本發(fā)明涉及噻唑雜環(huán)類化合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

白血病，亦稱作血癌，是一類造血干細(xì)胞異常的克隆性惡性疾病。其克隆中的白血病細(xì)胞失去進(jìn)一步分化成熟的能力而停滯在細(xì)胞發(fā)育的不同階段。在骨髓和其他造血組織中白血病細(xì)胞大量增生積聚并浸潤其他器官和組織，同時(shí)使正常造血受抑制，臨床表現(xiàn)為貧血、出血、感染及各器官浸潤癥狀。

白血病通常分為:1)急性淋巴細(xì)胞白血病，2)急性非淋巴白血病(簡稱急非淋)，3)慢性白血病，4)特殊類型白血病，

其中,慢性粒細(xì)胞白血病(CML)又叫慢性髓細(xì)胞白血病，它是血液系統(tǒng)的造血干細(xì)胞惡性克隆增殖性疾病，導(dǎo)致病人出現(xiàn)貧血、出血、感染等癥狀。CML占成人白血病的20％左右，大約每年的發(fā)病率為五萬分之一，其在任何年齡段都有可能發(fā)病，尤其是在老年人中發(fā)病率更高，且男性比女性發(fā)病率高。根據(jù)CML患者的疾病進(jìn)展?fàn)顩r和嚴(yán)重程度分為慢性期(CP)、加速期(AP)和急變期(BP)。大約85％～90％的慢性粒細(xì)胞白血病患者在慢性期被診斷發(fā)現(xiàn)，這個(gè)階段癥狀并不明顯，或者僅有乏力、關(guān)節(jié)疼痛或腹脹，如果藥物治療及時(shí)，慢性期就會(huì)變長，在沒有及時(shí)治療的情況下，疾病會(huì)進(jìn)入到加速期。CML形成的主要原因是9號(hào)和22號(hào)染色體發(fā)生異位t(9:22)(q34:q11)(費(fèi)城染色體Ph)形成一種融合基因即BCR-ABL融合基因，該基因能夠編碼BCR-ABL蛋白，是一種活性酪氨酸激酶。這種BCR-ABL激酶能使下游的一些底物磷酸化，進(jìn)而激活與細(xì)胞增殖有關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，造成成熟粒細(xì)胞無限增殖而導(dǎo)致CML的發(fā)生。

目前，臨床上對CML的治療方法主要是傳統(tǒng)的藥物治療、造血干細(xì)胞 移植和新興的分子靶向治療。普通的藥物治療包括烷化劑白消安、羥基脲、干擾素(IFN-α)、阿糖胞苷及高三尖杉酯堿。其中，由于白消安副反應(yīng)比較大，目前在臨床上已經(jīng)停止使用；羥基脲雖然價(jià)格低廉，治療成本低，毒副作用小，但是其對于處于加速期的CML病人作用效果差，而且對于急變期的CML患者基本沒有效果；α-干擾素較前兩者雖然毒副作用有所減小，但是其對加速期和急變期的CML患者效果很差。這種普通藥物治療的一個(gè)很大弊端是在對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用的同時(shí)也能對正常的機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生損傷。造血干細(xì)胞移植是目前理論上唯一可以治愈CML的方法，它是通過先用大劑量放化療將CML患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞清除，再將自體或異體的造血干細(xì)胞移植給患者，使其重新建立正常的的造血免疫系統(tǒng)。但是這種方法在實(shí)際操作起來存在很多困難，比如對患者的年齡有一定的要求，手術(shù)復(fù)雜，成功率低，耗費(fèi)高，且必須要有合適的骨髓捐獻(xiàn)者，而且移植后期有可能發(fā)生感染，會(huì)使CML患者和家人面臨很大的風(fēng)險(xiǎn)，所以造血干細(xì)胞移植在實(shí)際應(yīng)用過程中很受限制。

達(dá)沙替尼是新穎的、口服的、多靶點(diǎn)的小分子酪氨酸激酶抑制劑，是第二代TKIs。達(dá)沙替尼最初是作為SRC家族(例如Fyn，Yes，Src和Lyk等)激酶抑制劑被研制的，它也可以抑制BCR-ABL、EphA2、血小板生長因子受體及c-Kit。雖然達(dá)沙替尼具有一定的治療效果，但其也存在著一些臨床治療的缺點(diǎn)。達(dá)沙替尼臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，達(dá)沙替尼有存在很普遍的骨髓移植現(xiàn)象，最常見的不良反應(yīng)包括體液潴留(包括胸腔積液)、腹瀉、頭痛、惡心、皮疹、呼吸困難、出血、疲勞、肌肉骨骼疼痛、感染、嘔吐、咳嗽、腹痛和發(fā)熱，偶爾可見心力衰竭。與藥物相關(guān)的發(fā)熱性中性粒細(xì)胞減少癥的發(fā)生率為5％。所以尋找一種對白血病干細(xì)胞有殺傷力并且副作用較低的化合物迫在眉睫，而且這也將開啟CML治療的新方向和改變抗CML藥物的臨床評估標(biāo)準(zhǔn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中用于治療白血病的藥物療效不佳的問題，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種噻唑雜環(huán)類化合物，該噻唑雜環(huán)類化合物具 有以下結(jié)構(gòu)通式：

在上述噻唑雜環(huán)類化合物中，所述通式中X為：

并且其中，R包括以下基團(tuán)：

在上述噻唑雜環(huán)類化合物中，所述通式中X為：

并且其中，R包括以下基團(tuán)：

在上述噻唑雜環(huán)類化合物中，所述通式中X為：

并且其中，R包括以下基團(tuán)：

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，還提供了一種噻唑雜環(huán)類化合物的制備方法，包括：使2-((6-(4-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧)乙基)哌嗪-1-基)2-甲基嘧啶-4-基)氨基)-N’-(2-氯-6-甲苯甲酰)噻唑-5-碳酸肼)和叔丁基(2-(4-(6-((5-(2-(2-氯-6-甲苯甲酰)酰基羰基)噻唑-2-基)氨基)2-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸酯分別發(fā)生脫氫環(huán)化反應(yīng)來制備N-(6-(4-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧)乙基)哌嗪-1-基)2-甲基嘧啶-4-基)5-(5-(2-氯6-甲苯基)1，3，4-惡二唑-2-基)噻唑-2-胺和叔丁基(2-(4-(6-((5-(5-(2-氯-6-甲苯1,3,4-惡二唑-2-基)噻唑-2-基)氨基)2-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸酯

