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一種檸檬酸蛋白、其制備方法及其衍生產品與流程

文檔序號:11931375閱讀:543來源:國知局
本發(fā)明屬于生物
技術領域
,更具體地,涉及一種檸檬酸蛋白、其制備方法及其衍生產品。
背景技術
:理想的食品微量元素添加劑載體,必須克服無機鹽的胃腸道副反應,使患者有好的順應性,還要能被患者較好的吸收,最好是在十二指腸內吸收。蛋白質作為微量元素載體能克服無機鹽的胃腸道副反應,且能使微量元素在十二指腸內吸收。目前現(xiàn)有的微量元素載體為琥珀酸蛋白、EDTA、檸檬酸、氨基乙酸。用于醫(yī)藥目的的,目前有琥珀酸蛋白為載體的有ItalfarmacoS.p.A生產的蛋白琥珀酸鐵。然而,琥珀酸蛋白作為微量元素添加劑載體存在以下缺陷:一是琥珀酸蛋白絡合微量元素時絡合量較低,不管是嬰幼兒還是成人為了補充合適劑量的微量元素,需要一次性服用琥珀酸蛋白絡合的微量元素藥劑的藥量很大,服用不方便;二是琥珀酸蛋白在人體內代謝也會產生大量的丁二酸,丁二酸對眼睛、皮膚、粘膜等都有一定的刺激作用;三是琥珀酸蛋白在制備過程中副反應產生了丁二酸,雖然后續(xù)有丁二酸去除工藝,但工藝繁瑣,而且仍會有丁二酸殘留。因此,需要一種微量元素絡合容量大的酰化蛋白,其制備過程中的副產物和在人體內代謝產物對人體無毒無刺激,最好為人體內源性物質。技術實現(xiàn)要素:針對現(xiàn)有技術的以上缺陷或改進需求,本發(fā)明提供了一種檸檬酸蛋白、其制備方法及其衍生產品,其目的在于通過將蛋白質和檸檬酸酐發(fā)生酰化反應,制備得到一種具有很強微量元素絡合容量且制備過程中的副產物和在人體內代謝產物均為人體內源性物質的檸檬酸蛋白,由此解決現(xiàn)有技術?;鞍鬃鳛槲⒘吭剌d體絡合容量低、制備過程中的副產物和人體代謝產物有毒的技術問題。為實現(xiàn)上述目的,按照本發(fā)明的一個方面,提供了一種檸檬酸蛋白,其特征在于,具有式(I)的結構式:其中,(protein)為蛋白質,所述蛋白質為動物蛋白質、植物蛋白質或微生物蛋白質,式中n為0或1。優(yōu)選地,所述動物蛋白質為酪蛋白、乳蛋白和/或膠原蛋白中的一種或多種。優(yōu)選地,所述動物蛋白質為酪蛋白。優(yōu)選地,所述植物蛋白質為大豆蛋白、胚芽蛋白、花生蛋白和/或螺旋藻蛋白中的一種或多種。優(yōu)選地,所述植物蛋白質為大豆分離蛋白。優(yōu)選地,所述微生物蛋白為細菌蛋白和/或真菌蛋白。照本發(fā)明的另一方面,提供了一種所述的檸檬酸蛋白的制備方法,所述檸檬酸蛋白是由所述蛋白質和檸檬酸酐按照質量比1:0.3~0.6發(fā)生?;磻频谩?yōu)選地,所述蛋白質和檸檬酸酐按照質量比1:0.4~0.5反應制得。按照本發(fā)明的另一個方面,提供了一種所述的檸檬酸蛋白的衍生產品,所述衍生產品為所述檸檬酸蛋白和金屬離子的絡合物。優(yōu)選地,所述金屬離子包括鐵、鋅、鍶、鈣、碘、硒、銅、鉬、鉻或鈷。總體而言,通過本發(fā)明所構思的以上技術方案與現(xiàn)有技術相比,能夠取得下列有益效果:(1)本發(fā)明的檸檬酸蛋白是蛋白質分子上的伯氨基或仲氨基上的氫被檸檬酸酐取代生成,本發(fā)明的檸檬酸蛋白對微量元素具有很強的絡合容量,對應的微量元素載量較高,例如采用本發(fā)明的檸檬酸蛋白載鐵得到的檸檬酸蛋白鐵的載鐵量是琥珀酸蛋白載鐵量的1.3~1.5倍;(2)本發(fā)明所述的檸檬酸蛋白的制備過程采用檸檬酸酐酰化蛋白質,其代謝產物為檸檬酸,檸檬酸為人體內源性物質,對人體無毒無害;(3)本發(fā)明制得的檸檬酸蛋白有良好的胃腸道順應性,應用于微量元素添加劑載體時能被患者較好的吸收;(4)本發(fā)明的檸檬酸蛋白制備方法簡單,蛋白質原料廣泛易得,將其應用于微量元素載體具有很好的市場前景。附圖說明圖1是本發(fā)明的實施例1制得的檸檬酸蛋白產品的紅外光譜圖。具體實施方式為了使本發(fā)明的目的、技術方案及優(yōu)點更加清楚明白,以下結合附圖及實施例,對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。此外,下面所描述的本發(fā)明各個實施方式中所涉及到的技術特征只要彼此之間未構成沖突就可以相互組合。本發(fā)明的檸檬酸蛋白具有式(I)的結構:其中,(protein)為蛋白質,所述蛋白質為動物蛋白質、植物蛋白質或微生物蛋白質,式中n為0或1。當所述蛋白質為動物蛋白質時,其為酪蛋白、乳蛋白和/或膠原蛋白中的一種或多種,優(yōu)選酪蛋白;當所述蛋白質為植物蛋白質時,其為大豆蛋白、胚芽蛋白、花生蛋白和/或螺旋藻蛋白中的一種或多種,優(yōu)選大豆蛋白;當所述蛋白質為微生物蛋白質時,其為細菌蛋白和/或真菌蛋白。