專利名稱：埃博霉素類似物、其制備方法、藥物組合物及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗腫瘤活性的大環(huán)化合物、該化合物的制備方法、包含該化合物的藥物組合物以及該化合物的使用方法。更具體而言，本發(fā)明涉及一系列穩(wěn)定代謝的作為抗腫瘤劑的埃博霉素類似物。
背景技術(shù)：
埃博霉素藥學(xué)領(lǐng)域有用的大環(huán)內(nèi)酯類化合物。例如，發(fā)現(xiàn)具有以下結(jié)構(gòu)的埃博霉素A和B 埃博霉素A中R代表H，埃博霉素B中R代表Me發(fā)揮著與紫杉醇類似的微管穩(wěn)定化作用，并由此具有抗快速增殖細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞或其它高增殖性細(xì)胞疾病)的細(xì)胞毒性活性。Hofle，G.等人〔Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第35卷，No.13/14，1567-1569(1996)；1993年5月27日出版的WO93/10121和1997年5月29日出版的WO97/19086〕采用X射線結(jié)晶學(xué)分析確定了這些化合物的全部結(jié)構(gòu)。Bollag，D.M.等(Cancer Res.，第55卷，2325-2333(1995))的核心論文揭示了埃博霉素的細(xì)胞目標(biāo)是使微管穩(wěn)定化，這和已建立的臨床上有效的紫杉烷類具有的作用相同。
埃博霉素已引起了人們廣泛的興趣，這源于對(duì)其微管蛋白的穩(wěn)定性活性的發(fā)現(xiàn)。人們發(fā)現(xiàn)埃博霉素在體外能抗大量的具有紫杉醇抗性的人類癌細(xì)胞系(Kowalski，R.J.等，J.Biol.Chem.，第272卷，2534-2541(1997))，這一發(fā)現(xiàn)更加深了人們對(duì)埃博霉素的興趣。另外，與紫杉醇相比，埃博霉素的相對(duì)有效的總合成使得在埃博霉素類似物的合成中、以及其生物學(xué)活性和結(jié)構(gòu)/活性關(guān)系(SAR)特征中獲得更大的成就(Altmann，K.-H.等，Curr.Opin.Chem.Biol.，第5卷，424-431(2001)).
有幾批人員在這個(gè)領(lǐng)域里是比較活躍的，包括Memorial Sloan-Kettering癌癥研究中心的Danishefsky教授，美國(guó)斯克利普斯研究院的Nicolaou教授，諾華醫(yī)藥公司的Altmann教授以及德國(guó)先靈公司的Klar教授。舉例而言，Danishefsky領(lǐng)導(dǎo)的研究小組已經(jīng)制備出12，13-脫氧埃博霉素B，并且分析它的生物活性(ChouT.-C.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，第95卷，9642(1998))。美國(guó)斯克利普斯研究院的Nicolaou教授領(lǐng)導(dǎo)的小組已經(jīng)合成了12，13-環(huán)丙基、12，13-環(huán)丁基以及帶有嘧啶側(cè)鏈的埃博霉素類似物(Nicolaou，K.C.，J.Amer.Chem.Soc.，第123卷，9313-9323(2001))。德國(guó)先靈公司的小組已制備了含有16個(gè)鹵素取代基的埃博霉素衍生物(WO 00/49021)。另外，諾華醫(yī)藥公司的Altmann教授已經(jīng)合成了一種埃博霉素類似物，在此類似物中，噻唑分子被苯環(huán)型官能團(tuán)牢固的從構(gòu)象上鎖定(Altmann，K.-H.et al.，Chimica，第54卷，No.11，612-621(2000))。在這些埃博霉素衍生物中，包括12，13-脫氧埃博霉素B在內(nèi)的三種制劑已經(jīng)被進(jìn)一步用于I期后期和II期臨床試驗(yàn)，而且其它結(jié)構(gòu)的變體也正在獲得授權(quán)以進(jìn)行研究。
12，13-脫氧埃博霉素BDanishefsky研究小組發(fā)現(xiàn)，用CF3基團(tuán)取代C12上的甲基并且引入E-9，10雙鍵(參看下圖結(jié)構(gòu)式)可大大增強(qiáng)抗癌活性(Rivkin，A.等，J.Am.Chem.Soc.，第125卷，No.10，2899-2901(2003)；Chou，T-C.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第42卷，4762-4767(2003))。另外，還可觀察到此化合物(參看下圖結(jié)構(gòu)式)的非腫瘤特異性毒性明顯減少。

也已合成埃博霉素A和B的其他衍生物和類似物，并測(cè)試了它們抗各種癌癥以及其他異常增生性疾病的活性。這些類似物在以下文獻(xiàn)中有報(bào)道Hofle，G.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第35卷，No.13/14，1567-1569(1996)；Nicolaou，K.C.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，No.19，2097-2103(1997)；Su，D.-S.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，No.19，2093-2097(1997)；Su，D.-S.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，757-759(1997)；Meng，D.等，J.Amer.Chem.Soc.，第119卷，10073-10092(1997)；Yang，Z.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，166-168(1997)；Nicolaou，K.C.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，525-527(1997)；Nicolaou，K.C.等，Nature，第387卷，268-272(1997)；Schinzer，D.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第36卷，523-524(1997)；和Nicolaou，K.C.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，第37卷，2014-2045(1998)。
然而，所有這些埃博霉素類似物或衍生物都有一個(gè)潛在的易受攻擊的大環(huán)內(nèi)酯(環(huán)酯)連接，該連接容易發(fā)生酯酶介導(dǎo)的水解，因此導(dǎo)致其藥物動(dòng)力學(xué)差，例如半衰期短、口服藥物時(shí)其生物利用度低以及體外抗腫瘤活性受損。盡管它們抗癌細(xì)胞系的體外細(xì)胞毒性活性仍然卓越，由于其代謝不穩(wěn)定，仍然難以將其用于體內(nèi)(Lee，F(xiàn).等，Clin.Can.Res.，第7卷，1429-1437(2001))。
對(duì)于大環(huán)聚酮化合物，如抗生素紅霉素和埃博霉素，這種類型的代謝不穩(wěn)定的環(huán)酯源自其合成過(guò)程中的多模型(multimodular)酶裝配路線。在它們的生物合成途徑中，大環(huán)化出現(xiàn)在硫酯酶結(jié)構(gòu)域使鏈解開(kāi)過(guò)程中的聚酮化合物合成酶裝配路線的最下游位置(Walsh，C.T.，Science，Vol.303，1805-1810(2004))。自然界中沒(méi)有其它方式如直接的碳碳單鍵或雙鍵形式的連接進(jìn)行大環(huán)化，這就削弱了大自然生成更具代謝穩(wěn)定性的天然產(chǎn)物的能力。因此，技術(shù)上仍然需要更具代謝穩(wěn)定性的生物學(xué)活性埃博霉素類似物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及新穎的埃博霉素類似物，該類似物沒(méi)有代謝不穩(wěn)定的環(huán)酯連接，而具有抗增生以及抗腫瘤活性。本發(fā)明還涉及含有本發(fā)明化合物的藥物組合物。
本發(fā)明更進(jìn)一步涉及使用本發(fā)明化合物治療和預(yù)防增生性疾病或失調(diào)、原發(fā)癌或轉(zhuǎn)移性癌。本發(fā)明的化合物尤其適用于治療或預(yù)防對(duì)微管穩(wěn)定化試劑響應(yīng)的癌癥。
本發(fā)明另一目的是提供制備這種埃博霉素類似物和中間物的合成方法。本發(fā)明又一個(gè)目的是提供用于治療癌癥患者的組合物，該組合物含有采用本發(fā)明制備方法制得的任何埃博霉素類似物，并任選地含有藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
本發(fā)明還提供了用于制備埃博霉素化療類似物的各種中間物。
具體實(shí)施例方式
一方面，本發(fā)明提供下式(I)結(jié)構(gòu)的埃博霉素類似物 式中A-B選自O(shè)-CH2、CH2-O、CH2C(＝O)、C(＝O)CH2、CH2S(O)、CH2S(O)2、S(O)2CH2、NR8S(O)2、S(O)2NR8；D-E選自H2C-CH2、HC＝CH、O-CH2、CH2-O、-CH2CH2CH2-、-CH2CH＝CH-、-CH＝CHCH2-；R1、R2相同或不同，選自氫、C1-C10烷基、芳基、C7-C20芳烷基，或兩者形成-(CH2)n-基團(tuán)，其中n是2、3、4或5；R3、R3b相同或不同，選自氫、C1-C10烷基、芳基、C7-C20芳烷基，或兩者形成-(CH2)n-基團(tuán)，其中n是2、3、4或5；R4，R4a相同或不同，選自氫、C1-C10烷基、芳基、C7-C20芳烷基，或兩者形成-(CH2)n-基團(tuán)，其中n是2、3、4或5；R4b選自氫、C1-C10烷基、芳基或C7-C20芳烷基；R1a、R2a為H，或者一起形成建；R3a選自H、羥基或氰基；R6、R7一起形成另一根鍵，或者形成-O-或-CH2-；R5選自氫、C1-C10烷基、芳基、C7-C20芳烷基、CO2H、CO2-C1-C10烷基、CH2OH、CH2O-烷基、CH2O-芳基、CH2O-?；?、CN、CH2NH2、CH2N(烷基、酰基、芳?；?1.2，或者鹵代C1-C10烷基，如CH2F、CF3；R8選自氫、C1-C10烷基、芳基、C7-C20芳烷基、鹵代低級(jí)烷基；R9選自芳基、取代的芳基以及雜環(huán)。
