的方法。一般而言，將測試片暴露 于特定介質(zhì)（使得蛋白質(zhì)粘附等)如血漿、血液或尿液等歷時(shí)預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)，隨后洗涂測試 片，隨后進(jìn)行測試方案。該測試方案有效地將該裝置與活微生物培養(yǎng)、洗涂該裝置W除去 溶液存在的細(xì)菌"、讓活性組分有足夠時(shí)間去"殺死"，隨后轉(zhuǎn)移到生長介質(zhì)，在生長介質(zhì) 中裝置上存活的微生物將在溶液中繁殖成子代細(xì)胞，從而增加生長介質(zhì)的濁度，而該濁度 隨后可通過光學(xué)密度來測定。
[0048] 實(shí)施例29描述了測試底材的血小板粘附的方法。一般而言，測試片可(或可不)暴 露于特定的介質(zhì)(使得蛋白粘附等)如血漿、血液或尿液等歷時(shí)預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)，隨后洗涂測 試片，隨后進(jìn)行測試方案。該測試方案由W下組成:將處理過的測試片暴露于包含一定濃度 的血小板的血漿并讓其擱置過夜。
[0049] 實(shí)施例30描述了測試肝素活性的方法。
[0050] 實(shí)施例31描述了測定各種涂層對抗綠脈桿菌(Pseudomonas aeruginosa)的活性 的通用程序。所述方法類似于關(guān)于圖2所描述的方法。圖4(涂有抗微生物聚合物或組合聚合 物(抗微生物聚合物+肝素）并用綠脈桿菌(Pseudomonas aeruginosa)挑戰(zhàn)的血液透析導(dǎo) 管的生物膜介導(dǎo)的濁度)表示由實(shí)施例31得到的結(jié)果，且從該圖清楚地知道，相對于未涂布 的導(dǎo)管和抗微生物聚合物兩者，在對抗綠脈桿菌(Pseudomonas aeruginosa)時(shí)，組合涂層 意外地表現(xiàn)出優(yōu)異的抗微生物活性。
[0051 ]實(shí)施例32-36 W與實(shí)施例31類似的方式進(jìn)行。圖5(涂有抗微生物聚合物或組合聚 合物(抗微生物聚合物+肝素)并用糞腸球菌化nterococcus faecalis)挑戰(zhàn)的血液透析導(dǎo) 管的生物膜介導(dǎo)的濁度)表示從實(shí)施例32得到的結(jié)果，從該圖清楚地知道，相對于未涂布的 導(dǎo)管，在對抗糞腸球菌化nterococcus faecal is)時(shí)，組合涂層表現(xiàn)出優(yōu)異的抗微生物活 性。圖6(涂有抗微生物聚合物或組合聚合物（抗微生物聚合物+肝素）并用大腸桿菌 化SCherichia COli)挑戰(zhàn)，隨后血漿培養(yǎng)過夜的血液透析導(dǎo)管的濁度)表示從實(shí)施例33得 到的結(jié)果，從該圖清楚地知道，相對于未涂布的導(dǎo)管和抗微生物聚合物兩者，在對抗大腸桿 菌化scherichia coli)時(shí)，具有高肝素含量的組合涂層意外地表現(xiàn)出優(yōu)異的抗微生物活 性。圖7(涂有抗微生物聚合物或組合聚合物(抗微生物聚合物+肝素)并用金黃色葡萄球菌 (51曰地如〇(3〇(3(3118 aureus)挑戰(zhàn)、隨后血漿培養(yǎng)過夜的血液透析導(dǎo)管的濁度)表示從實(shí)施例 34得到的結(jié)果，從該圖清楚地知道，相對于未涂布的導(dǎo)管和抗微生物聚合物兩者，在對抗金 黃色葡萄球菌(51曰地如〇(3〇(3(3118 aureus)時(shí)，具有高肝素含量的組合涂層意外地表現(xiàn)出優(yōu) 異的抗微生物活性。圖8(在血漿培養(yǎng)后(在聚氨醋血液透析導(dǎo)管上)共混聚合物和抗微生物 聚合物對抗金黃色葡萄球菌(Sta地yIococcus aureus)的活性)表示從實(shí)施例35得到的結(jié) 果，從該圖清楚地知道，相對于未涂布的導(dǎo)管，在對抗金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)時(shí)，組合涂層表現(xiàn)出優(yōu)異的抗微生物活性。圖9表示從實(shí)施例36得到的結(jié)果，從該圖 清楚地知道，相對于未涂布的導(dǎo)管，在對抗綠脈桿菌(Pseudomonas aeruginosa)時(shí)，組合涂 層表現(xiàn)出優(yōu)異的抗微生物活性。