本發(fā)明所述的檸檬酸蛋白是由蛋白質分子上的伯胺基或仲胺基上的氫被檸檬酸酐取代發(fā)生?;磻桑磻匠淌饺缦拢菏街?,n為0或1。本發(fā)明的檸檬酸蛋白被檸檬酸酐?;稽c出現(xiàn)兩個-COOH,從結構上講,本發(fā)明的檸檬酸蛋白具有很強的絡合容量,且本發(fā)明的檸檬酸蛋白具有兩性,其等電點在4.0~5.5。本發(fā)明所述的檸檬酸蛋白的制備方法包括如下步驟:(1)溶解蛋白質在反應器中加入所述蛋白質和水,攪拌均勻,采用氫氧化鈉溶液調節(jié)pH至蛋白質溶解完全,固液分離得到液相為蛋白質清液。(2)酰化向步驟(1)得到的蛋白質清液中分次緩慢加入檸檬酸酐,其中蛋白質和檸檬酸酐的質量比為1:0.3~0.6,優(yōu)選為1:0.4~0.5,使用氫氧化鈉溶液調節(jié)控制溶液pH確保蛋白質沒有析出,檸檬酸酐添加完畢后,繼續(xù)攪拌0.5~2h,然后緩慢滴加鹽酸溶液并控制pH為1.0~5.5,優(yōu)選的pH范圍為4.0~5.5;繼續(xù)攪拌0.5~2h,使沉淀完全,固液分離,得到固相為檸檬酸蛋白沉淀。其中蛋白質和檸檬酸酐發(fā)生?;磻馁|量比優(yōu)選為1:0.4~0.5,在此范圍內可以獲得高酰化度、低副產物的合成結果。(3)純化在反應器中加入步驟(2)得到的檸檬酸蛋白沉淀和水,攪拌均勻,采用氫氧化鈉溶液調節(jié)pH至檸檬酸蛋白沉淀溶解完全,固液分離得到液相為檸檬酸蛋白溶液。邊攪拌邊向所述檸檬酸蛋白溶液中加入鹽酸溶液控制溶液pH為1.0~5.5,優(yōu)選的pH范圍為4.0~5.5,使沉淀完全,固液分離,得到固相為檸檬酸蛋白粗品。重復步驟(3)2次以上,得到檸檬酸蛋白濕品。(4)干燥將步驟(3)得到的檸檬酸蛋白濕品置于溫度50~60℃下干燥至水分低于5%。,得到檸檬酸蛋白產品。本發(fā)明的檸檬酸蛋白的衍生產品,為所述檸檬酸蛋白和金屬離子的絡合物,金屬離子包括鐵、鋅、鍶、鈣、碘、硒、銅、鉬、鉻或鈷。將本發(fā)明制得的檸檬酸蛋白與鐵、鋅和鈣的金屬離子進行絡合,并利用如下公式計算各種金屬離子的絡合度。絡合度=(金屬離子總量-游離金屬離子量)/檸檬酸蛋白加入量×100%以下為實施例:實施例1合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.0kg酪蛋白,0.3kg檸檬酸酐酪蛋白:市售,甘肅華羚酪蛋白股份有限公司,批號HLYX1207061,蛋白質(以干基計)≥92.0%。檸檬酸酐(參考:史浩、李寒旭、丁立明等.檸檬酸酐的合成與表征[J].安徽理工大學學報(自然科學版),2006,26(1),056-060.):在帶有攪拌器、氯化鈣干燥管、回流冷凝管和溫度計的四口燒瓶中,加入一定量的無水檸檬酸、乙酸和乙酸酐。控制反應溫度34~40℃,反應時間16~20h。檸檬酸完全溶解后,減壓蒸餾出乙酸。在攪拌的條件下向剩余的溶液加入一定量的氯仿洗滌,白色渾濁轉為油性物質,繼續(xù)攪拌將油性物質轉化為白色沉淀,抽濾后沉淀物用氯仿洗滌2~3次,產物真空干燥,得檸檬酸酐。在反應器中加入1.0kg酪蛋白和15kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.3kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和15kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白1.06kg。取樣測得檸檬酸蛋白?;葹?0.5%。將實施例1得到的產品采用紅外光譜法進行表征分析,得到如圖1所示的紅外光譜圖,由圖可知,在1666cm-1處有較強吸收,在3285cm-1處有中等強度的吸收,在2928cm-1處有中等強度的吸收。實施例2合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.00kg酪蛋白,0.45kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg酪蛋白和10kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.45kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和10kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白0.98kg。取樣測檸檬酸蛋白酰化度為92.8%。