專(zhuān)利名稱(chēng)：抗菌素化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及碳代青霉烯(carbapenems)，特別是涉及含有羧基取代的苯基的這類(lèi)化合物。本發(fā)明還涉及它們的制備方法，制備它們的中間體，它們作為治療劑的用途以及含有它們的藥物組合物。
本發(fā)明的化合物是抗菌素并且可用于治療任何通常用抗菌素治療的疾病，例如治療哺乳動(dòng)物包括人體的細(xì)菌感染。
首先于1974年由發(fā)酵介質(zhì)中分離出了碳代青霉烯并且發(fā)現(xiàn)其具有廣譜抗菌活性。由于該發(fā)現(xiàn)，已研究出許多新的碳代青霉烯衍生物并且公開(kāi)和發(fā)表了幾百篇專(zhuān)利和科學(xué)論文。
首先，至今唯一商業(yè)銷(xiāo)售的碳代青霉烯是imipenem(N-亞胺甲基噻吩阿霉素。該化合物具有廣譜的抗菌活性。
本發(fā)明提供了具有廣譜抗菌活性包括抗革蘭氏陽(yáng)性和陰性、需氧和厭氧細(xì)菌活性的化合物。它們對(duì)β-內(nèi)酰胺酶具有良好的穩(wěn)定性。此外，本發(fā)明的有代表性的化合物具有非常好的持久作用。
本發(fā)明所涉及的碳代青霉烯衍生物根據(jù)通常所認(rèn)可的半系統(tǒng)命名法命名
因此，本發(fā)明提供了一種式(Ⅰ)的化合物或其可藥用的鹽或可體內(nèi)水解的酯
其中R1是1-羥基乙基、1-氟乙基或羥甲基;
R2是氫或C1-4烷基;
R3是氫或C1-4烷基;
R4和R5是相同或不同的，并且選自氫、囟素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、氨基磺?；?、C1-4烷基氨基磺?；⒍?C1-4烷基氨基磺酰基、氨基甲?；?、C1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲酰基、三氟甲基、磺酸、氨基、C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基、C1-4鏈烷酰氨基、C1-4鏈烷?；?N-C1-4烷基)氨基、C1-4烷磺酰氨基和C1-4烷基S(O)-n，其中n是0、1或2條件是在與-NR3-連接的鏈的鄰位上沒(méi)有羥基或羧基取代基。
本發(fā)明所用的烷基包括直鏈和支鏈取代基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和異丁基。
R1優(yōu)選的是1-羥基乙基。
R2為氫或C1-4烷基例如甲基、乙基、正丙基、異丙基或正丁基。R2優(yōu)選的是氫或甲基，R2特別優(yōu)選的是甲基。
R3為氫或C1-4烷基例如甲基、乙基、正丙基、異丙基或正丁基。R3優(yōu)選的是氫。
R4和R5是相同或不同的，并且選自氫;囟素例如氟、溴或氯;氰基;C1-4烷基例如甲基、乙基、正丙基、異丙基或正丁基;硝基;羥基;羧基;C1-4烷氧基例如甲氧基或乙氧基;C1-4烷氧羰基例如甲氧羰基、乙氧羰基和正丙氧羰基;氨基磺酰基;C1-4烷基氨基磺?；缂装被酋；鸵野被酋；?二-C1-4烷基氨基磺?；缍装被酋；⒓滓野被酋；投野被酋；?氨基甲?；?C1-4烷基氨基甲?；缂谆被柞；蛞一被柞；?二-C1-4烷基氨基甲?；缍谆被柞；蚨一被柞；?三氟甲基;磺酸;氨基;C1-4烷基氨基例如甲氨基或乙氨基;二-C1-4烷基氨基例如二甲氨基或二乙氨基;C1-4鏈烷酰氨基例如乙酰氨基或丙酰氨基;C1-4鏈烷酰基(N-C1-4烷基)氨基例如N-甲基乙酰氨基;C1-4烷磺酰氨基例如甲磺酰氨基;以及C1-4烷基S(O)n-例如甲硫基、甲基亞磺酰基或甲磺?；?br> 具體地說(shuō)，一類(lèi)合適的化合物是那些化合物，其中R4和R5是相同或不同的，并且選自氫、氟、氯、羥基、羧基、氰基、硝基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲氧羰基、氨基甲酰基、甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、三氟甲基、磺酸、甲基亞磺?；⒓谆酋；?、甲磺酰氨基或乙酰氨基。
R4和R5可以都不是氫，但通常特別優(yōu)選的是R4和R5中至少一個(gè)是氫。
特別優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R4是氫、羧基、氟、氯、甲基、甲氧基、氰基、磺酸或甲氧羰基，而R是氫。
本發(fā)明包括式(Ⅰ)化合物的所有差向立體異構(gòu)、非對(duì)映異構(gòu)及互變異構(gòu)形式，其中在5-位的絕對(duì)立體化學(xué)如式(Ⅰ)中所示。當(dāng)一個(gè)鍵用一個(gè)楔表示時(shí)，這表明在三維上該鍵將從紙面出來(lái)，而當(dāng)一個(gè)鍵是陰影時(shí)，這表明在三維上該鍵將返入紙面中。式(Ⅰ)化合物具有許多其它的立體中心，即在R1基團(tuán)(當(dāng)R1是1-羥基乙基或1-氟乙基時(shí))中;在6-位上;在1-位(當(dāng)R2是C1-4烷基)上;以及在吡咯烷環(huán)中的2′和4′位上
優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中β-內(nèi)酰胺環(huán)質(zhì)子相互呈反式構(gòu)型。當(dāng)R1是1-羥基乙基或1-氟乙基時(shí)，優(yōu)選的是其8-取代基具有R-構(gòu)形。因此，優(yōu)選類(lèi)型的化合物是式(Ⅲ)的化合物及其可藥用的鹽和可體內(nèi)水解的酯
其中R2、R3、R4和R5如前述定義。
當(dāng)R2是C1-4烷基例如甲基，優(yōu)選的是該化合物為1R構(gòu)型的形式。
優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中吡咯烷環(huán)在其2′-和4′-位上具有下列絕對(duì)的立體化學(xué)
本發(fā)明的優(yōu)選的一類(lèi)化合物是式(Ⅳ)的化合物及其可藥用的鹽和可體內(nèi)水解的酯
其中R3、R4和R5如前述式(Ⅰ)中所定義。
式(Ⅳ)中特別優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R3是氫，而R4和R5是相同或不同的并且選自氫、氟、氯、羥基、羧基、氰基、硝基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲氧羰基、氨基甲?；?、甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲?；⒓谆酋；⑷谆?、磺酸、甲基亞磺?；?、甲磺酰氨基或乙酰氨基。
式(Ⅳ)中特別優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R3和R5都為氫，而R4是氫、羧基、氟、氯、甲基、甲氧基、氰基、磺酸或甲氧羰基。
合適的藥用鹽包括酸加成鹽例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。另一方面，合適的鹽是堿性鹽例如堿金屬鹽如鈉或鉀鹽;堿土金屬鹽如鈣或鎂鹽;有機(jī)胺鹽如三乙胺、嗎啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、普魯卡因、二芐基胺、N，N-二芐基乙胺或氨基酸如賴(lài)氨酸鹽。為了避免疑問(wèn)，可能有一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)成鹽陽(yáng)離子，但這要取決于羧酸官能團(tuán)的數(shù)量以及所述陽(yáng)離子的價(jià)數(shù)。
優(yōu)選的藥用鹽是鈉和鉀鹽。然而，為了便于在制備過(guò)程中分離該鹽，不論其是否可藥用，在所選溶劑中不易溶解的鹽可能是優(yōu)選的。
可體內(nèi)水解的酯是那些在人體內(nèi)水解生成母體化合物的可藥用酯。該酯類(lèi)可以通過(guò)對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物給藥例如靜脈內(nèi)給藥試驗(yàn)化合物然后檢測(cè)該試驗(yàn)動(dòng)物的體液進(jìn)行鑒定。合適的對(duì)羧基可體內(nèi)水解的酯包括C1-4烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基酯、C1-6鏈烷酰氧基甲基酯例如新戊酰氧基甲基酯、2-苯并〔C〕呋喃酮基酯、C3-8環(huán)烷氧羰基氧基C1-6烷基酯例如1-環(huán)己氧羰基氧乙基酯;1，3-二氧戊環(huán)-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-酮基甲基酯;和C1-6烷氧羰氧基乙基酯例如1-甲氧羰氧基乙基酯并且可以在本發(fā)明化合物的任何羧基上形成。合適的對(duì)羥基可體內(nèi)水解的成酯基團(tuán)包括乙酰基、丙?；?、新戊?；?、C1-4烷氧羰基例如乙氧羰基和苯乙酰基。
本發(fā)明的具體化合物是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氯苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2，4-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，5-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-氨基甲?；?3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-二甲氨基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)碳代青霉烯-3-甲酸，
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4，6-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4，6-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲基亞磺酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-N′-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，及其可藥用的鹽和可體內(nèi)水解的酯。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，5-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，及其可藥用的鹽。
為了使用式(Ⅰ)化合物或其可藥用的鹽或可體內(nèi)水解的酯治療哺乳動(dòng)物包括人，特別是治療感染，一般按照標(biāo)準(zhǔn)的藥物實(shí)踐配制成藥物組合物。
因此，另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，它包含式(Ⅰ)化合物或其可藥用的鹽或可體內(nèi)水解的酯以及可藥用的載體。
對(duì)于希望治療的疾病情況，可用標(biāo)準(zhǔn)的方式，例如通過(guò)口服、直腸或腸胃外給藥來(lái)給藥本發(fā)明的藥物組合物。為此，本發(fā)明的化合物可用本領(lǐng)域已知的方式配制成例如片劑、膠囊、水或油溶液或懸浮液、乳液、可分散的粉末、栓劑和無(wú)菌注射水或油溶液或懸浮液的形式。
本發(fā)明的化合物可以配制成填充干粉的管形瓶，它可以單獨(dú)地或以無(wú)水摻混物的形式含有本發(fā)明化合物。例如本發(fā)明的酸性化合物可以與堿金屬碳酸鹽或碳?xì)渌猁}摻混。本發(fā)明化合物單獨(dú)的或以與標(biāo)準(zhǔn)賦形劑的混合物形式的凍干制劑是可以接受的。標(biāo)準(zhǔn)的賦形劑包括結(jié)構(gòu)形成劑、低溫防護(hù)劑和pH改進(jìn)劑，例如甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、葡萄糖、氯化鈉、葡聚糖、蔗糖、麥芽糖、明膠、牛血清清蛋白、甘氨酸、甘露糖、核糖、聚乙烯基吡咯烷酮、纖維素衍生物、谷氨酰胺、肌醇、谷氨酸鉀、赤蘚醇、絲氨酸及其它氨基酸和緩沖劑例如磷酸氫二鈉和檸檬酸鉀。
除本發(fā)明化合物以外，本發(fā)明的藥物組合物還可以含有一種或多種已知藥物或與其共同給藥，所述已知藥物選自其它可臨床使用的抗菌劑(例如其它β-內(nèi)酰胺或氨基苷)、β-內(nèi)酰胺酶的抑制劑(例如棒酸)、腎管封阻劑(如4-(二丙基氨磺?；?苯甲酸)及降低對(duì)腎臟的副作用的代謝酶的抑制劑(例如脫氫肽水解酶的抑制劑，如Z-2-酰氨基-3-取代的丙烯酸酯例如cilastatin)和N-?；陌被?例如參見(jiàn)EP-A-178911)。
一種合適的本發(fā)明的藥物組合物是適于口服給藥的單位劑量形式的藥物組合物，例如含有100mg～1g本發(fā)明化合物的片劑或膠囊。
優(yōu)選的本發(fā)明的藥物組合物是適于靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射的藥物組合物，例如含有1～50%w/w本發(fā)明組合物的無(wú)菌注射液。
以1%水溶液的形式構(gòu)成、凍干并且可以通過(guò)加0.9%氯化鈉水溶液達(dá)到所需濃度而制成的組合物的具體實(shí)例如下組合物1實(shí)施例1的化合物 50mg組合物2實(shí)施例1的化合物 50mg甘氨酸 31mg組合物的其它具體實(shí)例如上，但用實(shí)施例2～37的任一種化合物代替實(shí)施例1的化合物。
為了治療由細(xì)菌引起的感染，將以與imipenem所用相同的通用方式對(duì)人給藥本發(fā)明的藥物組合物，而劑量方面要考慮本發(fā)明化合物相對(duì)于imipenem的臨床應(yīng)用的作用效力和持久性。因此，每個(gè)病人將接受的靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)日注射劑量為0.05～5g，優(yōu)選為0.1～2.5g的本發(fā)明化合物，該組合物每天給藥1～4次，優(yōu)選是1天1或2次?？梢酝ㄟ^(guò)快速濃注給藥?kù)o脈內(nèi)、皮下和肌內(nèi)注射劑量。另一方面，可以通過(guò)連續(xù)輸液一段時(shí)間給藥?kù)o脈注射劑量。另外，每個(gè)病人將接受的日口服劑量約等于所述日腸胃外給藥劑量。因此，合適的日口服劑量是0.05～5g本發(fā)明的化合物，該組合物每天給藥1～4次。
另一方面，本發(fā)明提供了一種制備式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽或可體內(nèi)水解的酯的方法，該方法包括使式(Ⅴ)化合物脫保護(hù)
其中R2、R4和R5如前所定義(如果合適的話，R4和R5可被任意保護(hù));-COOR6和-COOR7是羧基或被護(hù)羧基;R8是基團(tuán)R3或氨基保護(hù)基;R9是氫或氨基保護(hù)基;而R10是基團(tuán)R1，被護(hù)的1-羥基乙基或被護(hù)的羥甲基;其中存在至少一個(gè)保護(hù)基;
并且以下如果需要;
(ⅰ)形成可藥用的鹽，(ⅱ)酯化形成可體內(nèi)水解的酯。
保護(hù)基通常可選自文獻(xiàn)中所述的或?qū)I(yè)化學(xué)家已知適于保護(hù)所述基團(tuán)的任何基團(tuán)，并且可通過(guò)常規(guī)的方法引入。
保護(hù)基可以通過(guò)文獻(xiàn)中所述的或?qū)I(yè)化學(xué)家已知適于脫除所述保護(hù)基的任何常規(guī)方法脫除，選擇這樣的方法以便達(dá)到脫除保護(hù)基而最小地干擾分子中的其它基團(tuán)的效果。
式(Ⅴ)化合物是新的并且構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
為了方便起見(jiàn)，下面給出了保護(hù)基的具體實(shí)例，其中“低級(jí)”表示用它來(lái)表示的基團(tuán)最好具有1-4個(gè)碳原子。應(yīng)該理解，這些實(shí)例不是詳盡的。下面給出了脫除保護(hù)基的方法的具體實(shí)例，但這些實(shí)例是相似的而且不是詳盡的。使用未具體提及的保護(hù)基和脫保護(hù)方法當(dāng)然也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
羧基保護(hù)基可以是成酯的脂族或芳脂族醇或成酯的硅烷醇(所述醇或硅烷醇優(yōu)選含有1-20個(gè)碳原子)的殘基。
羧基保護(hù)基的實(shí)例包括直鏈或支鏈(C1-12)烷基(如異丙基、叔丁基);低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基(如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基);低級(jí)脂族酰氧基低級(jí)烷基(如乙酰氧甲基、丙酰氧甲基、丁酰氧甲基、新戊酰氧甲基);低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基(如1-甲氧羰氧基乙基、1-乙氧羰氧基乙基);芳基低級(jí)烷基(如對(duì)甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對(duì)硝基芐基、二苯甲基和2-苯并〔C〕呋喃酮基);三(低級(jí)烷基)甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);三(低級(jí)烷基)甲硅烷基低級(jí)烷基(如三甲基甲硅烷基乙基);以及(C2-6)鏈烯基(如烯丙基和乙烯基乙基)。
特別適于脫除羧基保護(hù)基的方法包括例如酸-、堿-、金屬-或酶-催化水解。
羥基保護(hù)基的實(shí)例包括低級(jí)鏈烯基(如烯丙基);低級(jí)鏈烷?；?如乙?；?;低級(jí)烷氧羰基(如叔丁氧羰基);低級(jí)鏈烯氧羰基(如烯丙氧羰基);芳基低級(jí)烷氧羰基(如苯甲酰氧羰基、對(duì)甲氧基芐氧羰基、鄰硝基芐氧羰基、對(duì)硝基芐氧羰基);三低級(jí)烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基)和芳基低級(jí)烷基(如芐基)。
氨基保護(hù)基的實(shí)例包括甲酰基、芳烷基(如芐基和取代的芐基，例如對(duì)甲氧基芐基、硝基芐基和2，4-二甲氧基芐基，以及三苯甲基);二對(duì)甲氧苯基甲基和呋喃基甲基;低級(jí)烷氧羰基(如叔丁氧羰基);低級(jí)鏈烯氧羰基(如烯丙氧羰基);芳基低級(jí)烷氧羰基(如芐氧羰基、對(duì)甲氧基芐氧羰基、鄰硝基芐氧羰基、對(duì)硝基芐氧羰基;三烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);亞烷基(如亞甲基);亞芐基和取代的亞芐基。
適于脫除羥基和氨基保護(hù)基的方法包括例如酸-、堿-、金屬-或酶-催化水解，對(duì)于諸如對(duì)硝基芐氧羰基的基團(tuán)，氫化，以及對(duì)于諸如鄰硝基芐氧羰基的基團(tuán)，光解。
對(duì)于式(Ⅰ)化合物中的羧基和羥基，優(yōu)選的保護(hù)基是烯丙基和對(duì)硝基芐基。脫除該烯丙基的優(yōu)選方法是用四(三苯基膦)鈀和Meldrum酸在偶極非質(zhì)子傳遞溶劑四氫呋喃混合物，例如二甲基亞砜/四氫呋喃或1，3-二甲基-2-氧代四氫嘧啶/四氫呋喃或醇/四氫呋喃混合物，例如異丙醇/四氫呋喃或乙醇/四氫呋喃中，最好在室溫下通過(guò)鈀催化進(jìn)行的。另外，在二氯甲烷中，可以用甲基苯胺代替Meldrum酸。這些條件使得在加入鈉鹽例如2-乙基己酸鈉后可通過(guò)沉淀其鈉鹽而分離出該產(chǎn)物。
脫除對(duì)硝基芐基的優(yōu)選方法是用鈀催化劑進(jìn)行氫化。
本發(fā)明的另一方面，式(Ⅰ)和(Ⅴ)化合物可以如下制備a)使式(Ⅵ)化合物與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)
