專利名稱：用作平滑肌細胞增生抑制劑的芐基糖酰胺的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及將取代的芐基糖酰胺(benzylglosylamide)用作滑肌細胞增生抑制劑和治療組合物，以治療平滑肌過度增生為特征的疾病和病癥，例如再狹窄。
所有形式的血管再造術(shù)，例如血管成形術(shù)和靜脈分流術(shù)，對損傷產(chǎn)生反應(yīng)，最后導(dǎo)致平滑肌細胞(SMC)增生，接著過多數(shù)量的細胞外基質(zhì)沉積(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.Jvasc.Surg 1991，13，885)。這些情況在動脈粥樣硬化(Raines E.W.；Ross R.Br.Heart J.1993，69(增刊)，S.30)及移植動脈粥樣硬化(Isik，F(xiàn).F.；Mcdonald，T.O.；Ferguson，M.；Yamanaka，E.；Gordon Am.J.Pathol.1992，141，1139)中也是重要的過程。在血管成形術(shù)后的再狹窄的情況下，通過藥理干預(yù)控制平滑肌細胞增生臨床解決辦法至今仍然不確定(Herrman.J.P.R.；Hermans，WR.M.；Vos，J.；Serruys P.W.Drugs 1993，4，18和249)。任何成功選擇性抑制平滑肌細胞增生的方法都必須不干擾內(nèi)皮細胞的修復(fù)或者其它細胞的正常增生以及功能(Weissberg，P.L.；Grainger，D.J.；Shanahan C.M.；Metcalfe，J.C.Cardiovascular Res.1993，27，1191)。
粘多糖肝素和硫酸肝素是平滑肌細胞增生的內(nèi)源性抑制劑，還能促進內(nèi)皮細胞生長(Castellot，J.J.Jr.；Wright，T.C.；Kamovsky，M.J.Seminars in Thrombosis and hemostasis 1987，13，489)。但是，因為與各種制劑異質(zhì)性有關(guān)的其它藥理作用(特別是抗凝作用引起的過度出血)可能危害肝素、肝素片段、化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾的肝素、低分子量肝素和其他模擬肝素的陰離子多糖的全部臨床有益作用(Borman，S.Chemical and engineering News.1993年6月28日，27)。
WO96/14325公開了作為平滑肌細胞增生抑制劑的?；S基糖苷。本發(fā)明的化合物不同之處在于(a)所述碳水化合物具有一個端基酰胺，(b)所述碳水化合物上的取代基明顯不同以及(c)拮抗平滑肌細胞增生的活性更強。
Zehavi.U.在Cabohyd.Res.1986，151，371中公開了4-羧基-2-硝基芐基-4-O-α-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡糖苷，它連接在聚合物上，以研究用作糖元合酶反應(yīng)中的受體。本發(fā)明化合物不同之處在于(a)所述碳水化合物具有一個端基酰胺，(b)芐基基團上的取代基不同，以及(c)作用(抗平滑肌增生)不同。
專利號US5,498,775、WO96/14324和US5,464,827描述了作為平滑肌細胞增生抑制劑用于治療以過度平滑肌增生為特征的疾病和病癥的多陰離子芐基糖苷或者環(huán)糊精。β-環(huán)糊精十四硫酸鹽被描述為平滑肌細胞增生抑制劑和再狹窄的有效抑制劑(Reilly.CF.；Faiitu.T.；Mefali.R.C.；Stablihto.I.I.；Wai-se E.；Johnson，R.G.Durg DevelopmentResearch 1993，29，137)。US5019562公開了用于治療與不需要的細胞或組織生長有關(guān)的病理狀態(tài)的環(huán)糊精陰離子衍生物。WO93/09790公開了抗增生的環(huán)糊精多陰離子衍生物，所述衍生物的每個糖殘基具有至少2個陰離子殘基。Meinetsberger(EP312087A2和312086A2)描述了硫酸化雙醛糖酸酰胺的抗血栓形成和抗凝血的性質(zhì)。US4431637公開了作為補體系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑的多硫酸化酚糖苷。本發(fā)明的化合物與所有現(xiàn)有技術(shù)的不同之處在于所述化合物(a)為結(jié)構(gòu)與肝素、硫酸化環(huán)糊精或硫酸化乳糖酸二聚物不同的芐基糖酰胺，(b)含有不多于兩個的毗連糖基(二糖)，(c)具有明確的結(jié)構(gòu)，(d)不是硫酸化物。