實施例3合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.00kg酪蛋白,0.40kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg酪蛋白和10kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.40kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和10kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白0.92kg。取樣測檸檬酸蛋白?;葹?0.8%。實施例4合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.00kg酪蛋白,0.50kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg酪蛋白和10kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.50kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和10kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白1.06kg。取樣測檸檬酸蛋白酰化度為96.3%。實施例5合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.00kg酪蛋白,0.60kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg酪蛋白和10kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.60kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和10kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白1.05kg。取樣測檸檬酸蛋白?;葹?5.5%。實施例6合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.0kg大豆分離蛋白,0.30kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg大豆分離蛋白和10kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.30kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和10kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白1.04kg。取樣測得檸檬酸蛋白?;葹?3.8%。實施例7合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.0kg大豆分離蛋白,0.45kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg大豆分離蛋白和11kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.45kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和11kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白1.01kg。取樣測得檸檬酸蛋白?;葹?0.1%。實施例8合成1kg檸檬酸蛋白所需的原料:1.0kg大豆分離蛋白,0.60kg檸檬酸酐在反應器中加入1.0kg大豆分離蛋白和15kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解完全。分次緩慢加入檸檬酸酐0.60kg,使用2M氫氧化鈉控制pH在6.0~9.0,檸檬酸酐添加完畢0.5h后,緩慢滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,繼續(xù)攪拌0.5h后,離心,得檸檬酸蛋白沉淀。在反應器中加入檸檬酸蛋白沉淀和15kg純化水,2M氫氧化鈉調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白沉淀溶液中加入酸性溶液控制pH4.0~5.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白粗品。重復上述過程2次,得檸檬酸蛋白(濕品)。將檸檬酸蛋白(濕品)平鋪于不銹鋼托盤上(檸檬酸蛋白厚度約1cm),置于真空干燥箱中,控制真空度-0.06MPa~-0.08MPa、55℃,干燥20小時,得檸檬酸蛋白0.99kg。取樣測得檸檬酸蛋白?;葹?5.3%。