使所述N-(6-(4-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧)乙基)哌嗪-1-基)2-甲基嘧啶-4-基)5-(5-(2-氯6-甲苯基)1，3，4-惡二唑-2-基)噻唑-2-胺和所述叔丁基(2-(4-(6-((5-(5-(2-氯-6-甲苯1,3,4-惡二唑-2-基)噻唑-2-基)氨基)2-甲基嘧啶 -4-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸酯分別發(fā)生取代反應(yīng)以生成所述噻唑雜環(huán)類化合物；

其中，所述噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

，其中，R為：

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，還提供了一種噻唑雜環(huán)類化合物的制備方法，包括：使叔丁基(5-乙炔噻唑-2-基)氨基甲酸酯與1-疊氮-2-氯苯反應(yīng)生成叔丁基(5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-基l)氨基甲酸酯；

使所述叔丁基(5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-基)氨基甲酸酯與三氟乙酸反應(yīng)生成5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺；

使5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺與4,6-二氯-2-甲基嘧啶反應(yīng)生成N-(6-氯-2-甲基嘧啶-4-基)-5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺；

使所述N-(6-氯-2-甲基嘧啶-4-基)-5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺與哌嗪類化合物反應(yīng)，生成所述噻唑雜環(huán)類化合物；

其中，所述哌嗪類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

所述噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

并且其中，R至少包括

根據(jù)本發(fā)明的又一方面，還提供了上述噻唑雜環(huán)類化合物在用于治療白血病的藥物中的應(yīng)用。

在上述應(yīng)用中，所述用于治療白血病的藥物包含所述噻唑雜環(huán)類化合物、所述噻唑雜環(huán)類化合物在藥學(xué)上可接受的鹽、酯、水合物或它們的組 合以及輔料。

在上述應(yīng)用中，所述治療白血病的藥物的劑型選自片劑、膠囊劑、丸劑、栓劑、氣霧劑、口服液體制劑、顆粒劑、散劑、注射劑、糖漿劑、酒劑、酊劑、露劑、膜劑或它們的組合。

在上述應(yīng)用中，所述治療白血病的藥物的給藥方式包括口服、注射、植入、外用、噴霧、吸入或它們的組合。

從而，本發(fā)明提供了一類新的噻唑雜環(huán)類化合物及其制備方法和應(yīng)用，通過細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的噻唑雜環(huán)類化合物均可以抑制K562、HL60、KG1a細(xì)胞的增殖，通過測定IC₅₀和IC₉₀值發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的噻唑雜環(huán)類化合物對K562、HL60、KG1a細(xì)胞的增殖的抑制作用均可達(dá)到90％，并且特別是本發(fā)明提供的實(shí)例3化合物(化合物4c)在藥物濃度低于陽性對照藥物達(dá)沙替尼的情況下，可以同樣實(shí)現(xiàn)抑制K562、HL60、KG1a細(xì)胞增殖的效果，因此本發(fā)明提供的噻唑雜環(huán)類化合物可以用于治療白血病。

附圖說明

圖1示出了化合物4a的1H NMR。

圖2示出了化合物4a的¹³C NMR。

圖3示出了化合物4b的¹H NMR。

圖4示出了化合物4b的¹³C NMR。

圖5示出了化合物4c的¹H NMR。

圖6示出了化合物4c的¹³C NMR。

圖7示出了化合物4d的¹H NMR。

圖8示出了化合物4d的¹³C NMR。

圖9示出了化合物13a的¹H NMR。

圖10示出了化合物13a的¹³C NMR。

圖11示出了化合物13b的¹H NMR。

圖12示出了化合物13b的¹³C NMR。

圖13示出了化合物13c的¹H NMR。

圖14示出了化合物13c的¹³C NMR。

圖15示出了化合物13d的¹H NMR。

圖16示出了化合物13d的¹³C NMR。

圖17示出了化合物13e的¹H NMR。

圖18示出了化合物13e的¹³C NMR。

圖19示出了化合物25a的¹H NMR。

圖20示出了化合物25a的¹³C NMR。

圖21示出了化合物25c的¹H NMR。

圖22示出了化合物25c的¹³C NMR。

圖23示出了化合物25d的¹H NMR。

圖24示出了化合物25d的¹³C NMR。

圖25示出了化合物25e的¹H NMR。

圖26示出了化合物25e的¹³C NMR。

圖27示出了化合物25f的¹H NMR。

圖28示出了化合物25f的¹³C NMR。

圖29示出了達(dá)沙替尼、實(shí)例1和實(shí)例4化合物對K562細(xì)胞的抑制作用。

圖30示出了實(shí)例2化合物對K562細(xì)胞的抑制作用。

圖31示出了實(shí)例3化合物對K562細(xì)胞的抑制作用。

圖32示出了實(shí)例5化合物、實(shí)例6化合物、實(shí)例7化合物、實(shí)例8化合物、實(shí)例9化合物對K562細(xì)胞的抑制作用。

圖33示出了實(shí)例10化合物、實(shí)例11化合物、實(shí)例12化合物、實(shí)例13化合物、實(shí)例14化合物對K562細(xì)胞的抑制作用。

圖34示出了達(dá)沙替尼、實(shí)例1化合物、實(shí)例4化合物對HL60細(xì)胞的抑制作用。

圖35示出了實(shí)例2化合物對HL60細(xì)胞的抑制作用。

圖36示出了實(shí)例3化合物對HL60細(xì)胞的抑制作用。

圖37示出了實(shí)例5化合物、實(shí)例6化合物、實(shí)例7化合物、實(shí)例8化合物、實(shí)例9化合物對HL60細(xì)胞的抑制作用。

圖38示出了實(shí)例10化合物、實(shí)例11化合物、實(shí)例12化合物、實(shí)例13化合物、實(shí)例14化合物對HL60細(xì)胞的抑制作用。

圖39示出了達(dá)沙替尼、實(shí)例1化合物、實(shí)例2化合物、實(shí)例3化合物、實(shí)例4化合物對KG1a細(xì)胞的抑制作用。

圖40示出了實(shí)例5化合物、實(shí)例6化合物、實(shí)例7化合物、實(shí)例8化合物、實(shí)例9化合物對KG1a細(xì)胞的抑制作用。

