一種轉(zhuǎn)化生長因子e1激動劑多肽及其制備方法、應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及預(yù)防或治療腦梗塞的多肽化合物。轉(zhuǎn)化生長因子-ei激動劑多肽1，其特征在于：其序列為HANFCLGPCPYIWSLDTQYS。采用Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備，Rink酰氨MBHA樹脂作為載體，N,N-二異丙基碳二亞胺為縮合劑，三氟乙酸為切割試劑?？晒矁r連接一個佐劑，佐劑是牛血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。轉(zhuǎn)化生長因子-e1激動劑多肽1在預(yù)防或治療腦梗塞中的應(yīng)用。可通過多種給藥方式預(yù)防或治療腦梗塞，包括皮下或肌肉注射，靜脈注射或者靜脈滴注，口服給藥如藥丸、膠囊等，鼻噴劑等。本發(fā)明中的轉(zhuǎn)化生長因子-e1激動劑多肽1可以靶向促進轉(zhuǎn)化生長因子-e1表達，提高血漿中轉(zhuǎn)化生長因子-e1的含量，達到預(yù)防或治療腦梗塞的作用。
【專利說明】一種轉(zhuǎn)化生長因子β1激動劑多肽及其制備方法、應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及用于預(yù)防或治療腦梗塞的多肽化合物。

【背景技術(shù)】：
[0002] 腦梗塞是指突然發(fā)生的腦局部血液循環(huán)障礙導(dǎo)致腦組織缺血缺氧引起的局灶性 神經(jīng)功能缺損綜合征。世界范圍內(nèi)三大死亡疾病之一，也是成年人首位致殘原因。由于目 前腦梗塞的病因及發(fā)病機制尚未完全闡明，且臨床上理想的治療手段有限，使得其不僅發(fā) 病率很高，致死率、致殘率及復(fù)發(fā)率也較高，給個人和社會造成了巨大的負擔(dān)。
[0003] 目前預(yù)防或治療腦梗塞的藥物，主要為針對控制易患因素。如患者凝血高，給予抗 血栓的治療；如患有糖尿病、應(yīng)及時控制血糖，包括飲食控制；如有高血壓則應(yīng)給降壓藥， 使血壓降至適當(dāng)水平，如有血膽固醇增高，則應(yīng)控制高膽固醇適當(dāng)給予降脂藥物。
[0004] 轉(zhuǎn)化生長因子-β I (transforming growth factor-pi, TGF-β 1)是具有潛在抗炎 特性的多功能細胞因子，目前發(fā)現(xiàn)其可通過多種途徑參與腦缺血后損傷與修復(fù)的病理生理 過程。有研究稱其可通過增加 TGF-β 1蛋白的表達，提高血漿中TGF-β 1的含量，進而在疾 病的發(fā)生發(fā)展中起到預(yù)防或治療腦梗塞的作用。然而，現(xiàn)階段，沒有成熟開發(fā)的轉(zhuǎn)化生長因 子-β 1激動劑問世，用于預(yù)防或治療腦梗塞。


【發(fā)明內(nèi)容】
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[0005] 本發(fā)明目的是針對現(xiàn)有預(yù)防或治療腦梗塞藥物的特點，設(shè)計一種多肽化合物，能 有效治療或預(yù)防腦梗塞。
[0006] 技術(shù)方案
[0007] 轉(zhuǎn)化生長因子-β 1激動劑多肽1，其特征在于：其序列為HANFCLGPCPHWSLDTQYS。 采用Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備，Rink酰氨MBHA樹脂作為載體，N，N-二異丙基碳二亞 胺為縮合劑，三氟乙酸為切割試劑。可共價連接一個佐劑，佐劑是牛血清白蛋白，人血清白 蛋白，或聚乙二醇。轉(zhuǎn)化生長因子-β?激動劑多肽1在預(yù)防或治療腦梗塞中的應(yīng)用?？赏?過多種給藥方式預(yù)防或治療腦梗塞，包括皮下或肌肉注射，靜脈注射或者靜脈滴注，口服給 藥如藥丸、膠囊等，鼻噴劑等。
[0008] 有益結(jié)果：
[0009] 本發(fā)明中的轉(zhuǎn)化生長因子-β 1激動劑多肽1可以靶向促進轉(zhuǎn)化生長因子-β 1表 達，提高血漿中轉(zhuǎn)化生長因子-β 1的含量，達到預(yù)防或治療腦梗塞的作用。