在一優(yōu)選的實(shí)施例中，上述式I化合物的A-B選自-CH2C(O)-、-C(O)CH2-、-CH2S(O)-、-CH2S(O)2-、-CH2O-或-OCH2-。
在另一優(yōu)選實(shí)施例中，上述式I化合物的D-E選自-CH2CH2-、-CH2＝CH2-。
在又一優(yōu)選實(shí)施例中，上述式I化合物的R5選自CH3、CH2F、CHF2或CF3。
在本發(fā)明另一實(shí)施例中，本發(fā)明還涉及以下化合物(或中間物) 在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及通過(guò)將治療有效量或預(yù)防有效量的式(I)化合物給予動(dòng)物〔優(yōu)選是哺乳動(dòng)物，尤其是需要的人對(duì)象，本文指患者〕而治療各種癥狀的方法。在給藥前，通常將本發(fā)明的一種或多種化合物配制成含有有效劑量的所述一種或多種化合物與一種(或多種)藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。
在另一實(shí)施例中，本發(fā)明涉及通過(guò)使哺乳動(dòng)物細(xì)胞與本發(fā)明化合物接觸而誘導(dǎo)所述細(xì)胞中的微管穩(wěn)定化的方法。
可使用本發(fā)明化合物或其藥物組合物治療或預(yù)防的疾病包括但不限于原發(fā)癌、轉(zhuǎn)移性癌、實(shí)體瘤以及血液相關(guān)疾病而言。在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及治療和/或預(yù)防下述疾病的方法腦癌、乳腺癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥、胃癌、膀胱癌、前列腺癌、腸癌、直腸癌、肝癌、肺癌(包括小細(xì)胞型和非小細(xì)胞型)、胰腺癌、食道癌、口腔癌、咽癌、腎癌、骨癌、垂體癌、卵巢癌、子宮癌、皮膚癌、頭頸部癌、宮頸癌以及喉癌。
在另一實(shí)施例中，本發(fā)明還提供含有治療有效量或預(yù)防有效量的一種或多種本發(fā)明化合物以及藥學(xué)上可接受的載體或媒介物的藥物組合物。藥學(xué)上可接受的載體或媒介物可包括賦形劑、稀釋劑或其混合物。
本文所述的化合物或者藥物組合物可用于與其他抗癌或抗細(xì)胞毒性的試劑、血管生成抑制劑、抗癌疫苗以及基于抗體的治療相結(jié)合進(jìn)行治療。另外，本文所述的化合物和藥物組合物也可作為現(xiàn)有治療和/或試驗(yàn)治療的輔助手段。還可結(jié)合化療或放療使用本發(fā)明的化合物。
給藥方式包括但不限于口服、胃腸外、粘膜以及局部給藥。這種給藥方式還包括肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、腦內(nèi)、硬腦膜外、舌下、口腔、直腸、陰道、鼻內(nèi)、眼內(nèi)、口服以及透皮給藥。較佳的是，將藥物組合物配制成注射劑。較佳的是，結(jié)合抗酸劑或其它能有效中和胃酸的合適緩沖液進(jìn)行口服給藥。
以下描述本發(fā)明的各術(shù)語(yǔ)的定義。除非另有說(shuō)明，不管是單獨(dú)使用還是作為較大基團(tuán)中的一部分，這些定義適用于整篇說(shuō)明書(shū)的各術(shù)語(yǔ)。
術(shù)語(yǔ)“烷基”指可任選取代的長(zhǎng)1-20個(gè)碳原子、較佳1-7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”指可任選取代的C1-4烷基。
術(shù)語(yǔ)“取代的烷基”指被一至四個(gè)或更多個(gè)取代基取代的烷基，這些取代基可以是鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、羥基、烷氧基、環(huán)烷基氧基、雜環(huán)氧基(heterocyclooxy)、氧基(oxo)、烷?；?、芳基、芳氧基、芳烷基、烷酰氧基、氨基、烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、環(huán)烷氨基、雜環(huán)氨基、雙取代氨基(其中，氨基上的兩個(gè)取代基選自烷基、芳基、芳烷基)、烷酰氨基、芳酰氨基、芳烷酰氨基、取代烷酰氨基、取代芳氨基、取代芳烷酰氨基、巰基、烷基巰基、芳基巰基、芳烷基巰基、環(huán)烷基巰基、雜環(huán)巰基、硫逐烷基、硫逐芳基、硫逐芳烷基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、芳烷基磺?；?、磺酰氨基(例如SO2NH2)、取代的磺酰氨基、硝基、氰基、羧基、氨基甲?；?例如CONH2)、取代的氨基甲酰(例如CONH烷基、CONH芳基、CONH芳烷基，或者其氮上具有兩個(gè)選自烷基、芳基、芳烷基取代基的物質(zhì))、烷氧基羰基、芳基、取代的芳基、胍基和雜環(huán)基(如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等)。其中，如上所述，取代基自身可進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、芳基和芳烷基的基團(tuán)取代。在此給出的烷基及取代的烷基的定義也適用于烷氧基中的烷基部分。
術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”指可任選取代的不飽和脂族烴基，具有1至9個(gè)碳原子、較佳具有2-6個(gè)碳原子和一個(gè)或多個(gè)雙鍵。取代基可包括在上述取代的烷基中提到的取代基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵代”指的是氟、氯、溴、碘。
術(shù)語(yǔ)“芳基”指的是單環(huán)或雙環(huán)芳族烴基，具有6-12個(gè)環(huán)碳原子，例如苯基、萘基、聯(lián)苯基以及二苯基，它們每個(gè)都可以被取代。
術(shù)語(yǔ)“芳烷基”指通過(guò)烷基連接到一個(gè)更大的基團(tuán)實(shí)體上的芳基，如芐基。
術(shù)語(yǔ)“取代的芳基”指被1-4個(gè)選自以下的取代基取代的芳基如烷基、取代的烷基、鹵代、三氟甲基、三氟甲氧基、羥基、烷氧基、環(huán)烷基氧基、雜環(huán)氧基、烷?；⑼轷Ｑ趸?、氨基、烷氨基、二烷氨基、芳烷氨基、環(huán)烷氨基、雜環(huán)氨基、烷酰氨基、巰基、烷基巰基、環(huán)烷基巰基、雜環(huán)巰基、脲基、硝基、氰基、羧基、羧基烷基、氨基甲酰、烷氧基羰基、硫逐烷基、硫逐芳基、烷基磺?；?、磺酰氨基、芳氧基等。取代基自身可被進(jìn)一步一種或幾種選自鹵素、烴基、烷基、烷氧基、芳基、取代的烷基、取代的芳基和芳烷基取代。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指可任選取代的飽和環(huán)狀烴基環(huán)系統(tǒng)，較佳含有1至3個(gè)環(huán)狀，每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)碳，這些環(huán)還可與不飽和的C3-C7碳環(huán)結(jié)構(gòu)稠合。代表性的基團(tuán)包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)葵基、環(huán)十二烷基以及金剛烷基。代表性的取代基包括如上所述的一個(gè)或多個(gè)烷基，或者上述烷基取代基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”指可任選取代的、不飽和的、部分飽和的或完全飽和的芳族或非芳族環(huán)狀基團(tuán)，例如，該基團(tuán)為4-7元單環(huán)，7-11元雙環(huán)或10-15元三環(huán)基團(tuán)。這些基團(tuán)在含有至少一個(gè)碳原子的環(huán)中至少含有一個(gè)雜原子。含雜原子的雜環(huán)基的每一個(gè)環(huán)可含有1、2或3個(gè)選自氮原子、氧原子、硫原子的雜原子，其中氮原子和硫原子也可以被任選地氧化，氮原子可以被任選地季胺化。雜環(huán)基團(tuán)可通過(guò)任一雜原子或碳原子連接到更大的分子上。
代表性的單環(huán)雜環(huán)基團(tuán)包括吡咯烷基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、氧雜環(huán)丁烷基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、唑烷基、異噁唑啉基(isoxazolinyl)、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、異噻唑基、異噻唑烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧合氮雜基、氮雜基、4-哌啶酮基、吡啶基、N-氧代吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、四氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、四氫硫代吡喃砜、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉亞砜、硫代嗎啉砜、1，3-二氧戊環(huán)以及四氫-1，1-二氧代噻吩基、二噁烷基、異噻唑烷基、噻唑烷基(thietanyl)、硫雜丙環(huán)基(thiiranyl)、三嗪基和三唑基等。