[0052] 實(shí)施例37對涂有抗微生物聚合物、組合(抗微生物+肝素)聚合物或共混(抗微生物 +肝素)聚合物的表面如上所述進(jìn)行血小板粘附測試。結(jié)果示于圖10-12。
[0053] 實(shí)施例38描述了組合聚合物的肝素活性隨時(shí)間的變化。結(jié)果(涂有組合聚合物(高 肝素含量)的PUR帶在PBS中經(jīng)16周系列培養(yǎng)的表面肝素活性(通過IIa))示于圖13。
[0054] 實(shí)施例41-42、45和46描述了使抗微生物單體聚合的方法。一般而言，將抗微生物 單體與一種或多種共聚單體混合、脫氣并加熱到反應(yīng)溫度。隨后加入聚合引發(fā)劑。讓反應(yīng)進(jìn) 行到所需的粘度水平并隨后巧滅。隨后純化得到的聚合物。
[0055] 抗微生物官能團(tuán)能夠殺死易感類型微生物、防止易感類型微生物的繁殖、或抑制 易感類型微生物的生長、或至少明顯減緩易感類型的微生物的生長。微生物包括但不必限 于細(xì)菌、病毒、真菌、酵母、藻類和其他生物形式?？刮⑸锕倌軋F(tuán)包括脈基團(tuán)、雙脈基團(tuán)和 季錠。
[0056]脈(guanide group)基團(tuán)具有下述通式的化合物的一部分：
根據(jù)本發(fā)明，Ri、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氨、取代或未取代的烷基鏈、取代或未取代的環(huán) 烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的烷氧基、脈和胺。
[0057] 雙脈基團(tuán)(biguanide group)為脈的亞基且具有下述通式的化合物的一部分：
根據(jù)本發(fā)明，Ri、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氨、取代或未取代的烷基鏈、取代或未取代的環(huán) 烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的烷氧基、脈和胺。優(yōu)選的Ri、R2、R3和R4組合包括 上述作為脈列出的那些。
[0058] 具有雙脈和/或脈基團(tuán)的適合的抗微生物基團(tuán)包括聚(脈）、聚(雙脈）、聚(六亞甲 基雙脈）、雙氯苯雙脈己燒及其衍生物。抗微生物官能團(tuán)的衍生物也適合用作抗微生物官能 團(tuán)。衍生物為可從母體化合物通過某些化學(xué)方法或物理方法衍生得到的化合物。一般而言， 它們與母體化合物結(jié)構(gòu)類似并具有類似的特征。在某些實(shí)施方案中，抗微生物官能團(tuán)可為 含有脈或雙脈基團(tuán)的基團(tuán)的衍生物，例如聚(六亞甲基雙脈）。適合的脈、雙脈和聚（六亞甲 基雙脈）的衍生物，特別是脈衍生物、聚氨基丙基雙脈衍生物、聚六亞甲基脈和聚六亞甲基 脈衍生物、W及上述抗微生物基團(tuán)的乙締基型和甲基丙締酸型衍生物包括例如在US 4， 670,592、US 8,603,453、US 7,256,218、US7,563,792、US 2009/0306157、W0 2013/152838、 EP 1，624,754、EP 0,456,093、UK 705,838和UK 1,095,902中公開的那些，運(yùn)些文獻(xiàn)通過全 文引用W不與本文的具體公開相沖突的程度結(jié)合到本文中。
