專利名稱：嘧啶類衍生物甲磺酸鹽及其制備方法與應(yīng)用、藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘧啶類衍生物，具體是嘧啶類衍生物甲磺酸鹽及其制備方法與應(yīng)用與相應(yīng)的藥物組合物。
背景技術(shù)：
根據(jù)腫瘤發(fā)生的分子機(jī)理來開發(fā)新一代高效、特異、低毒性的抗腫瘤新藥是科學(xué)家和制藥公司一直在努力的目標(biāo)。由于腫瘤發(fā)病的過程很長，并且有許多細(xì)胞內(nèi)的生理和病理過程在其間起作用，因此對大部分腫瘤發(fā)生的細(xì)胞分子機(jī)理迄今仍然不是很清楚。但人類慢性髓性白血病(CML)發(fā)生的分子機(jī)理的研究已經(jīng)取得重大突破，CML的發(fā)生是因?yàn)榘籽〖?xì)胞的第9號和第22號染色體部分交換后形成的BCR/ABL融合基因，結(jié)果使得融合基因中ABL酪氨酸蛋白激酶的活性被持續(xù)活化而使細(xì)胞處于異常的分裂狀態(tài)并且不發(fā)生衰亡(apoptosis)(Biochimica etBiophysica Acta 2001，1551M11-M18)。
根據(jù)上述機(jī)理，1996年Druker等人發(fā)現(xiàn)酪氨酸激酶(TK酶)的抑制劑可有效地抑制調(diào)控費(fèi)城染色體之前腫瘤基因BCR/ABL融合基因。后來此種TK酶的抑制劑被命名為STI571(Glivec，甲磺酸伊馬替尼)。STI571作用機(jī)理在于占據(jù)TK酶的口袋，使酶與BCR/ABL作用的磷酸酶無法活化，造成BCR/ABL與其介質(zhì)無法被產(chǎn)生磷酸化作用，因此抑制了癌細(xì)胞增生信號的傳遞，從而起到治療白血病的效果。但在2001年，美國加利福尼亞大學(xué)洛杉磯分校分子生物學(xué)研究所Gorre等報(bào)告，BCR/ABL基因突變或擴(kuò)增使慢性粒細(xì)胞白血病患者對STI571產(chǎn)生耐藥性臨床研究證明，許多慢性粒細(xì)胞白血病加速期病人，最初用STI571治療有效，但以后復(fù)發(fā)；Gorre等對病人的臨床標(biāo)本進(jìn)行了生化及分子生物學(xué)檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所有被檢病例的耐藥性都與BCR/ABL信號傳導(dǎo)恢復(fù)有關(guān)，9例病人中，6例病人的耐藥與酪氨酸激酶功能區(qū)蘇氨酸殘基中的一個氨基酸被取代有關(guān)，該功能區(qū)可與STI571形成一個關(guān)鍵的氫鍵；Gorre等重新設(shè)計(jì)了另一項(xiàng)研究，結(jié)果證明，異亮氨酸取代蘇氨酸可以導(dǎo)致STI571產(chǎn)生耐藥性，另外3例病人的耐藥與BCR/ABL基因不斷擴(kuò)增有關(guān)(Science2001，293876)。
因此，尋找一種新的更好的化合物來治療白血病有著十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供藥理上可接受的、治療效果好的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽及其制備方法。
本發(fā)明還有一個要解決的技術(shù)問題是提供上述嘧啶類衍生物甲磺酸鹽的應(yīng)用。
同時本發(fā)明還提供含有上述嘧啶類衍生物甲磺酸鹽的抗白血病藥物組合物和抗腫瘤藥物組合物。
本發(fā)明的發(fā)明人，對很多化合物進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了具有式(I)的嘧啶類衍生物鹽特別是甲磺酸鹽，更特別是當(dāng)R1，R2，R3，R4，R5，R6＝H，R7＝CH3，以及X＝CH2時的甲磺酸鹽(簡稱NRJ1)具有抑制白血病細(xì)胞持續(xù)和高活性的酪氨酸蛋白激酶的作用，
其中R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7從下列基團(tuán)中選擇-H，低鏈烷基；由-OH，-COR8，-CN或-CONH2取代的低鏈烷基(R8＝C1～C4烷基)；環(huán)烷基，或由-OH取代的環(huán)烷基；X為C1～C4烷基，-NHCO，-OCO，所述鹽熔點(diǎn)105℃-115℃。