圖41示出了實(shí)例10化合物、實(shí)例11化合物、實(shí)例12化合物、實(shí)例13化合物、實(shí)例14化合物對KG1a細(xì)胞的抑制作用。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

在本發(fā)明中提供的噻唑雜環(huán)類化合物的結(jié)構(gòu)通式為：

其中，通式中

即，上述通式可以為：

實(shí)施例1具有通式一的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成和結(jié)構(gòu)鑒定

在上述通式一中：

具有通式一的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成實(shí)驗(yàn)步驟(通式一所包含的實(shí)例化合物實(shí)驗(yàn)步驟)如下：

1.通用合成路線

2.具體合成步驟：

2.1：化合物3：N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(2-(1，3-二氧代異吲哚啉)乙基) 哌嗪)-2-甲基嘧啶)氨基)噻唑-5-甲酰胺的合成

0℃下，將化合物1(500mg，1.02mmol)，三苯基磷PPh₃(349mg，1.33mmol)，鄰苯二甲酰亞胺2(195.7mg，1.33mg)加入到有10mL重蒸的無水四氫呋喃中，然后在攪拌條件下加入偶氮二甲酸二異丙酯DIAD(226.4mg，1.33mmol)，低溫?cái)嚢?0min后移至室溫反應(yīng)，直至原料1反應(yīng)完全(有時(shí)反應(yīng)不能進(jìn)行到底)。反應(yīng)結(jié)束后，低壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，然后柱層析純化即可得到化合物3(白色固體，555mg)。產(chǎn)率為87.8％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.04(br，1H)，7.83-7.85(m，2H)，7.70-7.72(m，2H)，7.45(s，1H)，7.30(dd，J＝0.8，7.2Hz，1H)，7.14-7.20(m，2H)，5.78(s，1H)，3.85(t，J＝6.4Hz，2H)，3.56(br，4H)，2.68(t，J＝6.4Hz，2H)，2.60(br，4H)，2.50(s，3H)，2.35(s，3H)。

實(shí)例1化合物4a:N-(2-氯-(6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-氨乙基)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺的合成

將化合物3(606mg，0.98mmol)加入到有10mL乙醇的圓底燒瓶中，然后加入5mL水合肼，加熱至78℃回流兩個(gè)小時(shí)即可反應(yīng)完全，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，然后加氯化鈉飽和溶液，用四氫呋喃萃取3次，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。柱層析進(jìn)一步純化得化合物4a(白色固體)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm9.88(br，1H)，8.23(s，1H)，7.40(dd，J＝7.2Hz，1H)，7.24-7.30(m，2H)，6.06(s，1H)，3.52(br，4H)，2.68(t，J＝6.4Hz，2H)，2.44(t，J＝4.4Hz，4H)，2.41(s，3H)，2.36(t，J＝6.4Hz，2H)，2.24(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.61，163.11，162.84，160.42，157.47，141.32，139.29，134.02，132.92，129.48，128.62，127.47，126.11，83.14，60.63，52.89，44.09，38.72， 26.05，18.77；

HRMS-ESI(+)：C₂₂H₂₈ClN₈OS計(jì)算值487.1759，檢測到487.1805[M+H]⁺。

實(shí)例2化合物4b:N-(2-氯-(6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-異硫氰酸酯)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺的合成

0℃下，將化合物4a(100mg，0.21mmol)加入到有3mL二氯甲烷圓底燒瓶中，然后加入二環(huán)己基碳二亞胺DCC(1.1eq)，然后攪拌條件下，緩慢滴加二硫化碳CS₂(15eq)，滴加完后，在低溫下攪拌5min后，移去冰水浴，然后常溫?cái)嚢柚练磻?yīng)完全。減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，硅膠柱層析純化即可得到化合物4b(白色固體)。該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm11.47(s，1H)，9.88(s，1H)，8.23(s，1H)，7.40(dd，J＝1.2，7.2Hz，1H)，7.24-7.30(m，2H)，6.07(s，1H)，3.80(t，J＝6.0Hz，2H)，3.54(br，4H)，2.66(t，J＝6.0Hz，2H)，2.54(br，4H)，2.42(s，3H)，2.24(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.67，163.02，162.81，160.39，157.44，141.30，139.29，134.00，132.91，130.09，129.49，128.63，127.47，126.19，83.17，56.80，52.24，44.11，43.07，26.05，18.77；

HRMS-ESI(+)：C₂₃H₂₆ClN₈OS₂計(jì)算值，529.1359；檢測到529.1356.[M+H]⁺。

實(shí)例3化合物4c：N-(2-氯-(6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-丙烯酰胺)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺的合成

0℃下，將化合物4a(150mg，0.31mmol)加入到有3mL二氯甲烷的圓底燒瓶中，然后攪拌條件下加入上述制備的丙烯酰氯(3mL，0.35mmol)和Et₃N(47mg，0.46mmol)，加畢，在低溫下攪拌5min后，移去冰水浴，然后常溫?cái)嚢柚练磻?yīng)完全。反應(yīng)液用飽和食鹽水洗滌2次，有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，硅膠柱層析純化即可得到化合物4c(白色固體)。該化合物的 ¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm11.48(s，1H)，9.89(s，1H)，8.23(s，1H)，8.08(s，1H)，7.40(dd，J＝1.2，7.2Hz，1H)，7.24-7.31(m，2H)，7.25(dd，J＝10，16.8Hz，1H)，6.11(d，J＝1.2Hz，1H)，6.07(s，1H)，5.59(dd，J＝0.4，9.6Hz，1H)，3.52(br，4H)，3.31(s，2H)，2.50-2.51(m，9H)，2.42(s，1H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.64，165.07，163.02，162.82，160.41，157.44，141.34，139.29，134.02，133.03，132.29，129.47，128.61，127.46，126.19，125.43，83.16，57.30，52.67，43.93，36.51，26.04，18.78；HRMS-ESI(+)：C₂₅H₃₀ClN₈O₂S計(jì)算值541.1901；檢測到541.1879[M+H]⁺。

實(shí)例4化合物4d：N-(2-氯-(6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-氯乙酰胺)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺的合成

