專利名稱：高純度秦皮甲素及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及高純度秦皮甲素及其制備方法。
背景技術(shù)：
秦皮為常用中藥，通常來源于木犀科植物苦櫪白蠟樹FraxinusrhynchophyllaHanee、白蠟樹Fraxinus chinensis Roxb、尖葉白蠟樹Fraxinusszaboana Lingelsh.或宿柱白蠟樹Fraxinus stylosaLing的干燥枝皮或干皮。中醫(yī)理論認(rèn)為，秦皮具有清熱燥濕、收澀、明目等功效，常用于治療熱痢、泄瀉、赤白帶下、目赤腫痛、目生翳膜等癥?，F(xiàn)代研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗過敏等作用。秦皮的主要成分為香豆素類，包括秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素等，其中秦皮甲素含量最高，約1％。
目前，秦皮甲素的制備采用95％的乙醇回流提取方法，該包括將提取液濃縮至無醇味后，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，以除去秦皮乙素。所得溶液再進(jìn)行濃縮析出秦皮甲素晶體。在該方法，要使用95％的乙醇和乙酸乙酯，成本高，并且萃取過程容易乳化，操作較麻煩。而且，濃縮步驟存在很大困難，因?yàn)槿芤后w積過小時(shí)，粘度太大，很難析出晶體。另外，而且得到的秦皮甲素晶體中含大量秦皮素，純度不理想。
另外，在現(xiàn)有的提取秦皮甲素的方法，通常使用乙酸乙酯來進(jìn)萃取，如果操作人員在工作工程中長期接觸乙酸乙酯會(huì)對(duì)人體造成傷害，例如肝臟受損等，而且也會(huì)對(duì)環(huán)境造成一定的污染。
因此，本領(lǐng)域急需一種提取高純度秦皮甲素的簡便方法，它對(duì)環(huán)境和人體無害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種高純度秦皮甲素的制備方法，該方法操作簡便、成本低、產(chǎn)率高，可用于工業(yè)化生產(chǎn)，而且本發(fā)明的方法對(duì)于環(huán)境和人體無害。
本發(fā)明提供了一種秦皮甲素的制備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結(jié)晶步驟，其中分離步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱后，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液后停止收集。
本發(fā)明還提供了一種秦皮甲素組合物，它包含90-100重量％的秦皮甲素。
本發(fā)明制備秦皮甲素的方法操作簡單，產(chǎn)率高，并且生成的秦皮甲素純度非常高。另外，本發(fā)明使用水代替乙酸乙酯可以避免操作過程中對(duì)人體和環(huán)境的傷害。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明提供了一種秦皮甲素的制備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結(jié)晶步驟，其中分離步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量體積比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱后，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液后停止收集。
在本發(fā)明的方法中，所述提取步驟在本領(lǐng)域中是常規(guī)的。例如，所述提取步驟的具體過程可如下進(jìn)行1)將中藥秦皮粉碎成粗粉(例如10～40目的粉末)，然后將秦皮粗粉置于常壓回流裝置中；2)在所述回流裝置中加入5-10倍量(以所述中藥秦皮的重量計(jì))的水；3)加熱回流60-90分鐘，得到提取液；4)步驟2和3重復(fù)進(jìn)行2～4次，然后合并提取液。
在本發(fā)明中，所用原料為常規(guī)的中藥秦皮，例如產(chǎn)地為陜西或甘肅的中藥秦皮。
在本發(fā)明的柱層析步驟中，所述洗脫劑是常規(guī)的。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)例中，所述洗脫劑選自去離子水。
在本發(fā)明的柱層析步驟中，所述大孔吸附樹脂是常規(guī)的，它通過市售得到。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)例中，所述大孔吸附樹脂選自非極性或弱極性大孔吸附樹脂中的一種或幾種。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)例中，所述大孔吸附樹脂選自D101(天津農(nóng)藥廠生產(chǎn)，苯乙烯型)、HZ-802、DM130(山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)生產(chǎn))、AB-8(天津南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)，苯乙烯型)、Diaion HP-20(日本三菱公司生產(chǎn)，苯乙烯型)中一種或幾種。
在本發(fā)明的方法中，所述濃縮步驟是常規(guī)的。例如所述濃縮步驟的具體過程可如下進(jìn)行1)將柱層析步驟所得洗脫液濃縮到0.5～1倍柱體積；2)將步驟1中所得溶液置于4～15℃冷藏12～24小時(shí)，然后離心或過濾。
在本發(fā)明的方法中，所述結(jié)晶步驟是常規(guī)的。例如，所述結(jié)晶步驟的具體過程可如下進(jìn)行1)將濃縮步驟所得的濃縮物液置于4～10℃冰箱中析晶，12～24小時(shí)后進(jìn)行過濾或離心；2)將所得晶體加熱溶于水中，所述水的用量使所得溶液的體積與析晶前相同，然后將所得溶液置于4～10℃的冰箱中進(jìn)行重結(jié)晶；3)次日過濾得到晶體，即為秦皮甲素，純度90％～100％。
