專利名稱：氟苯尼考及其類似物的水溶性前藥的制作方法
與相關申請的交叉引用
本申請是非臨時申請，根據35 U.S.C.§119(e)要求2006年12月13日提交的美國臨時申請60/874,864的優(yōu)先權，其全文在此引入作為參考。
發(fā)明領域
本發(fā)明涉及氟苯尼考(florfenicol)及其類似物的新型前藥。在一個具體方面，本發(fā)明涉及顯示了改良的水溶性和水解穩(wěn)定性的氟苯尼考及其類似物的帶電荷的含氮酯。在該方面的具體實施方式
中，本發(fā)明涉及氟苯尼考的某些帶電荷的含氮酯。

背景技術：

氟苯尼考(2，2-二氯-N-((1R，2S)-3-氟-1-羥基-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙烷-2-基)乙酰胺)具有如下化學結構
氟苯尼考
氟苯尼考是廣譜抗生素，對多種革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細菌具有活性，包括用于預防和治療由鳥類、爬行動物、魚類、貝類和哺乳動物的易感性病原體引起的細菌感染。氟苯尼考的主要用途之一在于治療由溶血性曼氏桿菌(Mannheimia haemolytica)、多殺巴氏桿菌和/或睡眠嗜血桿菌(也稱為Histophilus somni)引起的牛肺炎和伴隨的呼吸道感染(通常稱為牛呼吸道疾病或BRD)。它還顯示治療由壞死梭桿菌和黑色素擬桿菌引起的牛蹄皮炎；由多殺巴氏桿菌、大葉性肺炎放線桿菌、豬鏈球菌、豬霍亂沙門氏菌和/或支原體屬引起的豬呼吸道疾病；由大腸桿菌引起的雞大腸桿菌??；由鯰魚愛德華氏菌引起的鯰魚腸敗血病；以及由殺鮭氣單胞菌引起的鮭魚癤病。其它對氟苯尼考顯示出易感性的細菌屬包括腸桿菌屬、克雷伯氏桿菌屬、葡萄球菌屬、腸球菌屬、鮑特氏菌屬、變形桿菌屬以及志賀氏桿菌屬。特別地，氯霉素耐受性生物體菌株(例如肺炎克雷伯氏菌、陰溝腸桿菌、S.typhus和大腸桿菌)對氟苯尼考具有易感性。

氟苯尼考最常見通過口服或腸胃外施用至對象，后者主要通過肌內和靜脈內施用。由于其極低的水溶性(大約1mg/mL)，因此在商業(yè)制劑中必須加入有機溶劑以達到所需的產品濃度。出于在獸醫(yī)中對經濟的單劑量治療的需要，對新型的高濃度氟苯尼考制劑存在著需求。此外，還需要能夠更長時間保持有效的血漿抗生素水平的氟苯尼考形式，從而提高施用的經濟性，例如，更容易地提供單劑量治療，特別是在獸醫(yī)中。除此之外，還需要氟苯尼考類似物的類似形式。

一種重要的應用是經飲用水向動物給予藥物來治療細菌感染。該種施用方式提供了對細菌感染的有效治療，因為氟苯尼考被腸道適當地吸收，并達到了必需的抗生素全身水平。然而，如上所述，氟苯尼考的水溶性極低；因此氟苯尼考在水中的溶解極慢。要在飲用水中達到所需的濃度，需要制備在與水混溶的有機溶劑中的濃縮形式的預溶解氟苯尼考。此外，容易地直接溶解于動物飲用水的氟苯尼考或氟苯尼考類似物的水溶性前藥是十分合意的。

其它兩種常見的利膽醇(phenicol)抗生素(氯霉素和甲砜霉素)包含兩個羥基基團一個為伯醇型，另一個為仲醇型。人們已進行了大量的工作來通過對更易獲得的伯醇(而非受阻仲醇基團)的酯化來生成這兩種抗生素的水溶性前藥。這些化合物的甘氨酸酯已得到了廣泛的研究。該類酯的一些實例披露于美國專利3,740,411和3,770,889(均為Akiyama等人)，英國專利1,263,116(Sumitomo Chemical Co.)，以及3,405,165和3,475,470(均為Rebstock等人)中。

對于生成缺乏伯醇基團的氟苯尼考的水溶性前藥所開展的工作則少得多。例如，氟苯尼考的酯描述于Nagabhushan的美國專利4,311,857中。該專利描述了氟苯尼考的伯脂族酯，還公開了由數種氨基酸生成的酯，特別是甘氨酸酯、鳥氨酸酯和賴氨酸酯。此類氨基酸酯還披露于Kohan等人的美國專利6,790,867中。Murthy等人的美國專利申請公開號2005/014828描述了一系列具有脂族羧酸的氟苯尼考酯。Hecker等人的美國專利申請公開號2005/0182031描述了氟苯尼考的某些磷酸酯。然而，對于具有另外的有益特征的氟苯尼考的替代形式仍然存在著需求。(應注意本文對于任何參考文獻的引用不應解釋為該參考文獻構成本發(fā)明的“現有技術”)。
發(fā)明概述
簡言之，本發(fā)明包括了本文所述的氟苯尼考和/或氟苯尼考類似物的某些新型前藥，包括氟苯尼考或其類似物的藥學上可接受的鹽的前藥。這些前藥包括氟苯尼考及其類似物的仲醇基團的含氮酯，在具體實施方式
中，它們具有足夠的水溶性，從而提供氟苯尼考的前藥或氟苯尼考類似物的前藥所需的功能。在更具體實施方式
中，該化合物的特定亞類(subclass)還具有使該前藥在對象系統中的溶液中維持至適當條件出現所需的水解穩(wěn)定性，在該適當條件下該前藥可水解，釋放所述的氟苯尼考或氟苯尼考類似物。

本發(fā)明的其它方面包括上述氟苯尼考或氟苯尼考類似物或它們的藥學上可接受的鹽的前藥的藥物制劑，所述藥物制劑還包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑或載體。其它方面包括用氟苯尼考或氟苯尼考類似物治療對象的方法，其包括向所述對象施用有效量的根據本發(fā)明的氟苯尼考或氟苯尼考類似物或它們的藥學上可接受的鹽的前藥，或施用包含所述前藥的藥物組合物。

本發(fā)明進一步提供了包含預防有效量的新型的氟苯尼考前藥、氟苯尼考類似物的前藥或前述任意一種的藥學上可接受的鹽的藥物組合物。本發(fā)明還提供了這些化合物的混合物。此外，在某些藥物組合物中，氟苯尼考自身可與本發(fā)明的一種或多種新型的氟苯尼考前藥和/或氟苯尼考類似物的前藥聯合。本發(fā)明進一步提供了包含有用于策略用藥(metaphylaxis)的新型前藥的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物可根據需要和/或實踐價值(practicemerits)以預防有效量和/或供策略用藥而施用至動物或魚。本發(fā)明還提供了根據需要和/或實踐價值，施用預防有效量的本發(fā)明藥物組合物和/或用于策略用藥的相應方法。本發(fā)明還提供了在有此需要的動物中治療或預防疾病或病癥的方法。
發(fā)明詳述
本發(fā)明提供了氟苯尼考和/或氟苯尼考類似物的新型前藥，包括氟苯尼考或其類似物的藥學上可接受的鹽的前藥。這些前藥具有一種或多種有利性質，例如水溶性、在水性系統中的水解穩(wěn)定性和/或在動物胃中通過酶的作用被釋放的能力。在具體實施方式
中，(當為改善口服吸收而使用時)該前藥在給藥溶液和/或在腸中均不會過早地轉化為母體藥物。在更具體實施方式
中，向對象施用本發(fā)明的前藥，可在該前藥到達其目的位置時提供所需的向母體藥物轉化的速率。

因此，含有可提高溶解度，但在溶解時不具有充分化學穩(wěn)定性的部分的前藥分子可能不能實現所需的效果。

如果該母體藥物從胃腸系統令人滿意地良好吸收，則該前藥的目標作用可簡單地是提高溶解度，以便促進施用(例如，在飲用水中)。在該情況下，可通過兩種獨立機制中的一種或者兩種在胃系統中從前藥釋放母體藥物由于腸酶作用引起的酶水解，或通過腸中出現的pH相對于原始給藥溶液的pH提高所引發(fā)的化學水解。母體藥物的化學釋放可能由于被升高的pH或被一些能夠進行分子內環(huán)化的前藥部分的作用所促進的酯鍵水解所引起。具體而言，母體藥物的釋放可由于通過pH變化而引發(fā)的前藥的伯胺或仲胺對母體藥物的分子內置換所引起。

因此，本發(fā)明提供了具有式(I)的氟苯尼考或氟苯尼考類似物的新型前藥及其藥學上可接受的鹽
其中 R選自
A為氧，且a為0或1； L為(a)CH2，且l為1至6的整數； (b)CHR1，其中R1為氨基酸側鏈，且l為1；或者 (c)CHR1NHC(O)CH(NH2)R2，其中R1和R2為氨基酸側鏈，且l為1； M為(a)氧或硫，且m為0或1； (b)CH2，且m為0或從1至4的整數；或者 (c)NH，且m為1； X為(a)CH2，且x為0或1至4的整數；或者 (b)C(O)，且x為1； Y為(a)NH2； (b)NHRx，其中Rx為甲基、乙基、正丙基或異丙基； (c)NRyRz，其中Ry和Rz獨立地為氫、甲基、乙基、正丙基或異丙基，或者Ry和Rz一起形成C2-C5亞烷基鏈，或在所述鏈中進一步包含氮或氧雜原子的C2-C4亞烷基鏈； (d)C(＝NH)NH2； (e)N+R4R5R6，其中R4、R5和R6獨立地為氫、甲基或乙基，或者R4和R5一起形成C2-C5亞烷基鏈，或在所述鏈中進一步包含氮或氧雜原子的C2-C4亞烷基鏈； (f)吡啶鎓； (g)N-甲基或N-乙基吡啶鎓； (h)N′-3-甲基-N-1-咪唑鎓； (i)被具有式NR4R5或N+R4R5R6的基團取代的苯基基團，其中R4、R5和R6如上所定義；或者 (j)NH-CR3(＝NH)，其中R3為氫、甲基或氨基； 以及R7選自二氯甲基、二氟甲基、三氟甲基、氰甲基、疊氮甲基和氨甲基； 條件為基團AaLlMmXxY不是α-N-非官能化(non-functionalized)甘氨酸、鳥氨酸或賴氨酸殘基。

在這些化合物的具體實施方式
中，前藥部分的氮原子為帶電原子。此外，為了調節(jié)含有此類帶電氮原子或其堿性足以確保該前藥在生理pH下主要以帶電形式存在的氮原子的酯前部分(promoieties)的水解速率，可將該氮原子置于遠離酯的羰基鍵的位置。通過將帶電的氮原子連接在進一步(further)遠離該可水解碳酸酯官能團(hydrolyzable carbonatefunctionality)的位置，可在含有該帶電氮原子的碳酸酯衍生物中達到相同的效果。距離將在母體藥物釋放時水解的酯或碳酸酯基團的羰基碳原子至少兩個原子或至少三個原子的帶電氮原子足以實現該酯或碳酸酯的預期水解穩(wěn)定性。

一些優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括式(II)
其中 A為氧，且a為0或1； L為(a)CH2，且l為1至5的整數； (b)CHR1，其中R1為氨基酸側鏈，且l為1；或者 (c)CHR1NHC(O)CH(NH2)R2，其中R2為氨基酸側鏈，且l為1；M為(a)氧，且m為0或1； (b)CH2，且m為0或1至4的整數；或者 (c)NH，且m為1； X為(a)CH2，且x為0或1至4的整數；或者 (b)C(O)，且x為1； Y為(a)NH2； (b)NHRx，其中Rx為甲基、乙基、正丙基或異丙基； (c)NRyRz，其中Ry和Rz獨立地為氫、甲基、乙基、正丙基或異丙基； (d)C(＝NH)NH2； (e)N+R4R5R6，其中R4、R5和R6獨立地為氫、甲基或乙基； (f)N-吡啶鎓； (g)N′-3-甲基-N-1-咪唑鎓；或 (h)NH-CR3(＝NH)，其中R3為氫、甲基或氨基；以及 R7選自二氯甲基、二氟甲基、三氟甲基、氰甲基、疊氮甲基和氨甲基(其中R7優(yōu)選為二氯甲基)； 條件是a+l+m+x的總和為2至6，并優(yōu)選為3至6； 條件是如果a為1，則M為(CH2)m；以及 條件為基團AaLlMmXxY不是α-N-非官能化甘氨酸、鳥氨酸或賴氨酸殘基。
本發(fā)明進一步提供了這些優(yōu)選化合物的藥學上可接受的鹽。

