一種奧拉西坦脂質微泡及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及奧拉西坦，具體涉及奧拉西坦脂質微泡及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 奧拉西坦是由意大利史克比切姆公司于1974年首次合成的促智藥，是由兩種異 構體（S)-奧拉西坦（(s)-oxiracetam)和（R)-奧拉西坦（(R)-oxiracetam)組成的消旋 體。益智藥奧拉西坦是一種合成的羥基氨基丁酸（GABOB)衍生物，它是一種能促進學習，增 強記憶力，保護受損神經細胞的中樞神經系統(tǒng)藥物。
[0003] 專利CN102525899A公布了一種奧拉西坦注射液，CN1555794A公布了一種奧拉西 坦分散片，CN102579386A公布了一種奧拉西坦膠囊及薄膜衣片，CN101732251A公布了一種 奧拉西坦脂質體注射液；這些制劑均存在藥物靶位作用時間不長，藥物穩(wěn)定性不夠好，藥物 降解速度較快等問題。
[0004] 尋找高效、低毒且具有良好生物相容性的藥物載體是靶向給藥的關鍵所在。靶向 給藥系統(tǒng)發(fā)展的趨勢是利用脂質體、微球等作為藥物載體，其中脂質體由于可體內降解、無 毒、無免疫抑制作用等特點，作為藥物載體越來越受到人們的重視。但是脂質體也存在很多 的局限性，如靶向性不明顯，包封率較低，易滲透。尤其是到達靶位后釋藥緩慢，往往很難達 到有效治療濃度。
[0005] 隨著超聲顯影技術的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)微泡能夠顯著改善超聲圖像的對比質量，由 此發(fā)展出中間含氣的超聲微泡作為超聲造影劑。超聲造影劑作為增強心肌、肝、腦等實質器 官的二維超聲顯像和血流多普勒效應，明顯提高超聲對于病變區(qū)形態(tài)的分辨能力。
[0006] 盡管微泡在造影劑方面的研究日趨成熟，但是將微泡作為一種新型的藥物載體來 研究并不多見。盡管微泡在靶向給藥及促進藥物在靶部位的吸收具有獨特的優(yōu)勢，但存在 很多目前無法克服的技術難題：如微泡作為藥物載體，其載藥量較低，造成輸送到靶位的藥 物濃度較低，對大多數(shù)藥物來說不足以產生有效的藥理作用等。目前載藥微泡僅適用于少 量藥效較強的藥物，如重組人血管內皮抑制素，布舍瑞林、紫杉醇等。

【發(fā)明內容】

[0007] 針對現(xiàn)有技術中存在的上述缺陷，本發(fā)明提供一種奧拉西坦脂質微泡。
[0008] 本發(fā)明的另一目的是提供一種奧拉西坦脂質微泡的制備方法。
[0009] 本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的： 一種奧拉西坦脂質微泡，其特征在于：所述脂質微泡包括磷脂雙分子層膜、氣體和載奧 拉西坦的白蛋白納米粒；所述氣體和載奧拉西坦的白蛋白納米粒均包裹在磷脂雙分子層膜 內部。
[0010] 所述白蛋白為人血清白蛋白。
[0011] 所述氣體可以為氮氣、全氟丁烷、全氟丙烷、六氟化硫中的一種或幾種混合。
[0012] 發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，制備的奧拉西坦脂質微泡，容易出現(xiàn)外殼較硬，彈性相對 差，在超聲時空化作用效應弱，不能被低能量超聲所擊碎，倘若加大超聲能量又會造成正常 組織損傷。
[0013] 上述磷脂優(yōu)選天然磷脂。
[0014] 在滿足脂質微泡容易被超聲擊破的情況下，發(fā)明人在研究中還發(fā)現(xiàn)，奧拉西坦脂 質微泡中氣體的選擇有很大的講究，一旦控制不好就容易出現(xiàn)：微泡里的氣體擴散很快，球 壁塌陷而迅速失去聲反射性，并且不能隨血液分布全身，從而一定程度上影響奧拉西坦的 治療效果。