其中R2、R4-R10如前所定義，且L是離去基團(tuán)，或
b)使式(Ⅷ)化合物環(huán)化
其中R2、R4-R10如前所定義，而R11-R13獨(dú)立地選自C1-6烷氧基、芳氧基、二C1-6烷基氨基和二芳基氨基或R11-R13的任意兩個(gè)代表鄰亞苯二氧基;或R11-R13之一是C1-4烷基、烯丙基、芐基或苯基，而其它兩個(gè)獨(dú)立地選自C1-4烷基、三氟甲基或苯基，其中任何苯基可被C1-3烷基或C1-3烷氧基任意取代;
并且任何官能團(tuán)可被任意保護(hù)，以及以下如有必要(ⅰ)脫除任何保護(hù)基;
(ⅱ)形成可藥用的鹽;
(ⅲ)酯化形成可體內(nèi)水解的酯。
適于式(Ⅵ)化合物的L是羥基的反應(yīng)基如磺酸酯(例如C1-6烷磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基)、磷酸酯(例如二芳基磷酸酯如二苯基磷酸酯或L是囟化物(例如氯化物)。另一方面，L是亞砜例如-SOCH＝CH-NHCOCH3，它可容易地被置換。L優(yōu)選的是二苯基磷酸酯(-OP(O)(OPh)2)。
式(Ⅵ)化合物及其制備方法是碳代青霉烯文獻(xiàn)中所公知的，例如參加EP-A-126587，EP-A-160391，EP-A-243686和EP-A-343499。
式(Ⅵ)和式(Ⅶ)化合物間的反應(yīng)通常在堿例如有機(jī)胺如二異丙基乙基胺或無(wú)機(jī)堿如堿金屬碳酸鹽諸如碳酸鉀存在下進(jìn)行。該反應(yīng)通常在-25℃至室溫，合適的是在約-20℃的溫度下進(jìn)行。該反應(yīng)通常在有機(jī)溶劑例如乙腈或二甲基甲酰胺中進(jìn)行。該反應(yīng)通常以與文獻(xiàn)中對(duì)類(lèi)似反應(yīng)所述的類(lèi)似方式進(jìn)行。
式(Ⅶ)的化合物是新的并且構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅶ)的化合物可通過(guò)使式(Ⅸ)的化合物脫保護(hù)而制備
其中R4-R6、R8和R9如前所定義，R14是保護(hù)基，例如C1-6鏈烷酰基、C1-6烷氧羰基或苯甲酰基。R14優(yōu)選為乙酰基和叔丁氧羰基。式(Ⅸ)的化合物可用標(biāo)準(zhǔn)的脫保護(hù)方法轉(zhuǎn)化為式(Ⅶ)的化合物，例如，乙?；赏ㄟ^(guò)在鏈硅烷醇或鏈烯醇例如烯丙醇的水溶液中進(jìn)行堿性水解而除去。
式(Ⅸ)的化合物是新的并且構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅸ)的化合物可通過(guò)使式(Ⅹ)的化合物的活性衍生物(可就地形成)與式(Ⅺ)的化合物反應(yīng)而制備
其中R4-R6、R8、R9和R14如前所定義。式(Ⅹ)化合物的活性衍生物包括酰囟、酸酐和“活化的”酯例如相應(yīng)于(Ⅹ)的硫代羧酸的1H苯并〔1，2，3〕三唑-1-基、五氟苯基和2，4，5-三氯苯基酯或苯并咪唑-2-基酯。式(Ⅹ)和式(Ⅺ)的化合物的反應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)方法下，例如在Vilsmier試劑(如此就地形成(Ⅹ)的反應(yīng)性衍生物)存在下，在-30～25℃，優(yōu)選是-20～5℃的溫度下進(jìn)行。
式(Ⅹ)和(Ⅺ)的化合物通過(guò)專(zhuān)業(yè)化學(xué)家已知的標(biāo)準(zhǔn)方法例如以下實(shí)施例中的方法、EP-A-126587中所述的方法或通過(guò)與其相似或類(lèi)似的方法制備。
合適的是，在式(Ⅷ)的化合物中，R11-R13獨(dú)立地選自C1-6烷基氨基例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丙氧基或正丁氧基;芳氧基例如任選的苯氧基;二C1-6烷基氨基例如二甲氨基或二乙氨基;二芳基氨基例如二苯氨基或者R11-R13的任何兩個(gè)代表鄰亞苯二氧基。優(yōu)選的是，R11-R13的每個(gè)具有相同的定義并且是C1-6烷氧基例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或正丁氧基或是苯氧基。
式(Ⅷ)化合物在本領(lǐng)域公知的常規(guī)條件下進(jìn)行環(huán)化形成式(Ⅴ)的化合物。一般的條件是在基本上惰性的有機(jī)溶劑例如甲苯、二甲苯或乙酸乙酯中在60-150℃的溫度下加熱。通常，該反應(yīng)在氮?dú)夥罩羞M(jìn)行并在自由基清除劑例如氫醌存在下進(jìn)行。
式(Ⅷ)的化合物可以就地形成和環(huán)化。式(Ⅷ)的化合物通常可以通過(guò)使式(Ⅻ)的化合物與式(ⅩⅢ)的化合物反應(yīng)而制備
其中R2和R4-R13如前所定義。
合適的式(ⅩⅢ)化合物是亞磷酸鹽或是這種化合物的官能等價(jià)物。
式(Ⅻ)化合物與式(ⅩⅢ)化合物的反應(yīng)通常在有機(jī)溶劑例如甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙腈或二甲基甲酰胺中進(jìn)行。該反應(yīng)通常在較高的溫度例如60-150℃下進(jìn)行。
式(Ⅻ)化合物可用許多本領(lǐng)域公知的方法制備。例如，式(Ⅻ)化合物可通過(guò)用式(ⅩⅤ)的化合物使式(ⅩⅣ)化合物的?；苽?
其中R2、R4-R6和R8-R10如前所定義其中R7如前所定義。
式(ⅩⅣ)的化合物可通過(guò)使式(ⅩⅥ)的化合物與式(Ⅶ)的化合物反應(yīng)而制備
其中R2和R10如前所定義。式(ⅩⅥ)的化合物是本領(lǐng)域已知的并且可以用本領(lǐng)域公知的常規(guī)酰基化方法與式(Ⅶ)的化合物反應(yīng)。
式(Ⅶ)、(Ⅻ)和(ⅩⅣ)的化合物是新的并且如此構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
下列生物試驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)和實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明。
抗菌活性本發(fā)明的可藥用的碳代青霉烯化合物是有效的抗菌劑，它對(duì)用于鑒別抗病菌活性的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室微生物，革蘭氏陰性及革蘭氏陽(yáng)性具有廣譜的體外活性。具體化合物的抗菌譜和效力可以用標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)試系統(tǒng)測(cè)試。具體地講，本發(fā)明的碳代青霉烯對(duì)β-內(nèi)酰胺酶具有良好的穩(wěn)定性并且在哺乳動(dòng)物中具有特別好的消去半衰期。一般說(shuō)來(lái)，該化合物具有優(yōu)于imipenem的顯著改進(jìn)。
本發(fā)明化合物的抗菌性能也可以用常規(guī)的試驗(yàn)進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明。
通常，已發(fā)現(xiàn)碳代青霉烯對(duì)溫血?jiǎng)游飦?lái)說(shuō)是無(wú)毒的，而這個(gè)通則也適用于本發(fā)明的化合物。將本發(fā)明的有代表性的化合物以能預(yù)防細(xì)菌感染所需的過(guò)量劑量對(duì)小鼠給藥，未注意到由該給藥的化合物所引起的明顯的中毒癥兆或副作用。
對(duì)于有代表性的化合物，用診斷敏感性試驗(yàn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的體外試驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，得到下列結(jié)果。根據(jù)由瓊脂稀釋方法以104CFU/點(diǎn)的接種物大小測(cè)定的最小抑制濃度(MIC)表示抗菌活性。
在實(shí)施例中(a)NMR譜在200MHz或400MHz進(jìn)行;
(b)烯丙氧基是指丙烯-1-基氧基-OCH2CH＝CH2;
(c)THF是指四氫呋喃;
(d)DMF是指二甲基甲酰胺;
(e)Meldrum酸是2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮;
(f)在減壓下蒸發(fā)溶劑;
(g)EtOAc是指乙酸乙酯;
(h)EEDQ是指N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉;
(i)DMSO是指二甲基亞砜;
(j)DCCI是指二環(huán)己基碳化二亞胺;
(k)在DMSO-d和乙酸d所取的NMR譜中的峰位根據(jù)DMSO與乙酸的比例而變化。
在NMR譜中acetic acid是指乙酸;
obscured是模糊的;
part obscured是部分模糊的;
quintet是五重峰;
overlapping是重疊;
broad是寬峰;
mixture of rotamers是旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物。
實(shí)施例1(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-羥基苯基氨基甲酰基)-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽在氬氣氛下，向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(500mg，0.72mM)和2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(Meldrum酸，829mg，5.75mM)于DMF(8ml)和THF(4ml)的混合物中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(83mg，0.072mM)。在氬氣以及無(wú)光照的條件下將該溶液攪拌2小時(shí)。用乙醚(40ml)稀釋該溶液，離心分離所得的沉淀物，移出上層清液。洗滌所得產(chǎn)物，方法是將該產(chǎn)物再懸浮于乙醚中然后離心分離，最后在高真空下干燥該產(chǎn)物。將該粗產(chǎn)物溶于水(10ml)中并用NaHCO3將pH調(diào)至6.8。過(guò)濾后，該溶液在Diaion CHP20P樹(shù)脂上進(jìn)行層析，合并合適的級(jí)分，得到標(biāo)題產(chǎn)物(66%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.82(m，part obscured，1H);2.79(m，1H);3.03(dd，1H);3.22(dd，1H);3.38(quintet，1H);3.57(dd，1H);3.82(quintet，1H);3.99(quintet，1H);4.19(dd+m，2H);7.13(t，1H);7.44(t，1H);7.65(t，1H).
原料如下制備3-烯丙氧基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯將3-羥基-5-硝基苯甲酸(3.9g，21.3mM)溶于DMF(55ml)中，在攪拌下加入無(wú)水K2CO3(11.78g，76.5mM)。加入烯丙基溴(5.4ml，62.4mM)，將該混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。蒸除溶劑，殘留物用水處理，將pH調(diào)至5.5，并將產(chǎn)物提取到乙酸乙酯中。合并的提取液用NaH2PO4水溶液、水、鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。蒸發(fā)后的殘留物在硅膠上進(jìn)行層析，用汽油/乙酸乙酯(10∶1)的混合物洗脫，得到3-烯丙氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯(5.94g，90%)。
Nmr(CDCl3)δ 4.66(dt，2H);4.87(dt，2H);5.31-5.52(m，4H);5.94-6.14(m，2H);7.92(m，2H);8.46(t，1H).
Ms(CI)264(MH)+
將上述酯(2g，7.6mM)溶于乙酸乙酯(15ml)中，在氬氣氛下加入SnCl2·2H2O(13.7g，61mM)于乙酸乙酯(35ml)中加熱回流的懸浮液中。將該混合物加熱回流4小時(shí)，冷卻，并倒入880氨(20ml)和水(20ml)的混合物中。分離出有機(jī)層并用乙酸乙酯再提取三次。合并的提取液用稀氨溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，并蒸發(fā)得到3-烯丙氧基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯的黃色油狀物(1.53g，86%)。
Nmr(CDCl3)δ 3.60(br，2H);4.53(dt，2H);4.78(dt，2H);5.25-5.44(m，4H);5.96-6.12(m，2H);6.43(dt，1H);7.00(m，2H).
Ms(CI)233(MH)+側(cè)鏈吡咯烷-4-基硫代乙酸酯的制備將4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-羧基吡咯烷的環(huán)己胺鹽(5.6g，15mM)懸浮于乙酸乙酯中，順序用2M HCl(20ml和10ml)、水和鹽水振搖，用MgSO干燥乙酸乙酯層。蒸發(fā)得到游離酸。制備Vilsmeier試劑，方法是在氬氣氛下用草酰氯(0.52ml，6mM)于二氯甲烷(5ml)中的溶液處理二甲基甲酰胺(0.51ml，6.6mM)于二氯甲烷(20ml)中的溶液30分鐘。將4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-羧基吡咯烷(1.64g，6mM)于二氯甲烷(7ml)中的溶液一次加入該溶液，接著加入N-甲基嗎啉(0.79ml，7.2mM)于二氯甲烷(3ml)中的溶液，繼續(xù)在-10℃下攪拌30分鐘。冷至-20℃后，滴加溶于二氯甲烷(15ml)中的3-烯丙氧基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯(1.39g，5.9mM)和N-甲基嗎啉(0.79ml，7.2mM)。使溫度升至0℃，將該反應(yīng)保持18小時(shí)。用二氯甲烷(100ml)稀釋后，該混合物用2MHCl、HO和飽和NaHCO3洗滌，用MgSO4干燥，并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過(guò)在硅膠上中壓層析進(jìn)行純化，用汽油在二氯甲烷中的溶液(3∶1～2∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯，為膠狀物(2.37g，81%)。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.58(br，2H);3.39(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.55(t，part obscured，1H);4.58(dt，2H)4.68(dt，2H);4.81(dt，2H);5.23-5.49(m，6H);5.84-6.15(m，3H);7.36(t，1H);7.57(t，1H);7.66(t，1H);9.10(br，1H).
Ms(+ve FAB)489(MH)+，511(M+Na)+轉(zhuǎn)化為吡咯烷-4-基硫醇將(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷(1.89g，3.9mM)溶于烯丙醇(25ml)并用氬氣充氣該溶液。加入1M氫氧化鈉(4ml，4mM)，該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)至干。將殘留物溶于乙酸乙酯(100ml)中，用2MHCl、NaHCO3、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇，為膠狀物(1.57g，76%)。粗產(chǎn)物直接用于下個(gè)階段。
被護(hù)的碳代青霉烯的制備在氬氣氛下將(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(1.5g，3mM)溶于無(wú)水乙腈(18ml)中，冷至-20°，加入二異丙基乙基胺(0.63ml，3.6mM)，接著滴加(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(1.57g，3.5mM)于乙腈(12ml)中的溶液。然后將該反應(yīng)混合物在-20℃下保存3天。蒸發(fā)溶劑，該殘留物在硅膠上用梯度洗脫(二氯甲烷/乙酸乙酯40∶60至70∶30)通過(guò)中壓層析進(jìn)行純化，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯，為膠狀物(1.25g，60%)。
Nmr(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.65(br，2H);3.26，3.31(dd overlapping m，2H);3.46(m，1H);3.79(quintet，1H);4.01(dd，1H);4.19-4.29(m，2H);4.50-4.78(m，9H);5.19-5.46(m，8H);5.83-6.12(m，4H);7.36(br s，1H);7.64(m，2H);9.00(br，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+，718(M+Na)+(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯如下制備在0℃和氬氣氛下，向(1R，5S，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-氧代碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(2.66mmol)〔由2-二偶氮-3-氧-4-甲基-4-(3-(1-羥基乙基)-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-4-基)丁酸烯丙基酯和辛酸銠就地制備參見(jiàn)例如EP-A-208889〕和二異丙基乙基胺(1.1當(dāng)量乙腈溶液)的溶液中滴加氯磷酸二苯基酯(1.1當(dāng)量)。將該溶液在室溫下攪拌30分鐘，形成相應(yīng)的2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯。
制備下列進(jìn)一步的實(shí)施例
實(shí)施例2用與實(shí)施例1相同的一般方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羥基-4-氯苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸二鈉鹽，所不同的是在加入鈀催化劑后，將該溶液緩慢溫?zé)嵋匀芙庠摯呋瘎┎⒃跉鍤夥蘸蜔o(wú)光照的條件下攪拌1小時(shí)。加入2-乙基己酸鈉于THF中的溶液并在劇烈攪拌下將合并的溶液到入THF中。離心分離所得的沉淀物并移出上層清液。通過(guò)使該產(chǎn)物再懸浮于THF中然后離心分離而將其洗滌兩次，最后在高真空下干燥，得到標(biāo)題產(chǎn)物。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，6H);1.85(m，obscured，1H);2.73(m，obscured，1H);2.95(dd，1H);3.21(dd，1H);3.40(m，1H);3.54(dd，1H);3.78(quintet，1H);3.99(t，1H);4.11(t，1H);4.18(dd，1H);7.41(d，1H);7.75(dd，1H);8.06(d，1H).