特別的化合物為那些式(I)或(II)的化合物其中Y包含帶正電荷的氮原子，即，Y是基團N+R4R5R6，其中R4、R5和R6獨立地為氫、甲基或乙基，例如NH3+、N+H2(CH3)、N+H(CH3)2、N+(CH3)3、N+H2(C2H5)、N+H(C2H5)2、N+(C2H5)3、1-NH+-3-甲基咪唑鎓。其中a為0的化合物為酯；其中a為1的化合物為碳酸酯。其它特別的化合物為那些式(I)或(II)的化合物其中基團AaLlMmXxY不是α-氨基酸或芳族α-氨基酸的α-N-非官能化殘基(例如，基團AaLlMmXxY不是α-N-非官能化的苯基丙氨酸殘基)，或者基團AaLlMmXxY不是α-N-非官能化的α-氨基酸，或者基團AaLlMmXxY不是α-氨基酸殘基。

式(I)和(II)的化合物包括其中基團Aa-Ll-Mm-Xx-Yy例如如下所示的化合物 1.二肽酯R＝H，氨基酸側鏈
2.ω(Omega)氨基酯(n＝2-6)R＝H、Me、Et
3.ω脒基酯，N-連接(n＝2-6)R＝H、Me
4.ω脒基酯，C-連接(n＝2-6)
5.ω胍酯(n＝2-6)
6.ω氨基酸酯-環(huán)胺(n1＝1-6；n2＝2-4)
7.ω季銨酯(n＝1-6)R＝Me、Et
8.ω季銨酯-環(huán)胺(n1＝2-6；n2＝2-4；R＝Me、Et)
9.ω季銨酯-環(huán)二胺(n＝2-6；R＝H、Me、Et)
10.ω吡啶鎓鹽，C-連接；(n＝2-6；R＝Me、Et)
11.ω咪唑鎓鹽(n＝2-6；R＝Me、Et)
12.氨甲基苯甲酸酯(R＝Me、Et)
13.氨甲基苯甲酸酯的季鹽(R＝Me、Et)
對于類型2-11，還有
型，其中“帶電基團”表示所示類型的帶正電荷的含氮部分。

式(II)的化合物一般包括如下所例示 A.具有末端胺官能團的碳酸酯； B.在接頭(linker)中具有另外的α-雜原子(O、S)的酯；例如-C(O)CH2OCH2CH2NH2、C(O)CH2SCH2CH2NH2； C.具有另外的α-雜原子(N)-的酯，其為氨基酸衍生物，但在α位置不帶有可質子化的胺；這些為二肽，例如 -C(O)CH2NHC(O)CH2NH2和 -C(O)CH(Me)NHC(O)CH(Me)NH2； D.在至少兩個遠離羰基基團的亞甲基基團中去除了季氮原子的酯，例如C(O)CH2CH2CH2-N-甲基咪唑鎓和C(O)CH2CH2CH2N+Me3。

一些優(yōu)選的化合物如下所示

另一方面，本發(fā)明涉及制備該新型化合物的方法。在一種方法中，可通過使氟苯尼考或氟苯尼考類似物與具有端基W的羧酸或其衍生物反應來制備作為酯的本發(fā)明化合物，其中W代表被保護的伯胺或仲胺，其隨后被脫保護為游離胺、叔胺或在之后被處理成所需的帶電氮官能團的基團。市售的羧酸活化衍生物可用于形成該酯；它可在單獨的反應步驟中制備，或者它可在氟苯尼考或氟苯尼考類似物的存在下原位制備。


可通過使氟苯尼考或氟苯尼考類似物與具有端基W的烷氧基碳酸衍生物(例如氯甲酸酯)反應制備作為碳酸酯的本發(fā)明化合物，其中W代表被保護的伯胺或仲胺，其隨后被脫保護為游離胺、叔胺或在之后被處理成所需的帶電氮官能團的基團。

必需的酸或氯甲酸酯如果不能商業(yè)購得，則可容易地通過本領域人員已知的方法制備。合適的反應條件、溶劑等如下所例示。

如以上反應方案所示，氟苯尼考或氟苯尼考類似物的仲醇官能團與活化的羧酸或烷氧基碳酸試劑通過基團Q的親核置換進行反應。最常用的該類試劑采用Q＝氯，但也可使用本領域已知的許多其它離去基團。
作為氯甲酸酯(Q＝氯)的替代物，具有不同離去基團Q的其它試劑可用于制備氟苯尼考醇的碳酸酯。對每種離去基團引用了代表性的參考文獻，每一篇文獻在此引入作為參考。



可通過加入諸如三烷基胺、吡啶、4-烷基吡啶、4-二氨基烷基吡啶或其組合等催化劑來促進該反應。初始的酯或碳酸酯中間體的形成可在各種溶劑中便利地進行。合適的溶劑包括例如氯化溶劑，如二氯甲烷和1，2-二氯乙烷；酯溶劑，例如乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙酸異戊酯、二乙酸乙二醇酯、二乙酸丙二醇酯、三乙酸甘油酯；單醚溶劑，例如二乙醚、二異丙醚、甲基叔丁基醚；聚醚溶劑，例如乙二醇醚、二甲基乙二醇醚、二甘醇醚、二甘醇二甲基醚、二甘醇二乙基醚；甲醛縮醛醚(formaldehyde acetal ethers)，例如二甲氧基甲烷、二乙氧基甲烷、二丁氧基甲烷；環(huán)醚，例如四氫呋喃、1，3-二氧戊環(huán)、1，4-二噁烷；酮溶劑，例如丙酮、甲基乙基酮、甲基異丁基酮；以乙二醇和二甘醇的單醚為代表的混合醚/酯溶劑，例如乙酸2-甲氧基乙酯、乙酸2-乙氧基乙酯、乙酸2-(甲氧基-乙氧基)乙酯和乙酸2-(乙氧基-乙氧基)乙酯。
定義 如本文使用
除非另有指明，“約”一般指在所示的值的百分之二十范圍內的值。

“氨基酸”指已知的天然氨基酸，特別是選自丙氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸和酪氨酸的那些氨基酸。“氨基酸側鏈”和“氨基酸殘基”指衍生自α-氨基酸的基團，并表示氨基酸的NH2-CH(Raa)CO2H結構中的Raa基團，例如纈氨酸的-CH(CH3)2，賴氨酸的-CH2CH2CH2CH2NH2，以及絲氨酸的-CH2OH。對于脯氨酸，它表示-CH2CH2CH2-，其末端(distal end)與α氮原子連接。術語“α-N-非官能化”表示在α位置具有未取代的-NH2基團的氨基酸殘基，其與官能化殘基相對，在官能化殘基中例如α-氨基基團是肽的酰胺鍵的一部分。

“烷基”指具有所指出碳原子數目(即，C1-C10表示1至10個碳)的直鏈或支鏈飽和烴部分。烷基基團的范例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基，以及各種戊基、己基、庚基、辛基等基團。烷基基團還包括在鏈中具有一個或多個雜原子的那些基團，例如，甲氧基甲基(CH3OCH2-)、乙氧基乙基、甲基硫代甲基(CH3SCH2-)、甲基氨基甲基(CH3NHCH2-)等。

“亞烷基鏈”指衍生自烷基基團的二價烴基基團，即，其兩端同時與所述分子的其余部分連接的飽和的直鏈或支鏈烴基基團。典型的亞烷基基團包括亞甲基-CH2-、亞乙基-CH2CH2-和正亞丙基-CH2CH2CH2-。正如烷基基團，亞烷基鏈可包含一個或多個雜原子，例如-CH2CH2-NH-CH2CH2-。當亞烷基鏈與氮原子結合時(如在具有式NRyRz的基團中)，整個基團為雜環(huán)基，例如哌啶基等基團。當該亞烷基鏈還包含雜原子時，所得的基團NRyRz將為例如含有兩個氮原子的環(huán)狀部分，如哌啶基。

“前藥”指作為藥物前體的化合物，其在被施用至對象時，通過代謝或化學過程經歷化學轉化，以獲得活性藥物，例如，氟苯尼考或氟苯尼考類似物的碳酸酯為前藥，其在體內釋放氟苯尼考化合物。

“藥物組合物”指包含本發(fā)明化合物，包括其藥學上可接受的鹽(例如氟苯尼考前藥)以及藥學上可接受的賦形劑和/或載體的組合物或制劑。在具體實施方式
中，該載體為溶劑(例如水)。

“賦形劑”指加入到藥物組合物中以進一步促進活性成分的施用的惰性物質。賦形劑的非限制性范例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和各類淀粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。

“施用”(″Administer″或″administration″)指為了治療或預防微生物感染的目的，本發(fā)明的化合物或溶劑合物或者含有本發(fā)明化合物的藥物組合物向有機體的遞送。

本文使用的“治療有效量”指本發(fā)明前藥將充分迅速并且以充分量水解以提供一定濃度氟苯尼考或者氟苯尼考類似物的量，氟苯尼考或者氟苯尼考類似物在此濃度下能夠在一定程度上減輕對象中一種或多種細菌感染的癥狀。在具體的實施方式中，治療有效量指本發(fā)明氟苯尼考前藥的量，當施用至對象時，將氟苯尼考或者氟苯尼考類似物以充分的血漿濃度遞送給對象，從而(1)降低并且優(yōu)選消除對象體中的細菌細胞群體；(2)抑制(即，減緩或者優(yōu)選停止)細菌細胞的增殖；(3)抑制(即，減緩，優(yōu)選停止)細菌感染的擴散；和/或(4)減輕(優(yōu)選消除)與感染相關的一種或多種癥狀。

“氟苯尼考類似物”指在苯環(huán)上具有不同于甲磺?；娜〈?在式(I)或(II)中以“R”表示)和/或其中R7為不同于二氯甲基的基團的氟苯尼考類似物。

“預防有效量”指通過水解提供氟苯尼考或者氟苯尼考類似物的充分血漿濃度的本發(fā)明氟苯尼考前藥或者氟苯尼考類似物前藥的量，從而(1)保持通過預先施用治療有效量的前藥或者其它適宜的藥物而實現的降低細菌細胞群體的水平；(2)保持通過施用治療有效量的藥物而實現的抑制細菌細胞增殖的水平；(3)保持通過施用治療有效量的藥物而實現的抑制感染擴散的程度；和/或(4)保持通過施用治療有效量的本發(fā)明前藥(例如氟苯尼考)或者其它適宜的藥物而實現的緩輕與細菌感染相關的一種或多種癥狀的水平，或者如果癥狀得到消除，保持癥狀不存在?！邦A防有效量”還指包含本發(fā)明氟苯尼考前藥或者本發(fā)明氟苯尼考類似物前藥的組合物的量，其以充分的血漿濃度遞送氟苯尼考或者氟苯尼考類似物，以防止細菌在易感有機體內積累至足以引起感染的量。

策略用藥指對一整組動物適時集中用藥，以使預期的疾病爆發(fā)消除或最小化(例如，在一個或多個具有高度感染風險的動物中)。在一個具體實施方式
中，高風險牛指輕體重的，具有未知的健康史的進行長途運輸(long haul)的牛。

本文使用的術語“最小抑制濃度”可與“MIC”互換使用。“MIC50”是50％的分離群(isolates)的生長被抑制時的化合物(例如，本發(fā)明前藥)濃度。類似地，MIC90是90％的分離群的生長被抑制時的化合物濃度。

“對象”指能被病原菌感染的動物物種或魚，在具體實施方式
中包括人。合適的動物對象還包括野生動物、家畜(例如，為肉、奶、黃油、蛋、毛皮、皮革、羽毛和/或羊毛目的而飼養(yǎng)的動物)、役畜、研究動物、伴侶動物以及用于/在動物園、野生棲息地和/或馬戲團飼養(yǎng)的動物。

