Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥和抗痛風(fēng)的藥物或保健食品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)和醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種Graveobioside A 在制備抗高尿酸血癥和抗痛風(fēng)的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 痛風(fēng)是細(xì)小針尖狀的尿酸鹽的慢性沉積所致的一種疾病，痛風(fēng)的生化標(biāo)志是高尿 酸血癥。其臨床表現(xiàn)為尚尿酸鹽結(jié)晶而引起的痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)畸形，周身局部出現(xiàn)紅、 月中、熱、痛等癥狀，痛風(fēng)一般分為無癥狀期、急性關(guān)節(jié)炎期、間歇期及慢性關(guān)節(jié)炎期，痛風(fēng)在 早期階段往往僅表現(xiàn)間斷發(fā)作的急性關(guān)節(jié)炎。以單關(guān)節(jié)受累為主，關(guān)節(jié)腫痛通常持續(xù)7-10 天，可自發(fā)或通過藥物緩解，在間歇期無任何癥狀。而隨著痛風(fēng)病程的延長，發(fā)作次數(shù)、累及 受累關(guān)節(jié)數(shù)目逐漸增多，間歇期也開始出現(xiàn)關(guān)節(jié)癥狀。同時關(guān)節(jié)或皮膚軟組織中痛風(fēng)石形 成，關(guān)節(jié)出現(xiàn)毀損甚至致殘。腎臟也出現(xiàn)腎結(jié)石、慢性腎損傷等表現(xiàn)，最終可能發(fā)展為慢性 腎功能衰竭。痛風(fēng)同時是糖尿病、慢性腎病、肥胖、高血壓、腎結(jié)石、心梗等多種代謝相關(guān)疾 病的危險因素。究其原因，痛風(fēng)主要是先天遺傳基因以及后天飲食環(huán)境兩個因素共同造成 的，其病理都跟代謝酶有關(guān)，嘌呤堿基分解代謝的關(guān)鍵酶是黃嘌呤氧化酶(XOD)，它是決定 體內(nèi)尿酸生成速度的限速酶。
[0003] 目前，對于痛風(fēng)與高尿酸血癥的常規(guī)治療仍以西藥為主，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對痛風(fēng)的治療 方法多以消炎止痛、促進尿酸鹽排泄、降低血尿酸為主，西醫(yī)治療痛風(fēng)的藥物主要分為以下 兩大類:抗炎藥:包括秋水仙堿，非留體類抗炎藥(NSAIDs)，糖皮質(zhì)激素，腎上腺皮質(zhì)激素， 氨基葡萄糖，IL-I抑制劑等；降尿酸藥:有促尿酸排泄藥苯溴馬隆，抑制尿酸生成藥別嘌呤 醇、非布司他。這些藥物以不同的作用環(huán)節(jié)達(dá)到緩解或治療痛風(fēng)與高尿酸血癥的目的，但越 來越多的臨床觀察發(fā)現(xiàn)它們都具有一定的毒副作用。研究發(fā)現(xiàn)，中藥對治療痛風(fēng)也有較好 的效果，并顯示較小或無的毒副作用。一些中藥通過抗炎、鎮(zhèn)痛活性抑制足腫脹而發(fā)揮作 用，如短葶山麥冬、秦艽醇提物、黃柏等，Tian YQ等，對短葶山麥冬水提物及其有效部位抗 炎活性研究中發(fā)現(xiàn)，采用二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠或組胺誘導(dǎo)小鼠足跖腫脹模 型，短葶山麥冬具有顯著體內(nèi)外抗炎活性。另外一些中藥通過抑制XOD的活性而發(fā)揮作用， 如肉桂細(xì)枝、買麻藤、澤蘭、虎杖水提取物等。從葡萄籽提取的原花青素，植物提取的黃酮 類、槲皮素、紫槲皮苷，從蜂蜜提取的蜂膠可抑制肝臟的X0D，降低高尿酸血癥模型小鼠血液 尿酸水平。
[0004] 芹菜籽風(fēng)味獨特，芹菜籽中油脂含量豐富，同時其中含有多種生理活性物質(zhì)，主要 包括:丁基苯酞類(其藥用有效成分為3-正丁基-4,5_二氫苯并呋喃酮）、不飽和脂肪酸、黃 酮類、礦物元素、維生素等。芹菜籽具有平肝清熱息風(fēng)、安神定志、祛風(fēng)利濕等功效，用于高 血壓病、眩暈頭痛、面紅耳赤、皮膚濕疹、瘡腫等。
[0005] 服用芹菜籽提取物來緩解和治療關(guān)節(jié)疼痛在澳洲已有百年的歷史，被視為傳統(tǒng)民 間偏方，長期服用無毒副作用，現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)已初步肯定油菜籽油中含有對關(guān)節(jié)軟骨有益的 營養(yǎng)。另外，越來越多的文獻(xiàn)報道證明，中藥芹菜籽提取物抗炎效果良好，并能顯著降低高 尿酸血癥水平，有明顯防治痛風(fēng)的作用，并對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎產(chǎn)生的腎功能損害有一定的保 護作用，芹菜籽提取物是從芹菜籽中提取的一種有效成分，芹菜籽所含有的丁基苯酞是一 類具有鎮(zhèn)靜止痛作用的化合物，目前已經(jīng)從芹菜籽中提取出了多種這類具鎮(zhèn)靜止痛作用的 活性成分，同時芹菜籽中主要活性成分為柯伊利素、木犀草素和芹菜素等黃酮類成分。研究 表明，柯伊利素、木犀草素和芹菜素在體外可以顯著抑制黃嘌呤氧化酶的活性，且其活性與 別嘌呤醇的活性相當(dāng)。目前為止，毒理學(xué)數(shù)據(jù)顯示芹菜籽并無明顯的毒副作用。因此芹菜籽 作為防治痛風(fēng)的中藥新藥研發(fā)，具有很大優(yōu)勢及良好前景。
