專利名稱：一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離4-羥基異亮氨酸的制備方法，特別是涉及一種4-羥基異亮 氨酸單體的制備工藝。
背景技術(shù)：
葫蘆巴Trigonella Foenum-graecum L系豆科蝶形花亞植物，本屬植物共70余 種，主要分布在亞洲、非洲和地中海地區(qū)。我國有五種，主產(chǎn)河南、安徽、陜西、寧夏等地，該 植物在我國多為栽培。葫蘆巴別名蘆豆、香豆、苦豆等，其種子味苦，性溫，有溫腎陽、逐寒濕、止痛功能， 可驅(qū)蟲、治小兒食疾等，食品工藝則廣泛用于咖啡、香精、煙草、糖果等，具有特殊風(fēng)味。葫蘆 巴種子為中藥材，可作為醫(yī)藥工業(yè)的原料，近期研究發(fā)現(xiàn)，從葫蘆巴種子中提取的4-羥基 異亮氨酸，具有治療糖尿病的功效。經(jīng)研究測試表明葫蘆巴種子中含有葫蘆巴油、葫蘆巴膠、18種氨基酸、皂甙之 類、黃酮類、三萜類和生物堿類等物質(zhì)。氨基酸中以4-羥基異亮氨酸含量最高。從葫蘆巴乙 醇提取物引起大鼠胰島素濃縮增加的試驗中，提示其作用機理可能是對β細胞的刺激作 用會直接作用。有學(xué)者報道葫蘆巴提取物中存在能刺激胰島素分泌的物質(zhì)，即化合物4-羥 基異亮氨酸，主要作用于β細胞血漿膜的K+通道。目前，關(guān)于葫蘆巴中4-羥基異亮氨酸 的研究，主要集中在藥理作用的研究方面。關(guān)于4-羥基異亮氨酸的提取分離方法，資料報導(dǎo)都是用20%的乙醇冷浸法提取 的，也有報導(dǎo)采用陽離子樹脂純化分離的，但得到的產(chǎn)品4-羥基異亮氨酸含量較低(20 40%)。達不到單體的要求，而且工藝較復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決在4-羥基異亮氨酸的提取過程中一些不理想的問題，本發(fā)明提供了一 種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，它是對葫蘆巴籽提取物再次進行精制純化，目的是通 過簡單的工藝得到4-羥基異亮氨酸單體。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是4_羥基異亮氨酸單體的制備，其方 法的步驟為葫蘆巴籽提取物溶解，調(diào)節(jié)PH值，冷凍析晶，低溫過濾得到粗晶體，純水溶解， 調(diào)節(jié)PH值，活性炭脫色，抽濾，濾液濃縮至少量結(jié)晶析出，放入冰箱中析晶，抽濾得到4-羥 基異亮氨酸單體產(chǎn)品。具體生產(chǎn)工藝步驟如下(1)原料準備市場購買葫蘆巴籽提取物(4-羥基異亮氨酸含量約20% )；(2)溶解加入2 3倍(溶劑與原料體積質(zhì)量比)20 60%乙醇溶解；(3)調(diào)ρΗ值，冷凍析晶調(diào)ρΗ值4. 0 7. 0，室溫放置8 24小時后再放入冰柜 冷凍析晶1 5天，抽濾得到粗晶體； (4)再次溶解將得到的粗品加入5 10倍純水溶解；
(5)調(diào)ρΗ值調(diào)節(jié)ρΗ值到4. 0 7. 0 ；
(6)活性炭脫色加入1 10%活性炭，脫色溫度為50 90°C，脫色時間為20 60分鐘，趁熱抽濾，得到清液；(7)濃縮將清液真空濃縮，控制真空度在-0. SOMPa以上，溫度50°C 90°C，濃縮 至有少量結(jié)晶析出；(8)冷藏放置溫度0 10°C，放置1-5天，抽濾得到4-羥基異亮氨酸單體產(chǎn)品。本發(fā)明的有益效果是該種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝工藝操作簡便、重復(fù) 性好，產(chǎn)品純度高，達到單體級別。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例來進一步的說明。實施例1 稱取200g葫蘆巴籽提取物(4-羥基異亮氨酸含量約20% )，加入400mL 40%的乙醇，水浴50°C溶解，調(diào)節(jié)pH值到5. 0 6. 0，轉(zhuǎn)入到-25 30°C冰柜中，冷凍析晶 72小時，低溫過濾，得到沉淀物，沉淀物用低溫95 %乙醇淋洗兩次，避光通風(fēng)處晾干，得到 粗晶體。