代表性的雙環(huán)雜環(huán)基團(tuán)包括苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、奎寧環(huán)基、喹啉基、N-氧化喹啉基、四氫異喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、中氮茆基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃吡啶基〔例如呋喃[2，3-c]吡啶基、呋喃[3，1-b]吡啶基或者呋喃[2，3-b]吡啶基〕、二氫異吲哚基、二氫喹唑啉基〔例如3，4-二氫-4-氧-喹唑啉基]、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并二嗪基、苯并呋咱基、苯并噻喃基、苯并三唑基、苯并吡唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噻喃基、二氫苯并噻喃基砜、二氫苯并吡喃基、二氫吲哚基、異苯并二氫吡喃基、異二氫吲哚基、1，5-二氮雜萘基、2，3-二氮雜萘基、胡椒基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、喹唑啉基、四氫喹啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基等。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”的代表性取代基包括上述取代的烷基或取代的芳基的定義中的一個(gè)或多個(gè)取代基，以及較小的雜環(huán)基，如環(huán)氧化物、氮丙啶等。
術(shù)語(yǔ)“?；敝傅氖?C(O)-烷基。
術(shù)語(yǔ)“取代的烷?；敝傅氖?C(O)-取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“芳?；敝傅氖?C(O)-芳基。
術(shù)語(yǔ)“取代的芳?；敝傅氖?C(O)-取代的芳基。
術(shù)語(yǔ)“雜原子”包括了氧原子、硫原子以及氮原子。
本發(fā)明的化合物，尤其是式I化合物，與各種有機(jī)或無(wú)機(jī)酸形成鹽。這些鹽包括與鹽酸、氫溴酸、甲磺酸、羥乙烷磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、馬來(lái)酸、苯磺酸、甲苯磺酸以及其他各種酸形成的鹽(例如硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽等)。通過(guò)在使鹽沉淀的媒介中或者在隨后進(jìn)行蒸發(fā)的水性媒介中使式I化合物與等量的酸反應(yīng)而形成所述鹽。
式I化合物也可以和堿金屬(如鈉、鉀、鋰)、堿土金屬(如鈣和鎂)、有機(jī)堿(如，二環(huán)己胺和三丁基胺)、以及嘧啶和氨基酸(如精氨酸，賴氨酸等)結(jié)合而形成鹽?？刹捎靡韵路绞将@得所述鹽，例如，可通過(guò)在使鹽沉淀的媒介中或在隨后進(jìn)行蒸發(fā)的水性媒介中使所需的離子與羧酸質(zhì)子(如果存在于式I化合物中的話)交換。其它的鹽采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)形成。
另外，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)，且其也包括在本文所述的術(shù)語(yǔ)鹽的定義內(nèi)。
本發(fā)明還包括式I化合物的前體藥物和溶劑合物。本文使用的術(shù)語(yǔ)前體藥物指將其給予對(duì)象后，通過(guò)代謝或者化學(xué)過(guò)程而發(fā)生化學(xué)轉(zhuǎn)換、從而產(chǎn)生式I化合物、其鹽或溶劑合物的化合物。例如，式I化合物可以形成一種羧酸酯，此物質(zhì)攝取后可被水解。通常，通過(guò)酯化該分子上任一羧酸部分可形成羧酸酯。式I化合物的溶劑合物較佳為水合物。
前體藥物的各種形式在本領(lǐng)域中是眾所周知的，并在文獻(xiàn)中有廣泛評(píng)述。這些前體藥物送遞衍生物在以下文獻(xiàn)中有討論，如a)《前體藥物的設(shè)計(jì)》，H.Bundgaard(編者)，Elsevier(1985)；b)《酶學(xué)方法》，K.Widder等(編者)，學(xué)術(shù)出版社，Vol.42，309-396(1985)；c)《藥物設(shè)計(jì)與發(fā)展的教科書(shū)》，Krosgaard-Larsen and H.Bundgaard(編者)，第五章，″前體藥物的設(shè)計(jì)與應(yīng)用，″113-191(1991)；d)H.Bundgaard，《高級(jí)藥物衍生回顧》，8，1-38(1992)；e)H.Bundgaard，J.of《藥學(xué)》，77，285(1988)；f)N.Kakeya et al.，Chem.Oharm.Bull.，32，692(1984)。
通過(guò)使用本領(lǐng)域中一種的聚乙二醇化技術(shù)，使用式I中存在的羥基將式I轉(zhuǎn)化成聚乙二醇化共軛物(conjugate)(Greenwald，R.B.等，Advanced Drug DeliveryReview，55，217-250，(2003))。聚乙二醇化共軛物可以提供式I化合物的改進(jìn)的藥物動(dòng)力學(xué)和體內(nèi)功效。聚乙二醇的分子量從1000至50000不等。
本發(fā)明的化合物可以從多種旋光異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體以及立體異構(gòu)體存在。雖然本文顯示的化合物以一種光學(xué)取向(orientation)描述，但本發(fā)明包括所有的異構(gòu)體及其混合物，包括區(qū)域異構(gòu)體(regioisomer)和立體異構(gòu)體。
式I的首選化合物為下式代表的化合物以及其異構(gòu)體、包合物、前體藥物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或者其水合物 式中A-B選自O(shè)-CH2、CH2-O、CH2C(＝O)、C(＝O)CH2、CH2S(O)2、S(O)2CH2、NR8S(O)2、S(O)2NR8；D-E選自H2C-CH2、HC＝CH；R1、R2、R3、R4相同或不同，選自氫或低級(jí)烷基；
R3b、R4a、R4b為氫；R1a、R2a為H，或者一起形成建；R3a選自H、羥基或氰基；R6、R7一起形成另一根鍵，或者形成-O-或-CH2-；R5選自低級(jí)烷基、CO2H、CH2OH、CH2O-烷基、CH2O-芳基、CN、CH2NH2、鹵代低級(jí)烷基，如CH2F、CF3；R8選自氫、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基；R9是本文所定義的雜環(huán)基，包括但不限于 吡咯烷基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、唑烷基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、哌嗪基、氮雜基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、嗎啉基、噻唑烷基、硫雜丙烷基、三嗪基、三唑基。
在本發(fā)明一優(yōu)選的化合物中，R9優(yōu)選選自 其中，R8選自H、C1-4烷基、鹵代C1.4烷基。
藥物組合物及制劑本發(fā)明還提供藥物組合物，該組合物含有至少一種其有效量能治療癌癥或其它增生性疾病的本發(fā)明化合物(如式I化合物)和藥學(xué)上可接受的載體或媒介。本發(fā)明組合物可含有下述其它治療劑，并可如根據(jù)藥學(xué)制劑領(lǐng)域已知的技術(shù)或者可接受的藥學(xué)實(shí)踐所要求的那樣采用常規(guī)的固體或液體載體或媒介、以及適用于所需給藥方式的藥學(xué)添加劑(如賦形劑、結(jié)合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、香料等)進(jìn)行配制。
還可將式I化合物配制在無(wú)菌的溶液或懸浮液中，形成用于胃腸外給藥的組合物?？筛鶕?jù)可接受的藥學(xué)實(shí)踐的要求，用約0.1-500毫克的式I化合物與生理學(xué)上可接受的媒介、載體、賦形劑、結(jié)合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑等混合在一單元?jiǎng)┬椭?。這些組合物或制劑中活性物質(zhì)的量較佳是獲得所述的合適劑型的量。
在一個(gè)具體實(shí)施例中，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”指獲得聯(lián)邦或州政府的相關(guān)部門(mén)所批準(zhǔn)或者在美國(guó)藥典或其他社會(huì)公認(rèn)的藥典上所羅列，可用于動(dòng)物尤其是人。本文使用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”包括但不限于可能存在于本發(fā)明方法和組合物使用的化合物中的酸性或堿性基團(tuán)的鹽。
口服給藥的代表性組合物包括懸浮液，該懸浮液可含有賦予體積的微晶纖維素；作為懸浮劑的褐藻酸或者褐藻鈉；作為粘性增強(qiáng)劑的甲基纖維素；甜味劑，比如果糖、天冬甜素或者糖精；調(diào)味劑，如薄荷油、冬青油；著色劑以及防腐劑；用于提供藥學(xué)上可口的制品。即釋片劑可含有如一種或多種微晶纖維素、磷酸二鈣、淀粉、硬酯酸鎂、乳糖以及其他本領(lǐng)域周知的賦形劑、結(jié)合劑、添加物、崩解劑、稀釋劑以及潤(rùn)滑劑。模制片、壓制片或凍干片是可使用的代表性形式。