Ms(+ve FAB)532/534(MH)+，(Na salt)+;554/556(Na2salt)+所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1中的方法將2-氯-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是，最后的提取溶液是甲苯，得到2-氯-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.89(dt，2H);5.33-5.51(m，2H);5.96-6.15(m，1H);7.66(d，1H);8.27(dd，1H);8.72(d，1H).
Ms(CI)241/243 M+，259/261(M+NH4)+在氬氣層下使氯化錫二水合物在乙醇中回流，得到一個(gè)溶液。停止加熱，加入上述硝基化合物于乙醇中的溶液。繼續(xù)回流3小時(shí)，將該混合物冷卻，脫除溶劑。將殘留物溶于乙酸乙酯，用880氨處理直至為堿性。由沉淀的錫鹽傾析出有機(jī)相，將該淤漿用更多的溶劑類(lèi)似地再提取。合并的有機(jī)相然后用稀氨水、水和鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。蒸發(fā)得到5-氨基-2-氯苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.74(br，2H);4.81(dt，2H);5.27-5.47(m，2H);5.93-6.13(m，1H);6.73(dd，1H);7.15(d，1H);7.24(d，1H).
Ms(CI)212/214 M+，229/231(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法將上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙醚(100∶0至95∶5)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.57(br，2H);3.39(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.55(t，1H);4.66(dt，2H)4.83(dt，2H);5.24-5.47(m，4H);5.85-6.02(m，2H);7.36(d，1H);7.70(dd，1H);7.92(d，1H);9.32(br，1H).
Ms(+ve FAB)467/469(MH)+，489/491(M+Na)+按實(shí)施例1的方法將上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.65(br，2H);3.25(dd overlapping m，2H);3.48(m，1H);3.80(quintet，1H);3.98(dd，1H);4.20-4.31(dd overlapping quintet，2H);4.52(t，1H);4.51-4.76(m，4H);4.83(dt，2H);5.20-5.47(m，6H);5.85-6.11(m，3H);7.39(d，1H);7.77(dd，1H);7.99(d，1H);9.05(br，1H).
Ms(+ve FAB)674/676(MH)+，696/698(M+Na)+實(shí)施例3
用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸二鈉鹽。
(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.16(d，3H);1.19(d，3H);1.82(m，obscured，1H);2.70(dd overlapping m，2H);3.22(dd，1H);3.35-3.60(overlapping m，3H);3.95-4.08(overlapping m，2H);4.16(dd，1H);7.57(d，1H);7.69(dd，1H);8.36(d，1H).
Ms(+ve FAB)532/534(MH)+，(Na salt)+;554/556(Na2salt)+所用原料如下制備基本上按上述實(shí)施例1中的方法使4-氯-3-硝基苯甲酸烯丙基化，得到4-氯-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.86(d，2H);5.31-5.48(m，2H);5.94-6.13(m，1H);7.50(d，1H);8.18(dd，1H);8.52(d，1H).
Ms(CI)241/243 M+，259/261(M+NH4)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-4-氯苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.08(br，2H);4.79(dt，2H);5.25-5.44(m，2H);5.92-6.11(m，1H);7.30(d，1H);7.38(dd，1H);7.47(d，1H).
Ms(CI)212/241 M+，229/231(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法將上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙醚(100∶0至95∶5)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.56(br，1H);2.66(br，1H);3.43(dd，1H);4.04(quintet，1H);4.16(dd，1H);4.61(t，1H);4.66(dt，2H);4.82(dt，2H);5.21-5.45(m，4H);5.84-6.11(m，2H);7.45(d，1H);7.77(dd，1H);9.00(d，1H);9.08(br，1H).
Ms(+ve FAB)467/469(MH)+，489/491(M+Na)+按實(shí)施例1的方法將上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.36(d，3H);2.65(br，2H);3.24(dd overlapping m，2H);3.88(quintet，1H);4.08(m，1H);4.19-4.30(dd overlapping quintet，2H);4.60(t，1H);4.67(m，4H);4.82(dt，2H);5.18-5.45(m，6H);5.82-6.01(m，3H);7.44(d，1H);7.76(dd，1H);9.04(d，1H);8.98(br，1H).
Ms(+ve FAB)674/676(MH)+，696/698(M+Na)+實(shí)施例4用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是使用DMSO和THF的混合物。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.94(m，obscured，1H);2.85(m，1H);3.10(dd，1H);3.23(dd，1H);3.40(quintet，1H);3.66(dd，1H);3.89(quintet，1H);3.99(t，1H);4.21(dd，1H);4.27(t，1H);7.46(t，1H);7.71(d，1H);7.86(d，1H);8.27(s，1H).
Ms(+ve FAB)498(MH)+;(Na salt)+;520(Na2salt)+所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1中的方法使3-硝酸苯甲酸烯丙基化，所不同的是，最后的提取溶劑是乙醚，得到3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.88(d，2H);5.33-5.49(m，2H);5.96-6.17(m，1H);7.66(t，1H);8.41(td，2H);8.88(t，1H).
用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是溶劑為甲醇，得到3-氨基苯甲酸烯丙基酯。
(CDCl3)δ 3.38(br，2H);4.79(dt，2H);5.24-5.44(m，2H);5.93-6.09(m，1H);6.86(dm，1H);7.21(t，1H);7.37(t，1H);7.45(dt，1H).
側(cè)鏈吡咯烷-4-基硫基乙酸酯的制備將(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-羧基吡咯烷(2.54g，9.3mM)、3-氨基苯甲酸烯丙基酯(1.5g，8.5mM)和2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氫喹啉(2.72g，11mM)溶于甲苯(50ml)并在室溫下攪拌18小時(shí)。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(150ml)稀釋并用2MHCl(3×30ml)、水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得到(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷，為膠狀物(3.7g，100%)，呈足以進(jìn)一步使用的純態(tài)。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.60(br，2H);3.40(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.57(t，1H);4.66(dm，2H);4.82(dt，2H);5.23-5.46(m，4H);5.86-6.12(m，2H);7.41(t，1H);7.82(d，1H);7.91(d，1H);8.07(t，1H);9.18(br，1H).
按實(shí)施例1的方法將上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯/二氯甲烷1∶1進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，RR，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.64(br，2H);3.26，3.28(dd overlapping m，2H);3.48(m，1H);3.81(quintet，1H);4.01(dd，1H);4.22-4.32(m，2H);4.54(t，1H);4.62-4.75(m，4H);4.82(m，2H);5.19-5.45(m，8H);5.82-6.10(m，4H);7.41(d，1H);7.81(d，1H);7.92(dm，1H);8.11(t，1H);8.98(br，1H).
Ms(+ve FAB)640(MH)+，662(M+Na)+實(shí)施例5按實(shí)施例1中所述的方法由適當(dāng)保護(hù)的碳代青霉烯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，6H);1.99(quintet，1H);2.75(m，part obscured，1H);2.87(dd，1H);3.22(s，3H);3.25(dd，part obscured，1H);3.44(quintet，1H);3.62(dd，1H);3.75(quintet，1H);4.03(quintet，1H);4.16-4.23(m，2H);7.90(dd，1H);8.17(d，1H);9.00(d，1H).
Ms(+ve FAB)554(MH)+，576(Na salt)+，598(Na2salt)+所用的原料如下制備基本上按實(shí)施例1中的方法使4-甲磺?；?3-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚9∶1進(jìn)行梯度洗脫，得到4-甲磺酰基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.45(s，3H);4.90(dt，2H);5.30-5.49(m，2H);5.96-6.12(m，1H);8.29(d，1H);8.40-8.46(m，2H).
按實(shí)施例1的方法還原，所不同的是溶劑為甲醇，得到3-氨基-4-甲磺?；郊姿嵯┍?。
Nmr(CDCl3)δ 3.07(s，3H);4.82(dt，2H);5.05(br，2H);5.29-5.44(m，2H);5.95-6.11(m，1H);7.46(m，2H);7.81(d，1H).
Ms(+ve FAB)256(MH)+，273(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙醚(100∶0至90∶10)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.31(s，3H);2.41(m，1H);2.80(m，1H);3.11(s，3H);3.51(dd，1H);4.00-4.18(m，2H);4.53(dd，1H);4.65(2m，2H)4.87(dt，2H);5.23-5.47(m，4H);5.83-6.13(m，2H);7.93(dd，1H);8.03(d，1H);9.09(br s，1H).
Ms(+ve FAB)511(MH)+，533(M+Na)+按實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。Nmr(CDCl3)δ 1.21(d，3H);1.35(d，3H);2.43(m，1H);2.75(br，1H);3.08(s，3H);3.23(dd overlapping m，2H);3.55(dd，1H);3.85-4.08(m，2H);4.19-4.28(m，2H);4.53-4.68(m，5H);4.86(dt，2H);5.17-5.47(m，6H);5.79-6.12(m，3H);7.92(dd，1H);8.00(d，1H);9.16(br s，1H);10.14(br，1H).
Ms(+ve FAB)718(MH)+，740(M+Na)+實(shí)施例6(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸在氬氣氛下向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1′-烯丙氧羰基-2′-(3-烯丙氧羰基-4-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(199mg，0.3mM)和2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(Meldrum酸，259mg，1.8mM)于DMF(1.5ml)中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(10mg，0.009mM)于THF(0.1ml)中的溶液。將該溶液在氬氣氛下攪拌2小時(shí)，加入四(三苯基膦)鈀(5mg，0.0045mM)于THF(0.1ml)中的溶液。攪拌30分鐘后，加入THF(3ml)和乙醚(9ml)，濾出所得的固體，用乙醚(9ml)洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題產(chǎn)物(72mg，49%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.30(d，6H);2.00(m，part obscured，1H);2.91(m，part obscured，1H);3.13(dd，1H);3.36(dd，1H);3.55(dq，1H);3.73(dd，1H);3.95(m，1H);4.12(m，1H);4.29(dd，1H);4.34(dd，1H);7.40(dd，1H);7.98(m，1H);8.32(dd，1H).
Ms(+ve FAB)494(MH)+，516(M+Na)+所用原料如下制備5-氨基-2-氟苯甲酸烯丙基酯將2-氟-5-硝基苯甲酸(4.16g，22.5mM)溶于DMF(45ml)，在攪拌下加入無(wú)水K2CO3(4.65g，33.7mM)。加入烯丙基溴(2.38ml，28.01mM)，將該混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，然后倒入水(450ml)中，并用乙醚(3×100ml)提取。合并的提取液用MgSO4干燥，蒸發(fā)，得到黃色油狀物(5.4g)。該油狀物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用乙酸乙酯/己烷(12.5∶87.5)的混合物洗脫，得到2-氟-5-硝基苯甲酸烯丙基酯(4.64g，92%)。
Nmr(CDCl3)δ 4.89(d，2H);5.30-5.50(m，2H);5.90-6.10(m，1H);7.32(t，1H);8.38-8.46(m，1H);8.86(dd，1H).
Ms(EI)226(MH)+;(CI)225M+，243(M+NH4)+將上述酯(2.47g，10.97mM)溶于甲醇(40ml)，向攪拌的同時(shí)保持在5～15℃的該溶液中加入氯化錫二水合物(9.89g，43.76mM)于濃HCl(9ml)中的溶液。然后將該混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后倒入水(200ml)中并用固體NaHCO3(17.6g)中和至pH為6。該混合物用氯仿(3×200ml)提取，合并的提取液用MgSO4干燥，蒸發(fā)，得到5-氨基-2-氟苯甲酸烯丙基酯(2.09g，98%)，為黃色油狀物。
Nmr(CDCl3)δ 3.60(br s，2H);4.82(dt，2H);5.25-5.48(m，2H);5.93-6.12(m，1H);6.78(ddd，1H);6.93(dd，1H);7.20(dd，1H).
Ms(EI)195M+;(CI)196(MH)+;213(M+NH4)+按實(shí)施例的方法將上述胺與脯氨酸縮合。所得產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用乙酸乙酯/己烷(42.5∶57∶5)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.50-2.70(br s，2H);3.40(d，1H);3.98-4.20(m，2H);4.56(t，1H);4.67(dt，2H);4.84(dt，2H);5.20-5.50(m，4H);5.83-6.12(m，2H);7.10(dd，1H);7.80-7.89(m，1H);7.93(dd，1H);8.90-9.40(br s，1H).
Ms(+ve FAB)451(MH)+，473(M+Na)+轉(zhuǎn)化為吡咯烷-4-基硫醇將(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸乙酯(1.33g，2.96mM)溶于烯丙醇(30ml)中并用氬氣充氣該溶液。加入1M氫氧化鈉(3.1ml，3.1mM)，該混合物在室溫下攪拌30分鐘，用乙酸(0.3ml)處理，再攪拌5分鐘，然后蒸發(fā)至干。將殘留物溶于乙酸乙酯(60ml)，用飽和NaHCO3水溶液(60ml)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇，為膠狀物(1.07g，89%)。該粗產(chǎn)物如此直接用于下一階段。
按實(shí)施例1中的方法使該硫醇與碳代青霉烯磷酸酯縮合，所得產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(75∶25)洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.40-2.80(br，2H);3.24-3.28(m，2H);3.40-3.58(br，1H);3.80(dq，1H);3.99(dd，1H);4.19-4.33(m，2H);4.53(t，1H);4.59-4.77(m，4H);4.77-4.88(m，2H);5.17-5.50(m，6H);5.80-6.13(m，3H);7.10(dd，1H);7.82-7.95(m，1H);8.00(dd，1H);8.70-9.20(br s，1H).
Ms(+ve FAB)658(MH)+實(shí)施例7如實(shí)施例6中所述由適當(dāng)保護(hù)的碳代青霉烯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.30(d，6H);1.84(m，1H);2.80-2.93(m，2H);3.36(dd，1H);3.58(m，1H);3.66(dd，1H);3.81(m，1H);4.09(dq，1H);4.21(m，1H);4.31(dd，1H);7.56(dd，1H);8.07(m，1H);8.90(d，1H).
Ms(+ve FAB)494(MH)+，516(M+Na)+所用原料如下制備3-氨基-4-氟苯甲酸烯丙基酯如實(shí)施例6中所述使4-氟-3-硝基苯甲酸烯丙基化，得到4-氟-3-硝基苯甲酸烯丙基酯Nmr(CDCl3)δ 4.87(dt，2H);5.48-5.32(m，2H);5.95-6.14(m，1H);7.40(dd，1H);8.30-8.38(m，1H);8.76(dd，1H).
Ms(EI)225M+;(CI)225M+，243(M+NH4)+基本上如實(shí)施例2中所述還原上述酯，所不同的是用甲醇作溶劑，得到3-氨基-4-氟苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.70(br，2H);4.79(dt，2H);5.25-5.44(m，2H);5.96-6.09(m，1H);7.02(dd，1H);7.41-7.54(m，2H).
Ms(EI)195M+;(CI)196(MH)+如實(shí)施例1中所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)硅膠層析純化該產(chǎn)物，用乙酸乙酯/己烷(50∶50)作洗脫劑，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.62(br，2H);3.40(dd，1H);3.98-4.20(m，2H);4.60(t，1H);4.67(dt，2H);4.82(dt，2H);5.2-5.5(m，4H);5.8-6.15(m，2H);7.16(dd，1H);7.83(ddd，1H);8.97(dd，1H);9.27(br，1H).
Ms(EI)451(MH)+;(CI)451(MH)+如實(shí)施例6中所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼迹⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，所得產(chǎn)物通過(guò)層析(用乙酸乙酯洗脫)進(jìn)行純化，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.90(m，part obscured，1H);2.78(m，1H);3.22(dd，1H);3.26(m，1H);3.52(m，1H);3.83-4.03(m，2H);4.09(dd，1H);4.22(m，1H);4.53(m，1H);4.53-4.65(m，4H);4.80(dt，2H);5.05-5.43(m，6H);5.73-5.98(m，2H);5.98-6.09(m，1H);7.38(dd，1H);7.78(br s，1H);8.49(m，1H);8.62(d，1H).
Ms(+ve FAB)658(MH)+，680(M+Na)+實(shí)施例8按實(shí)施例7中的方法由適當(dāng)保護(hù)的碳代青霉烯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2，4-二氟苯基氨基甲?；量┩?4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.29(d，6H);1.94-1.99(m，part boscured 1H);2.81-3.07(m，1H);3.05(dd，1H);3.37(dd，1H);3.56(m，1H);3.75(dd，1H);3.92(q，1H);4.10(dq，1H);4.29-4.38(m，2H);7.22(t，1H);8.07(m，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，534(M+Na)+所用原料如下制備3-氨基-2，6-二氟苯甲酸烯丙基酯如實(shí)施例6中所述使2，6-二氟-3-硝基苯甲酸烯丙基化，得到2，6-二氟-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)4.90(dt，2H);5.33-5.50(m，2H);5.95-6.03(m，1H);7.09-7.27(ddd，1H);8.22-8.27(ddd，1H).
Ms(EI)244(MH)+;(CI)261(M+NH4)+如實(shí)施例2中所述還原上述酯，所不同的是用甲醇作溶劑，得到3-氨基-2，6-二氟苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.86(dt，2H);5.27-5.49(m，2H);5.95-6.09(m，1H);6.77-6.86(m，2H).
MS(EI)213M+;(CI)214(MH)+如實(shí)施例1中所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化并用乙酸乙酯/己烷(40∶60)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-2，4-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.60(br，2H);3.40(dd，1H);3.95-4.19(m，2H);4.57(t，1H);4.67(dt，2H);4.86(dt，2H);5.20-5.50(m，4H);5.81-6.13(m，2H);6.95(ddd，1H);8.4(ddd，1H);9.2(br，1H).