粗晶體加入IOOmL純水加熱50°C溶解，加入IOg活性炭粉，加熱到70°C，攪拌脫 色30分鐘，趁熱抽濾，得到清液，減壓濃縮至少量晶體析出，室溫放置5小時，轉(zhuǎn)入冰箱冷藏 (0 4°C )48小時，抽濾，晶體用少量無水乙醇洗滌晾干，得到高純度4-羥基異亮氨酸單體 (含量95 100% )，重量收率5 10%。實施例2 稱取200g葫蘆巴籽提取物(4-羥基異亮氨酸含量約30% )，加入350mL 50%的乙醇，水浴40°C溶解，調(diào)節(jié)pH值到5. 0 6. 0，轉(zhuǎn)入到-25 30°C冰柜中，冷凍析晶 72小時，低溫過濾，得到沉淀物，沉淀物用低溫95 %乙醇淋洗兩次，避光通風(fēng)處晾干，得到 粗晶體。粗晶體加入80mL純水加熱40°C溶解，加入6g活性炭粉，加熱到80°C，攪拌脫色20 分鐘，趁熱抽濾，得到清液，減壓濃縮至少量晶體析出，室溫放置4小時，轉(zhuǎn)入冰箱冷藏(0 40C )48小時，抽濾，晶體用少量無水乙醇洗滌晾干，得到高純度4-羥基異亮氨酸單體(含 量95 100% )，重量收率7 15%。
權(quán)利要求
一種4 羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是(1)原料準備市場購買葫蘆巴籽提取物(4 羥基異亮氨酸含量約20％)；(2)溶解加入2～3倍(溶劑與原料體積質(zhì)量比)20～60％乙醇溶解；(3)調(diào)pH值，冷凍析晶調(diào)pH值4.0～7.0，室溫放置8～24小時后再放入冰柜冷凍析晶1～5天，抽濾得到粗晶體；(4)再次溶解將得到的粗品加入5～10倍純水溶解；(5)調(diào)pH值調(diào)節(jié)pH值到4.0～7.0；(6)活性炭脫色加入1～10％活性炭，脫色溫度為50～90℃，脫色時間為20～60分鐘，趁熱抽濾，得到清液；(7)濃縮將清液真空濃縮，控制真空度在 0.80MPa以上，溫度50℃～90℃，濃縮至有少量結(jié)晶析出；(8)冷藏放置溫度0～10℃，放置1 5天，抽濾得到4 羥基異亮氨酸單體產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是所述的所 用原料為葫蘆巴籽提取物(4-羥基異亮氨酸含量約20% )
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是所述的在 溶解步驟中，采用20 60%乙醇作為溶解溶劑，溶解溫度控制在30 70°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是所述的在 冷凍析晶前需先將溶液調(diào)到弱酸性，pH值4. 0 7. 0，室溫放置8 24小時后再放入冰柜 冷凍析晶1 5天，抽濾得到粗晶體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是所述的 粗晶體溶解后需要活性炭脫色，加入1 10%活性炭，脫色溫度為50 90°C，脫色時間為 20 60分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝，其特征是將脫色過 濾后得到的溶液減壓濃縮至有少量結(jié)晶析出，然后需冷藏放置，溫度0 10°C，放置1-5天。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝。所述的制備工藝為市場上購買葫蘆巴籽提取物(4-羥基異亮氨酸含量約20％)，加入低濃度乙醇溶解，調(diào)節(jié)pH值，冷凍析晶，低溫過濾沉淀物，得到粗晶體，再用純水溶解，調(diào)節(jié)pH值，活性炭脫色。抽濾，濾液濃縮至少量結(jié)晶析出，放入冰箱中析晶，抽濾得到4-羥基異亮氨酸單體(含量95～100％)。該種4-羥基異亮氨酸單體的制備工藝工藝操作簡便、重復(fù)性好，產(chǎn)品純度高，達到單體級別。
文檔編號C07C229/22GK101982457SQ201010291028
公開日2011年3月2日 申請日期2010年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月21日
發(fā)明者張艷, 曹禮群, 李五洲, 李新晴, 蔣永紅 申請人:徐州技源天然保健品有限公司