烷基包括直鏈部分和支鏈部分。鹵素為溴、氯、氟和碘。當Y為N時，所述吡啶羧酰胺優(yōu)選為吡啶3-羧酰胺。
藥學(xué)上可接受的鹽可以由以下有機酸和無機酸形成，例如乙酸、丙酸、乳酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、丙二酸、扁桃酸、蘋果酸、苯二甲酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟腦磺酸以及類似已知可接受酸。鹽也可以由有機堿和無機堿形成，優(yōu)選為堿金屬鹽，例如鈉、鋰或鉀。當Y為氮或者式I化合物含一個堿性氮時可以制備酸加成鹽，當式I化合物含一個羥基時通常可以制備堿加成鹽。
本發(fā)明的化合物可能含一個非對稱碳原子以及某些本發(fā)明的化合物可能含有一個或更多非對稱中心，這樣可以引起旋光異構(gòu)體和非對映體。盡管沒有說明式I的立體化學(xué)，但是本發(fā)明包括這樣的旋光異構(gòu)體和非對映體；外消旋體和拆分的對映體純R和S立體異構(gòu)體；R和S立體異構(gòu)體的其他混合物，以及它們的藥學(xué)可接受鹽。
本發(fā)明的優(yōu)選式I化合物為以下這樣的化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中n為0-1；R1和R2各自獨立為H、鹵素、CF3、羥基、硝基、氨基、甲氧基、丁氧基或丁氧基腈；R3為H、乙酰胺或甲氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為氫、1-6個碳原子的?；虮郊柞；?；R9和R10各自獨自為1-6個碳原子的酰基或者在麥芽糖4′和6′位上的R9和R10基團一起構(gòu)成苯亞甲基環(huán)；所有其他取代基同上述定義。
本發(fā)明更優(yōu)選的式I化合物為這樣的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n為0；R1和R2各自獨立為H或者鹵素；R3為H；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為氫、1-6個碳原子的?；虮郊柞；籖9和R10各自獨自為1-6個碳原子的?；蛘咴邴溠刻?′和6′位上的R9和R10基團一起構(gòu)成苯亞甲基環(huán)；所有其他取代基同上述定義。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是6-氯-N-(7-O-乙酰基-β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺；N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-6-氯-煙酰胺；2-氯-哌啶-5-羧酸-(6-O-苯甲?；?4’，6’-O-苯亞甲基-1-去氧-β-D-纖維二糖基)-酰胺；(2，6-二甲氧基-N-(7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺；N-(7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-氯-4-氟-苯甲酰胺；或者N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-2-氯-4-氟-苯甲酰胺，或者它們的藥學(xué)上可接受鹽。
根據(jù)以下方案，用商業(yè)上可獲得的原料或者可采用文獻方法制備的原料可以制備本發(fā)明的化合物。這個方案顯示本發(fā)明代表性化合物的制備。
方案I 在方案I中，Y、n、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和R10同上述定義。