在具體實施方式
中，本發(fā)明的“對象”是“制造食品”的動物。就本發(fā)明而言，術語“制造食品”的動物應理解為包括所有的供人和/或其它動物消費或可供消費而飼育的動物(例如，乳牛、產蛋母雞等)。此類動物的非限制性清單包括鳥類(雞、火雞、鵝、鴨子、鴕鳥等)、牛類(例如黃牛、奶牛、水牛)、羊類(例如山羊或綿羊)、豬類(例如成豬(hog)或豬(pig))、馬類(例如馬)等，以及水生動物，包括貝類和魚(如鱒魚或鮭魚)，以及其它供人類消費所飼養(yǎng)或捕獲的物種。就本發(fā)明而言，術語“魚”應理解為包括但不限于真骨魚類(Teleosti grouping of fish)，即硬骨魚。鮭目(包括鮭科)和鱸形目(包括棘臀魚科)均包含在真骨魚分類中。可能的魚類接受者的范例包括鮭科、鮨科、鯛科、麗鯛科、棘臀魚科、三線磯鱸(Parapristipomatrilineatum)以及藍眼琵琶魚(Plecostomus spp)。

在另一實施方式中，所述對象為伴侶動物。就本發(fā)明而言，術語“伴侶”動物應理解為包括家貓(貓科)、狗(犬科)、兔、馬(馬科)、嚙齒動物(例如豚鼠、松鼠、大鼠、小鼠、沙鼠以及倉鼠)、靈長類(例如，猴)以及鳥類，例如鴿子、鴿(dove)、鸚鵡、長尾鸚鵡、金剛鸚鵡、金絲雀等。

其它動物也預期可以受益于本發(fā)明前藥，其它動物包括有袋類動物(例如袋鼠)、爬行動物(比如養(yǎng)殖海龜)、野禽(game birds)、天鵝、平胸類鳥以及其它經濟學上重要的家畜。

上述化合物的藥學上可接受的鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、甲磺酸鹽、硫酸鹽、2-羥基乙基硫酸鹽、檸檬酸鹽以及磷酸鹽。

下表1描述了本發(fā)明的代表性化合物。
表1
藥物組合物
本發(fā)明化合物或該化合物的生理上可接受的溶劑合物可被直接施用至有此需要的動物，或者以其中前述物質與適當賦形劑或載體混合的藥物組合物形式進行施用。藥物的配制或施用技術可見于最新版的Remington′s Pharmacological Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA。Remington中所討論的制劑和技術主要涉及人類患者的使用；然而，它們可通過獸醫(yī)領域技術人員公知的技術容易地改造為供非人類患者使用。含有本發(fā)明的新型化合物的藥物組合物還可包含典型的藥物賦形劑和添加劑，例如液體和/或固體載體、表面活性劑、分散劑、味覺掩蔽劑等。味覺掩蔽劑包括例如在Gao等人的美國專利6,514,492(在此全文引入作為參考)中描述的用于喹諾酮類及其衍生物的味覺掩蔽劑，即離子交換樹脂(包括陽離子和陰離子樹脂兩者)如甲基丙烯酸-二乙烯基苯共聚物(例如AMBERLITE

IRP-64)、聚苯乙烯磺酸鈉樹脂(例如AMBERLITE

IRP-69)以及聚苯乙烯磺酸-二乙烯基苯樹脂(例如DOWEX

樹脂)。

當本文描述的本發(fā)明化合物作為動物飼料的成分、或者溶解或懸浮于飲用水中被施用時，提供組合物，其中活性藥劑密切分散在惰性載體或稀釋劑中。惰性載體是一種不會與本發(fā)明化合物反應且可向動物安全施用的載體。優(yōu)選地，用于飼料施用的載體是(或可以是)動物日糧的成分。

合適的組合物包括飼料預混料或補充料，其中活性成分以相對大量存在，且其適合直接飼喂動物或者直接加入飼料中或在中間稀釋或混合步驟后加入至飼料。適用于此類組合物的典型的載體或稀釋劑包括例如酒糟干谷(distillers′dried grains)、玉米粉、柑橘粉、發(fā)酵殘留物、研磨牡蠣殼、次小麥粉、糖蜜溶解物、玉米芯粉、食用豆?jié){飼料、大豆磨粒、粉碎石灰石等。本發(fā)明化合物通過例如碾磨、攪拌、研磨或轉筒混合(tumbling)等方法在整個載體中完全分散。以重量計(w/w)，包含約0.05至約5.0％，更廣泛而言，約0.005至約2.0％的發(fā)明化合物的組合物特別適合作為飼料預混料。直接飼喂動物的飼料補充料將包含約0.0002至0.3重量％發(fā)明化合物。

向動物飼料中加入一定量的此類補充料，以在最終飼料中得到處理和控制易感性微生物所需的活性化合物的濃度。盡管本發(fā)明化合物的所需濃度根據上文所述的因素以及所用的具體衍生物而變化，該化合物通常在該飼料中投放的濃度在約0.0001至0.02％或約0.00001至約0.002％(均為w/w)之間，從而實現所需的抗微生物效果。

本發(fā)明的藥物組合物可通過本領域公知的方法(例如使用各種公知的混合、溶解、造粒、糖錠制備、粉碎、乳化、包膠囊、包埋或凍干方法)制備。該組合物可與一種或多種生理可接受的載體一起配制，該載體包括賦形劑和助劑，其可促進該活性化合物加工為可以藥用的制劑。恰當的制劑取決于所選擇的施用途徑。

對于注射(包括但不限于靜脈內、肌內和皮下注射)，可將本發(fā)明化合物配制在極性溶劑中，其包括但不限于丙二醇、醇類(如苯甲醇或乙醇)、聚乙二醇、以及N-甲基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、其它吡咯烷酮、N，N-二甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、丙酮、三乙酰甘油酯(triacetin)、甘油、福爾馬林、甘油三酸酯類(如Miglyol

產品)、任選的濃度最高為10％的水，以及任意前述賦形劑的組合或其它普通技術人員已知物質。對于經粘膜給藥，在制劑中使用適于穿越屏障的滲透劑。這種滲透劑在本領域通常是已知的。

除了上述制劑外，可制備本發(fā)明化合物的濃縮組合物，其可在現場使用時被稀釋。此類濃縮組合物的制備節(jié)約了運輸或貯存大量稀釋劑(特別是水)的成本。
施用
合適的施用途徑可包括但不限于口服、直腸、局部、透粘膜、肌內、皮下、髓內、囊內、直接室內、靜脈內、玻璃體內、腹膜內、鼻內、乳房內、耳內或眼內施用。

如上所討論，該化合物的一種施用方法是因其水溶性而將其包含在對象的飲用水中。

或者，可通過局部而非全身的方式施用，例如可將其制備為藥膏或局部施用的制劑，以將其直接施用在感染區(qū)域或者將該化合物直接注射進入感染組織。在任一情況下均可使用緩釋制劑。

因此，純形式的或者合適的藥物組合物形式的本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的溶劑合物可通過任意可接受的藥劑施用模式進行施用，以實現類似的作用。施用的途徑可以是普通技術人員已知的任意途徑。本發(fā)明化合物可以任意本領域認可的形式(即，固體、半固體、凍干粉或液體劑型，例如，片劑、栓劑、丸劑、軟彈性和硬明膠膠囊、粉末、溶液、混懸劑或者氣霧劑等)，并以適合簡單施用精確劑量的單位劑量或多劑量形式施用于有此需要的對象。該組合物將包含常規(guī)的藥物載體或賦形劑以及作為活性劑的本發(fā)明化合物，此外還包括其它藥劑、藥物制劑、載體、佐劑等。
劑量
治療有效量指有效預防和/或將微生物感染最小化，和/或治療、減輕和/或改善由微生物感染引起的癥狀的化合物的量。對治療有效量的確定完全在本領域技術人員的能力范圍之內，特別是根據本文的公開內容。

對于本發(fā)明方法中使用的任意化合物，治療有效量最初可從由本發(fā)明前藥化合物釋放的抗菌劑的已知性質進行估計。然后，可配制該劑量以在動物模型中使用，從而達到等于或大于本領域已知的最小抑制濃度(″MIC″)的循環(huán)濃度范圍。該信息隨后可用于更準確地確定對患者有用的劑量。

本文所述的化合物的治療效力可通過細胞培養(yǎng)或試驗動物中的標準藥學程序來確定。例如，最小抑制濃度(″MIC″)可參照臨床和實驗室標準研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute)(CLSI)制定的指南進行確定。類似地，本文所述的化合物的毒性可表示為該化合物的LD50，其為在用特定化合物治療的組中50％對象的致死劑量。

所獲得的數據可用于配制適用于患者的劑量范圍。當然，該劑量可根據劑型和施用途徑而變化。具體的劑型、施用途徑和劑量可由醫(yī)師個人根據患者的狀況進行選擇(例如參見Fingl等人，1975，″The PharmacologicalBasis of Therapeutics″，Ch.1p.1)。大體而言，該發(fā)明化合物向需要該種治療的動物施用的劑量能夠使在血漿和身體組織中釋放的抗生素濃度達到和/或維持針對目標(不管是治療和消除易感性感染微生物還是預防新的感染)的有效水平，并持續(xù)能夠實現預期目標的時間長度。本領域技術人員應能理解，下文中估算的劑量范圍可根據臨床反應，并考慮從每種相應前藥化合物釋放的抗生素的相對數量進行調整。例如，針對皮下施用，本發(fā)明化合物通常在約1mg/kg體重至約150mg/kg體重的劑量范圍內施用。施用的頻率也可從每天單劑量到每天多劑量變化。對于口服施用，該劑量優(yōu)選每天施用一次。

劑量和給藥間隔可單獨調節(jié)，以提供足以維持等于或高于MIC或任意其它所需水平的濃度的化合物血漿水平。此類血漿水平通常稱為最低有效濃度(MECs)。MEC將隨每一種化合物而變化，但可由體外數據(例如達到對微生物群落80％以上的抑制所需的濃度)進行估算。MEC可通過本文所述的測定進行確定。實現MEC所需的劑量將取決于該化合物和/或動物的個體特征和/或施用途徑。HPLC測定或生物測定可用于確定該化合物和/或其相應的活性產物的血漿濃度。

可也可使用MEC值確定給藥間隔?；衔锸┯玫姆桨笐茉?0-90％的時間內將血漿水平維持在MEC以上。

在局部施用或選擇性攝取的情況下，藥物的有效局部濃度可能與血漿濃度不相關，可采用本領域已知的其它步驟測定正確的劑量和間隔。

組合物可每日施用一次或分為多個劑量。通常單個劑量便足以治療感染。在一些情況下，需要在一個劑量后48小時給予第二劑量以治療動物。如本領域普通技術人員所能理解，確切的劑量將取決于感染的階段和嚴重性、感染有機體對組合物的易感性以及待治療動物物種的個體特征。

施用的組合物的數量將當然取決于待治療的患者、引起感染的病原體或細菌、感染的嚴重性、施用的方式(即，口服、靜脈、局部等)以及處方醫(yī)師、獸醫(yī)的判斷等。

當采用皮下途徑時，本發(fā)明化合物通常將以約1mg/kg體重至約150mg/kg體重的劑量范圍向牛施用。優(yōu)選地，該劑量范圍為約20mg/kg體重至約70mg/kg體重。更優(yōu)選地，該劑量為約60mg/kg。然而，當本發(fā)明化合物通過肌內(IM)途徑施用時，該劑量優(yōu)選施用兩次，且第二劑量在第一劑量施用后約24至約48小時后施用。

對于豬，本發(fā)明化合物通常以約10mg/kg體重至約150mg/kg體重的劑量范圍進行施用。優(yōu)選地，該劑量范圍為約20mg/kg體重至70mg/kg體重。根據本發(fā)明，該前藥優(yōu)選經由它們的飲用水向豬施用。

