專利名稱：針對fcrn的抗體及其用途的制作方法
針對FCRN的抗體及其用途相關(guān)申請本申請根據(jù)35U. S.C. § 119(e)要求2008年4月25日提交的第61/048，152號美 國臨時申請，和2008年4月觀日提交的第61/048，500號美國臨時申請的權(quán)益，其全部內(nèi) 容通過引用整體并入本文。
背景技術(shù)：
血清中最豐富的抗體同種型為IgG并且其在介導(dǎo)抗病原體的保護作用和在介 導(dǎo)促進免疫系統(tǒng)組分募集到組織、粘膜和皮膚表面的過敏和炎癥反應(yīng)中起到關(guān)鍵作用 (Junghans, Immunologic Research 16(1) :29(1997)) 此外，其也為多種自身免疫性疾 病的關(guān)鍵組分。在正常情況下，血清中IgG的半衰期在小鼠中在5-7天的范圍內(nèi)并且在人 中在22-23天的范圍內(nèi)，其相對其他血漿蛋白的血清半衰期為較長時間的周期。這個較長 的周期的發(fā)生一部分是由于新生兒的Fcfoi受體(Fcfoi)將胞飲的IgG從降解溶酶體中解 救出來并將其回收到細胞外區(qū)室(Junghans和Anderson，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93 5512(1996)，Roopenian 等 J. Immunology 170 :3528 (2003))。FcRn與IgG的Fc部分結(jié)合。IgG Fc區(qū)和Fcfoi之間的相互作用為pH依賴型。當 通過液相內(nèi)吞作用進入細胞的時候，IgG被隔絕到內(nèi)體(endosome)內(nèi)并以高親和性在酸 性pH(6 6. 5)下與Fcfoi結(jié)合；當該IgG-Fcfoi復(fù)合物循環(huán)到質(zhì)膜時，IgG在微堿性pH( 7. 4)下迅速從血流中的Fcfoi上解離下來。通過該受體介導(dǎo)的回收機制，F(xiàn)cfoi有效地將IgG 從在溶酶體中的降解中解救出來，從而延長循環(huán)IgG的半衰期。Fcfoi為通常位于內(nèi)皮細胞和表皮細胞的內(nèi)體的非共價異源二聚體。其為一種具有 三個重鏈α (α 1、α 2和α幻以及一個單獨的可溶輕鏈β 2_微球蛋白(β 2Μ)域的單通跨 膜的膜結(jié)合受體。結(jié)構(gòu)上，其屬于具有β 2Μ作為共同輕鏈的主要組織相容性復(fù)合物1類分 子家族。Fcfoia鏈為由包含α 、α 2和α 3重鏈域的胞外域，跨膜區(qū)，和相對短的胞質(zhì)尾 區(qū)組成的 46kD 蛋白(Burmeister 等 Nature 372 :366(1994))。Fcfoi最先在新生大鼠腸中發(fā)現(xiàn)，其中其作用于介導(dǎo)從母鼠的乳汁中吸收IgG抗體 并協(xié)助其轉(zhuǎn)運到循環(huán)系統(tǒng)中(Leach等J Immunol 157:3317(1996))。Fcfoi也已從人胎盤 中被分離出來，其中其也介導(dǎo)將母體IgG吸收和轉(zhuǎn)運到胎兒的循環(huán)中。在成年人中，F(xiàn)cRn 在許多組織中表達，包括肺、腸、腎，以及鼻腔、陰道和膽道系統(tǒng)(biliary tress)表面的上 皮組織中(第 6，030，613 和 6，086，875 號美國專利；Israel 等，Immunology 92 :69 (1997)； Kobayashi 等 AmJ Physiol(2002) ；Renal Physiol 282 :F358 (2002))。為了研究Fcfoi對IgG動態(tài)平衡的作用，工程化小鼠使得至少一部分編碼β 2Μ和 FcRn重鏈的基因被“敲除”以致這些蛋白無法表達(W0 02/43658 Junghans和Anderson， Proc Natl Acad Sci US 93:5512(1996))。在這些小鼠中，IgG的血清半衰期和濃度被顯 著降低，說明IgG的動態(tài)平衡的Fcfoi依賴型機制。也有人建議可在這些Fcfoi敲除小鼠中生成抗人Fcfoi抗體并且這些抗體可阻止 IgG與Fcfoi的結(jié)合。然而，還未生成或檢測所述抗體(W0 02/43658)。
對IgG與Fcfoi的結(jié)合抑制通過阻止IgG回收而負向改變IgG的血清半衰期。該 原理在自身免疫性皮膚水泡病(cutaneous bullous disease)小鼠模型中被表明具有治療 有效性(Li 等 J Clin Invest 115 =3440-3450 (2005)) 據(jù)此，阻止或拮抗 IgG 與 FcRn 的 結(jié)合的劑可被用于治療或預(yù)防以存在不恰當調(diào)節(jié)的IgG抗體為特征的自身免疫和炎癥疾 病或病癥的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明尤其涉及結(jié)合Fcfoi的抗體，以及識別和使用所述抗體的方法。在一方面本發(fā)明提供了一種分離的抗體，該分離的抗體包含重鏈(HC)免疫球蛋 白可變域序列和輕鏈(LC)免疫球蛋白可變域序列，其中該重鏈免疫球蛋白可變域序列和輕鏈免疫球蛋白可變域序列形成與人Fcfoi 結(jié)合的抗原結(jié)合位點；并且其中該抗體包括一個或多個以下特征(a)人⑶R或人框架區(qū)；(b)該LC免疫球蛋白可變域序列包含與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11或DX2500的LC可變域CDR至少85%相同的一個或多個CDR ；(c)該HC免疫球蛋白可變域序列包含與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11或DX2500的HC可變域CDR至少85%相同的一個或多個CDR ；(d)該 LC 免疫球蛋白可變域序列與 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04、M0090-F11 或 DX2500 的 LC 可變域至少 85%相同；(e)該 HC 免疫球蛋白可變域序列與 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11或DX2500的HC可變域至少85%相同；并且(f)該抗體結(jié)合與被 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、M0090-F11 或 DX2500結(jié)合的表位重疊的表位。在一方面本發(fā)明提供了一種分離的抗體，該分離的抗體與選自M0171-A03、 M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、M0090-F11 和 DX2500 組成的組的抗體至少 85%相同。在一方面本發(fā)明提供了一種分離的抗體，該分離的抗體選自M0171-A03、 M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、M0090-F11 和 DX2504 組成的組。在一方面本發(fā)明提供了一種包含M0161-B04的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā) 明提供了一種與M0161-B04至少85%相同的分離的抗體。M0161-B04的CDR如表17A所示。在一方面本發(fā)明提供了一種包含M0171-A03的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā) 明提供了一種與MO171-A03至少85 %相同的分離的抗體。MO171-A03的CDR如表17A所示。在一方面本發(fā)明提供了一種包含M0171-A01的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā) 明提供了一種與MO171-AO1至少85 %相同的分離的抗體。MO171_A01的CDR如表17A所示。在一方面本發(fā)明提供了一種包含M0159-A07的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā) 明提供了一種與M0159-A07至少85%相同的分離的抗體。M0159-A07的CDR如表17A所示。在一方面本發(fā)明提供了一種包含M0090-F11的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā) 明提供了 一種與M0090-F11至少85 %相同的分離的抗體。M0090-F11的CDR如表17A所示。在一方面本發(fā)明提供了一種包含DX-2500的⑶R的分離的抗體。在一方面本發(fā)明 提供了一種與DX-2500至少85%相同的分離的抗體。DX-2500的⑶R如表17A所示。
在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含M0161-B04的可變域 序列，并且LC可變域序列包含M0161-B04的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含M0171-A03的可變域 序列，并且LC可變域序列包含M0171-A03的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含M0171-A01的可變域 序列，并且LC可變域序列包含M0171-A01的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含M0159-A07的可變域 序列，并且LC可變域序列包含M0159-A07的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含M0090-F11的可變域 序列，并且LC可變域序列包含M0090-F11的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，HC可變域序列包含DX2500的可變域序 列，并且LC可變域序列包含DX2500的可變域序列。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，該抗體與被M0171-A03、M0171-A01、 M0159-A07, M0161-B04, M0090-F11 或 DX2500 結(jié)合的 FcRn 表位結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中，該抗體與M0171-A03、M0171A01、 M0159-A07, M0161-B04, M0090-F11 或 DX2500 競爭與 FcRn 的結(jié)合。本文中所用M0171-A03 也稱為 M171-A03 和 M00171-A03。本文中所用 M0171-A01 也稱為 M171-A01 和 M00171-A01。本文中所用 M0159-A07 也稱為 M159-A07 和 M00159-A07。 本文中所用 M0161-B04 也稱為 M161-B04、M00161-B04 和 DX-2504。本文中所用 M0090-F11 也稱為 M090-F11 和 M90-F11。在一方面本發(fā)明提供了一種與人Fcfoi結(jié)合的分離的抗體或其片段，其中該抗體 針對人Fcfoi重鏈或其片段生成，其中該抗體功用為結(jié)合于人Fcfoi的IgG的非競爭性抑制 劑，并且其中該抗體不與β 2-微球蛋白結(jié)合。在一方面本發(fā)明提供了一種與人Fcfoi結(jié)合的分離的抗體或其片段，其中該抗體 針對人Fcfoi重鏈或其片段生成，其中當不與Fcfoi復(fù)合時，該抗體不與β 2-微球蛋白結(jié)合， 并且其中該抗體不產(chǎn)生自Fcfoi-/-敲除小鼠。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體選自由:3B3. 11,31. 1、4Β4. 12和 17D3組成的組。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與人Fcfoi在大約ρΗ范圍5-7. 4以 小于IOOnM的解離常數(shù)(Kd)結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗原結(jié)合位點與人Fcfoi特異性結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與穩(wěn)定表達Fcfoi的細胞系結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體調(diào)節(jié)(例如，抑制)Fcfoi與抗體/ 免疫球蛋白恒定區(qū)的結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的α亞基結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的α鏈的α 1、α 2、或者 α 3域結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體不與Fcfoi的β亞基結(jié)合，即，該蛋 白僅與α亞基結(jié)合。
在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的β亞基結(jié)合，其中該β 亞基與α亞基相關(guān)聯(lián)。在本文中提供的抗體的一些實施方案中α和β亞基正確地組裝為Fcfoi。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與包括α亞基和β亞基并正確組 裝的Fcfoi結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體在大約ρΗ 6下以大約800ηΜ、小于 600ηΜ、小于300ηΜ、小于ΙΟΟηΜ、小于50nM、小于25nM、小于ΙΟηΜ、或者小于5nM的IC5tl抑制 IgG-Fc的結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為可溶性Fab。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體通過其抗原結(jié)合域以及其Fc區(qū)與 FcRn結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的結(jié)合在2-10的范圍內(nèi)大 致上獨立于ρΗ。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的結(jié)合在6-8的范圍內(nèi)大 致上獨立于ρΗ。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體在ρΗ 7. 5具有小于0. 01、0.001、 0. 0001、0. 00001s-1 的 Iiftffo在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體與Fcfoi的結(jié)合大致上依賴于ρΗ。在本文中提供的抗體的一些實施方案中相對于大鼠Fcfoi，該抗體以ρΗ-依賴性或 PH-獨立性的方式優(yōu)先與人Fcfoi結(jié)合。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體在內(nèi)體中或在內(nèi)體條件下與Fcfoi