[0015] 上述氣體以全氟丁烷為佳。
[0016] 在滿足脂質微泡容易被超聲擊破的情況下，發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，若控制不好，制得的奧 拉西坦脂質微泡在體內的傳輸效率緩慢，藥物起效時間相對較慢，從而一定程度上影響奧 拉西坦的用藥。
[0017] 進一步，天然磷脂優(yōu)選蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂和磷脂酰乙醇胺中的一種或幾種混合。
[0018] 所述的白蛋白納米粒包括表面有修飾葉酸、甘草次酸的載奧拉西坦白蛋白納米 粒，或表面沒有修飾的載奧拉西坦白蛋白納米粒。
[0019] 上述奧拉西坦脂質微泡的制備方法，包括載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙旱闹苽?和包裹載奧拉西坦白蛋白納米粒脂質微泡的制備。
[0020] 載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙旱闹苽洌?分別配制白蛋白水溶液和奧拉西坦的乙醇溶液，然后將奧拉西坦乙醇溶液緩慢滴加到 白蛋白水溶液中，然后加入戊二醛，攪拌固化，旋轉蒸發(fā)除去乙醇，即得載藥白蛋白納米粒 混懸液。
[0021] 包裹載奧拉西坦白蛋白納米粒脂質微泡的制備： 將磷脂、甘油和磷酸鹽緩沖液混合，再加入步驟1中制得的白蛋白納米?；鞈乙翰⒓?熱，然后充入氣體振蕩，制得包裹載藥白蛋白納米粒的脂質微泡。
[0022] 上述奧拉西坦的用量為臨床處方量。本發(fā)明使用的固化劑為戊二醛，其用量為本 領域技術人員根據(jù)實際情況確定。
[0023] 發(fā)明人在實際過程中發(fā)現(xiàn)，在采用上述制備方法制備脂質微泡過程中，若控制不 好，易使得制得的奧拉西坦脂質微泡易滲漏，穩(wěn)定性差，保存時間短，從而嚴重影響奧拉西 坦脂質微泡的用藥效果。
[0024] 優(yōu)選地，上述白蛋白水溶液的濃度為0. 8%~5% ;戊二醛的濃度為0. 2%~0. 3% ;磷 月旨、甘油和磷酸鹽緩沖液的比例為55~60:5~8:100。
[0025] 進一步，在保證制得的奧拉西坦脂質微泡不易滲漏，穩(wěn)定性好的情況下，發(fā)明人在 研究中還發(fā)現(xiàn)，若控制不好，易出現(xiàn)制得的脂質微泡包封率低的技術問題。
[0026] 更優(yōu)選地，上述戊二醛的濃度為0. 23%~0. 28% ;奧拉西坦的乙醇溶液加入到白蛋 白水溶液中的滴速控制在〇. 1~6 mL/min。
[0027] 上述百分比為重量百分比。磷脂、甘油與磷酸鹽緩沖液的比例為質量比。
[0028] 在保證包封效率的基礎上，發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，震蕩時間與加熱時間控制不好 會帶來制得的奧拉西坦脂質微泡的粒徑不均勻，從而一定程度上影響脂質微泡透過體內膜 的比例及效率。
[0029] 最優(yōu)選地，上述白蛋白水溶液的濃度為1%~3% ;戊二醛的濃度為0. 25% ;磷脂、甘油 和磷酸鹽緩沖液的比例為55~60:5~8:100 ;奧拉西坦的乙醇溶液加入到白蛋白水溶液中 的滴速控制在0. 5~3 mL/min，充入氣體后震蕩的時間為5-300 s ;加熱時間為2~3h。