因此，在合適的溶劑系統(tǒng)中，例如苯、乙醇、二氯甲烷、三乙胺，在一種偶聯(lián)劑例如EEDQ、DEC/HOBT或者DCC/HOBT存在下，于室溫下使纖維二糖胺1和苯甲酸衍生物2偶聯(lián)生成糖苷3。也可以如下制備此糖苷在合適的溶劑系統(tǒng)中，例如四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈和乙酸乙酯，在有三乙胺存在下，使胺1與取代的?；?偶聯(lián)生成糖苷3。當R3為硝基時，可如下還原3中的硝基獲得苯胺基化合物4在室溫下回流的極性非質(zhì)子傳遞溶劑如乙酸乙酯或者極性質(zhì)子傳遞溶劑如乙醇或甲醇中，可使用還原劑例如氯化亞錫或鐵金屬進行還原反應(yīng)；或者在催化劑如碳載鈀存在下，通過催化氫化反應(yīng)進行還原反應(yīng)。在非質(zhì)子傳遞溶劑如二氯甲烷或者四氫呋喃中，在一種胺堿例如三乙胺或二異丙基乙胺存在下，在-20℃至室溫的溫度下，使4和?；然蛘呋酋Ｂ扰己仙赡繕嘶衔?。
在室溫下回流的甲醇或者氫氧化鈉水溶液的甲醇中使用一種堿例如催化性甲醇鈉，3或5的乙酸酯基團可以通過水解去除生成化合物6。在乙酸酯基團水解后，在極性非質(zhì)子傳遞溶劑例如乙腈或二甲基甲酰胺中，在酸催化劑例如樟腦磺酸或甲苯磺酸存在下，在室溫至70℃下，麥芽糖4′和6′位上的羥基可以和苯甲醛二甲縮醛反應(yīng)生成苯亞甲基衍生物。化合物6的羥基可以于可力丁/四氫呋喃混合物中，在-78℃至室溫下選擇性地苯甲酰基化生成7。在胺堿例如吡啶或者三乙胺存在下，使用脂酰酐在溫度0℃至室溫下再?；苫衔?。
本發(fā)明的化合物用作抗增生劑。下述方法顯示以標準藥理測試方法評價本發(fā)明的代表性化合物，所述測試方法測定所評價化合物抑制平滑肌細胞增生的能力。采用3H胸苷摻入評價化合物對細胞增生的作用測試早期傳代(一般3-7代)的不完全融合狀態(tài)人類和豬平滑肌細胞。在16mm(24孔)多孔培養(yǎng)板用添加10％胎牛血清和2％抗生素/抗真菌劑的199培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。在開始該試驗方案之前，將亞融合細胞置于無血清合成培養(yǎng)基(AIM-V；Gibco)24-48小時。
盡管發(fā)現(xiàn)化合物隨著預(yù)培養(yǎng)愈久愈有效，但是一般在血清剝奪同步的細胞中加入化合物、3H胸苷和血清/生長因子后開始所述方法，并且報告相應(yīng)的結(jié)果。
在各孔中加入稀釋50倍的化合物(20μ/孔)，將培養(yǎng)板在5％CO2、37℃下培養(yǎng)24-36小時。開始時用50％乙醇溶解化合物，然后用培養(yǎng)基進行序列稀釋。通常評價的化合物濃度為1到100μM。作為對照，常規(guī)以所有細胞制品評價濃度為0.1至100μg/ml的二級豬小腸粘膜肝素(鈉鹽)。
完成測試程序后，將培養(yǎng)板置于冰上，用冰冷磷酸緩沖鹽水(PBS)洗三次，以冰冷10％三氯乙酸(TCA)溫育30分鐘以去除溶解于酸的蛋白。把溶液轉(zhuǎn)移至盛有0.4N鹽酸(500μL/瓶，中和氫氧化鈉)的閃爍小瓶中，每個孔用水(500μL)沖洗兩次，總體積為2mL/瓶。
獲得對照和實驗樣品的一式三份數(shù)據(jù)。從生長因子或血清刺激的最大刺激增生的細胞獲得照數(shù)據(jù)。從生長因子或血清最大刺激并用化合物處理的細胞獲得試驗數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以IC50提供在下表1。
表1
本發(fā)明的化合物可用于治療或抑制以過度平滑肌增生(平滑肌細胞過度增生)為特征的疾病。所述化合物特別適用于治療過度增生性血管疾病，所述疾病以平滑肌增生為特征，例如再狹窄，最常見于血管再造手術(shù)和移植，例如氣囊血管成形術(shù)、血管移植手術(shù)、冠狀動脈分流手術(shù)和心臟移植。其他存在不需要的“細胞”性血管增生的疾病狀態(tài)包括高血壓、哮喘和充血性心力衰竭。本發(fā)明的化合物也可用作血管生成抑制劑。血管生成(新血管化)即形成新毛細血管的過程，對許多病理過程特別重要，包括慢性炎癥和惡性腫瘤。因此本發(fā)明化合物可用作抗腫瘤藥。
本發(fā)明的化合物可以單獨配制或者和便于給藥的藥物載體組方配制，其比例取決于所述化合物的溶解性和化學(xué)性質(zhì)，選定的給藥途徑和標準藥理實踐。藥物載體可以是固體或者液體。
固體載體可以包括一種或更多種物質(zhì)，所述物質(zhì)也可以用作調(diào)味劑、潤滑劑、增溶劑、懸浮劑、填充劑、助流劑、壓縮助劑、粘合劑或片劑崩解劑；它也可以是包囊材料。在粉劑中，載體為微粒固體，可以是和微?；钚猿煞值幕旌衔?。在片劑中，所述活性成分按合適比例與具有必要的壓縮性質(zhì)的載體混合，并壓成需要的形狀和大小。粉劑和片劑優(yōu)選含最高至99％活性成分。合適的固體載體包括，例如磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點石蠟和離子交換樹脂。
