(fā)明技術(shù)方案的第四方面是提供本發(fā)明第一方面所述n-(5-酰基噻唑-2-基)酰胺及其藥學(xué)上可接受的鹽以及第三方面所述藥物組合物在制備流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑方面的應(yīng)用。

有益技術(shù)效果：

本發(fā)明的n-(5-?；邕?2-基)酰胺是一類新結(jié)構(gòu)類型的具有流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制活性的化合物。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例旨在說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限定。

實(shí)施例1

n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-2-(嗎啉-1-基)乙酰胺的制備

0.86mmoln-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-2-氯乙酰胺、5mlthf、0.86mmol嗎啉，0.86mmoltea，常溫?cái)嚢瑁瑃lc監(jiān)測(cè)，反應(yīng)18h；脫溶，二氯甲烷溶解，飽和食鹽水洗滌，收集、合并有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，脫溶，加石油醚析出固體，乙醇重結(jié)晶，抽濾，濾餅用石油醚和冰乙醇洗滌，干燥后得白色粉末狀固體n-(5-乙酰基-4-甲基噻唑-2-基)-2-(嗎啉-1-基)乙酰胺0.12g，收率49.3％，m.p.142～145℃，¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ：2.52(s，3h，ch3)，2.64(t，j＝4.4hz，4h，ch2nch2)，2.66(s，3h，ch3co)，3.29(s，2h，coch2)，3.79(t，j＝4.4hz，4h，ch2och2)。

實(shí)施例2

n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-3-氯丙酰胺的制備

75mmol3-氯丙酸和75mmoldcc溶于60ml二氯甲烷，投入催化劑dmap2g，室溫下攪拌10分鐘，加入2-氨基-4-甲基噻唑-5-乙酮的氫溴酸鹽4.8g，黃色消失，室溫?cái)嚢杓s48h，抽濾，二氯甲烷洗滌濾餅，濾液依次用飽和食鹽水和飽和nahco3洗滌數(shù)次，水層用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，脫溶，柱層析(v石油醚：v乙酸乙酯＝2:1)，得白色粉末n-(4-甲基-5-乙酰基噻唑-2-基)-3-氯丙酰胺5.84g，收率70.3％，m.p.163～166℃，¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ：2.52(s，3h，ch3)，2.64(s，3h，ch3)，2.96(t，j＝6.3hz，2h，coch2)，3.90(t，j＝6.2hz，2h，ch2)。

實(shí)施例3

n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-3-(嗎啉-1-基)丙酰胺的制備

0.813mmoln-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-3-氯丙酰胺、5mlthf、0.813mmol嗎啉，0.86mmoltea，常溫?cái)嚢瑁瑃lc監(jiān)測(cè)，反應(yīng)18h；脫溶，二氯甲烷溶解，飽和食鹽水洗滌，收集、合并有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，脫溶，加石油醚析出固體，乙醇重結(jié)晶，抽濾，濾餅用石油醚和冰乙醇洗滌，干燥后得白色粉末狀固體n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-3-(嗎啉-1-基)丙酰胺0.16g，收率66.7％，m.p.154～156℃，¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ：2.50(s，3h，ch3)，2.68～2.61(m，9h，ch3co+ch2nch2+coch2)，2.78(t，j＝5.6hz，2h，ch2)，3.87(s，j＝4.4hz，4h，ch2och2)，12.66(s，1h，nh)。

實(shí)施例4

n-(5-乙酰基-4-甲基噻唑-2-基)-2-(哌啶-1-基)乙酰胺的制備

1.07mmoln-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-2-氯乙酰胺溶于5mlthf、1.61mmol哌啶、1.07mmoltea，常溫反應(yīng)，tlc監(jiān)測(cè)，反應(yīng)23h；反應(yīng)完后，脫溶，二氯甲烷溶解，飽和食鹽水洗，收集、合并有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，脫溶，加石油醚析出固體，乙醇重結(jié)晶，抽濾，濾餅用石油醚和冰乙醇洗滌，干燥得白色粉末狀固體n-(5-乙?；?4-甲基噻唑-2-基)-2-(哌啶-1-基)乙酰胺0.14g，收率46.6％，m.p.120～122℃，¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ：1.49～1.50(m，2h，哌啶4-h)，1.64～1.69(m，4h，哌啶3，5-h)，2.52(s，3h，ch3)，2.55(m，4h，哌啶2，6-h)，2.66(s，3h，ch3co)，3.22(s，2h，coch2)。

實(shí)施例5

n-(5-?；邕?2-基)酰胺及其鹽的抗流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性

1.實(shí)驗(yàn)原理

化合物munana是神經(jīng)氨酸酶的特異性底物，在神經(jīng)氨酸酶作用下產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物在360nm照射激發(fā)下，可產(chǎn)生450nm熒光，熒光強(qiáng)度的變化可以靈敏地反映神經(jīng)氨酸酶活性。酶均來(lái)自a/pr/8/34(h1n1)病毒毒株。

2.實(shí)驗(yàn)方法

在酶反應(yīng)體系中，一定濃度樣品與流感病毒神經(jīng)氨酸酶na懸浮于反應(yīng)緩沖液中(ph6.5)，加入熒光底物munana啟動(dòng)反應(yīng)體系，37℃孵育40分鐘后，加反應(yīng)終止液終止反應(yīng)。在激發(fā)波長(zhǎng)360nm和發(fā)射波長(zhǎng)為450nm的參數(shù)條件下，測(cè)定熒光強(qiáng)度值。根據(jù)熒光強(qiáng)度的減少量可以計(jì)算化合物對(duì)na活性的抑制率。

3.檢測(cè)樣品：實(shí)施例化合物

4.活性結(jié)果

實(shí)施例化合物在反應(yīng)系統(tǒng)中檢測(cè)濃度40.0μg/ml時(shí)對(duì)神經(jīng)氨酸酶的抑制率及其ic50值列入下表1：

表1n-(5-?；邕?2-基)酰胺對(duì)神經(jīng)氨酸酶的抑制活性

n-(5-?；邕?2-基)酰胺具有良好的抗流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性，可用于制備流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑。