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一種提高水蛭透明質(zhì)酸酶酶活的方法與流程

文檔序號(hào):12097246閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種酶活提高的透明質(zhì)酸酶突變體,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述透明質(zhì)酸酶突變體的基因。

3.表達(dá)權(quán)利要求1所述透明質(zhì)酸酶突變體的載體或細(xì)胞系。

4.一種產(chǎn)透明質(zhì)酸酶的基因工程菌,其特征在于,以枯草芽孢桿菌為宿主,以pPNMK為載體,表達(dá)權(quán)利要求1所述透明質(zhì)酸酶突變體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,所述枯草芽孢桿菌包括Bacillus subtilis168,Bacillus subtilis WB600。

6.一種提高透明質(zhì)酸酶酶活的方法,其特征在于,將SEQ ID NO.2所示透明質(zhì)酸酶氨基酸序列的L50-G57區(qū)域替換為SLESISPS,并將K120-R125替換為SKSKMQ,并將K163-D167區(qū)域替換為EGYGS,并將P280-W287區(qū)域替換為RHKDKPTG,并將V307-L313區(qū)域替換為WSGFLNI,并將T344替換為K344

7.一種提高透明質(zhì)酸酶酶活的生產(chǎn)方法,其特征在于,將權(quán)利要求5或6任一所述的基因工程菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中,在30~37℃培養(yǎng)16~72h。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述發(fā)酵培養(yǎng)基組分為30g/L蔗糖、20g/L酵母膏、2g/L蛋白胨、15.6g/L磷酸氫二鈉、5.94g/L磷酸二氫鉀。

9.權(quán)利要求1所述透明質(zhì)酸酶突變體在食品、生物、化工、醫(yī)藥領(lǐng)域中制備含透明質(zhì)酸的醫(yī)藥配制品、保健品、化妝品中的應(yīng)用。

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