專利名稱：一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領域，尤其是涉及一種采用高效液相制備色譜法從固公果中同時制備薔薇酸和委陵菜酸的方法。
背景技術：
固公果Tfo1Sa odorata Sweet var. gigantea Rehd. et ffils.屬薔薇屬植物，其根性平、味酸，具有澀腸止瀉的功效，常用于治療腹瀉、菌痢等疾病，是一味應用歷史悠久的彝族民間藥材?，F(xiàn)代研究表明固公果根中含有多種三萜類成份，該三萜類成分具有較好的鎮(zhèn)痛抗炎作用，薔薇酸與委菱菜酸是其中量較高的三萜成分。此外，劉梁等研究表明以委陵菜酸為主要成分的三葉委陵菜三萜類化合物具有明顯抗病毒作用。鑒于這兩種三萜類物質(zhì)的特殊藥理作用，其開發(fā)前景是無限大的。薔薇酸(Rosolicacid)，分子式=C19H14O3 ；分子量:290. 31。委陵菜酸(Tormentic acid)，分子量488. 71，理化性質(zhì)無色結(jié)晶型粉末， mp.260 ^2°C (甲醇-/JO ；mp273°C，[ α ]D_20° (批唆)。IR y maxcm\-l 3400 (-0H), 1700 (C=O)，835 (C=C)。MSm/z :488 (Μ+)，264。IHNMR0 13CNMR。白色棒晶(丙酮)，mp276 279°C。藥化作用降血糖作用和抗菌作用。現(xiàn)有文獻中對委陵菜酸及薔薇酸的相關研究報道相對較少，未見有兩種物質(zhì)同時制備的方法，也未見有相關專利報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，該方法操作簡單，制得產(chǎn)品含量高。本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的
一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于包含以下步驟
1)提取取固公果藥材粉碎，加4(Γ70%乙醇提取2 3次，藥材與溶劑比例為1:(5 10)， 合并提取液，濃縮成浸膏；
2)大孔樹脂除雜將上述提取物過大孔樹脂處理，先用水及水溶性有機溶劑低濃度水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用水溶性有機溶劑較高濃度的水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥铮?br> 3)制備高效液相進一步分離純化將上述總?cè)铺崛∥镉眉状既芙?，濾膜過濾，用高效液相制備色譜對其進行分離純化，分別收集目標洗脫液，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶；
4)重結(jié)晶將上述結(jié)晶用甲醇熱回流結(jié)晶2 3次得薔薇酸和委陵菜酸產(chǎn)品。所述步驟1)中的提取方法可選用加熱回流法或超聲提取法，提取溫度控制在 60 100°C。所述步驟2)中的水溶性有機溶劑可以是甲醇、乙醇、丙醇等中的一種。所述步驟3)中的濾膜孔徑為0. 2^0. 45 μ m。
3
所述步驟3)中的高效液相制備色譜是以反相鍵合硅膠為固定相，以乙腈-0. 3%三氟乙酸(3(T38 62^70 )為流動相，紫外檢測器監(jiān)測收集目標流分。所述的反相鍵合硅膠是C-8或C-18鍵合硅膠。所述的紫外檢測器的波長設定為210nm。本發(fā)明的積極效果是
1)采用大孔樹脂脫除多糖類雜質(zhì)，操作簡單，大孔樹脂處理量大，可重復使用；
2)制備高效液相進一步分離純化所用的反相高效液相制備色譜，具有分離度高、重現(xiàn)性好、分離時間短、制備量大等優(yōu)點，分離的到產(chǎn)品純度可達98%以上；
3)本發(fā)明使用的溶劑系統(tǒng)較為簡單，還具有低成本，回收率高的優(yōu)點。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
取固公果藥材1kg，粉碎，加10L40%乙醇液熱回流提取2次，合并提取液，濃縮至低醇， 上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV30%乙醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV65%乙醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，將所得總?cè)朴蒙倭考状既芙猓鲃酉嘞♂?，?jīng)0. 45 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(30:70)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶， 濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶3次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸1. 2g (含量 98. 2%)和委陵菜酸0. 7g (含量98. 7%)。實施例2:
取固公果藥材lKg，粉碎，加5L70%乙醇超聲提取3次，合并提取液，濃縮至低醇，上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV30%甲醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV70%甲醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥铮瑢⑺每側(cè)朴蒙倭考状既芙?，流動相稀釋，?jīng)0. 22 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(32:68)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶2次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸1. Ig (含量98. 3%)和委陵菜酸0.8g (含量98.5%)。實施例3:
取固公果藥材^(g，粉碎，加40L50%乙醇超聲提取2次，合并提取液，濃縮至低醇，上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV25%丙醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV70%丙醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，將所得總?cè)朴蒙倭考状既芙?，流動相稀釋，?jīng)0. 22 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(35:65)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶3次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸5. 4g (含量98. 5%)和