本發(fā)明提供的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽可根據(jù)選擇的基團(tuán)選用相應(yīng)的化合物原料進(jìn)行制備，下面以NRJ1的制備方法為例說明1)將0.5-1.0M 4-氯甲基苯甲酰氯的THF溶液加入到0.2-0.5M的N-(5-氨基-2-甲苯基)-4-(3-吡啶基)-2-嘧啶胺的THF溶液中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1-5h，用1-3L乙酸乙酯處理，再用飽和Na2CO3溶液處理，靜置分層，飽和食鹽水洗滌，然后將所得粗品用200-500mL乙酸乙酯處理，過濾得黃色固體4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺，2)在0.5-1.0M哌嗪的乙腈溶液中，加入0.1-0.3M 4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺的CH2Cl2溶液，懸濁反應(yīng)體系回流過夜，過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，得含哌嗪鹽酸鹽的N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽粗品，3)將該粗品加入約50mL 1.0N NaOH，用乙酸乙酯萃取，再分別用水、飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮，得白色無定形游離堿粗品，然后將該游離堿粗品溶于適量丙酮，過濾，濾液中加入適量甲磺酸的丙酮溶液，收集所得黃色沉淀物，分別用丙酮、乙醚洗滌，真空干燥后得到微黃色的N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺雙甲磺酸鹽(熔點(diǎn)110℃-112℃；Rf＝0.57，CHCl2∶MeOH＝95∶5)。
本發(fā)明的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽可應(yīng)用于制備治療白血病的藥物中，特別是針對BCR/ABL融合基因陽性的白血病，如BCR/ABL融合基因陽性的人慢性髓系白血病與人淋巴細(xì)胞白血病。
如NRJ1對慢性髓性白血病的治療作用可通過其對BCR/ABL陽性的白血病細(xì)胞株(例如K562和KU812細(xì)胞)在體外的抑制作用來證明。以K562為例，此試驗(yàn)過程可簡述如下取生長良好的K562細(xì)胞20000個，懸浮于含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)基，加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的培養(yǎng)孔中，并在此細(xì)胞中加入不同濃度的NRJ1，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中(5％CO2，37℃)孵育48小時后用MTT法測定細(xì)胞濃度，并計(jì)算出NRJ1作用的50％有效抑制濃度(IC50)，在本實(shí)驗(yàn)中NRJ1的IC50是指用此濃度的NRJ1處理細(xì)胞后使細(xì)胞數(shù)下降到對照組(不加藥物處理)的50％，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明NRJ1對BCR/ABL陽性的白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞在體外具有抑制作用。
NRJ1對白血病的治療作用也可以用它對來源于慢性白血病病人的白血病細(xì)胞的直接抑制作用來證明，此實(shí)驗(yàn)方法可簡述如下抽取BCR/ABL陽性CML病人的外周血(經(jīng)細(xì)胞學(xué)檢查含有30％的BCR/ABL陽性白血病細(xì)胞)，將細(xì)胞濃度用含有10％胎牛血清的1640溶液調(diào)整到1×105/ml，取0.2ml于96孔培養(yǎng)板中加入不同濃度的NRJ1共同孵育48小時后，用MTT法測定NRJ1對細(xì)胞的抑制效應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明NRJ1對BCR/ABL陽性CML病人的外周血的體外培養(yǎng)細(xì)胞具有抑制效應(yīng)。
本發(fā)明的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽，可經(jīng)口服或不經(jīng)口服給藥，給藥劑量可根據(jù)藥物的藥效和毒性而定，一般為100～800mg/天。
經(jīng)口服時，可與藥理上可接受的輔劑混合，將其制成片劑，包衣片，糖衣片，硬膠囊、軟膠囊，溶液劑，乳劑或混懸劑。不經(jīng)過口給藥時，它們可以通過直腸給藥，比如栓劑，或腸道外給藥，比如注射劑。
本發(fā)明涉及的由嘧啶類甲磺酸鹽組成的藥物制劑，可以通過常規(guī)工藝制備而成，例如常規(guī)的混合，裝膠囊，溶解，制粒，乳化，壓片，包衣或凍干處理。這些藥物制劑可以與無治療活性的有機(jī)或無機(jī)輔料制備而成。其中乳糖，淀粉或其衍生物，滑石粉，酸或其鹽，都可以用作片劑，包衣片，糖衣片及硬膠囊的輔料。軟膠囊的合適輔料包括植物油，蠟及脂肪，但軟膠囊一般不添加輔料。溶液劑和糖漿劑的合適輔料為水，多羥基化合物，蔗糖，及葡萄糖等。注射劑的合適輔料可以是水，酒精，多羥基化合物，甘油，植物油，磷脂和表面活性劑。栓劑的合適輔料為植物油，蠟，脂肪，半液體多羥基化合物。