代表性的組合物包括那些用速溶的稀釋劑如甘露醇、乳糖、蔗糖和環(huán)糊精配制化合物的組合物。還包含在這些制劑中的可以是高分子賦形劑，如微晶纖維素、聚乙二醇(PEG)等。這些制劑還可包含用于輔助粘膜吸附的賦形劑，如羥丙基纖維素(HPC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羧甲基纖維素鈉(SCMC)、馬來(lái)酐共聚物(例如從Aldrich中購(gòu)得的Gantrez)，以及用于控制釋放的試劑，如聚丙烯酸共聚物、卡波普(carbopol)等。為了制備和使用的簡(jiǎn)便，還可添加本領(lǐng)域周知的滑潤(rùn)劑、助流劑、香料、著色劑以及穩(wěn)定劑。另外，當(dāng)本發(fā)明組合物成藥片或藥丸形式時(shí)，可將其包涂，以延遲藥物在胃腸道中的崩解和吸收，從而在一個(gè)較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供持續(xù)的作用。較佳的是，將口服組合物與抗酸劑一同給予，用以幫助中和胃腸道液體，以阻止活性化合物的分解。包圍在滲透活性強(qiáng)(driving)的化合物四周的選擇性滲透膜也適用于口服給予的化合物或藥物組合物。在后面這些平臺(tái)上，該強(qiáng)的化合物吸收從環(huán)繞該膠囊的環(huán)境中得到的液體而膨脹，從而從孔隙中置換(displace)試劑或試劑組合物。這些送遞平臺(tái)可提供基本上為零級(jí)數(shù)的送遞特征(zero-order profile)，這與即釋制劑的錐形特征相反。還可使用如單硬酯酸甘油或者硬酯酸甘油之類的延時(shí)型材料。
用于鼻氣霧劑和吸入給予的代表性組合物包括鹽溶液，該溶液可含有如芐醇或其他適當(dāng)?shù)姆栏瘎?、用于提高生物利用率的吸收促進(jìn)劑、和/或其他本領(lǐng)域已知的增溶劑和分散劑。
用于胃腸外給藥的代表性組合物包括注射液或者懸浮液，它們可含有合適的無(wú)毒的腸道外可接受的稀釋劑或溶劑，包括表面活性劑，如聚氧乙烯化蓖麻油、Cremphor EL-聚山梨醇酯-80、甘露醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇、乙醇、水、Ringer′s溶液、Ringer′s乳酸鹽溶液、葡萄糖溶液、鹽溶液例如等張氯化鈉溶液；或者其他合適的分散劑或增濕劑和懸浮劑，包括合成的單甘油酯或甘油二酯；還有脂肪酸，包括油酸等。在一個(gè)實(shí)施例中，在使用本發(fā)明的化合物之前，立即用注射用無(wú)菌水(USP)和5％葡萄糖水溶液(D5W)或者0.9％注射用氯化鈉(USP)重新配制。
用于直腸給藥的代表性組合物包括栓劑，它可包含一種合適的非刺激性的賦形劑，例如可可油、合成的甘油酯或者聚乙二醇，這些物質(zhì)在常溫下是固態(tài)的，但是在直腸腔內(nèi)就可液化和/或溶解從而釋放出藥物。
用于局部給藥的代表性組合物包括一種局部載體，如Plastibase(Bristol-Myers Squibb公司提供的聚乙烯凝膠化的礦物油)。舉例而言，可局部給予本發(fā)明的化合物，用于治療與牛皮癬相關(guān)的斑塊，為此，可將該化合物配制成霜或油膏。
化合物的使用和功效本發(fā)明提供通過(guò)給予患者治療有效量或預(yù)防有效量的本發(fā)明化合物會(huì)其藥學(xué)上可接受的鹽治療和/或預(yù)防癌癥的方法，并獲得良好的療效。
術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指將引起給患者治病的獸醫(yī)或臨床醫(yī)生所期望的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的本發(fā)明化合物的量。
術(shù)語(yǔ)“預(yù)防有效量”指將預(yù)防或抑制或減輕獸醫(yī)或臨床醫(yī)生正試圖預(yù)防、抑制或減輕的患有醫(yī)學(xué)癥狀的患者的痛苦的本發(fā)明化合物的量。不受任何特殊理論的限制，本發(fā)明的化合物，尤其是式I化合物，被認(rèn)為是主要的微管穩(wěn)定劑。本發(fā)明的化合物可用于治療各種癌癥和其它增生性疾病，包括但不限于癌，包括膀胱癌、骨癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、于宮頸癌、甲狀腺癌、皮膚癌、鱗狀細(xì)胞癌；淋巴系統(tǒng)的造血細(xì)胞腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞性淋巴瘤以及Burkett’s淋巴瘤；骨髓系統(tǒng)的造血細(xì)胞腫瘤，包括急性及慢性骨髓性白血病和前髓細(xì)胞白血??；間葉細(xì)胞源性腫瘤，包括纖維肉瘤、骨肉瘤以及橫紋肌肉瘤；其他腫瘤，包括黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、著色性干皮病(xenoderma pigmentosum)，四原子癌(tetratocarcinoma)、角化棘皮瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、甲狀腺濾泡癌(thyroid follicularcancer)以及神經(jīng)膠質(zhì)瘤；中樞及外圍神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、神經(jīng)鞘瘤。
本發(fā)明的化合物對(duì)于治療或預(yù)防腦癌、乳腺癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、胃癌、膀胱癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝癌、肺癌(包括小細(xì)胞性及非小細(xì)性)、胰腺癌、食道癌、口腔癌、咽癌、腎癌、骨癌、垂體癌、卵巢癌、子宮癌、皮膚癌、頭頸部癌癥、頸喉部癌癥都是有效的。
式I化合物也可以抑止血管生成，因此可以影響腫瘤的生長(zhǎng)并提供治療腫瘤以及腫瘤相關(guān)疾病的方法。式I化合物的這種抗血管生成的功能也可用于治療其他對(duì)抗血管生成物質(zhì)響應(yīng)的疾病，這些疾病包括但不限于某些形式的視網(wǎng)膜血管相關(guān)的失明、關(guān)節(jié)炎，尤其是炎性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、銀屑病及牛皮癬。
本發(fā)明式I化合物將誘導(dǎo)或抑制對(duì)正常的發(fā)育和自身穩(wěn)定而言是關(guān)鍵的生理學(xué)細(xì)胞死亡程序——細(xì)胞程序死亡。細(xì)胞程序死亡途徑的變化導(dǎo)致了各種人類疾病的發(fā)病機(jī)理。式I化合物可作為凋亡的調(diào)節(jié)劑，用于治療與細(xì)胞程序死亡失常相關(guān)的各種人類疾病，包括但不限于癌癥和癌前損害、免疫反應(yīng)相關(guān)疾病、病毒感染、肌肉骨骼系統(tǒng)的退行性病變以及腎病。
不希望被束縛于任何機(jī)制或形態(tài)學(xué)，本發(fā)明的化合物也可以用來(lái)治療除癌癥或其他增生性疾病外的其它疾病。這些疾病包括但不限于病毒感染，如皰疹病毒、痘病毒、EB病毒、辛德畢斯病毒以及腺病毒的感染；自身免疫疾病，如全身性紅斑狼瘡、免疫介導(dǎo)的血管球性腎炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸病、自身免疫性糖尿?。簧窠?jīng)退化性疾病，如阿爾茨海默氏病、艾滋病相關(guān)性癡呆、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓肌萎縮、小腦退化；艾滋病；脊髓增生異常綜合癥；再生障礙性貧血；心梗性缺血性損傷；中風(fēng)和再灌注損傷；再狹癥；心律失常；動(dòng)脈硬化癥；毒素誘導(dǎo)性或酒精性肝??；血液性疾病，如慢性貧血、再生障礙性貧血；肌肉骨骼系統(tǒng)的退行性疾病，如骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎；阿司匹林敏感性鼻竇炎；囊性纖維化；多發(fā)性硬化；腎病以及癌性疼痛。
本發(fā)明提供一種給需要的動(dòng)物，特別是哺乳動(dòng)物更尤其是人類，治療前述疾病(尤其是癌癥或其它增生性疾病)的方法，包括向需要的對(duì)象給予至少一種有效量的式I化合物?？膳c本發(fā)明化合物一起使用本文下面描述的其它治療劑。在本發(fā)明的方法中，所述其它治療劑可在給予本發(fā)明之前給予，或者同時(shí)或之后給予。
可將本發(fā)明的化合物給予當(dāng)前正在接受化療以及未進(jìn)行化療的患者?？蓪⒈景l(fā)明的化合物給予之前已進(jìn)行化療或從未進(jìn)行化療的患者?？蓪⒈景l(fā)明的化合物給予當(dāng)前正進(jìn)行放療或者未進(jìn)行放療的患者?？蓪⒈景l(fā)明的化合物給予之前進(jìn)行了放療以及從未進(jìn)行放療的患者。
可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法確定本發(fā)明化合物的有效量。該有效量包括給予人的代表性劑量，即每天每千克體重約0.5到200毫克，這可以被一次性給予也可以被分成幾個(gè)劑量單獨(dú)給予，例如一天四次。較佳的是，以少于100mg/kg/天的劑量一次或分2-4次口服、靜脈內(nèi)或采用兩種方式給予該化合物。容易理解，具體劑量水平以及給藥次數(shù)對(duì)于每個(gè)患者來(lái)說(shuō)都可能是不一樣的，這有賴于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知道的各種因素，包括具體使用的化合物的活性、代謝穩(wěn)定性以及該化合物作用時(shí)間的長(zhǎng)短、使用藥物的對(duì)象的種類、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥方式、給藥時(shí)間、排泄速率、藥物組合、具體疾病的嚴(yán)重程度。適宜的治療對(duì)象包括動(dòng)物，最佳是哺乳動(dòng)物，尤其是人。
通常，本發(fā)明的化合物一直要被給予患者直到其出現(xiàn)反應(yīng)，例如腫瘤尺寸的減?。换蛘咧钡接^察到毒性限制性劑量。本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易知道患者何時(shí)表現(xiàn)出反應(yīng)或者何時(shí)到底劑量限制性毒性。與式I和II化合物有關(guān)的常規(guī)劑量限制性毒性包括但不限于疲勞、關(guān)節(jié)痛/肌肉痛、食欲減退、高度過(guò)敏、中性白細(xì)胞減少、血小板減少以及神經(jīng)毒性。