對于禽類，本發(fā)明化合物通常以約10mg/kg體重至150mg/kg體重的劑量范圍進行施用?？诜r，該前藥將每天在飲用水中施用，施用時間根據臨床指示，例如，從約三天至約七天。在所有上述情況中，該飲用水中的前藥可在“貯桶(bulk tank)”或“定量給料器(proportioner)”中施用。最終濃度通常在50mg/加侖至700mg/加侖的范圍內。優(yōu)選地，該濃度在約至100mg/加侖至600mg/加侖的范圍內。更優(yōu)選地，該最終濃度為約500mg/加侖。此類在飲用水中的前藥的施用可持續(xù)1至10天。更優(yōu)選地，可連續(xù)施用5天，或者直至呼吸道疾病的癥狀得到控制。
向水生動物施用
本發(fā)明的一個實施方式包括在魚或水生無脊椎動物中消除、減少或預防細菌感染的方法。該方法包括向有此需要的水生動物施用有效量的本發(fā)明的化合物。在該實施方式的多個方面中，可通過向該動物給用有效量的發(fā)明化合物或者通過使該動物或動物群體浸沒在含有有效量的該活性化合物的溶液中進行施用。應當進一步理解，該發(fā)明化合物可通過將藥物應用在具有該動物的池塘或儲水區(qū)域得以施用，從而允許該動物通過它們的鰓吸收該化合物，或者攝取該發(fā)明化合物的劑量。對于具體動物的個體治療，例如對于特定的魚(例如，在獸醫(yī)或水族館)，一種可選的施用本發(fā)明化合物的方法是直接注射單獨或聯合其它藥劑的本發(fā)明化合物，或者注射包含它們的滲透釋放裝置。

能夠有效減少、消除或預防魚或其它水生物種的細菌感染的本發(fā)明化合物的劑量可通過上文針對其它動物所討論的參數和方法由獸醫(yī)常規(guī)確定，盡管該劑量依賴于治療的魚的物種、涉及的具體微生物以及感染的程度。針對水生生物的適應癥，該發(fā)明化合物通?？梢约s1mg/kg至約70mg/kg，優(yōu)選從約10mg/kg至約30mg/kg的劑量進行施用。合適的施用途徑包括靜脈內、皮下、肌內和/或根據需要通過噴灑或滴入，和/或通過將該化合物直接加入至水體中。

對于口服施用，本發(fā)明化合物可以上述劑量施用約10至約15天。

盡管活性成分可與食物分開施用，可預期在優(yōu)選的方面該活性劑可被混合進入該魚飼料中。含藥魚飼料可通過將適當量的本發(fā)明化合物與市售的魚飼料產品混合達到預期劑量水平后制備得到。與魚飼料混合的本發(fā)明化合物的量將取決于魚進食的速度。對于進食速度在約0.2％至4％生物量/天的魚來說，該含藥飼料優(yōu)選的含量為約50至約10000mg/kg飼料，更優(yōu)選約100至約2000mg/kg飼料。

盡管本發(fā)明化合物可在造粒前混合進入飼料混合物，該含藥飼料優(yōu)選通過用本發(fā)明化合物包覆飼料顆粒而形成。

任意的魚種類，包括淡水和咸水種類，以及上述的無脊椎水生物種，均可通過本發(fā)明的化合物進行細菌感染的治療或預防。
與其它藥劑或治療形式聯用
此外還預期本發(fā)明化合物與其它本領域已知的有用藥劑同時或先后(例如，在相同的組合物中或在單獨的組合物中)聯合施用。該種藥劑包括例如其它抗微生物劑，例如抗生素、抗真菌劑，抗病毒劑，殺外寄生蟲藥和殺內寄生蟲藥等，以及營養(yǎng)補充劑、飼料添加劑等。例如，可預期將任意本領域已知的標準(非前藥)利膽醇，如氟苯尼考、氯霉素或甲砜霉素與本發(fā)明的化合物聯合施用。生產這些抗生素化合物的方法，以及可用于此類方法的中間體，描述于美國專利4,311,857、4,582,918、4,973,750、4,876,352、5,227,494、4,743,700、5,567,844、5,105,009、5,382,673、5,352,832和5,663,361，它們在此引入作為參考。其它的氟苯尼考類似物和/或前藥已被披露，且該種類似物還可用于本發(fā)明的組合物和方法(例如參見美國專利7,041,670和美國專利7,153,842，兩者均在此全文引入作為參考)。當該抗生素化合物為氟苯尼考時，該氟苯尼考的濃度通常為約10％至約50％，優(yōu)選的水平介于約20％和約40％，更優(yōu)選地水平為至少約30％(在這些情況下，對于固體組合物為w/w，對于液體組合物為w/v)。

可與本發(fā)明化合物聯用的另一有用的抗生素化合物為替米考星(tilmicosin)。替米考星為一種大環(huán)內酯抗生素，其化學式為20-二氫-20-脫氧-20-(順式-3，5-二甲基哌啶-1-基)-泰樂霉素(desmycosin)，它被披露于美國專利4,820,695(在此引入作為參考)。在美國專利4,820,695中還披露了一種可注射的水性制劑，其包含50％(體積比)丙二醇、4％(體積比)苯甲醇和50-500mg/ml的活性成分。替米考星可作為堿或作為磷酸鹽存在。據發(fā)現替米考星在4天以上的治療期間進行注射施用時，可用于治療呼吸道感染，特別是牛的溶血性巴氏桿菌感染。相應地，替米考星可用于治療，例如，新生小牛肺炎和牛呼吸道疾病。當替米考星存在時，其數量為約1％至約50％(w/v)，優(yōu)選10％至約50％，在具體實施方式
中為30％。

可與本發(fā)明化合物聯用的另一有用的抗生素化合物為托拉菌素(tulathromycin)。托拉菌素可根據美國專利6,825,327(其全文在此引入作為參考)所示的方法制備。托拉菌素可以約5.0％至約70％(以重量計)的濃度水平存在于可注射劑型中。托拉菌素最適合以約0.2mg/kg體重/天(mg/kg/天)至約200mg/kg/天的劑量范圍以單或多劑量(即，每天從1至4劑量)、并優(yōu)選每周一次或兩次以1.25、2.5或5mg/kg的劑量進行施用，盡管根據待治療對象的物種、體重和狀態(tài)需要進行變化。托拉菌素可以約5.0％至約70％(以重量計，w/v)的濃度水平存在于可注射劑型中。
可與本發(fā)明的化合物聯用的另一有用的抗生素為氟喹諾酮類抗生素，例如，恩氟沙星、達氟沙星、二氟沙星、奧比沙星和馬波沙星。恩氟沙星可以約100mg/ml的濃度施用。達氟沙星可以約180mg/ml的濃度施用。

其它可與本發(fā)明化合物聯用的有用的大環(huán)內酯抗生素包括來自酮內酯類的化合物，更特別而言，來自氮雜內酯類的化合物。該類化合物描述于，例如，美國專利6,514,945、6,472,371、6,270,768、6,437,151和6,271,255，美國專利6,239,112、5,958,888，以及美國專利6,339,063和6,054,434，其全文均在此引入作為參考。

其它可與本發(fā)明化合物聯用的有用的抗生素包括四環(huán)素類，特別是氯四環(huán)素和土霉素。

其它的抗生素包括β-內酰胺，例如青霉素中的一種，例如青霉素G、青霉素K、氨芐青霉素、羥氨芐青霉素，或者羥氨芐青霉素與棒酸或其它β-內酰胺酶抑制劑的組合。其它特別地β-內酰胺包括頭孢菌素，例如，頭孢噻夫、頭孢喹諾等。

除此之外，本發(fā)明可選地包括用于在動物中治療微生物或寄生蟲感染的組合物，其包含一種或多種上述列舉的抗生素，摻合和/或聯合一種或多種本發(fā)明的化合物，以及可選的載體和/或賦形劑。

對于所有此處所述的方法和本發(fā)明的化合物，還可預期將將所鑒定的化合物與一種或多種本領域已知的藥劑簡單合用，以殺死或控制各類寄生蟲，例如，包括所有的此處所述的體外和體內寄生蟲。因此，盡管本發(fā)明的化合物和方法優(yōu)于已知的藥劑和采用已知藥劑的方法，在特定的可選實施方式中，它們預期與其它用于殺死或控制各種類型害蟲的已知藥劑或該已知藥劑的組合同時或先后(例如，在相同的組合物中或在單獨的組合物中)聯用。

這些與本發(fā)明的化合物聯用的其它藥劑包括，本領域已知的驅腸蟲藥，例如，阿弗菌素類(例如，伊維菌素、莫西菌素、殺螨菌素)，苯并咪唑類(例如，阿苯達唑、三氯苯咪唑)，水楊酸苯胺類(氯氰碘柳胺、羥氯柳苯胺)、取代的苯酚類(例如，硝羥碘芐腈)、嘧啶類(例如，噻嘧啶)、咪唑噻唑類(例如，左旋噻米唑)以及吡喹酮。

可用于聯合本發(fā)明的化合物殺死或控制害蟲的其它本領域已知的藥劑包括有機磷酸酯殺蟲劑。該類殺蟲劑具有極廣的活性，了，作為殺昆蟲劑，以及在特定的實例中，具有驅腸蟲藥活性。有機磷酸酯殺蟲劑包括，例如，百治磷、特丁磷、樂果、二嗪農、乙拌磷、敵百蟲、保棉磷、毒死蜱、馬拉硫磷、甲基氧代內吸磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷、乙基對硫磷、甲基對硫磷、速滅磷、甲拌磷、三硫磷、伏殺磷，以上為該類化合物的小部分范例。還預期包括本發(fā)明方法和化合物與氨基甲酸鹽類型的殺蟲劑的組合，該殺蟲劑包括，例如，西維因、卡巴呋喃、涕滅威、草達滅、滅多蟲等，以及與有機氯類型的殺蟲劑的組合。進一步預期包括與生物殺蟲劑的組合，例如，驅腸蟲藥、除蟲菊酯(及其合成的變體，例如，丙烯菊酯、芐呋菊酯、芐氯菊酯、四溴菊酯)以及常用作殺螨劑的尼古丁。其它預期聯用的各種殺蟲劑包括蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑，乙酯殺螨醇，甲脒(例如，amtitaz)，銅化合物，例如氫氧化銅、硫酸氧氯化銅，cyclotron，氯氰菊酯，殺螨醇，硫丹，esenfenvalerate，氰戊菊酯，lambda三氟氯氰菊酯，甲氧氯和硫。

此外，對于此處所述的所有方法和新型化合物，進一步預期該鑒定的化合物可用于和增效作用劑聯用，例如與胡椒基丁醚(PBO)和三苯基磷酸酯(TPP)聯用；和/或與昆蟲生長調節(jié)劑(IGRs)和幼齡激素類似物(JHAs)如雙氟苯隆、環(huán)丙氨嗪、甲氧保幼激素等聯用，從而同時提供在動物對象以及在動物對象的環(huán)境中對寄生蟲的初始和持續(xù)控制(在昆蟲的所有發(fā)育階段，包括卵)。

同樣在該組合中預期聯用環(huán)狀二烯類化合物，魚尼丁，KT-199和/或較老的本領域已知的驅腸蟲藥，例如，阿弗菌素類(例如，伊維菌素、莫西菌素、殺螨菌素)，苯并咪唑類(例如，阿苯達唑、三氯苯咪唑)，水楊酸苯胺類(氯氰碘柳胺、羥氯柳苯胺)、取代的苯酚類(例如，硝羥碘芐腈)、嘧啶類(例如，噻嘧啶)、咪唑噻唑類(例如，左旋噻米唑)、吡喹酮以及部分有機磷酸酯，例如驅蟲磷和吡唑硫磷。

具體而言，可在本發(fā)明的范圍內使用的其它抗寄生蟲化合物優(yōu)選由阿弗菌素類化合物組成。如上所述，阿弗菌素類化合物是一系列極具潛力的抗寄生蟲劑，已知可在哺乳動物中應對光譜的體內寄生蟲和體外寄生蟲。

在本發(fā)明的范圍內與本發(fā)明的化合物聯用的優(yōu)選化合物為伊維菌素。伊維菌素是阿弗菌素的一類半合成衍生物，通常生產為至少80％的22，23-二氫阿弗菌素B1a和少于20％的22，23-二氫阿弗菌素B1b-伊維菌素的混合物，并披露于美國專利4,199,569，其在此引入作為參考。自20試劑80年代中期以來，伊維菌素曾被用作抗寄生蟲劑，以治療各種動物寄生蟲和寄生蟲疾病。

阿巴美丁是一種阿弗菌素，其在美國專利4,310,519(在此全文引入作為參考)中被披露為阿弗菌素B1a/B1b。阿巴美丁包含至少80％的阿弗菌素B1a和不超過20％的阿弗菌素B1b。