[0059] 季錠基團(tuán)為包含具有下述通式的基團(tuán)的陽離子化合物：
根據(jù)本發(fā)明，Ri、化、R3、R4獨(dú)立地選自雜原子、取代或未取代的烷基鏈、取代或未取代的 環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的烷氧基、脈和胺。適合的季錠基團(tuán)出現(xiàn)在有 機(jī)娃季錠化合物和3-(S甲氧基甲娃烷基）丙基二癸基甲基錠鹽中。其他包括苯扎氯錠（苯 甲巧錠（benzaIkonium) chloride)、節(jié)索氯錠（benzethonium chloride)、甲基節(jié)索氯錠 (me1:hy化enzethonium chloride)、十六烷基二甲基芐基氯化錠（cetalkonium chloride)、 十六烷基氯化化晚鐵、十六烷基S甲基漠化錠（cetrimonium cetrimide)、dofanium chloride、漠化四乙基錠、二癸基二甲基氯化錠和杜滅芬(domiphen bromide)。徑胺適合的 抗微生物季錠基團(tuán)公開于US 8,598,269、US 8,512,731、US 3,794,736、US 3,730,701、US 3,860,709、US 4,282,366、US 4,394,378、US 4,408,996、US 4,414,268、US 4,504,541、US 4,615,937、US 4,620,878、US 4,631，273、US 5,358,688、US 5,359,104和美國專利申請第 2006/0223962號中，運(yùn)些文獻(xiàn)通過全文引用W不與本文的具體公開相沖突的程度結(jié)合到本 文中。
[0060] 抗血栓形成官能團(tuán)通過在引入外來物之后減小體內(nèi)血栓形成的量。多糖為由糖單 體的組合制得的聚合物。一些多糖具有抗血栓形成性質(zhì)，包括氨基葡聚糖、肝素及其衍生 物。適合的抗血栓形成官能團(tuán)包括肝素和肝素衍生物;氨基葡聚糖;華法令;水賠素;透明質(zhì) 酸;硫酸皮膚素；多糖;粘多糖;硫酸軟骨素;硫酸角質(zhì)素;具有硫酸醋基團(tuán)、橫酸醋基團(tuán)、氨 基橫酸醋基團(tuán)、聚氧乙締酸基團(tuán)的單體;兩性離子基團(tuán)，甲基丙締酸2-橫基乙醋、丙締酸2-橫基乙醋、甲基丙締酸3-橫基丙醋、乙氧基甲基丙締酸3-橫基丙醋、丙締酸3-橫基丙醋、甲 基丙締酸4-硫酸根合下醋、丙締酸4-硫酸根合下醋、硫酸締丙醋、硫酸甲醋締丙醋、3-下締-1-硫酸醋、3-甲基-3-下締-1-硫酸醋、3-甲基-3-下締-1-硫酸醋、2-硫酸根合乙基甲基丙締 酷胺、2-硫酸根合乙基丙締酷胺、3-硫酸根合丙基甲基丙締酷胺、3-硫酸根合丙基丙締酷 胺、4-硫酸根合下基甲基丙締酷胺、4-硫酸根合下基丙締酷胺、硫酸根合聚氧化締甲基丙締 酸醋、硫酸根合聚氧化締丙締酸醋、甲基丙締酸2-氨基橫酸根合乙醋、丙締酸2-氨基橫酸根 合乙醋、甲基丙締酸3-氨基橫酸根合丙醋、丙締酸3-氨基橫酸根合丙醋、甲基丙締酸4-氨基 橫酸根合下醋、丙締酸4-氨基橫酸根合下醋、氨基橫酸締丙醋、氨基橫酸甲醋締丙醋、2-氨 基橫酸根合乙基甲基丙締酷胺、2-氨基橫酸根合乙基丙締酷胺、3-氨基橫酸根合丙基甲基 丙締酷胺、3-氨基橫酸根合丙基丙締酷胺、4-氨基橫酸根合下基丙締酷胺（4-3111口11日1]1〇1：〇1311171日1：11日(3巧1日1111(1日）、4-氨基橫酸根合下基丙締酷胺、氨基橫酸根合聚氧化 締甲基丙締酸醋和氨基橫酸根合聚氧化締丙締酸醋?？蓮纳鲜鰧?shí)例看出，具有硫酸醋、橫酸 醋和氨基橫酸醋等基團(tuán)的適合單體可包括具有碳-碳雙鍵的可聚合基團(tuán)，可聚合物基團(tuán)特 別是丙締酸基團(tuán)和甲基丙締酸基團(tuán)。其他適合的抗血栓形成化合物和官能團(tuán)可參見美國專 利公開第號2011/0274821和美國專利第6,096,798號，運(yùn)些文獻(xiàn)通過全文引用W不與本文 的具體公開相沖突的程度結(jié)合到本文中。肝素基團(tuán)為具有下述通式化合物的一部分的多 糖：