在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的化合物通過(guò)靜脈輸注給予患者，輸注時(shí)間約1O分鐘到3小時(shí)不等，較佳約30分鐘到2小時(shí)，更佳約45分鐘到90分鐘，最佳約1小時(shí)。特別是，本發(fā)明的方法包括給藥方案，比如一天一次，持續(xù)2到10天，較佳3到9天，更佳4到8天，最佳5天。在一個(gè)實(shí)施例中，各周期間有3天到5周、較佳4天到4周、更佳5天到3周、最佳1到2周停止治療。在另一實(shí)施例中，可口服、靜脈或采用這兩種方式給予本發(fā)明化合物，一天一次，持續(xù)3天，然后隔較佳是1到3周停止治療。在又一實(shí)施例中，可口服、靜脈或采用這兩種方式給予本發(fā)明化合物，一天一次，持續(xù)5天，然后隔較佳是1到3周停止治療。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，給予本發(fā)明化合物的治療循環(huán)是每天一次，連續(xù)5天，各周期之間的時(shí)間是2-10天，較佳是1周。
也可每1-10周、較佳是每2-8周、更佳是每3-6周、更佳是每3周通過(guò)口服、靜脈內(nèi)或采用這兩種方式給予本發(fā)明的化合物一次。在一個(gè)實(shí)施例中，每周給予本發(fā)明化合物一次。在另一實(shí)施例中，每3周給予本發(fā)明的化合物一次。
本發(fā)明的化合物可以被單獨(dú)給予或者和其他在癌癥或其他增生性疾病的治療過(guò)程中有療效的的抗癌及抗細(xì)胞毒素物質(zhì)一起給予。這些物質(zhì)可以與式I化合物被同時(shí)給予或相繼給予?？拱┗蚩辜?xì)胞毒性藥物的組合尤為有效，其中，所選擇的第二種藥物以不同的方式起作用，或者在細(xì)胞周期的不同階段起作用，如在S期，而本發(fā)明式I化合物在G2-M期起作用。
抗癌或抗細(xì)胞毒素藥物的例子包括但并不局限于烷基化劑，比如氮芥、烷基磺酸鹽、亞硝基脲、烯亞胺、三氮烯；抗代謝物，如葉酸拮抗劑、嘌呤類似物、嘧啶類似物；抗生素，如環(huán)蒽類抗生素(anthracyclines)、博來(lái)霉素、絲裂霉素、放線菌素D、博來(lái)霉素A2、博來(lái)霉素B2、派來(lái)霉素以及比利卡霉素(plicamycin)；酶，例如L-天門(mén)冬酰胺酶；法尼基(farnesyl)蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑；激素類物質(zhì)，如糖腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素/抗雌激素、雄激素/抗雄激素、黃體酮、促黃體激素釋放激素拮抗劑、乙酸奧曲肽(octreotide acetate)；微管分裂劑，如抗癌天然物(ecteinascidins)或者其類似物或衍生物；微管穩(wěn)定化物質(zhì)，例如紫杉醇(即Taxol)、紫素(docetaxel)、埃博霉素A-F或者他們的類似物及衍生物；植物衍生物，如長(zhǎng)春蔓生物堿、表鬼臼毒素、紫杉醇類；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如，依力替康)；含異戊二烯基的蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑；還有各種其他物質(zhì)，比如羥基脲、甲基芐肼、鄰對(duì)滴滴滴、六甲密胺、鉑系金屬配合物如順鉑、卡鉑；以及其他抗癌或抗細(xì)胞毒性物質(zhì)，如生物反應(yīng)修飾劑、生長(zhǎng)因子、免疫調(diào)節(jié)劑、單克隆抗體。本發(fā)明的化合物也可以與化療或放療結(jié)合使用。
該類抗癌/抗細(xì)胞毒性試劑的代表性例子包括但不限于順鉑、卡鉑、甲氰咪胍、洋紅霉素、鹽酸氮芥、五甲基三聚氰胺(pentamethylmelamine)、三胺硫磷、替尼泊苷、環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、去甲氧竹紅霉素、苯丙氨酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、曲磷胺、曲奧舒凡、足葉草毒素及其衍生物、磷酸依托泊苷、依托泊苷、異長(zhǎng)春堿、環(huán)氧長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、9-氨基喜樹(shù)堿、伊立替康、克利斯納托(crisnatol)、苯丁酸氮芥、甲地孕酮、甲基葉酸、絲裂霉素C、Ecteinascidin-743、甲磺酸丁二醇二酯、卡氮芥(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、洛伐他汀、1-甲基-4-苯基吡啶鎓(phenylpyridiniumion)、司莫司汀、蛋白激酶C抑制劑、鏈佐星、三胺硫磷、苯二甲藍(lán)、氮烯咪胺、氨基蝶呤、氨甲蝶呤、三甲曲沙、硫鳥(niǎo)嘌呤、巰基嘌呤、氟達(dá)拉濱、脫氧肋間型霉素(pentostatin)、克拉屈賓、阿糖胞苷(ara C)、甲基絲裂霉素、5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、鹽酸阿霉素、甲酰四氫葉酸、霉酚酸、柔紅霉素、去鐵胺、氟尿苷、脫氧氟尿苷、來(lái)迪特列克迪(ratitrexed)、伊達(dá)比星、表阿霉素、吡喃阿霉素、佐柔比星、米托蒽醌、硫酸博來(lái)霉素、絲裂霉素C、放線菌素D、藏紅花醛素(safracins)、藏紅花醛霉素(saframycins)、喹啉并咔辛類(quinocarcins)、雙可地莫利德斯(discodermolides)、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、維托佛芬(vertoporfin)、紫杉醇、三苯氧胺、雷洛昔芬、噻唑呋喃(tiazofuran)、硫鳥(niǎo)嘌呤、病毒唑、EICAR、雌莫司汀、雌莫司汀磷酸鈉、氟他胺、比卡魯胺、布舍瑞林、亮丙瑞林、蝶啶、第依尼瑟斯(diyneses)、左旋咪唑、阿福拉康(aflacon)、干擾素、白細(xì)胞介素、白細(xì)胞間介素-2、非格司亭、沙格司亭、利妥昔單抗、卡介苗、維生素A酸、鹽酸伊立替康、倍他米松、鹽酸吉西他濱、異搏定、依托泊苷VP-16、六甲蜜胺、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子幫浦抑制劑、拓?fù)涮婵怠?br> 以上列出的抗癌/抗細(xì)胞毒性試劑中首選的是紫杉醇、順鉑、卡鉑、鹽酸阿霉素、洋紅霉素、柔毛霉素、氨喋呤、氨甲蝶呤、甲基葉酸、絲裂霉素C，Ecteinascidin-743，甲基絲裂霉素、5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、吉西他濱、阿糖胞苷、足葉草毒素及其衍生物(如依托泊苷、磷酸依托泊苷或替尼泊苷)、苯丙氨酸氮芥、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、異長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛和環(huán)氧長(zhǎng)春堿。
還可將式I化合物及其組合物和上述其他抗癌/抗細(xì)胞毒性試劑與其他對(duì)上述癥狀有特定治療作用的制劑配制或共同給予。例如，本發(fā)明化合物可與預(yù)防反胃高度過(guò)敏、胃痛的制劑(如止嘔劑)和H1及H2抗組胺劑一起配制。本發(fā)明化合物還可與抗血管生成的化合物、拓樸異構(gòu)酶抑制劑和抗體制劑配制。
本發(fā)明化合物也可與血管生成拮抗劑相結(jié)合。血管生成拮抗劑包括有表皮生長(zhǎng)因子(EGF)抑制劑、表皮生長(zhǎng)因子激酶(如EGF酪氨酸激酶)拮抗劑、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)拮抗劑、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)拮抗劑、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)拮抗劑和蛋氨酸受體蛋白2(Met AP2)拮抗劑。首選的血管生成拮抗劑為直接作用于血管生成因子的抗體。
該類血管生成拮抗劑主要有二氫吲哚硫酮類(indolinethiones)、吡啶并嘧啶類(pyridopyrimidines)、喹啉并噁唑類(quinoazolines)、苯基-吡咯并嘧啶類(phenyl-pyrrolo-pyrimidines)、曲妥珠單抗、IMC-C225、AG 1571(SU 5271)，SU 5416，SU6668、α-干擾素、白細(xì)胞介素12、IM 862、EMD-121974、鈣內(nèi)流抑制劑(CAI)、新霉素、角鯊?fù)榘?squalamine)、血管內(nèi)皮抑素、SI-27，MMI-166，馬立馬司他、BAY-129556，prinomastat(AG-3340)、metastat(COL-3)，CGS-27023A和BMS-275291。
上述治療成分與式I代表的化合物結(jié)合后，可以其常用治療劑量給藥，例如可參照the Physician′s Desk Reference(56thed.，2002)或由執(zhí)業(yè)醫(yī)師決定給藥劑量。
給藥途徑式I代表的化合物可通過(guò)以下途徑給予，例如，以藥片、膠囊、粒劑或粉劑等形式口服；舌下給藥；口腔給藥；以無(wú)菌注射用水、無(wú)水溶液或懸浮液的形式采用皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)注射或灌注技術(shù)腸道外給藥；以氣霧劑形式經(jīng)鼻吸入；以霜?jiǎng)┗蛩幐嘈问骄植客磕ǎ灰运▌┬问浇?jīng)肛門(mén)給藥；以包含在無(wú)毒可藥用載體或賦形劑中的單位劑量形式給藥。該化合物可制成立即釋放或持續(xù)釋放藥效的形式。使用包含該化合物的適當(dāng)藥物成分可實(shí)現(xiàn)立即釋放或持續(xù)釋放，尤其是使用皮下植入或滲透泵可持續(xù)釋放藥效。該化合物也可以微脂體形式給藥，例如，將活性物質(zhì)混合于藥片、膠囊、溶液或懸浮液中，每單位劑量含約1-500mg式I代表的化合物或混合物，，也可使用含0.01到5％式I代表的化合物的外用藥物局部涂抹，每天1-5次。推薦用量為每單位劑量1mg、5mg、10mg、25mg、100mg、250mg、500mg。