液體載體用于制備溶液劑、懸浮劑、乳劑、糖漿劑、酏劑和加壓組合物。所述活性成分可以溶解或懸浮于藥學(xué)上可接受的液體載體中，例如水、有機溶劑，兩者的混合物或者藥學(xué)上可接受的油或脂肪。液體載體可以含有其他合適的藥用添加劑，例如增溶劑、乳化劑、緩沖劑、防腐劑、甜味劑、調(diào)味劑、助懸劑、增稠劑、色素、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透壓調(diào)節(jié)劑。用于口服和胃腸外給藥的液體載體的合適實例包括水(部分含有上述添加劑，例如纖維素衍生物，優(yōu)選為羧甲基纖維素鈉溶液)、醇類(包括一元醇和多元醇，例如甘油)和它們的衍生物，卵磷脂(lethicins)和油(例如分級分離的的椰子油和花生油)。對于胃腸外給藥，載體也可以是油酯例如油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。滅菌液體載體可用于胃腸外給藥的滅菌液體形式的組合物。用于加壓組合物的液體載體可以是鹵代烴或者其他藥學(xué)上可接受的拋射劑。
滅菌溶液或者懸浮液的液體藥用組合物可以通過例如肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下注射使用。滅菌溶液劑也可以靜脈給藥。本發(fā)明的化合物也可以以液體或者固體組合物形式口服給藥。
本發(fā)明的化合物可以以常規(guī)栓劑形式經(jīng)直腸或者陰道給藥。對于通過鼻內(nèi)或者支氣管內(nèi)吸入或吹入給藥，本發(fā)明的化合物可以配制成水溶液或部分水溶液，然后可以以氣霧劑形式使用。本發(fā)明的化合物也可以通過使用含活性化合物和載體的透皮貼片經(jīng)皮給藥，所述載體對活性化合物呈惰性，對皮膚無毒，使得可以傳遞所述藥物，以通過皮膚系統(tǒng)吸收進入血液。載體可以是多種形式中的任何一種，例如霜劑、軟膏、糊劑、凝膠和封閉裝置(occlusive device)。所述霜劑和軟膏可以是水包油或油包水型的粘稠液體或半固體乳劑。糊劑也適合，所述糊劑包括分散于含所述活性成分的石油或親水石油的吸收性粉末。許多封閉裝置可以用于將所述活性成分釋放入血液，例如附帶儲庫的半透膜，所述儲庫含有活性成分及載體或無載體，或者是含所述活性成分的基質(zhì)。其他封閉裝置見于文獻中。
劑量隨著使用的特定組合物、給藥途徑、癥狀表現(xiàn)的嚴重程度以及治療的特定對象而變化。根據(jù)標準藥理測試方法的結(jié)果，設(shè)計的胃腸外給藥(優(yōu)選為靜脈給藥)的活性化合物日劑量為0.1至10mg/kg，設(shè)計的每日口服劑量大約高10倍。估計靜脈給藥急性血管損傷(例如氣囊血管成形術(shù)或移植手術(shù))之后應(yīng)該持續(xù)大約5-30天，且治療慢性疾病需更長時間。一般以低于所述化合物最佳劑量的小劑量開始治療。然后增加劑量直至達到所述條件下的最佳效果?？诜?、胃腸外、鼻或支氣管內(nèi)給藥的準確劑量將由給藥醫(yī)師根據(jù)所治療個體的情況決定。所述藥用組合物最好為單位劑型，例如片劑或者膠囊劑。在這些劑型中，所述組合物細分在含合適數(shù)量活性成分的單劑中，所述單位劑型可以是包裝的組合物，例如包裝粉末、小瓶、安瓿、預(yù)先填充的注射器或者含液體的小藥囊。所述單位劑型可以是例如膠囊劑或片劑本身，或者它可是包裝形式的合適數(shù)量的任何這樣的組合物。
下面提供了本發(fā)明代表性化合物的制備。
實施例16-氯-N-(7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺步驟17-O-乙?；?1-β-纖維二糖胺7-O-乙?；?1-β-纖維二糖胺通過氧化鉑還原疊氮化物可以獲得，所述疊氮化物按照A.Bertho，Justus Liebigs Ann.Chem.，562，29(1949)的方法制得。步驟26-氯-N-(7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺將一份6-Chloronicitinoyl chloride(0.5g，0.32mmol)加入到攪拌的溶于二氯甲烷(1.5ml)的7-O-乙酰基-1-β-纖維二糖胺(0.20g，03147mmol)和三乙胺(0.064g，0.63mmol)與四氫呋喃(1.5ml)的混合物中。