本發(fā)明的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽對白血病細(xì)胞的抑制作用并不僅僅局限于它本身，它還可以與其它已知的對慢性白血病細(xì)胞有作用的化學(xué)或生物藥物聯(lián)合應(yīng)用而起到更佳的效果。如本發(fā)明發(fā)現(xiàn)NRJ1與低于有效濃度的人類重組α-干擾素和羥基尿素聯(lián)合使用后對K562細(xì)胞的殺傷作用有明顯的增加，這種作用比現(xiàn)在已知的最好的治療白血病的藥物STI571要更強(qiáng)。如在體外，不同濃度的NRJ1和500IU/ml的人類重組α-干擾素可以明顯增強(qiáng)其對KU812細(xì)胞的殺傷作用。同樣和100uM的羥基尿素聯(lián)合使用后也可使NRJ1對K562細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng)，IC50從0.7uM下降到0.5uM，100uM的羥基尿素本身對K562細(xì)胞沒有明顯的抑制作用。因此本發(fā)明提供一種含有治療有效量嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽和任選的一種或多種治療有效量的其他已知抗白血病藥物的抗白血病藥物組合物，其中該組合物制劑的制備還可以包含防腐劑，促溶劑，穩(wěn)定劑，增濕劑，增乳劑，甜味劑，增色劑，調(diào)味劑、鹽(用以改變藥劑的滲透壓)，緩沖劑，包衣劑或抗氧劑。同樣，本發(fā)明也提供一種含有治療有效量嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽和任選的一種或多種治療有效量的其他已知抗腫瘤藥物藥物組合物。
本發(fā)明的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽對白血病細(xì)胞的生長有抑制作用，而對于陰性細(xì)胞卻沒有抑制作用；同時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)對白血病患者外周血白細(xì)胞的生長有明顯的抑制作用，此抑制作用與濃度成正比，而對正常人外周血的白細(xì)胞只有輕微的非特異的抑制。
同時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，本發(fā)明提供的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽與已知抗白血病藥物的抗白血病藥物組合物，如NRJ1與人類重組α-干擾素或羥基尿素，聯(lián)合作用于白血病細(xì)胞后可使NRJ1對此細(xì)胞抑制作用明顯增強(qiáng)，而在抑制濃度范圍內(nèi)的α-干擾素、羥基尿素本身對白血病細(xì)胞沒有抑制作用，NRJ1與這兩種藥物組合后對K562細(xì)胞的抑制作用均比單用STI571要強(qiáng)。

圖1為本發(fā)明的嘧啶類衍生物NRJ1的化學(xué)合成路線簡圖。
圖2、NRJ1對人白血病細(xì)胞株生長的抑制作用。圖中橫坐標(biāo)代表NRJ1的濃度，縱坐標(biāo)代表不同濃度的NRJ1對細(xì)胞的抑制率(與對照組相比)，圖中每個數(shù)據(jù)代表三個平行實(shí)驗(yàn)孔的平均值。其中K562細(xì)胞為BCR/ABL陽性而U937為陰性。
圖3、0.8uM的NRJ1對K562細(xì)胞作用的時間效應(yīng)。圖中橫坐標(biāo)代表NRJ1作用的時間，縱坐標(biāo)代表0.8uM的NRJ1在不同的時間對K562細(xì)胞的抑制率(與對照組相比)，圖中每個數(shù)據(jù)代表三個平行實(shí)驗(yàn)孔的平均值。
圖4、NRJ1對BCR/ABL陽性的CML病人外周血(含約30％的白血病細(xì)胞)和正常人(ND)外周血細(xì)胞生長的作用。圖中橫坐標(biāo)代表NRJ1的濃度，縱坐標(biāo)代表不同濃度的NRJ1對細(xì)胞的抑制率(與對照組相比)，圖中每個數(shù)據(jù)代表三個平行實(shí)驗(yàn)孔的平均值。
圖5、比較NRJ1、NRJ1和其它抗白血病藥物的組合、STI571對K562細(xì)胞生長的抑制作用。圖中橫坐標(biāo)代表NRJ1和STI571的濃度，縱坐標(biāo)代表細(xì)胞的抑制率(與對照組相比)，圖中每個數(shù)據(jù)代表三個平行實(shí)驗(yàn)孔的平均值。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 嘧啶類衍生物NRJ1的制備方法NRJ1的合成路線用圖1來表述。