在一具體實(shí)施例中，可在需要治療的部位使用本發(fā)明一種或多種化合物或藥物組合物?？赏ㄟ^(guò)各種方法，如(非限制性)術(shù)中局部灌注、局部敷用等等、術(shù)后傷口縫合時(shí)結(jié)合使用、注射、經(jīng)導(dǎo)尿管、栓劑、通過(guò)各種植入物給予。所述植入物是孔狀的、非孔狀的或凝膠狀的材料，包括各種膜，如硅膠膜，或是纖維。在一個(gè)實(shí)施例中，可以直接將藥物注射入原發(fā)癌、轉(zhuǎn)移瘤或?qū)嶓w瘤中或其原發(fā)部位。
生物學(xué)評(píng)價(jià)以下試驗(yàn)可顯示本發(fā)明化合物阻斷微管解聚的能力。
微管試驗(yàn)按文獻(xiàn)中所列步驟進(jìn)行，并評(píng)價(jià)所合成的化合物形成和使微管穩(wěn)定的能力。同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)。
使用純化微管蛋白和開(kāi)發(fā)用來(lái)放大活性比Taxol(泰素、紫杉醇)高的化合物間的試驗(yàn)來(lái)測(cè)試式I化合物促微管蛋白聚合的能力。與埃博霉素A和B相比，式I代表的化合物有高細(xì)胞毒性和促微管聚合活性(Lin等，Cancer Chemother.Pharmacol，38，136-140(1996)；Rogan等，Science 244，994-996(1984))。
過(guò)濾分光試驗(yàn)將微管蛋白(0.25ml，1mg/ml)加到試管中，加入2.SμL待測(cè)化合物?；旌蠘悠罚?7℃培養(yǎng)30分鐘。把樣品(150μL)轉(zhuǎn)移至事先在真空下用200μL MEM緩沖液洗滌的0.22μm孔徑的96-孔Millipore Multiscreen Durapore親水性過(guò)濾盤(pán)中。用200μL MEM緩沖液洗滌孔。為了給平板上捕獲的蛋白質(zhì)染色，將50μL酰胺黑溶液(0.1％藍(lán)黑萘酚(sigma)/45％甲醇/10％乙酸)加入過(guò)濾器染色2分鐘；然后在使其處于真空狀態(tài)。額外加入200μL酰胺黑退色溶液(90％甲醇/2％乙酸)洗滌兩次，以除去未結(jié)合的染料。如下采用Schaffner和Weissmann等(Anal.Biochem，56502-514，1973)的方法來(lái)定量信號(hào)將200μL的洗提溶液(25mM NaOH-0.05mmEDTA-50％乙醇)加入孔中，5分鐘后，用吸液管混合溶液。接著在室溫下培養(yǎng)10分鐘，將150μL的洗提溶液加入96孔板的一個(gè)孔中，用Molecular Devices微盤(pán)分析儀測(cè)量其吸收率。
或者，可如下證明式I化合物抑制微管解聚合的效率在二甲亞砜(DMSO)中制成待測(cè)化合物的原液，-20℃儲(chǔ)存。微管蛋白可經(jīng)兩輪溫度依賴性解聚合/聚合反應(yīng)從豬腦中提取，詳請(qǐng)見(jiàn)Weingarten等，Biochemistry，1974，135529-37。微管蛋白(指微管蛋白加上微管蛋白相關(guān)的蛋白質(zhì))的工作原液(working stock solution)儲(chǔ)存于零下70℃。基本上如文獻(xiàn)中公開(kāi)的已知方法測(cè)量待測(cè)化合物誘導(dǎo)微管蛋白聚合的程度(Lin等，Cancer Chem.Pharm.1996；38136-140)。簡(jiǎn)言之，室溫下，將5μL待測(cè)化合物的原液預(yù)先與45μL的水混合，濃度為最終所需濃度的20倍，然后將混合物置于冰上。將一等份試樣的豬腦微管蛋白原液快速解凍，再用冰凍的2X MEM緩沖液(200ml MES，2mM EGTA，2mM MgCl2，pH 6.7，MES為2.嗎啉乙磺酸，EGTA為乙二醇雙(2(2-氨乙基)-四乙酸)稀釋到2mg/ml。接著每向待測(cè)化合物中添加每次50μL的微管蛋白稀釋液，開(kāi)始聚合反應(yīng)，室溫下水浴培養(yǎng)該樣品。再將反應(yīng)混合物置于Eppendorf微量離心機(jī)中，室溫培養(yǎng)15分鐘。室溫下以14000rpm的速度離心該樣品20分鐘，使聚合了的微管蛋白與未聚合的微管蛋白分離。根據(jù)Lowry法(DC Assay Kit，Bio-Rad Laboratories，Hercules，Calif.)測(cè)定上清液(含有未聚合的可溶解的微管蛋白的殘余部分)的蛋白濃度，作為微管蛋白聚合的間接測(cè)量值。用分光光度計(jì)(SpectraMax 340，MolecularDevices，Sunnyvale，Calif.)在750nm測(cè)量顯色反應(yīng)的光密度值(OD)。將經(jīng)待測(cè)化合物處理的樣品與載體處理的對(duì)照之間的OD差值與含有25μM埃博霉素B或Taxol(陽(yáng)性對(duì)照)的測(cè)試用培養(yǎng)基的OD比較。待測(cè)化合物引起的聚合反應(yīng)表示為相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照為100％。通過(guò)幾種不同濃度的比較，可測(cè)出EC50(產(chǎn)生50％最大聚合的濃度)。
也可使用以下方法證明抗腫瘤細(xì)胞的效能
通過(guò)MTS[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-sulphenyl)-2H-四鎓(tetrazolium)，內(nèi)鹽]試驗(yàn)(Riss et a1.，Mol.Biol.Cell，3(Suppl.)，184 1992)評(píng)價(jià)在人類克隆癌細(xì)胞HCT-116中的細(xì)胞毒性。
根據(jù)此試驗(yàn)，將以每孔4000個(gè)人類克隆癌細(xì)胞HCT-116的密度將其接種到96孔微滴定板中。平板培養(yǎng)24小時(shí)后，加入要研究的化合物，并依次稀釋。37℃培養(yǎng)細(xì)胞72小時(shí)。接著將MTS(最終濃度為333μg/mL)和電子耦合物質(zhì)(25μM吩嗪硫酸甲酯)加入細(xì)胞中。
活細(xì)胞中的脫氫酶將MTS還原為可吸收492nM波長(zhǎng)的光的物質(zhì)形式，可用分光光度法定量該物質(zhì)。吸光度和活細(xì)胞數(shù)量直接成正比。也就是說(shuō)，吸光度越大，活細(xì)胞的數(shù)量就越多。最終結(jié)果由IC 50值(范圍從0.01-1000nM)表示。IC 50是抑制細(xì)胞增殖的程度達(dá)到未處理的對(duì)照細(xì)胞的50％所需的藥物濃度(即450nM的吸光度)。
在優(yōu)選的實(shí)施例中，本發(fā)明化合物的IC 50值在體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)中為0.01-1000nM。但在某些具體情況下化合物的活性在此范圍之外。
還已證實(shí)本發(fā)明化合物可在體內(nèi)抑制腫瘤的形成。大量有過(guò)度增生(包括腫瘤發(fā)生和腫瘤轉(zhuǎn)移擴(kuò)散情況)的動(dòng)物模型是本領(lǐng)域已知的?？蓞⒁?jiàn)表317-1，第317章，″瘤形成機(jī)制″，Harrison′s Principals of Internal Medicine，第13版，Isselbacher等編輯，McGraw-Hill，紐約，第1814頁(yè)；和Lovejoy等，1997，J.Pathol.181130-135。具體而言，可通過(guò)其對(duì)去胸腺小鼠上的人腫瘤移植物的作用而證明本發(fā)明化合物的效用(Lee等，An Epothilone Analog PossessingPotent Activity AgainstPaclitaxel-Sensitive and-Resistant Human Tumors，摘要，美國(guó)癌癥研究協(xié)會(huì)第91界年會(huì)，San Francisco，Calif.，Apr.1-5，2000；美國(guó)癌癥研究協(xié)會(huì)，Philadelphia，Pa.，2000，LB-34；Lee等，Clin.Cancer Res.，第7卷，1429(2001))。此外，已描述了適用于多種癌癥的常規(guī)動(dòng)物模型，包括但不限于p53缺陷型小鼠模型(Donehower，1996，Semin.Cancer Biol.7269-278)、Min小鼠(Shoemaker等，1997，Biochem.Biophys.Acta，1332F25-F48)、腫瘤免疫反應(yīng)大鼠(Frey，1997，Methods，12173-188)。
例如，把本發(fā)明化合物給予試驗(yàn)動(dòng)物，較佳是易發(fā)生原位癌的試驗(yàn)動(dòng)物，隨后檢查該試驗(yàn)動(dòng)物腫瘤形成的發(fā)生率是否減少，并與未使用該化合物的對(duì)照組對(duì)比?；蛘撸瑢⒈景l(fā)明化合物給予患有原發(fā)腫瘤的試驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)(例如，已由惡性、瘤的或轉(zhuǎn)移的細(xì)胞或者是致癌物質(zhì)的引入而誘導(dǎo)了腫瘤的動(dòng)物)，接著檢查該試驗(yàn)動(dòng)物與未給予所述化合物的對(duì)照動(dòng)物相比其腫瘤退化的情況。
基于以上特性，式I化合物(也包括其鹽)適用于治療增生性疾病，特別是腫瘤疾病，包括轉(zhuǎn)移性腫瘤、實(shí)體瘤(如肺部腫瘤、乳房腫瘤、直結(jié)腸癌、前列腺癌、黑素瘤、腦部腫瘤、胰腺腫瘤、頭頸部腫瘤、膀胱癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、咽部腫瘤)，還有血細(xì)胞增生性疾病(如白血病)，或?qū)ξ⒐芙饩酆弦种苿┲委煼磻?yīng)的其它疾病(如牛皮癬)。式I化合物或其鹽也適于包被醫(yī)療用植入物，可預(yù)防狹窄(WO 99/16416，優(yōu)先權(quán)日為1997年9月29日)。
