專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，特別是涉及一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù)：
紫花地丁為堇菜科植物植物，清熱解毒，涼血消腫的功效，中醫(yī)常用其治療疔瘡， 癰腫，瘰疬，黃疸，痢疾，腹瀉，目赤，喉痹，毒蛇咬傷。紫花地丁全草含甙類(lèi)、黃酮類(lèi)、酯類(lèi)等成分。其中黃酮類(lèi)和七葉內(nèi)酯是主要功能性成分。
紫花地丁總黃酮具有抗菌、抗炎和抗氧化作用。李定剛等利用超聲提取，硅膠柱層析分離純化，得到純度達(dá)到97. 5%黃酮類(lèi)化合物。該類(lèi)化合物對(duì)沙門(mén)氏菌和乳房炎病原菌包括金黃色葡萄球菌、鏈球菌、鏈球菌、鏈球菌及大腸桿菌都有良好的抑制作用。文赤夫等對(duì)紫花地丁中芹菜素進(jìn)行清除自由基活性研究。試驗(yàn)結(jié)果相同濃度的VC、VE與紫花地丁芹菜素比較，紫花地丁芹菜素對(duì)超氧陰離子自由基的清除效果比VC、VE都強(qiáng)。
七葉內(nèi)酯是香豆素類(lèi)化合物，具有抗菌、抗炎及鎮(zhèn)咳祛痰作用，對(duì)細(xì)菌性痢疾、急性腸炎有較好治療效果，兼有退熱作用，毒副作用小，幾無(wú)苦味。
現(xiàn)有從紫花地丁提取黃酮方法，多是醇溶液提取，輔助超聲微波，在進(jìn)行純化處理。從紫花地丁中提取七葉內(nèi)酯的方法也多是科學(xué)研究。如“紫花地丁中水溶性化學(xué)成分的研究”和“紫花地丁化學(xué)成分的研究”，兩篇文獻(xiàn)都是采用用醇浸泡提取，減壓蒸餾，用熱水溶解后，其懸浮液用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得乙酸乙酯部分，硅膠柱層析純化，此類(lèi)方法不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
同時(shí)從紫花地丁中提取兩種產(chǎn)物的工業(yè)化方法較少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，該方法易于工業(yè)化。
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的是這樣來(lái)實(shí)現(xiàn)的
一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，其特征在于包括以下步驟
1)取紫花地丁原料，粉碎加7-15倍量50-80%醇溶液回流提取2_3次，濾過(guò)，減壓濃縮，得濃縮液；
2)上述濃縮液加熱水稀釋后加入大孔樹(shù)脂吸附，醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓濃縮，鹽酸溶液調(diào)PH3-5放置沉淀；
3)上述沉淀物濾出，20-40%乙醇溶液回流溶解過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮產(chǎn)品， 濾液濃縮小體積放置結(jié)晶；
4)上述結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得七葉內(nèi)酯女口廣 PFt ο
所述步驟1)及步驟2)的醇為甲醇或乙醇。
所述步驟2)大孔樹(shù)脂型號(hào)可選HZ816、SPD300、ADS-17或LSA-40中的一種。
所述步驟2、中醇溶液梯度為3-5BV20-30%醇溶液一4_6BV50_70%醇溶液。
本發(fā)明的積極效果在于原料利用率高，一個(gè)工藝同時(shí)得到了兩種產(chǎn)品，成本低； 本方法是利用總黃酮和七葉內(nèi)酯的共性溶于較高醇溶液，進(jìn)行提取，又利用大孔樹(shù)脂純化后，溶解度差異，七葉內(nèi)酯溶于低濃度沸乙醇，分離兩種產(chǎn)品，比硅膠柱、萃取等工藝簡(jiǎn)單， 適合工業(yè)化生產(chǎn)。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
取紫花地丁原料粉碎，取1kg，加12kg50%乙醇回流提取2次，每次提取3小時(shí)，濾過(guò)得提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加熱水稀釋后加HZ816(樹(shù)脂500ml)大孔樹(shù)脂柱吸附， 吸附結(jié)束后，先用2. 5L20%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用2L70%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓回收乙醇，趁熱用5%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3，放置沉淀，沉淀物濾出用200ml40%乙醇溶液回流溶解，過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮22g，含量87. 6%。濾液減壓濃縮至80ml放置結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥，得七葉內(nèi)酯淡黃色結(jié)晶1.9g，含量85. 1%。
實(shí)施例2:
取紫花地丁原料粉碎，取1kg，加10kg80%乙醇回流提取2次，每次提取2小時(shí)， 濾過(guò)得提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加熱水稀釋后加SPD300(樹(shù)脂500ml)大孔樹(shù)脂柱吸附，吸附結(jié)束后，先用1.5L30%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用2. 5L60%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓回收乙醇，趁熱用10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH5，放置沉淀，沉淀物濾出用 300ml20%乙醇溶液回流溶解，過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮20g，含量90. 6%。濾液減壓濃縮至150ml放置結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥，得七葉內(nèi)酯淡黃色結(jié)晶2. lg，含量86.3%。
實(shí)施例3