12小時后，反應(yīng)液用二氯甲烷(10ml)稀釋，而且連續(xù)用水(5ml)、10％氫氧化鈉(5ml)和鹽水(10ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)及濃縮。通過快速層析(50％-60％EtOAc/石油醚梯度洗脫)得到呈灰白色固體的標題化合物；1H NMR(CDCl3)δ1.99(s，3H)，2.01(s，3H)，2.04(s，6H)，2.06(s，3H)，2.10(s，3H)，2.12(s，3H)，3.65-3.69(m，2H)，3.79-3.81(m，2H)，4.06(dd，J＝12.3，2.4，Hz，1H)，4.14-4.18(m，1H)，4.38(dd，J＝12.5，4.6，Hz，1H)，4.50(d，J＝11.6，1H)，4.51(d，J＝7.9，1H)，4.90-4.96(m，2H)，5.07(表觀(apparant)t，J＝9.7，1H)，5.15(表觀t，J＝9.2，1H)，5.30-5.37(m，4H)，7.04(d，J＝8.6，1H)，7.42(dd，J＝8.3，0.7，Hz 1H)，8.02(dd，J＝8.1，2.6，Hz，2H)8.73(dd，J＝7.4，0.7，Hz 1H)。IR(KBr)3400，1750，1550，1245和1075cm-1，質(zhì)譜(+ESI)，m/z 775(M＋H)，797(M＋Na)實施例2N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-6-氯-煙酰胺步驟16-氯-N-(β-D-纖維二糖基)-煙酰胺將0.075ml的0.34M甲醇鈉溶液加入到6-氯-N-(7-O-β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺(1040mg，1.34mmol)的甲醇(10ml)液中。攪拌反應(yīng)物過夜，用Dowex H+樹脂淬冷，0.5小時后過濾溶液且真空濃縮得到白色固體的標題化合物，mp193；1H NMR(D2O-d2)δ3.19(t，J＝8.1Hz，1H)，3.25-3.48(m，4H)，3.58-3.62(m，4H)，3.70-3.83(m，3H)，4.40(d，J＝7.9Hz，1H)，5.08(d，J＝9.2Hz 1H)，7.49(d，J＝8.6Hz 1H)，8.09(dd，J＝8.3Hz，2.4Hz，1H)，8.63(d，J＝2.0Hz，1H)。IR(KBr)3375，2900，1660，1575和1060cm-1，質(zhì)譜(-FAB)，m/e 479(M-H)，797(M＋Na)。C18H25ClN2O11·H2O的計算值C，43.34；H，5.46；N，5.61。實測值C，43.48；H，5.55；N，5.47。步驟2N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-6-氯-煙酰胺將在二甲基甲酰胺(6ml)中含6-氯-N-(β-D-纖維二糖基)-煙酰胺(0.33g，0.6863mmol)、苯亞甲基二甲縮醛(0.15ml，1.0mmol)及樟腦磺酸(10mg，0.043)的溶液在70℃加熱。4小時后，使反應(yīng)液冷卻至室溫，并且用0.5ml的1N氫氧化鈉溶液淬冷。濃縮溶液并且通過快速層析(2，5-10％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫)純化得到呈白色固體的標題化合物，mp230℃；1H NMR(DMSO-d6)δ3.13-3.16(m，1H)，3.34-3.45(m，7H)，3.63-3.75(m，3H)，4.18-4.22(m，1H)，4.15(d，J＝1.5Hz，1H)，4.55(d，J＝7.7Hz，1H)，4.62(表觀t，J＝5.8Hz，1H)，4.98(表觀t，J＝8.8Hz，1H)，5.19(d，J＝5.3Hz，1H)，5.38(d，J＝4.4Hz，1H)，5.35(d，J＝5.1Hz，1H)，5.59(s，1H)，7.35-7.38(m，3H)，7.42-7.45(m，2H)，7.67(d，J＝8.3Hz，1H)，8.29(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，8.88(d，J＝2.6Hz，1H)，9.20(d，J＝8.6Hz，1H)。IR(KBr)3400，2900，1650和1075cm-1，質(zhì)譜(+FAB)，m/e 569(M＋H)。C25H29ClN2O11·1.0H2O的計算值C，51.16；H，5.32；N，4.77。實測值C，51.22；H，5.26；N，4.68。