纟口口。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體在pH7. 5不釋放Fcfoi。在本文中提供的抗體的一些實施方案中當施用于受治療者時，該抗體引起與自身 免疫性病癥相關(guān)聯(lián)的癥狀的改善。在本文中提供的抗體的一些實施方案中HC和LC可變域序列為同一多肽鏈的組 分。在本文中提供的抗體的一些實施方案中HC和LC可變域序列為不同多肽鏈的組 分。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為全長抗體。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為人抗體或人源化抗體或者在人 中具有非免疫原性。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體包含人抗體框架區(qū)。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體包含F(xiàn)c域。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為鼠抗體。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為單克隆抗體。在本文中提供的抗體的一些實施方案中該抗體為嵌合的或人源化的。在本文中提供的抗體的一些實施方案該抗體選自由i^b、F(ab) ‘ 2,Fv和kFv組 成的組。
在本文中提供的抗體的一些實施方案該抗體與Fcfoi的結(jié)合在pH 6. 0到8. 0的范 圍內(nèi)獨立于pH。在一方面本發(fā)明提供了一種包含本文提供的任何一種抗體和藥學(xué)上可接受的載 體的藥物組合物。在一方面本發(fā)明提供了一種分離的核酸，該分離的核酸包含編碼多肽的序列，該 多肽包括與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07或M0161-B04的可變域序列至少80%相同 的序列。在一方面本發(fā)明提供了一種分離的核酸，該分離的核酸包含編碼多肽的序列，該 多肽包括本文中提供的任何一種抗體的第一和/或第二免疫球蛋白可變域。在一方面本發(fā)明提供了包含本文提供的核酸序列的載體或宿主細胞。在一方面本發(fā)明提供了在樣品中檢測Fcfoi的方法，該方法包括使用本文提供的 任何一種抗體與樣品相接觸并且在抗體和Fcfoi之間存在相互作用的情況下，檢測該相互 作用。在一些實施方案中該抗體還包含可檢測標記。在一方面本發(fā)明提供了一種在受治療者中檢測Fcfoi的方法，該方法包括向受治 療者施用還包含可檢測標記的本文提供的任何一種抗體；并且在受治療者中檢測該標記。 在一些實施方案中檢測包括對受治療者成像。在一方面本發(fā)明提供了一種調(diào)節(jié)Fcfoi活性的方法，該方法包括使用本文提供的 任何一種抗體與Fcfoi相接觸，由此調(diào)節(jié)Fcfoi的活性。在一些實施方案中該Fcfoi位于人受 治療者中。在一些實施方案中該抗體阻止Fcfoi與內(nèi)源性Ig的結(jié)合。在一些實施方案中該 抗體阻止Fcfoi與治療性抗體結(jié)合。在一些實施方案中該Fcfoi位于上皮細胞的內(nèi)體。在一 些實施方案中該Fcfoi位于內(nèi)皮細胞的內(nèi)體。在一些實施方案中該Fcfoi位于細胞表面。在一方面本發(fā)明提供了一種治療自身免疫性病癥和/或調(diào)節(jié)自身免疫性病癥癥 狀的方法，該方法包括施用足以調(diào)節(jié)癥狀的量的本文所提供的任何一種抗體。在一些實 施方案中該自身免疫性病癥是選自以下組成的組的病癥類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑 狼瘡(SLE)、重癥肌無力(MG)、格雷夫斯病、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、格林-巴利 綜合征、自身免疫性心肌炎、膜性腎小球腎炎、糖尿病、I型或II型糖尿病、多發(fā)性硬化癥、 雷諾氏綜合征、自身免疫性甲狀腺炎、胃炎、乳糜瀉、白癜風(fēng)、肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、 炎癥性腸病、脊椎關(guān)節(jié)病、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、免疫性嗜中性粒細胞減少癥、青少 年發(fā)病型糖尿病、和與細胞因子、結(jié)核病中常見的T淋巴細胞介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)相關(guān) 的免疫反應(yīng)、結(jié)節(jié)病和多肌炎、多動脈炎、皮膚血管炎、天皰瘡、類天皰瘡、肺出血腎炎綜合 征(Goodpasture' s syndrome)、川崎氏病、系統(tǒng)性硬化癥、抗磷脂綜合征和干燥綜合征 (Sjogren' s syndrome)。在一些實施方案該抗體縮短內(nèi)源性IgG的半衰期。在一方面本發(fā)明提供了一種調(diào)節(jié)循環(huán)IgG的半衰期/水平的方法，該方法包括 確認需要調(diào)節(jié)循環(huán)IgG的半衰期/水平的受治療者；并且向受治療者施用有效調(diào)節(jié)受治療 者體內(nèi)的循環(huán)IgG的半衰期/水平的量的本文所提供的任何一種抗體。在一些實施方案中 該方法降低循環(huán)IgG的半衰期/水平。在一些實施方案中該受治療者為人。在一些實施方 案中施用該抗體并聯(lián)合非本文提供的任何一種抗體的抗自身免疫性病癥的劑或療法以降 低循環(huán)IgG的半衰期/水平。在一些實施方案中非本文所提供的任何一種抗體的該抗自身 免疫性病癥的劑或療法包括靜脈內(nèi)Ig療法；非類固醇抗炎藥物(NSAID)；皮質(zhì)類固醇；環(huán)孢菌素、雷帕霉素、子囊霉素，或其免疫抑制類似物，例如，環(huán)孢菌素A、環(huán)孢菌素G、FK-506, 雷帕霉素、40-0-(2-羥基)乙基-雷帕霉素；環(huán)磷酰胺；硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；布喹那；FTY 720 ；來氟米特；咪唑立賓，霉酚酸，霉酚酸酯(mycophenolate mofetil)，15-脫氧精胍菌素 (deoxyspergualine)；免疫抑制性單克隆抗體，例如，白細胞受體的單克隆抗體，例如，MHC、 CD2、CD3、CD4、CD7、⑶25、⑶28、B7、CD45、或CD58或其配體；其他免疫調(diào)節(jié)化合物，例如 CTLA4Ig ；或其他粘附分子抑制劑，如mAb或低分子量抑制劑，包括選擇蛋白拮抗劑和VLA-4 拮抗劑。在一方面本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防自身免疫性病癥的方法，該方法包括向 患有該病癥或有發(fā)展該病癥的風(fēng)險的受治療者施用本文所提供的任何一種抗體。在一些實 施方案中該自身免疫性病癥以不需要的循環(huán)IgG為特征。在一些實施方案中該抗體縮短內(nèi) 源性IgG的半衰期。在一些實施方案中該自身免疫性病癥為選自以下的病癥類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、重癥肌無力(MG)、格雷夫斯病、特發(fā)性血小板減少性紫癜 (ITP)、格林-巴利綜合征、自身免疫性心肌炎、膜性腎小球腎炎、糖尿病、I型或II型糖尿 病、多發(fā)性硬化癥、雷諾氏綜合征、自身免疫性甲狀腺炎、胃炎、乳糜瀉、白癜風(fēng)、肝炎、原發(fā) 性膽汁性肝硬化、炎癥性腸病、脊椎關(guān)節(jié)病、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、免疫性嗜中性粒 細胞減少癥、青少年發(fā)病型糖尿病、和與細胞因子、結(jié)核病中常見的T淋巴細胞介導(dǎo)的遲發(fā) 型超敏反應(yīng)相關(guān)的免疫反應(yīng)、結(jié)節(jié)病和多肌炎、多動脈炎、皮膚血管炎、天皰瘡、類天皰瘡、 肺出血腎炎綜合征、川崎氏病、系統(tǒng)性硬化癥、抗磷脂綜合征和干燥綜合征。在一些實施方 案中該天皰瘡為尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡或副腫瘤性天皰瘡。在一方面本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防自身免疫性病癥的方法，該方法包括向 患有該病癥或有發(fā)展該病癥的風(fēng)險的受治療者聯(lián)合治療或預(yù)防該病癥的第二療法施用本 文所提供的任何一種抗體。在一些實施方案中該第二療法包括靜脈內(nèi)Ig療法；非類固醇抗 炎藥物(NSAID)；皮質(zhì)類固醇；環(huán)孢菌素、雷帕霉素、子囊霉素、或其免疫抑制類似物，例如， 環(huán)孢菌素A、環(huán)孢菌素GJK-506、雷帕霉素、40-0-(2-羥基)乙基-雷帕霉素；環(huán)磷酰胺；硫 唑嘌呤；甲氨蝶呤；布喹那；FTY 720 ；來氟米特；咪唑立賓，霉酚酸，霉酚酸酯，15-脫氧精 胍菌素；免疫抑制性單克隆抗體，例如，白細胞受體的單克隆抗體，例如，MHC、CD2、CD3、CD4、 ⑶7、⑶25、⑶^、B7、⑶45、或⑶58或其配體；其他免疫調(diào)節(jié)化合物，例如CTLA4Ig ；或其他 粘附分子抑制劑，如mAb或低分子量抑制劑，包括選擇蛋白拮抗劑和VLA-4拮抗劑。在一方面本發(fā)明提供了一種在個體內(nèi)降低不需要的抗體的濃度的方法，該方法包 括向個體施用治療有效劑量的本文提供的任何一種抗體或抗體片段的步驟。在一些實施方 案中該抗體或其片段在藥學(xué)上可接受的載體中施用。在一些實施方案中該個體為人。在一 些實施方案中該抗體或其片段與佐劑一起施用。在一些實施方案中該不需要的抗體為那他 珠單抗。在一些實施方案中該不需要的抗體為非自身人類白細胞抗原。在一些實施方案中 所施用的抗體或其片段與器官移植聯(lián)合施用。在一方面本發(fā)明提供了一種在個體內(nèi)減少IgG與Fcfoi結(jié)合的方法，該方法包括以 下步驟提供與人Fcfoi結(jié)合、針對抗人Fcfoi重鏈或其片段而生成、為IgG與人Fcfoi結(jié)合的 非競爭性抑制劑并且不與β 2-微球蛋白結(jié)合的抗體或其片段；并且以足夠降低在個體內(nèi) IgG與Fcfoi結(jié)合的量向個體施用該抗體或其片段。在一些實施方案中該個體患有自身免 疫性或同種免疫疾病。在一些實施方案中該個體為器官移植接受者。在一些實施方案中已向該個體施用治療性抗體。在一些實施方案中該自身免疫性病癥為免疫性血小板減少癥。 在一些實施方案中該自身免疫性病癥為免疫性天皰瘡。在一些實施方案中該個體為人。在 一些實施方案中以lmg/kg到2g/kg的劑量施用該抗體。在一些實施方案中以lmg/kg到 200mg/kg的劑量施用該抗體。在一方面本發(fā)明提供了一種在個體內(nèi)抑制IgG抗體水平的方法，該方法包括以下 步驟提供與人Fcfoi結(jié)合、針對抗人Fcfoi重鏈或其片段而生成、為IgG與人Fcfoi結(jié)合的非 競爭性抑制劑并且不與β 2-微球蛋白結(jié)合的抗體或其片段；并且以足夠抑制在個體內(nèi)IgG 抗體水平的量向個體施用該抗體或其片段。在一些實施方案中該IgG抗體為治療性IgG抗 體。在一些實施方案中該治療性IgG抗體為那他珠單抗。在一些實施方案中該IgG抗體為 非自身人類白細胞抗原。在一些實施方案中該方法還包括血漿置換步驟。在一方面本發(fā)明涉及抑制IgG分子恒定區(qū)與Fcfoi結(jié)合的抗體。本發(fā)明因此涉及 包含特異性結(jié)合于Fcfoi分子表位的至少一個可變區(qū)的抗體。在一些實施方案中，本發(fā)明的 抗體與人Fcfoi結(jié)合。在其他實施方案中，該抗體與嚙齒類或猴Fcfoi結(jié)合。本發(fā)明的一些 示例性抗體包括，例如，4Β4. 12.3Β3. 11,31. 1、和17D3。在一方面本公開以包括重鏈(HC)免疫球蛋白可變域序列和輕鏈(LC)免疫球蛋白 可變域序列的抗體(例如，分離的抗體)為特征。第一和第二免疫球蛋白可變域序列形成 與Fcfoi (例如，人Fcfoi)結(jié)合的抗原結(jié)合位點。在一個實施方案中，該抗體具有一個或多個 以下特征(a)其 LC 免疫球蛋白可變域序列與;3Β3· 11,31. 1、532A-M0090_F09、Μ0084-Β03、 M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、 M0073-E10、或M0090-F11的LC可變域，或其一個或多個CDR至少85%相同；(b)其 HC 免疫球蛋白可變域序列與:3Β3· 11,31. 1、532A-M0090_F09、M0084-B03、 M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、 M0073-E10、或M0090-F11的HC可變域，或其一個或多個CDR至少85%相同；并且(c)該抗體結(jié)合與被 3B3. 11,31. 1、532A-M0090_F09、M0084-B03、M0056-G05、 M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11結(jié)合的表位相重疊的表位。在一個實施方案中，該抗體與Fcfoi(例如，人Fcfoi)結(jié)合，例如，在pH范圍5-8，例 如，具有小于100、50、10、5、1、或0.1碰的解離常數(shù)(Kd)。在一個實施方案中，該抗原結(jié)合 位點與人Fcto特異性結(jié)合。本文中，“特異性結(jié)合”或“特異性結(jié)合于”指Fcto結(jié)合抗體優(yōu) 先與人Fcfoi結(jié)合的能力，具有比其對不同于Fcfoi的非特異性抗原(例如，肌動蛋白，酪蛋 白)結(jié)合的親和性強至少2倍、10倍、50倍、100倍或更強的親和性(更小的Kd)。在一個 實施方案中，該抗體以小于0. 01、0. 001、0. 0001,0. 00001s"1的k離解與人Fcfoi結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體與Fcfoi的胞外域結(jié)合；例如，F(xiàn)cfoi的一個α亞基，即， FcRna鏈的a 1、a 2、或a 3域。在一個實施方案中，該抗體不與Fcfoi的β ( β 2M)亞基 結(jié)合，例如，該抗體只與α亞基結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體確實與Fcfoi的β亞基結(jié) 合，但是，只有在當β2Μ與α亞基相關(guān)聯(lián)的時候。例如，除非α亞基和β亞基兩者都存 在并正確地組裝為Fcfoi，否則該抗體不與α或β亞基結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體與 包括α亞基和β亞基并正確地組裝的Fcfoi結(jié)合。
