鉆葉石竹總黃酮提取及純化工藝的制作方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種化合物的提取工藝，具體為一種鉆葉石竹總黃酮的提取和純化工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]竹子是禾本科多年生常綠植物，是當今世界最具有使用價值的植物之一。全世界約有70多屬、1200多種，竹林面積約2000萬km2(3億畝)，我國位于世界竹子分布的中心地區(qū)，素有“竹子王國”之稱，擁有極為豐富的竹類資源，其中剛竹屬是我國栽培的主要經(jīng)濟竹種，經(jīng)濟價值高，用途廣，面積大，商品竹材生產(chǎn)量最多。竹葉資源的開發(fā)具有極為重要的經(jīng)濟和社會意義。竹子全身是寶，是當今世界最具有使用價值的植物之一。竹材是竹林的主聲品，竹材工業(yè)利用主要有:竹漿造紙、竹質(zhì)人造板、竹家具和日用品、竹工藝晶等。竹筍和竹筍制品、竹子食用菌(竹蓀)、竹木糖醇和竹汁飲料是目前我國著重開發(fā)的食品。而現(xiàn)在方興未艾的竹葉黃酮的研究與開發(fā)又為竹子的綜合開發(fā)利用錦上添花。竹葉黃酮產(chǎn)業(yè)正經(jīng)歷著由局部走向大部，竹葉黃酮的應用電從輔助型的食品添加劑向作為防治心腦血管疾病的新型藥物的方向轉(zhuǎn)變。與銀杏黃酮相比，竹葉黃酮的開發(fā)利用顯然更具優(yōu)勢。因為一方面竹葉較之于銀杏葉具有的資源優(yōu)勢更大，從而使竹葉比銀杏葉的收購成本也要低廉得多。從另一方面考慮，銀杏葉黃酮的開發(fā)利用與其創(chuàng)造的經(jīng)濟效益均已接近飽和，這也為竹葉黃酮的開發(fā)和應用提供了一個契機。目前竹葉黃酮提取物及其系列產(chǎn)品均已上市，并小批量出口至同、韓、美、加等國，市場反應良好。竹葉的醫(yī)療保健作用早已為我國人民所認識。竹葉在我國具有悠久的食用和藥用歷史，人們對竹葉風味的直覺就是那透人心脖的清香。竹葉中含有大量的黃酮、酚酸、蒽醌類化合物、生物活性多糖、香豆素類內(nèi)酯、特種氨基酸、芳香成分和錳、鋅、硒等微量元素。但是竹葉黃酮的研究還處于相當滯后的狀態(tài)，鉆葉石竹是我國一個獨特品種，而且對于鉆葉石竹黃酮前期的提取、精制工藝的研究更是少之又少，除前文已述及的中國專利信息網(wǎng)報道的《從竹葉中提取黃酮類化合物浸膏或粉劑的生產(chǎn)方法》之外，國內(nèi)外基本上為空白。但是該發(fā)明采用溶劑萃取方法，有機溶劑的耗費很大，生產(chǎn)工藝比較繁索，使工業(yè)化生產(chǎn)比較困難。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明為了解決鉆葉石竹總黃酮提取的問題，提供了一種一種鉆葉石竹總黃酮提取及純化工藝。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種鉆葉石竹總黃酮提取及純化工藝，包括如下步驟:
1.鉆葉石竹總黃酮的提取方法，其特征在于:采用乙醇浸提法進行提取，最佳工藝為:采用76% (v / V乙醇，料液比1:34(w / V)，浸提時間8小時，溫度80°C，浸提4次，pH值9.5為鉆葉石竹中黃酮的最佳浸提條件。在此條件下所得浸提液的吸光值可達0.296，即每克干竹葉的浸提液中含有黃酮15.14mg，則可得浸提率為59%。
[0005]2.鉆葉石竹總黃酮的最佳精制工藝方法，其特征在于:以大孔吸附樹脂ADS-17為鉆葉石竹黃酮的專用分離樹脂，采用吸附流速為4mL / min,洗脫流速為2.5mL / min,徑高比為1:8.5，吸附原液pH值為9.2，洗脫劑選擇45%乙醇溶液，洗脫劑用量為3BV(樹脂床體積)。在此條件下得到的洗脫液再采用真空冷凍干燥的方法，得到竹葉黃酮的黃褐色粉末。
【具體實施方式】
[0006]實施例1、竹葉總黃酮提取工藝:
1.乙醇濃度的確定
稱取19鉆葉石竹葉粉，在75。C，料液比1:20，浸提2h，pH不調(diào)，浸提一次的條件下，依次以10%——90% (V / V)的乙醇進行浸提，在510rim下測得的吸光度與乙醇濃度的關(guān)系O
[0007]2.料液比的選擇
稱取鉆葉石竹葉粉19，按料液比從1:15到1:40(w / v)選取浸提溶劑的體積，于75°C以65% 7，醇，浸提2h，pH不調(diào)，浸提I次，在510nm測得浸提后溶液總吸光度值(每毫升浸提溶液吸光度值X溶劑浸提后總體積)與溶劑起始體積之間的關(guān)系。
[0008]3.浸提時間的選擇
以76%乙醇，料液比1:34，在75°C，pH不調(diào)，浸提I次的條件下，每次稱取Ig竹葉粉，分別浸提I，1.5, 2, 3,4, 5,6, 7h,在510rim下測得吸光度與浸提時間的關(guān)系。