4委陵菜酸3. Ig (含量99. 1%)。實施例4:
取固公果藥材^(g，粉碎，加35L55%乙醇加熱回流提取3次，合并提取液，濃縮至低醇， 上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV30%乙醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV75%乙醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，將所得總?cè)朴蒙倭考状既芙猓鲃酉嘞♂?，?jīng)0. 22 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(33:67)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶， 濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶3次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸4. Ig (含量 99. 2%)和委陵菜酸2. 8g (含量99. 3%)。實施例5
取固公果藥材10Kg，粉碎，加60L65%乙醇超聲提取2次，合并提取液，濃縮至低醇，上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV35%乙醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV75%乙醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，將所得總?cè)朴蒙倭考状既芙猓鲃酉嘞♂?，?jīng)0. 45 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(38:62)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶2次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸9. Sg (含量98. 5%) 和委陵菜酸5. 9g (含量98.6%)。實施例6:
取固公果藥材10Kg，粉碎，加70L40%甲醇加熱回流提取2次，合并提取液，濃縮至低醇， 上大孔樹脂吸附，先用2BV水及;3BV30%乙醇水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用5BV70%乙醇水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，將所得總?cè)朴蒙倭考状既芙?，流動相稀釋，?jīng)0. 45 μ m濾膜濾過，再采用反相制備高效液相進一步分離純化，以C-18鍵合硅膠為固定相，乙腈-0. 3%三氟乙酸(30:70)溶液為流動相，流速設定為30ml/min，設定紫外檢測器波長210nm，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用甲醇加熱回流溶解，放冷析晶3次，濾出晶體，得高純度的薔薇酸10. 2g (含量 98. 1%)和委陵菜酸7. Ig (含量98. 1%)。
權利要求
1.一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于包含以下步驟1)提取取固公果藥材粉碎，加4(Γ70%乙醇提取2 3次，藥材與溶劑比例為1:(5 10)， 合并提取液；2)大孔樹脂除雜將上述提取物過大孔樹脂處理，先用水及水溶性有機溶劑低濃度水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用水溶性有機溶劑較高濃度的水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥铮?)制備高效液相進一步分離純化將上述總?cè)铺崛∥?，用甲醇溶解，濾膜過濾，用高效液相制備色譜對其進行分離純化，分別收集目標洗脫液，回收試劑至小體積，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶將上述結(jié)晶用甲醇熱回流結(jié)晶2 3次得薔薇酸和委陵菜酸產(chǎn)品。
2.如權利要求1所述的一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于所述步驟1)中的提取方法可選用加熱回流法或超聲提取法，提取溫度控制在6(T10(TC。
3.如權利要求1所述的一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于所述步驟2)中的水溶性有機溶劑可以是甲醇、乙醇、丙醇等中的一種。
4.如權利要求1所述的一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于所述步驟3)中的濾膜孔徑為0.2 0. 45 μ m。
5.如權利要求1所述的一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法，其特征在于所述步驟3)中的高效液相制備色譜是以反相鍵合硅膠為固定相，以乙腈-0. 3%三氟乙酸 (30^38 62 70 )為流動相，紫外檢測器監(jiān)測收集目標流分。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領域，提供了一種薔薇酸和委陵菜酸的聯(lián)合制備方法。制備方法包括乙醇液提取，大孔樹脂處理，用水及水溶性有機溶劑低濃度水溶液洗脫糖和其他雜質(zhì)，再用水溶性有機溶劑較高濃度的水溶液進行洗脫，洗脫液減壓濃縮至干得總?cè)铺崛∥?，再?jīng)高效液相制備色譜純化，分段收集薔薇酸流分和委陵菜酸流分，最后用甲醇熱回流結(jié)晶得高純度的薔薇酸和委陵菜酸。本發(fā)明制得產(chǎn)品純度高，質(zhì)量好。
文檔編號C07J63/00GK102391347SQ20111022594
公開日2012年3月28日 申請日期2011年8月9日 優(yōu)先權日2011年8月9日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司