另一種優(yōu)選的阿弗菌素是多拉克丁，也稱為25-環(huán)己基-阿弗菌素B1。多拉克丁的結構和制備披露于美國專利5,089,480，其在此全文引入作為參考。

另一優(yōu)選的阿弗菌素是莫西菌素。莫西菌素，也稱為LL-F28249alpha，由美國專利4,916,154(在此全文引入作為參考)所報道。

另一優(yōu)選的阿弗菌素是司拉克丁。司拉克丁是25-環(huán)己基-25-脫(1-甲基丙基)-5-脫氧-22，23-二氫-5-(羥基亞胺基)-阿弗菌素B1單糖。

殺螨菌素或者B41是從鏈霉菌屬的殺螨菌素生成菌株的發(fā)酵液中分離的物質。該微生物、發(fā)酵條件以及分離步驟更完整地描述于美國專利3,950,360和3,984,564。

可參照美國專利5,288,710和5,399,717所述制備得到的依馬菌素(4″-脫氧-4″-epi-甲氨基阿弗菌素B1)，是兩種類似物4″-脫氧-4″-epi-甲氨基阿弗菌素B1a和4″-脫氧-4″-epi-甲氨基阿弗菌素B1b的混合物。優(yōu)選地，可使用依馬菌素的鹽?？捎糜诒景l(fā)明的依馬菌素的鹽的非限制性范例包括在美國專利5,288,710中描述的鹽，例如，由苯甲酸、取代的苯甲酸、苯磺酸、檸檬酸、磷酸、酒石酸、馬來酸等衍生的鹽。更優(yōu)選地，在本發(fā)明中所用的該依馬菌素鹽是依馬菌素苯甲酸鹽。

依立諾克丁化學名已知為4″-epi-乙?；被?4″-脫氧-阿弗菌素B1。依立諾克丁特別被開發(fā)用于所有類別和年齡組的牛。它是第一種即對體內和體外寄生蟲具有廣譜活性，同時又在肉和牛奶中形成極少殘留的阿弗菌素。它的另一優(yōu)點在于局部傳遞時具有很高的效力。

本發(fā)明的組合物可選地包含一種或多種如下抗寄生蟲化合物(殺寄生蟲藥)的組合 美國專利申請公布2005/0182059(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的咪唑[1，2-b]噠嗪化合物。
美國專利申請公布2005/0182139(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的1-(4-單和二-鹵甲基磺酰苯基)-2-酰氨基-3-氟代丙醇化合物。
美國專利申請公布2006/0063841(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的三氟甲烷磺酰苯胺肟醚衍生物化合物。
美國專利申請公布2006/0128779(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的苯基-3-(1H-吡咯-2-基)丙烯腈化合物。
美國專利申請公布2006/0281695(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的N-[(苯氧基)苯基]-1，1，1-三氟甲烷磺酰胺和N-[(苯基硫烷基)苯基]-1，1，1-三氟甲烷磺酰胺衍生物。
美國專利申請公布2007/0238700(在此引入作為參考)披露的抗寄生蟲的N-苯基-1，1，1-三氟甲磺酰胺腙化合物。

本發(fā)明的組合物還可與殺吸蟲劑聯用。合適的殺吸蟲劑包括，例如，三氯苯咪唑、芬苯達唑、阿苯達唑、氯舒隆和奧苯達唑。應當理解，上述組合還可進一步包含抗生素、抗寄生蟲劑和殺吸蟲劑活性化合物的組合。

除了上述組合外，還預期提供此處所述的本發(fā)明的方法和化合物與其它動物保健藥的組合以提供對疾病的預防，該保健藥包括例如，痕量元素、抗炎劑、抗感染劑、激素、皮膚病藥制劑(包括殺微生物劑和消毒劑)以及免疫生物劑，例如疫苗和抗血清。

例如，此類抗感染劑包括一種或多種抗生素，其可在采用本發(fā)明的化合物或方法進行治療的過程中被可選地共施用(例如，出于合并的組合物和/或單獨的劑型中)。本領域已知的適用于該目的的抗生素包括，例如，上文列舉的抗生素。

此外，還可預期將本發(fā)明的方法和化合物與本領域已知的動物健康藥(例如。痕量元素、維生素、抗炎劑、抗感染劑等)在相同或不同的組合物中同時或先后地聯合施用。

合適的抗炎藥包括例如類固醇和非類固醇抗炎藥兩者。非類固醇抗炎藥(適用時包括它們的外消旋混合物或單獨的對映體)可包括布洛芬、氟比洛芬、酮洛芬、阿氟芬酸(aclofenac)、雙氯芬酸、阿洛普令、aproxen、阿司匹林、二氟尼柳、非諾洛芬、吲哚美辛、甲芬那酸、萘普生、保泰松、吡羅昔康、水楊酰胺、水楊酸、舒林酸、脫氧舒林酸、替諾昔康、曲馬多、ketoralac、氟苯沙酸(flufenisal)、雙水楊酯、三乙醇胺水楊酸鹽、氨基比林、安替比林、羥基保泰松、阿扎丙宗、噌戊唑酮(cintazone)、氟芬那酸、氯尼塞利、氯尼辛、甲氯滅酸、氟尼辛、秋水仙素、地美可辛、別嘌呤醇、奧昔嘌醇、鹽酸芐達明、二甲法登、吲哚克索(indoxole)、吲四唑、鹽酸米姆本、鹽酸瑞尼托林、四氫甲吲胺、鹽酸苯吲吡啶、氟洛芬、異丁芬酸、甲基萘丙醇(naproxol)、芬布芬、辛可芬、二氟米酮鈉、苯四唑胺(fenamole)、氟羧嗪(flutiazin)、甲氧苯咪酮(metazamide)、鹽酸來替米特、鹽酸奈西利定、奧他酰胺、咪康唑、新辛可芬、nimazole、檸檬酸普羅沙唑、氧喹苯胺、芐叉異喹酮(tesimide)、托美汀和三氟米酯。

在具體實施方式
中，本發(fā)明化合物與氟尼辛聯合使用[例如，參見美國專利6,790,867B2，其全文在此引入作為參考]。在相關的實施方式中，本發(fā)明提供了包含本發(fā)明化合物和氟尼辛的藥物組合物。

類固醇抗炎藥包括例如糖皮質激素類藥劑，如地塞米松、可的松、氫化可的松、潑尼松、倍氯米松、倍他米松、氟尼縮松、甲基潑尼松、帕拉米松、強的松龍、曲安西龍、阿氯米松、安西奈德、氯倍他索、氟氫可的松、雙醋酸二氟拉松(diflurosone diacetate)、氟輕松、氟米龍(fluoromethalone)、氟氫縮松、哈西縮松、甲羥松、莫米松、及其藥學上可接受的鹽和混合物。
包裝
如果需要，組合物可存在于包裝(pack)、藥囊(sachet)或分配器裝置中，例如存在于FDA批準的試劑盒中，該試劑盒可包含一種或多種含有活性成分的單位劑型。該包裝可包含例如金屬或塑料箔膜，例如泡罩包裝。該包裝或分配器裝置可伴有施用說明書。該包裝或分配器還可帶有附著在該容器上的公告，該公告的形式由監(jiān)管藥品生產、使用或銷售的政府部門開具，其內容反映了該部門對組合物的劑型或者允許人用或獸用的批準情況。該種公告可以是例如由美國食品與藥品管理局批準的處方藥標簽，或者是批準的產品插頁。還可制備包含配制在相容的藥物載體中的本發(fā)明化合物的組合物，將其置于合適的容器內，并對適應癥的治療進行標記。在任選的實施方式中，該包裝包含容納多劑量的玻璃或塑料小瓶或其它容器。

以下顯示本發(fā)明化合物的制備實施例。然而，它們僅用于闡述本發(fā)明，并不對其構成限制。
水溶性前藥的合成
在以下方案中，″FFC-OH″和″FFC-O″符號分別用于氟苯尼考和氧連接的氟苯尼考部分

可通過氟苯尼考與合適的活化的羧酸或烷氧基羧酸碳酸試劑的反應來常規(guī)制備帶有基于氮的帶正電荷的氮官能團的氟苯尼考碳酸酯和氟苯尼考酯?？赏ㄟ^在文獻(例如，″March′s Advanced Organic ChemistryReactions，Mechanisms，and Structure″，第5版，Michael B.Smith，JerryMarch，2001年1月15日；Wiley-Interscience)中描述的公知方法制備這些試劑。

具有基于氮的帶正電荷的氮官能團的氟苯尼考碳酸酯和氟苯尼考酯的一種制備策略中采用了以下方案1所示的適當保護的氨基官能團(對用于保護氨基基團的保護基團PG的大量選擇以及使用它們的方法描述于″Protective Groups in Organic Synthesis″，Theodora W.Greene，Peter G.M.Wuts；1999年5月15日Wiley-Interscience)中。
方案1

將氟苯尼考與活化的羧酸試劑(例如酰氯、?；溥?acylimidazolide)、羧酸羥基琥珀酰亞胺酯、羧酸五氟苯酚酯、羧酸碳二亞胺(carbondiimide)加合物等)或活化的烷氧基碳酸試劑(具有非氯離去基團的氯甲酸酯或另選的碳酸酯試劑-參見上文)反應，其中親核置換基團Q。該類型的最常見試劑使用Q＝氯?？赏ㄟ^加入諸如三烷基胺、吡啶、4-烷基吡啶、4-二氨基烷基吡啶或其組合等催化劑來促進該反應。或者，可通過向含有氟苯尼考和該羧酸的反應混合物中加入合適的活化試劑，原位活化該羧酸。初始的酯或碳酸酯中間體的形成可在各種溶劑中便利地進行。合適的溶劑包括例如氯化溶劑，如二氯甲烷和1，2-二氯乙烷；酯溶劑，例如乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙酸異戊酯、二乙酸乙二醇酯、二乙酸丙二醇酯、三乙酸甘油酯；單醚溶劑，例如二乙醚、二異丙醚、甲基叔丁基醚；聚醚溶劑，例如乙二醇醚、二甲基乙二醇醚、二甘醇醚、二甘醇二甲基醚、二甘醇二乙基醚；甲醛縮醛醚，例如二甲氧基甲烷、二乙氧基甲烷、二丁氧基甲烷；環(huán)醚，例如四氫吹喃、1，3-二氧戊環(huán)、1，4-二噁烷；酮溶劑，例如丙酮、甲基乙基酮、甲基異丁基酮；以乙二醇和二甘醇的單醚為代表的混合醚/酯溶劑，例如乙酸2-甲氧基乙酯、乙酸2-乙氧基乙酯、乙酸2-(甲氧基-乙氧基)乙酯、乙酸2-(乙氧基-乙氧基)乙酯。以下提供的實施例舉例說明使用四氫呋喃作為溶劑。

典型地，通過在0℃下將含有1.5-2.0當量的相應氯甲酸酯或其它反應性烷氧基碳酸衍生物的四氫呋喃溶液加至含有利膽醇、1.0當量三乙胺和0.5當量4-N，N-二甲氨基吡啶的四氫呋喃溶液中來進行該反應，并允許反應進行至完全。

形成末端胺保護的氟苯尼考酯或碳酸酯后，根據該保護基團的特征，通過標準的脫保護方法對胺官能團進行脫保護。對于酸敏感性保護基團，當使用合適的酸進行脫保護時，該脫保護可直接形成所需的鹽形式(例如鹽酸鹽)。當脫保護方法生成游離胺時(例如氫解去除芐氧基羰基基團)，可通過向該反應混合物中加入酸或者通過在單獨的步驟中將該胺轉化為合適的鹽來制備所需的鹽形式。

本發(fā)明的水溶性氟苯尼考胺鹽酸鹽前藥的典型制備實施例表示為實施例1的化合物的制備。


制備具有末端基于氮的帶正電荷的官能團的氟苯尼考碳酸酯和氟苯尼考酯前藥的一種備選策略可涉及含氮的“掩蔽的胺”官能團，該官能團在隨后的階段中被轉化為所需的胺。針對該目的的典型的含氮官能團(以及轉化為胺的相應方法)的范例為硝基(還原)、疊氮基(還原)、腈(還原為CH2NH2)和伯酰胺(Curtius重排)。
方案2