在一個實施方案中，該抗體調(diào)節(jié)(例如，抑制)Fcfoi與抗體/免疫球蛋白恒定區(qū) 的結(jié)合。例如，該抗體可具有優(yōu)于(例如，數(shù)值上小于)5ηΜ、500ρΜ、200ρΜ、150ρΜ、ΙΟΟρΜ、或 75pM的Ki，例如，介于50nM和IpM,或200pM和5pM之間的Ki0在一個實施方案中，該抗體與Fcfoi結(jié)合并且降低或防止Fcfoi與抗體/免疫球蛋 白恒定區(qū)的結(jié)合。例如，該抗體可與Fcfoi (例如，人Fcfoi)以強于(即，數(shù)值上小于)1x10_8M 的親和性(Kd)結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體為以大致上獨立于pH或大致上依賴于pH的 方式Fcfoi結(jié)合并在pH 6具有大約3.0-82nM范圍的Kd的Fab。在一個實施方案中，該抗體 為以大致上獨立于pH或大致上依賴于pH的方式與Fcfoi結(jié)合并在pH7. 5具有大約9. 7到大 約39. 7nM范圍的Kd的Fab。在一個實施方案中，該抗體為以大致上獨立于pH或大致上依賴 于PH的方式與Fcfoi結(jié)合并在pH6具有大約0. 409-大約29. 5nM、大約2. 44-大約29. 5nM、 大約0. 13-大約1. 03nM、大約6. 43-大約30. 2nM、大約0. 2-大約2. 87nM、大約0. 34-大約 2. 87nM、或大約0. 2-大約30. 2nM范圍的Kd的IgG。在一個實施方案中，該抗體為以大致 上獨立于PH或大致上依賴于pH的方式與Fcfoi結(jié)合并在pH7. 5具有大約0. 675-24. 2nM、 2. 1-24. 2nM、0. 158-lOnM、或大約 2. 04-大約 80nM 范圍的 Kd 的 IgG。在一個實施方案中，該抗體抑制Fcfoi與IgG-Fc的結(jié)合，并在大約pH 6具有小于 80011]\1、60011]\1、或30011]\1、20011]\1、10011]\1、111]\1、50 ]\1的 IC5tl。在一個實施方案中，該抗體該抗體 為以大致上獨立于pH或大致上依賴于pH的方式抑制Fcfoi與IgG-Fc結(jié)合并在pH6具有大 約13-7MnM或大約13-80nM范圍的IC5tl的Fab。在一個實施方案中，該抗體為以大致上獨 立于PH或大致上依賴于pH的方式抑制Fcfoi的結(jié)合并在pH6具有大約1. 2-36nM、36_120nM、 120-562nM、l. 5-5. 4nM、5. 4-50nM、51_161nM 范圍的 IC5tl 的 IgG。在一個實施方案中，該抗體為，例如，單鏈抗體、Fab、sFab片段、F(ab' )2、Fd片 段、Fv片段、scFv、或dAb片段。在一些實施方案中，該抗體為單特異性，例如，單克隆抗體或重組抗體。術(shù)語“單特 異性抗體”指對特定靶標，例如，表位，表現(xiàn)出單獨的結(jié)合特異性和親和性的抗體。該術(shù)語包 括“單克隆抗體”或“單克隆抗體組合物”，如本文所用，其指具有單分子組成的抗體的制品。在一個實施方案中，該抗體為重組或修飾的抗-Fcfoi抗體，例如，嵌合、人源化、去 免疫化或體外生成抗體。如本文所用，術(shù)語“重組”或“修飾的”人抗體意為包括通過重組 方法制備、表達、生成或分離的所有抗體，比如使用重組表達載體轉(zhuǎn)染進入宿主細胞表達的 抗體，從重組組合抗體庫中分離的抗體，從人免疫球蛋白基因轉(zhuǎn)基因動物(例如，小鼠)中 分離的抗體或者通過涉及將人免疫球蛋白基因序列剪接到其他DNA序列的任何其他方法 制備、表達、生成或分離的抗體。所述重組抗體包括人源化、CDR嫁接、嵌合、去免疫化、體外 生成抗體，并可任選地包括由人種系免疫球蛋白序列衍生的恒定區(qū)。在一個實施方案中，該 抗體不在人體內(nèi)弓丨起抗球蛋白反應(yīng)。還公開了與本文所公開的抗Fcfoi抗體的重疊表位結(jié)合、或競爭性抑制其與Fcfoi 的結(jié)合的抗體(包括全長抗體或其抗原結(jié)合片段)，例如，與sFab 532A-M0090-F09、 M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、 M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的重疊表位結(jié)合，或競爭性抑制其與Fcfoi結(jié)合的抗 體。也有可能使用抗Fcfoi抗體的組合，例如，與Fcfoi不同區(qū)結(jié)合的兩個或多個抗體，例如， 與Fcfoi胞外域上的兩個不同表位性結(jié)合的抗體。可選擇地，可使用雙特異性抗體。雙特異性抗體為具有兩個可變重域和兩個可變輕域以使得該單分子具有兩種特異性結(jié)合能力的 分子；該可變域或特異性中的一個或多個可為本文所述抗體的并與Fcfoi結(jié)合。在一個實施方案中，抗Fcfoi抗體(例如，全長抗體或其抗原結(jié)合片段)包括至 少一個輕鏈或重鏈可變域序列(例如，至少一個輕鏈免疫球蛋白和至少一個重鏈免疫球 蛋白)。在一些實施方案中，每個免疫球蛋白包括具有至少一個，兩個或三個互補決定區(qū) (CDR)的輕鏈或重鏈可變域序列，該互補決定區(qū)大致上與同F(xiàn)cfoi相互作用的抗體的輕鏈 或重鏈可變域序列的⑶R相同該抗體例如，本文中所述的sFab，例如，532A-M0090-F09、 M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、 M0064-H04、M0073-E10、或 MOO90-F11。在一個實施方案中，該抗體使用其抗原結(jié)合域并通過其Fc區(qū)與Fcfoi結(jié)合。在一 個實施方案中，該抗體僅使用其抗原結(jié)合域與Fcfoi結(jié)合。例如，該抗體不包括Fc區(qū)或包括 不與Fcfoi相互作用的修飾的Fc區(qū)。在一個實施方案中，該抗體通過其抗原結(jié)合域與Fcfoi 結(jié)合比通過其Fc域更加緊密至少1000倍。在一個實施方案中，在2-10、4-9、5-8、6-8、或6-7. 5的范圍內(nèi)，抗體與Fcfoi的結(jié) 合大致上是PH獨立的。術(shù)語“pH獨立”指抗體在2-10、4-9、5-8、6-8，或6-7. 5范圍的pH 下與Fcfoi結(jié)合/和或保持結(jié)合的能力。該親和性可在不同pH值下變化。在一些實施方案 中，Kd在該范圍內(nèi)的任何值下不高于200nM、50nM、10nM、lnMor IOOpM0例如，該抗體在pH 6與Fcfoi結(jié)合并在pH 7. 5保持結(jié)合。在一個實施方案中，抗體與Fcfoi的結(jié)合大致上依賴 于pH。術(shù)語“pH獨立”指在第一 pH下抗體與Fcfoi結(jié)合/和或保持結(jié)合的能力以及在第二 PH下與Fcfoi結(jié)合或保持結(jié)合的能力，其中第二 pH在第一 pH的給定數(shù)量的pH單位內(nèi)(例 如，6、5、4、3、2、1. 5個單位)。例如，該抗體可在pH6與FcRn結(jié)合并可在ρΗ7· 5仍與FcRn 結(jié)合或保持結(jié)合。術(shù)語“ΡΗ依賴”指抗體在第一 pH下與Fcfoi結(jié)合/和或保持結(jié)合的能力 以及在第二 PH下缺乏與Fcfoi結(jié)合或保持結(jié)合的能力，其中第二 pH在第一個pH的給定數(shù) 量的PH單位內(nèi)(例如，6、5、4、3、2、1.5個單位)。例如，該抗體可在ρΗ6與Fcfoi結(jié)合并且 在ΡΗ7. 5不能與Fcfoi結(jié)合或保持結(jié)合。在一個實施方案中，相對于大鼠或猴Fcfoi該抗體以pH依賴或pH獨立的方式優(yōu)先 與人Fcfoi結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體以相差不超過2倍、5倍或10倍的親和性與人 Fcfoi以及合適的實驗動物(例如，大鼠或猴)的Fcfoi 二者結(jié)合。在一個實施方案中，該抗 體在pH范圍6. 0-7. 5以Kd彡5ηΜ與人Fcfoi和合適的實驗動物的Fcfoi結(jié)合。在一個實施 方案中，該抗體在內(nèi)體內(nèi)或在內(nèi)體條件下與Fcfoi結(jié)合。例如，該抗體在酸性條件例如pH 6 下與Fcfoi結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體在ρΗ6與Fcfoi結(jié)合，例如，比在ρΗ7. 5更優(yōu)至 少1. 5、2、5、8、10、20、或50倍。在一個實施方案中，該抗體在pH 7. 5釋放Fcfoi，例如，比在 口116更迅速至少1.5、2、5、8、10、20、或50倍。在一個實施方案中，該抗體在pH 7. 5與Fcfoi 結(jié)合，例如，比在PH 6更優(yōu)至少1.5、2、5、8、10、20、或50倍。在一個實施方案中，該抗體在 PH 6釋放Fcfoi，例如，比在ρΗ7. 5更迅速至少1. 5、2、5、8、10、20、或50倍。在一個實施方案 中，該抗體在PH 7. 5不釋放Fcfoi。在一個實施方案中，該抗體在pH 6不釋放Fcfoi。在一個實施方案中，與Fcfoi的相互作用延長該抗體的半衰期。在一個實施方案 中，該抗體弓I起其他IgG分子的半衰期縮短，例如，至少5、10、20、40、50、60、70、80、或90 %。 例如，90%縮短將使抗體的半衰期由20天改變到2天。
在一個實施方案中，當施用于受治療者時，該抗體引起與自身免疫性病癥相關(guān)聯(lián) 的癥狀的改善。例如，該抗體可減輕或降低諸如以下的癥狀的嚴重性關(guān)節(jié)腫脹，疼痛，或僵 硬；循環(huán)抗體水平比如自身性抗體水平；關(guān)節(jié)疼痛(關(guān)節(jié)痛)；發(fā)燒；極度疲勞；皮膚疹；貧 血；胸部疼痛或深呼吸疼痛；臉頰和鼻部的蝴蝶形皮疹；光敏性；脫發(fā)；抽搐；口或鼻潰瘍； 雷諾氏現(xiàn)象；輕度紅斑；神經(jīng)精神表現(xiàn)；血小板減少；和胸腔積液等。在一個實施方案中，HC和LC可變域序列為同一多肽鏈的組分，也就是說其為單鏈 抗體的部分。在一個實施方案中，HC和LC可變域序列為不同多肽鏈的組分。在一個實施方案中，該抗體為全長抗體。例如，該抗體可為人抗體或人源化抗體和 /或可在人中具有非免疫原性。在一個實施方案中，該抗體包含人抗體框架區(qū)。在一個實施 方案中，該抗體包含F(xiàn)c域。在一個實施方案中，HC可變域序列包含;3B3. 11,31. 1、532A-M0090_F09、 M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、 M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的可變域序列，并且LC可變域序列包含!3B3. 11、31. 1、 532A-M0090-F09, M0084-B03, M0056-G05、M0084-B1U M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、 M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的可變域序列。在一個實施方案中，該 抗體與被 3B3. 11,31. 1、532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、 M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 結(jié)合的 FcRn 表位 結(jié)合。在一個實施方案中，該抗體與 532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、 M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 競爭 與Fcfoi的結(jié)合。在一方面，本發(fā)明涉及一種制備單克隆抗體的方法，其包括用Fcfoi蛋白或其至 少一個片段或用編碼Fcfoi分子或其片段的多核苷酸序列免疫嚙齒類動物；從所述嚙齒類 動物中獲得B細胞；將所述B細胞與骨髓瘤細胞系相融合以獲得雜交瘤細胞；在使其分泌 單克隆抗體的條件下培養(yǎng)所述雜交瘤細胞，其中所述抗體包含至少一個可變區(qū)，其特異性 結(jié)合于Fcfoi分子，其中所述Fcfoi分子包含可以結(jié)合至少IgG恒定區(qū)的一部分的域，其中所 述抗體與所述Fcfoi分子的結(jié)合抑制IgG恒定區(qū)的部分與所述Fcfoi分子的結(jié)合；并分離該 抗體。在一方面，本公開以一種識別與Fcfoi例如人Fcfoi結(jié)合的抗體的方法為特征，并且 包括提供Fcfoi抗原或其片段；提供抗體庫，例如，展示庫；并且識別該庫中存在的與Fcfoi 抗原結(jié)合的成員，其中該庫的每個成員均在其表面展示異源性抗體組分并且每個成員包括 編碼該異源性抗體組分的核酸，該異源性抗體組分為一組多樣化的抗體組分的成員。該方 法可包括從已識別的成員中分離核酸分子，并且該核酸分子編碼特異性結(jié)合于Fcfoi抗原 的多肽。在一個實施方案中，該抗體與人Fcto特異性結(jié)合。在一個實施方案中，該庫為噬菌體庫，例如，噬菌體展示庫。在一個實施方案中，使 用競爭配體將被識別的噬菌體洗脫，例如，與FcfoI和/或競爭性抗人Fcfoi抗體結(jié)合的IgG Fe。在另一方面，本公開以一種在樣品中檢測Fcfoi的方法為特征，該方法包括將樣 品與Fcfoi結(jié)合抗體(例如，本文所述抗體)相接觸并且如果存在抗體和Fcfoi的相互作用， 檢測該相互作用。在一個實施方案中，該抗體包含可檢測標記比如熒光標簽(例如，在存在顯色或化學(xué)發(fā)光底物下進行檢測的氟硼熒(bodipy)、熒光素-5-異硫氰酸酯、羅丹明、和過 氧化物酶或堿性磷酸酶和過氧化物酶)。在一方面，本公開以一種調(diào)節(jié)Fcfoi活性的方法為特征，該方法包括將Fcfoi與 FcRn結(jié)合抗體(例如，本文所述抗體)相接觸，從而調(diào)節(jié)Fcfoi的活性(例如，與IgG Fc的 結(jié)合)。在一個實施方案中，該Fcfoi位于人受治療者內(nèi)；該Fcfoi可位于人受治療者的上皮 或內(nèi)皮細胞內(nèi)或在血液內(nèi)(例如，在血液中可溶或在血液中循環(huán)的細胞內(nèi))。在一個實施方 案中，該抗體阻止Fcfoi與底物結(jié)合，例如，內(nèi)源性底物比如IgG Fc和/或血清白蛋白。在 一個實施方案中，該Fcfoi位于上皮或內(nèi)皮細胞內(nèi)體內(nèi)。在一方面，本公開以一種治療、預(yù)防和/或調(diào)節(jié)病癥的癥狀的方法為特征，該病癥 例如自身免疫性病癥或與非正常Fcfoi活性相關(guān)的病癥。該方法包括向受治療者施用Fcfoi 結(jié)合抗體(例如，本文所述抗體)，例如，患有該病癥或有發(fā)展該病癥的風(fēng)險的受治療者。在 一個實施方案中，以足夠調(diào)節(jié)病癥癥狀的量和/或時間施用該配體。在一個實施方案中，該自身免疫性病癥為選自以下組成的組的病癥類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、重癥肌無力(MG)、格雷夫斯病、特發(fā)性血小板減少性紫癜 (ITP)、格林-巴利綜合征、自身免疫性心肌炎、膜性腎小球腎炎、糖尿病、I型或II型糖尿 病、多發(fā)性硬化癥、雷諾氏綜合征、自身免疫性甲狀腺炎、胃炎、乳糜瀉、白癜風(fēng)、肝炎、原發(fā) 性膽汁性肝硬化、炎癥性腸病、免疫性嗜中性粒細胞減少癥、脊椎關(guān)節(jié)病、實驗性自身免疫 性腦脊髓炎、青少年發(fā)病型糖尿病、和與細胞因子、結(jié)核病中常見的T淋巴細胞介導(dǎo)的遲發(fā) 型超敏反應(yīng)相關(guān)的免疫反應(yīng)、結(jié)節(jié)病和多肌炎、多動脈炎、皮膚血管炎、天皰瘡、類天皰瘡、 肺出血腎炎綜合征、川崎氏病、系統(tǒng)性硬化癥、抗磷脂綜合征和干燥綜合征。