0℃下，將化合物4a(100mg，0.20mmol)加入到有2mL二氯甲烷的圓底燒瓶中，然后攪拌條件下加入氯乙酰氯(44mg，0.39mmol)和Et₃N(45.5mg，0.45mmol)，加畢，在低溫下攪拌5min后，移去冰水浴，然后常溫?cái)嚢柚练磻?yīng)完全。反應(yīng)液用飽和食鹽水洗滌2次，有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，硅膠柱層析純化即可得到化合物4d(米白色固體)。該化合物的 ¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm9.95(s，1H)，8.27(s，2H)，7.40(d，J＝7.2Hz，1H)，7.23-7.30(m，2H)，6.09(s，1H)，4.08(s，2H)，3.52(br，4H)，3.25(q，J＝6，12Hz，1H)，2.41-2.48(m，9H)，2.24(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.86，162.79，162.44，161.47，160.37，157.78，141.42，139.30，134.05，132.96， 129.47，128.60，127.46，126.51，84.03，59.44，58.19，53.07，43.16，37.88，26.01，18.81；HRMS-ESI(+)：C₂₄H₂₉Cl₂N₈O₂S計(jì)算值563.1511；檢測到563.1542[M+H]⁺。

實(shí)施例2具有通式二的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成和結(jié)構(gòu)鑒定

具有通式二的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成實(shí)驗(yàn)步驟(通式二所包含的實(shí)例化合物實(shí)驗(yàn)步驟)如下：

1.通用路線

2.具體合成步驟：

2.1化合物9a-9b的制備

將化合物7(5.67g，18.98mmol)，不同R基團(tuán)的哌嗪(2-5eq)以及DIPEA(4.91g，37.99mmol)加入到攪拌的1，4-二氧六環(huán)(95mL)中，然后加熱至100-105℃回流3-12h，反應(yīng)完全后冷卻至室溫(一般過夜)，有大量固體析出，抽濾，然后用蒸餾水洗滌濾餅得化合物9(白色固體)。產(chǎn)率90％左右。

化合物9a的核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm8.01(s，1H)，7.71(dd，J＝1.2，7.6Hz，4H)，7.35-7.46(m，6H)，5.74(s，1H)，4.33(q，J＝7.2Hz，2H)，3.84(t，J＝6.0Hz，2H)，3.59(br，4H)，2.63(t，J＝6.0Hz，2H)，2.57(br，4H)，2.54(s，3H)，1.35(t，J＝7.2Hz，3H)，1.071(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ166.31，165.51，162.94，162.30，156.567，143.36，135.63，133.68，129.73，127.73，121.44，82.93，62.09，60.86，60.32，53.34，44.09，26.89，25.80，19.21，14.45。

化合物9b的核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm10.72(s，1H)，8.05(s，1H)，5.79(s，1H)，5.02(br，1H)，4.36(q，J＝7.2Hz，2H)，3.64(s，4H)，3.28(br，2H)，2.54(s，9H)，1.46(s，9H)，1.38(t，J＝7.2Hz，3H)； ¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)：δ165.62，164.22，162.85，162.30，157.23，156.03，145.98，120.59，83.32，78.01，60.89，57.75，52.71，44.06，37.83，28.73，26.03，14.78。

1.2.化合物10a-10b的制備

將化合物9加入兩口圓底燒瓶中，加入213mL乙醇，攪拌下加入80％的水合肼106.5mL，加熱至78℃回流反應(yīng)2h。反應(yīng)后，冷卻至室溫，有大量固體析出。然后抽濾，濾餅用大量水洗滌，真空干燥得化合物10(白色固體)。

化合物10b的核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm11.33(s，1H)，9.56(s，1H)，7.92(s，1H)，6.69(t，J＝4.8Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.51(s，1H)，3.49(br，1H)，3.07(q，J＝6.0Hz，2H)，2.45(br，4H)，2.41(s，3H)，2.36(t，J＝6.8Hz，2H)，1.38(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)：δ165.60，162.84，162.26，161.94，157.48，156.03，139.41，125.39，82.95，78.01，57.74，52.71，44.06，37.81，28.72，26.05。

2.3酸銨縮合制備雙酰肼化合物11a-11b

0℃下將化合物10(1.0eq)和三乙胺(8.7g，8.60mmol)分批緩慢加入到29的二氯甲烷溶液中，約4h后反應(yīng)完畢。直接向反應(yīng)體系中加入20mL蒸餾水，抽濾，濾餅用蒸餾水洗滌，干燥即可得化合物11(白色固體)。產(chǎn)率50％-80％。

化合物11a：2-((6-(4-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧)乙基)哌嗪-1-基)2- 甲基嘧啶-4-基)氨基)-N’-(2-氯-6-甲苯甲酰)噻唑-5-碳酸肼)的結(jié)構(gòu)式如下：

化合物11a的核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm11.64(s，1H)，10.49(s，1H)，10.40(s，1H)，8.18(s，1H)，7.66(dd，J＝1.2，7.2Hz，4H)，7.45-7.53(m，6H)，7.33-7.38(m，2H)，7.27(dd，J＝2.4，6.4Hz，1H)，6.20(s，1H)，4.36(dd，J＝0.8，12.4Hz，2H)，4.07(br，2H)，3.64(d，J＝10.8Hz，2H)，3.47(t，J＝12.4Hz，2H)，3.38(s，2H)，3.22(d，J＝9.6Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.46(s，3H)，1.02(s，9H)；

化合物11b：叔丁基(2-(4-(6-((5-(2-(2-氯-6-甲苯甲酰)?；驶?噻唑-2-基)氨基)2-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸酯的結(jié)構(gòu)式如下：

化合物11b的核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm11.45(s，1H)，10.44(s，1H)，10.38(s，1H)，8.14(s，1H)，7.33-7.38(m，2H)，7.27(dd，J＝6.4HZ，1H)，6.69(t，J＝1.2Hz，1H)，6.06(s，1H)，3.51(br，4H)，3.08(q，J＝6.4Hz，2H)，2.46(s，7H)，2.433(s，3H)，2.37(t，J＝6.4Hz，2H)，1.39(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)：δ166.01，165.61，163.04，162.87，161.32，157.39，156.04，141.29，138.34，135.79，130.67，130.51，129.16，126.85，124.49，83.17，78.02，57.72，52.70，45.99，44.07，37.80，28.73，26.00，19.54。