抗血栓形成官能團(tuán)的衍生物同樣適合用作抗血栓形成官能團(tuán)。衍生物為可通過某些化 學(xué)或物理方法衍生自母體化合物的化合物。一般而言，它們的結(jié)構(gòu)類似于母體化合物且具 有類似特性。在一些實(shí)施方案中，抗血栓形成官能團(tuán)可為肝素衍生物。肝素衍生物例如包括 苯甲控錠肝素（苯甲控錠(benzalkonium) heparin)、硫酸肝素、硫酸類肝素、肝素錠、肝素 芐基醋、肝素巧、肝素裡、高分子量和低分子量肝素、硫酸鹽化肝素 (SUlfated h巧arin)、胺 化肝素、甲基丙締酸肝素、甲基丙締酸肝素季錠鹽絡(luò)合物、肝素甲基丙締酸鹽和聚（乙二醇） 甲基丙締酸肝素。
[0061]可聚合基團(tuán)為能反應(yīng)形成聚合物的官能團(tuán)?？删酆匣鶊F(tuán)可通過自由基聚合、加聚 或縮聚來聚合。包含可聚合基團(tuán)的各種單體公開于:US 6，127,348、US 6，121，027、US 7， 771，743、PCT GB9701173、US 6,096,798、US 6,060,582、5,993,890、5,945,457、5,877， 263、5,855,618、5,846,530、5,837,747、5,783,570、5,776，184、5,763,504、5,741，881、5， 741，551、5,728,751、5,583,213、5,512,329、5,462,976、5,344,455、5，183,872、4,987， 181、4,331,697、4,239，664、4,082,727、美國專利公開 2003/0021762 和歐洲專利049,828 Al & B1。運(yùn)些文獻(xiàn)通過引用出于所有目的W不與本文的具體公開相沖突的程度結(jié)合到本 文中，包括使用運(yùn)些單體作為共聚單體或制備聚合物W便用官能化合物來修飾。其他適合 的可聚合基團(tuán)包括：聚氧化締、聚乙二醇、聚乙締基化咯燒酬、聚丙締酸醋、聚甲基丙締酸 醋、聚氧化締、甲基丙締酸或其他乙締基型單體;酷氯，例如甲基丙締酷氯、異氯酸醋或甲基 丙締酸醋2-異氯酸根合乙醋、親電子的聚（乙二醇）甲基丙締酸醋（PEGMA)。如果使用了 PEGMA，則通過將其首先與表氯醇反應(yīng)W在PEGMA上連接環(huán)氧化物基團(tuán)使得PEGMA具有親電 子性。該環(huán)氧化物也可與其他官能團(tuán)例如-OH、-COOH等反應(yīng)。并且，PEGMA可與幾基二咪挫反 應(yīng)W得到反應(yīng)性基團(tuán)，該反應(yīng)性基團(tuán)可進(jìn)一步與-NH、-OH、-C00H反應(yīng)。
[0062] 一般而言，自由基聚合用乙締基型或締丙基型基團(tuán)完成，乙締基型或締丙基型基 團(tuán)包括丙締酸醋和甲基丙締酸醋。單體可自身聚合，或者與同樣經(jīng)歷自由基聚合的共聚單 體聚合。共聚單體的實(shí)例包括一種或多種W下物質(zhì)：丙締酸醋、甲基丙締酸醋、甲基丙締酸 醋2-徑基乙醋、甲基丙締酸醋徑丙醋、甲基丙締酸醋正下醋、甲基丙締酸醋叔下醋、甲基丙 締酸醋正己醋、甲基丙締酸醋2-甲氧基乙醋、聚（己縮脈）甲基丙締酸醋、聚（己縮脈)聚氧乙 締甲基丙締酸醋、或烷基衍生的聚（己縮脈）甲基丙締酸醋、肝素衍生的聚氧乙締大分子、乙 締基橫酸單體、包含聚（乙二醇）的單體、N-乙締基化咯燒酬單體、甲基丙締酸醋4-節(jié)氧基苯 醋、碳酸締丙醋甲醋、締丙醇、締丙基異氯酸醋、甲基丙締酷氧基乙基膽堿。