在一個實施方案中，本發(fā)明的抗體可被用于抑制IgG穿越血腦屏障的轉(zhuǎn)運。在另 一實施方案中，本發(fā)明的抗體可被用于治療腦瘤或阿爾茨海默氏病。在一個實施方案中，該抗體縮短內(nèi)源性IgG的半衰期。在一個實施方案中，該自身 免疫性病癥以不需要的循環(huán)IgG為特征，例如，不需要的循環(huán)病原性IgG。在一方面，本公開以一種在受治療者中檢測i^cfoi的方法為特征，該方法包括向 受治療者施用包括可檢測標記的Fcfoi結(jié)合抗體(例如，本文中所述抗體)；并在該受治療 者中檢測該標記。該方法可包括對受治療者成像，例如，使用斷層攝影術(shù)，例如，MRL·在一方面，本公開以一種調(diào)節(jié)循環(huán)IgG的半衰期/水平的方法為特征，該方法包 括確定需要調(diào)節(jié)循環(huán)IgG半衰期/水平的受治療者，例如，人；并以足夠調(diào)節(jié)循環(huán)IgG半衰 期/水平的量向該受治療者施用Fcfoi結(jié)合抗體(例如，本文中所述抗體)。在一個實施方 案中，該方法降低循環(huán)IgG的半衰期/水平。在一個實施方案中，施用該抗體并聯(lián)合另一種 抗自身免疫性病癥的劑或療法以降低循環(huán)IgG的半衰期/水平。聯(lián)合施用Fcfoi抗體和其 他抗自身免疫性病癥的劑或療法可導(dǎo)致調(diào)節(jié)或降低循環(huán)IgG的半衰期/水平所需的其他抗 自身免疫性病癥的劑或療法的水平的降低。在另一方面，本公開以一種分離的核酸為特征，該分離的核酸包括編碼第一多肽 的第一序列，包括與 3B3. 11,31. 1、532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、 M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 的 第一可變域序列的序列至少80、85、90、92、94、95、96、97、98、99、或100 %相同的序列，或 與編碼 3B3. 11,31. 1、532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 的可變域的序 列的核酸雜交(例如，在嚴格條件下)的序列。在一個實施方案中，該核酸還包括編碼 包括(相應(yīng)可變域的)第二可變域序列的第二多肽的第二序列，例如，與3B3. 11、31. 1、 532A-M0090-F09, M0084-B03、M0056-G05、M0084-B1U M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、 M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 的第二可變域序列的序列至少 80、85、90、 92、94、95、96、97、98、99、或 100% 相同的序列，或與編碼 3B3. 11,31. 1、532A-M0090_F09、 M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、 M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的可變域的序列的核酸雜交(例如，在嚴格條件下) 的序列。在一個實施方案中，該核酸還包括調(diào)控序列(例如，啟動子序列，非翻譯的5’區(qū)和 非翻譯的3’區(qū))和/或載體序列。例如，該核酸構(gòu)成載體。在另外一個方面，本公開以一種可表達抗體的宿主細胞為特征。該宿主細胞包括 一種或多種核酸，其集合包括(1)編碼第一可變域序列的第一序列，包括與3B3. 11,31. 1、 532A-M0090-F09, M0084-B03, M0056-G05、M0084-B1U M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、 M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 的第一可變域序列的序列至少 80、85、90、 92、94、95、96、97、98、99、或 100% 相同的序列，或與編碼 3B3. 11,31. 1、532A-M0090_F09、 M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、 M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的第一可變域的序列的核酸雜交(例如，在嚴格條 件下)的序列，以及( 編碼包括(相應(yīng)可變域的)第二可變域序列的第二可變域序列 的第二序列，例如，與 3B3. 11,31. 1、532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、 M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或 M0090-F11 的第 二可變域序列的序列至少80、85、90、92、94、95、96、97、98、99、或100%相同的序列，或與編 碼 532A-M0090-F09、M0084-B03、M0056-G05、M0084-B11、M0092-D02、M0055-G12、M0057-F02、 M0062-C09、M0064-H04、M0073-E10、或M0090-F11的可變域的序列的核酸雜交(例如，在嚴 格條件下)的序列。在一方面，本公開以一種治療或預(yù)防自身免疫性病癥的方法為特征，該方法包括 施用Fcfoi結(jié)合抗體(例如，本文中所述抗體)，例如，聯(lián)合施用第二療法，給患有自身免疫性 病癥或有發(fā)展該病癥的風(fēng)險的受治療者。例如，該第二療法可為適合治療或預(yù)防病癥的療 法。在一個實施方案中，該第二療法可包括靜脈內(nèi)Ig療法；非類固醇抗炎藥物(NSAID)； 皮質(zhì)類固醇；環(huán)孢菌素、雷帕霉素、子囊霉素、或其免疫抑制類似物，例如，環(huán)孢菌素A、環(huán)孢 菌素G、Π(-506、雷帕霉素、40-0-(2-羥基)乙基-雷帕霉素；環(huán)磷酰胺；硫唑嘌呤；甲氨 蝶呤；布喹那；FTY 720 ；來氟米特；咪唑立賓、霉酚酸、霉酚酸酯、15-脫氧精胍菌素；免疫 抑制性單克隆抗體，例如，白細胞受體的單克隆抗體，例如，MHC、⑶2、⑶3、⑶4、⑶7、⑶25、 ⑶^、B7、⑶45、或⑶58或其配體；其他免疫調(diào)節(jié)化合物，例如CTLA4Ig ；或其他粘附分子抑 制劑，如mAb或低分子量抑制劑，包括選擇蛋白拮抗劑。在另一方面，本公開以一種治療胎兒的方法為特征，該方法包括將小分子或大分 子藥物，例如，抗生素或疫苗(例如，病毒疫苗)，軛合于Fcfoi結(jié)合抗體；并且在子宮內(nèi)向懷 有胎兒的孕婦施用該軛合物。在一個實施方案中，該胎兒患有病癥或有患病癥的風(fēng)險。示 例性病癥包括免疫系統(tǒng)病癥(例如，自身性免疫病癥)，代謝紊亂，或感染性病癥，例如，細 菌或病毒感染，例如，腸道感染(例如，幽門螺桿菌(Helibacter pylori)感染)。
在另一方面，本公開以一種治療嬰兒的方法為特征，該方法包括將小分子或大分 子藥物軛合于與Fcfoi結(jié)合的抗體，例如，本文中所述抗體；并將該軛合抗體加入母乳內(nèi)。可 將該母乳施用于嬰兒。在一個實施方案中，將該軛合抗體施用于婦女并且該婦女直接，例 如，哺乳，或間接地向嬰兒提供母乳。盡管本發(fā)明主要以抗體的最優(yōu)實施方案進行討論，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將易于理 解非抗體的結(jié)合蛋白或配體在本公開范圍內(nèi)。


圖1描繪了關(guān)于與hFcfoi或人β2Μ反應(yīng)性的，來自使用編碼hFcfoi或GPI連接的 hFcRn的DNA ；以及使用編碼人β 2Μ的DNA進行免疫的動物的，在免疫56天以后所得小鼠血 清中的抗體的ELISA分析結(jié)果。小鼠#180-184使用編碼hFcfoi的質(zhì)粒免疫；小鼠#185-189 使用編碼hFcfoi的質(zhì)粒和編碼hi3 2M的質(zhì)粒免疫；小鼠#190-194使用編碼GPI-連接的 hFcRN的質(zhì)粒免疫；小鼠#195-199使用編碼GPI-連接的hFcRN的質(zhì)粒和編碼h β 2M的質(zhì) 粒免疫。圖2描繪了關(guān)于與hFcfoi或人β2Μ反應(yīng)性的，來自使用編碼hFcfoi或GPI連接的 hFcRn的DNA ；以及使用編碼人β 2Μ的DNA進行免疫的動物的，在免疫94天以后所得小鼠 血清中的抗體的ELISA分析結(jié)果。圖3描繪了 FACS分析的結(jié)果，該FACS分析用于確定#182小鼠所衍生的克隆的上 清是否能夠阻止細胞(工程化以過表達Fcfoi的HEK 293細胞)上的hFcfoi的hlgG 結(jié)合。將細胞與雜交瘤上清一起培養(yǎng)60-90分鐘，然后使用PBS清洗，隨后與Alexa fluor-488標記的hlgG—起培養(yǎng)。所得結(jié)果以㈧總體平均熒光強度(TMFI)或⑶人IgG 與Fcfoi結(jié)合改變(抑制或加強)的百分比的方式表現(xiàn)。圖4描繪了 FACS分析的結(jié)果，該FACS分析使用實施例6中所述方法確定#187小 鼠所衍生的雜交瘤上清的阻止活性的。所得結(jié)果以(A)總體平均熒光強度(TMFI)或(B) 人IgG與Fcfoi結(jié)合改變(抑制或加強)的百分比的方式表現(xiàn)。圖5描繪了 FACS分析的結(jié)果，該FACS分析用于確定在(A)mAb 31. 1、mAb 4. 13、 和hlgGl ；或(B)mAb 3B3. IUmAb 4B4. 12 JPhIgGl的各種濃度下的Fcfoi阻止活性的效價， 所述確定是通過檢測在Alexa-488-標記的hlgG和抗Fcfoi阻止單克隆抗體或hlgGl存在 下培養(yǎng)的四3(11細胞(工程化用以過表達Fcfoi的HEK 293細胞)的表面染色進行。所得 結(jié)果以結(jié)合于細胞的hlgG的百分比表示，其定義為各濃度下的TMFI除以不加競爭 劑的樣品的TMFI乘以100%。圖6描繪了 FACS分析的直方圖，該FACS分析用于確定mAb 3B3. IUmAb 31. UmAb 4. 13, mAb 4B4.12、和mAb 15B6. 1與表達hFcfoi的細胞(工程化用以過表達Fcfoi 的HEK 293細胞)的細胞表面的結(jié)合。圖7描繪了 FACS分析的直方圖，該FACS分析用于確定mAb 3B3. IUmAb 31. UmAb 4. 13和mAb4B4. 12與表達Fcfoi的大鼠細胞(工程化用以過表達大鼠Fcfoi的大鼠成纖維細 胞)的細胞表面的結(jié)合。圖8描繪了 FACS分析的直方圖，該FACS分析用于確定mAb 3B3. IUmAb 4. 13、mAb 31. 1、mAb 4B4. 12、和mAb 15B6. 1與表達Fcfoi的小鼠3T3細胞(工程化用以過表達小鼠FcRn的NIH 3T3細胞)的細胞表面的結(jié)合。圖9描繪了 FACS分析的直方圖，該FACS分析用于確定mAb 3B3. IUmAb 4. 13、mAb 31. 1、mAb 4B4. 12、和mAb 15B6. 1與THP細胞(人單核細胞系)細胞內(nèi)表達的hFcfoi的結(jié)口。圖10描繪了 FACS分析的直方圖，該FACS分析用于確定mAb 3B3. 11、mAb 4. 13、 mAb 31. 1、mAb 4B4. 12 JPmAb 15B6. 1與Caco_2細胞(人腸上皮細胞系)細胞內(nèi)表達的 hFcRn的結(jié)合。圖11描繪了與mAb 4B4. 12或同種型對照mlgG^i(1813)在表面或細胞內(nèi)反應(yīng)的 (A)小鼠脾臟的巨噬細胞群和⑶小鼠脾臟總細胞群的百分比。圖12描繪了使用OVA加CFA免疫和經(jīng)過mAb 4B4. 12、同種型對照mlgG^i(1813) 或PBS處理的小鼠的(A)脾臟和(B)腹股溝淋巴結(jié)的平均重量。使用OVA加CFA將小鼠免 疫并以Img的4B4. 12或同種型對照1813的10次注射進行IP處理。圖13描繪了對Balb/c小鼠的抗卵清蛋白(OVA)的IgG的血清水平的影響，該小 鼠已使用OVA免疫，并隨后使用mAb 4B4. 12、陽性對照mIgG^i(1813)或PBS處理?？贵w處 理由三次每日腹膜內(nèi)(IP)注射抗體，隨后10次每隔一日的IP注射抗體組成。所示結(jié)果在 抗體處理9天后(5次注射)得到。圖14描繪了對⑶-1小鼠的人IgG血清水平的影響，該小鼠已使用lmg/kg的人 IgG(Synagis)進行腹膜內(nèi)(IP)注射，并隨后在72小時后使用20mg/kg mAb 4B4. 12，20mg/ kg同種型對照mIgG^i(18i;3)，或PBS的單次IP注射進行處理。血清樣品在mAB注射前 (Synagis注射后72小時)，mAB注射后72，和168小時獲得。所示結(jié)果由抗體處理后M小 時的血清中得到。圖15描繪了與圖14所述的同樣的實驗，并有兩個另外的血清取樣點(72和168 小時)。該結(jié)果表示為與mAB注射前的Synagis的水平相比保留的Synagis的百分比。圖16描繪了使用mAb 4B4. 12、同種型對照mIgG2a (1813)、或PBS處理對實驗性自 身免疫性重癥肌無力(EAMG)的嚴重性的影響的時程。通過如下對愈加嚴重的癥狀分配零 到四的等級評估該病癥的嚴重性0，無癥狀；1，弱握力、易疲勞和時喘；2，一般性虛弱，休 息時駝背(hunched posture at rest)，體重降低，發(fā)抖；3，嚴重虛弱，瀕死；以及4，死亡。圖17描繪了使用mAb 4B4. 12、同種型對照mlgG^i (1813)，或PBS處理對實驗性自 身免疫性重癥肌無力(EAMG)造成的體重降低的影響，體重降低以克報告(如y軸所示)。圖18 描繪 了 Tg32B 小鼠(hFcfoi+/+，h β 2Μ+/+，mFcRn-/", m β 2Μ_/_)中生物素化 的人IgG(生物素-hlgG)與未標記的人IgG(hlgG)的清除動力學(xué)的比較。使用5mg/kg生物 素化的人IgG(Synagis)和495mg/kg未標記的hlgG對動物進行靜脈內(nèi)(IV)注射。在圖中 所示的時間點收集血清并使用親和素平板(Pierce Chemicals)確定血清中生物素-hlgG 濃度并使用ELISA測量未標記的hlgG。圖19描繪了將動物經(jīng)過mAb 3B3. 11處理后的Tg32B小鼠(hFcI n+/+，h β 2Μ+/+， mFcRn-/-,m^ 2Μ-/-)中生物素化的人IgG(生物素-hlgG)的清除動力學(xué)。使用5mg/kg生 物素化的人IgG(Synagis)和495mg/kg未標記的hlgG對動物進行靜脈內(nèi)(IV)注射。對小 時以后，開始每日一次的IV注射50mg/kg的mAb !3B3. 11并持續(xù)5天的時間。在圖中所示 的時間點收集血清并使用親和素平板(Pierce Chemicals)確定血清中生物素-hlgG濃度。