2.4脫氫環(huán)化反應(yīng)制備噁二唑化合物12a-12b

將化合物11(5.78mmol)溶于30mL二氯甲烷中，然后加入3eq的DIPEA(2.24g，17.34mmol)和1.5eq的TsCl(1.65g，8.68mmol)，常溫?cái)嚢柚粱衔?1反應(yīng)完全，大約3h，反應(yīng)體系由懸浮液變?yōu)辄S色澄清溶液。反應(yīng)完全后加入氨的水溶液除去過量的TSCl，有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，粗品過柱純化得到化合物12(白色固體)。產(chǎn)率76.3％-79％。

化合物12a：N-(6-(4-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧)乙基)哌嗪-1-基)2-甲基嘧啶-4-基)5-(5-(2-氯6-甲苯基)1，3，4-惡二唑-2-基)噻唑-2-胺的結(jié)構(gòu)式如下：

化合物12a的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm10.13(br，1H)，8.10(s，1H)，7.68(d，J＝6.4Hz，4H)，7.32-7.45(m，8H)，7.22-7.25(m，1H)，5.81(s，1H)，3.83(t，J＝5.2Hz，2H)，3.60(br，4H)，2.55-2.60(m，9H)，1.05(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆):δ166.34，164.14，162.88，160.65，160.45，156.30，141.48，140.14，135.56，134.91，133.59，132.04，129.69，128.86，127.69，127.35，123.72，113.31，82.85，61.90，60.19，53.20，44.00，26.81，25.61，20.59，19.15。

化合物12b：叔丁基(2-(4-(6-((5-(5-(2-氯-6-甲苯1,3,4-惡二唑-2-基)噻唑-2-基)氨基)2-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸酯的結(jié)構(gòu)式如下：

化合物12b的制備方法同上。其核磁數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(400MHz，CDCl3)：δppm10.87(br，1H)，8.07(s，1H)，7.38-7.42(m，2H)，7.28(d，J＝4Hz， 1H)，5.84(s，1H)，4.99(br，1H)，3.63(br，4H)，3.26(d，J＝3.2Hz，2H)，2.51(s，9H)，2.40(s，3H)，1.47(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃):δ166.39，164.04，162.85，160.56，160.51，156.33，156.00，141.57，139.98，134.92，132.14，128.98，127.46，123.76，113.42，82.82，79.31，57.30，52.49，43.94，37.04，29.69，28.48，25.57，20.64。

2.5噁二唑化合物13a-13e的合成

實(shí)例5化合物：13a的合成

將化合物12a(3.00g，4.00mmol)加入到有40mL四氫呋喃的圓底燒瓶中，然后加入固體TBAF(3.14g，12.01mmol)，常溫?cái)嚢?h，反應(yīng)完全后用120mL飽和食鹽水洗滌3次，有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，粗品進(jìn)一步柱層析純化得到化合物13a(白色固體，1.974g)。產(chǎn)率為96.3％?；衔锏?¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆):δppm11.77(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55-7.61(m，2H)，7.46(d，J＝7.2Hz，1H)，6.07(s，1H)，4.45(t，J＝5.2Hz，1H)，3.53(br，6H)，3.33(s，6H)，2.42-2.45(m，9H)，2.30(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)：165.53，162.97，162.82，160.83，160.14，156.97，142.50，141.84，134.15，133.40，129.85，127.79，123.64，112.04，83.24，60.63，58.94，53.16，44.06，25.94，20.30；HRMS-ESI(+)：C₂₃H₂₆ClN₈O₂S，計(jì)算值513.1588；檢測到513.1607[M+H]⁺。

實(shí)例6化合物13b:N-(6-(4-(2-氨基乙基)哌嗪基)-2-甲基嘧啶基)-2-(5-(2-氯-6-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑基)氨基噻唑的合成

將化合物12b(173mg，0.28mmol)溶于2.5mL二氯甲烷中，常溫?cái)嚢柘录尤?CF₃COOH，室溫反應(yīng)至化合物12b完全消失。低壓濃縮除去反應(yīng)中的溶劑，然后加入飽和食鹽水，用飽和的NaHCO₃調(diào)節(jié)pH9～10，用四氫呋喃萃取三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，粗品進(jìn)一步柱層析純化得到化合物13b(白色固體，144.5mg)。產(chǎn)率為83％。該化合物的 ¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆):δppm8.17(s，1H)，7.55-7.61(s，1H)，7.45(d，J＝6.4Hz，1H)，6.15(s，1H)，3.56(br，4H)，2.92(t，J＝6.4Hz，2H)，2.56(t，J＝6.4Hz，2H)，2.50(s，4H)，2.45(s，3H)，2.30(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)：165.54，162.97，162.80，160.84，160.15，157.06，142.53，141.85，134.15，133.41，129.86，127.80，123.65，112.01，83.37，55.06，52.47，43.98，36.34，25.95，20.29；HRMS-ESI(+)：C₂₃H₂₇ClN₉O_S，計(jì)算值512.1748；檢測到512.1733[M+H]⁺。

從化合物13b進(jìn)一步合成其它衍生物13c-13e(實(shí)例7-9化合物)：具體合成方法見上述4b-4d。

實(shí)例7化合物

合成化合物13c的產(chǎn)率為37％。該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆):δppm11.77(s，1H)，8.18(s，1H)，7.61-7.55(m，2H)，7.48-7.46(dd，J＝7.2，0.8Hz，1H)，6.10(s，1H)，3.80(t，J＝6.4Hz，2H)，3.56(br，4H)，2.66(t，J＝6.4Hz，2H)，2.54(br，4H)，2.46(s，3H)，2.30(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆):δ165.57，162.97，162.80，160.84，160.16，157.02，142.49，141.85，134.17，133.39，129.85，127.80，123.66，112.08，88.33，56.80，52.23，44.13，43.08，25.95，20.30；HRMS-ESI(+)：C₂₄H₂₅ClN₉OS₂，計(jì)算值554.1311；檢測到554.1332[M+H]⁺。