實施例32-氯-哌啶-5-羧酸-(6-O-苯甲?；?4’，6’-O-苯亞甲基-1-去氧-β-D-纖維二糖基)-酰胺將N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-6-氯-煙酰胺(0.22g，0.39mmol)溶于無水四氫呋喃(1.5ml)和無水2，4，6可力丁(1.5ml)的溶液冷卻至-40℃ 0.5小時。慢慢加入苯甲酰氯(0.076ml，0.507mmol)，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)液用乙酸乙酯(30ml)稀釋，并且連續(xù)用1N HCl(15ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)和鹽水(15ml)洗滌。干燥(硫酸鎂)并過濾有機層。蒸發(fā)并快速層析(2，5-10％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫)得到呈白色固體的標題化合物，mp 260℃；1H NMR(DMSO-d6)δ3.17-3.28(m，1H)，3.35-3.47(m，4H)，3.55(dt，J＝8.8，5.9Hz，1H)，3.64-3.71(m，2H)，3.82-3.86(m，1H)，4.17(dd，J＝10.1，4.2Hz，1H)，4.48(dd，J＝12.1，4.6Hz，1H)，4.57-4.65(m，2H)，4.86(d，J＝3.1Hz，1H)，5.09(表現(xiàn)t，J＝9.0Hz，1H)，5.33(d，J＝5.3Hz，1H)，5.37(d，J＝4.6Hz，1H)，5.50(s，1H)，5.57(d，J＝5.1Hz，1H)，7.35-7.37(m，3H)，7.39-7.42(m，2H)，7.55(t，J＝7.2Hz，2H)，7.63-7.69(m，2H)，7.96(d，J＝8.6Hz，2H)，8.27(dd，J＝8.3，2.6Hz，1H)，8.86(d，J＝2.6Hz，1H)，9.22(d，J＝9.0Hz，1H)。IR(KBr)3400，2900，1650，1275和1100cm-1，質(zhì)譜(-FAB)，m/z 671(M-H)。C32H33ClN2O12·1.0H2O的分析值C，55.62；H，5.10；N，4.05。實測值C，55.80；H，4.99；N，4.01。
實施例4(2，6-二甲氧基-N-7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺將一份2-乙氧基-N-羰基-1，2-二氫喹啉(0.071g，0.29mmol)加入攪拌的溶于苯-乙醇(1∶1，v/v，4ml)的2，6-二甲氧基nicitinic酸(0.051g，0.26mmol)中。0.5小時后，加入7-O-乙?；?1-β-纖維二糖胺(0.151g0.24mmol)，將該混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，使殘留物溶于二氯甲烷中。連續(xù)用1N鹽酸、水、1％的碳酸氫鈉和水洗滌有機層，干燥(硫酸鎂)并濃縮。通過快速層析(40％-60％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脫)純化得到呈白色固體的標題化合物，mp127℃；1HMR(CDCl3)δ1.98(s，3H)，1.99(s，3H)，2.01(s，3H)，2.04(s，6H)，2.10(s，3H)，2.12(s，3H)，3.63-3.67(m，1H)，3.80-3.85(m，2H)，3.96(s，3H)3.99-4.07(m.1H)，4.07(s，3H)，4.17(dd，J＝12.6，4.2Hz，1H)，4.37(dd，J＝12.5，4.4Hz，1H)，4.44-4.47(m，1H)，4.51(d，J＝7.9Hz，1H)，4.94(表觀t，J＝8.1Hz，1H)，5.03-5.16(m，2H)，5.33(t，J＝9.7Hz，1H)，5.39(t，J＝9.4Hz，1H)9.4Hz，1H)，6.41(d，J＝9.4Hz，1H)，8.34(d，J＝8.3Hz，1H)，8.41(d，J＝8.8Hz，1H)。IR(KBr)3400，2950，1750，1245和1050cm-1，質(zhì)譜(+FAB)，m/e 801(M＋H)，823(M＋Na)。C34H44ClN2O20·0.5H2O的計算值C，50.43；H，5.60；N，3.46。實測值C，50.56；H，5.52；N，3.31.