總的制備方法可采用與本領(lǐng)域已知的方法類似的方法合成本發(fā)明式I化合物。較佳的是，采用由Grubbs催化劑催化式II化合物閉環(huán)置換(ring closure metathesis，RCM)的方法(Grubbs，R.H.等，Acc.Chem.Res.，Vol.28，446(1995))。
用堿處理促進(jìn)式III和式IV偶聯(lián)為為式II
本發(fā)明還提供合成式III和式IV的方法。其合成方法如下所述。
將市場(chǎng)上購(gòu)得的酮酸1轉(zhuǎn)化為酸性氯化物2，再將后者轉(zhuǎn)化為化合物3?；衔?中的酮基團(tuán)受到乙二醇縮酮的保護(hù)生成縮酮4?？s酮4與堿發(fā)生烯醇化反應(yīng)，接著與碘化物5發(fā)生烴化反應(yīng)，生成產(chǎn)物6(Chou，T.-C.，Angew.Chem.Int.Ed.2003，42，4762-4767)。如下圖所示，化合物6經(jīng)兩步反應(yīng)生成化合物7。化合物7與磷鹽8(Chappell，M.D.，etal.，Org.Lett.，2000，2，1633-1636)發(fā)生烯化反應(yīng)生成化合物9?；衔?酸性水解后得到式III(流程1)。
流程1
流程中，“cat.”指催化劑，“-78℃ to-20℃”代表“-78℃到-20℃”，下文司式IV經(jīng)酮醛10(Shioji，K.，Synthetic Comm.2001，31，3569-3575)合成。酮醛10受到二異丙基縮醛的保護(hù)生成酮11。酮11與易得的乙醛12(Nagaoka，H.等，Tetrahedron，1981，37，3873)縮合為丁間醇醛13(中等非鏡像選擇性)(dr，5.71，Rivikin，A.等，J.Am.Chem.Soc.，2003，125，2899-2901)。將丁間醇醛13中的醇基團(tuán)保護(hù)為T(mén)BS甲硅烷醚，生成化合物14，化合物14經(jīng)三步標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)化為石蠟15。石蠟15酸性水解后得到式IV(流程2)。
流程2 式III的烯醇化鋰與式IV的丁間醇醛縮合反應(yīng)生成閉環(huán)置換環(huán)化前體式II及其非對(duì)映異構(gòu)體結(jié)構(gòu)式V。用HPLC將式II和結(jié)構(gòu)式V分離(流程3)。
流程3
在甲苯中，在第2代Grubbs催化劑的存在下進(jìn)行式II與式V的閉環(huán)置換(RCM)反應(yīng)(流程4)。采用與Chou(Chou，T.-C.，Angew.Chem.Int.Ed.2003，42，4762-4767)類似的方法，由RCM反應(yīng)提供順式異構(gòu)體異構(gòu)體。使用HF-比啶去除TBS基團(tuán)生成所需的式I化合物(流程4)。
流程4 可環(huán)氧化劑如m-CPBA轉(zhuǎn)化式I化合物，得到式V化合物(流程5)。
流程5
實(shí)施例以下非限制性實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施。
實(shí)施例14-氧-戊酰氯 將4-氧-戊酸溶于CH2Cl2，加入0.01當(dāng)量DMF，再加入1.1當(dāng)量草酰氯。室溫下攪拌該混合物6小時(shí)，濃縮得到粗的標(biāo)題化合物，該化合物不需經(jīng)進(jìn)一步純化就可使用。
實(shí)施例21-(4-芐基-2-氧-噁唑烷-3-基)-戊-1，4-二酮 將4-苯甲基-惡唑烷-2-酮溶于-78℃THF(四氫呋喃)，加入1.1當(dāng)量溶于己烷的正丁基鋰。在-78℃下攪拌該混合物10分鐘，接著加入1當(dāng)量溶于THF的實(shí)施例1產(chǎn)物。將所得的混合物再攪拌30分鐘，用NH4Cl溶液終止反應(yīng)，用EtOAc提取。用Na2SO4干燥EtOAc提取物并濃縮。用硅膠色譜法純化殘留物得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例34-芐基-3-[3-(2-甲基[1，3]-二氧戊-2-基)-丙酰基]-噁唑烷-2-酮 將實(shí)施例2的產(chǎn)物溶于-40℃CH2Cl2中，加入1.2當(dāng)量1，2-二-三甲硅烷氧基乙烷和0.05當(dāng)量TMSOTf(三甲基硅化三氟甲烷磺酸)。-40℃下攪拌混合物6小時(shí)，加入0.2當(dāng)量Et3N(三乙基銨)。減壓下去除溶劑，得到粗的標(biāo)題化合物，該化合物不需經(jīng)進(jìn)一步純化就可使用。
實(shí)施例44-芐基-3-[2-(2-甲基-[1，3]二氧戊-2-基甲基)-5-三氟甲基-辛-4，7-二?；鵠-噁唑烷-2-酮 將LiHMDS(六甲基二硅胺鋰)溶于-78℃1.1當(dāng)量THF中，加入溶于THF的實(shí)施例3的產(chǎn)物的溶液。-78℃攪拌混合物1小時(shí)，再用1.2當(dāng)量溶于THF的6-碘-4-三氟甲基-己-1，4-二烯處理。-78℃攪拌所得混合物8小時(shí)，用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例53-(2-甲基-[1，3]-二氧戊-2-基甲基)-6-三氟甲基-壬-5，8-二烯-2-酮 將溶于甲苯的1.0當(dāng)量Me3Al(鋁源三甲基鋁)加到溶于0℃THF的MeONHMe鹽酸鹽懸浮液中。0℃下攪拌混合物1小時(shí)后，加入0.5當(dāng)量溶于THF的實(shí)施例4產(chǎn)物的溶液，再在0℃下攪拌6小時(shí)，用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥提取物并濃縮。將殘留物溶于THF，0℃冷卻。用1.5當(dāng)量溶于THF的MeMgBr處理。0℃下攪拌2小時(shí)后，再用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例6
2-甲基-4-[2-甲基-3-(2-甲基-[1，3]二氧戊-2-基甲基)-6-三氟甲基-壬-1，5，8-三烯基]-噻唑 將溶于甲苯的1.0當(dāng)量KHMDS(六甲基二硅氨鉀烷)加到磷鹽8溶于-78℃THF的懸浮液中。-78℃下攪拌1小時(shí)后，加入0.5當(dāng)量溶于THF的實(shí)施例5產(chǎn)物的溶液，再在-20℃下攪拌6小時(shí)。用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)。用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例74-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-7-三氟甲基-癸-6，9-二烯-2-酮 將實(shí)施例6的產(chǎn)物溶于4∶1THF/水溶液中，加入0.05當(dāng)量TsOH。室溫下攪拌混合物2小時(shí)，加入0.1當(dāng)量Et3N。減壓下除去溶劑，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例81，1-二異丙氧基-2，2-二甲基-戊-3-酮 將當(dāng)量的TsOH加到2，2-二甲基-3-氧-戊醛在5∶1的I-PrOH/CH(Oi-Pr)3溶液中。室溫下攪拌4小時(shí)后，加入0.1當(dāng)量Et3N，減壓下除去溶劑，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例9
7-芐氧基-5-羥基-1，1-而異丙基-2，2，4，6-四甲基-戊-3-酮 將實(shí)施例8產(chǎn)物的THF溶液加到-90℃的LDA(1.1當(dāng)量)THF溶液中。攪拌30分鐘后，逐滴加入1.2當(dāng)量的3-芐氧基-2-甲基-丙醛的THF溶液。-90℃下攪拌混合物1小時(shí)。用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)。用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例107-芐氧基-5-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-1，1-二異丙基-2，2，4，6-四甲基-戊-3-酮 將1.0當(dāng)量實(shí)施例9的產(chǎn)物和2當(dāng)量Et3N溶于0℃CH2Cl2，加入1.1當(dāng)量TBSOTf。0℃下攪拌混合物1小時(shí)，用NaHCO3飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例115-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-1，1-二異丙氧基-2，2，4，6-四甲基-辛-7-烯-3-酮 將實(shí)施例10產(chǎn)物溶于EtOH，加入0.01當(dāng)量存在于活性炭上的鈀，H2氣氛中攪拌4小時(shí)。用C鹽墊過(guò)濾溶液，濃縮濾液。將殘留物溶于CH2Cl2，加入0.1當(dāng)量TPAP和2當(dāng)量NMO。0℃下攪拌混合物8小時(shí)，再用硅膠墊過(guò)濾。濃縮濾液，將殘留物溶于THF中，加入-78℃Ph3P＝CH2溶液(2當(dāng)量，由MePPh3I和n-BuLi在-78℃制得)。-78℃下攪拌混合物1小時(shí)，用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAe提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例125-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-2，2，4，6-四甲基-3-氧-辛-7-烯醛 將實(shí)施例11溶于4∶1THF/水溶液中，加入O.05當(dāng)量TsOH。室溫下攪拌混合物2小時(shí)，加入0.1當(dāng)量Et3N。減壓下除去溶劑，生成上圖所示化合物。