實(shí)例8化合物

化合物13d的¹HNMR(400MHz，CDCl₃):δppm10.09(br，1H)，8.10(s，1H)，7.39(m，2H)，7.30(d，J＝2Hz，1H)，6.34(dd，J＝1.2，17.2Hz，1H)，6.14-6.21(m，2H)，6.88(dd，J＝1.2，10Hz，1H)，33.68(br，4H)，3.51(q，J＝5.6，11.2Hz，2H)，2.56-2.61(m，9H)，2.41(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆):δ165.57，165.05，162.98，162.82，160.84，160.16，157.00，142.51，141.85，134.17，133.40，132.30，129.85，127.80，125.43，123.66，112.07，83.29，57.33，52.70，44.01，36.54，25.95，20.30；HRMS-ESI(+)：C₂₆H₂₉ClN₉O₂S，計(jì)算值566.1848；檢測到566.1868[M+H]⁺。

實(shí)施例9化合物

化合物13e的¹HNMR(400MHz，CDCl₃):δ9.62(br，1H)，8.10(s，1H)，7.40-7.44(m，2H)，7.22(d，J＝0.8Hz，1H)，5.82(s，1H)，4.10(s，2H)，3.68(br，4H)，3.46(q，J＝5.6，11.2Hz，2H)，2.55-2.62(m，9H)，2.40(s，3H)；¹³C-NMR(100MHz，DMSO-d₆):166.54，165.61，162.92，162.70，160.82，160.16，157.09，142.51，141.84，134.16，133.40，129.85，127.80，123.64，112.11，83.54，58.24，56.61，52.21，43.15，37.89，25.93，20.30；HRMS-ESI(+)：C₂₅H₂₈Cl₂N₉O₂S，計(jì)算值588.1459；檢測到588.1359[M+H]⁺。

實(shí)施例3具有通式三的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成和結(jié)構(gòu)鑒定

具有通式三的噻唑雜環(huán)類化合物的化學(xué)合成實(shí)驗(yàn)步驟(通式三所包含的實(shí) 例化合物實(shí)驗(yàn)步驟)如下：

1.通用路線

2.具體合成步驟：

2.1化合物15的合成

取100mL兩口燒瓶，加入化合物14(5.00g，49.93mmol)，THF(50mL)，在0℃下攪拌，然后分別加入三乙胺(10.10g，99.81mmol)和DMAP(30mg，0.25mmol)。10min后，向燒瓶中滴加(Boc)₂O(13.08g，59.93mmol)。滴加完畢，撤掉冰浴，升至室溫，繼續(xù)攪拌3h，TLC檢測反應(yīng)完全，滴加蒸餾水淬滅。抽濾，將濾液旋干，與濾餅合并到一起，加入100mL二氯甲烷稀釋，用飽和的檸檬酸溶液(100mL)洗滌有機(jī)相3-5次，再用飽和氯化鈉溶液(100mL)洗有機(jī)相1-2次，無水硫酸鈉干燥，濃縮得到化合物15(白色固體，7.65g)。產(chǎn)率為76.4％。該化合物的¹HNMR(400MHz，CDCl₃):δppm12.71(bs，1H)，7.41(d，J＝3.5Hz，1H)，6.90(d，J＝3.5Hz，1H)，1.61(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ162.17，153，13，136.67，111.94，81.73，28.33；MS:[M+H]⁺201.01。

2.2化合物16的合成

化合物15(7.65g，38.20mmol)，二氯甲烷(76mL)置于燒瓶中，攪拌下分批加入NIS(8.6g，38.22mmol)，溶液迅速由無色變?yōu)樯钭仙?，加畢，室溫?cái)嚢?h，TLC檢測反應(yīng)完全。混合液加入二氯甲烷稀釋至100mL，用Na₂S₂O₃飽和溶液(100mL/次)洗滌有機(jī)相2-3次，分離出有機(jī)相，然后有機(jī)相用無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品，黃色固體11.42g；然后進(jìn)一步經(jīng)硅膠柱層析純化得到化合物16(白色固體粉末，8.32g)。產(chǎn)率為66.8％。該化合物的¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm12.19(bs，1H)，7.38(s，1H)，1.60(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ165.77，152.96，143.94，82.49，62.56，28.26；MS:[M+H]⁺326.85。

2.3化合物17的合成

化合物16(2.00g，6.13mmol)置于一干燥兩口燒瓶，在手套箱中加入CuI(116.7mg，0.61mmol)，PdCl₂(PPh₃)₂(215mg，0.31mmol)，然后抽真空，充氮?dú)?重復(fù)2-3次)；用注射器分別加入干燥三乙胺(1.86g，18.38mmol)，重蒸THF(20mL)和三甲基硅基乙炔(1.20g，12.26mmol)，溶液很快變?yōu)楹谏?，室溫?cái)嚢?2h。反應(yīng)結(jié)束后，用蒸餾水淬滅。砂芯漏斗鋪一層硅藻土，過濾除去反應(yīng)混合液中的固體，加壓濃縮除去有機(jī)溶劑，用二氯甲烷溶解，分別用蒸餾水，飽和氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相2-3次，無水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析分離純化。2.5％EtOAc/PE洗脫得到化合物17(黃色固體粉末，2.02g)。產(chǎn)率為55.5％。該化合物的¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm12.11(bs，1H)，δ7.46(s，1H)，δ1.60(s，9H)，0.26(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ161.44，152.63，141.83，111.78，101.17，94.33，82.53，53.42，28.27；MS:[M+H]⁺297.02。

2.4化合物18：叔丁基(5-乙炔噻唑-2-基)氨基甲酸酯的合成

化合物17(2.22g，7.49mmol)懸浮在溶劑甲醇(70mL)中，邊攪拌邊加入無水碳酸鉀(2.07g，15.00mmol)，30min后反應(yīng)結(jié)束，將溶劑旋干。加入二氯甲烷溶解，用蒸餾水洗滌有機(jī)相3次，飽和氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相1-2次，無水硫酸鈉干燥，濃縮得到化合物18(黃色粉末，1.64g)。產(chǎn)率為97.6％。該化合物 ¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm11.84(bs，1H)，7.53(s，1H)，3.39(s，1H)，1.61(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ161.94，152.75，142.42，110.49，83.27，82.59，73.96，28.26。