MS(+ve FAB)469(MH)+如實(shí)施例6中所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合。所得產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用乙酸乙酯洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2S′，4S′)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-羧基-2，4-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.26(d，3H);1.36(d，3H);1.80(d，1H);2.62(br，2H);3.19-3.36(m，2H);3.44(dd，1H);3.08(q，1H);4.05(dd，1H);4.19-4.33(m，2H);4.50-4.80(m，5H);4.86(dt，2H);5.17-5.50(m，6H);5.82-6.10(m，3H);6.95(dt，1H);8.38(dt，1H);9.00(br，1H).
Ms(+ve FAB)676(MH)+，698(M+Na)+實(shí)施例9采用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，三鈉鹽，所不同的是使用DMSO和THF的混合物。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.84(m，part obscured，1H);2.78(m，1H);3.02(dd，1H);3.23(dd，1H);3.40(quintet，1H);3.58(dd，1H);3.83(quintet，1H);4.00(quintet，1H);4.20(dd overlapping m，2H);7.92(dd，1H);8.17(d，1H);8.33(d，1H).
Ms(+ve FAB)542(MH)+，(Na salt)+;564(Na2salt)+所用的原料如下制備按實(shí)施例1的方法使2-羧基-4-硝基苯甲酸烯丙基化，得到2-烯丙氧羰基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.85(dt，4H);5.29-5.47(m，4H);5.91-6.12(m，2H);7.88(d，1H);8.38(dd，1H);8.63(d，1H).
用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，通過(guò)硅膠中壓層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙醚(100∶0至90∶10)進(jìn)行梯度洗脫，得到2-烯丙氧羰基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.94(br，2H);4.71-4.80(m，4H);5.22-5.42(m，4H);5.88-6.10(m，2H);6.69(dd，1H);6.75(d，1H);7.74(d，1H).
如實(shí)施例1中所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)硅膠中壓層析進(jìn)行純化，采用由二氯甲烷至20%乙醚的二氯甲烷溶液的梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3，4-二烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.59(br，2H);3.37(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.12(dd，1H);4.56(t，1H);4.67(d，2H);4.77(t，4H);5.25-5.42(m，6H);5.84-6.11(m，3H);7.79(m，3H);9.52(br，1H).
如實(shí)施例1中所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⒉挥眠M(jìn)一步純化而直接與碳代青霉烯磷酸酯縮合，最后通過(guò)硅膠中壓層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯3∶2作為洗脫劑，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3，4-二烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.62(br，2H);3.26(dd overlapping m，2H);3.47(br，1H);3.81(quintet，1H);3.97(dd，1H);4.19-4.29(overlapping m，2H);4.53(t，1H);4.62-4.82(m，8H);5.19-5.44(m，8H);5.84-6.07(m，4H);7.82(s，3H);9.30(br，1H).
實(shí)施例10采用實(shí)施例1的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，所不同的是該粗酸具有足夠的純度，而不需要層析。
(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，6H);1.95(m，obscured，1H);2.87(m，obscured，1H);3.17(dd，1H);3.25(dd，1H);3.42(dt，1H);3.75(dd，1H);3.99-4.05(m，2H);4.22(dd，1H);4.33(t，1H);6.76(d，1H);7.56(dd，1H);7.97(d，1H).
Ms(+ve FAB)492(MH)+，514(M+Na)+所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1中的方法使2-羥基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是最終的提取溶劑是乙醚，得到2-烯丙氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.82(m，4H);5.26-5.55(m，4H);5.97-6.13(m，2H);7.49(d，1H);8.41(dd，1H);8.52(d，1H).
用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是，溶劑為甲醇，用NaHCO溶液堿化，得到2-烯丙氧基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.23(br，2H);4.53(dt，1H);4.79(d，2H);5.21-5.49(m，4H);5.93-6.14(m，2H);6.80(m，2H);7.16(d，1H).
如實(shí)施例1中所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙醚(100∶0至85∶15)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(4-烯氧基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.56(br，2H);3.39(dd，1H);4.01(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.52(t，1H);4.60(dt，2H)4.66(m，2H);4.81(dt，2H);5.23-5.51(m，6H);5.85-6.13(m，3H);6.91(d，1H);7.76(dd，1H);7.81(d，1H);8.97(br，1H).
如實(shí)施例1所述將上述硫基乙酸酯脫乙酰基化為硫醇，并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，采用由二氯甲烷至乙酸乙酯的梯度洗脫劑，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(4-烯丙氧基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基吡咯烷)-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.57(br，2H);3.25，3.28(dd overlapping quintet，2H);3.47(br，1H);3.78(quintet，1H);4.01(dd，1H);4.18-4.27(dd overlapping m，2H);4.51(t，1H);4.58-4.79(m，6H);4.79(dt，2H);5.19-5.51(m，8H);5.83-6.12(m，4H);6.93(d，1H);7.79(dd，1H);7.85(d，1H);8.88(br，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+，718(M+Na)+實(shí)施例11用實(shí)施例1的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，所不同的是，所得粗酸具有足夠的純度并且不需要層析。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.15(d，6H);1.77(m，part obscured，1H);2.69(m，part obscured，1H);2.85(m，part obscured，1H);3.19(dd，1H);3.33-3.51(m，2H);3.71(quintet，1H);3.94(quintet，1H);4.03(t，1H);4.15(dd，1H);8.18(t，1H);8.45(d，2H).
Ms(+ve FAB)520(MH)+，542(M+Na)+所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1所述使3-羧基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，得到3-烯丙氧羰基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.89-4.93(m，4H);5.33-5.50(m，4H);5.97-6.17(m，2H);9.00(t，1H);9.04(d，2H).
用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，得到3-烯丙氧羰基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.91(br，2H);4.80-4.84(m，4H);5.26-5.45(m，4H);5.96-6.11(m，2H);7.53(d，2H);8.09(t，1H).
如實(shí)施例1所述使上述胺與脯氨酸縮合，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3，5-二烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.60(br，2H);3.40(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.14(dd，1H);4.58(t，1H);4.65-4.70(m，2H);4.83-4.87(m，4H);5.24-5.47(m，6H);5.84-6.16(m，3H);8.39(d，2H);8.45(t，1H);9.36(br，1H).
按實(shí)施例1的方法將上述硫基乙酸酯脫乙?；癁榱虼疾⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3，5-二烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.63(br，2H);3.25，3.29(dd overlapping m，2H);3.49(br，1H);3.84(quintet，1H);3.98(dd，1H);4.19-4.30(m，2H);4.55(t，1H);4.63-4.78(m，4H);4.84(d，4H);5.19-5.45(m，8H);5.84-6.12(m，4H);8.46(s，3H);9.18(br，1H).
Ms(+ve FAB)724(MH)+，746(M+Na)+實(shí)施例12(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸向氬氣氛和無(wú)光的條件下，向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸-4-硝基芐基酯(10g，12mM)和Meldrum酸(5.2g，36mM)于THF(70ml)中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(1.4g，1.2mM)。該混合物在室溫下攪拌30分鐘。將該混合物用乙酸乙酯(230ml)稀釋并加入碳酸氫鈉(1.5g)于蒸餾水(200ml)中的溶液中。加入10% Pd-炭(4g)并將該混合物在氫氣氛中氫化3小時(shí)。濾出催化劑，濾液用乙酸乙酯(2×100ml)和乙醚(2×100ml)提取，水層減壓濃縮至約250ml。將該溶液分成兩份，每個(gè)樣品通過(guò)經(jīng)過(guò)1升的HP20SS柱進(jìn)行純化，用水作為洗脫劑。收集純餾分并凍干，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(3.5g)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4，positions sensitive to exact solvent ratio)δ 1.19(d，6H);1.94(dt，1H);2.97(dt，1H);3.13(dd，1H);3.25(dd，1H);3.42(dt，1H);3.68(dd，1H);3.94(quintet，1H);4.02(quintet，1H);4.22(dd，1H);4.32(t，1H);7.46(t，1H);7.73(dt，1H);7.88(dm，1H);8.27(t，1H).
Ms(+ve FAB)498(Na salt)，520(di-Na salt).
所用原料如下制備用與實(shí)施例1中所述相似的方法使3-硝基苯甲酸(50g，0.3M)烯丙基化。在攪拌下將固體K2CO3(82.7g，0.6M)加入該酸于無(wú)水DMF(700ml)中的溶液。有少許放熱且該混合物變稠。用30分鐘加入烯丙基溴(38.8ml，0.45M)并將該混合物攪拌過(guò)夜。通過(guò)硅藻土過(guò)濾后，減壓蒸發(fā)該溶液至干，將殘留物分配在乙醚和NaHCO3水溶液之間。用稀HCl、鹽水和水洗滌乙醚層，干燥并蒸發(fā)，得到黃色油狀物(62g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.85-4.92(m，2H);5.27-5.5(m，2H);5.97-6.2(m，1H);7.85(t，1H);8.37-8.42(dt，1H);8.48-8.54(dq，1H);8.64(t，1H).
不用進(jìn)一步純化而將該油狀物用氯化錫和實(shí)施例6中所述的方法直接還原為3-氨基苯甲酸烯丙基酯(53g)。
Nmr(CDCl3)δ 3.6(broad，2H);4.77-4.82(dt，2H);5.24-5.44(m，2H);5.96-6.1(m，1H);6.83-6.88(m，1H);7.17-7.25(m，1H);7.35-7.47(m，2H).
通過(guò)將上述3-氨基苯甲酸烯丙基酯(26.6g，0.15M)懸浮于甲苯(750ml)中并加入EEQQ(44.5g，0.18M)而使其與4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-羧基吡咯烷(55.2g，0.15M)縮合。將該混合物攪拌過(guò)夜，用EtOAc(21)稀釋并用稀HCl、水和鹽水洗滌。將EtOAc層干燥并蒸發(fā)，殘留物用乙醇重結(jié)晶，得到(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷(67.7g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 1.93(quintet，1H);2.9(m，1H);3.35(m，1H);3.91-4.14(m，2H);4.49(quintet，1H);4.81(dd，2H);5.22(dd，2H);5.2-5.44(m，2H);5.95-6.10(m，1H);7.47(d，2H);7.66(t，2H);7.8-7.93(m，2H);8.18-8.3(m，2H);10.31(s，1H).
在0℃下通過(guò)將上述硫基乙酸酯(52.7g，0.1M)溶于脫氣的烯丙基醇(11)并加入NaOH水溶液(2M，50ml)而將其轉(zhuǎn)化為硫醇。3小時(shí)后，加入HCl水溶液(2M，52.5ml)，蒸發(fā)溶劑并將殘留物分配在EtOAc和鹽水之間。EtOAc層用MgSO4干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)。該硫醇不用進(jìn)一步純化而直接使用。
將(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸-4-硝基芐基酯(59.68g，0.1M)于乙腈(500ml)和二氯甲烷(120ml)中的溶液冷至-15℃并緩慢加入乙基二異丙基胺(52.5ml)。在氬氣氛下加入(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(0.1M)于乙腈(400ml)中的溶液，將該混合物放置過(guò)夜。蒸發(fā)溶劑，所得殘留物進(jìn)行硅膠層析，用二氯甲烷、EtOAc和乙腈進(jìn)行洗脫，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸-4-硝基芐基酯，為黃色固體(52.6g)。
Nmr(DMSO-d6+CD3OD)δ 1.26(d，3H);1.35(d，3H);2.2-2.4(m，1H);2.7-2.95(m，1H);3.28-3.40(m，2H);3.54-3.63(m，1H);3.8(t，1H);4.01-4.1(q，1H);4.21-4.33(m，2H);4.61(dd，1H);4.73(d，2H);5.17-5.45(m，6H);5.93-6.11(m，1H);7.37-8.22(complex pattern of doublets and double doublets，12H).
實(shí)施例13用與實(shí)施例12中所述相似的方法進(jìn)行脫保護(hù)和氫化，所不同的是使用(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-烯丙氧羰基-5-氨基甲?；交被柞；?-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸-4-硝基芐基酯(0.44g)。氫化后，將水層凍干，不用HP20SS層析，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，為淺黃色固體(125mg)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.9(d，6H);1.98-2.06(m，1H);2.85-2.98(m，1H);3.16-3.21(m，1H);3.26(dd，1H);3.43(quintet，1H);3.74(dd，1H);3.91-3.97(m，1H);4.0(t，1H);4.23(dd，1H);4.39(t，1H);8.24(t，1H);8.33(t，1H);8.44(t，1H).
所用原料如下制備用與實(shí)施例1中所述相似的方法用1當(dāng)量的烯丙基溴(2ml)將5-硝基間苯二甲酸(5g)轉(zhuǎn)化為單烯丙基酯。用NaHCO3水溶液由有機(jī)相中提取出所需的酸(2.7g)。該有機(jī)層含有二烯丙基酯(2.7g)。得到單酸，3-烯丙氧羰基-5-硝基苯甲酸，為白色固體。
Nmr(CDCl3)4.87(d，2H);5.3-5.5(q，2H);5.97-6.15(m，1H);9.01(t，3H).
Ms(CI)252(MH)+將DCCI(1.3g)加入上述酸(1.5g)和N-羥基琥珀酰亞胺(0.76g)于二氯甲烷(50ml)中的溶液中，該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。濾出白色固體并將該溶液蒸發(fā)至干。將該活性酯在硅膠上進(jìn)行純化，用二氯甲烷進(jìn)行洗脫，然后將其溶于二氯甲烷并用氨氣在5℃下進(jìn)行處理。沉淀出的白色固體是3-烯丙氧羰基-5-硝基苯甲酰胺(1.1g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.9(dt，2H);4.88-4.93(m，2H);6.03-6.11(m，1H);7.83(broad s，1H);8.55(broad s，1H);8.75(t，1H);8.84(t，1H);8.94(t，1H).
Ms(CI)268(M+NH4)+用與實(shí)施例12中的還原相似的方法用SnCl2還原3-烯丙氧羰基-5-硝基苯甲酰胺(1g)，得到3-烯丙氧羰基-5-氨基苯甲酰胺(0.5g)。
Nmr(DMSO-d6)4.78(dt，2H);5.2-5.8(broad，2H);5.26-5.45(m，2H);5.91-6.13(m，1H);7.22(broad s，1H);7.27(t，1H);7.33(t，1H);7.59(s，1H).
Ms(CI)221(MH)+用與實(shí)施例12中所述相似的方法將(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-羧基吡咯烷(0.75g)轉(zhuǎn)化為酰氯并與3-烯丙氧羰基-5-氨基苯甲酰氨(0.45g)反應(yīng)。所得粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠層析，用EtOAc洗脫，得到4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷(0.58g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 1.92-2.06(m，1H);2.3(s，3H);2.79-2.83(m，1H);3.38(dd，1H);3.97-4.12(m，2H);4.49(dd，1H);4.83(dt，2H);5.19(dd，2H);5.25-5.43(m，2H);5.97-6.11(m，1H);7.31(broad s，2H);7.54(d，2H);8.04(d，2H);8.12(t，1H);8.26(t，1H);8.31(t，1H);10.0(s，1H).
用實(shí)施例12中所述的方法由上述硫基乙酸酯生成硫醇。
用與實(shí)施例12中所述相似的方法使(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯(0.6g)和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基-5-氨基氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫醇(0.48g)于乙腈(20ml)中的溶液進(jìn)行反應(yīng)。通過(guò)快速層析進(jìn)行純化，用EtOAc然后用5%MeOH/EtOAc洗脫，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基-5-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯，為黃色固體(0.44g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 1.19-1.22(d，6H);2.0-2.11(m，1H);2.8-2.92(m，1H);3.32(dd，1H);3.42-3.62(m，2H);3.92-4.2(m，2H);4.31(broad d，1H);4.53(q，1H);4.84(d，2H);4.98-5.46(m，6H);5.98-6.14(m，1H);7.42-8.52(complex pattern of doublets and double doublets，11H).
實(shí)施例14用與實(shí)施例12中所述相似的方法進(jìn)行脫保護(hù)和氫化，所不同的是使用(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-烯丙氧羰基-6-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸對(duì)硝基芐基酯。氫化后，將水層凍干，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.3-1.38(2xd，6H);2.0-2.11(m，1H);2.85-2.96(m，1H);3.09(dd，1H);3.37(dd，1H);3.53(quintet，1H);3.79(dd，1H);3.94(t，1H);4.16(t，1H);4.33(dd，1H);4.43(t，1H);7.87(dd，1H);7.97(d，1H);9.12(d，1H).
Ms(+ve FAB)541(Na salt)，563(di-Na salt).
所用原料如下制備在-10℃下用草酰氯(2.63ml)、DMF(2.55ml)和N-甲基嗎啉(7.95ml)使硝基對(duì)苯二甲酸(6.33g)于二氯甲烷(75ml)和THF(15ml)中轉(zhuǎn)化為單酰氯。1小時(shí)后除去溶劑，不用進(jìn)一步純化，將該產(chǎn)物溶于烯丙醇(20ml)和THF(10ml)并在室溫下攪拌過(guò)夜。脫除溶劑并將殘留物分配在EtOAc和NaHCO水溶液之間。酸化該NaHCO3溶液并用EtOAc提取，得到產(chǎn)物，4-烯丙氧羰基-2-硝基苯甲酸(6.8g)。
Nmr(CDCl3)δ 4.89(d，2H);5.31-5.49(m，2H);5.95-6.15(m，1H);7.94(d，1H);8.36(dd，1H);8.54(d，1H).