以下方案2A顯示了實施例3化合物的制備方法，其使用方便用于該目的的掩蔽的氮官能團。
方案2A

制備本發(fā)明前藥的另一種便利策略涉及置換連接于氟苯尼考的碳酸酯或酯部分上的離去基團LG。該方法可特別方便用于含季銨氮的前藥部分，但它還可用于引入其它氨基官能團。
方案3

以下方案3A顯示了此類策略在制備實施例15和16的前藥中的應用，其中所需的相應的溴化季銨可直接在烷基化步驟中獲得。
方案3A

用于制備氟苯尼考的氨基酸酯前藥的便利方法可采用如下所示的方案2A和3A的方法的組合，以制備實施例17的化合物。
方案4

關于制備含有堿性或帶電季氮的氟苯尼考酯前藥，至少可采用兩種一般策略，所述堿性或帶電季氮是不直接連接至氟苯尼考的α-氨基酸一部分。在一種策略中，末端氨基酸在前藥部分連接至氟苯尼考前并入其中，在另一種策略中，可在前藥部分的第一片段與氟苯尼考連接后進行末端氨基酸的連接。

可便利用于制備此類前藥的兩種策略舉例說明于方案5中，該方案描述了實施例4的化合物的制備。
方案5
前藥的穩(wěn)定性和氟苯尼考釋放 方案7

當存在通過末端胺官能團對氟苯尼考進行分子內置換的可能性時，可發(fā)生氟苯尼考的非酶促釋放(方案7，路線A)。此類過程的速率極大地依賴于底物和溶液的pH。要進行這種置換，該末端胺要求為伯胺或仲胺，pH要求足夠高，以允許未質子化的胺以有意義濃度的未質子化形式存在。此外，x+m+l+a的總和要求為3或4，以使得在環(huán)化時容易形成5或6-元環(huán)。末端胺的取代也能夠明顯影響此類環(huán)化介導的氟苯尼考釋放速率。胺的?；耆柚沽舜祟惌h(huán)化，而烷基取代可相比未取代的伯胺明顯減緩環(huán)化。根據上述標準，本發(fā)明實施例1-3和5-14的化合物能夠進行環(huán)化，而本發(fā)明實施例4和15-17的化合物不能進行該過程。進行環(huán)化并釋放氟苯尼考的能力可極大地決定當該水溶液的pH由原始的pH 4.5(大多數前藥的鹽酸鹽的粗品水溶液所觀察到的pH)調節(jié)至接近生理pH 7.4時的前藥穩(wěn)定性。在許多情況下，此類環(huán)化的速率尚未快到以有效方式足以影響前藥溶液的穩(wěn)定性(見表2)，但在一些情況下，環(huán)化會相當迅速。實施例1-2、7-9、11和14的水溶液在pH 7.4時可觀察到數分鐘至3小時范圍內的半衰期，這很大程度上可解釋為環(huán)化介導的氟苯尼考釋放。

當該前藥溶液經口服達到腸道時，由pH變化誘導的氟苯尼考或氟苯尼考類似物的釋放從氟苯尼考的口服生物利用度的角度看是完全可以接受的，因為眾所周知氟苯尼考本身在口服時被良好吸收。取決于攝入的前藥溶液在腸道pH調節(jié)后的氟苯尼考釋放速率，游離氟苯尼考的釋放和吸收可導致來自不同可溶性前藥的氟苯尼考的不同生物利用度。對于更穩(wěn)定的前藥，可基于口服完整前藥后通過酶促介導的過程快速全身釋放得到較大的氟苯尼考口服生物利用度。

通過對將該前藥部分連接于氟苯尼考的羰基官能團上的末端伯或仲胺的初始親核攻擊(叔胺和季銨基團不能參與此類轉化)，也可發(fā)生僅可能針對碳酸酯前藥(A＝氧)的由前藥溶液pH變化誘導的競爭性過程。對于碳酸酯，重排的非環(huán)狀氨基甲酸酯的形成過程(方案7，路線B；不釋放氟苯尼考)可與環(huán)狀氨基甲酸酯的形成競爭(方案7，路線A；釋放氟苯尼考)。在前藥的體外評估中，對實施例1、2和7觀察到形成可觀量重排的前藥異構體(見表2)。實施例6的碳酸酯前藥未顯示形成任何重排異構體，而實施例5的碳酸酯前藥的重排足夠緩慢，其在pH7.4調節(jié)的溶液中僅生成少量的重排產物，但在牛血清中未觀察到重排。
一般程序(general procedure)I 氟苯尼考碳酸酯的制備
R＝Boc保護的末端氨基烷基
在0℃和氮氣氛下將原料醇A(1.78摩爾當量)和三乙胺(1.78摩爾當量)的無水四氫呋喃(0.68M)溶液逐滴加入至三光氣(triphosgene)(0.64摩爾當量)的無水四氫呋喃(0.48M)溶液中。將所得的混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后通過濾紙迅速過濾，以去除銨鹽。氯甲酸酯溶液B濾液未經進一步純化而用于接下來的碳酸酯化反應。

將新鮮制備的氯甲酸酯溶液B或市售氯甲酸酯B(1.78摩爾當量，0.34M)的無水四氫呋喃溶液置于滴液漏斗中，在0℃和氮氣氛下將2/3的溶液滴加入含有氟苯尼考C(1摩爾當量，0.64M)、4-N，N-二甲氨基吡啶(DMAP，0.5摩爾當量)和三乙胺(1.5摩爾當量)的無水四氫呋喃溶液中。將該混合物在0℃下攪拌30分鐘，并通過薄層色譜監(jiān)測反應進展。(如果薄層色譜顯示反應未完全，則加入另外量的氯甲酸酯溶液)。通過濾紙迅速過濾所得的溶液，以去除銨鹽。濃縮濾液，加入乙酸乙酯以溶解該粗產物。所得的溶液依次用1M HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，然后通過硅膠和Na2SO4墊快速過濾。濃縮濾液，通過快速柱色譜或重結晶純化所得的粗產物，獲得所需的受保護的碳酸酯D。
一般程序II 氟苯尼考酯的制備
R＝Boc保護的末端氨基烷基
將N-Boc保護的末端氨基烷基羧酸E(1.1摩爾當量)、氟苯尼考C(1.0摩爾當量)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.0當量)和4-N，N-二甲氨基吡啶(0.5摩爾當量)的溶液混合，并在室溫和氮氣氛下于無水N，N-二甲基甲酰胺(0.24M)中攪拌過夜。所得的溶液用乙酸乙酯稀釋，并依次用1M HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，然后通過硅膠和Na2SO4墊快速過濾。濃縮濾液，通過快速柱色譜純化該粗產物，獲得所需的酯D。
一般程序III Boc保護的中間體的脫保護

在0℃下用氣體HCl使碳酸酯D(或酯F)的無水四氫呋喃(0.14M)溶液飽和。將所得的溶液在室溫下攪拌30分鐘至1小時，并用氮氣吹掃，以去除過量的HCl。將該溶液濃縮至干，并在真空下干燥所得的固體物質，獲得所需的胺鹽酸鹽產物G。
一般程序IV

將G(1.0當量)和三乙胺(1.0當量)的無水N，N-二甲基甲酰胺(0.38M)溶液在室溫和氮氣氛下攪拌15分鐘。在室溫下順序加入Boc保護的氨基酸H(1.03當量)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDAC，2.0當量)和1-羥基苯并三唑(HOBt，0.5當量)。將最終的溶液在氮氣氛和室溫下攪拌過夜，并用乙酸乙酯稀釋。所得的溶液依次用1M HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，然后通過硅膠和Na2SO4墊快速過濾。濃縮濾液，通過快速柱色譜純化該粗產物，獲得所需的純產物J。

在0℃下用氣體HCl使J的無水四氫呋喃(0.14M)溶液飽和。將所得的溶液在室溫下攪拌30分鐘至1小時，并用氮氣吹掃，以去除過量的HCl。將該溶液濃縮至干，并在真空下干燥所得的固體物質，獲得所需的胺鹽酸鹽產物K。
實施例
以下是本發(fā)明化合物的代表性制備實施例。
實施例1
2-氨乙基碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺酰基)苯基)丙酯鹽酸鹽
通過一般程序I和III從20g氟苯尼考獲得該標題鹽酸鹽，并通過在乙酸乙酯和己烷混合物中將該固體攪拌過夜進行純化，得到28g(定量產率)的白色粉末。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝3.1ppm(t，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.3ppm(m，2H)，4.4-4.7(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.2ppm(br，3H)，9.2(d，1H)。
實施例2
2-(甲氨基)乙基碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
通過一般程序I和III從20g氟苯尼考獲得該標題鹽酸鹽，其未經進一步純化，得到25g(91％產率)的白色粉末。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝2.5ppm(s，3H)，3.2ppm(s，5H)，4.3ppm(m，2H)，4.3-4.7(m，5H)，5.9ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.1ppm(br，2H)，9.3(d，1H)。
實施例3
4-氨基丁酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
通過一般程序II和III從9g氟苯尼考獲得該標題鹽酸鹽，并在65℃下減壓干燥2天，得到7g(56％產率)的白色粉末。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.8ppm(p，2H)，2.5ppm(t，2H)，2.8ppm(t，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.1ppm(br，3H)，9.2(d，1H)。
實施例4
4-(2-氨基-丙酰基氨基)丁酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
將三乙胺(3.1mL，1.1當量)和4-氨基丁酸甲酯鹽酸鹽(3.2g，1.05當量)在25mL無水N，N-二甲基甲酰胺中的溶液于-10℃在氮氣氛下攪拌10分鐘。在相同的溫度下順序加入Boc-L-丙氨酸(3.8g，1.0當量)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(4.2g，1.1當量)、1-羥基苯并三唑(1.8g，0.6當量)和15mL的無水N，N-二甲基甲酰胺。將最終的溶液在氮氣氛下和室溫下攪拌過夜，并用乙酸乙酯稀釋。所得的溶液依次用1M HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，然后通過硅膠和Na2SO4墊快速過濾。濃縮濾液，并減壓干燥得到粗制糊狀物(4.8g)。將該糊狀物在LiOH(0.45g，1.1當量)存在下的50mL四氫呋喃、25mL甲醇和20mL水的混合物中室溫攪拌1小時。用濃鹽酸酸化該溶液，并用乙酸乙酯萃取。合并有機萃取物，用飽和NaCl水溶液洗滌，通過硅膠和Na2SO4墊快速過濾。濃縮濾液，減壓干燥得到糊狀的4-(2-叔丁氧基羰基氨基-丙?；被?丁酸(4.0g，72％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.1ppm(d，3H)，1.3ppm(s，9H)，1.6ppm(p，2H)，2.2ppm(t，2H)，3.0ppm(m，2H)，3.8ppm(m，1H)，6.8ppm(d，1H)，7.8ppm(t，1H)。

將該糊狀物用作一般程序II的原料酸A，得到白色固體狀的產物D(6.2g，71％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.1ppm(d，3H)，1.3ppm(s，9H)，1.6ppm(p，2H)，2.4ppm(t，2H)，3.0ppm(m，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.8ppm(m，1H)，4.2-4.6ppm(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，6.9ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.8ppm(t，1H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(d，1H)。