2.5化合物21：叔丁基(5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-基)氨基甲酸酯的合成

0℃下，化合物19(425mg，3.00mmol)，NaNO₂(414mg，6.00mmol)和5mLH₂O加至圓底燒瓶中，邊攪拌邊緩慢滴加3N鹽酸(3mL，9.00mmol)，加畢，繼續(xù)攪拌1h。稱取NaN₃(214.5mg，3.30mmol)，溶于2mLH₂O中，緩慢滴加至上述燒瓶中，繼續(xù)攪拌1.5h，TLC檢測，原料已消失，反應(yīng)完全。用二氯甲烷萃取反應(yīng)混合液，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)除去部分溶劑，加入乙腈溶液，繼續(xù)將二氯甲烷旋干，得到20的混合物，產(chǎn)物溶于乙腈，直接投下一步；

取另一燒瓶，加入化合物18，抽真空，充氮?dú)?，在氮?dú)饬髦屑尤牖衔?0(1-疊氮-2-氯苯)的乙腈溶液和催化量的納米Cu₂O(懸浮于H₂O中)，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。反應(yīng)結(jié)束后，柱層析分離純化產(chǎn)品，先用P:E＝5:1洗脫除去部分雜點(diǎn)，2％甲醇/二氯甲烷洗脫得到產(chǎn)品，即化合物21(751mg，85.8％)。該化合物的¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm10.91(bs，1H)，7.86(s，1H)，7.77(s，1H)，7.32-7.46(m，3H)，2.17(s，3H)，1.64(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ161.260，152.824，140.00，138.18，134.16，133.97，131.80，131.15，129.54，127.90，121.35，82.49，28.34，17.92；MS:[M+H]⁺391.78。

2.6化合物22：5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺的合成

化合物21(2.3g，5.88mmol)溶于CH₂Cl₂(30mL)中，常溫下邊攪拌邊加入 CF₃COOH(6mL)，室溫繼續(xù)攪拌3h，TLC檢測反應(yīng)完全，旋蒸除去溶劑和部分CF₃COOH，加入飽和碳酸氫鈉溶液至pH8～9。二氯甲烷萃取2-3次，合并有機(jī)相，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，低壓濃縮得到產(chǎn)品，即化合物22(棕黃色固體，1.67g)。產(chǎn)率為97.6％。該化合物的¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm7.77(s，1H)，7.40-7.45(m，3H)，7.32(s，1H)，5.33(bs，2H)，2.14(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ140.43，138.20，135.85，133.99，131.83，131.15，129.49，127.85，120.78，17.88。

2.7化合物24：N-(6-氯-2-甲基嘧啶-4-基)-5-(1-(2-氯-6-甲苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻唑-2-胺的合成

0℃下，將化合物22(1.67g，5.74mmol)加入到60％的NaH(1148mg，28.70mmol使用前用石油醚洗滌3次)的四氫呋喃溶液(57mL)中，攪拌下，將化合物23(1.12g，6.89mmol)分批加入到上述懸浮液中，加畢，低溫?cái)嚢?0min后移至室溫反應(yīng)過夜。旋蒸除去四氫呋喃溶液，加入60mL蒸餾水，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH5～6.5，二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相，用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。柱層析進(jìn)一步純化得化合物24(乳白色固體，1.8g)。產(chǎn)率為75.3％。該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm12.06(br，1H)，8.86(s，1H)，7.88(s，1H)，7.57-7.64(m，2H)，7.52(d，J＝7.2Hz，1H)，6.94(s，1H)，2.61(s，3H)，2.07(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ167.86，158.79，158.22，158.08，140.20，138.37，135.62，134.10，132.24，131.13，130.37，128.22，123.50，121.50，103.51，25.64，17.66；MS:[M+H]⁺418.03。

實(shí)例10至實(shí)例11化合物：25a-25b的合成

將化合物24(1.8g，4.30mmol)，哌嗪類化合物(21.51mmol)，DIPEA(1.11g，8.59mmol)均加入到圓底燒瓶中，然后加入反應(yīng)溶劑1，4-二氧六環(huán)43mL，加熱103℃回流攪拌3h，反應(yīng)完畢。冷卻至室溫(一般過夜)，有固體析出，抽濾，用水和乙酸乙酯分別洗滌2次，干燥后即可得到化合物25(白色固體)，產(chǎn)率為73-88％。注：反應(yīng)時(shí)間主要取決于哌嗪的量，反應(yīng)時(shí)間隨哌嗪量的增多而減少，大概可在3-20h浮動(dòng)。

實(shí)例10化合物

該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm11.26(s，1H)，8.78(s，1H)，7.76(s，1H)，7.50-7.63(m，3H)，6.05(s，1H)，4.47(bs，1H)，3.54(t，J＝5.6Hz，6H)，2.43-2.50(m，9H)，2.06(s，H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.58，162.84，159.56，157.60，140.64，138.37，135.34，134.16，132.18，131.13，130.34，128.20，123.04，119.99，82.65，60.61，58.89，53.15，44.01，26.05，17.64；HRMS-ESI(+)：C₂₃H₂₇ClN₉OS，計(jì)算值512.1748；檢測到512.1744[M+H]⁺。

該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm9.89(br，1H)，7.86(s，1H)，7.84(s，1H)，7.40-7.47(m，2H)，7.33(dd，J＝0.8，7.2Hz，1H)，5.87(s，1H)，5.03(br，1H)，3.66(br，4H)，3.29(d，J＝5.2Hz，2H)，2.51-2.56(m，9H)，2.18(s，3H)，1.48(s，9H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.59，162.86，159.59，157.62，156.04，140.64，138.38，135.35，134.18，132.18，131.15，130.34，128.20，123.04，120.01，82.67，78.02，66.83，57.76，52.74，44.11，37.84，28.73，26.05，17.65；MS:[M+H]⁺611.16。

2.9化合物25c-25f的合成

實(shí)例11化合物：25c的合成

將化合物25b(500mg，0.82mmol)加入到含有8mL二氯甲烷的圓底燒瓶中，攪拌下加入2mLCF₃COOH，加畢室溫反應(yīng)3h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全。低壓濃縮除去二氯甲烷，然后向體系中加入5mL甲醇，再加入固體碳酸鈉調(diào)節(jié)pH9～10，過濾除去不溶的固體，濾液濃縮，進(jìn)一步通過柱層析純化得化合物25c(334mg，白色固體)。產(chǎn)率為80％。該化合物的¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm8.78(s，1H)，7.76(s，1H)，7.56-7.64(m，2H)，7.51(dd，J＝0.4，7.2Hz，1H)，6.06(s，1H)，3.52(br，4H)，2.69(t，J＝6.4Hz，2H)，2.44-2.45(m，7H)，2.37(t，J＝6.4Hz，2H)，2.07(s，3H)，1.83(s，1H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.58，162.85，159.61，157.63，140.66，138.37，135.36，134.17，132.18，131.14，130.34，128.20，123.04，119.99，82.67，60.41，52.89，44.11，38.60，26.06，17.64；HRMS-ESI(+)：C₂₃H₂₈ClN₁₀S，計(jì)算值511.1908；檢測到511.1905[M+H]⁺。