不用純化，通過(guò)上述方法將該酸轉(zhuǎn)化成酰氯，將其溶于0℃的THF(100ml)中。將氨氣鼓泡進(jìn)該溶液直至反應(yīng)完成。將該溶液分配在EtOAc和水之間，有機(jī)餾分的產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行純化，用二氯甲烷然后用EtOAc進(jìn)行洗脫。用與實(shí)施例12中相似的方法用SnCl2還原含有少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(4g)，得到4-烯丙氧羰基-2-氨基苯甲酰胺。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.79(d，2H);5.22-5.46(m，2H);5.91-6.13(m，1H);7.02(dd，1H);7.37(d，1H);7.61(d，1H).
通過(guò)將(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-羧基吡咯烷(1.58g)懸浮于二氯甲烷(25ml)中而將其轉(zhuǎn)化為酰氯并加入草酰氯(1.52ml)。加入幾滴DMF。2小時(shí)后蒸發(fā)溶劑，在氬氣氛下將溶于二氯甲烷(10ml)中的該酰氯加入4-烯丙氧羰基-2-氨基苯甲酰胺(0.52g)于0℃的含有N-甲基嗎啉(0.38ml)的THF(10ml)和二氯甲烷(5ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物放置過(guò)夜并分配在二氯甲烷和HCl稀水溶液之間。二氯甲烷級(jí)分用水、鹽水洗滌并干燥。通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用增加濃度的EtOAc的二氯甲烷溶液洗脫，得到(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基-6-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷(0.84g)。
Nmr(CDCl3)δ 2.25(quintet，1H);2.29(s，3H);2.83(m，1H);3.53(dd，1H);4.02(quintet，1H);4.2(dd，1H);4.49(dd，1H);4.85(d，2H);5.23-5.46(m，2H);5.97-6.13(m，1H);7.31-7.5(broad，2H);7.57(d，1H);7.75(dd，1H);7.81-7.95(broad，2H);9.27(d，1H).
用與實(shí)施例2中所述相似的方法由上述硫基乙酸酯生成硫醇。
按實(shí)施例12中所述的方法使(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-氨基甲酰基-5-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇于乙腈(20ml)中的溶液進(jìn)行反應(yīng)，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-烯丙氧基-3-羧基-6-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯，為黃色泡沫體(1.24g)。
Nmr1.23-1.35(m，6H);2.2-2.38(m，1H);2.77-2.93(m，1H);3.27(dd，1H);3.28-3.42(m，1H);3.65-3.92(m，2H);4.17-4.35(m，3H);4.53(t，1H);4.83(d，2H);4.92-5.44(m，6H);5.93-6.11(m，1H);6.22-6.58(broad，2H);7.35-8.23(complex pattern of doublets and double doublets，10H);9.20(d，1H).
實(shí)施例15用與實(shí)施例2中所述相似的方法進(jìn)行脫保護(hù)和純化(最終產(chǎn)物的層析在HP20SS柱上進(jìn)行)，所不同的是使用(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(2-二甲氨基羰基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。將層析柱所得的合適的水級(jí)分凍干，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-二甲氨基羰基-3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4，mixture of rotamers)δ 1.17(d，6H);1.75(m，2H);2.65，2.72(2xs，overlapping m，4H);3.00，3.01(2xs，overlapping m，4H);3.17(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.55(m，2H);3.96(m，2H);4.15(dd，1H);7.43(t，1H);7.68(m，1H);8.20-8.40(2xd，1H).
所用原料如下制備用實(shí)施例1中對(duì)于形成3-烯丙氧基-5-氨基苯甲酸烯丙基酯所述相似的方法將2-二甲氨基羰基-3-硝基苯甲酸(1g)轉(zhuǎn)化為烯丙基酯，得到2-二甲氨基羰基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯(0.88g)。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.45(s，3H);2.97(s，3H);4.79(dd，2H);5.28-5.47(m，2H);5.9-6.1(m，1H);7.81(t，1H);8.28-8.4(dq，2H).
Ms(CI)279(MH)+用與實(shí)施例1中所述的還原相似的方法用SnCl2還原烯丙基酯(0.44g)，得到2-二甲氨基羰基-3-氨基苯甲酸烯丙基酯(0.41g)，為清的紅色油狀物。
Nmr(CDCl3)δ 2.24(s，3H);3.06(s，3H);3.64(broad，2H);4.68(dd，2H);5.17-5.37(m，2H);5.82-6.02(m，1H);6.83(dd，1H);7.09-6.85(m，1H);7.37(dd，1H).
Ms(CI)249(MH)+用與實(shí)施例12中所述的EEDQ方法類(lèi)似的方法使2-二甲氨基羰基-3-氨基苯甲酸烯丙基酯(0.39g，1.4mM)與(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-羧基吡咯烷(0.42g，1.54mM)縮合，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(2-二甲氨基羰基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基吡咯烷-4-基硫基乙酸酯(0.84g)。
Nmr(CDCl3，mixture of rotamers)δ 2.32(s，3H);2.38(br m，part obscured，1H);2.38(br m，part obscured，1H);2.74，2.76(2xs overlapping br m，4H);3.11，3.14(2xs，3H);3.36-3.45(m，1H);3.98-4.14(m，2H);4.50(dd，1H);4.56-4.79(m，4H);5.16-5.44(m，4H);5.93-6.06(m，2H);7.45(t，1H);7.81-7.86(m，1H);8.33-8.41(2xd，1H);8.60(br，1H).
Ms(CI)504(MH)+用與實(shí)施例12中所述相似的方法由上述硫基乙酸酯生成硫醇。
用與實(shí)施例1中“被護(hù)的碳代青霉烯的制備”步驟中所述相似的方法使(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(0.73g，1.47mM)和(2S，4S)-1-(烯丙氧羰基)-2-(2-二甲氨基羰基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇于乙腈(12ml)中的溶液反應(yīng)，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(2-二甲氨基羰基-3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯，為白色固體(0.63g)。
Nmr(CDCl3，mixture of rotamers)δ 1.24(d，3H);1.35(2xd，3H);1.98(br，1H);2.34(br，1H);2.73(s，3H);3.11，3.13(2xs，3H);3.22-3.46(m，3H);3.66-3.85(m，1H);4.00-4.26(m，3H);4.50(t，1H);4.62-4.80(m，6H);5.08-5.46(m，6H);5.83-6.06(m，3H);7.46(td，1H);7.86(d，1H);8.29(m，1H);8.55(br，1H).
Ms(CI)711(MH)+
實(shí)施例16(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鉀鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸4-烯丙基酯(0.4g，0.53mmol)于DMF(20ml)中的溶液中加入Meldrum酸(0.2g，1.39mmol)和四(三苯基膦)鈀(40mg，0.035mmol)。該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在室溫下將1M磷酸鉀緩沖液(20ml)和鋅粉(0.5g)的溶液加入該溶液，1小時(shí)后，該反應(yīng)混合物用硅藻土過(guò)濾并用固體碳酸鉀將濾液的pH調(diào)至7.5。過(guò)濾該溶液，減壓濃縮，所得殘留物通過(guò)反相層析進(jìn)行純化(Nucleosil C18)，用水作為洗脫劑，凍干后得到標(biāo)題化合物(78mg，28%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.15(d，3H);1.17(d，3H);1.74(m，1H);2.06(s，3H);2.66(m，1H);2.84(m，1H);3.20(dd，1H);3.40(m，2H);3.70(m，1H);3.97(m，2H);4.16(dd，1H);7.92(s，1H);7.94(s，1H);8.19(s，1H).
所用原料如下制備將(2S，4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷(1g，1.8mmol)和EEDQ(0.53g，3mmol)于氯仿(70ml)中的溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。然后將3-乙酰氨基-5-氨基苯甲酸(0.53g，2.7mmol)和二異丙基乙胺(0.7ml，4mmol)加入該反應(yīng)混合物，將其在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)溶劑后，粗化合物通過(guò)在HP20SS上層析進(jìn)行純化，用甲醇/水(80∶20)作為洗脫劑。部分蒸發(fā)溶劑，冷凍干燥，得到(2S，4S)-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯(1g，67%)。
將(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯溶于甲醇(60ml)和水(20ml)的混合物中，并用1M NaOH水溶液將該溶液的pH調(diào)至11。在室溫下30分鐘后，該反應(yīng)混合物用甲醇中和，蒸發(fā)并通過(guò)在HP20SS上層析進(jìn)行純化，用甲醇/水(80∶20)作為洗脫劑。蒸發(fā)并冷凍干燥，得到(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(0.68g，74%)。
Nmr(DMSOd6+acetic acid-d4)δ 2.05(m，1H);2.75(m，1H);3.20-3.80(m，2H);4.00(m，1H);4.42(m，1H);5.40(br s，2H);7.45-8.30(m，7H).
向(1R，5S，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯(0.6g，1.2mmol)于DMF(12ml)中的溶液中順序加入二異丙基乙胺(0.6ml，3.4mmol)、(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇(0.6g，1.2mmol)、三正丁基膦(0.6ml，2.4mmol)和水(0.1ml，5.5mmol)。將該反應(yīng)混合物在4℃下攪拌過(guò)夜，蒸發(fā)至干，所得殘留物通過(guò)在HP20SS樹(shù)脂上層析進(jìn)行純化，用乙腈/水(40∶60)作為洗脫劑。蒸發(fā)并冷凍干燥，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(0.8g，88%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.15(d，3H);1.17(d，3H);2.05(s，3H);2.17(m，1H);2.81(m，1H);3.26(dd，1H);3.36(td，1H);4.56-4.74(m，2H);5.02-5.73(m，4H);5.91(m，1H);7.47(d，1H);7.68(d，1H);7.85-7.99(m，3H);8.20-8.29(m，2H).
實(shí)施例17(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鉀鹽用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸-4-烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)制備標(biāo)題化合物。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.14(d，3H);1.16(d，3H);1.75(m，1H);2.07(s，3H);2.73(m，1H);2.96(dd，1H);3.21(dd，1H);3.39(m，1H);3.54(dd，1H);3.78(m，1H);3.96(m，1H);4.08(t，1H);4.18(dd，1H);7.69(dd，1H);8.18(d，1H);8.42(d，1H).
MS(+ve FAB)571(MH)+，(K salt)所用原料如下制備用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由2-乙酰氨基-5-氨基苯甲酸制備(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.95(m，1H);2.12(s，3H);2.34(s，3H);2.77(m，1H);3.32(m，1H);3.93-4.50(m，3H);5.04-5.32(m，2H);7.47-8.42(m，7H).
用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯制備(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇。
用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇和(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯制備(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-乙酰氨基-3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)。
Nmr(CDCl3)δ1.14-1.80(m，23H);2.17(s，3H);2.67(m，1H);3.00-3.30(m，3H);3.35-3.90(m，4H);3.90-4.40(m，3H);4.40-4.75(m，3H);5.00-5.75(m，4H);5.70-6.10(m，1H);7.38-8.65(m，7H).
實(shí)施例18(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鉀鹽用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯制備標(biāo)題化合物。
Nmr(DMSOd6+acetic acid-d4)δ 1.16(d，3H);1.17(d，3H);1.74(m，1H);2.64(m，1H);2.81(dd，1H);3.01(s，3H);3.20(m，1H);3.40(m，2H);3.68(m，1H);3.96(m，2H);4.17(dd，1H);7.54(s，1H);7.82(s，1H);8.00(s，1H).
MS(+Ve FAB)單鉀鹽607(M+H)+;二鉀鹽645(M+H)+。
所用原料如下制備用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由3-氨基-5-甲磺酰氨基苯甲酸制備(2S，4S)-1-(4-(硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 2.00(m，1H);2.30(s，3H);2.84(m，1H);2.95(s，3H);3.20-3.51(m，1H);3.83-4.20(m，2H);4.30-4.58(m，1H);5.20(m，2H);7.48-8.22(m，7H).
用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯制備(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 2.10(m，1H);2.78(m，1H);2.99(s，3H);3.43(m，1H);3.68(m，1H);4.05(m，1H);4.42(m，1H);5.13-5.32(m，3H);7.50-8.82(m，7H).
用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇和(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，3H);1.22(d，3H);1.96(m，1H);2.83(m，1H);3.00(s，3H);2.26-3.57(m，3H);3.87-4.28(m，4H);4.42-4.76(m，3H);5.08-5.42(m，4H);5.92(m，1H);7.22-8.22(m，7H).
實(shí)施例19(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸-4-硝基芐基酯(0.5g，0.56mmol)于DMF(5ml)和水(5ml)中的攪拌的溶液中加入1M磷酸鈉緩沖液(5ml)，然后加入鋅粉(1g)。將該反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)并通過(guò)加碳酸氫鈉的飽和水溶液將該溶液的pH調(diào)至8。用硅藻土過(guò)濾后，濃縮濾液，通過(guò)制備色譜(Nucleosil C-18)進(jìn)行純化，用水作為洗脫劑。將所需級(jí)分濃縮和冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物(44mg，12%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.15(d，3H);1.16(d，3H);1.78(m，1H);2.73(m，1H);2.92(m，1H);3.21(dd，1H);3.40(m，1H);3.48(m，1H);3.75(m，1H);3.97(m，1H);4.03(m，1H);4.18(m，1H);7.93(s，1H);8.11(s，1H);8.29(s，1H).
MS(-ve FAB)單鈉鹽576(M-H)-;二鈉鹽598(M-H)-所用原料如下制備用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由3-氨基-5-磺基苯甲酸制備(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.97(m，1H);2.30(s，3H);2.80(m，1H);3.37(m，1H);3.86-4.15(m，2H);4.46(m，1H);5.05-5.28(m，2H);7.46-9.25(m，7H).
用與實(shí)施例16類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯制備(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.25(d，3H);1.27(d，3H);2.07(m，1H);2.70(m，1H);3.4(m，1H);3.67(m，1H);3.99(m，1H);4.49(m，1H);5.07-5.30(m，2H);7.47-8.40(m，7H).
用與實(shí)施例1類(lèi)似的方法由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇和(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸4-硝基芐基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，3H);1.21(d，3H);1.96(m，1H);2.77(m，1H);3.18-3.47(m，2H);3.66-4.90(m，6H);5.04-5.50(m，4H);7.30-8.35(m，11H).
實(shí)施例20(5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽在室溫下，向(5R，6S，8R，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(0.185g，0.296mmol)于CH2Cl2(4ml)中的攪拌的溶液中順序加入N-甲基苯胺(0.190g，1.776mmol)、水(4ml)、碳酸氫鈉(100mg)和四(三苯基膦)鈀(34mg，0.029mmol)。10分鐘后，分離出水相并注在C18制備HLPC柱上，得到標(biāo)題化合物(43mg，27%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)1.16(d，3H);1.81(m，1H);2.64(m，1H);2.84(m，1H);3.26(m，3H);3.4(m，1H);3.67(m，1H);3.94(m，2H);4.12(m，1H);7.42(t，1H);7.65(d，1H);7.83(d，1H);8.27(s，1H).
用與實(shí)施例1中所述類(lèi)似的方法，通過(guò)使實(shí)施例4中所述的(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-硫醇與(5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-2-二苯磷酰氧基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(EP-A-126780和EP-A-208889)反應(yīng)制備原料(5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯，產(chǎn)率為67%。
實(shí)施例21(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽在氬氣氛下，向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(358mg，0.54mM)和2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(388mg，2.7mM)于DMF(8ml)和THF(4ml)的混合物中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(62mg，0.054mM)。在氬氣氛及無(wú)光的條件下將該溶液攪拌1.75小時(shí)，并蒸除溶劑。將殘留物溶于THF(6ml)和DMF(2ml)的混合物中，加入2-乙基己酸鈉(295mg，1.77mM)于THF(4ml)中的溶液，接著加入乙醚(20ml)。離心分離所得沉淀物，除去上層清液。通過(guò)使該產(chǎn)物懸浮于THF(4ml)和乙醚(10ml)的混合物中然后懸浮于乙醚(20ml)中接著離心分離將其洗滌兩次。將粗產(chǎn)物溶于水(20ml)中并用NaHCO3將pH調(diào)至7.4。過(guò)濾后，該溶液在HP20SS樹(shù)脂上進(jìn)行層析，合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，得到標(biāo)題產(chǎn)物(206mg，70%)。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，6H);1.95(m，part obscured，1H);2.83(m，1H);3.09(dd，1H);3.25(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.64(dd，1H);3.88(quintet，1H);4.02(quintet，1H);4.22(dd，1H);4.31(t，1H);8.00(s，1H);8.28(t，1H);8.46(t，1H).
Ms(+ve FAB)523(MH)+，(Na salt)所用原料如下制備3-氰基-5-硝基苯甲酸將3-氨基-5-硝基苯甲酸(3.64g，20mM)溶于濃鹽酸(20ml)，用水(75ml)稀釋?zhuān)渲?℃，用30分鐘加到NaNO2(1.38g，20mM)于水(10ml)中的溶液中。用飽和Na2CO3溶液將pH調(diào)至6.2。將CuSO4·5H2O(10g，42mM)于水(40ml)中以及KCN(10g，154mM)于水(20ml)中的混合物加熱至65℃，用15分鐘加入重氮鹽溶液，并將該混合物回流40分鐘。冷卻后，用2M鹽酸酸化，有機(jī)相用乙酸乙酯(2×200ml)提取。合并的提取液用NaH2PO4水溶液、水、鹽水洗滌，并用Na2SO4干燥。蒸發(fā)，得到3-氰基-5-硝基苯甲酸(3.6g，94%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 8.69(t，1H);8.80(t，1H);8.97(t，1H).