[0009]4溫度因素的選擇
每次稱取19竹葉粉，以75%乙醇，料液比1:34，分別在60，65，70，75，80°C，浸提611，在PH不調(diào)，浸提I次的條件下，測得浸提液在510rim的吸光度值與溫度的關(guān)系。.5.提取次數(shù)的選擇
稱取Ig竹葉粉，以65%乙醇，料液比1:30，于80。C，一共浸提12h，平均每次3h，不調(diào)pH,浸提I次后，過濾，將濾渣自然晾干后，浸提第2次，再過濾，仍將濾渣自然晾干，再浸提第3次，如此直至第4次。將第I次濾液測得吸光度值后，與第2次濾液合并，再測吸光度值，然后再與第3次濾液臺并，測吸光度值，最后與第4次濾液合并，測吸光度值，并以提取次數(shù)對每次所測吸光度值作圖。
[0010]6 pH值的選擇
以75%乙醇，料液比1:34，在80°C，浸提6h，浸提2次，每次3h，以5% NaOH調(diào)節(jié)溶劑PH值分別得9，10，11，12，未調(diào)的溶劑pH值為8.56，依次浸提后，于51hm測得吸光度與溶劑PH值之間的關(guān)系。
[0011]實施例2、鉆葉石竹葉總黃酮精制工藝:
I不同吸附流速下的泄漏，取一定體積的ADS —17濕樹脂裝柱，使徑高比均為1:5，通過調(diào)節(jié)恒流泵的流速，對上柱樣液進行吸附流速的選擇，應以泄漏點最遲出現(xiàn)的吸附流速為宜。因此在樣液濃度為13.79 “g / mL，樣液體積均為10mL的條件下，分別對ImL /min, 2mL / min,4mL / min三種吸附流速下的泄漏情況作比較。
[0012]2不同徑高比下的泄漏情況，在樹脂體積一定的情況下，通過選擇不同柱徑的填充柱，得不同的徑高比，來觀察對泄漏點的影響，也是影響吸附樹脂吸附量的一個主要因素之一。取濃度為13.79 P g / mL的樣液各10mL,在吸附流速均為4mL / min的條件下,分別試驗了徑高比為1:5，1:7，1:8.5三種條件下的泄漏情況。
[0013]3.不同吸附原液PH下的泄漏情況，吸附原液各150mL，在吸附流速為4mL / min,徑高比為1:10的條件下，分別對其泄漏情況作比較。
[0014]4.不同解吸條件下的洗脫情況，取適量ADS-17樹脂，以10mL吸附液進行吸附，控制吸附流速為4mL / min,待吸附達到泄漏點后，再分別取200roL10% ,20% ,30% ,40%,45%、60%的乙醇溶劑進行洗脫，解吸流速控制為1.5mL / min，分別將各次洗脫的濃組分合并，然后測定它們的吸光值。
[0015]5.不同用量解吸劑的洗脫效果，取50mLADS，17樹脂，以10mL吸附液進行吸附，控制吸附流速為4mL / min,待吸附達到泄漏點后，再分別取45%乙醇溶液50mL，10mL,150mL，200mL，250mL進行洗脫，解吸流速控制為1.5mL / min，分別將每次洗脫出的濃組分合并，然后測定它們的總吸光度。
[0016]6.不同解吸流速下的洗脫效果，將樹脂均以45%乙醇進行洗脫，洗脫速度分別對應于原吸附流速的一半，即2.5mL / min, ImL / min, 0.5mL / min,分別對解吸效果作比較。
【主權(quán)項】
1.一種鉆葉石竹葉總黃酮的提取方法，其特征在于:采用乙醇浸提法進行提取，最佳工藝為:采用76% (V / V乙醇，料液比1:34(w / V)，浸提時間8小時，溫度80°C，浸提4次，pH值9.5為竹葉中黃酮的最佳浸提條件；在此條件下所得浸提液的吸光值可達0.296，即每克干竹葉的浸提液中含有黃酮15.14mg，則可得浸提率為59%。
2.一種鉆葉石竹葉總黃酮的提取方法，其特征在于:以大孔吸附樹脂ADS-17為竹葉黃酮的專用分離樹脂，采用吸附流速為4mL / min,洗脫流速為2.5mL / min,徑高比為1:8.5，吸附原液pH值為9.2，洗脫劑選擇45%乙醇溶液，洗脫劑用量為3BV (樹脂床體積);在此條件下得到的洗脫液再采用真空冷凍干燥的方法，得到竹葉黃酮的黃褐色粉末。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種鉆葉石竹葉總黃酮的提取方法葉總黃酮的提取工藝及純化方法，通過采用大孔吸附樹脂，利用ADS系列大孔吸附樹脂，發(fā)明出了一種對竹葉黃酮具有良好純化精制功能的ADS-17樹脂，為竹葉黃酮的精制工藝打開了新的思路，同時也極大地減小了有機溶劑的耗費，縮短了生產(chǎn)周期，相應地減小了生產(chǎn)成本，提高了本工藝產(chǎn)品的市場競爭力。
【IPC分類】A61K36-899
【公開號】CN104689094
【申請?zhí)枴緾N201310644269
【發(fā)明人】賈俊平
【申請人】賈俊平
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2013年12月5日