通過一般程序III對該固體脫保護，在凝膠柱色譜純化后得到白色泡沫狀的游離氨基形式的前藥(2.4g，43％產率)。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3ppm(d，3H)，1.7ppm(p，2H)，2.4ppm(t，2H)，3.1-3.2ppm(m，7H)，3.7ppm(q，1H)，4.3-4.6(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.7ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.5ppm(t，1H)，9.2(d，1H)。該鹽酸鹽按一般程序III中所述進行制備。
實施例5
3-氨基丙基碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
該標題鹽酸鹽通過一般程序I和III，從28g氟苯尼考獲得，并通過在醚中將該粗制固體攪拌過夜純化，得到33g(83％產率)的白色粉末。H1-NMR(DMSC-d6)，δ＝1.9ppm(p，2H)，2.8ppm(s，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.1ppm(m，2H)，4.3-4.7(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.1ppm(br，3H)，9.2(d，1H)。
實施例6
3-(甲基氨基)丙基碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺酰基)苯基)丙酯鹽酸鹽
該標題鹽酸鹽通過一般程序I和III，從2.8g氟苯尼考獲得，并通過在四氫呋喃和醚的混合物中將該粗制固體攪拌2天純化，得到2.1g(63％產率)的白色粉末。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.9ppm(p，2H)，2.9ppm(t，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.1ppm(t，2H)，4.3-4.7(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(br，2H)，9.2(d，1H)。
實施例7
2-(乙氨基)乙基碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
在-10℃下向攪拌中的含二碳酸二叔丁酯(24.5g)的50mL四氫呋喃溶液順序加入2-(乙氨基)乙醇(11mL)和三乙胺(16mL)。在室溫下攪拌該溶液1.5小時，用乙酸乙酯稀釋，依次用1M HCl水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。分離有機層，通過硅膠和硫酸鈉墊快速過濾。濃縮濾液，減壓干燥粗產物，得到灰白色油狀的乙基-(2-羥基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(21g，99％產率)；H1-NMR(CDCl3)，δ＝1.1ppm(t，3H)，1.4ppm(s，9H)，2.7ppm(s，1H)，3.2ppm(q，2H)，3.4ppm(t，2H)，3.7ppm(t，2H)。

將該粗制的物質(10g)作為一般程序I的原料醇A，得到白色泡沫狀的產物D(14.7g，97％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.0ppm(br，3H)，1.4ppm(s，9H)，3.1ppm(q，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.4ppm(m，2H)，4.2ppm(t，2H)，4.3-4.7(m，5H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.0ppm(d，2H)。

將以上獲得的中間體通過一般程序III進行脫保護，并在將該粗制固體在100mL的四氫呋喃和20mL醚的混合物中攪拌1小時純化，過濾分離，并減壓干燥后得到白色粉末狀的標題鹽酸鹽(11g，84％產率)。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.2ppm(t，3H)，2.9ppm(q，2H)，3.2ppm(s，5H)，4.3-4.7(m，5H)，5.9ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(br，2H)，9.2(d，1H)。
實施例8
1，4-二氨基戊酸((1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺?；?苯基)丙酯二鹽酸鹽
在-10℃和氮氣氛下將亞硫酰氯(2.8mL，1.3當量)分數批加入至L-鳥氨酸鹽酸鹽(5g，1當量)和50mL甲醇的混合物中。所得的溶液在室溫下攪拌1小時，去除溶劑，得到白色泡沫狀的甲酯衍生物(6.7g)。在三乙胺(12mL，3當量)的存在下將該泡沫在四氫呋喃和甲醇(50mL/50mL)的混合物中于室溫攪拌20分鐘，然后向該混合物中加入二碳酸二叔丁酯(12.5g，2當量)。將所得的溶液在室溫下攪拌過夜，然后用濾紙過濾，以去除銨鹽。濃縮濾液，并將所得的固體溶解于乙酸乙酯中，依次用1M HCl水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。將該有機部分通過硅膠和硫酸鈉墊快速過濾。將濾液濃縮得到粗制糊狀物，將其在四氫呋喃(50mL)和2N NaOH水溶液(13mL)的混合物中于室溫攪拌10分鐘。用1M HCl水溶液酸化該溶液，并用乙酸乙酯萃取。分離有機層，通過硅膠和硫酸鈉墊快速過濾。濃縮濾液，減壓干燥，得到白色泡沫狀的2，5-雙-叔丁氧基羰基氨基-戊酸(8.8g，83％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3-1.8ppm(m，22H)，2.9ppm(q，2H)，3.9ppm(m，1H)，6.8ppm(br，1H)，7.0ppm(d，0.6H)，7.2ppm(d，0.4H)。

將以上獲得的該受保護的鳥氨酸中間體用作一般程序II中的原料酸A，得到白色泡沫狀的產物D(8.7g，71％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3-1.8ppm(m，22H)，2.9ppm(br，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.0-4.7ppm(m，4H)，6.0ppm(s，1H)，6.4PPM(S，1H)，6.8ppm(br，1H)，7.3ppm(d，2H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(d，2H)。

將以上所得中間體脫保護，然后通過一般程序III并不經進一步純化得到白色固體狀的標題鹽酸鹽(6.8g，97％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.8-2.2ppm(m，2H)，2.8ppm(br，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.6ppm(m，2H)，4.2-4.7ppm(m，4H)，6.2ppm(s，1H)，6.9ppm(s，1H)，7.7ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.0ppm(br，3H)，8.8ppm(br，3H)，9.6ppm(d，1H)。
實施例9
(1-氨基-乙酰氨基)乙酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
根據一般程序II、III和IV，使用24g氟苯尼考和12gN-Boc-甘氨酸，在將粗制固體于200mL溫熱的二氯甲烷中攪拌20分鐘純化后，過濾分離，并在50℃下減壓干燥6天后得到白色粉末狀的標題鹽酸鹽(20g，56％產率)；；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝3.2ppm(m，3H)，3.6ppm(s，2H)，4.1ppm(d，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，6.0ppm(s，1H)，6.7ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.1ppm(br，3H)，9.0ppm(t，1H)，9.2ppm(d，1H)。
實施例10
5-氨基戊酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺酰基)苯基)丙酯鹽酸鹽
該標題鹽酸鹽通過一般程序II和III從8.2g氟苯尼考和5-叔丁氧基羰基氨基-戊酸獲得，并通過在四氫呋喃混合物中將該粗制固體攪拌2天純化得到白色粉末(6.2g，63％產率)。H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.5ppm(m，4H)，2.4ppm(m，2H)，2.7ppm(br，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.6(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(m，5H)，9.1(d，1H)。
實施例11
2-(2-氨基-丙?；被?丙酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
根據一般程序II、III和IV，使用9g氟苯尼考和5.4gBoc-L-丙氨酸，在將粗制固體于二氯甲烷和甲醇的混合物中快速沉淀后，過濾分離，并在減壓干燥后純化得到白色粉末狀的標題鹽酸鹽(5.2g，58％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.4ppm(d，6H)，3.1ppm(s，3H)，3.9ppm(q，1H)，4.3-4.7ppm(m，4H)，6.0ppm(s，1H)，6.7ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.2ppm(br，3H)，9.2ppm(d，1H)，9.3ppm(d，1H)。
實施例12
5-(甲基氨基)戊酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
將1-甲基-2-哌啶酮(5g，1當量)和KOH(5.4g，2當量)的乙醇溶液(30mL)加熱至90℃過夜。將溶液冷卻至室溫后，加入二碳酸二叔丁酯(19.2g，2當量)和100mL乙醇。將所得的溶液在室溫下攪拌30分鐘，然后通過濾紙過濾，以去該固體。濃縮濾液，用1M HCl水溶液酸化，并用乙酸乙酯萃取。合并有機萃取物，濃縮，并通過凝膠柱色譜純化。通過色譜得到兩種級分。極性較大的級分含有所需的5-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)戊酸，而極性較小的級分通過NaOH水溶液水解以得到更多的所需酸。該酸的總產率為8.3g(81％)，其為褐色糊狀物；H1-NMR(CDCl3)，δ＝1.4ppm(s，9H)，1.6ppm(m，4H)，2.4ppm(t，2H)，2.8ppm(s，3H)，3.2ppm(t，3H)。

將該糊狀物(3g，1.1當量)用作一般程序II中的原料酸A，得到白色泡沫狀的產物D(6.5g，86％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3-1.5ppm(m，13H)，2.5ppm(m，2H)，2.7ppm(s，3H)，3.1-3.2ppm(m，5H)，4.2-4.6(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(d，2H)。

通過遵循一般程序III對該泡沫進行脫保護，未經進一步純化得到黃色泡沫狀的標題鹽酸鹽(6.1g，定量產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.6ppm(br，4H)，2.8ppm(br，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.6ppm(s，5H)，4.2-4.6(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.8ppm(br，2H)，9.2ppm(d，1H)。
實施例13
(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙基3-(乙氨基)丙基碳酸酯鹽酸鹽
將3-氯丙醇(4.4mL，1當量)和乙胺(15mL，3當量)的混合物在密封管中加熱2天。冷卻至室溫后，加入固體K2CO3。濾除固體后，通過于95℃減壓蒸餾去除副產物，得到粗制的糊狀所需產物。用二碳酸二叔丁酯(12g，1當量)處理殘留的糊狀物，同時在三乙胺(16mL，2當量)的存在下于甲醇(50mL)中攪拌。將溶液在室溫下攪拌30分鐘，濃縮，并用乙酸乙酯稀釋。用1M HCl水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌該有機溶液。分離有機層，濃縮得到無色的粗制油，將其通過凝膠柱色譜純化得到無色油狀的乙基-(3-羥基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(10g，93％產率)；H1-NMR(CDCl3)，δ＝1.1ppm(t，3H)，1.4ppm(s，9H)，1.7ppm(p，2H)，3.2ppm(q，2H)，3.4ppm(t，2H)，3.6ppm(t，2H)。

將所得的油狀物用作一般程序I中的原料醇A，得到白色泡沫狀的產物D(13.7g，95％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.0ppm(t，3H)，1.3ppm(s，9H)，1.8ppm(p，2H)，3.0-3.2ppm(m，7H)，4.0ppm(t，2H)，4.3-4.7(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.0(d，1H)。

通過遵循一般程序III對該泡沫進行脫保護，通過凝膠柱色譜純化粗制的固體后，得到白色泡沫狀的標題鹽酸鹽(11.9g，97％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.2ppm(t，3H)，1.9ppm(m，2H)，2.9ppm(m，4H)，3.2ppm(s，3H)，4.1-4.7(m，5H)，5.9ppm(d，1H)，6.5ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(br，2H)，9.2(d，1H)。
實施例14
(2-氨基-乙氧基)乙酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲磺?；?苯基)丙酯鹽酸鹽
在室溫下攪拌2-氨基乙醇(12mL，1.2當量)和三乙胺(22mL，1當量)的四氫呋喃(150mL)溶液時，分數批加入二碳酸二叔丁酯(35g，1當量)。在室溫下攪拌該溶液20分鐘，用乙酸乙酯稀釋，用1M HCl水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。分離有機層，通過硅膠和硫酸鈉墊快速過濾。濃縮濾液，在減壓干燥后得到無色油狀的粗制產物叔丁基-N-(2-羥乙基)氨基甲酸酯(24g，92％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3ppm(s，9H)，2.9ppm(q，2H)，3.3ppm(q，2H)，4.6(t，1H)，6.6ppm(t，1H)。

將該油狀物(13.3g，1當量)溶解于四氫呋喃(150mL)中，并在-78℃下攪拌，同時分數批加入NaH(4.6g，1.4當量)。將所得的混合物在室溫下攪拌1小時，然后在-78℃下加入溴乙酸乙酯(12.7mL，1.4當量)。將混合物在室溫下攪拌過夜，并用乙酸乙酯稀釋。用1M HCl水溶液洗滌該溶液，并濃縮。通過凝膠柱色譜純化所得的粗制混合物，得到無色油狀的所需產物2-氨基乙氧基-N-叔丁氧基羰基乙酸乙酯(10g，50％產率)；H1-NMR(CDCl3)，δ＝1.3ppm(t，3H)，1.4ppm(s，9H)，3.3ppm(m，2H)，3.6ppm(t，2H)，4.1ppm(s，2H)，4.2ppm(q，2H)，5.1ppm(br，1H)。

在室溫下于5分鐘內，在四氫呋喃(20mL)和水(20mL)的混合物中用固體NaOH(1g，1.2當量)水解該油狀物(5g，1當量)。用醚萃取該混合物以去除雜質，用6N HCl水溶液酸化所得的混合物，并用乙酸乙酯萃取。用飽和NaCl水溶液洗滌合并的萃取物，通過硅膠和硫酸鈉墊快速過濾。濃縮濾液，在減壓干燥后得到無色油狀的所需產物(2-叔丁氧基羰基氨基-乙氧基)乙酸(4g，90％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3ppm(s，9H)，3.0ppm(q，2H)，3.4ppm(t，2H)，3.9ppm(s，2H)，6.6ppm(t，1H)，12.6ppm(br，1H)。

將所得的物質用作一般程序II中的原料酸A，得到白色泡沫狀的產物D(7.8g，84％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝1.3ppm(s，9H)，3.1ppm(q，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.4ppm(t，2H)，4.2-4.6(m，5H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，6.8ppm(t，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(d，1H)。