圖20描繪了 FACS分析的條形圖，該FACS分析用來確定mAb 3B3. 11、mAb 4. 13、 mAb 31. UmAb 4B4. 12、和mAb 15B6. 1與轉(zhuǎn)染了猴Fcfoi/β 2M的COSl細胞的結(jié)合。結(jié)果表 示為TMFI。圖21描繪了用來確定mAB3B3. 11U5B6. 1、4· 13、和31. 1與hFcfoi α鏈的特異性結(jié) 合以及mAb 3B5. 4和5A4. 9與β 2M的特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)免疫印跡。圖22描繪了用來確定這些mAB識別的表位的Biacore表位分析。圖23描繪了 M90-F11，Μ84-Β11和M55-G12的四個連續(xù)的每日靜脈內(nèi)劑量對TG32B 小鼠的生物素IgG分解代謝的影響。圖M描繪了 M90-F11對hFcfoi Tg小鼠中hlgG分解代謝的劑量反應(yīng)(四個連續(xù) 的每日靜脈內(nèi)劑量)。圖25描繪了 M90-F11對hFcfoi Tg小鼠中hlgG分解代謝的單次劑量反應(yīng)。圖沈描繪了用于使種系化M90-F11親和成熟的方法。圖27描繪了在20mg/kg靜脈內(nèi)劑量下親和成熟的IgG和可溶性FAB對加速Tg32B 小鼠中hlgG分解代謝的影響(生物素IgG&總IgG)。圖28描繪了在5mg/kg靜脈內(nèi)劑量親和成熟IgG的和可溶性FAB對加速Tg32B小 鼠中hlgG分解代謝的影響(生物素IgG&總IgG)。圖四描繪了加入輕鏈而非重鏈的M90-F11種系變化(以粗體突出顯示)。圖30描繪了 IgG的異型變化。圖31描繪了靜脈內(nèi)施用的抗Fcfoi抗體對Tg32B小鼠中hlgG分解代謝的影響。圖32描繪了皮下施用的Μ161-Β04ΦΧ2504)抗Fcfoi抗體對Tg32B小鼠中hlgG分 解代謝的影響。圖33描繪了抗Fcfoi抗體對食蟹猴中hlgG分解代謝的影響。圖33A描繪了取得血 液樣品的時間。圖3 描繪了沒有施用抗體Fcfoi抗體M161-B04時的總體血清IgG水平。圖34描繪了以靜脈內(nèi)(圖34A)和皮下(圖34B)施用的5mg/kg M161-B04抗-Fcfoi 抗體在猴中的效果。所示為猴的個體數(shù)據(jù)。圖35描繪了以靜脈內(nèi)(圖34A)和皮下(圖34B)施用的20mg/kg M161-B04 抗-Fcfoi抗體在猴中的效果。所示為猴的個體數(shù)據(jù)。圖36描繪了以靜脈內(nèi)和皮下施用的各種濃度的M161-B04抗Fcfoi抗體在猴中的 效果(根據(jù)給藥前數(shù)據(jù)標準化數(shù)據(jù))。圖37描繪了以靜脈內(nèi)和皮下施用的M161-B04抗Fcfoi抗體對猴中血清IgA(圖 37A)、血清IgM(圖37B)和血清白蛋白(圖37C)的濃度的影響(根據(jù)給藥前數(shù)據(jù)標準化數(shù) 據(jù))。圖38描繪了 DX-2504序列及其比對。
具體實施例方式在正常情況下，F(xiàn)cfoi可延長循環(huán)IgG的半衰期。與Fcfoi結(jié)合的抗體可用于例如， 通過阻止與IgG的相互作用調(diào)節(jié)Fcfoi的功能。特別的，阻止Fcfoi與IgG的相互作用的抗 體可用于縮短IgG分子的半衰期。這些抗體及相關(guān)策略可用于治療甚至預(yù)防抗體介導(dǎo)的自身免疫性病癥，比如，多發(fā)性硬化癥，發(fā)炎性腸道病癥，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)，或本文中所述 的其他自身免疫性病癥。在大鼠被動模型中，30mg/kg的劑量的拮抗性抗大鼠Fcfoi單克隆 抗體(mAb)lG3成功地預(yù)防了實驗性自身免疫重癥肌無力(EAMG)；該劑量比在MG、SLE和 ITP的治療中使用的靜脈內(nèi)IgG(IVIG)低大約100倍。此外，遺傳上易染自身免疫性病癥比 如狼瘡或關(guān)節(jié)炎的Fcfoi缺陷小鼠在病癥的嚴重性上有明顯減緩。因此，抗人Fcfoi的性抗 體在人類自身免疫性病癥的治療上具有治療潛力。本公開進一步提供，尤其是，可用于治療自身免疫性病癥和降低IgG的循環(huán)水平 的人拮抗性抗人Fcfoi抗體。另外公開的為對具有通過抗原結(jié)合域結(jié)合并阻止IgG-Fc和人 FcRn或大鼠Fcfoi相互作用的能力的高親和性可溶性Fab (sFab)(如在可溶蛋白測定和使用 工程化以過表達人Fcfoi或大鼠Fcfoi的細胞系的活細胞結(jié)合測定中所評估的)的識別。該 sFab可以pH獨立的方式或以pH依賴的方式結(jié)合并阻止IgG-Fc和人Fcfoi或大鼠Fcfoi相 互作用，例如，在酸性PH比如pH 6。該sFab可轉(zhuǎn)化為IgG抗體。定義術(shù)語“結(jié)合蛋白”可指可與靶標分子相互作用的蛋白。該術(shù)語與“配體”可交換使 用?！癋cfoi結(jié)合蛋白，，或“Fcfoi結(jié)合配體”指可以與Fcfoi相互作用的蛋白，并且，特別包括 優(yōu)先與Fcfoi相互作用的蛋白，例如，IgG。如本文所用，術(shù)語“抗體”指包括至少一個免疫球蛋白可變域或免疫球蛋白可變域 序列的蛋白。例如，抗體可包括一個重(H)鏈可變區(qū)(在本文中縮寫為VH)，和一個輕(L) 鏈可變區(qū)(在本文中縮寫為VL)。在另一個實例中，抗體包括兩個重(H)鏈可變區(qū)和兩個輕 (L)鏈可變區(qū)。術(shù)語“抗體”包括抗體的抗原結(jié)合片段(例如，單鏈抗體、Fab和sFab片段、 F(ab' )2、Fd片段、Fv片段、scFv、和dAb片段)以及完全抗體。VH和VL區(qū)可進一步細分成高變區(qū)，其命名為“互補決定區(qū)”(“⑶R”)，散布在更 加保守的區(qū)內(nèi)，其命名為“框架區(qū)”(“FR”)。框架區(qū)和CDR的范圍已被準確的定義(參 見，Kabat, Ε· A.,等(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest (免疫學(xué) 上重要的蛋白序列)，第 5 版，U. S. D印artment of Health and Human Services，NIH 出版 號 91-3242，和 Chothia，C.等(1987) J. Mol. Biol. 196 :901_917，另參見 http://www. hgmp. mrc.ac.uk)。本文中使用Kabat定義。每個VH和VL通常包括三個⑶R和四個FR，根據(jù)以 下順序從氨基末端向羧基末端排列FR1、⑶Rl、FR2、⑶R2、FR3、⑶R3、FR4。術(shù)語全長抗體的“抗原結(jié)合片段”(或簡單稱為”抗體部分”或“片段”)，如本文所 用，指全長抗體的一個或多個保留了特異性結(jié)合于所感興趣的靶標的能力的片段。術(shù)語全 長抗體的“抗原結(jié)合片段”中包括的結(jié)合片段的實例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CHl 域組成的單價片段；(ii)F(ab' )2片段，包括在鉸鏈區(qū)由二硫橋連接的兩個Fab片段的二 價片段；(iii)Fd片段，由VH和CHl域組成；(iv)Fv片段，由抗體單臂的VL和VH域組成； (v) dAb 片段(Ward 等，(1989)Nature 341 :544-546)，其由 VH 域組成；以及(vi)保留了功 能的分離的互補決定區(qū)(CDR)。此外，盡管Fv片段的兩個域，VL和VH，由不同的基因編碼， 但可使用重組方法，通過使其制備為單獨的蛋白鏈的合成連接體將其連接在一起，其中VL 和VH區(qū)配對形成被稱為單鏈Fv(scFV)的單價分子。參見，例如，Bird等(1988)Science 242 :423-426 ；和 Huston 等(1988)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 :5879_5883?？贵w片段可使用包括為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)的任何合適的技術(shù)獲得。術(shù)語“單特異性抗體”指對特定靶標，例如，表位，表現(xiàn)出單獨的結(jié)合特異性和親和性的抗 體。該術(shù)語包括“單克隆抗體”或“單克隆抗體組合物”，如本文所用，指具有單分子組成的 抗體或其片段的制品。如本文所用，“同種型”指由重鏈恒定區(qū)基因編碼的抗體類別(例如， IgM 或 IgGl)。如本文所用，“結(jié)合親和性”指表觀結(jié)合常數(shù)或Ka。Ka為解離常數(shù)(Kd)的倒數(shù)。結(jié) 合蛋白可能，例如，對特定靶標分子具有至少10_5、10_6、10_7、10_8、KT9UO,和10_"M的結(jié)合 親和性。結(jié)合配體對第一靶標相對于第二靶標更高的結(jié)合親和性可由比與第二靶標結(jié)合的 Ka(或數(shù)值Kd)，更高的與第一靶標結(jié)合的Ka(或更小的數(shù)值Kd)表示。在所述情況下，相對 于第二靶標(例如，同一蛋白的第二構(gòu)型或其模擬物；或第二蛋白)，結(jié)合蛋白對第一靶標 (例如，蛋白的第一構(gòu)型或其模擬物)具有特異性。結(jié)合親和性的區(qū)別(例如，特異性或其 他比較)可為至少 1. 5、2、3、4、5、10、15、20、50、70、80、100、500、1000、或 IO5 倍。結(jié)合親和性可通過包括平衡透析、平衡結(jié)合、凝膠過濾、ELISA、表面等離子體共 振、或光譜法(例如，使用熒光測定)的各種方法確定。示例性的測量結(jié)合親和性的條件為 30°C和pH 7. 2下的PBS (磷酸鹽緩沖液)。這些技術(shù)可用于測量已結(jié)合的和游離的結(jié)合蛋 白的濃度作為結(jié)合蛋白(或靶標)濃度的函數(shù)。已結(jié)合的結(jié)合蛋白([已結(jié)合])的濃度通 過以下方程與游離的結(jié)合蛋白的濃度([游離])以及在靶標上對結(jié)合蛋白的結(jié)合位點的濃 度相關(guān)，其中(N)為每個靶標分子的結(jié)合位點的數(shù)目[已結(jié)合]=N.[游離]/((1/Ka)+[游離])。但是并不是總是需要準確地確定Ka，因為有時獲得親和性的量化測量已經(jīng)足夠， 例如，使用比如ELISA或FACS分析的方法確定的結(jié)果與Ka成比例，并因此可用于比較，比 如確定是否較高親和性是，例如，2倍高，以獲得親和性的量化測量，或獲得親和性的推導(dǎo)， 例如，通過功能性測定中的活性，例如，體外或體內(nèi)測定。術(shù)語“同源配體”指Fcfoi的天然生成的配體，包括其天然生成的變異體(例如，剪 接變異體、天然生成的突變體、和同等型(isoform))?！氨Ｊ匕被崽娲睘槭褂镁哂邢嗨苽?cè)鏈的氨基酸殘基替代氨基酸殘基的一種替 代。本領(lǐng)域內(nèi)已定義具有相似側(cè)鏈的氨基酸殘基家族。這些家族包括具有堿性側(cè)鏈(例 如，賴氨酸，精氨酸，組氨酸)、酸性側(cè)鏈(例如，天門冬氨酸，谷氨酸)、不帶電荷的極性側(cè)鏈 (例如，甘氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺，絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸，半胱氨酸)、非極性側(cè)鏈(例 如，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，脯氨酸，苯丙氨酸，蛋氨酸，色氨酸)，β -分支側(cè)鏈 (例如，蘇氨酸，纈氨酸，異亮氨酸)和芳香族側(cè)鏈(例如，酪氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，組氨 酸)的氨基酸。很多的框架和CDR氨基酸殘基包括一個或多個保守性替代是可能的。生物高分子的共有序列可包括在不同氨基酸間變化的位點。例如，在所述上下文 中的符號“X” 一般指任何氨基酸(例如，二十種天然氨基酸中的任何一種或十九種非半胱 氨酸氨基酸中的任何一種)。其它被可允許的氨基酸還可例如使用括號和斜線標明。例如， “ (A/W/F/N/Q)，，意為在特定位點上允許丙氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺?！叭诵?effectively human) ”免疫球蛋白可變區(qū)為包括足夠數(shù)量的人框架氨基 酸位置以致該免疫球蛋白可變區(qū)在正常人體內(nèi)不引起免疫原性反應(yīng)的免疫球蛋白可變區(qū)。 “人效”抗體為包括足夠數(shù)量的人氨基酸位置以致該抗體在正常人體內(nèi)不引起免疫原性反 應(yīng)的抗體。
“表位”指被結(jié)合蛋白(例如，抗體比如Fab或全長抗體)結(jié)合的靶標化合物上的 位點。在該靶標化合物為蛋白的情況下，該位點可完全由氨基酸組分組成，完全由該蛋白的 氨基酸的化學(xué)修飾(例如，糖基部分)組成，或由其組合組成。重疊表位包括至少一個共同
氨基酸殘基。對兩種序列之間“同源性”或“序列同一性”(在本文中以上術(shù)語可交換使用)進 行的計算如下所示。將序列比對以用于最佳比較目的(例如，為了最佳比對，可在第一和第 二氨基酸或核酸序列中的一個或兩個序列中引入缺口，并且為了比較目的可以忽略非同源 性序列)。最佳比對確定為以Blosum 62評分矩陣并以缺口罰分為12、缺口延長罰分為4、 以及移碼缺口罰分為5使用GCG軟件包中的GAP程序確定的最佳評分。然后比較位于相應(yīng) 氨基酸位置或核苷酸位置的氨基酸殘基或核苷酸。當?shù)谝恍蛄兄械奈恢门c第二序列中的 相應(yīng)位置被相同的氨基酸殘基或核苷酸占據(jù)時，則所述分子在該位置為相同的(如本文所 用，氨基酸或核酸“同一性”等同于氨基酸或核酸”同源性”)。該兩種序列之間的同一性百 分比為所述序列共有的相同位置的數(shù)量的函數(shù)。在一個實施方案中，用于比較的參考序列的長度為該參考序列的長度的至少 30%、至少 40%、至少 50%、至少 60%、至少 70%、80%、90%、92%、95%、97%、98% 或 100%。例如，該參考序列可為免疫球蛋白可變域序列的長度?！叭嗽椿泵庖咔虻鞍卓勺儏^(qū)為被修飾以包括足夠數(shù)量的人框架氨基酸位置以至 于免疫球蛋白可變區(qū)在正常人體內(nèi)不引起免疫原性反應(yīng)的免疫球蛋白可變區(qū)。對“人源化” 免疫球蛋白的描述包括，例如，US6, 407，213和US 5，693，762。如在本文中所用，術(shù)語“在低嚴謹性、中嚴謹性、高嚴謹性或非常高嚴謹 性的條件下雜交”描述了雜交和清洗的條件。進行雜交反應(yīng)的指南可在Current Protocols inMolecular Biology (現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗指南)，John Wiley & Sons， N. Y. (1989)6. 3. 1-6. 3. 6中發(fā)現(xiàn)，其通過引用并入本文。水相和非水相方法已在該參考文獻 中描述并可使用其中任何一種。本文中所指特異性雜交條件如下(1)低嚴謹性雜交條件 為在大約45°C下在6X氯化鈉/檸檬酸鈉(SSC)中，隨后在至少50°C下在0. 2X SSC、0. 1% SDS中清洗兩次(對于低嚴謹性條件清洗的溫度可以增高到55°C) ； (2)中嚴謹性雜交條件 為在大約45°C下在6X SSC中，隨后在60°C下在0. 2X SSC、0. 1 % SDS中清洗一次或多次； (3)高嚴謹性雜交條件為在大約45°C下在6X SSC中，隨后在65°C下在0. 