Ms(-ve FAB)191(M-H)-Ir(nujol)v2220cm-1基本上按實(shí)施例1中的方法使3-氰基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是，層析純化使用石油/乙酸乙酯(5∶1)的混合物，得到3-氰基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.91(dt，2H);5.39-5.53(m，2H);5.99-6.19(m，1H);8.78(t，1H);8.81(t，1H);9.04(t，1H).
Ms(+ve FAB)202M+;232(M+NH4)+;
(均為通過(guò)氨還原的氨基化合物)用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-5-氰基苯甲酸烯丙基酯，m.p.112-113℃。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.79(dt，2H);5.25-5.45(m，2H);5.94-6.13(m overlapping br，1H);7.10(t，1H);7.37(t，1H);7.48(t，1H).
Ms(+ve FAB)202M+;232(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(19∶1～9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.59(br，2H);3.38(dd，1H);3.97-4.17(m，2H);4.56(t，1H);4.69(d，2H);4.84(d，2H);5.26-5.48(m，4H);5.85-6.14(m，2H);8.03(br s，1H);8.18(t，1H);8.29(br s，1H);9.69(br，1H).
Ms(+ve FAB)458(MH)+;480(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙酰基化，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇。
Nmr(CDCl3)δ 1.90(d，1H);2.52(br，1H);2.65(br，1H);3.34-3.52(m，2H);4.07(dd，1H);4.54(t，1H);4.69(d，2H);4.84(d，2H);5.27-5.47(m，4H);5.87-6.11(m，2H);8.01(s，1H);8.21(t，1H);8.28(s，1H);9.56(br，1H).
如實(shí)施例1所述使上述硫醇與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(3∶2至2∶3)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.27(d，3H);1.35(d，3H);2.67(v br，2H);3.21-3.33(overlapping m，2H);3.53(br，1H);3.83(quintet，1H);3.93(dd，1H);4.20-4.31(overlapping m，2H);4.54(t，1H);4.63-4.86(m，6H);5.21-5.47(m，6H);5.82-6.11(m overlapping br，3H);8.05(t，1H);8.33(br s，1H);8.37(br s，1H);9.35(br，1H).
Ms(+ve FAB)665(MH)+;687(M+Na)+
實(shí)施例22用實(shí)施例21的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，3H);1.18(d，3H);1.83(m，part obscured，1H);2.76(quintet，1H);2.98(dd，1H);3.22(dd，1H);3.39(quintet，1H);3.56(dd，1H);3.81(s overlapping m，4H);4.00(quintet，1H);4.15，4.18(t overlapping dd，2H);7.22(t，1H);7.58(t，1H);7.84(t，1H).
Ms(-ve FAB)505(M-H)-，(Na salt)所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1的烯丙基化步驟使3-羥基-5-硝基苯甲酸甲基化，所不同的是用硫酸二甲酯代替烯丙基溴，不必進(jìn)行層析純化，得到3-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.94(s，3H);3.97(s，3H);7.87(t，1H);7.90(t，1H);8.44(t，1H).
將上述酯(3.45g，16mM)溶于THF(100ml)，用1M NaOH(25ml)處理，在室溫下攪拌5小時(shí)。脫除溶劑后，所得殘留物用水(50ml)處理，用2M硫酸酸化并用乙酸乙酯(3×60ml)提取。合并的有機(jī)提取液用NaH2PO4水溶液、鹽水洗滌，用MgSO4干燥。蒸發(fā)，得到3-甲氧基-5-硝基苯甲酸，將其基本上如實(shí)施例1中所述進(jìn)行烯丙基化，所不同的是層析純化使用石油/乙酸乙酯(6∶1)的混合物，得到3-甲氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.95(s，3H);4.87(dt，2H);5.31-5.48(m，2H);5.95-6.15(m，1H);7.89(t，1H);7.92(t，1H);8.46(t，1H).
Ms(CI)237M+;255(M+NH4)+
用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-5-甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.72(s，3H);4.50(v br，2H);4.75(dt，2H);5.25-5.43(m，2H);5.95-6.11(m，1H);6.47(t，1H);6.75(t，1H);6.93(t，1H).
Ms(CI)208(MH)+如實(shí)施例1所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用石油/乙酸乙酯(5∶2～2∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.59(br，2H);3.38(dd，1H);3.85(s，3H);4.02(quintet，1H);4.15(dd，1H);4.55(t，1H);4.68(d，2H);4.81(d，2H);5.22-5.46(m，4H);5.83-6.13(m，2H);7.35(t，1H);7.58(br s，1H);7.64(t，1H);9.12(br，1H).
Ms(+ve FAB)463(MH)+;485(M+Na)+如實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(60∶40至45∶55)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.37(d，3H);2.64(v br，2H);3.21-3.33(overlapping m，2H);3.48(br，1H);3.80(quintet，1H);3.85(s，3H);4.01(dd，1H);4.19-4.29(overlapping m，2H);4.53(t，1H);4.62-4.83(m，6H);5.20-5.45(m，6H);5.84-6.11(m overlapping br，3H);7.25(t，1H);7.63(m，2H);8.90(br，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+
實(shí)施例23用實(shí)施例21的方法以亞砜中心的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-甲亞磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.87(m，part obscured，1H);2.64-2.91，2.82，2.84(m overlpping 2x s，5H);3.21(dd，1H);3.40(quintet，1H);3.52(dd，1H);3.71(quintet，1H);4.01(quintet，1H);4.01(m，1H);4.18(dd，1H);7.83(t，1H);7.94(td，1H);8.45(d，1H).
Ms(+ve FAB)560(MH)+，(Na salt);582(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備4-甲亞磺酰基-3-硝基苯甲酸將4-甲硫基-3-硝基苯甲酸(4.36g，20mM)溶于乙酸(200ml)，在室溫下用H2O2(2.5ml，30%，22mM)處理。在室溫下攪拌4天后，用偏亞硫酸氫鈉分解過(guò)量的過(guò)氧化物，蒸發(fā)溶劑。所得殘留物通過(guò)在硅膠上層析進(jìn)行純化，用甲醇洗脫，得到4-甲亞磺酰基-3-硝基苯甲酸(4.1g，89%)，m.p.238-239℃。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.90(s，3H);8.29(d，1H);8.56(dd，1H);8.68(d，1H).
Ms(-ve FAB)229(M-H)-基本上如實(shí)施例1所述使上述酸烯丙基化，所不同的是不必進(jìn)行層析純化，得到4-甲亞磺酰基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯，m.p.119-121℃。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.91(s，3H);4.91(dt，2H);5.29-5.50(m，2H);5.99-6.18(m，1H);8.34(d，1H);8.61(dd，1H);8.69(d，1H).
用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-4-甲亞磺酰基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.92(s，3H);4.82(dt，2H);5.17(br，2H);5.28-5.46(m，2H);5.96-6.11(m，1H);7.30(dd，1H);7.41(m，2H).
Ms(EI)223(M-O)+;239M+如實(shí)施例1所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用己烷/乙酸乙酯(3∶2至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲亞磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6at 100°)δ 1.98(m，1H);2.32(s，3H);2.73(s，3H);2.86(m，part obscured，1H);3.36(m，1H);3.91-4.10(overlapping m，2H);4.48(dd，1H);4.53(m，2H);4.86(d，2H);5.11-5.49(m，4H);5.80-5.97(m，1H);6.01-6.15(m，1H);8.09(s，2H);8.35(s，1H).
Ms(+ve FAB)495(MH)+如實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙酰基化并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由乙酸乙酯至乙酸乙酯/異丙醇(98∶2)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲亞磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6，mixture of rotamers)δ 1.18(d，6H);1.99(br，1H);2.80(soverlapping m，5H);3.25(solvent overlapping m，2H);3.54(m，1H);3.90-4.18(m，3H);4.15(dd，1H);4.55(m，4H);4.85(d，2H);5.06(d，1H);5.14-5.46(m，6H);5.79-6.13(m，3H);7.80-8.05(m，2H);8.12(m，1H);10.10(m，1H).
Ms(+ve FAB)702(MH)+實(shí)施例24用實(shí)施例21的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.16(d，3H);1.18(d，3H);1.75(quintet，1H);2.63(m，1H);2.79(dd，1H);3.20(s overlapping m，4H);3.38(m，2H);3.64(quintet，1H);3.95(m，2H);4.14(dd，1H);8.09(t，1H);8.44(m，2H).
Ms(-ve FAB)574(M-H)-，(Na salt)所用原料如下制備3-甲硫基-5-硝基苯甲酸將3-氨基-5-硝基苯甲酸(1.82g，10mM)溶于濃硫酸(1.9ml)，用水(10ml)稀釋?zhuān)⒗渲?℃。加入NaNO2(0.7g，10mM)于水(3ml)中的溶液并將該混合物攪拌30分鐘。在3℃下將重氮鹽的冷溶液加入甲硫基銅(Ⅰ)的淤漿中，并將該混合物攪拌45分鐘。有機(jī)相用乙酸乙酯(5×60ml)提取，合并的有機(jī)層用NaH2PO4水溶液、水、鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。蒸發(fā)，得到3-甲硫基-5-硝基苯甲酸(1.77g，83%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.63(s，3H);8.10(t，1H);8.21(t，1H);8.32(t，1H);13.68(br，1H).
Ms(-ve FAB)213(M-H)-基本上如實(shí)施例1所述使上述酸烯丙基化，所不同的是層析洗脫劑是石油/乙酸乙酯(6∶1)的混合物，得到3-甲硫基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
(CDCl3)δ 2.60(s，3H);4.87(dt，2H);5.32-5.49(m，2H);5.93-6.07(m，1H);8.20(m，2H);8.57(t，1H).
Ms(EI)253M+3-甲磺酰基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯將3-甲硫基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯(1.12g，4.4mM)溶于甲醇(30ml)并冷至2℃。緩慢加入“過(guò)氧單過(guò)硫酸鉀”(2KHSO5·KHSO4·K2SO4，8.13g，13.2mM)于水(25ml)中的溶液，連續(xù)攪拌4小時(shí)。該混合物用水(60ml)稀釋并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。合并的有機(jī)提取液用水、鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用石油/乙酸乙酯(3∶1至2∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到3-甲磺酰基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯(0.74g，59%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.44(s，3H);4.94(dt，2H);5.32-5.53(m，2H);6.01-6.25(m，1H);8.78(t，1H);8.89(t，1H);8.91(t，1H).
用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-5-甲磺?；郊姿嵯┍ァ?br> Nmr(DMSO-d6)δ 3.15(s，3H);4.80(dt，2H);5.26-5.47(m，2H);5.95-6.15(m overlapping br，3H);7.29(t，1H);7.47(t，1H);7.51(t，1H).
如實(shí)施例1所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.34(s，3H);2.48(m，1H);2.62(m，1H);3.17(s，3H);3.41(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.15(dd，1H);4.58(dd，1H);4.71(d，2H);4.84(dt，2H);5.27-5.47(m，4H);5.88-6.14(m，2H);8.23(br s，2H);8.37(t，1H);9.69(br，1H).
Ms(+ve FAB)511(MH)+;533(M+Na)+如實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙酰基化并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(55∶45至20∶80)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.54(br，1H);2.66(br，1H);3.12(s，3H);3.19-3.22(overlapping m，2H);3.54(br，1H);3.87(quintet，1H);3.94(dd，1H);4.25，4.29(quintet overlapping dd，2H);4.55(t，1H);4.65-4.80(m，4H);4.85(d，2H);5.20-5.46(m，6H);5.86-6.12(m overlapping br，3H);8.31(br，1H);8.43(br，1H);8.52(br，1H);9.40(br，1H).
Ms(+ve FAB)718(MH)+;740(M+Na)+實(shí)施例25用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.16(d，6H);1.92(m，part obscured，1H);2.77(m，part obscured，1H);3.00(dd，1H);3.21(dd，1H);3.37(quintet，1H);3.59(quintet，1H);3.80(quintet，1H);3.97(quintet，1H);4.20(m，2H);7.91(br s，1H);8.27(br s，1H);8.44(br s，1H).
Ms(-ve FAB)542(M-H)-，(acid);564(M-H)-，(Na salt)所用原料如下制備
基本上如實(shí)施例1所述使3-硝基-5-三氟甲基苯甲酸烯丙基化，所不同的是所得產(chǎn)物的純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析，得到3-硝基-5-三氟甲基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.91(dt，2H);5.30-5.51(m，2H);5.99-6.20(m，1H);8.58(br s，1H);8.77(br s，1H);8.84(t，1H).
Ms(CI)275M+;293(M+NH4)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-5-三氟甲基苯甲酸烯丙酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.78(dt，2H);5.24-5.43(m，2H);5.93-6.13(m，1H);7.08(t，1H);7.27(br s，1H);7.44(t，1H).
Ms(CI)245M+;263(M+NH4)+按實(shí)施例1所述使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.59(m，2H);3.39(dd，1H);4.04(quintet，1H);4.14(dd，1H);4.58(t，1H);4.62(dt，2H);4.85(dt，2H);5.23-5.48(m，4H);5.84-6.15(m，2H);8.03(br s，1H);8.23(br s，2H);9.60(br，1H).
Ms(+ve FAB)501(MH)+;523(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯/二氯甲烷(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-三氟甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.21(d，6H);2.05(br，1H);2.85(br，1H);3.29(dd，1H);3.44(dd，1H);3.51(quintet，1H);3.93(br，1H);4.05-4.18(m，2H);4.27(dd，1H);4.43-4.71(overlapping m，5H);4.85(d，2H);5.16-5.46(m，6H);5.70-6.16(m，3H);7.94(br s，1H);8.37(br s，1H);8.53(br s，1H).
Ms(+ve FAB)708(MH)+;730(M+Na)+實(shí)施例26用實(shí)施例1的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，6H);1.93(m，part obscured，1H);2.86(quintet，1H);3.02(dd，1H);3.26(dd，1H);3.44(quintet，1H);3.68(dd，1H);3.84(quintet，1H);3.95(s，3H);4.03(quintet，1H);4.22(dd，1H);4.34(t，1H);7.13(d，1H);7.78(dd，1H);8.25(d，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na salt);550(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1的方法使4-甲氧基-3-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是該產(chǎn)物的純度足以直接使用而不必層析，得到3-硝基-4-甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.03(s，3H);4.83(dt，2H);5.29-5.46(m，2H);5.93-6.14(m，1H);7.14(d，1H);8.24(dd，1H);8.52(d，1H).
Ms(CI)237M+;255(M+NH4)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-4-甲氧基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必層析。
Nmr(CDCl3)δ 3.72(br，2H);3.90(s，3H);4.77(dt，2H);5.24-5.43(m，2H);5.95-6.10(m，1H);6.79(d，1H);7.41(d，1H);7.50(dd，1H).
Ms(CI)208(MH)+如實(shí)施例4所述使上述胺與脯氨酸縮合，所不同的是所得產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(4∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.51(br，1H);2.66(br，1H);3.41(dd，1H);3.93(s，3H);4.01(quintet，1H);4.17(dd，1H);4.55(t，1H);4.64(d，2H);4.80(dt，2H);5.18-5.44(m，4H);5.81-6.14(m overlapping br，2H);6.91(d，1H);7.84(dd，1H);8.90(br，1H);9.01(d，1H).
Ms(+ve FAB)463(MH)+;485(M+Na)+如實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯Nmr(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.36(d，3H);2.52(br，1H);2.66(br，1H);3.22(dd，1H);3.28(quintet，1H);3.44(dd，1H);3.83(quintet，1H);3.93(s，3H);4.09(m，1H);4.19-4.31(overlapping m，2H);4.53(t，1H);4.65(m，4H);4.81(d，2H);5.19-5.45(m，6H);5.83-6.11(m，3H);6.91(d，1H);7.83(dd，1H);8.79(br，1H);9.04(d，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+
實(shí)施例27用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，6H);1.83(m，part obscured，1H);2.75(quintet，1H);2.97(dd，1H);3.23(dd，1H);3.40(quintet，1H);3.56(dd，1H);3.82(s+m，4H);3.99(quintet，1H);4.12(t，1H);4.19(dd，1H);7.09(d，1H);7.75(dd，1H);7.95(d，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na salt);550(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1中所述使2-甲氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是所得產(chǎn)物的純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析，得到2-甲氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.03(s，3H);4.85(dt，2H);5.30-5.49(m，2H);5.95-6.14(m，1H);7.08(d，1H);8.48(dd，1H);8.72(d，1H).
Ms(CI)238(MH)+;255(M+NH4)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，得到5-氨基-2-甲氧基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(CDCl3)δ 3.39(br，2H);3.83(s，3H);4.80(dt，2H);5.23-5.47(m，2H);5.94-6.13(m，1H);6.83(d，2H);7.18(t，1H).
Ms(CI)208(MH)+如實(shí)施例4所述使上述胺與脯氨酸縮合，所不同的是所得產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(4∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.58(br，2H);3.39(dd，1H);3.89(s，3H);4.02(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.53(t，1H);4.66(dt，2H);4.80(dt，2H);5.23-5.48(m，4H);5.84-6.13(m，2H);6.94(d，1H);7.80(m，2H);8.94(br，1H).