1)、4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺 C24H20ClN5O Mol.Wt.429.90將0.90g(4.77mmol)4-氯甲基苯甲酰氯的THF(5mL)溶液加入1.1g(4.0mmol)N-(5-氨基-2-甲苯基)-4-(3-吡啶基)-2-嘧啶胺的THF(20mL)溶液中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1h，加入50mL乙酸乙酯，再用75mL飽和碳酸鈉溶液處理，靜置分層，飽和食鹽水洗滌，然后將所得粗品用適量乙酸乙酯處理，過濾得黃色固體4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺(1.0g，Yield58.8％)，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)10.21(s，1H)，9.26(d，J＝1.8Hz，1H)，8.97(s，1H)，8.67(dd，1H，J1＝5.1Hz，J2＝1.5Hz)，8.50(d，1H，J＝5.5Hz)，8.46(dt，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，8.06(d，1H，J＝2.2Hz)，7.93(d，1H，J＝8.1Hz)，7.56(d，2H，J＝8.4Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝5.9Hz)，7.46(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝2.2Hz)，7.42(d，1H，J＝5.1Hz)，7.19(d，1H，J＝8.4Hz)，4.83(s，2H)，2.21(s，3H).MS m/z430(M+).
2)、N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺雙甲磺酸鹽(NRJ1) C28H29N7OMol.Wt.479.58在0.27g(3.1mmol)哌嗪的乙腈(30mL)溶液中，加入0.27g(0.63mmol)4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺的CH2Cl2(2mL)溶液，懸濁反應(yīng)體系回流過夜，過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，得目標(biāo)物鹽酸鹽粗品。將該粗品加入1.0N NaOH 50mL，用乙酸乙酯萃取(3×100mL)，再分別用水、飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，HV濃縮，得白色無定形粗品，然后將該粗品溶于20mL丙酮，過濾，濾液中加入含80uL甲磺酸的丙酮溶液2mL，收集所得黃色沉淀物，分別用丙酮、乙醚洗滌，真空干燥后得微黃色的N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺雙甲磺酸鹽(0.32g，Yield76％)，M.P.110～112℃，Rf＝0.57，1H NMR(400MHz，CD3OD)9.53(s，1H)，9.04(d，1H，J＝8.1Hz)，8.82(d，1H，J＝5.1Hz)，8.54(d，1H，J＝5.1Hz)，8.27(d，1H，J＝1.8Hz)，7.97(d，1H，J＝8.4Hz)，7.93(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝5.5Hz)，7.57(d，1H，J＝8.4Hz)，7.47(d，1H，J＝5.1Hz)，7.34(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，7.27(d，1H，J＝8.4Hz)，3.93(s，2H)，3.34(m，4H)實(shí)施例2、K562和U937細(xì)胞的培養(yǎng)K562和U937屬于建代的人體白血病細(xì)胞株，可選用合適的培養(yǎng)條件在體外培養(yǎng)，本實(shí)施例選用ATCC全球生物資源中心的細(xì)胞株，用含有胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液(R.Ian Freshney.Culture of AnimalCellsA Manual of Basic Technique；Wiley，John & Sons，Incorporated，2000)。當(dāng)不同濃度的NRJ1作用于細(xì)胞一定時間后，可以用MTT來檢測細(xì)胞的生長情況(Pieters R，et al.，Blood，1990，76(11)2327-2336)。NRJ1對細(xì)胞的生長抑制率可用以下公式來表示。抑制率＝(1-ODt/ODc)×100，其中ODt為NRJ1處理組用MTT法檢測的平均光吸收值，ODc為對照組(不加藥物處理組)的平均光吸收值。
實(shí)施例3、正常人和慢性白血病患者外周血白血細(xì)胞的分離和原代培養(yǎng)正常人和慢性白血病患者外周血白血細(xì)胞的分離可以用密度梯度離心的方法來分離后，可用合適的培養(yǎng)條件在體外培養(yǎng)，如含有胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液。NRJ1對這些細(xì)胞的作用和抑制率的計(jì)算方法同實(shí)施例2。
實(shí)施例4 NRJ1的生物學(xué)作用