實施例5N-(7-O-乙酰基-β-D-纖維二糖基)-3-氯-4-氟-苯甲酰胺根據(jù)實施例1步驟2的方法制備呈白色固體的標題化合物，mp203-205℃；1H NMR(CDCl3)δ1.99(s，3H)，2.01(s，3H)，2.04(s，6H)，2.05(s，3H)，2.10(s，3H)，2.12(s，3H)，3.64-3.68(m，1H)，3.79-3.80(m，2H)，4.05(dd，J＝12.5，2.0Hz，1H)，4.14-4.19(m，1H)，4.37(dd，J＝12.5，4.4Hz，1H)，4.48-4.53(m，2H)，4.91-4.99(m，2H)，5.07-5.17(M，2H)，5.33(t，J＝9.2Hz，1H)，5.40(t，J＝9.2Hz，1H)，6.80(d，J＝9.0Hz，1H)，7.02-7.07(m，1H)，7.14(dd，J＝8.3，2.6Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.6，6.1Hz，1H)。IR(KBr)3400，2930，1750，1245和1050cm-1，質(zhì)譜(-ESI)，m/z 789.9/791.9(M-H)。C33H39ClFNO18的計算值C，50.04；H，4.96；N，1.77。實測值C，50.00；H，4.91；N，1.85。
實施例6N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-2-氯-4-氟-苯甲酰胺步驟1N-(β-D-纖維二糖基)-2-氯-4-氟-苯甲酰胺根據(jù)實施例2步驟1的方法制備呈白色固體的標題化合物，分解mp65℃；1H NMR(CD3OD-d4)δ3.22-3.42(m，5H)，3.51-3.62(m，3H)，3.67(dd，J＝11.9，5.3Hz，1H)，3.83-3.90(m，3H)，4.43(d，J＝7.9Hz，1H)，5.07(d，J＝9.2Hz，1H)，7.12-7.17(m，1H)，7.29(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.61(dd，J＝8.6，6.2Hz，1H)，8.53(s，1H)。IR(KBr)3400，2930，1600和1050cm-1，質(zhì)譜(-FAB)，m/z 496/498(M-H)。步驟2N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-2-氯-4-氟-苯甲酰胺根據(jù)實施例2的步驟2的方法制備呈白色固體的標題化合物，mp135-138℃；1H NMR(CD3OD-d4)δ3.34-3.91(m，11H)，4.28-4.31(m，1H)，4.59(d，J＝7.9Hz，1H)，5.09(d，J＝9.2Hz，1H)，5.58(s，1H)，7.16(dt，J＝8.3，2.6Hz，1H)，7.29-7.52(m，4H)，7.60(dd，J＝8.8，5.9Hz，1H)，7.97-7.99(m，3H)。IR(KBr)3400，2900，1550和1075cm-1，質(zhì)譜(+FAB)，m/e 586(M＋H)，608(M＋Na)。
權(quán)利要求
1.具有以下結(jié)構(gòu)的式I化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽 其中Y為C或者N；n為0-3；X為 R1和R2各自獨立為H、1至6個碳原子的烷基、鹵基、乙?；?、苯基、CF3、氰基、羥基、硝基、氨基、1至6個碳原子的烷氧基或者1至6個碳原子的烷氧基腈；R3為H、2至6碳個原子的酰胺或者1至6個碳原子的烷氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的酰基、R1和R2取代的芐基；或者R1和R2取代的苯甲?；?；R9和R10各自獨立為1至6個碳原子的?；蛘啕溠刻?′和6′位的R9和R10基團可以一起形成一環(huán)狀縮醛，該環(huán)狀縮醛可以被下列基團取代1至6個碳原子的烷基、兩個各具有1至6個碳原子的烷基、R1取代的吡啶、R1取代的苯基、R1取代的芐基、R1取代的2-苯乙基或者R1取代的3-苯丙基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n為0-1；R1和R2各自獨立為H、鹵素、CF3、羥基、硝基、氨基、甲氧基、丁氧基或丁氧基腈；R3為H、乙酰胺或甲氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的酰基苯甲?；?；R9和R10各自獨立為1至6個碳原子的?；蛘啕溠刻?′和6′位的R9和R10基團一起形成苯亞甲基環(huán)。
3.權(quán)利要求2的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n為0；R1和R2各自獨立為氫或鹵素；R3為氫。
4.權(quán)利要求1的化合物，它是6-氯-N-(7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
5.權(quán)利要求1的化合物，它是n-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-6-氯-煙酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
6.權(quán)利要求1的化合物，它是2-氯-哌啶-5-羧酸-(6-O-苯甲?；?4’，6’-O-苯亞甲基-1-去氧-β-D-纖維二糖基)-酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