Ms(CI)463(MH)+按實(shí)施例1所述使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯濃縮，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.36(d，3H);2.65(br，2H);3.25(dd，1H);3.28(quintet，1H);3.47(br，1H);3.79(quintet，1H);3.89(s，3H);4.01(dd，1H);4.18-4.29(overlapping m，2H);4.51(t，1H);4.66(m，4H);4.79(dt，2H);5.19-5.46(m，6H);5.84-6.11(m，3H);6.95(d，1H);7.79-7.87(m，2H);8.70(br，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+實(shí)施例28用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.85(m，part obscured，1H);2.66-2.86(overlapping m，2H);3.21(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.52-3.72(overlapping m，2H);3.82(s，3H);3.99(quintet，1H);4.08(dd，1H);4.17(dd，1H);7.17(t，1H);7.45(dd，1H);8.41(dd，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na salt);550(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備基本上按實(shí)施例1的烯丙基化步驟使2-羥基-3-硝基苯甲酸甲基化，所不同的是用甲基碘代替烯丙基溴，不必進(jìn)行層析純化，得到2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.88(s，3H);3.90(s，3H);7.44(t，1H);8.04(dd，1H);8.12(dd，1H).
Ms(CI)212(MH)+;229(M+NH4)+基本上用實(shí)施例22的方法使上述酯(3.45g，16mM)水解，所不同的是溶劑是DMSO而不是THF，得到2-甲氧基-3-硝基苯甲酸。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.89(s，3H);7.40(t，1H);8.01(dd，1H);8.06(dd，1H).
Ms(CI)215(M+NH4)+基本上按實(shí)施例1中所述使上述硝基酸烯丙基化，所不同的是該產(chǎn)物的純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析，得到2-甲氧基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.00(s，3H);4.86(dt，2H);5.31-5.50(m，2H);5.96-6.16(m，1H);7.27(d，1H);7.92(dd，1H);8.06(dd，1H).
Ms(CI)238(MH)+;255(M+NH4)+用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-2-甲氧基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(CDCl3)δ 3.86(s，3H);3.92(br，2H);4.82(dt，2H);5.26-5.49(m，2H);5.96-6.16(m，1H);6.91(dd，1H);7.00(t，1H);7.23(dd，1H).
Ms(CI)208(MH)+;225(M+NH4)+按實(shí)施例4的方法使上述胺與脯氨酸縮合，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.30(s，3H);2.53(br，1H);2.65(br，1H);3.41(dd，1H);3.86(s，3H);4.04(quintet，1H);4.16(dd，1H);4.58(t，1H);4.66(d，2H);4.83(dt，2H);5.20-5.47(m，4H);5.83-6.13(m overlapping br，2H);7.16(t，1H);7.60(dd，1H);8.57(dd，1H);9.15(br，1H).
Ms(+ve FAB)463(MH)+;485(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.53(br，1H);2.68(br，1H);3.24(dd，1H);3.28(quintet，1H);3.43(br，1H);3.80(quintet，1H);3.83(s，3H);4.12(m，1H);4.19-4.29(overlapping m，2H);4.57(t，1H);4.64(m，4H);4.83(d，2H);5.18-5.48(m，6H);5.81-6.14(m，3H);7.17(t，1H);7.61(dd，1H);8.56(dd，1H);9.02(br，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+
實(shí)施例29用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.19(d，6H);1.88(m，part obscured，1H);2.31(s，3H);2.77(dt，1H);2.93(dd，1H);3.22(dd，1H);3.42(quintet，1H);3.57(dd，1H);3.77(quintet，1H);4.01(quintet，1H);4.16(t，1H);4.19(dd，1H);7.35(d，1H);7.69(dd，1H);8.39(d，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na salt);534(MH)+，(Na2salt);556(M+Na)+，(Na2salt);
所用原料如下制備如實(shí)施例1中所述使4-甲基-3-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是不必進(jìn)行層析純化，得到4-甲基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.59(s，3H);4.84(dt，2H);5.27-5.47(m，2H);5.96-6.16(m，1H);7.67(d，1H);8.16(dd，1H);8.44(d，1H).
Ms(EI)222(MH)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是溶劑為甲醇，得到3-氨基-4-甲基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.10(s，3H);4.74(dt，2H);5.15(br，2H);5.22-5.43(m，2H);5.93-6.12(m，1H);7.04(d，1H);7.11(dd，1H);7.28(d，1H).
Ms(CI)192(MH)+;209(M+NH4)+按實(shí)施例4的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6，mix of rotamers)δ 1.97(quintet，1H);2.26(s，3H);2.34(s，3H);2.80(br，1H);3.30(br，1H);3.93-4.08(br m，2H);4.53(br，3H);4.80(dt，2H);5.10-5.44(m overlapping br，4H);5.78-6.13(m overlapping br，2H);7.38(d，1H);7.72(dd，1H);7.94(br，0.5H);8.01(br，0.5H);9.61(br，0.5H);9.67(br，0.5H).
Ms(CI)447(MH)+;464(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4，mix of rotamers)δ 1.16(d，3H);1.18(d，3H);1.98(quintet，1H);2.27(s，3H);2.86(br，1H);3.27(dd，1H);3.33(t，1H);3.56(quintet，1H);3.95(quintet，1H);4.02(dd，1H);4.15(quintet，1H);4.27(dd，1H);4.48-4.70(overlapping m，5H);4.80(d，2H);5.10-5.45(moverlapping br，6H);5.81-6.14(m overlapping br，3H);7.38(d，1H);7.75(dd，1H);8.01(br，0.5H);8.07(br，0.5H);9.60(br，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+實(shí)施例30用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.15(d，3H);1.16(d，3H);1.78(dt，1H);2.48(s，3H);2.60(dt，1H);2.90(dd，1H);3.21(dd，1H);3.39(quintet，1H);3.49(dd，1H);3.73(quintet，1H);3.99(quintet，1H);4.03(t，1H);4.17(dd，1H);7.23(d，1H);7.70(dd，1H);8.12(d，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na salt);534(MH)+，(Na2salt);556(M+Na)+，(Na2salt)所用原料如下制備按實(shí)施例1中所述使2-甲基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是不必進(jìn)行層析純化，得到2-甲基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.65(s，3H);4.84(dt，2H);5.28-5.47(m，2H);5.99-6.18(m，1H);7.65(d，1H);8.31(dd，1H);8.57(d，1H).
Ms(CI)222(MH)+;0.99(M+NH4)+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是溶劑為甲醇，得到5-氨基-2-甲基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.33(s，3H);4.73(dt，2H);5.18(br，2H);5.23-5.44(m，2H);5.93-6.12(m，1H);6.68(dd，1H);6.95(d，1H);7.12(d，1H).
Ms(CI)192(MH)+;209(M+NH4)+按實(shí)施例4的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基)-2-(3-烯丙氧羰基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(DMSO-d6，mix of rotamers)δ 1.91(br m，1H);2.33(s，3H);2.76(br m，1H);3.28(s overlapping m，4H);4.00(br m，2H);4.38(t，1H);4.51(br，2H);4.78(dt，2H);5.01-5.46(m overlapping br，4H);5.68-6.16(m overlapping br，2H);7.27(d，1H);7.72(dd，1H);8.11(br，0.5H);8.05(br，0.5H);10.17(br，1H).
Ms(+FAB)447(MH)+;469(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.19(d，6H);1.92(br，part obscured，1H);2.48(s，3H);2.79(br，1H);3.25(dd，1H);3.54(quintet，1H);3.91(br m，1H);4.01(quintet，1H);4.12(dd，1H);4.25(dd，1H);4.45(m，1H);4.50-4.68(m，4H);4.78(dt，2H);5.18-5.45(m，6H);5.70-6.13(m overlapping br，3H);7.25(d，1H);7.76(dd，1H);8.12(br m，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+實(shí)施例31(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽在氬氣氛下將(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯(3g，4.59mM)和2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(3.97g，27.6mM)溶于DMSO(15ml)和THF(5ml)的混合物中，并加入四(三苯基膦)鈀(531mg，0.46mM)。在氬氣氛及無(wú)光的條件下將該溶液攪拌1小時(shí)。加入2-乙基己酸鈉(1.53g，9.22mM)于THF(5ml)中的溶液，然后加入THF(250ml)。在氬氣層下過(guò)濾所得沉淀物以除去水分，用小部分THF(二次)和乙醚順序洗滌。將粗產(chǎn)物和NaHCO3(1.5g)溶于水(100ml)中，所得溶液在HP20SS樹(shù)脂上進(jìn)行層析，由水至水/乙腈(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，冷凍干燥，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.13(d，3H);1.15(d，3H);1.76(dt，1H);2.32(s，3H);2.68(dt，1H);2.87(dd，1H);3.18(dd，1H);3.36(quintet，1H);3.45(dd，1H);3.71(quintet，1H);3.95(quintet，1H);4.02(t，1H);4.14(dd，1H);7.49(s，1H);7.65(s，1H);8.05(s，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na salt);534(MH)+，(Na2salt);556(M+Na)+，(Na2salt)所用原料如下制備3-甲基-5-硝基苯甲酸在攪拌下將3，5-二甲基硝基苯(30g，0.198M)在吡啶(400ml)和水(250ml)的混合物中加熱至80℃。用0.75小時(shí)分批加入KMnSO4(62.7g，0.396M)，并在85～90℃下繼續(xù)加熱1.75小時(shí)。該熱溶液通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用熱水(150ml)洗滌。粉紅色濾液用幾滴偏亞硫酸氫鈉脫色，并蒸發(fā)至干。將殘留物溶于水(250ml)中，用乙醚(2×90ml)提取。將水層酸化(濃鹽酸)，用乙酸乙酯(3×120ml)提取。合并的有機(jī)提取液用NaHPO溶液、鹽水洗滌，用MgSO4干燥。使粗產(chǎn)物通過(guò)一個(gè)硅膠墊進(jìn)行洗脫，用乙酸乙酯/二氯甲烷/乙酸(25∶25∶1)的混合物作為洗脫劑，得到3-甲基-5-硝基苯甲酸(14.5g，40%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 2.51(s，3H);8.17(s，1H);8.30(t，1H);8.42(t，1H);13.58(br，1H).
Ms(CI)181(MH)+
如實(shí)施例1中所述使3-甲基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是不必進(jìn)行層析純化，得到3-甲基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.53(s，3H);4.87(dt，2H);5.31-5.48(m，2H);5.99-6.13(m，1H);8.20(s，1H);8.23(s，1H);8.68(s，1H).
Ms(CI)222(MH)+用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到5-氨基-3-甲基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不需進(jìn)行層析。
Nmr(CDCl3)δ 2.30(s，3H);3.46(br，2H);4.78(dt，2H);5.23-5.45(m，2H);5.93-6.12(m，1H);6.68(t，1H);7.17(t，1H);7.27(t，1H).
Ms(CI)192(MH)+;220(M+C2H5)+按實(shí)施例4的方法使上述胺與脯氨酸縮合，用己烷/乙酸乙酯(3∶1)作為洗脫劑通過(guò)層析進(jìn)行純化，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.39(s，3H);2.58(br，2H);3.29(dd，1H);4.02(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.56(t，1H);4.68(dm，2H);4.82(dt，2H);5.23-5.44(m，4H);5.86-6.12(m，2H);7.63(s，1H);7.85(s，1H);7.85(s，1H);9.09(br，1H).
Ms(+FAB)447(MH)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫烯丙基化并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(3∶2至2∶3)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.38(s，3H);2.63(br，2H);3.23(dd，1H);3.27(quintet，1H);3.46(br，1H);3.78(quintet，1H);4.00(dd，1H);4.24(overlapping m，2H);4.51(t，1H);4.59-4.63(m，4H);4.79(d，2H);5.17-5.42(m，6H);5.82-6.09(m，3H);7.61(s，1H);7.73(s，1H);7.99(s，1H);8.87(br，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+實(shí)施例32用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.18(d，6H);1.92(br，part obscured，1H);2.81(m，1H);3.03(dd，1H);3.23(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.61(m，1H);3.90(s overlapping m，4H);4.00(quintet，1H);4.21(overlapping m，2H);8.25(t，1H);8.50(m，2H)L.
Ms(+ve FAB)556(MH)+，(Na salt);578(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備如實(shí)施例1中所述使3-甲氧羰基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是不必通過(guò)層析進(jìn)行純化，得到3-甲氧羰基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.97(s，3H);4.91(dt，2H);5.31-5.51(m，2H);6.00-6.19(m，1H);8.75(t，1H);8.81(d，2H).
Ms(EI)265M+
用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是溶劑為甲醇，得到3-氨基-5-甲氧羰基苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(DMSO-d6)δ 3.79(br，2H);3.92(s，3H);4.82(dt，2H);5.26-5.46(m，2H);5.94-6.14(m，1H);7.53(m，2H);8.07(t，1H).
Ms(CI)236(MH)+;253(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(9∶1)進(jìn)行洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.60(br，2H);3.40(dd，1H);3.94(s，3H);4.04(quintet，1H);4.14(dd，1H);4.58(t，1H);4.68(dm，2H);4.85(dt，2H);5.25-5.47(m，4H);5.85-6.16(m，2H);8.36(t，1H);8.43(m，2H);9.40(br，1H).
Ms(+FAB)491(MH)+;513(M+Na)+在氬氣氛下將(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯(1.2g，2.4mM)溶于THF(50ml)，加入甲基胺水溶液(33%，w/v，0.51g，5.4mM)。繼續(xù)攪拌3小時(shí)，脫除溶劑。所得殘留物用2M鹽酸處理并用乙酸乙酯處理。有機(jī)溶液用水、鹽水、NaHCO水溶液洗滌，用MgSO4干燥。脫除溶劑，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇(1.02g，93%)。該硫醇按實(shí)施例1的方法不用進(jìn)一步純化而直接與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1)進(jìn)梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.37(d，3H);2.64(br，2H);3.26(dd overlapping quintet，2H);3.48(br，1H);3.86(quintet，1H);3.94(s overlapping m，4H);4.25(quintet，1H);4.29(dd，1H);4.56(t，1H);4.69(m，4H);4.86(dm，2H);5.19-5.46(m，6H);5.85-6.13(m，3H);8.46(m，3H);9.18(br，1H).
Ms(+ve FAB)698(MH)+;720(M+Na)+實(shí)施例33用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2，4-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，6H);1.96(m，part obscured，1H);2.81(m，1H);3.14(dd，1H);3.27(dd，1H);3.43(quintet，1H);3.73(m，1H);3.91(quintet，1H);4.04(quintet，1H);4.23(dd，1H);4.43(t，2H);7.29(t，1H);8.54(t，1H).
Ms(+ve FAB)534(MH)+，(Na salt);556(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備2，4-二氟-5-硝基苯甲酸將2，4-二氟苯甲酸(5g，0.031M)溶于濃硫酸(30ml)中并冷至0℃。攪拌該混合物，并滴加發(fā)煙硝酸(d 1.567g/ml，1.91ml，0.047M)，將溫度保持低于5℃。攪拌3小時(shí)后，將該混合物倒在冰上，有機(jī)相用二氯甲烷(2×75ml)提取。合并的有機(jī)層用水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到2，4-二氟-5-硝基苯甲酸(3.9g，61%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 7.18(t，1H);8.88(t，1H);9.93(br，1H).
Ms(-FAB)202(M-H)-按實(shí)施例1的方法使2，4-二氟-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是反應(yīng)時(shí)間僅為1.5小時(shí)，DMF在使用前用IR-120-H離子交換樹(shù)脂攪拌，不必通過(guò)層析進(jìn)行純化，得到2，4-二氟-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.88(dt，2H);5.31-5.50(m，2H);5.93-6.13(m，1H);7.13(t，1H);8.80(dd，1H).
Ms(EI)265M+用實(shí)施例2的方法還原上述硝基化合物，所不同的是溶劑為甲醇，得到5-氨基-2，4-二氟苯甲酸烯丙基酯，其純度足以直接使用而不必進(jìn)行層析。
Nmr(CDCl3)δ 3.61(br，2H);4.81(dt，2H);5.26-5.48(m，2H);5.92-6.12(m，1H);6.83(t，1H);7.38(dd，1H).
Ms(CI)214(MH)+;231(M+NH4)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(9∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧基-2，4-二氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.63(br，2H);3.39(dd，1H);4.04(quintet，1H);4.14(dd，1H);4.59(t，1H);4.66(dt，2H);4.83(dt，2H);5.22-5.49(m，4H);5.84-6.13(m，2H);6.94(t，1H);8.82(t，1H);9.22(br，1H).
Ms(+FAB)469(MH)+;491(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙酰基化并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2，4-二氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.38(d，3H);2.62(br，2H);3.24(dd overlapping quintet，2H);3.45(dd，1H);3.88(quintet，1H);4.03(dd，1H);4.25(quintet，1H);4.29(dd，1H);4.57(t，1H);4.68(m，4H);4.82(dm，2H);5.21-5.48(m，6H);5.85-6.10(m，3H);6.94(t，1H);8.85(t，1H);9.12(br，1H).
Ms(+ve FAB)676(MH)+;698(M+Na)+實(shí)施例34用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2，4-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，6H);1.95(m，part obscured，1H);2.87(dt，1H);3.08(dd，1H);3.26(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.71(dd，1H);3.87(quintet，part obscured，1H);3.91(s，3H);3.96(s，3H);4.03(quintet，1H);4.21(dd，1H);4.39(t，2H);6.76(s，1H);8.44(s，1H).