2X SSC.0. 1%SDS 中清洗一次或多次；并且(4)非常高嚴謹性條件為在65°C下在0. 5M磷酸鈉、7% SDS，隨后 在65°C下在0. 2X SSC、0. 1% SDS中清洗一次或多次。非常高嚴謹性條件(4)為優(yōu)選條件， 并且除非另外說明，否則應(yīng)使用該條件。本公開包括在低、中、高、非常高嚴謹性條件下與本 文所述核酸或其互補序列的雜交的核酸，例如，本文中所述的編碼結(jié)合蛋白的核酸。該核酸 可為參考核酸的同樣長度或在其長度的30 %、20 %、或10 %之內(nèi)。該核酸可對應(yīng)于編碼免 疫球蛋白可變域序列的區(qū)。FcRn結(jié)合蛋白可具有相對本文中所述的結(jié)合蛋白的突變(例如，至少一個\兩個 或四個，和/或少于15、10、5、或3個)(例如，保守或非必須氨基酸替代)，其對蛋白功能上 沒有顯著影響。可預(yù)測特定替代是否可以耐受，即，將不會負面影響生物特性，比如結(jié)合活 性，例如使用 Bowie，等(1990) Science 247 :1306-1310 的方法?！懊庖咔虻鞍子颉敝冈醋悦庖咔虻鞍追肿拥目勺兓蚝愣ㄓ虻慕Y(jié)構(gòu)域。免疫球蛋白域通常包括兩個由大約七個鏈形成的折疊，以及一個保守二硫鍵(參見，例如， A.F.Williams 禾口 A.N.Barclay 1988 Ann. Rev Immunol. 6 :381-40 。如在本文中所用，“免疫球蛋白可變域序列”指可形成免疫球蛋白可變域的結(jié)構(gòu)以 致一個或多個CDR區(qū)位于合適于抗原結(jié)合位點的構(gòu)型的氨基酸序列。例如，該序列可包括 天然生成的可變域的全部或部分氨基酸序列。例如，該序列可能省略一個、兩個或更多個 N-或C-末端氨基酸、內(nèi)部氨基酸，可包括一個或更多個插入或額外末端氨基酸，或可包括 其他改變。在一個實施方案中，包括免疫球蛋白可變域序列的多肽可與另一免疫球蛋白可 變域序列締合形成靶標結(jié)合結(jié)構(gòu)(或“抗原結(jié)合位點”)，例如，優(yōu)先與Fcfoi結(jié)構(gòu)相互作用 的結(jié)構(gòu)。抗體的VH或VL鏈還可包括重鏈或輕鏈恒定區(qū)的全部或部分，以由此分別形成重 或輕免疫球蛋白鏈。在一個實施方案中，該抗體為兩個重免疫球蛋白鏈和兩個輕免疫球蛋 白鏈的四聚體，其中重和輕免疫球蛋白鏈通過例如二硫鍵相互連接。重鏈恒定區(qū)包括三個 結(jié)構(gòu)域，CH1，CH2和CH3。輕鏈恒定區(qū)包括一個CL域。重鏈和輕鏈的可變區(qū)包含與抗原相 互作用的結(jié)合域?？贵w的恒定區(qū)通常介導(dǎo)抗體與宿主細胞或因子的結(jié)合，所述宿主細胞或 因子包括多種免疫系統(tǒng)細胞(例如，效應(yīng)細胞)和經(jīng)典補體系統(tǒng)的第一組分(Clq)。術(shù)語 “抗體”包括IgA、IgG、IgE、IgD、IgM型(以及其亞型)的完整免疫球蛋白。免疫球蛋白輕 鏈可為以下類型κ或λ。在一個實施方案中，抗體為糖基化的?？贵w可在抗體依賴型細 胞毒性和/或補體介導(dǎo)的細胞毒性中具有功能?？贵w的一個或多個區(qū)可為人或人效區(qū)。例如，一個或多個可變區(qū)可為人的或人效 的。例如，一個或多個 CDR 可為人的，例如，HC CDRUHC CDR2、HC CDR3、LC CDRULC CDR2、 和LC CDR3。每個輕鏈CDR均可為人的。HC CDR3可為人的。一個或多個框架區(qū)可為人的， 例如，HC或LC的FR1、FR2、FR3、和FR4。在一個實施方案中，所有的框架區(qū)均為人的，例如， 源自人體細胞，例如，產(chǎn)生免疫球蛋白的造血細胞或非造血細胞。在一個實施方案中，人序 列為種系序列，例如，由種系核酸編碼。一個或多個恒定區(qū)可為人的或人效的。在一個實施 方案中，抗體的至少70、75、80、85、90、92、95、或98%、或全部可為人的或人效的?？贵w全部或者部分可由免疫球蛋白基因或其區(qū)段編碼。示例性人免疫球蛋白基因 包括 κ、λ、α (IgAl 和 IgA2)、y (IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、δ、ε 和 μ 恒定區(qū)基因，以及 無數(shù)免疫球蛋白可變區(qū)基因。全長免疫球蛋白“輕鏈”(大約25KDa或214個氨基酸)由可 變區(qū)基因在NH2-末端(大約110個氨基酸)以及κ或λ恒定區(qū)基因在COOH-末端編碼。 全長免疫球蛋白“重鏈”(大約50KDa或446個氨基酸)，相似地由可變區(qū)基因(大約116個 氨基酸)和一個前述的其他恒定區(qū)基因編碼，例如，Y (編碼大約330個氨基酸)?！胺蛛x的組合物”指從可以獲得該分離的組合物的天然樣品的至少一種組分的至 少90%中提取出來的組合物。如果所感興趣的物類(species)或群體在重量-重量基礎(chǔ)上 為至少5、10、25、50、75、80、90、92、95、98、或99%純，則合成或天然生成的組合物可為“至 少某一純度的組合物”。在Fcfoi或其部分的構(gòu)型的模擬物的上下文里，術(shù)語“模擬物”指相對天然生成的 FcRn或其部分具有對至少一種特定構(gòu)型的偏好的修飾的Fcfoi。“非必需”氨基酸殘基為可在結(jié)合劑(例如，抗體)的野生型序列中改變而不消除 或不顯著改變其生物活性的殘基，而“必需”氨基酸殘基將導(dǎo)致所述改變。
本文所用措辭“腸胃外施用”和“腸胃外地施用”意為有別于腸內(nèi)施用和外用 (topical administration)的施用模式，通常通過注射，并非限制性地包括靜脈內(nèi)、肌肉 內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)、囊內(nèi)、眶內(nèi)、心內(nèi)、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮、關(guān)節(jié)內(nèi)、包膜下、蛛網(wǎng) 膜下腔、椎管內(nèi)、硬膜外和胸骨內(nèi)注射以及輸注。術(shù)語“多肽”或“肽”(其可交替使用)指由肽鍵連接的三個或多個氨基酸的聚合 物，例如，在長度上介于3和30個氨基酸之間，12和60個氨基酸之間，或30和300個氨基 酸之間，或超過300個氨基酸。多肽可包括一個或多個非天然氨基酸。通常，多肽僅包括天 然氨基酸?！暗鞍住笨砂ㄒ粋€或多個多肽鏈。相應(yīng)的，術(shù)語“蛋白”包含多肽。蛋白或多肽 也可包括一種或多種修飾，例如，糖基化，酰胺化，磷酸化，亞硝基化，等等。術(shù)語“小肽”可 用于描述在長度上介于3個和30個氨基酸之間的多肽，例如，在長度上介于8個和M個氨 基酸之間。“預(yù)防有效量”指在必要的劑量和時間段內(nèi)有效地達到所期預(yù)防結(jié)果的量。通常， 因為預(yù)防劑量在受治療者患病前或在病的早期階段使用，所以預(yù)防有效劑量將比治療有效 劑量小。如本文所用，術(shù)語“大致上相同”(或“大致上同源”)在本文中用于指第一氨基 酸或核酸序列包含足夠數(shù)量的與第二氨基酸或核酸序列相同或等同(例如，具有相似的側(cè) 鏈，例如，保守氨基酸替代)的氨基酸殘基或核苷酸，以至于該第一和第二氨基酸或核酸序 列具有相似活性(或編碼具有相似活性的蛋白)，所述活性例如，結(jié)合活性、結(jié)合偏好、或生 物活性。對于抗體，第二抗體對于相同的抗原具有相同的特異性和至少50%的親和性。與本文中所公開的序列相似或同源(例如，至少大約85%序列同一性)的序列也 是本申請的一部分。在一些實施方案中，序列同一性可為大約85^^90^^91^^92^^93%, 94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高。另外，當核酸區(qū)段在選擇性雜交條件(例如，高 嚴謹性雜交條件)下與該鏈的互補序列雜交時存在大致同一性。核酸可存在于完整細胞 中、細胞溶解產(chǎn)物中，或以部分純化或大致上純化的形式存在?？墒褂帽绢I(lǐng)域內(nèi)任何已知的方法確定統(tǒng)計顯著性。示例性統(tǒng)計檢驗包括學(xué)生T 檢驗、曼惠特尼U非參數(shù)檢驗(Mann Whitney U non-parametric test)和魏氏非參數(shù)統(tǒng)計 檢驗(ffilcoxon non-parametric statistical test)。一些統(tǒng)計顯著關(guān)系具有小于 0· 05 或0. 02的P值。特定結(jié)合蛋白可顯示統(tǒng)計顯著的(例如，P值< 0. 05或0. 02)例如特異 性或結(jié)合的差異。術(shù)語“誘導(dǎo)”、“抑制”、“加強”、“升高”、“增加”、“降低”或類似術(shù)語，例如， 其指明在兩種狀態(tài)之間可分辨的質(zhì)量或數(shù)量區(qū)別，并可指兩種狀態(tài)之間的區(qū)別，例如統(tǒng)計 顯著的區(qū)別?！爸委熡行┝俊闭{(diào)節(jié)可測量的參數(shù)，例如，循環(huán)IgG抗體水平，達相對未處理的受 治療者統(tǒng)計顯著程度或至少大約20%、至少大約40%、至少大約60%、或至少大約80%。化 合物調(diào)節(jié)可測量的參數(shù)例如自身免疫性的能力可在預(yù)測人類自身免疫性病癥的動物模型 系統(tǒng)中進行評估。另外，可通過檢查該化合物在體外調(diào)節(jié)參數(shù)的能力來評估組合物的這個 特性，例如，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的測定。本發(fā)明的其他特征和優(yōu)勢將在以下詳細描述和權(quán)利要求中更加清楚。本發(fā)明的實 施方案可包括本文所述的特征的任何組合。在任何情況下，術(shù)語“實施方案”都不排除本文 所公開的一個或多個其它特征。
FcRn 序列以下序列比對為人Fcfoi α鏈氨基酸序列與大鼠Fcfoi α鏈氨基酸序列的比對。示 例性Fcfoi蛋白可包括該兩種序列中的一種，或其片段，例如，不包括信號序列的片段信號序列 α工域
α _人MGVPRPQPffALGLLLFLLPGSLG AESHLSLLYHLTAVSSPAPGTPAFWVSGWLGPQQYLS
α _大鼠=MGMSQPGV-LLSLLLVLLPQTffG AEPRLPLMYHLAAVSDLSTGLPSFWATGWLGAQQYLT
α丄域 α 2域
人類:YNSLRGEAEPCGAWVWENQVSffYffEKETTDLRIKEKLFLEAFKALGGK—GP YTLQGLLG
α _大鼠:YNNLRQEADPCGAWIWENQVSffYffEKETTDLKSKEQLFLEAIRTLENQINGT FTLQGLLG
α 2域
人類CELGPDNTSVPTAKFALNGEEFMNFDLKQGTWG⑶WPEALAISQRWQQQDKAANKELTFL
大鼠:CELAPDNSSLPTAVFALNGEEFMRFNPRTGNWSGEWPETDIVGNLWMKQPEAARKESEFL
α 2域 α 3域
人類LFSCPHRLREHLERGRGNLEffK EPPSMRLKARPSSPGFSVLTCSAFSFYPPELQLRFLRN
α _大鼠=LTSCPERLLGHLERGRQNLEffK EPPSMRLKARPGNSGSSVLTCAAFSFYPPELKFRFLRN
α 3域
人類:GLAAGTGQ⑶FGPNSDGSFHASSSLTVKSGDEHHYCCIVQHAGLAQPLRVELE
大鼠:GLASGSGNCSTGPNGDGSFHAWSLLEVKRGDEHHYQCQVEHEGLAQPLTVDLD
跨膜 胞質(zhì)域
人類:SPAKSSVLVVGIVIGVLLLTAAAVGGALLff RRMRSGLPAPffISLRGDDTGVLLPTPGEAQ
α _大鼠:SPARSSVPVVGIILGLLLVVVAIAGGVLLff NRMRSGLPAPWLSLSGDDSGDLLPGGNLPP
人類:DADLKDVNVIPATA(SEQ ID NO :1)
大鼠:EAEPQGVNAFPATS(SEQ ID NO :2)
以下序列比對為人β2微球蛋白鏈氨基酸序列與大鼠β2微球蛋白鏈氨基酸序列的
比對。示例性i^cRn蛋白可包括該兩種序列中的一種，或其片段，例如，不包括信號序列的片段信號序列β 2微球蛋白β 2m_ 人類:MSRSVALAVLALLSLSGLEA IQRTPKIQVYSRHPAENGKSNFLNCYVSGFHPSDIEVDLLβ 2m_ 大鼠MARSVTVIFLVLVSLAWLA IQKTPQIQVYSRHPPENGKPNFLNCYVSQFHPPQIEIELLβ 2微球蛋白β 2m_ 人類KNGERIEKVEHSDLSFSKDWSFYLLYYTEFTPTEKDEYACRVNHVTLSQPKIVKWDRD
M(SEQID NO 3)β 2m_ 大鼠KNGKKIPNIEMSDLSFSKDWSFYILAHTEFTPTETDVYACRVKHVTLKEPKTVTWDRD M(SEQID NO 4)編碼Fcfoi蛋白α鏈的示例性核酸序列可包括以下序列FcRNa 核酸序列，人(Homo sapiens)GTTCTTCAGGTAOGAGGAGGGCATTGTTGTCAGTCTGGACCGAGCCCGCAGAGCCCCTCCTOGGCGTCCTGGTCCCGGCCGTGCCCGCGGTGTCCCGGGAGGMGGGGCGGGCOGGGGGTCGGGAGGAGTCACGTGCCCCCTCCOGCCCCAGGTOGTCCTCTCAGCATGGGGGTCCCGCGGCCTCAGCCCTGGGCGCTGGGGCTCCTGCTCTTTCTCCTTCCTGGGAGCCTGGGOGCAGMAGCCACCTCTCCCTCCTGTACCACCTTACCGCGGTGTCC
TCGCCTGCCCOGGGGACTCCTGCCTTCTGGGTGTCCGGCTGGCTGGGCCOGCAGCAGTACCTGAGCTACAATAGCCTGOGGGGCGAGGOGGAGCCCTGTGGAGCTTGGGTCTGGGMMCCAGGTGTCCTGGTATTGGGAGMAGAGACCACAGATCTGAGGATCMGGAGMGCTCTTTCTGGMGCTTTCMAGCTTTGGGGGGAMAGGTCCCTACACTCTGCAGGGCCTGCTGGGCTGTGMCTGGGCCCTGACMCACCTOGGTGCCCACOGCCA
AGTTOGCCCTGMCGGOGAGGAGTTCATGMTTTOGACCTCMGCAGGGCACCTGGGGTGGGGACTGGCCOGAGGCCCTGGCTATCAGTCAGOGGTGGCAGCAGCAGGACMGGCGGCCMCMGGAGCTCACCTTCCTGCTATTCTCCTGCCCGCACOGCCTGOGGGAGCACCTGGAGAGGGGCOGOGGMACCTGGAGTGGMGGAGCCCCCCTCCATGCGCCTGMGGCCCGACCCAGCAGCCCTGGCTTTTCCGTGCTTACCTGCAGOGCCTTCTCCTTCTACCCTCCGGAGCTGCMCTTCGGTTCCTGOGGMTGGGCTGGCCGCTGGCACOGGCCAGGGTGACTTOGGCCCCMCAGTGACGGATCCTTCCACGCCTOGTOGTCACTMCAGTCMMGTGGOGATGAGCACCACTACTGCTGCATTGTGCAGCAOGOGGGGCTGGCGCAGCCCCTCAGGGTGGAGCTGGMTCTCCAGCCMGTCCTCOGTGCTOGTGGTGGGMTOGTCATOGGTGTCTTGCTACTCAOGGCAGOGGCTGTAGGAGGAGCTCTGTTGTGGAGMGGATGAGGAGTGGGCTGCCAGCCCCTTGGATCTCCCTTOGTGGAGAOGACACOGGGGTCCTCCTGCCCACCCCAGGGGAGGCCCAGGATGCTGATTTGMGGATGTMATGTGATTCCAGCCACOGC