【具體實施方式】
[0010] 實施例1
[0011] 多肽的化學(xué)合成方法
[0012] 多肽1用Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備。合成反應(yīng)按照抑制劑1序列從C端向 N端進行，Rink酰氨MBHA樹脂作為載體（可在Advanced Chem Tech公司購得）上有自由 氨基。每一步連接過程中，氨基酸殘基都要活化，活化混合物中有4倍于載體上自由氨基的 HBTU，HOBt，DIEA和Fmoc-氨基酸。用N，N-二異丙基碳二亞胺為縮合劑，進行連接反應(yīng)，每 次氨基酸的連接反應(yīng)之后，用吡啶/醋酸/N-甲基咪唑（4:2:0. 5)的混合物來封閉未連接 的自由氨基，封閉反應(yīng)10分鐘。下一個氨基酸連接之前，都要把載體上的Fmoc-基團去掉， 去Fmoc-基團使用含20%哌啶的二甲基甲酰胺，需15分鐘。最后，當(dāng)所有氨基酸殘基順序 連接之后，抑制劑1用97%三氟乙酸從載體上切割下來，切割在室溫下進行2小時。
[0013] 應(yīng)用上述化學(xué)條件可合成并獲得多肽1，序列為HANFCLGPCPHWSLDTQYS，該序列 為全新序列。也可委托上海生工合成。
[0014] 實施例2
[0015] 轉(zhuǎn)化生長因子1激動劑多肽1預(yù)防大鼠腦梗塞模型的作用
[0016] 雄性8周齡的SD大鼠40只，隨機分為4組，分別為：A組為空白對照組：生理鹽水； B組為模型對照組：造模+生理鹽水；C組為藥物干預(yù)組：造模+轉(zhuǎn)化生長因子-β 1激動劑 多肽I (10mg/kg/d) ;D為陽性藥干預(yù)組：造模+尿激酶（10mg/kg)。連續(xù)10天。建立MCAO 的模型。（1)觀察大鼠局部腦缺血再灌注后梗死體積的大小；（2)采用神經(jīng)行為學(xué)評分，觀 察MCAO動物的康復(fù)情況；(3)檢測血漿中轉(zhuǎn)化生長因子-β 1的含量。
[0017] 結(jié)果：預(yù)防性給予多肽1組的腦梗塞模型大鼠與模型組相比，腦梗塞面積減少 (Ρ〈0. 01)，神經(jīng)行為學(xué)評分降低（Ρ〈0. 05)，血漿中TGF-β 1的含量升高（Ρ〈0. 05)，與模型對 照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（見表1)。
[0018] 表1轉(zhuǎn)化生長因子_β 1激動劑多肽1對預(yù)防大鼠腦梗塞模型的作用
[0019]

【權(quán)利要求】
1. 一種轉(zhuǎn)化生長因子β 1激動劑多肽，其特征在于：其氨基酸序列為 HANFCLGPCPYIWSLDTQYS 〇
2. -種權(quán)利要求1所述多肽的制備方法，其特征在于：采用Fmoc保護的固相合成技 術(shù)制備，Rink酰氨MBHA樹脂作為載體，N，N-二異丙基碳二亞胺為縮合劑，三氟乙酸為 切割試劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的多肽的制備方法，其特征在于：共價連接一個佐劑，佐劑是牛 血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。
4. 根據(jù)權(quán)利要求的多肽在制備預(yù)防或治療腦梗塞藥物中的應(yīng)用。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的多肽的用途，其特征在于：通過多種給藥方式預(yù)防或治療腦 梗塞，包括皮下或肌肉注射，靜脈注射或者靜脈滴注，口服給藥如藥丸、膠囊等，鼻噴劑。
【文檔編號】C07K7/08GK104211778SQ201410509347
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年9月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月28日
【發(fā)明者】羅瑞雪 申請人:蘇州普羅達生物科技有限公司