取紫花地丁原料粉碎，取1kg，加甲醇回流提取3次，每次提取1小時(shí)， 濾過(guò)得提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加熱水稀釋后加ADS-17(樹(shù)脂500ml)大孔樹(shù)脂柱吸附，吸附結(jié)束后，先用1. 5L30%甲醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用2. 5L60%甲醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓回收甲醇，趁熱用10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH4，放置沉淀，沉淀物濾出用 200ml40%乙醇溶液回流溶解，過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮21g，含量89. 6%。濾液減壓濃縮至90ml放置結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥，得七葉內(nèi)酯淡黃色結(jié)晶2. 2g，含量87.8%。
實(shí)施例4
取紫花地丁原料粉碎，取1kg，加10kg70%甲醇回流提取3次，每次提取1小時(shí)， 濾過(guò)得提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加熱水稀釋后加LSA-40(樹(shù)脂500ml)大孔樹(shù)脂柱吸附，吸附結(jié)束后，先用1. 5L30%甲醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用2. 5L60%甲醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓回收甲醇，趁熱用10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3，放置沉淀，沉淀物濾出用200ml30%乙醇溶液回流溶解，過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮Mg，含量86. 8%。濾液減壓濃縮至IOOml放置結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥，得七葉內(nèi)酯淡黃色結(jié)晶2. 0g，含量90.9%。
實(shí)施例5
取紫花地丁原料粉碎，取10kg，加100kg70%乙醇回流提取2次，每次提取2小時(shí)， 濾過(guò)得提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加熱水稀釋后加SPD300 (樹(shù)脂5000ml)大孔樹(shù)脂柱吸附，吸附結(jié)束后，先用15L30%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用25L60%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓回收乙醇，趁熱用10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH4，放置沉淀，沉淀物濾出用3L30%乙醇溶液回流溶解，過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮224g，含量88. 1%。濾液減壓濃縮至1.2L放置結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥，得七葉內(nèi)酯淡黃色結(jié)晶22. 5g，含量84.7%。
權(quán)利要求
1.一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，其特征在于包括以下步驟1)取紫花地丁原料，粉碎加7-15倍量50-80%醇溶液回流提取2-3次，濾過(guò)，減壓濃縮，得濃縮液；2)上述濃縮液加熱水稀釋后加入大孔樹(shù)脂吸附，醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓濃縮，鹽酸溶液調(diào)PH3-5放置沉淀；3)上述沉淀物濾出，20-40%乙醇溶液回流溶解過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮產(chǎn)品，濾液濃縮小體積放置結(jié)晶；4)上述結(jié)晶物濾出，乙酸乙酯回流溶解過(guò)濾，放置重結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得七葉內(nèi)酯產(chǎn)
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，其特征在于所述步驟1)及步驟2)的醇為甲醇或乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，其特征在于所述步驟2)大孔樹(shù)脂型號(hào)可選HZ816、SPD300、ADS-17或LSA-40中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法，其特征在于所述步驟幻中醇溶液梯度為3-5BV20-30%醇溶液一4-6BV50-70%醇溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供一種從紫花地丁中提取總黃酮及七葉內(nèi)酯的方法。方法是取紫花地丁原料，粉碎加7-15倍量50-80％醇溶液回流提取2-3次，濾過(guò)，減壓濃縮，濃縮液加熱水稀釋后加入大孔樹(shù)脂柱吸附，醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓濃縮，鹽酸溶液調(diào)pH3-5放置沉淀，沉淀物濾出，20-40％乙醇溶液回流溶解過(guò)濾，固體物干燥得總黃酮產(chǎn)品，濾液濃縮小體積放置結(jié)晶，乙酸乙酯回流溶解重結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得七葉內(nèi)酯產(chǎn)品。該方法具有原料利用率高、工業(yè)化程度高的優(yōu)勢(shì)。
文檔編號(hào)C07D311/16GK102526357SQ20101060387
公開(kāi)日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月24日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請(qǐng)人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司