CTGACCATCCGCCATTCCGACTGCTAMAGOGMTGTAGTCAGGCCCCTTTCATGCTGTGAGACCTCCTGGMCACTGGCATCTCTGAGCCTCCAGMGGGGTTCTGGGCCTAGTTGTCCTCCCTCTGGAGCCCCGTCCTGTGGTCTGCCTCAGTTTCCCCTCCTMTACATATGGCTGTTTTCCACCTOGATMTATMCACGAGTTTGGGCCCGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA(SEQ ID NO 5)示例性的人Fcfoi (胞外域)加GPI DNA序列(小寫加粗)的核酸序列如下所示。ATGGGGGTCCOGOGGCCTCAGCCCTGGGOGCTGGGGCTCCTGCTCTTTCTCCTTCCTGGGAGCCTGGGCGCAGMAGCCACCTCTCCCTCCTGTACCACCTTACOGCGGTGTCCTOGCCTGCCCCGGGGACTCCTGCCTTCTGGGTGTCCGGCTGGCTGGGCCCGCAGCAGTACCTGAGCTACMTAGCCTGCGGGGOGAGGCGGAGCCCTGTGGAGCTTGGGTCTGGGAMACCAGGTGTCCTGGTATTGGGAGMAGAGACCACAGATCTGAGGATCMGGAGMGCTCTTTCTGGMGCTTTCMAGCTTTGGGGGGMMGGTCCCTACACTCTGCAGGGCCTGCTGGGCTGTGMCTGGGCCCTGACMCACCTCGGTGCCCACOGCCMGTTCGCCCTGMOGGCGAGGAGTTCATGMTTTCGACCTCMGCAGGGCACCTGGGGTGGGGACTGGCCOGAGGCCCTGGCTATCAGTCAGOGGTGGCAGCAGCAGGACMGGOGGCCMCMGGAGCTCACCTTCCTGCTATTCTCCTGCCOGCACCGCCTGCGGGAGCACCTGGAGAGGGGCOGOGGMACCTGGAGTGGMGGAGCCCCCCTCCATGCGCCTGMGGCCCGACCCAGCAGCCCTGGCTTTTCOGTGCTTACCTGCAGCGCCTTCTCCTTCTACCCTCOGGAGCTGCMCTTOGGTTCCTGCGGMTGGGCTGGCCGCTGGCACOGGCCAGGGTGACTTOGGCCCCMCAGTGACGGATCCTTCCACGCCTOGTCGTCACTMCAGTCAMAGTGGCGATGAGCACCACTACTGCTGCATTGTGCAGCACGCGGGGCTGGOGCAGCCCCTCAGGGTGGAGCTGGMTCTCCAGCCMGTCCTCCcggccgctcgacgggctacgagcatcagtaacactactaggcgcaggcctactactatcactactaccagcactactacgatttgggccataa(SEQ ID NO 6)編碼β 2-微球蛋白(β 2Μ)的示例性核酸序列可包括以下序列> β-2-微球蛋白(Β2Μ)核苷酸，人(Homo sapiens)MTATMGTGGAGGOGTCGCGCTGGCGGGCATTCCTGMGCTGACAGCATTOGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCTACTCTCTCTTTCTGGCCTGGAGGCTATCCAGCGTACTCCMAGATTCAGGTTTACTCACGTCATCCAGCAGAGMTGGMAGTCMATTTCCTGMTTGCTATGTGTCTGGGTTT
CATCCATCOGACATTGMGTTGACTTACTGMGMTGGAGAGAGMTTGMMAGTGGAGCATTCAGACTTGTCTTTCAGCMGGACTGGTCTTTCTATCTCTTGTACTACACTGMTTCACCCCCACTGAMMGATGAGTATGCCTGCOGTGTGMCCATGTGACTTTGTCACAGCCCMGATAGTTMGTGGGATCGAGACATGTMGCAGCATCATGGAGGTTTGMGATGCOGCATTTGGATTGGATGMTTCCMATTCTGCTTGCTTGCTTTTTMTATTGATATGCTTATACACTTACACTTTATGCACMMTGTAGGGTTATMTMTGTTMCATGGACATGATCTTCTTTATMTTCTACTTTGAGTGCTGTCTCCATGTTTGATGTATCTGAGCAGGTTGCTCCACAGGTAGCTCTAGGAGGGCTGGCMCTTAGAGGTGGGGAGCAGAGMTTCTCTTATCCMCATCMCATCTTGGTCAGATTTGMCTCTTCMTCTCTTGCACTCMAGCTTGTTMGATAGTTMGOGTGCATMGTTMCTTCCMTTTACATACTCTGCTTAGMTTTGGGGGMAATTTAGMATATMTTGACAGGATTATTGGMATTTGTTATAATGAATGAAACATTTTGTCATATAAGATTCATATTTACTTCTTATACATTTGATAAAGTAAGGCATGGTTGTGGTTMTCTGGTTTATTTTTGTTCCACMGTTMATMATCATAMACTTGATGTGTTATCTCTTA(SEQ ID NO 7)小鼠抗人Fcfoi抗體抗體結(jié)構(gòu)和序列本發(fā)明涉及特異性結(jié)合于至少一個Fcfoi表位的抗體，其中該抗體與Fcfoi表位的 結(jié)合抑制IgG的Fc部分與Fcfoi結(jié)合。本發(fā)明因此涉及與Fcfoi阻斷性抗體。該阻斷性抗 體可為IgG、IgM、IgA、IgD或IgE。在一個實施方案中，該阻斷性抗體為IgG。在一個實施 方案中，本發(fā)明的抗體將具有IOkT1的結(jié)合親和性。在另一實施方案中，本發(fā)明的抗體將具 有IO11M-1的結(jié)合親和性。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及由:3B3. 11雜交瘤、31. 1雜交瘤、4B4. 12雜交瘤、或 17D3雜交瘤生成的單克隆抗體。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及結(jié)合于Fcfoi線性表位的抗體。在另一個實施方案 中，本發(fā)明涉及結(jié)合于Fcfoi構(gòu)象表位(conformational epitope)的抗體。在一個實施方 案中，本發(fā)明的抗體與包含EPPSMRLKAR(SEQ ID NO 105)或其片段的氨基酸序列結(jié)合。在 另一實施方案中，本發(fā)明的抗體與包含CSAFYPPELQLRFFLRNGL(SEQ IDNO :106)或其片段的
氨基酸序列結(jié)合。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗體與被:3B3. 11和31. 1識別的相同的表位特異性 反應(yīng)?？赏ㄟ^競爭性結(jié)合檢測法確定所述抗體。本發(fā)明的抗Fcfoi抗體，包括其Vh和\域，以及⑶R，的說明性實施方案的氨基酸 (AA)序列均在表1中列舉?？贵w的兩個特異性實施方案被鑒別為:3B3. 11和31. 1。表1 本發(fā)明的小鼠抗體的⑶R。
權(quán)利要求
1.一種分離的抗體，包含重鏈(HC)免疫球蛋白可變域序列和輕鏈(LC)免疫球蛋白可 變域序列，其中所述重鏈免疫球蛋白可變域序列和所述輕鏈免疫球蛋白可變域序列形成與人 FcRn結(jié)合的抗原結(jié)合位點；并且其中該抗體包括一種或多種以下特征(a)人CDR或人框架區(qū)；(b)該LC免疫球蛋白可變域序列包含與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11或DX2500的LC可變域CDR至少85%相同的一個或多個CDR ；(c)該HC免疫球蛋白可變域序列包含與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11或DX2500的HC可變域CDR至少85%相同的一個或多個CDR ；(d)該LC 免疫球蛋白可變域序列與 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、 M0090-F11或DX2500的LC可變域至少85%相同；(e)該HC 免疫球蛋白可變域序列與 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、 M0090-F11或DX2500的HC可變域至少85%相同；并且(f)該抗體結(jié)合與被M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、M0090-F11 或 DX2500結(jié)合的表位重疊的表位。
2.一種分離的抗體，所述抗體與選自 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、 M0090-F11和DX2500組成的組的抗體至少85%相同。
3.一種分離的抗體，其中該抗體選自 M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、M0161-B04、 M0090-F11 和 DX2504 組成的組。
4.一種分離的抗體，所述抗體包含M0161-B04的CDR。
5.一種分離的抗體，所述抗體與M0161-B04至少85%相同。
6.一種分離的抗體，所述抗體包含M0171-A03的CDR。
7.一種分離的抗體，所述抗體與M0171-A03至少85%相同。
8.一種分離的抗體，所述抗體包含M0171-A01的CDR。
9.一種分離的抗體，所述抗體與M0171-A01至少85%相同。
10.一種分離的抗體，所述抗體包含M0159-A07的CDR。
11.一種分離的抗體，所述抗體與M0159-A07至少85%相同。
12.—種分離的抗體，所述抗體包含M0090-F11的⑶R。
13.一種分離的抗體，所述抗體與M0090-F11至少85%相同。
14.一種分離的抗體，所述抗體包含DX-2500的CDR。
15.一種分離的抗體，所述抗體與DX-2500至少85%相同。
16.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含M0161-B04的可變域序列，并 且該LC可變域序列包含M0161-B04的可變域序列。
17.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含M0171-A03的可變域序列，并 且該LC可變域序列包含M0171-A03的可變域序列。
18.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含M0171-A01的可變域序列，并 且該LC可變域序列包含M0171-A01的可變域序列。
19.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含M0159-A07的可變域序列，并 且該LC可變域序列包含M0159-A07的可變域序列。
20.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含M0090-F11的可變域序列，并 且該LC可變域序列包含M0090-F11的可變域序列。
21.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該HC可變域序列包含DX2500的可變域序列，并且 該LC可變域序列包含DX2500的可變域序列。
22.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該抗體與被M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11 或 DX2500 結(jié)合的 FcRn 表位結(jié)合。
23.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中該抗體與M0171-A03、M0171-A01、M0159-A07、 M0161-B04.M0090-F11 或 DX2500 競爭與 FcRn 的結(jié)合。
24.一種分離的抗體或其片段，其與人Fcfoi結(jié)合，其中該抗體針對人Fcfoi重鏈或其片 段生成，其中該抗體功用為結(jié)合于人Fcfoi的IgG的非競爭性抑制劑，并且其中該抗體不與 β 2-微球蛋白結(jié)合。
25.一種分離的抗體或其片段，其與人Fcfoi結(jié)合，其中該抗體針對人Fcfoi重鏈或其片 段生成，其中當不與Fcfoi復(fù)合時，該抗體不與β 2-微球蛋白結(jié)合，并且其中該抗體不產(chǎn)生 自Fcfoi-/-敲除小鼠。
26.如權(quán)利要求25所述的抗體，其中該抗體選自由3Β3.11,31. 1、4Β4· 12和17D3組成的組。
27.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與人Fcfoi在約pH范圍5-7.4 以小于IOOnM的解離常數(shù)(Kd)結(jié)合。
28.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗原結(jié)合位點與人Fcfoi特異性結(jié)合。
29.如權(quán)利要求1- 中任一項所述的抗體，其中該抗體與穩(wěn)定表達1 ! 的細胞系結(jié)合。
30.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該抗體調(diào)節(jié)Fcfoi與抗體/免疫球蛋白 恒定區(qū)的結(jié)合。
31.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該抗體與!^cfoi的α亞基結(jié)合。
32.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoia鏈的α 、α2或者 α 3域結(jié)合。
33.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體不與Fcfoi的β亞基結(jié)合，即， 該蛋白僅與α亞基結(jié)合。
34.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoi的β亞基結(jié)合，其中該 β亞基與α亞基相聯(lián)。
35.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該α亞基和該β亞基正確地組裝為 FcRn0
36.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與包括α亞基和β亞基并正 確組裝的Fcfoi結(jié)合。
37.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體在pH約6下以小于大約800nM、 小于大約600nM、小于大約300nM、小于大約ΙΟΟηΜ、小于大約50nM、小于大約25nM、小于大約 IOnM或者小于大約5nM的IC5tl抑制IgG-Fc的結(jié)合。