實(shí)例12-14化合物：25d-25f的合成

在化合物25c基礎(chǔ)上采用與4b-4d同樣的方法合成了一系列的衍生物，如下示：

化合物25d：

實(shí)例12化合物

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm11.25(s，1H)，8.79(s，1H)，7.76(s，1H)，7.64-7.56(m，2H)，7.51(d，J＝7.2Hz，1H)，6.06(s，1H)，3.80(t，J＝5.6Hz，2H)，3.54(br，4H)，2.66(t，J＝5.6Hz，2H)，2.54(t，J＝4.4Hz，4H)，2.44(s，3H)， 2.07(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.62，162.82，159.59，157.65，140.65，138.37，135.36，134.18，132.16，131.15，130.33，130.19，128.19，123.04，120.03，82.75，56.83，52.26，44.14，43.09，26.06，17.65；HRMS-ESI(+)：C₂₄H₂₆ClN₁₀S₂，計(jì)算值553.1472；檢測到553.1387[M+H]⁺。

化合物25e：

實(shí)例13化合物

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm9.95(s，1H)，8.27(s，2H)，7.40(d，J＝7.2Hz，1H)，7.23-7.30(m，2H)，6.09(s，1H)，4.08(s，2H)，3.52(br，4H)，3.25(q，J＝6，12Hz，2H)，2.41-2.48(m，9H)，2.24(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ172.39，165.55，165.12，162.77，159.53，157.70，140.67，138.35，135.41，134.16，132.37，132.17，131.12，130.34，128.19，125.33，123.10，119.98，82.88，57.17，52.55，43.77，36.30，26.05，17.64；HRMS-ESI(+)：C₂₆H₃₀ClN₁₀OS，計(jì)算值565.2014；檢測到565.1992[M+H]⁺。

化合物25f：

實(shí)例14化合物

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm11.26(s，1H)，8.79(s，1H)，8.18(t，J＝5.2Hz，1H)，7.76(s，1H)，7.51-7.64(m，1H)，6.05(s，1H)，4.08(s，2H)，3.52(br，1H)，3.263(q，J＝6.4Hz，2H)，2.42-2.49(m，9H)，2.07(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，DMSO-d₆)δ165.82，162.40，161.48，159.35，157.94，140.58，138.36，135.43，134.15，132.21，131.13，130.36，128.21，123.17，120.27，83.59，59.45，58.20，53.05，43.15，37.89，26.02，17.65；HRMS-ESI(+)：C₂₆H₃₀ClN₁₀OS，計(jì)算值587.1624；檢測到587.1640[M+H]⁺。

實(shí)施例4由實(shí)施例1至實(shí)施例3制備的實(shí)例1至實(shí)例14化合物的活性測試

MTT粉末購買于Sigma公司，用磷酸緩沖液(PBS)將其配制成濃度為5毫克/毫升的溶液，選取0.22μm濾膜進(jìn)行過濾，然后于4℃下避光保存。K562細(xì)胞(慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞系)購于自北京金紫晶生物科技有限公司。實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞培養(yǎng)基為改良型RPMI-1640(Hyclone)基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加10％的胎牛血清(Hyclone)。

MTT比色法測定細(xì)胞活性包括下面幾個(gè)步驟(以K562細(xì)胞的測試方法為例，KG1aHL60細(xì)胞的測試方法與K562細(xì)胞的方法一致)：

(1)選取處于對數(shù)生長期的K562細(xì)胞，按每孔3×10³接種于96孔板，5％CO₂，37℃孵育培養(yǎng)過夜。

(2)加藥，本實(shí)驗(yàn)中設(shè)置了9個(gè)濃度梯度，體系中藥物終濃度梯度為：30μM，15μM，7.5μM，3.7μM，1.8μM，0.9μM，0.5μM，0.2μM，0.1μM。每個(gè)濃度5個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)置對照組(不加藥僅接種細(xì)胞)及空白孔(未接種細(xì)胞僅加培養(yǎng)基)，5％CO₂，37℃培養(yǎng)箱孵育72小時(shí)。

(3)每孔再加入20μLMTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖洗2-3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。

(4)4小時(shí)后終止培養(yǎng)，小心地吸去孔內(nèi)的液體。并向每孔加入150μL的二甲基亞砜。然后置于搖床上低速振蕩15分鐘左右，使結(jié)晶物充分溶解。采用酶聯(lián)免疫檢測儀MULTISKANFC(Thermoscientific)測定490nm處及570nm各孔的吸光度值，測量時(shí)以空白孔作為調(diào)零孔。

(5)處理數(shù)據(jù)。以藥物濃度為橫坐標(biāo)，細(xì)胞數(shù)為縱坐標(biāo)，用數(shù)據(jù)處理軟件SPSS軟件(IBM公司)進(jìn)行幾率單位加權(quán)回歸法(Bliss法)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，作圖，得到IC₅₀和IC₉₀值，見表1。

表1 實(shí)例1至實(shí)例14化合物對K562，KG1a，HL60細(xì)胞的抑制作用

通過表1，可以看出在實(shí)施例中制備的實(shí)例1至實(shí)例14化合物(分別對應(yīng)于化合物4a-4d，13a-13e，25a以及25c-25f)均可以有效地抑制K562，HL60，KG1a細(xì)胞的增殖，特別是實(shí)例3化合物(化合物4c)在藥物濃度低于陽性對照藥物達(dá)沙替尼的情況下，仍可以同樣實(shí)現(xiàn)有效抑制K562，HL60，KG1a細(xì)胞增殖的效果，因此，本發(fā)明提供的實(shí)例1至實(shí)例14化合物可以用于治療白血病。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改，等同替換，改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。