1、NRJ1對培養(yǎng)的白血病細(xì)胞株的作用為了觀察NRJ1對白血病細(xì)胞的作用，選用了BCR/ABL陽性的K562細(xì)胞和陰性的U937細(xì)胞。結(jié)果表明，用不同濃度的NRJ1作用于K562細(xì)胞48小時后，對細(xì)胞的生長有抑制作用，抑制作用與藥物的濃度成正比。而同樣濃度的NRJ1對BCR/ABL陰性細(xì)胞U937卻沒有抑制作用(圖2)。從圖中可以得知，NRJ1對K562細(xì)胞的抑制作用在濃度范圍在0.1uM到1.6uM之間時和其濃度呈線性相關(guān)，而NRJ1濃度高于1.6uM時，其對K562細(xì)胞的抑制作用已呈飽和趨勢。從圖中還可以得知，NRJ1的50％有效抑制濃度(IC50)略低于0.8uM。
用0.8uM的NRJ1作用于K562細(xì)胞24、48、72小時后發(fā)現(xiàn)，NRJ1對該細(xì)胞的抑制作用在24小時已經(jīng)為最大抑制作用的50％，48小時后抑制作用已經(jīng)達(dá)到最大，進(jìn)一步加長作用時間達(dá)72小時并不進(jìn)一步增加NRJ1對K562細(xì)胞的抑制作用(圖3)。
2、NRJ1對慢性白血病人和正常人外周血細(xì)胞的作用為了驗(yàn)證NRJ1對BCL/ABL白血病的治療作用，我們觀察了其對BCR/ABL陽性慢性白血病(CML)患者外周血白細(xì)胞(含30％的白血病細(xì)胞)的直接抑制作用，并用相同數(shù)量的正常人的外周血白細(xì)胞作對照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)NRJ1對白血病患者外周血白細(xì)胞的生長有明顯的抑制作用，此抑制作用與濃度成正比，而NRJ1對正常人外周血的白細(xì)胞只有輕微的非特異的抑制(圖4)。
實(shí)施例5 比較NRJ1、NRJ1與其它抗白血病藥物聯(lián)合應(yīng)用和STI571三者對K562細(xì)胞的抑制作用。
取生長良好的K562細(xì)胞，用含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)基調(diào)節(jié)濃度至1×105/ml，取0.2ml加到96孔培養(yǎng)板中，再用不同濃度的NRJ1和STI571處理這些細(xì)胞48小時后用MTT法測定細(xì)胞濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者的作用效率非常接近，IC50均為0.7uM左右；當(dāng)不同濃度的NRJ1(0.2uM、0.4uM、0.6uM、0.7uM)與500IU/ml的人類重組α-干擾素聯(lián)合作用于K562細(xì)胞后可使NRJ1對此細(xì)胞抑制作用明顯增強(qiáng)，IC50下降到0.4uM，而此濃度的α-干擾素本身對K562細(xì)胞沒有抑制作用。同樣用不同濃度的NRJ1與100uM的羥基尿素聯(lián)合使用后也可使NRJ1對K562細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng)，IC50從0.7uM下降到0.5uM，100uM的羥基尿素對K562細(xì)胞也沒有抑制作用(圖5)。NRJ1與這兩種藥物組合后對K562細(xì)胞的抑制作用均比單用STI571要強(qiáng)。
實(shí)施例6 制備針劑采用以下配方，按照常規(guī)方法制備用于治療白血病的針劑從實(shí)施例1中獲得的產(chǎn)物100mg注射用蒸餾水10ml實(shí)施例7 制備片劑采用以下配方，按照常規(guī)方法制備用于治療白血病的片劑從實(shí)施例1中獲得的產(chǎn)物100mg硬脂酸鎂50mg結(jié)晶纖維素100mg無水硅膠50mg實(shí)施例8 制備藥物組合物的針劑采用以下配方，按照常規(guī)方法制備用于治療白血病的針劑從實(shí)施例1中獲得的產(chǎn)物100mg
α-干擾素 500IU注射用生理鹽水 10ml實(shí)施例9 制備藥物組合物的膠囊采用以下配方，按照常規(guī)方法制備用于治療白血病的膠囊從實(shí)施例1中獲得的產(chǎn)物 100mg羥基尿素 250mg乳糖 50mg結(jié)晶纖維素 100mg無水硅膠 50mg
權(quán)利要求
1.式(I)的嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽， 式(I)中R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7從下列基團(tuán)中選擇H，C1～C4烷基；由-OH，-COR8，-CN或-CONH2取代的低鏈烷基，R8＝C1～C4烷基；環(huán)烷基，或由OH取代的環(huán)烷基；X為C1～C4烷基，-NHCO，-OCO；所述鹽熔點(diǎn)105℃-115℃。
2.如權(quán)利要求1所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽，其特征在于R1，R2，R3，R4，R5，R6＝H，R7＝CH3，X＝CH2。