通過遵循一般程序III將該泡沫(15.3g)脫保護，依次用溫熱的四氫呋喃和溫熱的二氯甲烷萃取粗制產物，并在50℃下減壓干燥2天后，得到白色粉末狀的標題鹽酸鹽(9.9g，74％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝2.9ppm(br，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.7ppm(t，2H)，4.2-4.7(m，5H)，6.1ppm(d，1H)，6.6ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.0ppm(br，3H)，9.2(d，1H)。
實施例15
{3-[2-(2，2-二氯-乙酰基氨基)-3-氟-1-(4-甲磺?；?苯基)-丙氧基羰基-丙基}-三甲基-溴化銨
在-20℃下攪拌氟苯尼考(8.8g，1當量)、二異丙基乙胺(5mL，1.2當量)和4-N，N-二甲氨基吡啶(1.2g，0.4當量)的四氫呋喃(90mL)溶液時，經由注射器加入4-溴丁酰氯(5g，1.1當量)的四氫呋喃(15mL)溶液。將該溶液在氮氣氛下于室溫攪拌過夜，并用乙酸乙酯稀釋。用1M HCl水溶液洗滌所得的溶液，分離有機層，濃縮得到褐色的油。將粗制的油用凝膠柱色譜純化，得到褐色泡沫狀的4-溴-丁酸2-(2，2-二氯-乙?；被?-3-氟-1-(4-甲磺酰基-苯基)-丙酯(5.6g，45％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝2.1ppm(p，2H)，2.6ppm(t，2H)，3.2ppm(s，3H)，3.5ppm(t，2H)，4.2-4.6(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.9ppm(d，2H)。

將該酯(1.1g，1當量)的四氫呋喃(2mL)溶液于-78℃下攪拌，同時加入純三甲胺(0.4mL，2當量)。將所得的溶液在密封管中攪拌過夜。過濾收集沉淀物，在室溫下于二氯甲烷中攪拌24小時。過濾收集純化的標題溴化銨，在50℃下減壓干燥2天，得到灰白色粉末(0.8g，65％產率)；H1-NMR(CDCl3/CD3OD)，δ＝2.0ppm(m，2H)，2.6ppm(m，2H)，3.0ppm(s，3H)，3.1ppm(s，9H)，3.4-3.6ppm(m，3H)，4.2-4.4ppm(m，3H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.8ppm(d，2H)。
實施例16
溴化1-[3-[2-(2，2-二氯-乙?；被?-3-氟-1-(4-甲磺?；?苯基)-丙氧基羰基]-丙基)-3-甲基-3H-咪唑-1-鎓
將4-溴-丁酸2-(2，2-二氯-乙酰基氨基)-3-氟-1-(4-甲磺?；?苯基)-丙酯(1.8g，1當量)和1-甲基咪唑(0.56mL，2當量)在室溫下于四氫呋喃(6mL)中攪拌過夜。用醚稀釋該溶液，過濾收集沉淀物，在乙酸乙酯和己烷(1∶1)的混合物中于室溫攪拌24小時。過濾收集純化的標題甲基溴化咪唑鎓，在50℃下減壓干燥7小時，得到灰白色粉末(1.2g，56％產率)；H1-NMR(CDCl3/CD3OD)，δ＝2.2ppm(m，2H)，2.6ppm(m，2H)，3.0ppm(s，3H)，3.9ppm(s，3H)，4.24.5ppm(m，5H)，6.0ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.2ppm(d，1H)，7.4ppm(s，1H)，7.6(d，2H)，7.8ppm(d，2H)，9.4ppm(s，1H)。
實施例17
氨基-乙酸2-(2，2-二氯-乙?；被?-3-氟-1-(4-甲磺酰基-苯基)-丙酯
通過遵循一般程序II和III，使用12.9g氟苯尼考和6.9g N-Boc甘氨酸，將粗制的固體在50℃下減壓干燥6天后，得到白色粉末狀的前藥(13.2g，80％產率)；H1-NMR(DMSO-d6)，δ＝3.2ppm(m，3H)，3.9ppm(s，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，6.1ppm(s，1H)，6.8ppm(s，1H)，7.7ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.6ppm(br，3H)，9.4ppm(d，1H)。

以下的實施例證明了本發(fā)明化合物的活性和作用。

根據如下方式測試表1的化合物在水溶液中的穩(wěn)定性和在?；蜇i血清中的穩(wěn)定性
前藥在水溶液中穩(wěn)定性的測定 在pH 7.4下 將前藥以1mg/mL的濃度溶解于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液中。將澄清的溶液放置在室溫下。將400μL的溶液等分試樣在0、1、2、8、24和48小時時間點轉移至含有400μL稀釋HCl溶液的塑料管中，以達到約4.0的最終pH。通過HPLC分析樣本。使用氟苯尼考的峰面積確定母體藥物釋放的速率。
在pH 4.5下 將前藥以0.5mg/mL的濃度溶解于蒸餾水中。必要時用稀釋HCl將pH調節(jié)至4.5。將澄清的溶液放置在室溫下。在0、1、2、4和7天時間點取出樣本用于分析。通過HPLC分析樣本。使用氟苯尼考的峰面積確定母體藥物釋放的速率。

前藥在?；蜇i血清中穩(wěn)定性的測定 在二甲亞砜中制備10mg/mL的前藥貯備液。將50μL的上述貯備液加入至5mL?；蜇i血清中，并混合。將400μL上述前藥血清溶液等分試樣轉移至塑料管(每個時間點一管)。在37℃下將溶液孵育預定的時間。在0、1、2、4、8和24小時時間點取出樣本，并加入400μL乙腈。將樣本攪拌30秒以沉淀蛋白并終止反應，以14,000rpm離心5分鐘。采集上清液進行HPLC分析。使用氟苯尼考的峰面積確定母體藥物釋放的速率。
HPLC條件 設備Agilent 1100 柱C 18，5mm，2.1mm x 150mm 流速0.5mL/min 溫度30℃ 檢測器UV 254nm 注射體積10mL 溶劑以0.1％甲酸水溶液、乙腈為梯度
結果顯示于表2中。
表2

本說明書中所引用的所有出版物和專利申請均引入作為參考，如同每一篇單獨的出版物和專利申請均被具體和單獨地引入作為參考。

盡管前述發(fā)明已通過用于清楚和理解目的的闡釋和實施例進行一定的詳細描述，但顯然，本領域普通技術人員根據本發(fā)明的教導將容易地在不脫離隨附權利要求書的精神和范圍的情況下對其進行某些變化和調整。
權利要求
1.具有式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽
其中
R選自
A為氧，且a為0或1；
L為(a)CH2，且l為1至6的整數；(b)CHR1，其中R1為氨基酸側鏈，且l為1；或者(c)CHR1NHC(O)CH(NH2)R2，其中R1和R2為氨基酸側鏈，且l為1；
M為(a)氧或硫，且m為0或1；(b)CH2，且m為0或從1至4的整數；或者(c)NH，且m為1；
X為(a)CH2，且x為0或1至4的整數；或者(b)C(O)，且x為1；
Y為(a)NH2；(b)NHRx，其中Rx為甲基、乙基、正丙基或異丙基；(c)NRyRz，其中Ry和Rz獨立地為氫、甲基、乙基、正丙基或異丙基，或者Ry和Rz一起形成C2-C5亞烷基鏈，或在所述鏈中進一步包含氮或氧雜原子的C2-C4亞烷基鏈；(d)C(＝NH)NH2；(e)N+R4R5R6，其中R4、R5和R6獨立地為氫、甲基或乙基，或者R4和R5一起形成C2-C5亞烷基鏈，或在所述鏈中進一步包含氮或氧雜原子的C2-C4亞烷基鏈；(f)吡啶鎓；(g)N-甲基或N-乙基吡啶鎓；(h)N′-3-甲基-N-1-咪唑鎓；(i)被具有式NR4R5或N+R4R5R6的基團取代的苯基基團，其中R4、R5和R6如上所定義；或者(j)NH-CR3(＝NH)，其中R3為氫、甲基或氨基；
以及R7選自二氯甲基、二氟甲基、三氟甲基、氰甲基、疊氮甲基和氨甲基；
條件為基團AaLlMmXxY不是α-N-非官能化甘氨酸、鳥氨酸或賴氨酸殘基。
2.具有式(II)的化合物及其藥學上可接受的鹽
其中
A為氧，且a為0或1；
L為(a)CH2，且l為1至5的整數；(b)CHR1，其中R1為氨基酸側鏈，且l為1；或者(c)CHR1NHC(O)CH(NH2)R2，其中R2為氨基酸側鏈，且l為1；
M為(a)氧，且m為0或1；(b)CH2，且m為0或1至4的整數；或者(c)NH，且m為1；
X為(a)CH2，且x為0或1至4的整數；或者(b)C(O)，且x為1；
Y為(a)NH2；(b)NHRx，其中Rx為甲基、乙基、正丙基或異丙基；(c)NRyRz，其中Ry和Rz獨立地為氫、甲基、乙基、正丙基或異丙基；(d)C(＝NH)NH2；(e)N+R4R5R6，其中R4、R5和R6獨立地為氫、甲基或乙基；(f)N-吡啶鎓；(g)N′-3-甲基-N-1-咪唑鎓；或(h)NH-CR3(＝NH)，其中R3為氫、甲基或氨基；以及
R7選自二氯甲基、二氟甲基、三氟甲基、氰甲基、疊氮甲基和氨甲基；
條件是a+l+m+x的總和為2至6，并優(yōu)選為3至6；條件是如果a為1，則M為(CH2)m；
以及條件為基團AaL1MmXxY不是α-N-非官能化甘氨酸、鳥氨酸或賴氨酸殘基。
3.如權利要求2所述的化合物，其中Y為通過至少兩個鏈中原子與羰基分隔的帶正電荷部分。
4.如權利要求2所述的化合物，其中a為0。
5.如權利要求1所述的化合物，其中a為1。
6.如權利要求2所述的化合物，其中L為CH2，且l為1至5的整數。
7.如權利要求2所述的化合物，其中M為CH2，且m為1至4的整數。
8.如權利要求2所述的化合物，其中X為CH2，且x為1至4的整數。
9.如權利要求2所述的化合物，其中Y為NR4R5R6+。
10.如權利要求2所述的化合物，其中R7為二氯甲基。
11.藥物組合物，其包含治療有效量的權利要求1所述的化合物或鹽以及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
12.如權利要求10所述的組合物，其包含治療有效量的權利要求1所述的化合物或鹽。
13.如權利要求10所述的組合物，其包含治療有效量的權利要求2所述的化合物或鹽。
14.如權利要求8所述的組合物，其進一步包含有效量的一種或多種其它藥劑。
15.如權利要求14所述的組合物，其中所述一種或多種其它藥劑選自殺微生物劑；驅腸蟲藥；殺外寄生蟲藥和殺內寄生蟲藥；抗吸蟲藥；抗炎藥；抗感染藥；激素；皮膚病制劑，包括抗菌劑和消毒劑；以及免疫生物劑，包括疫苗和抗血清。
16.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求1所述的化合物。
17.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求2所述的化合物。
18.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求10所述的組合物。
19.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求13所述的組合物。
20.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求14所述的組合物。
21.在對象中治療或預防疾病或病癥的方法，其包括對所述對象施用治療有效量的權利要求15所述的組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了氟苯尼考和/或氟苯尼考類似物的某些新型前藥，包括氟苯尼考及其類似物的藥學上可接受的鹽的鹽類前藥，包括氟苯尼考及其類似物的仲醇基團的含氮酯，及其藥學上可接受的鹽，包含它們的組合物，以及將它們施用至對象的方法。在具體實施方式
中，該前藥具有充分的水溶性，以提供氟苯尼考的水溶性前藥或氟苯尼考類似物的水溶性前藥所需的功能。該化合物的特定亞類還具有使該前藥在對象系統中的溶液中維持至適當條件出現所需的水解穩(wěn)定性，在該適當條件下該前藥可水解，釋放所述的氟苯尼考或氟苯尼考類似物。
文檔編號C07C237/06GK101605756SQ200780051290
公開日2009年12月16日 申請日期2007年12月11日 優(yōu)先權日2006年12月13日
發(fā)明者T·W·格林卡, J·張 申請人:先靈-普勞有限公司