[0006] 專利ZL 200710062800.6對芹菜籽提取物經(jīng)石油醚和乙酸乙酯多次萃取后得到芹 菜籽乙酸乙酯萃取物，所含的萃取物含有6個香豆素類和12個黃酮類化合物，其中黃酮類化 合物包含Graveobioside A，僅對18個化合物中的柯伊利素、木犀草素、芹菜素進行黃嘌呤 氧化酶體外抑制活性，柯伊利素對高尿酸血癥模型對小鼠的影響，尚未對Graveobioside A 進行抗痛風(fēng)相關(guān)的藥理活性實驗。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥和抗痛風(fēng)的 藥物或保健食品中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的Graveobioside A是從序菜籽中分離得到，并證明 Graveobioside A能顯著降低高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平，其降尿酸作用與抑制黃噪 呤氧化酶的活性有關(guān)，并且G r a V e 〇 b i 〇 s i d e A對小鼠關(guān)節(jié)炎有明顯抑制作用。 GraveobiosideA在制備抗高尿酸血癥和抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的用途屬于首次公開。
[0008]為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
[0009]如下結(jié)構(gòu)式所示的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)的藥物或保健 食品中的應(yīng)用，所述的藥物是每人每天服用劑量以20mg~800mg的GraveobiosideA為活性 成分并與賦形劑制成的藥物制劑。
[0011]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的藥物制劑中Graveobioside A的含量占藥物制劑質(zhì)量的0.1~99%，其余 為藥物學(xué)和藥劑學(xué)上可接受的，對人和動物無毒的藥用輔料或載體。
[0012]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的藥物制劑中含Graveobioside A的含量占藥物制劑質(zhì)量的0.5-90%，其余 為藥物學(xué)和藥劑學(xué)上可接受的，對人和動物無毒的藥用輔料或載體。
[0013]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的應(yīng)用是Graveobioside A通過降低血清的黃噪呤氧化酶活性，降低高尿酸 血癥的血清尿酸水平，從而達(dá)到抗高尿酸血癥的作用。
[0014]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的應(yīng)用是Graveobioside A通過抑制對角叉菜膠所致足腫脹，從而達(dá)到預(yù)防 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎足腫脹的作用。
[0015]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的應(yīng)用是Graveobioside A通過明顯抑制尿酸所致足腫脹，從而達(dá)到預(yù)防痛 風(fēng)性關(guān)節(jié)炎足腫脹的作用。
[0016]根據(jù)所述的Graveobioside A在制備抗高尿酸血癥或抗痛風(fēng)藥物或保健食品中的 應(yīng)用，其中所述的應(yīng)用是Graveobioside A對黃嘌呤氧化酶具有抑制作用并呈劑量依賴關(guān) 系，從而達(dá)到降尿酸作用，Graveobioside A是黃噪呤氧化酶的競爭性抑制劑。
[0017]本發(fā)明還提供了一種抗高尿酸血癥的藥物組合物，含有Graveobioside A化合物 及可藥用載體或賦形劑。
[0018]以及，抗痛風(fēng)的藥物組合物，含有Graveobioside A化合物及可藥用載體或賦形 劑。
[0019] 本發(fā)明同時還提供了一種Graveobioside A的制備方法，取序菜干燥種子，以8~ 15倍量30~70 % V/V乙醇滲漉提取或加熱提取2~4次，每次0.5~2小時，提取液減壓濃縮至 近無乙醇，于濃縮液中用1~3倍量乙酸乙酯萃取1~3次，分出乙酸乙酯并回收乙酸乙酯，水 層過D-IOl大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，濃縮，濃 縮液上硅膠柱色譜，用90:10-0:100的氯仿：甲醇梯度洗脫，分段收集洗脫液，用薄層色譜跟 蹤檢查，合并Graveobioside A的流份，濃縮，將濃縮液過Sephadex LH-20凝膠色譜進行純 化，用甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮干燥，得Graveobios ideA。
[0020] 本發(fā)明所述的Graveobioside A經(jīng)如下動物實驗和體外對黃噪呤氧化酶的抑制率 實驗，證明Graveobioside A能顯著降低高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平，其降尿酸作用與 抑制黃嘌呤氧化酶的活性有關(guān)，GraveobiosideA是黃嘌呤氧化酶的競爭性抑制劑，同時對 小鼠關(guān)節(jié)炎有明顯抑制作用。
[0021] 通過制備氧嗪酸鉀鹽致小鼠高尿酸血癥模型，觀察Graveobioside A對高尿酸血 癥的預(yù)防作用。GraveobiosideA低、中、高三個劑量組(按體重劑量組依次為5mg/kg、IOmg/ kg、20mg/kg)與模型對照組、正常對照組、陽性對照組(藥物為別嘌醇40mg/kg)比較，與正常 對照組相比，模型組動物血清尿酸和黃嘌呤氧化酶水平顯著升高，表明小鼠高尿酸血癥模 型成功;所有給藥組均能明顯降低氧嗪酸鉀鹽致高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平，與模型 對照組相比差異顯著