實(shí)施例134-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-8-羥基-3，5，7，7-四甲基-12-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-15-三氟甲基-十八烷-1，14，17-三烯-6，10-二酮 將1.1當(dāng)量LDA溶于-78℃THF中，加入1.0當(dāng)量溶于THF的實(shí)施例7產(chǎn)物。攪拌30分鐘后，逐滴加入1.0當(dāng)量溶于THF的實(shí)施例12。-78℃下攪拌混合物1小時(shí)，用NH4Cl飽和液終止反應(yīng)，用1∶1己烷/EtOAc提取。用Na2SO4干燥有機(jī)提取物并濃縮，用硅膠色譜法或HPLC純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例1415-(叔丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-3-羥基-2，2，14，16-四甲基-7-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-10-三氟甲基-環(huán)十六烷-9，12-二烯-1，5-二酮 將實(shí)施例13的各產(chǎn)物與0.1當(dāng)量溶于甲苯的Grubbs催化劑混合加熱至110℃，直至起始材料完全反應(yīng)。濃縮反應(yīng)混合物，用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例153，15-二氫-2，2，14，16-四甲基-7-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-10-三氟甲基環(huán)十六烷-9，12-二烯-1，5-二酮 將實(shí)施例14的各產(chǎn)物溶于乙腈，0℃下加入5當(dāng)量HF-比啶復(fù)合物。待起始原料消耗完后，將反應(yīng)混合物倒入NaHCO3飽和液中，用EtOAC提取。用Na2SO4干燥EtOAC提取物并濃縮。用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例163，15-二氫-2，2，14，16-四甲基-7-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-10-三氟甲基環(huán)十六烷-9-烯-1，5-二酮 如Chappell，M.D.(Org.Lett.，第2卷，1633，(2000))所述，將實(shí)施例15的各產(chǎn)物與溶于1，2-二氯乙烷中的TrisNHNH2和Et3N混合，加熱至50℃中。用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例177，11-二氫-8，8，10，12-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-16-三氟甲基-17-噁oxa)-雙環(huán)[14.1.0]十七烷-5，9-二酮
室溫下用溶于1，2-二氯甲基中的1.5當(dāng)量m-CPBA處理實(shí)施例16的各產(chǎn)物。攪拌至各起始原料完全。將反應(yīng)混合物倒入NaHCO3飽和液中，用EtOAC提取。用Na2SO4干燥EtOAC提取物并濃縮。用硅膠色譜法純化殘留物，獲得標(biāo)題化合物。
權(quán)利要求
1.下述式I化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或它們的區(qū)域異構(gòu)體或立體異構(gòu)體 式中，A-B選自O(shè)-CH2、CH2-O、CH2C(＝O)、C(＝O)CH2、CH2S(O)2、S(O)2CH2、NR8S(O)2、S(O)2NR8；D-E選自-H2C-CH2-、-HC＝CH-、-CH(OH)CH2-、-CH2CH(OH)-或-CH(OH)CH(OH)-；R1、R2、R3、R4相同或不同，選自氫或C1-4烷基；或R1、R2一起形成-(CH2)n-基團(tuán)，其中n為2、3、4或5；R3b、R4a、R4b為氫；R1a、R2a為H，或者一起形成建；R3a選自H、羥基或氰基；R6、R7一起形成另一根鍵，或者形成-O-或-CH2-；R5選自C1-4烷基、CO2H、CH2OH、CH2O-烷基、CH2O-芳基、CN、CH2NH2、鹵代C1-4烷基；R8選自氫、C1-4烷基、鹵代C1-4烷基；R9是選自以下雜環(huán)基 吡咯烷基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、唑烷基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、哌嗪基、氮雜基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、嗎啉基、噻唑烷基、硫雜丙烷基、三嗪基、三唑基，其中，R8的定義同上。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R6、R7一起形成
3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，所述A-B選自-CH2C(O)-、-C(O)CH2-、-CH2S(O)-、-CH2S(O)2-、-CH2O-或-OCH2-；所述D-E選自-CH2CH2-、-CH＝CH-；所述R5選自CH3、CH2F、CHF2或CF3。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物為 上式中，PEG為聚乙二醇。
5.一種藥物組合物，其特征在于，它含有權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或它們的區(qū)域異構(gòu)體或立體異構(gòu)體，和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
6.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物為單位劑型或無(wú)菌注射單位劑型形式。
7.如權(quán)利要求5或6所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還含有一種或多種選自下述的治療劑，用于組合治療癌癥或其它增生性疾病阿霉素、順鉑、卡鉑、甲氰咪胍、洋紅霉素、鹽酸氮芥、五甲基三聚氰胺、三胺硫磷、替尼泊苷、環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、去甲氧竹紅霉素、苯丙氨酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、曲磷胺、曲奧舒凡、足葉草毒素及其衍生物、磷酸依托泊苷、依托泊苷、異長(zhǎng)春堿、環(huán)氧長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、9-氨基喜樹(shù)堿、伊立替康、克利斯納托、苯丁酸氮芥、甲地孕酮、甲基葉酸、絲裂霉素C、Ecteinascidin-743、甲磺酸丁二醇二酯、卡氮芥、洛莫司汀、洛伐他汀、1-甲基-4-苯基吡啶鎓、司莫司汀、蛋白激酶C抑制劑、鏈佐星、三胺硫磷、苯二甲藍(lán)、氮烯咪胺、氨基蝶呤、氨甲蝶呤、三甲曲沙、硫鳥(niǎo)嘌呤、巰基嘌呤、氟達(dá)拉濱、脫氧肋間型霉素、克拉屈賓、阿糖胞苷、甲基絲裂霉素、5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、鹽酸阿霉素、甲酰四氫葉酸、霉酚酸、柔紅霉素、去鐵胺、氟尿苷、脫氧氟尿苷、來(lái)迪特列克迪、伊達(dá)比星、表阿霉素、吡喃阿霉素、佐柔比星、米托蒽醌、硫酸博來(lái)霉素、絲裂霉素C、放線菌素D、藏紅花醛素、藏紅花醛霉素、喹啉并咔辛類、雙可地莫利德斯、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、維托佛芬、紫杉醇、三苯氧胺、雷洛昔芬、噻唑呋喃、硫鳥(niǎo)嘌呤、病毒唑、EICAR、雌莫司汀、雌莫司汀磷酸鈉、氟他胺、比卡魯胺、布舍瑞林、亮丙瑞林、蝶啶、第依尼瑟斯、左旋咪唑、阿福拉康、干擾素、白細(xì)胞介素、白細(xì)胞間介素-2、非格司亭、沙格司亭、利妥昔單抗、卡介苗、維生素A酸、鹽酸伊立替康、倍他米松、鹽酸吉西他濱、異搏定、依托泊苷VP-16、六甲蜜胺、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子幫浦抑制劑、拓?fù)涮婵怠?br> 8.權(quán)利要求1所述的化合物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或它們的區(qū)域異構(gòu)體或立體異構(gòu)體在制備治療哺乳動(dòng)物癌癥或其它增生性疾病或者誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡的藥劑中的用途。
9.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述癌癥與微管穩(wěn)定化相關(guān)，或選自腦癌、乳腺癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥、胃癌、膀胱癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、食道癌、口腔癌、咽癌、腎癌、骨癌、垂體癌、卵巢癌、子宮癌、皮膚癌、頭頸部癌、宮頸癌和喉癌。
10.下式化合物
全文摘要
本發(fā)明涉及埃博霉素類似物、其制備方法、含有該類似物的藥物組合物以及該類似物的使用方法。本發(fā)明埃博霉素類似物可用于治療各種癌癥或其它各種增生性疾病，包括與微管穩(wěn)定化相關(guān)的各種疾病。本發(fā)明化合物還可以用于誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡。
文檔編號(hào)C07D413/00GK1752078SQ20041006656
公開(kāi)日2006年3月29日 申請(qǐng)日期2004年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月22日
發(fā)明者張曉東, 謝國(guó)建, 郇正偉, 查理斯·大衛(wèi), 王印祥, 陳杭 申請(qǐng)人:貝達(dá)醫(yī)藥開(kāi)發(fā)(上海)有限公司