Ms(+ve FAB)558(MH)+，(Na salt);580(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備2，4-二甲基-5-硝基苯甲酸通過(guò)在冷卻下將鈉金屬(1.42g，0.062M)溶于甲醇(40ml)中制備甲醇鈉溶液。加入2，4-二氟-5-硝基苯甲酸烯丙基酯(5g，0.021M)并將該混合物攪拌2小時(shí)。加入NaOH(2g，0.05M)于水(10ml)中的溶液，將該混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將殘留物溶于水(50ml)中，用乙醚(40ml)提取。水層用硫酸酸化，過(guò)濾所得的沉淀物并干燥，得到2，4-二甲氧基-5-硝基苯甲酸(4.23g，91%)。
Nmr(CDCl3)δ 4.07(s，3H);4.16(s，3H);6.62(s，1H);8.81(s，1H).
Ms(CI)228(MH)+;245(M+NH4)+如實(shí)施例1中所述使2，4-二甲氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基化，所不同的是不必通過(guò)層析進(jìn)行純化，得到2，4-二甲氧基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ4.02(s，3H);4.04(s，3H);4.79(dt，2H);5.26-5.46(m，2H);5.93-6.13(m，1H);6.54(s，1H);8.63(s，1H).
Ms(+FAB)268(MH)+;290(M+Na)+用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到5-氨基-2，4-二甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.25(br，2H);3.87(s，3H);3.90(s，3H);4.76(dt，2H);5.22-5.46(m，2H);5.93-6.12(m，1H);6.47(s，1H);7.29(s，1H).
Ms(CI)238(MH)+按實(shí)施例4的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(4∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2，4-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.49(br，1H);2.64(br，1H);3.40(dd，1H);3.91(s，3H);3.93(s，3H);4.00(quintet，1H);4.17(dd，1H);4.53(t，1H);4.64(d，2H);4.77(dt，2H);5.19-5.46(m，4H);5.80-6.14(m overlapping br，2H);6.49(s，1H);8.69(br，1H);8.81(s，1H).
Ms(+FAB)493(MH)+
按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2，4-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.22(d，3H);1.36(d，3H);2.48(br，1H);2.65(br，1H);3.23(dd，1H);3.28(quintet，1H);3.43(dd，1H);3.80(quintet，1H);3.91(s，3H);3.92(s，3H);4.09(dd，1H);4.24(quintet，1H);4.27(dd，1H);4.51(t，1H);4.66(m，4H);4.77(dt，2H);5.20-5.45(m，6H);5.83-6.11(m overlapping br，3H);6.49(s，1H);8.45(br，1H);8.82(s，1H).
Ms(+ve FAB)700(MH)+實(shí)施例35用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.17(d，6H);1.83(mpart obscured，1H);2.62-2.79(overlapping m，2H);3.18(dd，1H);3.41(quintet，1H);3.66(quintet，1H);3.98(quintet，1H);4.07(dd，1H);4.17(dd，1H);7.79(m，2H);8.67(s，1H).
Ms(+ve FAB)523(MH)+，(Na salt);545(MH)+，(Na2salt)
所用原料如下制備4-氰基-3-硝基苯甲酸在180℃及氬氣氛下將4-氯-3-硝基苯甲酸(5.84g，29mM)，氰化銅(5.2g，58mM)、氯化銅(0.96g，9.7mM)和喹啉(6.9ml，58mM)加熱3.5小時(shí)。冷卻后，將該混合物溶于濃鹽酸(60ml)，用水(80ml)稀釋?zhuān)靡宜嵋阴?3×100ml)提取。合并的有機(jī)層用NaH2PO4水溶液、鹽水洗滌并用MgSO干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，用二氯甲烷/乙酸(98∶2)的混合物洗脫，得到4-氰基-3-硝基苯甲酸(2.65g，48%)。
Nmr(DMSO-d6)δ 8.31(d，1H);8.41(dd，1H);8.68(d，1H).
Ms(EI)192M+基本上如實(shí)施例1中所述使上述硝基酸烯丙基化，通過(guò)硅膠層析純化該粗產(chǎn)物，用己烷乙酸乙酯(6∶1)作為洗脫劑，得到4-氰基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.93(dt，2H);5.37-5.50(m，2H);5.97-6.13(m，1H);8.03(d，1H);8.46(dd，1H);8.94(d，1H).
Ms(CI)221(MH)+;250(M+NH4)+用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-4-氨基甲?；郊姿嵯┍?，用乙酸乙酯/汽油重結(jié)晶，m.p.149-150℃。
Nmr(DMSO-d6)δ 4.77(dt，2H);5.25-5.43(m，2H);5.96-6.11(m，1H);6.72(br，2H);7.04(dd，1H);7.25(br，1H);7.35(d，1H);7.63(d，1H);7.87(br，1H).
Ms(EI)220M+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3，mix of rotamers)δ 2.25(quintet，1H);2.28(s，3H);2.82(br，1H);3.52(dd，1H);4.13(t，1H);4.20(br m，1H);4.52(dd，1H);4.61(br，2H);4.85(d，2H);5.01-5.48(m overlapping br，4H);5.66-6.12(m overlapping br，2H);6.55(br，1H);6.89(br，1H);7.64(br m，1H);7.79(br m，1H);9.30(br m，1H);11.68(br，0.5H);12.06(br，0.5H).
Ms(+ve FAB)476(MH)+(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯將DMF(0.2ml，2.5mM)溶于乙腈(10ml)，冷至-5℃，并用草酰氯(0.2ml，2.3mM)處理。攪拌30分鐘后，加入(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯(1g，2.1mM)于乙腈(15ml)中的溶液，接著加入吡啶(0.38ml，4.6mM)。15分鐘后，該混合物用乙酸乙酯(200ml)稀釋?zhuān)名}酸(2M，20ml)、水、NaHCO水溶液和鹽水洗滌，并用Na2SO4干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)層析進(jìn)純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(5-烯丙氧羰基-2-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯(0.9g，93%)。
Nmr(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.63(br，2H);3.46(dd，1H);4.06(quintet，1H);4.16(dd，1H);4.64(t，1H);4.71(dt，2H);4.85(dt，2H);5.22-5.47(m，4H);5.87-6.14(m，2H);7.67(d，1H);7.87(dd，1H);8.96(d，1H);9.42(br，1H).
Ms(+ve FAB)458(MH)+;480(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸乙酯脫乙酰基化并與碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.60(br，2H);3.25(dd overlapping quintet，2H);3.52(br，1H);3.88(quintet，1H);4.02(dd，1H);4.25(quintet，1H);4.28(dd，1H);4.55-4.74(m，5H);4.85(dt，2H);5.18-5.468(m，6H);5.83-6.11(m，3H);7.65(dt，1H);7.87(dd，1H);9.00(br s，1H);9.25(br，1H).
Ms(+ve FAB)665(MH)+;687(M+Na)+實(shí)施例36用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4)δ 1.20(d，6H);1.99(dt，1H);2.91(dt，1H);3.26(dd overlapping m，3H);3.42(quintet，1H);3.74(dd，1H);3.96(quintet，1H);4.04(quintet，1H);4.22(dd，1H);4.41(t，1H);7.43(dm，1H);7.81(dd，1H);8.00(t，1H).
Ms(+ve FAB)516(MH)+，(Na salt);538(MH)+，(Na2salt)所用的原料如下制備3-氟-5-硝基苯甲酸將在氬氣氛下的四氟硼酸硝基鈉(3.53g，30.2mM)于乙腈(50ml)中的劇烈攪拌的淤漿在冰浴中冷卻，分三批加入3-氨基-5-硝基苯甲酸(5.0g，27.5mM)。然后使溫度升至室溫，并將該混合物攪拌48小時(shí)。加入1，2-二氯苯(50ml)，減壓蒸除該混合物中的乙腈。然后當(dāng)放氣結(jié)束時(shí)將該混合物加熱至170℃保持30分鐘。冷卻后，將該混合物倒入二氯甲烷(200ml)中，用NaHCO3溶液提取。水相用二氯甲烷反洗后，將其酸化(2M鹽酸)，有機(jī)相用乙酸乙酯(2×100ml)提取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌并用MgSO4干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷/乙酸(99∶1)至二氯甲烷/異丙醇/乙酸(80∶20∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到3-氟-5-硝基苯甲酸(3.26g，64%)。
(DMSO-d6)δ 8.14(dm，1H);8.37(dt，1H);8.46(m，1H).
Ms(EI)185M+3-氟-5-硝基苯甲酸烯丙基酯將3-氟-5-硝基苯甲酸(3g，16.2mM)、對(duì)甲苯磺酸(1.54g，8.1mM)和稀丙醇(50ml)加熱回流，使餾出物通過(guò)3
分子篩16小時(shí)。冷卻后，該混合物用三乙胺中和并脫除溶劑。將殘留物溶于乙酸乙酯，用2M鹽酸、NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯/二氯甲烷(3∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到3-氟-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 4.89(dt，2H);5.33-5.49(m，2H);5.95-6.15(m，1H);8.11(m，2H);8.70(t，1H).
Ms(CI)226(MH)+;253(M+C2H5)+用實(shí)施例1的方法還原上述硝基化合物，得到3-氨基-5-氟苯甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 3.89(br，2H);4.79(dt，2H);5.25-5.45(m，2H);5.92-6.12(m，1H);6.54(dt，1H);7.07-7.15(m，2H).
Ms(CI)196(MH)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(85∶13)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3)δ 2.33(s，3H);2.59(br，2H);3.48(dd，1H);4.03(quintet，1H);4.13(dd，1H);4.56(t，1H);4.68(dt，2H);4.82(dt，2H);5.25-5.46(m，4H);5.86-6.11(m，2H);6.47(dm，1H);7.72(t，1H);7.87(dt m，1H);9.38(br，1H).
Ms(+ve FAB)451(MH)+;473(M+Na)+按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-5-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.63(br，2H);3.26(dd，1H);3.29(quintet，1H);3.48(br，1H);3.81(quintet，1H);3.97(dd，1H);4.27(dd overlapping m，2H);4.54(t，1H);4.62-4.76(m，4H);4.81(dt，2H);5.20-5.46(m，6H);5.85-6.10(m overlapping br，3H);7.48(dt，1H);7.83(br s，1H);7.88(dt，1H);9.18(br，1H).
Ms(+ve FAB)658(MH)+;680(M+Na)+實(shí)施例37用實(shí)施例2的方法制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-N′-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，二鈉鹽，所不同的是用DMSO代替DMF，所得產(chǎn)物通過(guò)在CHP20P柱上層析進(jìn)行純化，用水進(jìn)行洗脫。
Nmr(DMSO-d6+acetic acid-d4，run at 50°)δ 1.12(d，3H);1.18(d，3H);1.67(br，1H);2.13(br，1H);3.02(dd，1H);3.17(dd，1H);3.28(s overlapping m，5H);3.65(br，1H);3.98(quintet overlapping m，2H);4.12(dd，1H);7.58(d，1H);7.91(d，1H);7.98(m，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na salt);534(MH)+，(Na2salt)所用原料如下制備3-甲氨基苯甲酸烯丙基酯將3-氨基苯甲酸烯丙基酯(5g，28.2mM)溶于原甲酸三乙酯(50ml)并加入三氟乙酸(5滴)。將該溶液攪拌并用3 分子篩回流5小時(shí)。脫除溶劑，將殘留物溶于乙醇(50ml)，接著分幾批加入乙酸(8.08ml)和氰基硼氫化鈉(6.85g，0.108mM)。該混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，脫除溶劑。將殘留物溶于乙醚，用水、鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙酸乙酯(95∶5)進(jìn)行梯度洗脫，得到3-甲氨基苯甲酸烯丙基酯(0.93g，17%)。
Nmr(CDCl3)δ 2.88(s，3H);4.81(dt，2H);5.23-5.45(m，2H);5.94-6.13(m，1H);6.83(dd，1H);7.25(dd，1H);7.33(t，1H);7.43(dm，1H).
Ms(CI)192(MH)+按實(shí)施例1的方法使上述胺與脯氨酸縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至二氯甲烷/乙醚(4∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-N′-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基乙酸酯。
Nmr(CDCl3，mixture of rotamers)δ 1.93(m，1H);2.32(s，3H);2.48(m，part obscured，1H);3.28，3.31(2 x s，3H);3.40(quintet，1H);3.76(m，1H);4.01(m，1H);4.24(m，1H);4.50-4.74(m，2H);4.86(d，2H);5.18-5.48(m，4H);5.84-6.13(m，2H);7.38-7.68(m，2H);7.90-8.11(m，2H).
Ms(+ve FAB)447(MH)+;469(M+Na)+
按實(shí)施例1的方法使上述硫基乙酸酯脫乙?；⑴c碳代青霉烯磷酸酯縮合，通過(guò)層析進(jìn)行純化，由二氯甲烷至乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧羰基-2-(3-烯丙氧羰基-N′-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸烯丙基酯。
Nmr(CDCl3，mixture of rotamers)δ 1.20(2 x d，3H);1.34(2 x d，3H);1.87(br，1H);2.30(br，1H);3.29，3.31(2 x s，overlapping m，6H);4.05-4.30(m，4H);4.50-4.81(m，5H);4.96(d，2H);5.20-5.48(m，6H);5.85-6.13(m，3H);7.39-7.68(m，2H);7.91-8.11(m，2H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)的化合物或其可藥用的鹽或可體內(nèi)水解的酯，
其中R1是1-羥基乙基、1-氟乙基或羥甲基；R2是氫或C1-4烷基；R3是氫或C1-4烷基；R4和R5是相同或不同的，并且選自氫、囟素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、氨基磺?；1-4烷基氨基磺?；?、二C1-4烷基氨基磺酰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲酰基、二C1-4烷基氨基甲?；?、三氟甲基、磺酸、氨基、C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基、C1-4鏈烷酰氨基、C1-4鏈烷?；?N-C1-4烷基)氨基、C1-4烷磺酰氨基和C1-4烷基S(O)n-，其中n是0、1或2；條件是在與-NR3-連接的鏈的鄰位上沒(méi)有羥基或羧基取代基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是1-羥基乙基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2是氫或甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2是甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的化合物，其中R3是氫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)的化合物，它具有式(Ⅳ)
其中R3、R4和R5如前述所定義。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中R4和R5是相同或不同的并選自氫、氟、氯、羥基、羧基、氰基、硝基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲氧羰基、氨基甲?；?、甲基氨基甲?；⒍谆被柞；?、三氟甲基、磺酸、甲基亞磺?；?、甲基磺?；⒓谆酋０被蛞阴０被?。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的化合物，其中R4和R5的至少一個(gè)是氫。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中R4是氫、羧基、氟、氯、甲基、甲氧基、氰基、磺酸或甲氧羰基，而R5是氫。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氯苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氯苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲磺酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2，4-二氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-氨基甲?；?3-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-乙酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺酰氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-二甲氨基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4，6-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4，6-二氟苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲基亞磺酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲磺酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-N′-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，或其可藥用的鹽。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-甲氧羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氯苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-6-氟苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-甲酸，或其可藥用的鹽。
12.一種藥物組合物，它包含根據(jù)權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)的化合物以及可藥用的載體。
13.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，它包括將式(Ⅴ)化合物脫保護(hù)
其中R2、R4和R5如前所定義(如果合適的話，R4和R5可被任意保護(hù));-COOR6和-COOR7是羧基或被護(hù)羧基;R8是基團(tuán)R3(如權(quán)利要求1中所定義)或氨基保護(hù)基;R9是氫或氨基保護(hù)基;而R10是基團(tuán)R1(如權(quán)利要求1中所定義)，被護(hù)的1-羥基乙基或被護(hù)的羥甲基，其中存在至少一個(gè)保護(hù)基;并且以下如果需要;(ⅰ)形成可藥用的鹽，(ⅱ)酯化形成可體內(nèi)水解的酯。
14.一種權(quán)利要求13中所定義的式(Ⅴ)化合物。
15.一種制備權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求13中所定義的式(Ⅴ)化合物的方法，它包括a)使式(Ⅵ)化合物與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)
其中R2、R4-R10如權(quán)利要求13中所定義，且L是離去基團(tuán)，或b)使式(Ⅷ)化合物環(huán)化
其中R2、R4-R10如前所定義，而R11-R13獨(dú)立地選自C1-6烷氧基、芳氧基、二C1-6烷基氨基和二芳基氨基或R11-R13的任意兩個(gè)代表鄰亞苯二氧基;或R11-R13之一是C1-4烷基、烯丙基、芐基或苯基，而其它兩個(gè)獨(dú)立地選自C1-4烷基、三氟甲基或苯基，其中任何苯基可被C1-3烷基或C1-3烷氧基任意取代;并且任何官能團(tuán)可被任意保護(hù)，以及以下如有必要(ⅰ)脫除任何保護(hù)基;(ⅱ)形成可藥用的鹽;(ⅲ)酯化形成可體內(nèi)水解的鹽。
16.一種權(quán)利要求1中所定義的式(Ⅰ)化合物，為非藥用鹽形式。
17.一種權(quán)利要求15中所定義的式(Ⅶ)或(Ⅷ)化合物。
18.一種式(Ⅸ)、(Ⅻ)或(ⅩⅣ)的化合物
其中R2和R4-R10如權(quán)利要求13中所定義，R為保護(hù)基。
全文摘要
本發(fā)明涉及碳代青霉烯并提供了一種式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽或可體內(nèi)水解的酯，其中R
文檔編號(hào)C07D487/04GK1079224SQ9310147
公開(kāi)日1993年12月8日 申請(qǐng)日期1993年2月4日 優(yōu)先權(quán)日1992年2月4日
發(fā)明者M·J·貝斯, G·M·戴維斯, M·L·施溫 申請(qǐng)人:曾尼卡有限公司, 曾尼卡制藥有限公司