實施例9在3個在反應器中分別加入1.0kg檸檬酸蛋白(采用實施例2所述方法制備,酰化度97%~90%)和15kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0,至溶解完全,得檸檬酸蛋白溶液。分別測量檸檬酸蛋白溶液體積,取樣10ml。攪拌下分別緩緩向以上三個反應器中加入4%FeCl3溶液(加入FeCl3溶液的量按照檸檬酸酪蛋白與FeCl3·6H2O重量比1:0.34換算)、4%ZnCl2溶液(加入ZnCl2溶液的量按照檸檬酸酪蛋白與ZnCl2重量比1:0.17換算)、4%CaCl2溶液(加入CaCl2溶液的量按照檸檬酸酪蛋白與CaCl2·6H2O重量比1:0.28換算),使用2MNaOH溶液保持pH在6.0~9.0,添加完畢后,分別測定各反應器中反應液的體積V,分別取10ml反應液測定絡合度。向各反應液中分別滴加1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,使沉淀完全,離心,得檸檬酸蛋白鐵沉淀、檸檬酸蛋白鋅沉淀、檸檬酸蛋白鈣沉淀。在裝有15kg純化水的3個在反應器中分別加入檸檬酸蛋白鐵沉淀、檸檬酸蛋白鋅沉淀、檸檬酸蛋白鈣沉淀,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0使溶解,離心,得檸檬酸蛋白鐵沉淀溶液、檸檬酸蛋白鋅沉淀溶液、檸檬酸蛋白鈣沉淀溶液。攪拌下向檸檬酸蛋白鐵沉淀溶液、檸檬酸蛋白鋅沉淀溶液、檸檬酸蛋白鈣沉淀溶液中加入1MHCl溶液控制pH1.0~4.5,使沉淀完全,離心,過濾,得檸檬酸蛋白鐵粗品、檸檬酸蛋白鋅粗品、檸檬酸蛋白鈣粗品。重復上述過程2次。檸檬酸蛋白鐵粗品、檸檬酸蛋白鋅粗品、檸檬酸蛋白鈣粗品置于溫度50~60℃下干燥12~20小時,得檸檬酸蛋白鐵、檸檬酸蛋白鋅、檸檬酸蛋白鈣。絡合度測定方法:取反應液10ml,加入80ml無水乙醇,充分攪拌、離心后取上清液,用EDTA滴定上清液,消耗EDTA滴定液體積V2。取檸檬酸蛋白溶液10ml,加入80ml無水乙醇,充分攪拌、離心后取上清液,用EDTA滴定上清液,消耗EDTA滴定液體積V0。絡合度=(金屬離子總量-游離金屬離子量)/檸檬酸蛋白加入量×100%=M[4%V1*10/V-C(V2-V0)]/1*10/V×100%式中,M為絡合金屬離子的分子量,g/mol4%為加入的金屬離子溶液濃度,mol/lV1為加入金屬離子溶液的體積,ml10為測定絡合度時取樣量,mlC為EDTA滴定液摩爾濃度;mol/l1為檸檬酸酐總量,kgV為絡合反應后反應液總體積,ml按照上述公式,對檸檬酸蛋白鐵、檸檬酸蛋白鋅、檸檬酸蛋白鈣絡合度進行計算,結果如表1所示:表1檸檬酸蛋白鐵、檸檬酸蛋白鋅、檸檬酸蛋白鈣絡合度的計算結果名稱檸檬酸蛋白鐵檸檬酸蛋白鋅檸檬酸蛋白鈣絡合度g/kg56.4561.7466.76實驗表明:檸檬酸蛋白對Fe3+、Zn2+、Ca2+均有較大的絡合度。實施例10檸檬酸蛋白鐵制備:溶解檸檬酸蛋白:在4個在反應器中分別加入1.0kg檸檬酸蛋白(采用實施例2所述方法制備,?;?7%~90%)和15kg純化水,攪拌,2MNaOH溶液調節(jié)pH至6.0~9.0,至溶解完全,得檸檬酸蛋白溶液。載鐵:攪拌下分別緩緩向以上四個反應器中加入4%FeCl3溶液(加入FeCl3溶液的量按照檸檬酸酪蛋白與FeCl3·6H2O重量比1:0.34換算),使用2MNaOH溶液保持pH在6.0~9.0,添加4%FeCl3溶液總時間不得少于3h。添加完畢后,,使用氫氧化鈉溶液調節(jié)pH,使pH維持在6~9。4%FeCl3溶液滴加完畢后后繼續(xù)攪拌0.5~1h,得檸檬酸蛋白鐵粗品溶液。精制:向上述檸檬酸蛋白鐵粗品溶液滴加3MHCl,調節(jié)pH至1~4使沉淀完全,離心,弱酸性溶液洗滌沉淀。沉淀轉移至反應釜中,加入適量0.01mol/L~1mol/L氫氧化鈉溶液,沉淀溶解完全后,過1.5-10.0μm濾膜,再用3MHCl,調節(jié)pH至1~4使沉淀完全,離心,水洗沉淀后干燥,即得檸檬酸蛋白鐵。檸檬酸蛋白鐵與蛋白琥珀酸鐵載鐵量比較如表2所示。表2檸檬酸蛋白鐵與蛋白琥珀酸鐵載鐵量比較名稱檸檬酸蛋白鐵蛋白琥珀酸鐵來源本實施例制備市售原料藥含鐵量7.5%5.3%實驗表明:檸檬酸蛋白鐵較蛋白琥珀酸鐵有更高的載鐵量,檸檬酸蛋白載鐵量為琥珀酸蛋白載鐵量的1.4倍,由此也可證明檸檬酸蛋白較琥珀酸蛋白對鐵元素的絡合能力更強。本領域的技術人員容易理解,以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已,并不用以限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。當前第1頁1 2 3 
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