[0063] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，抗微生物基團(tuán)和/或抗血栓形成基團(tuán)通過連接基團(tuán) 共價(jià)連接到其各自的可聚合物基團(tuán)。運(yùn)些連接基團(tuán)通常為骨架前體的一部分并包含與所需 胺或氨氧化物反應(yīng)W形成單體(例如包含乙締基型或締丙基型基團(tuán)的單體)的反應(yīng)性基團(tuán)， 例如聚六亞甲基雙脈甲基丙締酸醋。存在各種產(chǎn)生該連接鍵的化學(xué)選擇。例如，連接基團(tuán)可 為取代或未取代的1-13個(gè)碳的控鏈、取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳基、取代或未 取代的環(huán)烷基、取代或未取代的環(huán)締基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的締基、包含 醋的官能鏈、包含酷胺的官能鏈、包含脈的官能鏈、包含碳酸醋的官能鏈、包含氨基甲酸醋 的官能鏈、包含聚氧乙締的官能鏈和包含聚氧丙締聚合物的官能鏈。術(shù)語取代或未取代用 于描述化學(xué)官能團(tuán)自身可被一個(gè)或多個(gè)其他取代基團(tuán)取代。運(yùn)些其他取代基團(tuán)可包括雜原 子例如0、N或S。但是，除非特別說明，否則連接的取代基的數(shù)目、取代位置和類型并未有特 別限定。此外，適合的連接基團(tuán)例如包括下列基團(tuán)：徑基、簇基、酸酢、異氯酸醋、締丙基、乙 締基、丙締酸醋、甲基丙締酸醋、環(huán)氧化物、橫酸或硫酸醋基團(tuán)。與聚合物的鍵接可通過共價(jià) 鍵(包括接枝)或通過離子鍵。與異氯酸醋的仲胺氮原子的化學(xué)連接導(dǎo)致取代的脈鍵，或與 異硫氯酸醋的化學(xué)連接導(dǎo)致取代的硫脈鍵，或與環(huán)氧化物的化學(xué)連接導(dǎo)致e-徑基叔胺，或 與酷氯的化學(xué)連接導(dǎo)致N，N-二取代的酷胺，或與酸酢的連接導(dǎo)致N，N-二取代的酷胺，或與 酸酢或酬的連接導(dǎo)致N，N-二取代的半胺醒化emiaminal)或胺醒(取決于醒或酬），或與不飽 和鍵的連接導(dǎo)致叔胺連接。
[0064] 聚合物為由重復(fù)子單元組成的分子。該重復(fù)單元通常被稱作單體單元或單體鏈節(jié) (mer)。術(shù)語"單體"通常用于指能夠反應(yīng)W形成聚合物的化學(xué)子單元。僅有幾個(gè)單體單元的 聚合物有時(shí)被稱作低聚物。術(shù)語聚合物的含義包括均聚物、共聚物、=元聚合物、嵌段共聚 物、無規(guī)共聚物和低聚物。聚合物可包括嵌段。一系列相同的單體單元連接在一起形成嵌 段。聚合物可不具有嵌段，或者聚合物可具有多個(gè)嵌段。共聚物為具有至少兩種不同的單體 單元的聚合物。一些共聚物具有嵌段，而另一些具有無規(guī)結(jié)構(gòu)，且某些共聚物具有嵌段和無 規(guī)共聚物結(jié)合區(qū)域兩者。共聚物可由反應(yīng)性單體、低聚物、聚合物或其他共聚物制備。
[0065] 自由基聚合技術(shù)是制備聚合物的強(qiáng)大手段。在該技術(shù)中，將溶液中的單體活化W 形成自由基。具有自由基的單體與另一單體反應(yīng)，形成共價(jià)鍵，且將那個(gè)另一單體活化W形 成自由基。所得鏈反應(yīng)用于形成聚合物。還存在形成聚合物的其他方法W及W在制備新聚 合物的方法中包括聚合物或低聚物的技術(shù)。運(yùn)些為技術(shù)人員所公知，存