本發(fā)明還提供了一種秦皮甲素組合物，它包括90-100重量％的秦皮甲素。
在本發(fā)明中，所述秦皮甲素組合物較好包含92-99重量％、更好94-99重量％、最好98-99重量％的秦皮甲素。
本發(fā)明利用大孔吸附樹脂將秦皮素、秦皮乙素及大量色素吸附，而且柱層析前提取液不需濃縮，從而省去了萃取的步驟。在本發(fā)明的方法中，可以直接用水進(jìn)行提取、分離等步驟。因此，相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)來說，本發(fā)明的方法操作簡便、成本低。另外，由本發(fā)明所得的秦皮甲素色澤好，純度高。
下面結(jié)合實(shí)施例細(xì)說明本發(fā)明，這些實(shí)施例只是用于舉例說明的目的，并沒有限制本發(fā)明的范圍。
秦皮甲素的鑒定方法根據(jù)藥典2005版一部中藥秦皮的含量測(cè)定方法鑒定秦皮甲素以及測(cè)定秦皮甲素的純度，對(duì)照品購自中國藥品生物制品檢驗(yàn)所。
實(shí)施例1在秦皮粗粉(產(chǎn)地甘肅)(20目)1公斤中加水10升，并加熱回流提取1小時(shí)。然后將殘?jiān)偌铀崛杀?，每次加?升，回流時(shí)間為1小時(shí)。合并提取液，并將所得提取液直接加入1公斤的2000ml的AB-8樹脂柱(天津南開大學(xué)化工廠，苯乙烯型)中，以每小時(shí)3個(gè)柱體積上樣。上樣完畢后，用30升水洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集20升洗脫液后停止收集。將所收集的20升洗脫液濃縮至1升，然后置于冰箱中過夜。次日，過濾冷藏的濃縮液，并用少量水洗滌濾餅。然后，用1升水加熱溶解后濾餅后將所得溶液置于冰箱中重結(jié)晶。次日過濾得到沉淀物，即為秦皮甲素(8g，純度97％)。
實(shí)施例2將秦皮粗粉(產(chǎn)地甘肅)(20目)1公斤中加水10升，并加熱回流提取1.5小時(shí)。然后將殘?jiān)偌铀崛∪?，每次加?升，回流為1小時(shí)。合并提取液，并將所得提取液直接加入3000ml的Diaion HP-20樹脂(日本三菱公司產(chǎn)，苯乙烯型)中，以每小時(shí)3個(gè)柱體積上樣。上樣完畢后，用60升水洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集40升洗脫液后停止收集。將所收集的40升洗脫液濃縮至1升，將所述濃縮液置于冰箱中過夜。次日，過濾冷藏的濃縮液，并用少量水洗滌濾餅。然后，用1升水加熱溶解后濾餅后將所得溶液置于冰箱中重結(jié)晶。次日過濾得到沉淀物，即為秦皮甲素(15g，純度98.6％)實(shí)施例3傳統(tǒng)工藝采用5倍量(以秦皮粗粉的重量計(jì))的95％的乙醇回流提取秦皮粗粉12小時(shí)。將提取液濃縮至無醇味后，加一倍量(以濃縮液的體積計(jì))溫水溶解，并用等量(以溫水的體積計(jì))乙酸乙酯萃取3遍。將水層濃縮至小體積后，將濃縮液置于冰箱中析晶。析出晶體后過濾，晶體用水和甲醇反復(fù)重結(jié)晶，得秦皮甲素。
傳統(tǒng)工藝與本發(fā)明的比較

權(quán)利要求
1.一種秦皮甲素的制備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結(jié)晶步驟，其中部分步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得秦皮甲素提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱后，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液后停止收集。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述洗脫劑是去離子水。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔樹脂選自非極性或弱極性大孔吸附樹脂中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于提取步驟的具體過程可如下進(jìn)行1)將中藥秦皮粉碎成粗粉，然后將秦皮粉置于常壓回流裝置中；2)在所述回流裝置中加入5-10倍量的水，以所述中藥秦皮的重量計(jì)；3)加熱回流60-90分鐘，得到提取液；4)步驟2和3重復(fù)進(jìn)行2～4次，然后合并提取液。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于濃縮步驟的具體過程可如下進(jìn)行1)將柱層析步驟所得洗脫液濃縮到0.5～1倍柱體積2)將步驟1中所得溶液置于4～15℃冷藏12～24小時(shí)，然后離心或過濾。
6.一種秦皮甲素組合物，它包含90-100重量％的秦皮甲素。
7.如權(quán)利要求6所述的組合物，其特征在于所述秦皮甲素的濃度為92-99％。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種秦皮甲素的制備方法，所述方法包括提取、柱層析、濃縮和結(jié)晶步驟，其中柱層析步驟如下a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮藥材和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱后，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清后，開始收集洗脫液，直到收集完10－15倍柱體積的洗脫液后停止收集。本發(fā)明制備秦皮甲素的方法操作簡單，產(chǎn)率高，并且生成的秦皮甲素純度非常高。
文檔編號(hào)C07D311/00GK1955173SQ20051003072
公開日2007年5月2日 申請(qǐng)日期2005年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月26日
發(fā)明者楊保華, 雷仕慶, 郭雅琦, 烏旭瓊, 夏凌云 申請(qǐng)人:信誼藥廠