38.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體為可溶性Fab。
39.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體通過其抗原結(jié)合域以及其Fc區(qū) 與Fcfoi結(jié)合。
40.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoi的結(jié)合在2-10的范圍 內(nèi)是大致上PH獨立的。
41.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoi的結(jié)合在6-8的范圍內(nèi) 是大致上PH獨立的。
42.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體在pH7. 5具有小于0.01、0. 001、0· 0001、0. 00001s-1 的 k離解。
43.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoi的結(jié)合是大致上pH依 賴的。
44.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中相對于大鼠Fcfoi，該抗體以pH-依賴 性或pH-獨立性的方式優(yōu)先與人Fcfoi結(jié)合。
45.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體在內(nèi)體中或在內(nèi)體條件下與 FcRn結(jié)合。
46.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該抗體在pH7. 5不釋放Fcfoi。
47.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中當施用于受治療者時，該抗體引起與 自身免疫性疾病相關(guān)聯(lián)的癥狀的改善。
48.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該HC可變域序列和該LC可變域序列 為同一多肽鏈的組分。
49.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該HC可變域序列和該LC可變域序列 為不同多肽鏈的組分。
50.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體為全長抗體。
51.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體為人抗體或人源化抗體或者在 人中具有非免疫原性。
52.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體包含人抗體框架區(qū)。
53.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體包含F(xiàn)c域。
54.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體為鼠抗體。
55.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體為單克隆抗體。
56.如權(quán)利要求116中任一項所述的抗體，其中該抗體為嵌合的或人源化的。
57.如權(quán)利要求146中任一項所述的抗體，其中該抗體選自由Fab、F(ab)‘ 2、Fv和 ScFv組成的組。
58.如權(quán)利要求H6中任一項所述的抗體，其中該抗體與Fcfoi的結(jié)合在pH6.0到8.0 的范圍內(nèi)獨立于pH。
59.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體和藥學(xué)上可接受的載體。
60.一種分離的核酸，包含編碼多肽的序列，所述多肽包括與M0171-A03、M0171-A01、 M0159-A07或M0161-B04的可變域序列至少80%相同的序列。
61.一種分離的核酸，包含編碼多肽的序列，所述多肽包括權(quán)利要求1-58中任一項所 述的抗體的第一和/或第二免疫球蛋白可變域。
62 一種載體，包含權(quán)利要求61或62所述的核酸序列。
63.一種宿主細胞，包含權(quán)利要求61或62所述的核酸。
64.一種檢測樣品中的Fcfoi的方法，該方法包括將所述樣品接觸權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體；并且如果存在，檢測在所述抗體和Fcfoi之間的相互作用。
65.如權(quán)利要求64所述的方法，其中該抗體還包含可檢測標記。
66.一種檢測受治療者中的Fcfoi的方法，該方法包括向受治療者施用還包含可檢測標記的權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體；并且在受治療者中檢測該標記。
67.如權(quán)利要求66所述的方法，其中該檢測包括對受治療者成像。
68.一種調(diào)節(jié)Fcfoi活性的方法，該方法包括將Fcfoi接觸權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體，由此調(diào)節(jié)Fcfoi的活性。
69.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該Fcfoi位于人受治療者中。
70.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該抗體阻止Fcfoi與內(nèi)源性Ig結(jié)合。
71.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該抗體阻止Fcfoi與治療性抗體結(jié)合。
72.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該Fcfoi位于上皮細胞的內(nèi)體。
73.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該Fcfoi位于內(nèi)皮細胞的內(nèi)體。
74.如權(quán)利要求68所述的方法，其中該Fcfoi位于細胞表面。
75.一種治療自身免疫性疾病和/或調(diào)節(jié)自身免疫性疾病的癥狀的方法，該方法包括 施用足以調(diào)節(jié)所述癥狀的量的權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體。
76.如權(quán)利要求75所述的方法，其中該自身免疫性疾病是選自以下組成的組的疾病 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、重癥肌無力(MG)、格雷夫斯病、特發(fā)性血小板 減少性紫癜(ITP)、格林-巴利綜合征、自身免疫性心肌炎、膜性腎小球腎炎、糖尿病、I型或 II型糖尿病、多發(fā)性硬化癥、雷諾氏綜合征、自身免疫性甲狀腺炎、胃炎、乳糜瀉、白癜風(fēng)、肝 炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、炎癥性腸病、脊椎關(guān)節(jié)病、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、免疫性嗜 中性粒細胞減少癥、青少年發(fā)病型糖尿病、和與細胞因子、結(jié)核病中常見的T淋巴細胞介導(dǎo) 的遲發(fā)型超敏反應(yīng)相關(guān)的免疫反應(yīng)、結(jié)節(jié)病和多肌炎、多動脈炎、皮膚血管炎、天皰瘡、類天 皰瘡、肺出血腎炎綜合征、川崎氏病、系統(tǒng)性硬化癥、抗磷脂綜合征和干燥綜合征。
77.如權(quán)利要求76所述的方法，其中該天皰瘡為尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡或副腫 瘤性天皰瘡。
78.如權(quán)利要求75所述的方法，其中該抗體縮短內(nèi)源性IgG的半衰期。
79.—種調(diào)節(jié)循環(huán)IgG的半衰期/水平的方法，該方法包括確認需要調(diào)節(jié)循環(huán)IgG的半衰期/水平的受治療者；并且向受治療者施用有效調(diào)節(jié)受治療者體內(nèi)循環(huán)IgG的半衰期/水平的量的權(quán)利要求1-58 中任一項所述的抗體。
80.如權(quán)利要求79所述的方法，其中該方法降低循環(huán)IgG的半衰期/水平。
81.如權(quán)利要求79所述的方法，其中該受治療者為人。
82.如權(quán)利要求79所述的方法，其中施用該抗體并聯(lián)合非權(quán)利要求1-58中任一項所述 抗體的抗自身免疫性疾病的藥劑或療法以降低循環(huán)IgG的半衰期/水平。
83.一種治療或預(yù)防自身免疫性疾病的方法，該方法包括將權(quán)利要求1-58中任一項 所述抗體施用于患有該疾病或有發(fā)展該疾病的風(fēng)險的受治療者。
84.如權(quán)利要求83所述的方法，其中該自身免疫性疾病以不需要的循環(huán)IgG為特征。
85.如權(quán)利要求83所述的方法，其中該抗體縮短內(nèi)源性IgG的半衰期。
86.如權(quán)利要求83所述的方法，其中該自身免疫性疾病為選自以下的疾病類風(fēng)濕關(guān) 節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、重癥肌無力(MG)、格雷夫斯病、特發(fā)性血小板減少性紫 癜(ITP)、格林-巴利綜合征、自身免疫性心肌炎、膜性腎小球腎炎、糖尿病、I型或II型 糖尿病、多發(fā)性硬化癥、雷諾氏綜合征、自身免疫性甲狀腺炎、胃炎、乳糜瀉、白癜風(fēng)、肝炎、 原發(fā)性膽汁性肝硬化、炎癥性腸病、脊椎關(guān)節(jié)病、實驗性自身免疫性腦脊髓炎、免疫性嗜中 性粒細胞減少癥、青少年發(fā)病型糖尿病、和與細胞因子、結(jié)核病中常見的T淋巴細胞介導(dǎo)的 遲發(fā)型超敏反應(yīng)相關(guān)的免疫反應(yīng)、結(jié)節(jié)病和多肌炎、多動脈炎、皮膚血管炎、天皰瘡、類天皰 瘡、肺出血腎炎綜合征、川崎氏病、系統(tǒng)性硬化癥、抗磷脂綜合征和干燥綜合征。
87.如權(quán)利要求86所述的方法，其中該天皰瘡為尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡或副腫 瘤性天皰瘡。
88.一種治療或預(yù)防自身免疫性疾病的方法，該方法包括將權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體聯(lián)合用于治療或預(yù)防該疾病的第二療法，施用 于患有該疾病或有發(fā)展該疾病的風(fēng)險的受治療者。
89.如權(quán)利要求88所述的方法，其中該第二療法包括靜脈內(nèi)Ig療法；非類固醇抗炎藥 物(NSAID)；皮質(zhì)類固醇；環(huán)孢菌素、雷帕霉素、子囊霉素，或其免疫抑制類似物，例如，環(huán)孢 菌素A、環(huán)孢菌素GJK-506、雷帕霉素、40-0-(2-羥基)乙基-雷帕霉素；環(huán)磷酰胺；硫唑嘌 呤；甲氨蝶呤；布喹那；FTY 720 ；來氟米特；咪唑立賓，霉酚酸，霉酚酸酯，15-脫氧精胍菌 素；免疫抑制性單克隆抗體，例如，白細胞受體的單克隆抗體，例如，MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、 ⑶25、⑶^、B7、⑶45或⑶58或其配體；其他免疫調(diào)節(jié)化合物，例如CTLA4Ig ；或其他粘附分 子抑制劑，如mAb或低分子量抑制劑，包括選擇蛋白拮抗劑和VLA-4拮抗劑。
90.一種降低個體中不需要的抗體的濃度的方法，包括向該個體施用治療有效劑量的 根據(jù)權(quán)利要求1-58中任一項所述的抗體或其片段的步驟。
91.如權(quán)利要求90所述的方法，其中在藥學(xué)上可接受的載體中施用該抗體或其片段。
92.如權(quán)利要求90所述的方法，其中該個體為人。
93.如權(quán)利要求90所述的方法，其中與佐劑一起施用該抗體或其片段。
94.如權(quán)利要求90所述的方法，其中該不需要的抗體為那他珠單抗。
95.如權(quán)利要求90所述的方法，其中該不需要的抗體為非自身人類白細胞抗原。
96.如權(quán)利要求95所述的方法，其中所施用的抗體或其片段與器官移植聯(lián)合施用。
97.一種減少個體內(nèi)IgG與FcRn結(jié)合的方法，包括以下步驟提供與人FcRn結(jié)合、針對人FcRn重鏈或其片段而生成、為IgG與人Fcfoi結(jié)合的非競 爭性抑制劑并且不與β 2-微球蛋白結(jié)合的抗體或其片段；并且以足夠降低個體內(nèi)IgG與Fcfoi結(jié)合的量向個體施用該抗體或其片段。
98.如權(quán)利要求97所述的方法，其中該個體患有自身免疫性疾病或同種免疫疾病。
99.如權(quán)利要求97所述的方法，其中該個體為器官移植接受者。
100.如權(quán)利要求97所述的方法，其中已向該個體施用治療性抗體。
101.如權(quán)利要求97所述的方法，其中該自身免疫性疾病為免疫性血小板減少癥。
102.如權(quán)利要求97所述的方法，其中該自身免疫性疾病為免疫性天皰瘡。
103.如權(quán)利要求97所述的方法，其中該個體為人。
104.如權(quán)利要求97所述的方法，其中以lmg/kg到2g/kg的劑量施用該抗體。
105.如權(quán)利要求97所述的方法，其中以lmg/kg到200mg/kg的劑量施用該抗體。
106.—種抑制個體內(nèi)IgG抗體水平的方法，包括以下步驟提供與人Fcfoi結(jié)合、針對人Fcfoi重鏈或其片段而生成、為IgG與人Fcfoi結(jié)合的非競 爭性抑制劑并且不與β 2-微球蛋白結(jié)合的抗體或其片段；并且以足夠抑制個體內(nèi)IgG抗體的水平的量向個體施用該抗體或其片段。
107.如權(quán)利要求106所述的方法，其中該IgG抗體為治療性IgG抗體。
108.如權(quán)利要求107所述的方法，其中該治療性IgG抗體為那他珠單抗。
109.如權(quán)利要求106所述的方法，其中該IgG抗體為非自身人類白細胞抗原。
110.如權(quán)利要求106所述的方法，其中該方法還包括血漿置換步驟。
全文摘要
本公開提供，尤其是，與FcRn結(jié)合的蛋白，例如以高親和性和選擇性抑制FcRn的免疫球蛋白。FcRn結(jié)合蛋白可用于治療多種疾病包括自身免疫性疾病。
文檔編號C07K16/28GK102149729SQ200980124409
公開日2011年8月10日 申請日期2009年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月25日
發(fā)明者克萊夫·伍德, 克里斯托弗·滕霍爾, 凱文·麥克唐奈, 劉立明, 珍妮弗·杜蒙, 羅伯特·查爾斯·拉德納, 艾倫·J·比通蒂, 詹姆斯·斯泰托, 阿魯穆加姆·穆魯加南達姆, 阿龍·薩托 申請人:戴?？怂褂邢薰? 百健艾迪亨莫菲力奧公司