[0030] 具體的說，一種奧拉西坦脂質微泡的制備方法，包括如下步驟： 1)載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙旱闹苽洌?配制濃度為0. 8%~5%白蛋白水溶液和奧拉西坦的乙醇溶液，然后將奧拉西坦乙醇溶 液以0. 5~3 mL/min滴加到白蛋白水溶液中，然后加入濃度為0. 25%的戊二醛，攪拌固化， 旋轉蒸發(fā)除去乙醇，即得載藥白蛋白納米?；鞈乙骸?br>[0031] 2)包裹載奧拉西坦白蛋白納米粒脂質微泡的制備： 將磷脂、甘油和磷酸鹽緩沖液按55~60:5~8:100的比例混合制得磷脂混合液，再加 入步驟1中制得的載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙翰⒓訜?~3h，然后充入全氟丁烷機械 法振蕩30s~50s，制得包裹載藥白蛋白納米粒的脂質微泡。
[0032] 上述載奧拉西坦白蛋白脂質微泡直徑為4~7微米。
[0033] 磷脂混合液與載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙旱捏w積比優(yōu)選3~4:1。
[0034] 本發(fā)明所得的微泡可靜注用于臨床，或者制成凍干粉針劑用于臨床。
[0035] -種奧拉西坦脂質微泡凍干粉針劑的制備方法，包括如下步驟： 1)載奧拉西坦白蛋白納米?；鞈乙旱闹苽洌?分別配制濃度為0. 8%~5%白蛋白水溶液和奧拉西坦的乙醇溶液，然后將奧拉西坦乙 醇溶液以〇. 5~3 mL/min滴加到白蛋白水溶液中，然后加入濃度為0. 25%的戊二醛，攪拌 固化，旋轉蒸發(fā)除去乙醇，即得載藥白蛋白納米?；鞈乙骸?br>[0036] 2)包裹載奧拉西坦白蛋白納米粒脂質微泡的制備： 將磷脂、甘油和磷酸鹽緩沖液按55~60:5~8:100的比例混合，再加入步驟1中制得 的白蛋白納米?；鞈乙翰⒓訜?~3h，然后充入全氟丁烷機械法振蕩30s~50s，制得包裹 載藥白蛋白納米粒的脂質微泡，所述憐脂混合液與載奧拉西坦白蛋白納米粒混懸液的體積 比為3:1。
[0037] 3)、預凍：把分裝好的奧拉西坦脂質微泡放入凍干箱內隔板上，在手動界面中，設 板層溫度為OtMmin (開啟電加熱)，進箱完畢后，待制品達到1°C以下保持60min ;打開兩 個壓縮機，設板溫-40°C、lmin，使制品在-35°C以下保持60min ;設板溫-lit：、60min，待制 品達-lit：時，使制品在-lit：保持60min ;設板溫-38°C、lmin，使制品在-35°C以下保持 60min〇
[0038] 4)、一次干燥(升華干燥） 對后箱制冷，待后箱溫度達_40°C時，開啟真空泵，2s后開小蝶閥，對后箱抽真空。
[0039] 待后箱真空彡90Pa時，開中隔閥，待前箱真空彡12pa時，設定導熱油溫度為 〇°C，有限量泄露為8±2pa，對制品加熱180min，設定導熱油溫度為10°C，有限量泄露為 8±2pa，至制品完全抽白。整個升華過程中，前、后箱真空度應彡30Pa，制品溫度彡-20°C， 冷凝器溫度< -50°C。如出現(xiàn)異常情況應減慢加熱速度、停止加熱或降低板溫。
[0040] 5 )、二次干燥(解析干燥） 設定板層溫度為20°C，待制品溫度越過-25~-20°C溫度段后，打開有限量泄漏 20±5 (彡30Pa)，使制品溫度迅速上升到20°C后，關閉有限量泄漏，恒溫干燥5小時以上。
[0041] 整個過程中，冷阱溫度應< -50°C。恒溫階段前、后箱真空為< 5Pa。
[0042] 本發(fā)明的有益效果： 本發(fā)明為載藥超聲微泡給藥系統(tǒng)，進入體內后，體表采用超聲輻射，使微泡定向爆破， 在體內靶部位釋放藥物；同時微泡的爆破可以造成"聲孔效應"，增強局部微血管和細胞膜 通透性，促進藥物滲透，從而實現(xiàn)藥物的靶向給藥。
[0043] 本發(fā)明選用的天然磷脂能清除自由基，延緩機體衰老；改善脂類代謝，