7.權(quán)利要求1的化合物，它是(2，6-二甲氧基-N-7-O-乙?；?β-D-纖維二糖基)-3-吡啶羧酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
8.權(quán)利要求1的化合物，它是N-(7-O-乙酰基-β-D-纖維二糖基)-3-氯-4-氟-苯甲酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
9.權(quán)利要求1的化合物，它是N-(4’，6’-O-苯亞甲基-β-D-纖維二糖基)-2-氯-4-氟-苯甲酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
10.一種治療或抑制其需要的哺乳動物過度增生性血管疾病的方法，所述方法包括給予所述哺乳動物有效量的具有以下結(jié)構(gòu)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述結(jié)構(gòu)為 其中Y為C或N；n為0-3；X為 R1和R2各自獨立為H、1至6個碳原子的烷基、鹵基、乙酰基、苯基、CF3、氰基、羥基、硝基、氨基、1至6個碳原子的烷氧基或者1至6個碳原子的烷氧基腈；R3為H、2至6碳個原子的酰胺或者1至6個碳原子的烷氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的?；?、R1和R2取代的芐基；或者R1和R2取代的苯甲?；?；R9和R10各自獨立為1至6個碳原子的?；蛘啕溠刻?′和6′位的R9和R10基團可以一起形成一環(huán)狀縮醛，該環(huán)狀縮醛可以被下列基團取代1至6個碳原子的烷基、兩個各具有1至6個碳原子的烷基、R1取代的吡啶、R1取代的苯基、R1取代的芐基、R1取代的2-苯乙基或者R1取代的3-苯丙基。
11.一種治療或抑制其需要哺乳動物再狹窄的方法，所述方法包括給予所述哺乳動物有效量的具有以下結(jié)構(gòu)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述結(jié)構(gòu)為 其中其中Y為C或N；n為0-3；X為 R1和R2各自獨立為H、1至6個碳原子的烷基、鹵基、乙?；?、苯基、CF3、氰基、羥基、硝基、氨基、1至6個碳原子的烷氧基或者1至6個碳原子的烷氧基腈；R3為H、2至6碳個原子的酰胺或者1至6個碳原子的烷氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的?；?、R1和R2取代的芐基；或者R1和R2取代的苯甲?；籖9和R10各自獨立為1至6個碳原子的?；蛘啕溠刻?′和6′位的R9和R10基團可以一起形成一環(huán)狀縮醛，該環(huán)狀縮醛可以被下列基團取代1至6個碳原子的烷基、兩個各具有1至6個碳原子的烷基、R1取代的吡啶、R1取代的苯基、R1取代的芐基、R1取代的2-苯乙基或者R1取代的3-苯丙基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中所述再狹窄由血管成形術(shù)、血管再造手術(shù)或者器官或者組織移植引起。
13.一種抑制其需要哺乳動物惡性腫瘤、肉瘤或贅生組織中血管形成的方法，該方法包括給予所述哺乳動物有效量的具有以下結(jié)構(gòu)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述結(jié)構(gòu)為 其中其中Y為C或N；n為0-3；X為 R1和R2各自獨立為H、1至6個碳原子的烷基、鹵基、乙?；?、苯基、CF3、氰基、羥基、硝基、氨基、1至6個碳原子的烷氧基或者1至6個碳原子的烷氧基腈；R3為H、2至6碳個原子的酰胺或者1至6個碳原子的烷氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的?；1和R2取代的芐基；或者R1和R2取代的苯甲酰基；R9和R10各自獨立為1至6個碳原子的?；蛘啕溠刻?′和6′位的R9和R10基團可以一起形成一環(huán)狀縮醛，該環(huán)狀縮醛可以被下列基團取代1至6個碳原子的烷基、兩個各具有1至6個碳原子的烷基、R1取代的吡啶、R1取代的苯基、R1取代的芐基、R1取代的2-苯乙基或者R1取代的3-苯丙基。
14.一種藥用組合物，它包含具有以下結(jié)構(gòu)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥物載體，所述結(jié)構(gòu)為 其中Y為C或N；n為0-3；X為 R1和R2各自獨立為H、1至6個碳原子的烷基、鹵基、乙?；⒈交?、CF3、氰基、羥基、硝基、氨基、1至6個碳原子的烷氧基或者1至6個碳原子的烷氧基腈；R3為H、2至6碳個原子的酰胺或者1至6個碳原子的烷氧基；R4、R5、R6、R7和R8各自獨立為H、1至6個碳原子的?；1和R2取代的芐基；或者R1和R2取代的苯甲?；?；R9和R10各自獨立為1至6個碳原子的酰基或者麥芽糖4′和6′位的R9和R10基團可以一起形成一環(huán)狀縮醛，該環(huán)狀縮醛可以被下列基團取代1至6個碳原子的烷基、兩個各具有1至6個碳原子的烷基、R1取代的吡啶、R1取代的苯基、R1取代的芐基、R1取代的2-苯乙基或者R1取代的3-苯丙基。
全文摘要
本發(fā)明提供具有右式結(jié)構(gòu)的式(Ⅰ)平滑肌細胞增生抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽,其中Y為C或者N;n為0－3;X為(A),其中R
文檔編號A61P9/08GK1333781SQ99815709
公開日2002年1月30日 申請日期1999年11月23日 優(yōu)先權(quán)日1998年11月24日
發(fā)明者R·E·麥德維特, F·O·阿德巴尤 申請人:美國家用產(chǎn)品公司