3.一種制備權(quán)利要求2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽的方法，其特征在于該方法包括步驟1)將0.5-1.0M 4-氯甲基苯甲酰氯的THF溶液加入到0.2-0.5M的N-(5-氨基-2-甲苯基)-4-(3-吡啶基)-2-嘧啶胺的THF溶液中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1-5h，用反應(yīng)總體積1～4倍的乙酸乙酯處理，得到的溶液用等體積的飽和Na2CO3溶液處理，靜置分層，飽和食鹽水洗滌，然后將所得粗品用適量乙酸乙酯處理，過濾得黃色固體4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺，2)在0.5-1.0M哌嗪的乙腈溶液中，加入0.1-0.3M 4-氯甲基-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-苯甲酰胺的CH2Cl2溶液，懸濁反應(yīng)體系回流過夜，過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，得含哌嗪鹽酸鹽的N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽粗品，3)將該粗品加入約50mL 1.0N NaOH，用乙酸乙酯萃取，再分別用水、飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮，得白色無定形游離堿粗品，然后將該游離堿粗品溶于適量丙酮，過濾，濾液中加入適量甲磺酸的丙酮溶液，收集所得黃色沉淀物，分別用丙酮、乙醚洗滌，真空干燥后得到微黃色的N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-氨基)-苯基]-4-哌嗪-1-甲基-苯甲酰胺雙甲磺酸鹽。
4.權(quán)利要求1或2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽在制備治療白血病的藥物中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽的應(yīng)用，其中的藥物為治療BCR/ABL融合基因相關(guān)白血病的藥物。
6.如權(quán)利要求5所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽的應(yīng)用，其中的藥物為治療BCR/ABL融合基因陽性的人慢性髓系白血病的藥物。
7.如權(quán)利要求5所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽的應(yīng)用，其中的藥物為治療BCR/ABL融合基因陽性的人淋巴細(xì)胞白血病的藥物。
8.權(quán)利要求1或2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽在制備治療與BCR/ABL融合基因相關(guān)腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。
9.一種抗白血病藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1或2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽和任選的藥理上可接受的輔劑。
10.一種抗白血病藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1或2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽和任選的一種或多種治療有效量的其他已知抗白血病藥物。
11.一種抗腫瘤藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1或2所述的式(I)嘧啶類衍生物的甲磺酸鹽和任選的一種或多種治療有效量的其他已知抗腫瘤藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及嘧啶類衍生物，具體是嘧啶類衍生物甲磺酸鹽及其制備方法與應(yīng)用，更具體是一種N－[4－甲基－3－(4－吡啶－3－基－嘧啶－2－氨基)－苯基]－4－哌嗪－1－甲基－苯甲酰胺甲磺酸鹽及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明提供的嘧啶類衍生物甲磺酸鹽在制備治療白血病、腫瘤的藥物中的應(yīng)用，對白血病患者外周血白細(xì)胞的生長有明顯的抑制作用，此抑制作用與濃度成正比，而對正常人外周血的白細(xì)胞只有輕微的非特異的抑制；并可與任選的一種或多種治療有效量的其他已知抗白血病、抗腫瘤藥物藥物組成藥物組合物，達(dá)到協(xié)同增效作用。
文檔編號C07D401/04GK1706840SQ20041000918
公開日2005年12月14日 申請日期2004年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月7日
發(fā)明者鄭樹, 徐榮臻, 陳鴻翔 申請人:杭州新瑞佳生物醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司